WO1999009194B1 - Adenovirus aviaire celo recombinant et son utilisation comme vecteur vaccinant - Google Patents
Adenovirus aviaire celo recombinant et son utilisation comme vecteur vaccinantInfo
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Abstract
L'invention concerne des méthodes de préparation d'adénovirus aviaires CELO recombinants et leurs utilisations à titre de vecteur d'expression de protéines hétérologues pour la préparation de vaccins, notamment pour la protection d'espèces aviaires contre les maladies infectieuses communes, ou à titre de vecteur d'expression de protéines hétérologues impliquées dans le métabolisme.
Claims
1. Méthode de préparation d'un adénovirus aviairc CELO recombinant, caractérisée en ce qu'on insert dans une partie non essentielle de son génome une séquence d'ΛDN codant pour tout ou partie d'un polypeptide hctcrologuc à l'adénovirus aviairc CELO, caractérisée en ce que la partie non essentielle correspond à une zone choisie parmi les sites suivants, repérés en coordonnées numériques (pb) relatives à la séquence telle que définie à la figure 1 : a) entre 600 et 650, b) entre 750 et 780, c) entre 3 380 et 3 520, d) entre 10 160 et 10 260, e) entre 12 160 et 12 180, 0 entre 21 775 et 21 818, g) entre 26 650 et 27 060, h) entre 27 970 et 28 170, i) entre 30 500 et 30 510, j) entre 32 480 et 32 730, k) entre 33 720 et 33 880, 1) entre 36 210 et 36 340, m) entre 36 640 et 36 740, n) entre 37 220 et 37 380, o) entre 38 280 et 38 650, p) entre 42 380 et 43 040.
2. Méthode selon la revendication 1, caractérisée en ce que ladite séquence d'ADN comprend en outre les éléments susceptibles d'assurer l'expression dudit polypeptide hétérologue dans une cellule infectée par ledit adénovirus recombinant.
3. Méthode selon l'une des revendications 1 et 2, caractérisée en ce qu'elle comporte en outre une étape de délétion d'au moins une partie non essentielle du génome de l'adénovirus aviaire CELO.
4. Méthode selon la revendication 3, caractérisée en ce que ladite partie non essentielle est choisie parmi les parties suivantes, repérées en coordonnées numériques (pb) relatives à la séquence telle que définie à la figure 1 : a) partie comprise entre 1 970 et 2 850, 5 b) partie comprise entre 1 970 et 3 000, c) partie comprise entre 3 130 et 3 520, d) partie comprise entre 33 210 et 33 450.
5. Méthode selon l'une des revendications 1 à 4, caractérisée en ce qu'elle H) comporte en outre une étape de délétion d'au moins une partie essentielle du génome de l'adénovirus aviaire CELO.
6. Méthode selon la revendication 5, caractérisée en ce que ladite partie essentielle du génome de l'adénovirus aviaire CELO est choisie parmi les parties suivantes,
15 repérées en coordonnées numériques (pb) relatives à la séquence telle que définie à la figure 1 : a) partie comprise entre 300 et 5 300, b) partie comprise entre 10 170 et 1 1 280, c) partie comprise entre 15 100 et 17 560, 20 d) partie comprise entre 15 100 et 21 800, e) partie comprise entre 16 050 et 17 540, f) partie comprise entre 16 050 et 21 800, g) partie comprise entre 16 050 et 23 170, h) partie comprise entre 17 540 et 21 800,
25 i) partie comprise entre 21 800 et 23 170, j) partie comprise entre 23 180 et 27 960, k) partie comprise entre 23 670 et 27 050,
1) partie comprise entre 24 800 et 27 060, m) partie comprise entre 27 100 et 31 790, 30 n) partie comprise entre 28 100 et 31 800, o) partie comprise entre 35 620 et 36 440.
4 1
7. Méthode selon la revendication 5, caractérisée en ce que l'étape de délétion conduit à l'obtention d'un adénovirus aviairc CELO recombinant comportant au moins 2 séquences d'acide nucléique codant pour un ITR et une séquence d'acide nucléique codant pour un signal d'encapsidation Ψ.
8. Méthode selon l'une des revendications l à 7, caractérisée en ce que la séquence d'ADN code pour un polypeptide hétérologue d'intérêt.
9. Méthode selon la revendication 8, caractérisée en ce que le polypeptide hétérologue d'intérêt est un polypeptide antigénique.
10. Méthode selon la revendication 9, caractérisée en ce que le polypeptide antigénique est un déterminant antigénique d'agent infectieux responsable de maladie infectieuse chez les animaux, de préférence chez les espèces aviaires.
1 1. Méthode selon la revendication 10, caractérisée en ce que la maladie infectieuse est choisie parmi la maladie de Marek, la bronchite infectieuse, la larynchotrachéite, le gumboro ou la maladie de Newcastle.
12. Méthode selon la revendication 8, caractérisée en ce que le polypeptide hétérologue d'intérêt est un polypeptide intervenant dans le métabolisme, de préférence aviaire, ou humain.
13. Vecteur, caractérisé en ce qu'il comprend un adénovirus aviaire CELO recombinant obtenu par une méthode selon l'une des revendications 1 à 12.
14. Vaccin caractérisé en ce qu'il contient un vecteur selon la revendication 13.
15. Vaccin selon la revendication 14, pour la protection d'espèces aviaires contre les maladies infectieuses.
16. Cellule transformée par un vecteur selon la revendication 13.
42
17. Cellule selon la revendication 16, caractérisée en ce qu'elle est une cellule eucaryote permettant la replication d'un adénovirus aviaire CELO recombinant défectif.
18. Procédé de préparation in vivo d'un polypeptide d'intérêt recombinant, caractérisé en ce qu'il met en oeuvre l'infection d'un animal par un vecteur selon la revendication 13 dont ladite séquence d'ADN insérée code pour ledit polypeptide d'intérêt, et en ce que ledit polypeptide d'intérêt est ensuite extrait dudit animal.
19. Procédé de préparation d'un polypeptide d'intérêt recombinant, caractérisé en ce qu'il met en oeuvre la culture de cellules selon la revendication 16.
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