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WO2018101434A1 - グリコシル化クロリンｅ６誘導体、または、その薬学的に許容される塩、医薬組成物、標的を破壊する方法、および、グリコシル化クロリンｅ６誘導体、またはその薬学的に許容される塩の製造方法 - Google Patents

グリコシル化クロリンｅ６誘導体、または、その薬学的に許容される塩、医薬組成物、標的を破壊する方法、および、グリコシル化クロリンｅ６誘導体、またはその薬学的に許容される塩の製造方法 Download PDF

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WO2018101434A1
WO2018101434A1 PCT/JP2017/043144 JP2017043144W WO2018101434A1 WO 2018101434 A1 WO2018101434 A1 WO 2018101434A1 JP 2017043144 W JP2017043144 W JP 2017043144W WO 2018101434 A1 WO2018101434 A1 WO 2018101434A1
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WO
WIPO (PCT)
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chlorin
derivative
group
acceptable salt
pharmaceutically acceptable
Prior art date
Application number
PCT/JP2017/043144
Other languages
English (en)
French (fr)
Inventor
矢野　重信
洋望 片岡
裕忠 西江
卓志 城
圭介 福本
仲野　靖浩
Original Assignee
公立大学法人名古屋市立大学
矢野　重信
富士フイルム株式会社
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
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Publication date
Application filed by 公立大学法人名古屋市立大学, 矢野　重信, 富士フイルム株式会社 filed Critical 公立大学法人名古屋市立大学
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    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
    • A61K31/7042—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings
    • A61K31/7052—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P27/00—Drugs for disorders of the senses
    • A61P27/02—Ophthalmic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
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    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
    • C07H15/00—Compounds containing hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals directly attached to hetero atoms of saccharide radicals
    • C07H15/02—Acyclic radicals, not substituted by cyclic structures
    • C07H15/14—Acyclic radicals, not substituted by cyclic structures attached to a sulfur, selenium or tellurium atom of a saccharide radical

Definitions

  • the present invention is a glycosylated chlorin e6 derivative, or a pharmaceutically acceptable salt thereof, that can be suitably used in photodynamic therapy (PDT) and / or photodynamic diagnosis (PDD). Relating to salt.
  • the present invention also relates to a pharmaceutical composition, a method for destroying a target, and a method for producing a glycosylated chlorin e6 derivative, or a pharmaceutically acceptable salt thereof.
  • Photodynamic therapy involves administering a photosensitive substance to a patient having a target diseased tissue (hereinafter also referred to as “target tissue”), and the target tissue (cancer tissue, tumor tissue, skin lesion, and This is a treatment method that selectively destroys only a target tissue by irradiating light having an appropriate wavelength for exciting the photosensitive substance after the photosensitive substance is accumulated in the neovascularization.
  • target tissue a target diseased tissue
  • cancer tissue tumor tissue
  • skin lesion skin lesion
  • hematoporphyrin derivative for example, Photofrin (registered trademark)
  • Photofrin registered trademark
  • hematoporphyrin derivatives are known to cause temporary photosensitivity as a side effect when administered to the human body.
  • the selectivity of hematoporphyrin derivatives for cancer tissues is not sufficient, and accumulation in normal tissues is also observed. Therefore, the patient who received the drug is dark for a long time until it is excreted outside the body so that normal cells are not destroyed by the photosensitizing action of hematoporphyrin derivative (porfimer sodium) accumulated in normal tissues. It is necessary to stay in place.
  • phthalocyanine compounds having absorption in a longer wavelength region 650 nm to 800 nm
  • chlorin compounds, and the like have been proposed as second-generation drugs.
  • talaporfin sodium hereinafter also referred to as “TS” in the present specification, Rezaphyrin (registered trademark)
  • TS talaporfin sodium
  • Rezaphyrin registered trademark
  • Patent Document 1 proposes a compound obtained by binding chlorin e6, which is a chlorin compound, and folic acid.
  • Patent Document 2 proposes a compound in which a chlorin compound and galactosamine are bound to detect a galectin biomarker.
  • Non-Patent Document 1 synthesizes a compound in which a sugar is bound to a chlorin compound labeled with 124 iodine, and proposes to PET (Positron Emission Tomography) imaging and photodynamic therapy.
  • an object of the present invention is to provide a glycosylated chlorin e6 derivative or a pharmaceutically acceptable salt thereof that has excellent tumoricidal properties (phototoxicity) and excellent tumor tissue growth inhibitory effect.
  • Another object of the present invention is to provide a pharmaceutical composition, a method for destroying a target, and a method for producing a glycosylated chlorin e6 derivative, or a pharmaceutically acceptable salt thereof.
  • the present inventors have become a photosensitive substance useful as a photodynamic therapeutic drug, ensuring safety to the living body and exhibiting high phototoxicity in a small amount.
  • the present inventors have found a novel glycosylated chlorin e6 derivative and a method for producing the same, and have reached the present invention.
  • R 1 , R 2 and R 3 are each independently an acetoxyalkyl group having 1 to 6 carbon atoms or a hydrocarbon group having 1 to 6 carbon atoms, [1 Or a pharmaceutically acceptable salt thereof.
  • R 1 , R 2 and R 3 in the general formula (1) described later are methyl groups, or a pharmaceutically acceptable salt thereof Salt.
  • —X— is —X 3 —O—
  • X 3 is a group bonded to an anomeric carbon atom of R or a group bonded to a carbon atom adjacent to the anomeric carbon atom.
  • Glycosylated chlorin e6 derivative or a pharmaceutically acceptable salt thereof.
  • X 4 is an alkylene group represented by — (CH 2 ) n —, and n is an integer of 3 to 10. Or a pharmaceutically acceptable salt thereof.
  • the saccharide is any one of [1] to [9], wherein the saccharide is a monosaccharide, an oligosaccharide, a polysaccharide, a monosaccharide containing an amino group, an oligosaccharide containing an amino group, or a polysaccharide containing an amino group.
  • the glycosylated chlorin e6 derivative or a pharmaceutically acceptable salt thereof.
  • a pharmaceutical composition comprising as an active ingredient.
  • a pharmaceutical composition comprising the glycosylated chlorin e6 derivative according to any one of [1] to [13] or a pharmaceutically acceptable salt thereof as an active ingredient.
  • the glycosylated chlorin e6 derivative or a pharmaceutically acceptable salt thereof (hereinafter also simply referred to as “the present chlorin derivative”) according to an embodiment of the present invention has very low toxicity in the dark, In vitro and in vivo, the target virus, bacteria, or these infected cells, tumor cells, or After contacting with a tumorous tissue, irradiation with light having a wavelength that is absorbed by the present chlorin derivative or the like can be applied to destroy the target. Therefore, the present chlorin derivative and the like can be used as a medicament containing the present chlorin derivative or the like as an active ingredient, particularly as a photodynamic therapeutic agent for tumors or skin diseases, or a photodynamic diagnostic agent.
  • glycosylated chlorin e6 derivative and its production method
  • a glycosylated chlorin e6 derivative may be described as an example, but the description is pharmaceutically acceptable for the glycosylated chlorin e6 derivative unless otherwise specified.
  • X 1 and X 2 are each independently a group represented by H (hydrogen atom) or R—X— * (* represents a bonding position), and X 1 and At least one of X 2 is a group represented by R—X— *. Synthesis is easier viewpoint, i.e., from the viewpoint of having superior productivity, it is preferable that either one of X 1 and X 2 is a group represented by R-X- *, X 1 is More preferably, it is a group represented by R—X— *, and X 2 is H (hydrogen atom).
  • R represents a sugar residue (hereinafter referred to as “sugar residue”).
  • sugar residue means a residue obtained by removing one hydroxyl group bonded to a carbon atom of the sugar, and a residue obtained by removing a hemiacetal (anomeric) hydroxyl group of a sugar is preferable.
  • X is a divalent group bonded to any one of the carbon atoms constituting R, and R is C (carbon atom), N (nitrogen atom), O (oxygen atom), H (hydrogen atom), And a linear or branched divalent group consisting of at least one atom selected from the group consisting of S and sulfur (sulfur atom).
  • X is, for example, —S—, —O—, —NR x — (R x is a hydrogen atom or a hydrocarbon group which may have a hetero atom), a carbonyl group, an alkylene group, an alkenylene group, and And a combination thereof, preferably containing O (oxygen atom) and / or S (sulfur atom), and selected from the group consisting of —S—, —O—, and an alkylene group A group in which the above is combined is more preferable, and a group in which —S—, —O—, and an alkylene group are combined is more preferable.
  • the sugar of R is not particularly limited.
  • aldpentose ribose, arabinose, xylose, lyxose, etc.
  • aldohexose allose, altrose, glucose, mannose, gulose, idose, galactose, talose, etc.
  • Aldoheptose ketopentose (such as ribulose and xylulose), ketohexose (such as psicose, fructose, sorbose, and tagatose), ketoheptose (such as cedoheptulose and coliose), and derivatives thereof having an amino group, etc.
  • Monosaccharides Oligosaccharides such as sucrose, maltose, lactose, maltotriose, raffinose and maltotetraose, and derivatives thereof having an amino group; And polysaccharides such as starch, amylose and glycogen, and derivatives thereof having an amino group; Among these, monosaccharides are preferable, hexose or hexosamine is more preferable, hexose is more preferable, and glucose is particularly preferable.
  • the monosaccharide may be D-form or L-form, but D-form is preferred.
  • oligosaccharide means a compound containing 2 to 9 monosaccharide units
  • polysaccharide means a compound containing 10 or more monosaccharide units
  • the monosaccharides that are glycosidically linked may be the same or different.
  • the glycosidic bond between monosaccharides may be an ⁇ -bond or a ⁇ -bond.
  • hexose examples include glucose, galactose, mannose, allose, altrose, gulose, idose, and talose.
  • glucose is most preferable. This is because the phototoxicity of glucose is excellent.
  • hexosamine examples include glucosamine, galactosamine, mannosamine, daunosamine, and perosamine. Of these, glucosamine is most preferable. This is because the phototoxicity of glucosamine is excellent.
  • R 1 , R 2 and R 3 are each independently H (hydrogen atom), an acetoxyalkyl group having 1 to 6 carbon atoms or a hydrocarbon group having 1 to 6 carbon atoms, and R 1 , R 2 and R 3 are each an acetoxyalkyl group having 1 to 6 carbon atoms or a hydrocarbon group having 1 to 6 carbon atoms.
  • examples of the acetoxyalkyl having 1 to 6 carbon atoms include acetoxymethyl, acetoxyethyl, acetoxypropyl, and acetoxybutyl.
  • the hydrocarbon having 1 to 6 carbon atoms is a straight chain having 1 to 6 carbon atoms such as methyl, ethyl, n-propyl, n-butyl, sec-butyl, tert-butyl, pentyl, cyclopentyl, hexyl, and cyclohexyl. Examples include chain, branched chain, or cyclic alkyl.
  • R 1 , R 2 and R 3 are each independently an acetoxyalkyl group having 1 to 6 carbon atoms or 1 carbon atom in that a glycosylated chlorin e6 derivative having a better effect of the present invention can be obtained. It is preferably a hydrocarbon group of ⁇ 6. It is because the uptake
  • R 1 , R 2 and R 3 are each independently preferably a hydrocarbon group having 1 to 3 carbon atoms, more preferably a methyl group, from the viewpoint of water solubility.
  • the divalent group (linking group) X preferably contains O (oxygen atom), and O and S (sulfur atoms) ) Is more preferable.
  • the group represented by R—X— * includes a group represented by R—X 3 —O— * in that a glycosidated chlorin e6 derivative having a better effect of the present invention can be obtained.
  • X 3 is a linear or branched divalent group consisting of at least one selected from the group consisting of C, N, O, H, and S, and constitutes R It is bonded to any one of the carbon atoms.
  • the glycosylated chlorin e6 derivative is preferably represented by the following formula (2).
  • the form of the sugar residue R is as already described as R in the formula (1).
  • the group represented by R—X 3 —O— * is a group represented by R—L—S—X 4 —O— * in that a glycosidated chlorin e6 derivative having an excellent effect of the present invention can be obtained.
  • More preferred are the groups Here, L represents a single bond or a divalent group. Although it does not restrict
  • the group represented by R—X— * is a group represented by R—S—X 4 —O— *, in other words, the sugar residue R is directly linked to —S—X 4 —O—.
  • the groups are preferred.
  • the direct linkage refers to, for example, a structure (—C—S—X 4 —O—) in which C (carbon atom) at the anomeric position of a sugar and —S—X 4 —O— are linked.
  • S (sulfur atom) in the group represented by R—S—X 4 —O— * is a linking group bonded to the anomeric carbon atom of R (carbon atom at position 1), or the anomeric position from the viewpoint of synthesis.
  • a linking group bonded to a carbon atom adjacent to the carbon atom (2-position carbon atom) is preferable, and a linking group bonded to the anomeric carbon atom (1-position carbon atom) of R is more preferable.
  • X 4 is bonded to O (oxygen atom) and S (sulfur atom).
  • X 4 is a linear or branched divalent group having C (carbon atom) and H (hydrogen atom).
  • X 4 is not particularly limited, and examples thereof include an alkylene group, an oxyalkylene group, and an alkyleneoxy group. Among these, a linear or branched alkylene group having 1 to 16 carbon atoms may be used.
  • a linear alkylene group represented by — (CH 2 ) n— is more preferable.
  • n is preferably an integer of 1 to 16, more preferably n is an integer of 2 to 13, and further preferably n is an integer of 3 to 10. This is because the synthesis is easy and the water solubility of the compound is increased.
  • glycosylated chlorin e6 derivative is preferably represented by the following formula (4), (5), or (6) from the viewpoint of having particularly excellent effects of the present invention.
  • n represents an integer of 3 to 10, respectively.
  • glycosylated chlorin e6 derivative may be used alone, or two or more kinds may be used in combination.
  • Pharmaceutically acceptable salts include alkali metal salts (such as sodium and potassium salts), alkaline earth metal salts (such as magnesium and calcium salts), ammonium salts, mono-, di- or tri -Lower (alkyl or hydroxyalkyl) ammonium salts (eg ethanolammonium salt, diethanolammonium salt, triethanolammonium salt, tromethamine salt), hydrochloride, hydrobromide, hydroiodide, nitrate, phosphate, Sulfate, formate, acetate, citrate, oxalate, fumarate, maleate, succinate, malate, tartrate, trichloroacetate, trifluoroacetate, methanesulfonate, Benzene sulfonate, p-toluene sulfonate, mesitylene sulfonate and naphthalene Sulfonic acid salts.
  • the salt may be an anhydride or a solv
  • the present chlorin derivative having the above-described configuration does not show cytotoxicity in the dark, but shows strong cytotoxicity under light irradiation. And it is estimated that the absorption in a long wavelength is large compared with a porphyrin derivative (absorption maximum wavelength 650nm), and the compound has high cell affinity and / or cell permeability by the coupling
  • the method for producing a chlorin derivative or the like includes a step of linking chlorin e6 and a sugar via a linking group (glycosidation). More specifically, it includes a step of glycosylation by binding a 3-position double bond of chlorin e6 alkyl ester and a sugar via a linking group.
  • the procedure for binding the linking group may be to link the sugar and the linking group and then link to chlorin e6.
  • the linking group and chlorin e6 may be combined and then linked to the saccharide, depending on the purpose.
  • the manufacturing method may be selected.
  • the thiol sugar (R-SH) has a functional group that can be linked to the thiol sugar, such as a leaving group (E) such as a halogen, a tosyl group, and a mesyl group, and a hydroxyl group (-OH).
  • a linking group (EX 4 —OH) is introduced.
  • the sugar residue R of the thiol sugar (R-SH) used here is preferably protected with a protecting group such as an acyl group.
  • a protecting group such as an acyl group.
  • Protecting groups include acetyl and aliphatic acyl groups such as pivaloyl; aromatic acyl groups such as benzoyl group; and aralkyl groups such as benzyl group. Of these protecting groups, an acetyl group is particularly preferred.
  • Examples of the linking group (EX 4 —OH) linked to the thiol sugar (R—SH) include chloroalcohol, bromoalcohol, iodoalcohol, tosylalcohol, and mesylalcohol.
  • the solvent used in this reaction is not particularly limited as long as the reaction proceeds.
  • aromatic amines such as pyridine, lutidine, and quinoline; dichloromethane, chloroform, 1,2-dichloroethane, and carbon tetrachloride Halogenated hydrocarbons such as hexane, pentane, and cyclohexane; aromatic hydrocarbons such as benzene, toluene, xylene, and chlorobenzene; diethyl ether, diisopropyl ether, diphenyl ether, tetrahydrofuran, And ethers such as dioxane and 1,2-dimethoxyethane; amides such as N, N-dimethylformamide and N, N-dimethylacetamide; water; and mixtures thereof.
  • a particularly preferred solvent for the above reaction is chloroform or dichloromethane.
  • a base for example, basic salts such as sodium carbonate, potassium carbonate, and cesium carbonate; inorganic bases such as sodium hydroxide and potassium hydroxide; pyridine, lutidine, etc.
  • Aromatic amines such as: triethylamine, tripropylamine, tributylamine, cyclohexyldimethylamine, 4-dimethylaminopyridine, N, N-dimethylaniline, N-methylpiperidine, N-methylpyrrolidine, and N-methylmorpholine Tertiary amines; Sodium hydrides and alkali metal hydrides such as potassium hydride; Metal amides such as sodium amide, lithium diisopropylamide and lithium hexamethyldisilazide; Sodium methoxide and sodium ethoxy Do And metal alkoxides such as potassium tert- butoxide; is selected from the like.
  • the final product obtained by this reaction can be isolated and purified from the reaction mixture by
  • chlorin e6 trimethyl ester hydrogen halide adduct is obtained by adding hydrogen halide to the double bond at the 3-position in the porphyrin ring 1-24 number method with respect to chlorin e6 trimethyl ester.
  • the hydrogen halide used include hydrogen chloride, hydrogen bromide, and hydrogen iodide.
  • hydrogen bromide is preferable from the viewpoint of the reactivity and stability of the chlorin e6 trimethyl ester hydrogen halide adduct.
  • the solvent used in this reaction is not particularly limited as long as the reaction proceeds, but formic acid, acetic acid, propionic acid and the like can be mentioned.
  • the resulting chlorin e6 trimethyl ester hydrogen halide adduct is allowed to act on a thiol sugar linking group conjugate (RS—X 4 —OH) to give a thiol sugar linking group conjugate (RS—X 4 —OH).
  • a chlorin e6 trimethyl ester hydrohalide to give a sugar-linked chlorin e6 trimethyl ester.
  • the thiol sugar linking group conjugate (RS—X 4 —OH) added in the above reaction is preferably added in an amount of 3 equivalents or more with respect to the chlorin e6 trimethyl ester hydrogen halide adduct. This is because the yield of sugar-linked chlorin e6 trimethyl ester is improved.
  • a base for example, basic salts such as sodium carbonate, potassium carbonate, and cesium carbonate; inorganic salts such as sodium hydroxide and potassium hydroxide; pyridine, and Aromatic amines such as lutidine; triethylamine, tripropylamine, tributylamine, cyclohexyldimethylamine, 4-dimethylaminopyridine, N, N-dimethylaniline, N-methylpiperidine, N-methylpyrrolidine, and N-methylmorpholine Tertiary amines such as sodium hydride and alkali metal hydrides such as potassium hydride; metal amides such as sodium amide, lithium diisopropylamide and lithium hexamethyldisilazide; sodium methoxide, Sodium etoki De, and it is selected from metal alkoxides such as potassium tert- butoxide.
  • basic salts such as sodium carbonate, potassium carbonate, and cesium carbonate
  • the solvent used in this reaction is not particularly limited as long as the reaction proceeds.
  • aromatic amines such as pyridine, lutidine, and quinoline
  • Halogenated hydrocarbons such as hexane, pentane, and cyclohexane
  • aromatic hydrocarbons such as benzene, toluene, xylene, and chlorobenzene
  • amides such as N, N-dimethylformamide and N, N-dimethylacetamide, or a mixture of two or more of these.
  • Particularly preferred solvents for the above reaction are dichloromethane, chloroform and mixtures thereof from the viewpoint of reactivity.
  • the final product obtained by this reaction can be isolated and purified from the reaction mixture by known means such as concentration, solvent extraction, fractional distillation, crystallization, recrystallization, and chromatography.
  • the chlorin e6 trimethyl ester has a functional group capable of being linked to a sugar, for example, a linking group (E) having a leaving group (E) such as a halogen, a tosyl group, and a mesyl group, and a hydroxyl group (—OH).
  • a linking group (E) having a leaving group (E) such as a halogen, a tosyl group, and a mesyl group, and a hydroxyl group (—OH).
  • a chlorin e6 trimethyl ester hydrogen halide adduct is obtained by adding a hydrogen halide to the double bond at the 3-position in the porphyrin ring 1-24 number method.
  • the hydrogen halide used include hydrogen chloride, hydrogen bromide, and hydrogen iodide.
  • hydrogen bromide is preferable from the viewpoint of the reactivity and stability of the chlorin e6 trimethyl ester hydrogen halide adduct.
  • the solvent used in this reaction is not particularly limited as long as the reaction proceeds, and formic acid, acetic acid, propionic acid and the like can be mentioned.
  • the linking group (EX 4 -OH) added in the above reaction is preferably added in an amount of 10 equivalents or more with respect to the chlorin e6 trimethyl ester hydrogen halide adduct. This is because the yield of the linking group-bound chlorin e6 trimethyl ester is improved.
  • a base for example, basic salts such as sodium carbonate, potassium carbonate, and cesium carbonate; inorganic bases such as sodium hydroxide and potassium hydroxide; pyridine, lutidine, etc.
  • Aromatic amines such as: triethylamine, tripropylamine, tributylamine, cyclohexyldimethylamine, 4-dimethylaminopyridine, N, N-dimethylaniline, N-methylpiperidine, N-methylpyrrolidine, and N-methylmorpholine Tertiary amines; Sodium hydrides and alkali metal hydrides such as potassium hydride; Metal amides such as sodium amide, lithium diisopropylamide and lithium hexamethyldisilazide; Sodium methoxide and sodium ethoxy Do And it is selected from metal alkoxides such as potassium tert- butoxide.
  • the solvent used in this reaction is not particularly limited as long as the reaction proceeds.
  • aromatic amines such as pyridine, lutidine, and quinoline
  • Halogenated hydrocarbons such as hexane, pentane, and cyclohexane
  • aromatic hydrocarbons such as benzene, toluene, xylene, and chlorobenzene
  • amides such as N, N-dimethylformamide and N, N-dimethylacetamide; and mixtures of two or more of these.
  • Particularly preferred solvents for the above reaction are dichloromethane, chloroform and mixtures thereof from the viewpoint of reactivity.
  • the final product obtained by this reaction can be isolated and purified from the reaction mixture by known means such as concentration, solvent extraction, fractional distillation, crystallization, recrystallization, and chromatography.
  • a thiol sugar (R-SH) is introduced into the linking group-bound chlorin e6 trimethyl ester.
  • thiol sugar As the thiol sugar (R-SH) used here, it is preferable to use a sugar in which a hydroxyl group in the sugar is protected with a protecting group such as an acyl group.
  • a protecting group such as an acyl group.
  • the protecting group include an acetyl group and an aliphatic acyl group such as a pivaloyl group; an aromatic acyl group such as a benzoyl group; an aralkyl group such as a benzyl group; Of these protecting groups, an acetyl group is particularly preferred.
  • the solvent used in this reaction is not particularly limited as long as the reaction proceeds.
  • aromatic amines such as pyridine, lutidine, and quinoline; dichloromethane, chloroform, 1,2-dichloroethane, and carbon tetrachloride
  • Halogenated hydrocarbons such as hexane, pentane, and cyclohexane
  • aromatic hydrocarbons such as benzene, toluene, xylene, and chlorobenzene
  • diethyl ether, diisopropyl ether, diphenyl ether, tetrahydrofuran Examples thereof include ethers such as dioxane and 1,2-dimethoxyethane; amides such as N, N-dimethylformamide and N, N-dimethylacetamide; water; a mixture of two or more of these.
  • Particularly preferred solvents for the above reaction are chloroform and dichloromethane.
  • a base for example, basic salts such as sodium carbonate, potassium carbonate and cesium carbonate; inorganic bases such as sodium hydroxide and potassium hydroxide; pyridine, lutidine and the like Aromatic amines; triethylamine, tripropylamine, tributylamine, cyclohexyldimethylamine, 4-dimethylaminopyridine, N, N-dimethylaniline, N-methylpiperidine, N-methylpyrrolidine, N-methylmorpholine, etc.
  • Tertiary amines alkali metal hydrides such as sodium hydride and potassium hydride; metal amides such as sodium amide, lithium diisopropylamide and lithium hexamethyldisilazide; sodium methoxide, sodium ethoxide , And metal alkoxides such as potassium tert- butoxide; is selected from the like.
  • the final product obtained by this reaction can be isolated and purified from the reaction mixture by known means such as concentration, solvent extraction, fractional distillation, crystallization, recrystallization, and chromatography.
  • the protecting group is then eliminated and removed by alkali treatment or the like.
  • the protecting group is an acyl group, it may be hydrolyzed by adding an alkaline solution.
  • alkali metals such as sodium methoxide, sodium ethoxide, sodium tert-butoxide, potassium methoxide, potassium ethoxide, and potassium tert-butoxide in dichloromethane, methanol, ethanol, tetrahydrofuran, or a mixed solvent thereof
  • the protecting group is removed by treating the protected compound with an alkali such as an alkoxide.
  • the protecting group is an aralkyl group
  • it can be removed by hydrogenation using a palladium catalyst.
  • Deprotecting the hydroxyl group of the sugar residue R further promotes the transfer of the present chlorin derivative and the like into the cell, and is superior in cytotoxicity.
  • This chlorin derivative, etc. does not show cytotoxicity in the dark, but makes use of the fact that it exhibits strong cytotoxicity under irradiation with light, so that it is brought into contact with the target biological material in vitro or in vivo in the dark. It can be used for the purpose of destroying the target by irradiating with light having an absorption wavelength such as the present chlorin derivative after incorporation into the cell.
  • examples of the target include a target selected from the group consisting of viruses, microorganisms and their infected cells, tumor cells, tumorous tissues, and neovascularization. Therefore, it can be used for tumor destruction.
  • the present chlorin derivative and the like can be used as a therapeutic agent for cancer classified as a malignant tumor.
  • the malignant tumor include an epithelial malignant tumor and a malignant tumor having a non-epithelial tissue classified as a sarcoma as a development base.
  • the present chlorin derivative is particularly useful for the treatment of solid tumors in which tumor cells grow massively and solidly, and surface cancers that reach light, among tumor cells.
  • Specific examples include esophageal cancer, lung cancer, gastric cancer, cervical cancer, uterine cancer such as uterine cancer, skin cancer, prostate cancer, and kidney cancer.
  • Skin cancer includes primary (squamous cell carcinoma, basal cell carcinoma, and epidermis cancer), as well as skin metastasis of visceral cancer.
  • the present chlorin derivative has an affinity for benign tumors among tumor cells, photodynamics of skin diseases such as actinic keratosis, severe acne, and skin psoriasis can be obtained by local administration. It can also be used as a therapeutic drug and as a photodynamic therapeutic drug for eye diseases such as age-related macular degeneration.
  • the glycosylated chlorin e6 derivative of the present invention can be used for diagnosis of cancer in combination with PET or the like. Furthermore, the glycosylated chlorin derivative of the present invention can also be used for tumor detection by utilizing its tumor accumulation property and affinity for benign tumors.
  • the present chlorin derivative and the like can be applied to the method for destroying the above target.
  • the method for destroying a target according to an embodiment of the present invention includes a step of irradiating the target with light having a wavelength absorbed by the chlorin derivative or the like after contacting the target with the chlorin derivative or the like.
  • the said method can be implemented in a human individual and a non-human individual. That is, the method for destroying the target can be carried out in a human individual, and can be carried out in a form other than that in a human individual.
  • a pharmaceutical composition according to an embodiment of the present invention is for photodynamic treatment of tumors, skin diseases, eye diseases or age-related macular degeneration, and contains the glycosylated chlorin e6 derivative as an active ingredient. In particular, it has a better effect for photodynamic therapy of tumors.
  • the glycosylated chlorin e6 derivative which is an active ingredient, has excellent water solubility, excellent cell permeability, and high phototoxicity. Therefore, it is a drug for photodynamic treatment of tumors (particularly solid cancer). Can be suitably used.
  • the pharmaceutical composition can be administered by catheter, intravenous or intramuscular injection, and can be administered by other parenteral routes. Moreover, it may be a creamy pharmaceutical composition and can be administered transdermally. In addition, it can be locally injected directly into the tumor tissue deep inside the body.
  • the present pharmaceutical composition contains the present chlorin derivative and the like, it may contain other components as necessary.
  • other components include excipients.
  • Excipients include, for example, lactose, kaolin, sucrose, crystalline cellulose, corn starch, talc, agar, pectin, stearic acid, magnesium stearate, lecithin, and sodium chloride as solids, Examples thereof include glycerin, peanut oil, polyvinyl pyrrolidone, olive oil, ethanol, benzyl alcohol, propylene glycol, and water.
  • this pharmaceutical composition can be used as necessary, including bases, surfactants, preservatives, emulsifiers, colorants, flavoring agents, fragrances, stabilizers, preservatives, antioxidants, An agent, an antibacterial agent, a solubilizing agent, a suspending agent, a binder, and a disintegrating agent may be contained.
  • the dosage form of the pharmaceutical composition is not particularly limited, and examples thereof include tablets, powders, granules, capsules, troches, syrups, emulsions, soft gelatin capsules, gels, pastes, injectable preparations, creams and gels. , Lotions, patches and the like.
  • the carrier used in the present pharmaceutical composition is appropriately selected according to the type of preparation. When it is prepared as an injectable preparation, it can be formulated into a sterile aqueous solution or dispersion containing the present chlorin derivative or the like or a sterile lyophilized preparation containing the present chlorin derivative or the like.
  • the liquid carrier for example, water, physiological saline, ethanol, hydrous ethanol, glycerol, propylene glycol, vegetable oil and the like are preferable.
  • diluents such as lactose, sucrose, dicalcium phosphate and carboxymethylcellulose
  • lubricants such as magnesium stearate, calcium stearate and talc
  • starch glucose, molasses , Polyvinyl pyrrolidone, cellulose, and derivatives thereof, and the like.
  • the content of the active ingredient per preparation in the present embodiment can be appropriately determined according to the subject to be treated and the usage, but for example, the amount of glycosylated chlorin e6 derivative can be 1 to 2000 mg. -1000 mg is preferable, and 10-500 mg is more preferable.
  • the dose of the present chlorin derivative and the like varies depending on the subject to be treated and the purpose, but in general, the amount of the present chlorin derivative and the like is preferably 0.1 to 30 mg / kg for tumor diagnosis or detection and tumor treatment.
  • the standard is 0.2 to 20 mg / kg. Since the present chlorin derivative, which is an active ingredient, has high cytotoxicity, it can be expected to obtain an effect equal to or higher than that of conventional products (photofurin and resafirin). This means that the time required for metabolism and excretion is short, and the convenience of using photodynamic therapy is enhanced.
  • the region to be treated is irradiated with light containing the absorption band of the compound.
  • singlet oxygen can be generated by irradiation with light having a wavelength of 500 nm or more, and the desired cytotoxicity can be exhibited, but irradiation with light having a high ratio of light having the maximum absorption wavelength is preferable.
  • an LED Light Emitting Diode
  • a laser a halogen lamp, or the like
  • the laser a dye laser, a semiconductor laser, an argon laser, or the like may be used as long as it can obtain light having a wavelength necessary for excitation.
  • IC 50 (Half maximum (50%) inhibitory concentration) was used for the phototoxicity evaluation, and the measurement was performed according to the following procedure.
  • MKN45 obtained from JCRB cell bank and subcultured for 6 months
  • MKN28 obtained from Immunobiological Laboratories and subcultured for 6 months
  • IC 50 was used for the phototoxicity evaluation, and the measurement was performed according to the following procedure.
  • MKN45 obtained from JCRB cell bank and subcultured for 6 months
  • MKN28 obtained from Immunobiological Laboratories and subcultured for 6 months
  • each well is adjusted to a predetermined drug concentration, cultured for 4 hours, and then 100 ⁇ L of phosphate buffered saline (PBS). Washed once with Buffered Saline), 100 ⁇ L of PBS was added again. Then, light was irradiated for 8 minutes and 40 seconds (16 J / cm 2 ) using a 660 nm LED light source (30.8 mW / cm 2 , LEDR-660DL, OptoCode). After irradiation, PBS was removed, and 100 ⁇ L of RPMI 1640 medium containing 2% FBS was added and cultured for 24 hours.
  • PBS phosphate buffered saline
  • 0.1 ⁇ mol / L or more and less than 0.1 ⁇ mol / L is B, 0.1 ⁇ mol / L or more and less than 1 ⁇ mol / L is C, 1 ⁇ mol / L or more and less than 10 ⁇ mol / L is D, 10 ⁇ mol / L or more is E It was evaluated.
  • Tumor volume was calculated by 1/2 (4 ⁇ / 3) (L / 2) (W / 2) H (L: length of tumor, W: width, H: height).
  • 0.1 ml of physiological saline (control group) was added from the lateral tail vein of nude mice, and the drug concentration was 1 in physiological saline or 20% PEG aqueous solution.
  • 0.1 ml of drug solution dissolved at 25 mM was administered.
  • the tumor was irradiated with a diode laser (100 mW / cm 2 , CrystaLaser CL660) with a spot of 660 nm (15 Jcm ⁇ 2 ) and a diameter of 2 cm.
  • the tumor size is measured every 2 days, and the tumor growth inhibition rate (TGI%) is calculated from the tumor volume on the 24th day according to the following formula.
  • TGI% is less than 65%, D, 65% or more and 70 Less than% was evaluated as C, 70% or more and less than 75% was evaluated as B, and 75% or more was evaluated as A.
  • TGI% ((Tumor volume in control group) ⁇ (Tumor volume in treatment group)) / (Tumor volume in control group) ⁇ 100%
  • Example 1 Production and evaluation of 1- (3-hydroxy-propanethio) - ⁇ -D-glucose-linked chlorin e6 trimethyl ester (1-1) Synthesis of 1- (3-hydroxy-propanethio) - ⁇ -D-glucose tetraacetate Nitrogen atmosphere Then, 1-thio- ⁇ -D-glucose tetraacetate (2.73 g, 7.50 mmol) was dissolved in chloroform (5.0 ml), and triethylamine (2.08 ml, 15.00 mmol) was added. The resulting solution was cooled to 0 ° C.
  • the obtained compound was confirmed by 1 H-NMR (400 MHz, deuterated chloroform solvent) based on Photochemistry and Photobiology, 2007, 83, 1006-1015.
  • the obtained dichloromethane layer was washed with water (200 ml) and saturated brine (200 ml), and dried over anhydrous sodium sulfate.
  • the obtained dichloromethane solution was suction filtered, and the solvent was distilled off under reduced pressure.
  • the obtained crude product was packed in a silica gel column (High Flash column, manufactured by Yamazen Co., Ltd.) and eluted with a mixed solvent of ethyl acetate and dichloromethane.
  • the eluent was concentrated under reduced pressure to obtain 1- (3-hydroxy-propanethio) - ⁇ -D-glucose tetraacetate-linked chlorin e6 trimethyl ester (yield 0.42 g, yield 27%).
  • the solvent was distilled off from the resulting solution under reduced pressure, and the residue was loaded onto a PLC glass plate (silica gel 60 F254, manufactured by Merck & Co., Inc.) and eluted with a mixed solvent of dichloromethane and methanol.
  • the eluent was concentrated under reduced pressure, filled in reverse phase silica gel chromatography (Sep-Pak C18, manufactured by Waters), the salt was eluted with ion-exchanged water, and then eluted with methanol.
  • the obtained methanol solution was concentrated under reduced pressure to obtain 1- (3-hydroxy-propanethio) - ⁇ -D-glucose linked chlorin e6 trimethyl ester (yield 64 mg, yield 72%).
  • the obtained dichloromethane solution was suction filtered, and the solvent was distilled off under reduced pressure.
  • the obtained crude product was packed in a silica gel column (High Flash column, manufactured by Yamazen Co., Ltd.) and eluted with a mixed solvent of ethyl acetate and dichloromethane.
  • the eluent was concentrated under reduced pressure to obtain 1- (6-hydroxy-hexanethio) - ⁇ -D-glucose tetraacetate linked chlorin e6 trimethyl ester (yield 145 mg, yield 13%).
  • the solvent was distilled off from the resulting solution under reduced pressure, and the residue was loaded onto a PLC glass plate (silica gel 60 F254, manufactured by Merck & Co., Inc.) and eluted with a mixed solvent of dichloromethane and methanol.
  • the eluent was concentrated under reduced pressure, filled in reverse phase silica gel chromatography (Sep-Pak C18, manufactured by Waters), the salt was eluted with ion-exchanged water, and then eluted with methanol.
  • the obtained methanol solution was concentrated under reduced pressure to obtain 1- (6-hydroxy-hexanethio) - ⁇ -D-glucose linked chlorin e6 trimethyl ester (yield 75 mg, 67%).
  • the obtained dichloromethane solution was suction filtered, and the solvent was distilled off under reduced pressure.
  • the obtained crude product was packed in a silica gel column (High Flash column, manufactured by Yamazen Co., Ltd.) and eluted with a mixed solvent of ethyl acetate and dichloromethane.
  • the eluent was concentrated under reduced pressure to obtain 1- (10-hydroxy-decanthio) - ⁇ -D-glucose tetraacetate-linked chlorin e6 trimethyl ester (yield 285 mg, yield 22%).
  • the solvent was distilled off from the resulting solution under reduced pressure, and the residue was loaded onto a PLC glass plate (silica gel 60 F254, manufactured by Merck & Co., Inc.) and eluted with a mixed solvent of dichloromethane and methanol.
  • the eluent was concentrated under reduced pressure, filled in reverse phase silica gel chromatography (Sep-Pak C18, manufactured by Waters), the salt was eluted with ion-exchanged water, and then eluted with methanol.
  • the obtained methanol solution was concentrated under reduced pressure to obtain 1- (10-hydroxy-decanthio) - ⁇ -D-glucose linked chlorin e6 trimethyl ester (yield 149 mg, yield 65%).
  • the 1- (3-hydroxy-propanethio) - ⁇ -D-galactose-linked chlorin e6 trimethyl ester obtained based on the above production method was evaluated based on the phototoxicity evaluation method and the tumor growth inhibition rate evaluation method. Carried out. The results are shown in Table 1, Table 2 and Table 3. Further, it was confirmed that all nude mice were alive without weight loss within the evaluation period of the tumor growth inhibition rate, and no adverse effects on the nude mice due to drug administration and laser irradiation were observed.
  • Example 5 Production and evaluation of 1- (6-hydroxy-hexanethio) - ⁇ -D-galactose-linked chlorin e6 trimethyl ester 1- synthesized in (4-1) instead of 1-thio- ⁇ -D-glucose tetraacetate The same production method as in Example 2 was performed using thio- ⁇ -D-galactose tetraacetate to obtain 1- (6-hydroxy-hexanethio) - ⁇ -D-galactose-linked chlorin e6 trimethyl ester. .
  • the 1- (6-hydroxy-hexanethio) - ⁇ -D-galactose-linked chlorin e6 trimethyl ester obtained based on the above production method was evaluated based on the phototoxicity evaluation method and the tumor growth inhibition rate evaluation method. Carried out. The results are shown in Table 1, Table 2 and Table 3. Further, it was confirmed that all nude mice were alive without weight loss within the evaluation period of the tumor growth inhibition rate, and no adverse effects on the nude mice due to drug administration and laser irradiation were observed.
  • Example 6 Production and evaluation of 1- (10-hydroxy-decanthio) - ⁇ -D-galactose-linked chlorin e6 trimethyl ester 1- synthesized in (4-1) instead of 1-thio- ⁇ -D-glucose tetraacetate The same production method as in Example 3 was carried out using thio- ⁇ -D-galactose tetraacetate to obtain 1- (10-hydroxy-decanthio) - ⁇ -D-galactose-linked chlorin e6 trimethyl ester. .
  • the 1- (10-hydroxy-decanthio) - ⁇ -D-galactose-linked chlorin e6 trimethyl ester obtained based on the above production method was evaluated based on the phototoxicity evaluation method and the tumor growth inhibition rate evaluation method. Carried out. The results are shown in Table 1, Table 2 and Table 3. Further, it was confirmed that all nude mice were alive without weight loss within the evaluation period of the tumor growth inhibition rate, and no adverse effects on the nude mice due to drug administration and laser irradiation were observed.
  • the 1- (3-hydroxy-propanethio) - ⁇ -D-mannose-linked chlorin e6 trimethyl ester obtained based on the above production method was evaluated based on the phototoxicity evaluation method and the tumor growth inhibition rate evaluation method. Carried out. The results are shown in Table 1, Table 2 and Table 3. Further, it was confirmed that all nude mice were alive without weight loss within the evaluation period of the tumor growth inhibition rate, and no adverse effects on the nude mice due to drug administration and laser irradiation were observed.
  • Example 8 Production and evaluation of 1- (6-hydroxy-hexanethio) - ⁇ -D-mannose-linked chlorin e6 trimethyl ester 1-thio- synthesized in (4-1) instead of 1-thio- ⁇ -D-glucose tetraacetate The same production method as in Example 2 was carried out using ⁇ -D-mannose tetraacetate to obtain 1- (6-hydroxy-hexanethio) - ⁇ -D-mannose-linked chlorin e6 trimethyl ester. .
  • the 1- (6-hydroxy-hexanethio) - ⁇ -D-mannose-linked chlorin e6 trimethyl ester obtained based on the above production method was evaluated based on the phototoxicity evaluation method and the tumor growth inhibition rate evaluation method. Carried out. The results are shown in Table 1, Table 2 and Table 3. Further, it was confirmed that all nude mice were alive without weight loss within the evaluation period of the tumor growth inhibition rate, and no adverse effects on the nude mice due to drug administration and laser irradiation were observed.
  • Example 9 Production and evaluation of 1- (10-hydroxy-decanthio) - ⁇ -D-mannose linked chlorin e6 trimethyl ester 1-thio- synthesized in (4-1) instead of 1-thio- ⁇ -D-glucose tetraacetate The same production method as in Example 3 was carried out using ⁇ -D-mannose tetraacetate to obtain 1- (10-hydroxy-decanthio) - ⁇ -D-mannose-linked chlorin e6 trimethyl ester. .
  • Esophageal cancer cell line KYSE30 (No. 11D028; ECACC), OE21 (No. 11D028; ECACC), gastric cancer cell line: MKN45 (No. 0254; Japan Cancer Research Bank), and colon cancer cell line: HT29 (No. HTB-38 (ATCC) was used and cultured under the following conditions.
  • KYSE30 RPMI 1640 OE21: RPMI 1640 and half mixture of Ham's F12 MKN45: RPMI 1640 HT29: McCoy's 5A All cultures contained 10% fetal bovine serum, 100 U / ml penicillin and streptomycin, 0.25 mg / ml amphotericin B, and were cultured under the conditions of 5% CO 2 and 37 ° C.
  • Example 3 the 1- (3-hydroxy-propanethio) - ⁇ -D-glucose-linked chlorin e6 trimethyl ester of Example 1 (in Table 3) was prepared in the same manner as the “phototoxicity evaluation method” described above.
  • IC 50 50% cancer cell killing concentration
  • TS comparative example
  • TS comparative example
  • TS comparative example
  • a human gastric cancer cell line MKN45 (No. 0254; Japan Cancer Research Bank) and a colon cancer cell line: HT29 (No. HTB-38; ATCC) were used.
  • Culture conditions As the culture solution, RPMI 1640 was used for MKN45, and McCoy's 5A was used for HT29. All cultures contained 10% fetal bovine serum, 100 U / ml penicillin and streptomycin, 0.25 mg / ml amphotericin B, and were cultured under the conditions of 5% CO 2 and 37 ° C.
  • Test method Using a 6 cm culture plate, 2 ⁇ 10 5 cells / well of the above cancer cell lines were cultured under the above conditions for 28 hours. Next, the culture solution was removed, (1) only the culture solution (control), (2) a culture solution containing 5 ⁇ M of the glycosylated chlorin e6 derivative of Example 1, and (3) 5 ⁇ M Talaporfin Sodium (TS; (Registered trademark, Meiji Seika Pharma) was replaced with the culture solution, and further cultured for 4 hours. After culturing for 4 hours, the culture solution was removed, washed three times with phosphate-buffered saline (PBS), and cells were collected from the culture plate using TrypLE-Express (Invitrogen).
  • PBS phosphate-buffered saline
  • the MAA of TS (Comparative Example) was 235, the MAA of the compound of Example 1 was 17051, and the MAA of the compound of Example 1 was the MAA of TS. It was about 70 times higher.
  • the MAA of TS (Comparative Example) is 97, the MAA of the compound of Example 1 is 18669, and the MAA of the compound of Example 1 is about 190 times higher than TS. was.
  • Example 1 has about 70 to 190 times higher uptake into cells in vitro compared to TS (Comparative Example) which is clinically applied. From this, it can be inferred that, when this chlorin derivative or the like is used, strong tumor fluorescence is obtained, and therefore, when applied to photodynamic diagnosis (PDD), a superior sensitivity can be obtained.
  • PDT photodynamic diagnosis
  • the present chlorin derivative and the like have better uptake performance into cancer cell lines compared to TS, and from this, the present chlorin derivative and the like have a cell killing effect by PDT superior to TS. It was found that
  • Cell culture conditions are as follows. OE21: Mixture of half volume of RPMI 1640 and Ham's F12 Het-1A: BEGM Bullet kit was used as a culture solution. All culture solutions were 10% fetal bovine serum, 100 U / ml penicillin and streptomycin, 25 mg / ml Of amphotericin B and cultured under conditions of 5% CO 2 concentration and 37 ° C.
  • the mouse colon cancer cell line CT26 (No. CRL-2638; ATCC) was used as the cell line.
  • Cell culture conditions, animals used, and methods for preparing mouse subcutaneous tumor models are as follows.
  • DMEM Dulbecco's Modified Eagle Medium
  • fetal bovine serum 100 U / ml penicillin and streptomycin, 0.25 mg / ml amphotericin B, and cultured at 5% CO 2 concentration at 37 ° C. .
  • mice used: The mice were 8-10 weeks old, female, approximately 20 g body weight mice (BALB / c CrSlc). Mice were raised for 2 weeks and adapted to the environment.
  • mouse subcutaneous tumor model The hair was removed in a circular shape of about 10 mm around the back of the right thigh root of the mouse, and 1 ⁇ 10 6 CT26 were inoculated subcutaneously using a 27G needle. Seven days after inoculation, a subcutaneous tumor model with an average tumor size of 100 mm 3 (major axis (mm) ⁇ minor axis (mm) ⁇ minor axis (mm)) was prepared.
  • the prepared mouse subcutaneous tumor model was divided into three groups (untreated control group, treatment group with the compound of Example 1, Talaporfin Sodium (TS (comparative example); Rezaphyrin (registered trademark), Meiji Seika Pharma) treatment group) average tumor Ten animals were allocated so that the sizes were uniform.
  • the compound of Example 1 or TS at a concentration of 1.56 ⁇ mol / Kg was intravenously administered from the mouse tail vein, and 30 minutes later, a 664 nm red semiconductor laser (KOYO-PDL664, OK Fiber Technology) was used, for a total of 100 J / cm 2 (150 mW / cm 2 ) single irradiation was performed.
  • Tumor size after treatment was measured using electronic calipers every 3 days. The measurement results were compared between two groups using Welch's t-test. The results are shown in the graph of FIG.
  • Example 1 Single intravenous toxicity study using mice
  • mice Crl: CD1 (ICR), 5 males and 5 females / dose group
  • mice Crl: CD1 (ICR), 5 males and 5 females / dose group
  • the administration liquid volume was 10 ml / kg.
  • a pharmacological physiological saline containing 10% Cremophor + 5% ethanol was used as the administration liquid medium.
  • Results of administration In the 250 mg / kg group raised in light conditions, 3 males, 1 female died on the 2nd day, and 1 female died on the 3rd day. In the 250 mg / kg group kept in the dark, 2 males died on the 2nd and 5th days, and 3 females died on the 2nd to 4th days. In some of these animals, decreased locomotor activity, slow breathing, and decreased body temperature were observed. There was no difference between the light and dark conditions in the status of death.
  • Body weight measurement Weight loss was observed on the 4th or 8th day in the 125 and 250 mg / kg groups for both bright and dark conditions. Both were temporary and showed a tendency to recover. There was no difference between light and dark conditions in weight fluctuation.
  • Necropsy results Only the discoloration of the auricle, the defect, and the crust of the tail, which were recognized as general symptoms in the 250 mg / kg group, were observed.
  • the minimum lethal dose in the single intravenous administration of the compound of Example 1 was 250 mg / kg for both male and female in the light and dark breeding conditions. Moreover, under the light condition breeding, swelling of the tail and discoloration of the auricle were observed after administration of the 250 mg / kg group, and a difference depending on the lighting conditions was observed. From the above results, it was presumed that the compound of Example 1 could obtain sufficient effects of the present invention at a dose at which safety was recognized.
  • AUC 0-last is 30.42 ⁇ g eq h / ml
  • AUC 0- ⁇ is 31.89 ⁇ g eq. -H / ml.

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Abstract

本発明は、光線力学的療法用の殺腫瘍細胞性（光毒性）および腫瘍組織の成長抑制効果に優れるグリコシル化クロリンｅ６誘導体を提供することを課題とする。また、本発明のグリコシル化クロリンｅ６誘導体は光線力学的診断用にも適用の可能性がある。本発明のグリコシル化クロリンｅ６誘導体は、下記一般式（１）で示されるグリコシル化クロリンｅ６誘導体、またはその薬学的に許容される塩である。

Description

グリコシル化クロリンｅ６誘導体、または、その薬学的に許容される塩、医薬組成物、標的を破壊する方法、および、グリコシル化クロリンｅ６誘導体、またはその薬学的に許容される塩の製造方法
　本発明は、光線力学的療法（Ｐｈｏｔｏｄｙｎａｍｉｃ　ｔｈｅｒａｐｙ；ＰＤＴ）および／または、光線力学的診断（Ｐｈｏｔｏｄｙｎａｍｉｃ　ｄｉａｇｎｏｓｉｓ：ＰＤＤ）において好適に用いることができる、グリコシル化クロリンｅ６誘導体、または、その薬学的に許容される塩に関する。また、本発明は、医薬組成物、標的を破壊する方法、および、グリコシル化クロリンｅ６誘導体、またはその薬学的に許容される塩の製造方法に関する。
　光線力学的療法（ＰＤＴ）は、標的となる疾患組織（以下、「標的組織」ともいう。）を有する患者に光感受性物質を投与し、標的組織（癌組織、腫瘍組織、皮膚病変部、および、新生血管等）に光感受性物質を集積させた後、光感受性物質を励起するのに適切な波長の光を照射することにより、標的組織のみを選択的に破壊する治療方法である。この場合、光励起されて活性化した光感受性物質が、近傍の分子状酸素に対して直接的または間接的にエネルギー移動を行い、これによる一重項酸素の生成が標的組織破壊の主要メカニズムであると考えられている。
　ＰＤＴに用いられる光感受性物質としては、ヘマトポルフィリン誘導体（例えばフォトフリン（登録商標））がよく知られており、既に実用化されている。しかしヘマトポルフィリン誘導体は、人体に投与した際に副作用として一時的な光過敏症を引き起こすことが知られている。また、ヘマトポルフィリン誘導体の癌組織に対する選択性は充分なものではなく、正常組織への集積性も認められる。したがって、投与を受けた患者は、正常組織に集積したヘマトポルフィリン誘導体（ポルフィマーナトリウム）による光増感作用で正常細胞が破壊されないように、それが体外に排泄されるまで長時間に渡って暗所に留まることが必要である。しかし、ポルフィマーナトリウムは正常組織からの排出速度が遅いため、４週間以上にわたって光過敏症が残ることが報告されている。加えて、ポルフィリン誘導体の最大吸収波長は約６３０ｎｍであり、モル吸光係数も低いため、ＰＤＴの治療効果（言い換えれば、標的組織）が５～１０ｎｍ程度の表層癌に限定されてしまう。
　このような化合物に対し、より長波長領域（６５０ｎｍ～８００ｎｍ）に吸収をもつフタロシアニン系化合物、および、クロリン系化合物等が第２世代の薬物として提案されている。例えば、クロリン系化合物にアスパラギン酸を結合させたタラポルフィンナトリウム（以下、本明細書において、「ＴＳ」ともいう。レザフィリン（登録商標））等は既に実用化され、臨床使用量を徐々に伸ばしている。このような薬剤においては、代謝性および吸収波長の長波長化等の問題をクリアしているものの、殺腫瘍細胞性および腫瘍組織の成長抑制効果については不十分といった問題がある。
　上記のようなＰＤＴ用薬剤として、特許文献１には、クロリン系化合物であるクロリンｅ６と葉酸とを結合させた化合物が提案されている。また特許文献２にはガレクチンバイオマーカーの検出用にクロリン系化合物とガラクトサミンとを結合させた化合物が提案されている。さらに、非特許文献１には、１２４ヨウ素でラベルしたクロリン系化合物に糖を結合させた化合物を合成し、ＰＥＴ（Ｐｏｓｉｔｒｏｎ　Ｅｍｉｓｓｉｏｎ　Ｔｏｍｏｇｒａｐｈｙ）イメージングおよび光線力学的療法への提案がされている。
特表２０１１－５１８８９０号公報 ＫＲ２００９０４７８７２Ａ
Ravindra K . Pandey et al., Journal of Medical Chemistry 2009, 52, 445-455
　以上のように、ポルフィリン系化合物およびクロリン系化合物についても開発、研究が進められているが、殺腫瘍細胞性および腫瘍組織の成長抑制効果の点では改善の余地があった。
　そこで、本発明は、優れた殺腫瘍細胞性（光毒性）、および、優れた腫瘍組織の成長抑制効果を有するグリコシル化クロリンｅ６誘導体、またはその薬学的に許容される塩の提供を課題とする。
　また本発明は、医薬組成物、標的を破壊する方法、および、グリコシル化クロリンｅ６誘導体、またはその薬学的に許容される塩の製造方法の提供も課題とする。
　本発明者らは、種々のポルフィリン誘導体、および、クロリン誘導体を検討した結果、光線力学的治療用薬として有用な、生体に対する安全性を確保し且つ少量で高い光毒性を示す光感受性物質となる、新規なグリコシル化クロリンｅ６誘導体およびその製造方法を見出し、本発明に至ったのである。
　すなわち、本発明は、以下の通りである。
［１］　後述する一般式（１）で示されるグリコシル化クロリンｅ６誘導体、または、その薬学的に許容される塩。
［２］　後述する一般式（１）において、Ｒ１、Ｒ２およびＲ３が、それぞれ独立に、炭素数１～６のアセトキシアルキル基または炭素数１～６の炭化水素基である、［１］に記載のグリコシル化クロリンｅ６誘導体、またはその薬学的に許容される塩。
［３］　後述する一般式（１）において、Ｒ１、Ｒ２およびＲ３が、メチル基である、［１］または［２］に記載のグリコシル化クロリンｅ６誘導体、またはその薬学的に許容される塩。
［４］　後述する一般式（１）において、－Ｘ－が－Ｘ３－Ｏ－であり、後述する一般式（２）で示される、［１］～［３］のいずれかに記載のグリコシル化クロリンｅ６誘導体、またはその薬学的に許容される塩。
［５］　後述する一般式（２）において、Ｘ３が、Ｒのアノマー位炭素原子と結合した基、または、アノマー位炭素原子に隣接する炭素原子と結合した基である、［４］に記載のグリコシル化クロリンｅ６誘導体、またはその薬学的に許容される塩。
［６］　後述する一般式（２）において、－Ｘ３－が－Ｓ－Ｘ４－であり、後述する一般式（３）で示される、［４］または［５］に記載のグリコシル化クロリンｅ６誘導体、またはその薬学的に許容される塩。
［７］　後述する一般式（３）において、Ｘ４が、炭素数１～１６の直鎖状または分岐鎖状のアルキレン基である、［６］に記載のグリコシル化クロリンｅ６誘導体、またはその薬学的に許容される塩。
［８］　後述する一般式（３）において、Ｘ４が－（ＣＨ２）ｎ－で示されるアルキレン基であり、ｎが１～１６の整数である、［６］または［７］に記載のグリコシル化クロリンｅ６誘導体、またはその薬学的に許容される塩。
［９］　後述する一般式（３）において、Ｘ４が－（ＣＨ２）ｎ－で示されるアルキレン基であり、ｎが３～１０の整数である、［６］～［８］のいずれかに記載のグリコシル化クロリンｅ６誘導体、またはその薬学的に許容される塩。
［１０］　糖が、単糖類、オリゴ糖、多糖類、アミノ基を含む単糖類、アミノ基を含むオリゴ糖、またはアミノ基を含む多糖類である、［１］～［９］のいずれかに記載のグリコシル化クロリンｅ６誘導体、またはその薬学的に許容される塩。
［１１］　糖が、単糖類であり、ＳがＲのアノマー位炭素原子と結合した、［１］～［１０］のいずれかに記載のグリコシル化クロリンｅ６誘導体、またはその薬学的に許容される塩。
［１２］　糖が、グルコース、ガラクトースまたはマンノースである、［１］～［１１］のいずれかに記載のグリコシル化クロリンｅ６誘導体、またはその薬学的に許容される塩。
［１３］　下記一般式（４）、（５）または（６）で示される、［１］～［１２］のいずれかに記載のグリコシル化クロリンｅ６誘導体、またはその薬学的に許容される塩。
［１４］　腫瘍、皮膚疾患、眼疾患または加齢黄斑変性の光線力学治療用であり、［１］～［１３］のいずれかに記載のクロリンｅ６誘導体、またはその薬学的に許容される塩を有効成分として含む医薬組成物。
［１５］　ウイルス、微生物およびこれらのいずれかの感染細胞、腫瘍細胞、腫瘍状組織、ならびに、新生血管からなる群より選択される標的に、［１］～［１３］のいずれかに記載のグリコシル化クロリンｅ６誘導体、またはその薬学的に許容される塩を接触させた後に、標的に対して、クロリンｅ６誘導体、またはその薬学的に許容される塩に吸収される波長の光を照射する工程を含む、標的を破壊する方法。
［１６］　［１］～［１３］のいずれかに記載のグリコシル化クロリンｅ６誘導体、またはその薬学的に許容される塩を有効成分として含む、医薬組成物。
［１７］　腫瘍、皮膚疾患、眼疾患または加齢黄斑変性の、治療、診断または検出のための、［１６］に記載の医薬組成物。
［１８］　クロリンｅ６と糖とを連結基を介して結合させる工程を含む、［１］～［１３］のいずれか１項に記載のグリコシル化クロリンｅ６誘導体、またはその薬学的に許容される塩の製造方法。
　本発明の実施形態に係るグリコシル化クロリンｅ６誘導体、または、その薬学的に許容される塩（以下、単に「本クロリン誘導体等」ともいう。）は、暗所での毒性が非常に低く、生体に対する安全性を確保し、光線照射による殺腫瘍細胞性および腫瘍組織の成長抑制効果に優れているため、インビトロまたはインビボにて、標的となるウイルス、細菌、若しくはこれらの感染細胞、腫瘍細胞、または腫瘍状組織と接触させた後、本クロリン誘導体等に吸収される波長の光線を照射することにより、上記標的を破壊する用途に適用できる。従って、本クロリン誘導体等は、上記本クロリン誘導体等を有効成分とする医薬、特に、腫瘍、または皮膚病の光線力学的治療用薬、あるいは光線力学診断薬として用いることができる。
本発明の実施形態に係るグリコシル化クロリンｅ６誘導体の製造方法の一例を説明するための図である。 本発明の実施形態に係るグリコシル化クロリンｅ６誘導体の製造方法の一例を説明するための図である。 食道癌細胞株および不死化食道正常上皮細胞株を用いた、本発明の実施形態に係るグリコシル化クロリンｅ６誘導体の細胞内取り込み性能評価結果を表すグラフである。 光線力学的療法における、本発明の実施形態に係るグリコシル化クロリンｅ６誘導体の抗腫瘍効果の評価結果を表すグラフである。
〔グリコシル化クロリンｅ６誘導体およびその製造方法〕
　以下では、本クロリン誘導体等のうち、特に、グリコシル化クロリンｅ６誘導体を例に説明することがあるが、その説明は、特に記載した場合を除き、グリコシル化クロリンｅ６誘導体の薬学的に許容される塩にも当てはまる。
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000007
　一般式（１）中、Ｘ１およびＸ２は、それぞれ独立に、Ｈ（水素原子）またはＲ－Ｘ－＊で表される基（＊は結合位置を表す）であり、かつ、Ｘ１およびＸ２の少なくとも一方はＲ－Ｘ－＊で表される基である。合成がより容易である観点、すなわち、より優れた生産性を有する観点からは、Ｘ１およびＸ２のいずれか一方がＲ－Ｘ－＊で表される基であることが好ましく、Ｘ１がＲ－Ｘ－＊で表される基であり、かつ、Ｘ２がＨ（水素原子）であることがより好ましい。
　ここで、Ｒは糖の残基（以下「糖残基」という。）を表す。糖残基とは糖が有する炭素原子に結合した水酸基を１個除いた残基を表し、糖のヘミアセタール性（アノマー性）の水酸基を除いた残基が好ましい。
　ＸはＲを構成する炭素原子のいずれか１つと結合した２価の基であり、かつ、ＲはＣ（炭素原子）、Ｎ（窒素原子）、Ｏ（酸素原子）、Ｈ（水素原子）、およびＳ（硫黄原子）からなる群より選択される少なくとも１種の原子からなる直鎖状または分岐鎖状の２価の基である。Ｘとしては、例えば、－Ｓ－、－Ｏ－、－ＮＲｘ－（Ｒｘは水素原子、または、ヘテロ原子を有してもよい炭化水素基）、カルボニル基、アルキレン基、アルケニレン基、および、これらを組合せた基が挙げられ、Ｏ（酸素原子）および／またはＳ（硫黄原子）を含むことが好ましく、－Ｓ－、－Ｏ－、および、アルキレン基からなる群より選択される２種以上を組み合わせた基がより好ましく、－Ｓ－、－Ｏ－、および、アルキレン基とを組み合わせた基がさらに好ましい。
　Ｒの糖としては、特に制限されないが、例えば、アルドペントース（リボース、アラビノース、キシロース、および、リキソース等）、アルドヘキソース（アロース、アルトロース、グルコース、マンノース、グロース、イドース、ガラクトース、および、タロース等）、アルドヘプトース、ケトペントース（リブロース、および、キシルロース等）、ケトヘキソース（プシコース、フルクトース、ソルボース、および、タガトース等）、ケトヘプトース（セドヘプツロース、および、コリオース等）、並びに、アミノ基を有するこれらの誘導体等の単糖類；
　ショ糖、マルトース、ラクトース、マルトトリオース、ラフィノース、および、マルトテトラオース等のオリゴ糖、並びに、アミノ基を有するこれらの誘導体；
　デンプン、アミロース、および、グリコーゲン等の多糖類、並びに、アミノ基を有するこれらの誘導体；等が挙げられる。なかでも、単糖類が好ましく、ヘキソースまたはヘキソサミンがより好ましく、ヘキソースがさらに好ましく、グルコースが特に好ましい。
　単糖類は、Ｄ体であってもよいし、Ｌ体であってもよいが、Ｄ体が好ましい。
　なお、本明細書において、オリゴ糖とは２～９個の単糖単位を含む化合物を意味し、多糖類とは１０個以上の単糖単位を含む化合物を意味する（Ｊ．Ｄ．ＲＯＢＥＲＴＳ＆Ｍ．Ｃ．ＣＡＳＥＲＩＯ（１９６４）．ＢＡＳＩＣ　ＰＲＩＮＣＩＰＬＥＳ　ＯＦ　ＯＲＧＡＮＩＣ　ＣＨＥＭＩＳＴＲＹ．　Ｗ．Ａ．Ｂｅｎｊａｍｉｎ．Ｉｎｃ．（Ｊ．Ｄ．ロバーツ＆Ｍ．Ｃ．カセリオ　大木道則（訳）（１９６９）．ロバーツ有機化学　株式会社東京化学同人）より引用）。グリコシド結合する単糖同士は、同じでもよく、異なっていてもよい。また、単糖同士のグリコシド結合は、α－結合であっても、β－結合であってもよい。
　ヘキソースとしては、具体的には、グルコース、ガラクトース、マンノース、アロース、アルトロース、グロース、イドース、および、タロースが挙げられ、これらのうち、グルコースが最も好ましい。グルコースのときの光毒性が優れているからである。
　ヘキソサミンとしては、具体的には、グルコサミン、ガラクトサミン、マンノサミン、ダウノサミン、および、ペロサミンが挙げられ、これらのうち、グルコサミンが最も好ましい。グルコサミンのときの光毒性が優れているからである。
　式（１）中、Ｒ１、Ｒ２およびＲ３は、それぞれ独立に、Ｈ（水素原子）、炭素数１～６のアセトキシアルキル基または炭素数１～６の炭化水素基であり、Ｒ１、Ｒ２およびＲ３の少なくとも１つは炭素数１～６のアセトキシアルキル基または炭素数１～６の炭化水素基である。
　ここで、炭素数１～６のアセトキシアルキルとしては、アセトキシメチル、アセトキシエチル、アセトキシプロピル、およびアセトキシブチル等が挙げられる。また、炭素数１～６の炭化水素としては、メチル、エチル、ｎ－プロピル、ｎ－ブチル、ｓｅｃ－ブチル、ｔｅｒｔ－ブチル、ペンチル、シクロペンチル、ヘキシル、およびシクロヘキシル等の炭素数１～６の直鎖状、分岐鎖状または環状アルキルが挙げられる。なかでも、より優れた本発明の効果を有するグリコシル化クロリンｅ６誘導体が得られる点で、Ｒ１、Ｒ２およびＲ３は、それぞれ独立に、炭素数１～６のアセトキシアルキル基または炭素数１～６の炭化水素基であることが好ましい。癌細胞に対する取り込み性が向上するからである。
　またＲ１、Ｒ２およびＲ３は、水溶性の観点から、それぞれ独立に、炭素数は１～３の炭化水素基であることが好ましく、メチル基がより好ましい。
　Ｒ－Ｘ－＊で表される基（＊は結合位置を表す）において、２価の基（連結基）Ｘには、Ｏ（酸素原子）が含まれることが好ましく、ＯおよびＳ（硫黄原子）が含まれていることがより好ましい。
　なかでも、より優れた本発明の効果を有するグリコシド化クロリンｅ６誘導体が得られる点で、Ｒ－Ｘ－＊で表される基としては、Ｒ－Ｘ３－Ｏ－＊で表される基が好ましい。ここで、Ｘ３は、Ｃ、Ｎ、Ｏ、Ｈ、およびＳからなる群より選択される少なくとも１種からなる直鎖状または分岐鎖状の２価の基であり、かつ、Ｒを構成する炭素原子のいずれか１個と結合している。Ｘ３の２価の基としては特に制限されないが、すでに説明したＸの２価の基と同様の形態である。
　すなわち、グリコシド化クロリンｅ６誘導体は、以下の式（２）で表されることが好ましい。なお、式（２）中、糖残基Ｒの形態としては、式（１）中のＲとして既に説明したとおりである。
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000008
　さらに優れた本発明の効果を有するグリコシド化クロリンｅ６誘導体が得られる点で、Ｒ－Ｘ３－Ｏ－＊で表される基としては、Ｒ－Ｌ－Ｓ－Ｘ４－Ｏ－＊で表される基がさらに好ましい。ここで、Ｌは、単結合または２価の基を表す。Ｌの２価の連結基としては特に制限されないが、例えば、Ｘの２価の基として既に説明したとおりである。
　なかでも、より優れた本発明の効果を有するグリコシド化クロリンｅ６誘導体が得られる点で、Ｒ－Ｌ－Ｓ－Ｘ４－Ｏ－＊で表される基のＬが単結合であることが好ましい。すなわち、Ｒ－Ｘ－＊で表される基は、Ｒ－Ｓ－Ｘ４－Ｏ－＊で表される基、言い換えれば、糖残基Ｒが－Ｓ－Ｘ４－Ｏ－に直接連結された基が好ましい。ここで直接連結とは、例えば糖のアノマー位のＣ（炭素原子）と－Ｓ－Ｘ４－Ｏ－が連結している構造（－Ｃ－Ｓ－Ｘ４－Ｏ－）を指す。
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000009
　また、Ｒ－Ｓ－Ｘ４－Ｏ－＊で表される基におけるＳ（硫黄原子）は、合成の観点からＲのアノマー位炭素原子（１位炭素原子）と結合した連結基、またはアノマー位炭素原子に隣接する炭素原子（２位炭素原子）と結合した連結基であることが好ましく、Ｒのアノマー位炭素原子（１位炭素原子）と結合した連結基であることがより好ましい。
　Ｘ４はＯ（酸素原子）とＳ（硫黄原子）と結合している。また、Ｘ４はＣ（炭素原子）およびＨ（水素原子）を有する直鎖状または分岐鎖状の２価の基である。Ｘ４としては特に制限されないが、例えばアルキレン基、オキシアルキレン基、およびアルキレンオキシ基等が挙げられるが、なかでも、炭素数１～１６の直鎖状または分岐鎖状のアルキレン基であることが好ましく、－（ＣＨ２）ｎ－で示される直鎖状アルキレン基であることがより好ましい。ｎは１～１６の整数であることが好ましく、ｎが２～１３の整数であることがより好ましく、ｎが３～１０の整数であることがさらに好ましい。合成が容易であり、かつ化合物の水溶性が高まるからである。
　なお、式（３）中、糖残基Ｒの形態としては、式（１）中のＲとして既に説明したとおりである。
　なかでも、特に優れた本発明の効果を有する点で、グリコシル化クロリンｅ６誘導体は、下記式（４）、（５）、または、（６）で表されることが好ましい。なお、下記式（４）～（６）において、ｎは、それぞれ３～１０の整数を表す。
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000010
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000011
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000012
　なお、グリコシル化クロリンｅ６誘導体１種を単独で用いても、２種以上を併用してもよい。
　薬学的に許容される塩としては、アルカリ金属塩（例えばナトリウム塩、およびカリウム塩等）、アルカリ土類金属塩（例えばマグネシウム塩、およびカルシウム塩等）、アンモニウム塩、モノ－、ジ－またはトリ－低級（アルキルまたはヒドロキシアルキル）アンモニウム塩（例えばエタノールアンモニウム塩、ジエタノールアンモニウム塩、トリエタノールアンモニウム塩、トロメタミン塩）、塩酸塩、臭化水素酸塩、ヨウ化水素酸塩、硝酸塩、リン酸塩、硫酸塩、ギ酸塩、酢酸塩、クエン酸塩、シュウ酸塩、フマル酸塩、マレイン酸塩、コハク酸塩、リンゴ酸塩、酒石酸塩、トリクロロ酢酸塩、トリフルオロ酢酸塩、メタンスルホン酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、ｐ－トルエンスルホン酸塩、メシチレンスルホン酸塩およびナフタレンスルホン酸塩等が挙げられる。
　また、塩は、無水物、または溶媒和物であってよく、溶媒和物としては、水和物、メタノール和物、エタノール和物、プロパノール和物、および２－プロパノール和物等が挙げられる。
　以上のような構成を有する本クロリン誘導体等は、暗所では細胞毒性は示さないが、光線照射下で強い細胞毒性を示す。そして、ポルフィリン誘導体と比べて長波長における吸収が大きく（吸収極大波長６５０ｎｍ）、また糖の連結により化合物は細胞親和性および／または細胞透過性が高くなっているものと推測される。
　次に、本クロリン誘導体等の製造方法について説明する。本発明の実施形態に係るクロリン誘導体等の製造方法は、クロリンｅ６と糖とを連結基を介して結合させる（グリコシド化）工程を含む。より具体的には、クロリンｅ６アルキルエステルの３位二重結合と糖とを連結基を介して結合させ、グリコシル化する工程を含む。連結基を結合させる手順は、糖と連結基とを結合させた後にクロリンｅ６と連結させてもよいが、連結基とクロリンｅ６とを結合させた後に糖と連結させてもよく、目的に応じて製造方法を選択すればよい。
　以下では、まず、糖と連結基とを結合させた後にクロリンｅ６と連結させる製造方法を図１を参照しつつ詳述する。
　まず、チオール糖（Ｒ－ＳＨ）に対し、チオール糖と連結できる官能基、例えばハロゲン、トシル基、およびメシル基等の脱離基（Ｅ）を有し、かつヒドロキシル基（－ＯＨ）を有する連結基（Ｅ－Ｘ４－ＯＨ）を導入する。
　ここで用いられるチオール糖（Ｒ－ＳＨ）の有する糖残基Ｒは、水酸基がアシル基等の保護基で保護されることが好ましい。保護基としては、アセチル、およびピバロイル等の脂肪族アシル基；ベンゾイル基等の芳香族アシル基；ベンジル基等のアラルキル基が挙げられる。これらの保護基のうち、アセチル基が特に好ましい。
　チオール糖（Ｒ－ＳＨ）と連結させる連結基（Ｅ－Ｘ４－ＯＨ）としては、クロロアルコール、ブロモアルコール、ヨードアルコール、トシルアルコール、およびメシルアルコール等が挙げられる。
　この反応において用いられる溶媒としては、反応が進行する限り特に制限されないが、例えば、ピリジン、ルチジン、および、キノリン等の芳香族アミン類；ジクロロメタン、クロロホルム、１，２－ジクロロエタン、および、四塩化炭素等のハロゲン化炭化水素類；ヘキサン、ペンタン、および、シクロヘキサン等の脂肪族炭化水素類；ベンゼン、トルエン、キシレン、および、クロロベンゼン等の芳香族炭化水素類；ジエチルエーテル、ジイソプロピルエーテル、ジフェニルエーテル、テトラヒドロフラン、ジオキサン、および、１，２－ジメトキシエタン等のエーテル類；Ｎ，Ｎ－ジメチルホルムアミド、および、Ｎ，Ｎ－ジメチルアセトアミド等のアミド類；水；および、これらの混合物等が挙げられる。上記反応で特に好ましい溶媒は、クロロホルム、または、ジクロロメタンである。
　またこの反応において塩基が用いられる場合は、例えば、炭酸ナトリウム、炭酸カリウム、および、炭酸セシウム等の塩基性塩類；水酸化ナトリウム、および、水酸化カリウム等の無機塩基類；ピリジン、および、ルチジン等の芳香族アミン類；トリエチルアミン、トリプロピルアミン、トリブチルアミン、シクロヘキシルジメチルアミン、４－ジメチルアミノピリジン、Ｎ，Ｎ－ジメチルアニリン、Ｎ－メチルピペリジン、Ｎ－メチルピロリジン、および、Ｎ－メチルモルホリン等の第３級アミン類；水素化ナトリウム、および、水素化カリウム等のアルカリ金属水素化物類；ナトリウムアミド、リチウムジイソプロピルアミド、および、リチウムヘキサメチルジシラジド等の金属アミド類；ナトリウムメトキシド、ナトリウムエトキシド、および、カリウムｔｅｒｔ－ブトキシド等の金属アルコキシド類；等から選択される。
　なお、この反応で得られる最終生成物は、濃縮、溶媒抽出、分溜、結晶化、再結晶、および、クロマトグラフィー等の公知の手段によって反応混合物から単離、精製できる。
　次に、クロリンｅ６トリメチルエステルに対し、チオール糖連結基結合体（Ｒ－Ｓ－Ｘ４－ＯＨ）を導入する。
　まずクロリンｅ６トリメチルエステルに対し、ポルフィリン環の１～２４番号法における３位の二重結合に、ハロゲン化水素を付加することにより、クロリンｅ６トリメチルエステルハロゲン化水素付加体を得る。使用するハロゲン化水素としては、塩化水素、臭化水素、およびヨウ化水素等が挙げられる。ハロゲン化水素としては、クロリンｅ６トリメチルエステルハロゲン化水素付加体の反応性と安定性の観点から、臭化水素が好ましい。
　この反応において用いられる溶媒としては、反応が進行する限り特に制限されないが、ギ酸、酢酸、およびプロピオン酸等が挙げられる。
　得られたクロリンｅ６トリメチルエステルハロゲン化水素付加体に、チオール糖連結基結合体（Ｒ－Ｓ－Ｘ４－ＯＨ）を作用させて、チオール糖連結基結合体（Ｒ－Ｓ－Ｘ４－ＯＨ）をクロリンｅ６トリメチルエステルハロゲン化水素付加体に結合させて、糖連結クロリンｅ６トリメチルエステルを得る。上記反応で加える、チオール糖連結基結合体（Ｒ－Ｓ－Ｘ４－ＯＨ）は、クロリンｅ６トリメチルエステルハロゲン化水素付加体に対し、３等量以上加えることが好ましい。糖連結クロリンｅ６トリメチルエステルの収率が向上するためである。
　また、この反応において塩基が用いられる場合は、例えば、炭酸ナトリウム、炭酸カリウム、および、炭酸セシウム等の塩基性塩類；、水酸化ナトリウム、および、水酸化カリウム等の無機塩基類；ピリジン、および、ルチジン等の芳香族アミン類；トリエチルアミン、トリプロピルアミン、トリブチルアミン、シクロヘキシルジメチルアミン、４－ジメチルアミノピリジン、Ｎ，Ｎ－ジメチルアニリン、Ｎ－メチルピペリジン、Ｎ－メチルピロリジン、および、Ｎ－メチルモルホリン等の第３級アミン類；水素化ナトリウム、および、水素化カリウム等のアルカリ金属水素化物類；ナトリウムアミド、リチウムジイソプロピルアミド、および、リチウムヘキサメチルジシラジド等の金属アミド類；ナトリウムメトキシド、ナトリウムエトキシド、および、カリウムｔｅｒｔ－ブトキシド等の金属アルコキシド類等から選択される。
　この反応において用いられる溶媒としては、反応が進行する限り特に限定されないが、例えば、ピリジン、ルチジン、および、キノリン等の芳香族アミン類；ジクロロメタン、クロロホルム、１，２－ジクロロエタン、および、四塩化炭素等のハロゲン化炭化水素類；ヘキサン、ペンタン、および、シクロヘキサン等の脂肪族炭化水素類；ベンゼン、トルエン、キシレン、および、クロロベンゼン等の芳香族炭化水素類；ジエチルエーテル、ジイソプロピルエーテル、ジフェニルエーテル、テトラヒドロフラン、ジオキサン、および、１，２－ジメトキシエタン等のエーテル類；Ｎ，Ｎ－ジメチルホルムアミド、および、Ｎ，Ｎ－ジメチルアセトアミド等のアミド類またはこれら二種以上の混合物等が挙げられる。上記反応で特に好ましい溶媒は、反応性の観点からジクロロメタン、クロロホルムおよびこれらの混合物である。
　なお、この反応で得られる最終生成物は、濃縮、溶媒抽出、分溜、結晶化、再結晶、およびクロマトグラフィー等の公知の手段によって反応混合物から単離、精製できる。
　次に、連結基とクロリンｅ６とを結合させた後に糖と連結させる製造方法を、図２を参照しつつ詳述する。
　まず、クロリンｅ６トリメチルエステルに対し、糖と連結できる官能基、例えばハロゲン、トシル基、およびメシル基等の脱離基（Ｅ）を有し、かつヒドロキシル基（－ＯＨ）を有する連結基（Ｅ－Ｘ４－ＯＨ）を導入する。
　クロリンｅ６トリメチルエステルにおいて、ポルフィリン環の１～２４番号法における３位の二重結合に、ハロゲン化水素を付加することにより、クロリンｅ６トリメチルエステルハロゲン化水素付加体を得る。使用するハロゲン化水素としては、塩化水素、臭化水素、および、ヨウ化水素等が挙げられる。ハロゲン化水素としては、クロリンｅ６トリメチルエステルハロゲン化水素付加体の反応性と安定性の観点から、臭化水素が好ましい。
　この反応において用いられる溶媒としては、反応が進行する限り特に限定されないが、ギ酸、酢酸、および、プロピオン酸等が挙げられる。
　得られたクロリンｅ６トリメチルエステルハロゲン化水素付加体に、連結基（Ｅ－Ｘ４－ＯＨ）を作用させて、連結基（Ｅ－Ｘ４－ＯＨ）をクロリンｅ６トリメチルエステルハロゲン化水素付加体に結合させて、連結基結合クロリンｅ６トリメチルエステルを得る。
　連結基（Ｅ－Ｘ４－ＯＨ）としては、クロロアルコール、ブロモアルコール、ヨードアルコール、トシルアルコール、およびメシルアルコール等が挙げられる。上記反応で加える、連結基（Ｅ－Ｘ４－ＯＨ）は、クロリンｅ６トリメチルエステルハロゲン化水素付加体に対し、１０等量以上加えることが好ましい。連結基結合クロリンｅ６トリメチルエステルの収率が向上するためである。
　またこの反応において塩基が用いられる場合は、例えば、炭酸ナトリウム、炭酸カリウム、および、炭酸セシウム等の塩基性塩類；水酸化ナトリウム、および、水酸化カリウム等の無機塩基類；ピリジン、および、ルチジン等の芳香族アミン類；トリエチルアミン、トリプロピルアミン、トリブチルアミン、シクロヘキシルジメチルアミン、４－ジメチルアミノピリジン、Ｎ，Ｎ－ジメチルアニリン、Ｎ－メチルピペリジン、Ｎ－メチルピロリジン、および、Ｎ－メチルモルホリン等の第３級アミン類；水素化ナトリウム、および、水素化カリウム等のアルカリ金属水素化物類；ナトリウムアミド、リチウムジイソプロピルアミド、および、リチウムヘキサメチルジシラジド等の金属アミド類；ナトリウムメトキシド、ナトリウムエトキシド、および、カリウムｔｅｒｔ－ブトキシド等の金属アルコキシド類等から選択される。
　この反応において用いられる溶媒としては、反応が進行する限り特に限定されないが、例えば、ピリジン、ルチジン、および、キノリン等の芳香族アミン類；ジクロロメタン、クロロホルム、１，２－ジクロロエタン、および、四塩化炭素等のハロゲン化炭化水素類；ヘキサン、ペンタン、および、シクロヘキサン等の脂肪族炭化水素類；ベンゼン、トルエン、キシレン、および、クロロベンゼン等の芳香族炭化水素類；ジエチルエーテル、ジイソプロピルエーテル、ジフェニルエーテル、テトラヒドロフラン、ジオキサン、および、１，２－ジメトキシエタン等のエーテル類；Ｎ，Ｎ－ジメチルホルムアミド、および、Ｎ，Ｎ－ジメチルアセトアミド等のアミド類；これら二種以上の混合物等が挙げられる。上記反応で特に好ましい溶媒は、反応性の観点からジクロロメタン、クロロホルムおよびこれらの混合物である。
　なお、この反応で得られる最終生成物は、濃縮、溶媒抽出、分溜、結晶化、再結晶、およびクロマトグラフィー等の公知の手段によって反応混合物から単離、精製できる。
次に、連結基結合クロリンｅ６トリメチルエステルに対し、チオール糖（Ｒ－ＳＨ）を導入する。
　ここで用いられるチオール糖（Ｒ－ＳＨ）は、糖中の水酸基をアシル基等の保護基で保護したものを用いることが好ましい。保護基としては、アセチル基、および、ピバロイル基等の脂肪族アシル基；ベンゾイル基等の芳香族アシル基；ベンジル基等のアラルキル基；等が挙げられる。これらの保護基のうち、アセチル基が特に好ましい。
　この反応において用いられる溶媒としては、反応が進行する限り特に限定されないが、例えば、ピリジン、ルチジン、および、キノリン等の芳香族アミン類；ジクロロメタン、クロロホルム、１，２－ジクロロエタン、および、四塩化炭素等のハロゲン化炭化水素類；ヘキサン、ペンタン、および、シクロヘキサン等の脂肪族炭化水素類；ベンゼン、トルエン、キシレン、および、クロロベンゼン等の芳香族炭化水素類；ジエチルエーテル、ジイソプロピルエーテル、ジフェニルエーテル、テトラヒドロフラン、ジオキサン、および、１，２－ジメトキシエタン等のエーテル類；Ｎ，Ｎ－ジメチルホルムアミド、および、Ｎ，Ｎ－ジメチルアセトアミド等のアミド類；水；これら二種以上の混合物等が挙げられる。上記反応で特に好ましい溶媒は、クロロホルム、および、ジクロロメタンである。
　またこの反応において塩基が用いられる場合は、例えば、炭酸ナトリウム、炭酸カリウム、および、炭酸セシウム等の塩基性塩類；水酸化ナトリウム、および、水酸化カリウム等の無機塩基類；ピリジン、およびルチジン等の芳香族アミン類；トリエチルアミン、トリプロピルアミン、トリブチルアミン、シクロヘキシルジメチルアミン、４－ジメチルアミノピリジン、Ｎ，Ｎ－ジメチルアニリン、Ｎ－メチルピペリジン、Ｎ－メチルピロリジン、および、Ｎ－メチルモルホリン等の第３級アミン類；水素化ナトリウム、および、水素化カリウム等のアルカリ金属水素化物類；ナトリウムアミド、リチウムジイソプロピルアミド、および、リチウムヘキサメチルジシラジド等の金属アミド類；ナトリウムメトキシド、ナトリウムエトキシド、および、カリウムｔｅｒｔ－ブトキシド等の金属アルコキシド類；等から選択される。
　なお、この反応で得られる最終生成物は、濃縮、溶媒抽出、分溜、結晶化、再結晶、および、クロマトグラフィー等の公知の手段によって反応混合物から単離、精製できる。
　以上の製造方法において、保護基で水酸基がブロックされている糖残基Ｒを使用した場合には、次いで、アルカリ処理等により、保護基を脱離除去する。保護基がアシル基の場合には、アルカリ溶液を加えて加水分解すればよい。例えば、ジクロロメタン、メタノール、エタノール、テトラヒドロフラン、またはこれらの混合溶媒中、ナトリウムメトキシド、ナトリウムエトキシド、ナトリウム－ｔ－ブトキシド、カリウムメトキシド、カリウムエトキシド、および、カリウム－ｔ－ブトキシド等のアルカリ金属アルコキシドのようなアルカリを用いて保護された化合物を処理することにより、保護基を除去する。保護基がアラルキル基の場合には、パラジウム触媒を使った水素添加により除去することができる。糖残基Ｒの水酸基を脱保護すると、細胞内への本クロリン誘導体等の移行がより促進され、細胞毒性により優れる。
〔用途〕
　本クロリン誘導体等は、暗所下では細胞毒性を示さないが、光線照射下で強い細胞毒性を示すことを利用して、標的となる生物材料と、暗所下でインビトロまたはインビボで接触させて細胞内に取り込ませた後、本クロリン誘導体等の吸収波長の光を照射することにより、標的を破壊する用途に用いることができる。
　ここで、標的としては、ウイルス、微生物およびこれらの感染細胞、腫瘍細胞、腫瘍状組織、ならびに新生血管からなる群より選択される標的が挙げられ、特に腫瘍細胞に親和性を有し、腫瘍細胞により集積されやすいことから、腫瘍の破壊に用いることができる。
　従って、本クロリン誘導体等は、悪性腫瘍（ｍａｌｉｇｎａｎｔ　ｔｕｍｏｒ）に分類される癌（ｃａｎｃｅｒ）の治療薬として利用できる。悪性腫瘍としては、上皮性悪性腫瘍、および、肉腫（ｓａｒｃｏｍａ）に分類されるような非上皮組織を発生母地とするような悪性腫瘍等が挙げられる。本クロリン誘導体等は、腫瘍細胞のうち、特に腫瘍細胞が塊状、および、充実性に増殖する固形癌（ｓｏｌｉｄ　ｃａｒｃｉｎｏｍａ）、光が届く表層癌の治療にとくに有用である。
　具体的には、食道癌、肺癌、胃癌、子宮頸癌、子宮体癌等の子宮癌、皮膚癌、前立腺癌、および、腎臓癌等が挙げられる。皮膚癌には、原発性（扁平上皮癌、基底細胞癌、および、表皮付属機癌）の他、内臓癌の皮膚転移も含まれる。
　また、本クロリン誘導体等は、腫瘍細胞のうち、良性腫瘍に対しても親和性を有することから、局所投与により、日光角化症、重症ニキビ、および、皮膚乾癬症等の皮膚病の光線力学的治療用薬としての利用、ならびに、加齢黄斑変性等の眼疾患の光線力学的治療用薬としての利用も可能である。
　さらに、本発明のグリコシル化クロリンｅ６誘導体の腫瘍集積性を利用して、ＰＥＴ等との併用により、癌の診断に利用することも可能である。さらに本発明のグリコシル化クロリン誘導体は、その腫瘍集積性および良性腫瘍に対する親和性を利用して、腫瘍の検出に利用することも可能である。
〔標的を破壊する方法〕
　既に説明したとおり、本クロリン誘導体等は、上記の標的を破壊する方法に適用できる。本発明の実施形態に係る標的を破壊する方法は、標的に、本クロリン誘導体等を接触させた後に、標的に対して、本クロリン誘導体等に吸収される波長の光を照射する工程を含む。
　なお、上記方法は、ヒト個体、及び、ヒト個体以外で実施できる。すなわち、上記標的を破壊する方法は、ヒト個体での実施が可能であり、及び、ヒト個体での実施を除く形態での実施も可能である。
〔医薬組成物〕
　本発明の実施形態に係る医薬組成物は、腫瘍、皮膚疾患、眼疾患または加齢黄斑変性の光線力学治療用であり、上記グリコシル化クロリンｅ６誘導体を有効成分として含有する。なかでも腫瘍の光線力学治療用としてより優れた効果を有する。
　有効成分であるグリコシル化クロリンｅ６誘導体は、上述のように、優れた水溶性を有し、しかも細胞透過性に優れ、光毒性が高いので、腫瘍（特に固形癌）の光線力学的治療用薬として好適に使用できる。
　本医薬組成物は、カテーテル、静脈内または筋肉内注射により投与でき、またその他の非経口的な経路で投与できる。
　また、クリーム状の薬剤組成物としてもよく、これにより経皮的にも投与できる。その他、体内の深部の腫瘍組織へ直接に局所注入できる。
　また、本医薬組成物は、本クロリン誘導体等を含有していれば、必要に応じてその他の成分を含有していてもよい。その他の成分としては、例えば、賦形剤が挙げられる。
　賦形剤としては、例えば、固形物として、乳糖、カオリン、ショ糖、結晶セルロース、コーンスターチ、タルク、寒天、ペクチン、ステアリン酸、ステアリン酸マグネシウム、レシチン、および、塩化ナトリウム等が挙げられ、液状物として、グリセリン、落花生油、ポリビニルピロリドン、オリーブ油、エタノール、ベンジルアルコール、プロピレングリコール、および、水等が挙げられる。
　本医薬組成物は、賦形剤以外にも、必要に応じて、基剤、界面活性剤、保存剤、乳化剤、着色剤、矯臭剤、香料、安定化剤、防腐剤、酸化防止剤、潤沢剤、抗菌剤、溶解補助剤、懸濁化剤、結合剤、および、崩壊剤等を含有してもよい。
　本医薬組成物の剤型としては、特に制限されず、例えば、錠剤、散剤、顆粒剤、カプセル剤、トローチ剤、シロップ剤、乳液、軟ゼラチンカプセル、ゲル、ペースト、注射用製剤、クリーム、ジェル、ローション、および、貼付剤等が挙げられる。
　本医薬組成物に用いられる担体は、製剤の種類に応じて適宜選択される。注射用製剤として調製する場合、本クロリン誘導体等を含む無菌の水溶液もしくは分散液または本クロリン誘導体等を含む無菌の凍結乾燥剤の形に製剤化できる。液体担体としては、例えば、水、生理食塩水、エタノール、含水エタノール、グリセロール、プロピレングリコール、および、植物油等が好ましい。
　本医薬組成物には、本クロリン誘導体等とともに、ラクトース、スクロース、第２リン酸カルシウム、および、カルボキシメチルセルロース等の希釈剤；ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸カルシウム、および、タルクのような滑剤；デンプン、グルコース、糖蜜、ポリビニルピロリドン、セルロース、および、その誘導体等；の結合剤を含み得る。
　本実施形態における一製剤当たりの有効成分の含量は、治療すべき対象や用法によって適宜とすることができるが、例えば、グリコシル化クロリンｅ６誘導体の量として、１～２０００ｍｇとすることができ、５～１０００ｍｇが好ましく、１０～５００ｍｇがさらに好ましい。
　本クロリン誘導体等の投与量は、治療すべき対象や目的によって異なるが、一般に、本クロリン誘導体等の量として、腫瘍の診断または検出、腫瘍治療のためには０．１～３０ｍｇ／ｋｇ、好ましくは０．２～２０ｍｇ／ｋｇが目安となる。
　有効成分である本クロリン誘導体等は、その細胞毒性が高いことから、従来品（フォトフリンやレザフィリン）よりも投与量を少なくして、同等以上の効果を得ることを期待できる。このことは、代謝、および、排泄に要する時間が短くて済むことを意味し、光線力学的療法の活用利便性を高める。
　腫瘍の治療のためには、本クロリン誘導体等を投与した後、治療すべき部位に、該当化合物の吸収帯を含む光線を照射する。具体的には、５００ｎｍ以上の光線照射により一重項酸素を発生して、目的の細胞毒性を発揮することができるが、好ましくは最大吸収波長の光の割合が高い光線を照射することである。
　照射源としては、ＬＥＤ（Ｌｉｇｈｔ　Ｅｍｉｔｔｉｎｇ　Ｄｉｏｄｅ）、レーザー、および、ハロゲンランプ等が用いられる。レーザーとしては、色素レーザー、半導体レーザー、および、アルゴンレーザー等、励起に必要な波長の光線が得られるものであればよい。
　以下に本発明を、実施例および比較例に基づき詳細に説明する。ただし、本発明はこれらによってなんら制限されるものではない。実施例および比較例に基づいて製造した化合物は以下の方法によって評価を実施した。
［光毒性の評価方法］
　光毒性評価にはＩＣ５０（Ｈａｌｆ　ｍａｘｉｍａｌ（５０％）ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｙ　ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ）を用いることとし、以下の手順で測定した。
　ヒト胃癌由来細胞であるＭＫＮ４５（ＪＣＲＢ細胞バンクより入手して６か月間継代培養したもの）およびＭＫＮ２８（株式会社免疫生物研究所より入手して６か月間継代培養したもの）を、それぞれ９６穴プレートの所定数量のｗｅｌｌに５×１０３個／ｗｅｌｌ播種し（ＦＢＳを１０％含むＲＰＭＩ１６４０培地、１００μＬ）、５％ＣＯ２存在下、３７℃で２４時間培養した。次にそれぞれのｗｅｌｌに、薬剤を異なる濃度で含む同培地溶液を１００μＬ加え、各ｗｅｌｌを所定の薬剤濃度に調整し、４時間培養した後、１００μＬのリン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ：Ｐｈｏｓｐｈａｔｅ-Ｂｕｆｆｅｒｅｄ　Ｓａｌｉｎｅ）で１回洗浄し、再度１００μＬのＰＢＳを加えた。その後、６６０ｎｍのＬＥＤ光源（３０．８ｍＷ／ｃｍ２、LEDR-660DL, OptoCode）を用いて８分４０秒、光線照射した（１６Ｊ／ｃｍ２）。照射後、ＰＢＳを取り除き、２％ＦＢＳを含むＲＰＭＩ１６４０培地を１００μＬ加え、２４時間培養した。
　培養後、Ｃｅｌｌ　Ｃｏｕｎｔｉｎｇ　ｋｉｔ－８（Ｄｏｊｉｎｄｏ　Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ：生細胞数測定キット）のプロトコルに従って操作を行い、マイクロプレートリーダー（ＳＰＥＣＴＲＡ　ＭＡＸ３４０，Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ　Ｄｅｖｉｃｅｓ社製）で４５０ｎｍの吸光度を測定することで、薬剤を添加していない場合に対する相対値としての細胞生存率を算出した。なお測定はｎ＝８で行い、８回で得た値の最大値と最小値を除き、平均値をＩＣ５０の値とし、ＩＣ５０が０．０１μｍｏｌ／Ｌ未満のものはＡ、０．０１μｍｏｌ／Ｌ以上０．１μｍｏｌ／Ｌ未満のものはＢ、０．１μｍｏｌ／Ｌ以上１μｍｏｌ／Ｌ未満のものはＣ、１μｍｏｌ／Ｌ以上１０μｍｏｌ／Ｌ未満のものはＤ、１０μｍｏｌ／Ｌ以上のものはＥと評価した。
［腫瘍成長抑制率の評価方法］
　ヌードマウス（各群各々４～６匹ずつ、雌４～５週齢、体重２０±２ｇ、ＢｉｏＬＡＳＣＯ社より入手）の右臀部に、５％ＣＯ２下、３７℃で１０％ウシ胎児血清（Ｇｉｂｃｏ　ＢＲＬ製）および１％抗生物質を添加した１ｍｍｏｌ／ｌピルビン酸ナトリウム含有ダルベッコ変法イーグル培地（Ｇｉｂｃｏ　ＢＲＬ製）にて増殖させたヒト大腸癌細胞株ＨＴ２９を２×１０７個皮下注射（０日目）し、腫瘍の大きさを２日ごとに測定した。腫瘍体積は、１／２（４π／３）（Ｌ／２）（Ｗ／２）Ｈで計算した（Ｌ：腫瘍の長さ、Ｗ：幅、Ｈ：高さ）。腫瘍体積が５０～１００ｍｍ３に達したところ（１０日目）で、ヌードマウスの側部尾静脈からそれぞれ生理食塩水（コントロール群）を０．１ｍｌ、生理食塩水または２０％ＰＥＧ水溶液に薬剤濃度１．２５ｍＭで溶解させた薬剤溶液０．１ｍｌを投与した。投与４時間後または２４時間後に、腫瘍に６６０ｎｍ（１５Ｊｃｍ－２）、直径２ｃｍのスポットのダイオードレーザー（１００ｍＷ／ｃｍ２、ＣｒｙｓｔａＬａｓｅｒ　ＣＬ６６０）を照射した。
　腫瘍の大きさを２日ごとに測定し、腫瘍成長抑制率（ＴＧＩ％）を２４日目の腫瘍体積から次式で計算を行い、ＴＧＩ％が６５％未満のものはＤ、６５％以上７０％未満のものはＣ、７０％以上７５％未満のものはＢ、７５％以上のものはＡと評価した。
　ＴＧＩ％＝（（コントロール群の腫瘍体積）－（処理群の腫瘍体積））／（コントロール群の腫瘍体積）×　１００％
［実施例１］
１－（３－ヒドロキシ－プロパンチオ）－β－Ｄ－グルコース連結クロリンｅ６トリメチ
ルエステルの製造と評価
（１－１）１－（３－ヒドロキシ－プロパンチオ）－β－Ｄ－グルコーステトラアセテートの合成
　窒素雰囲気下、１－チオ－β－Ｄ－グルコーステトラアセテート（２．７３ｇ、７．５０ｍｍｏｌ）をクロロホルム（５．０ｍｌ）に溶解し、トリエチルアミン（２．０８ｍｌ、１５．００ｍｍｏｌ）を加えた。得られた溶液を０℃に冷却し、３－ブロモ－１－プロパノール（０．８５ｍｌ、９．７５ｍｍｏｌ）をゆっくり滴下しながら撹拌した。滴下終了後、溶液の温度を２５℃に上げて３時間撹拌した。撹拌後の溶液に水（５０ｍｌ）、クロロホルム（３０ｍｌ）を入れて分液操作を行い、クロロホルム層を分取した。得られたクロロホルム層を飽和食塩水（５０ｍｌ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで脱水させた。
　次に、得られたクロロホルム溶液を吸引ろ過し、溶媒を減圧留去した。得られた粗生成物をシリカゲルカラム（ハイフラッシュカラム、山善株式会社製）に充填し、酢酸エチルとヘキサンの混合溶媒にて溶離した。溶離液を減圧濃縮することにより、１－（３－ヒドロキシ－プロパンチオ）－β－Ｄ－グルコーステトラアセテートを得た（収量２．６８ｇ、収率８５％）。
　得られた化合物は、Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．２０１３，７８，５１９６－５２０４に基づき、１Ｈ－ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，重クロロホルム溶媒）にて確認した。
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000013
（１－２）クロリンｅ６トリメチルエステルの合成
　窒素雰囲気下、クロリンｅ６（１１．９３ｇ、２０．００ｍｍｏｌ）を脱水ジクロロメタン（５００ｍｌ）と脱水メタノール（２５０ｍｌ）の混合溶媒に溶解した。得られた溶液にトリメチルシリルジアゾメタン（２．０ｍｏｌ／ｌヘキサン溶液、３４．０ｍｌ）を滴下し、２５℃で２時間撹拌した。得られた反応液から溶媒を減圧留去し、得られた残渣をジクロロメタン／ヘキサンから再結晶することにより、クロリンｅ６トリメチルエステルを得た（収量１１．６４ｇ、収率９１％）。
　得られた化合物は、Ｐｈｏｔｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ　ａｎｄ　Ｐｈｏｔｏｂｉｏｌｏｇｙ，２００７，８３，１００６－１０１５に基づき、１Ｈ－ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，重クロロホルム溶媒）にて確認した。
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000014
（１－３）１－（３－ヒドロキシ－プロパンチオ）－β－Ｄ－グルコーステトラアセテート連結クロリンｅ６トリメチルエステルの合成
　上記（１－２）で合成したクロリンｅ６トリメチルエステル（０．９５ｇ、１．４８ｍｍｏｌ）を窒素雰囲気下、２５％臭化水素－酢酸溶液（１８．０ｍｌ）に溶解し、３０℃で２時間撹拌した。得られた反応液から臭化水素－酢酸溶液を減圧留去し、反応液を乾固させた。得られた残渣を脱水ジクロロメタン（５０ｍｌ）に溶解し、炭酸カリウム（２．０５ｇ、１４．８０ｍｍｏｌ）を入れて、３０℃で３０分撹拌した。得られた溶液に、上記（１－１）で合成した１－（３－ヒドロキシ－プロパンチオ）－β－Ｄ－グルコーステトラアセテート（１．８８ｇ、４．４５ｍｍｏｌ）を脱水ジクロロメタン（５０ｍｌ）に溶解して滴下し、３０℃で５時間撹拌した。得られた反応液に水（１００ｍｌ）とジクロロメタン（２００ｍｌ）を加えて分液操作を行い、ジクロロメタン層を分取した。得られたジクロロメタン層を水（２００ｍｌ）および飽和食塩水（２００ｍｌ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで脱水させた。得られたジクロロメタン溶液を吸引ろ過し、溶媒を減圧留去した。得られた粗生成物をシリカゲルカラム（ハイフラッシュカラム，山善株式会社製）に充填し、酢酸エチルとジクロロメタンの混合溶媒にて溶離した。溶離液を減圧濃縮することにより、１－（３－ヒドロキシ－プロパンチオ）－β－Ｄ－グルコーステトラアセテート連結クロリンｅ６トリメチルエステルを得た（収量０．４２ｇ、収率２７％）。
　得られた化合物は１Ｈ－ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，重クロロホルム溶媒）にてクロリンｅ６トリメチルエステルの３位二重結合に由来するピークが消失し、１－（３－ヒドロキシ－プロパンチオ）－β－Ｄ－グルコーステトラアセテートが結合していることを確認した。またＥＳＩ＋ＭＳ（Ｅｌｅｃｔｒｏｓｐｒａｙ　Ｉｏｎｉｚａｔｉｏｎ　ｍａｓｓ　Ｓｐｅｃｔｒｏｍｅｔｒｙ）法による解析にて分子量が一致することを確認した。
ＭＳ：ｍ／ｚ（［Ｍ＋Ｈ］+）；ｃａｌｃｄ．１０６１．４５　ｆｏｒ　Ｃ５４Ｈ６８Ｎ４Ｏ１６Ｓ、ｆｏｕｎｄ．１０６１．４１。
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000015
（１－１′）３－ブロモ－１－プロパノール連結クロリンｅ６トリメチルエステルの合成
　上記（１－２）で合成したクロリンｅ６トリメチルエステル（０．９６ｇ、１．５０ｍｍｏｌ）を窒素雰囲気下、２５％臭化水素－酢酸溶液（１８．０ｍｌ）に溶解し、３０℃で２時間撹拌した。得られた反応液から臭化水素－酢酸溶液を減圧留去し、反応液を乾固させた。得られた残渣を脱水ジクロロメタン（５０ｍｌ）に溶解し、炭酸カリウム（２．０７ｇ、１５．００ｍｍｏｌ）を入れて、３０℃で３０分撹拌した。得られた溶液に、３－ブロモ－１－プロパノール（２．６０ｍｌ、３０．００ｍｍｏｌ）を滴下し、３０℃で５時間撹拌した。得られた反応液に水（１００ｍｌ）とジクロロメタン（２００ｍｌ）を加えて分液操作を行い、ジクロロメタン層を分取した。得られたジクロロメタン層を水（２００ｍｌ）、飽和食塩水（２００ｍｌ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで脱水させた。得られたジクロロメタン溶液を吸引ろ過し、溶媒を減圧留去した。得られた粗生成物をシリカゲルカラム（ハイフラッシュカラム，山善株式会社製）に充填し、酢酸エチルとジクロロメタンの混合溶媒にて溶離した。溶離液を減圧濃縮することにより、３－ブロモ－１－プロパノール連結クロリンｅ６トリメチルエステルを得た（収量０．９１ｇ、収率７８％）。
　得られた化合物は１Ｈ－ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，重クロロホルム溶媒）にてクロリンｅ６トリメチルエステルの３位二重結合に由来するピークが消失し、３－ブロモ－１－プロパノールが結合していることを確認した。またＥＳＩ＋ＭＳ法による解析にて分子量が一致することを確認した。
ＭＳ：ｍ／ｚ（［Ｍ＋Ｈ］+）；ｃａｌｃｄ．７７７．２９　ｆｏｒ　Ｃ４０Ｈ４９ＢｒＮ４Ｏ７、ｆｏｕｎｄ．７７７．２９。
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000016
　（１－２′）１－（３－ヒドロキシ－プロパンチオ）－β－Ｄ－グルコーステトラアセテート連結クロリンｅ６トリメチルエステルの合成
　窒素雰囲気下、１－チオ－β－Ｄ－グルコーステトラアセテート（１３１ｍｇ、０．３６ｍｍｏｌ）をクロロホルム（１．０ｍｌ）に溶解し、トリエチルアミン（９０μｌ、０．６５ｍｍｏｌ）を加えた。得られた溶液を０℃に冷却し、３－ブロモ－１－プロパノール連結クロリンｅ６トリメチルエステル（８６ｍｇ、０．１１ｍｍｏｌ）をゆっくり滴下しながら撹拌した。滴下終了後、溶液の温度を２０℃に上げて１４時間撹拌した。撹拌後の溶液に水（１０ｍｌ）、クロロホルム（１０ｍｌ）を入れて分液操作を行い、クロロホルム層を分取した。得られたクロロホルム層を飽和食塩水（１０ｍｌ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで脱水させた。得られたクロロホルム溶液を吸引ろ過し、溶媒を減圧留去した。得られた粗生成物をシリカゲルカラム（ハイフラッシュカラム，山善株式会社製）に充填し、酢酸エチルとジクロロメタンの混合溶媒にて溶離した。溶離液を減圧濃縮することにより、１－（３－ヒドロキシ－プロパンチオ）－β－Ｄ－グルコーステトラアセテート連結クロリンｅ６トリメチルエステル（収量５２ｍｇ、収率４５％）。
　得られた化合物は、１Ｈ－ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、重クロロホルム溶媒）にて１－チオ－β－Ｄ－グルコーステトラアセテートが結合していることを確認した。またＥＳＩ＋ＭＳ法による解析にて分子量が一致することを確認した。
ＭＳ：ｍ／ｚ（［Ｍ＋Ｈ］+）；ｃａｌｃｄ．１０６１．４５　ｆｏｒ　Ｃ５４Ｈ６８Ｎ４Ｏ１６Ｓ、ｆｏｕｎｄ．１０６１．４５。
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000017
　（１－４）１－（３－ヒドロキシ－プロパンチオ）－β－Ｄ－グルコース連結クロリンｅ６トリメチルエステルの合成
　上記（１－３）および（１－２′）で合成した１－（３－ヒドロキシ－プロパンチオ）－β－Ｄ－グルコーステトラアセテート連結クロリンｅ６（１０７ｍｇ、０．１０ｍｍｏｌ）を窒素雰囲気下、脱水メタノール（８．０ｍｌ）に溶解し、ナトリウムメトキシド（５４ｍｇ、１．００ｍｍｏｌ）を入れて２５℃で３０分撹拌した。得られた反応溶液に酢酸（５８μｌ、１．００ｍｍｏｌ）を加えて反応を停止させた。得られた溶液から溶媒を減圧留去し、残渣をＰＬＣガラスプレート（シリカゲル６０　Ｆ２５４、メルク株式会社製）に充填し、ジクロロメタンとメタノールの混合溶媒にて溶離した。溶離液を減圧濃縮後、逆相シリカゲルクロマト（Ｓｅｐ－Ｐａｋ　Ｃ１８、Ｗａｔｅｒｓ社製）に充填し、イオン交換水で塩を溶離させた後、メタノールにて溶離した。得られたメタノール溶液を減圧濃縮し、１－（３－ヒドロキシ－プロパンチオ）－β－Ｄ－グルコース連結クロリンｅ６トリメチルエステルを得た（収量６４ｍｇ、収率７２％）。
　得られた化合物は、１Ｈ－ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，重クロロホルム溶媒）にて１－（３－ヒドロキシ－プロパンチオ）－β－Ｄ－グルコーステトラアセテート連結クロリンｅ６トリメチルエステルのアセチル基由来のピークが消失していることを確認した。またＥＳＩ＋ＭＳ法による解析にて分子量が一致することを確認した。
ＭＳ：ｍ／ｚ（［Ｍ＋Ｈ］+）；ｃａｌｃｄ．８９３．４０　ｆｏｒ　Ｃ４６Ｈ６０Ｎ４Ｏ１２Ｓ、ｆｏｕｎｄ．８９３．４５。
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000018
　（１－５）１－（３－ヒドロキシ－プロパンチオ）－β－Ｄ－グルコース連結クロリンｅ６トリメチルエステルの評価
　上記製造方法に基づいて得られた１－（３－ヒドロキシ－プロパンチオ）－β－Ｄ－グルコース連結クロリンｅ６トリメチルエステルについて、光毒性の評価方法および腫瘍成長抑制率の評価方法に基づいて評価を実施した。結果を表１、表２および表３に示す。また腫瘍成長抑制率の評価期間内において、全てのヌードマウスが体重減少することなく生存していることを確認し、薬剤投与およびレーザー照射によるヌードマウスへの悪影響は見られなかった。
［実施例２］
１－（６－ヒドロキシ－ヘキサンチオ）－β－Ｄ－グルコース連結クロリンｅ６トリメチルエステルの製造と評価
　（２－１）１－（６－ヒドロキシ－ヘキサンチオ）－β－Ｄ－グルコーステトラアセテートの合成
　窒素雰囲気下、１－チオ－β－Ｄ－グルコーステトラアセテート（１．３７ｇ、３．７５ｍｍｏｌ）をクロロホルム（２．５ｍｌ）に溶解し、トリエチルアミン（１．０４ｍｌ、７．５０ｍｍｏｌ）を加えた。得られた溶液を０℃に冷却し、６－ブロモ－１－ヘキサノール（０．６６ｍｌ、４．８８ｍｍｏｌ）をゆっくり滴下しながら撹拌した。滴下終了後、溶液の温度を２５℃に上げて３時間撹拌した。撹拌後の溶液に水（２５ｍｌ）、クロロホルム（１５ｍｌ）を入れて分液操作を行い、クロロホルム層を分取した。得られたクロロホルム層を飽和食塩水（２５ｍｌ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで脱水させた。得られたクロロホルム溶液を吸引ろ過し、溶媒を減圧留去した。得られた粗生成物をシリカゲルカラム（ハイフラッシュカラム，山善株式会社製）に充填し、酢酸エチルとヘキサンの混合溶媒にて溶離した。溶離液を減圧濃縮することにより、１－（６－ヒドロキシ－ヘキサンチオ）－β－Ｄ－グルコーステトラアセテートを得た（収量１．３９ｇ、収率８０％）。
　構造同定は、Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．２０１３，７８，５１９６－５２０４に基づき、１Ｈ－ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，重クロロホルム溶媒）にて行った。
１Ｈ－ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，４００ＭＨｚ）δ５．２２（ｔ，Ｊ＝９．４Ｈｚ，１Ｈ，Ｈ－３），５．０８（ｔ，Ｊ＝１０．０Ｈｚ，１Ｈ，Ｈ－４），５．０４（ｔ，Ｊ＝１０．０Ｈｚ，１Ｈ，Ｈ－２）４．４８（ｄ，Ｊ＝１０．８Ｈｚ，１Ｈ，Ｈ－１），４．２５（ｄｄ，Ｊ＝１１．２Ｈｚ，Ｊ＝２．３Ｈｚ，１Ｈ，Ｈ－６），４．１４（ｄｄ，Ｊ＝１１．２Ｈｚ，Ｊ＝２．３Ｈｚ，１Ｈ，Ｈ－６），３．７０－３．７２（ｍ，１Ｈ，Ｈ－５），３．６３－３．６５（ｍ，２Ｈ，ＣＨ２ＯＨ），２．６４－２．７２（ｍ，２Ｈ，ＳＣＨ２），２．０６，２．０５，２．０３，２．０１（ｓ，１２Ｈ，４×ＯＣＯＣＨ３），１．５２－１．６５（ｍ，４Ｈ，－ＣＨ２－），１．３５－１．４２（ｍ，４Ｈ，－ＣＨ２－）
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000019
　（２－２）１－（６－ヒドロキシ－ヘキサンチオ）－β－Ｄ－グルコーステトラアセテート連結クロリンｅ６トリメチルエステルの合成
　実施例１で合成したクロリンｅ６トリメチルエステル（６６４ｍｇ、１．０４ｍｍｏｌ）を窒素雰囲気下、２５％臭化水素－酢酸溶液（１２．０ｍｌ）に溶解し、３０℃で２時間撹拌した。得られた反応液から臭化水素－酢酸溶液を減圧留去し、反応液を乾固させた。得られた残渣を脱水ジクロロメタン（３５ｍｌ）に溶解し、炭酸カリウム（１４３７ｍｇ、１０．４０ｍｍｏｌ）を入れて、３０℃で３０分撹拌した。得られた溶液に、上記（１－１）で合成した１－（６－ヒドロキシ－ヘキサンチオ）－β－Ｄ－グルコーステトラアセテート（１４５０ｍｇ、３．１２ｍｍｏｌ）を脱水ジクロロメタン（３５ｍｌ）に溶解して滴下し、３０℃で５時間撹拌した。得られた反応液に水（７０ｍｌ）とジクロロメタン（１４０ｍｌ）を加えて分液操作を行い、ジクロロメタン層を分取した。得られたジクロロメタン層を水（１４０ｍｌ）、飽和食塩水（１４０ｍｌ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで脱水させた。得られたジクロロメタン溶液を吸引ろ過し、溶媒を減圧留去した。得られた粗生成物をシリカゲルカラム（ハイフラッシュカラム，山善株式会社製）に充填し、酢酸エチルとジクロロメタンの混合溶媒にて溶離した。溶離液を減圧濃縮することにより、１－（６－ヒドロキシ－ヘキサンチオ）－β－Ｄ－グルコーステトラアセテート連結クロリンｅ６トリメチルエステルを得た（収量１４５ｍｇ、収率１３％）。
　得られた化合物は１Ｈ－ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，重クロロホルム溶媒）にてクロリンｅ６トリメチルエステルの３位二重結合に由来するピークが消失し、１－（６－ヒドロキシ－ヘキサンチオ）－β－Ｄ－グルコーステトラアセテートが結合していることを確認した。またＥＳＩ＋ＭＳ法による解析にて分子量が一致することを確認した。
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000020
　（２－３）１－（６－ヒドロキシ－ヘキサンチオ）－β－Ｄ－グルコース連結クロリンｅ６トリメチルエステルの合成
　上記（２－２）で合成した１－（６－ヒドロキシ－ヘキサンチオ）－β－Ｄ－グルコーステトラアセテート連結クロリンｅ６トリメチルエステル（１３４ｍｇ、０．１２ｍｍｏｌ）を窒素雰囲気下、脱水メタノール（１０．０ｍｌ）に溶解し、ナトリウムメトキシド（６５ｍｇ、１．２１ｍｍｏｌ）を入れて２５℃で３０分撹拌した。得られた溶液に酢酸（６９μｌ、１．２１ｍｍｏｌ）を加えて反応を停止させた。得られた溶液から溶媒を減圧留去し、残渣をＰＬＣガラスプレート（シリカゲル６０　Ｆ２５４、メルク株式会社製）に充填し、ジクロロメタンとメタノールの混合溶媒にて溶離した。溶離液を減圧濃縮後、逆相シリカゲルクロマト（Ｓｅｐ－Ｐａｋ　Ｃ１８、Ｗａｔｅｒｓ社製）に充填し、イオン交換水で塩を溶離させた後、メタノールにて溶離した。得られたメタノール溶液を減圧濃縮し、１－（６－ヒドロキシ－ヘキサンチオ）－β－Ｄ－グルコース連結クロリンｅ６トリメチルエステルを得た（収量７５ｍｇ、収率６７％）。
　得られた化合物は１Ｈ－ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、重クロロホルム溶媒）にて１－（６－ヒドロキシ－ヘキサンチオ）－β－Ｄ－グルコーステトラアセテート連結クロリンｅ６トリメチルエステルのアセチル基由来のピークが消失していることを確認した。またＥＳＩ＋ＭＳ法による解析にて分子量が一致することを確認した。
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000021
　（２－４）１－（６－ヒドロキシ－ヘキサンチオ）－β－Ｄ－グルコース連結クロリンｅ６トリメチルエステルの評価
　上記製造方法に基づいて得られた１－（６－ヒドロキシ－ヘキサンチオ）－β－Ｄ－グルコース連結クロリンｅ６トリメチルエステルについて、光毒性の評価方法および腫瘍成長抑制率の評価方法に基づいて評価を実施した。結果を表１、表２および表３に示す。また腫瘍成長抑制率の評価期間内において、全てのヌードマウスが体重減少することなく生存していることを確認し、薬剤投与およびレーザー照射によるヌードマウスへの悪影響は見られなかった。
［実施例３］
１－（１０－ヒドロキシ－デカンチオ）－β－Ｄ－グルコース連結クロリンｅ６トリメチルエステルの製造と評価
　（３－１）１－（１０－ヒドロキシ－デカンチオ）－β－Ｄ－グルコーステトラアセテートの合成
　窒素雰囲気下、１－チオ－β－Ｄ－グルコーステトラアセテート（１．３７ｇ、３．７５ｍｍｏｌ）をクロロホルム（２．５ｍｌ）に溶解し、トリエチルアミン（１．０４ｍｌ、７．５０ｍｍｏｌ）を加えた。得られた溶液を０℃に冷却し、１０－ブロモ－１－デカノール（１．００ｍｌ、４．８８ｍｍｏｌ）をゆっくり滴下しながら撹拌した。滴下終了後、溶液の温度を２５℃に上げて３時間撹拌した。撹拌後の溶液に水（２５ｍｌ）、クロロホルム（１５ｍｌ）を入れて分液操作を行い、クロロホルム層を分取した。得られたクロロホルム層を飽和食塩水（２５ｍｌ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで脱水させた。得られたクロロホルム溶液を吸引ろ過し、溶媒を減圧留去した。得られた粗生成物をシリカゲルカラム（ハイフラッシュカラム，山善株式会社製）に充填し、酢酸エチルとヘキサンの混合溶媒にて溶離した。溶離液を減圧濃縮することにより、１－（１０－ヒドロキシ－デカンチオ）－β－Ｄ－グルコーステトラアセテートを得た（収量１．６０ｇ、収率８２％）。
　構造同定は、Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．２０１３，７８，５１９６－５２０４に基づき、１Ｈ－ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、重クロロホルム溶媒）にて行った。
１Ｈ－ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，４００ＭＨｚ）δ５．２２（ｔ，Ｊ＝９．４Ｈｚ，１Ｈ，Ｈ－３），５．０７（ｔ，Ｊ＝１０．０Ｈｚ，１Ｈ，Ｈ－４），５．０３（ｔ，Ｊ＝１０．０Ｈｚ，１Ｈ，Ｈ－２）４．４９（ｄ，Ｊ＝１０．８Ｈｚ，１Ｈ，Ｈ－１），４．２５（ｄｄ，Ｊ＝１１．２Ｈｚ，Ｊ＝２．３Ｈｚ，１Ｈ，Ｈ－６），４．１３（ｄｄ，Ｊ＝１１．２Ｈｚ，Ｊ＝２．３Ｈｚ，１Ｈ，Ｈ－６），３．６９－３．７２（ｍ，１Ｈ，Ｈ－５），３．６１－３．６４（ｍ，２Ｈ，ＣＨ２ＯＨ），２．６０－２．７２（ｍ，２Ｈ，ＳＣＨ２），２．０７，２．０５，２．０２，２．０１（ｓ，１２Ｈ，４×ＯＣＯＣＨ３），１．５２－１．６５（ｍ，４Ｈ，－ＣＨ２－），１．２５－１．４２（ｍ，１２Ｈ，－ＣＨ２－）
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000022
　（３－２）１－（１０－ヒドロキシ－デカンチオ）－β－Ｄ－グルコーステトラアセテート連結クロリンｅ６トリメチルエステルの合成
　実施例１で合成したクロリンｅ６トリメチルエステル（７１５ｍｇ、１．１２ｍｍｏｌ）を窒素雰囲気下、２５％臭化水素－酢酸溶液（１３．０ｍｌ）に溶解し、３０℃で２時間撹拌した。得られた反応液から臭化水素－酢酸溶液を減圧留去し、反応液を乾固させた。得られた残渣を脱水ジクロロメタン（４０ｍｌ）に溶解し、炭酸カリウム（１５４９ｍｇ、１１．２０ｍｍｏｌ）を入れて、３０℃で３０分撹拌した。得られた溶液に、上記（３－１）で合成した１－（１０－ヒドロキシ－デカンチオ）－β－Ｄ－グルコーステトラアセテート（１７５０ｍｇ、３．３６ｍｍｏｌ）を脱水ジクロロメタン（４０ｍｌ）に溶解して滴下し、３０℃で５時間撹拌した。得られた反応液に水（８０ｍｌ）とジクロロメタン（１６０ｍｌ）を加えて分液操作を行い、ジクロロメタン層を分取した。得られたジクロロメタン層を水（１６０ｍｌ）、飽和食塩水（１６０ｍｌ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで脱水させた。得られたジクロロメタン溶液を吸引ろ過し、溶媒を減圧留去した。得られた粗生成物をシリカゲルカラム（ハイフラッシュカラム，山善株式会社製）に充填し、酢酸エチルとジクロロメタンの混合溶媒にて溶離した。溶離液を減圧濃縮することにより、１－（１０－ヒドロキシ－デカンチオ）－β－Ｄ－グルコーステトラアセテート連結クロリンｅ６トリメチルエステルを得た（収量２８５ｍｇ、収率２２％）。
　得られた化合物は１Ｈ－ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，重クロロホルム溶媒）にてクロリンｅ６トリメチルエステルの３位二重結合に由来するピークが消失し、１－（１０－ヒドロキシ－デカンチオ）－β－Ｄ－グルコーステトラアセテートが結合していることを確認した。またＥＳＩ＋ＭＳ法による解析にて分子量が一致することを確認した。
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000023
（３－３）１－（１０－ヒドロキシ－デカンチオ）－β－Ｄ－グルコース連結クロリンｅ６トリメチルエステルの合成
　上記（３－２）で合成した１－（１０－ヒドロキシ－デカンチオ）－β－Ｄ－グルコーステトラアセテート連結クロリンｅ６トリメチルエステル（２６８ｍｇ、０．２３ｍｍｏｌ）を窒素雰囲気下、脱水メタノール（２０．０ｍｌ）に溶解し、ナトリウムメトキシド（１２５ｍｇ、２．３１ｍｍｏｌ）を入れて２０℃で１時間撹拌した。得られた溶液に酢酸（１３２μｌ、２．３１ｍｍｏｌ）を加えて反応を停止させた。得られた溶液から溶媒を減圧留去し、残渣をＰＬＣガラスプレート（シリカゲル６０　Ｆ２５４、メルク株式会社製）に充填し、ジクロロメタンとメタノールの混合溶媒にて溶離した。溶離液を減圧濃縮後、逆相シリカゲルクロマト（Ｓｅｐ－Ｐａｋ　Ｃ１８、Ｗａｔｅｒｓ社製）に充填し、イオン交換水で塩を溶離させた後、メタノールにて溶離した。得られたメタノール溶液を減圧濃縮し、１－（１０－ヒドロキシ－デカンチオ）－β－Ｄ－グルコース連結クロリンｅ６トリメチルエステルを得た（収量１４９ｍｇ、収率６５％）。
　得られた化合物は１Ｈ－ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，重クロロホルム溶媒）にて１－（１０－ヒドロキシ－デカンチオ）－β－Ｄ－グルコーステトラアセテート連結クロリンｅ６トリメチルエステルのアセチル基由来のピークが消失していることを確認した。またＥＳＩ＋ＭＳ法による解析にて分子量が一致することを確認した。
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000024
（３－４）１－（１０－ヒドロキシ－デカンチオ）－β－Ｄ－グルコース連結クロリンｅ６トリメチルエステルの評価
　上記製造方法に基づいて得られた１－（１０－ヒドロキシ－デカンチオ）－β－Ｄ－グルコース連結クロリンｅ６トリメチルエステルについて、光毒性の評価方法および腫瘍成長抑制率の評価方法に基づいて評価を実施した。結果を表１、表２および表３に示す。また腫瘍成長抑制率の評価期間内において、全てのヌードマウスが体重減少することなく生存していることを確認し、薬剤投与およびレーザー照射によるヌードマウスへの悪影響は見られなかった。
［実施例４］
１－（３－ヒドロキシ－プロパンチオ）－β－Ｄ－ガラクト―ス連結クロリンｅ６トリメチルエステルの製造と評価
　（４－１）１－チオ－β－Ｄ－ガラクトーステトラアセテートの合成
　２，３，４，６－テトラ－Ｏ－アセチル－Ｄ－ガラクトピラノース（３４８ｍｇ、１．０ｍｍｏｌ）をジクロロメタン（５．０ｍｌ）に溶解し、テトラブロモメタン（６６３ｍｇ、２．０ｍｍｏｌ）とトリフェニルホスフィン（５２５ｍｇ、２．０ｍｍｏｌ）を入れて２５℃で４時間撹拌した。得られた反応溶液に対し、ジメチルホルムアミド（２．０ｍｌ）に溶解させた二硫化炭素（１１４ｍｇ、１．５ｍｍｏｌ）と硫化ナトリウム９水和物（４８０ｍｇ、２．０ｍｍｏｌ）の混合溶液を加え、２５℃で５分撹拌した。得られた反応溶液に水（３０ｍｌ）、ジクロロメタン（５０ｍｌ）を入れて分液操作を行い、ジクロロメタン層を分取した。得られたジクロロメタン層を水（３０ｍｌ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで脱水させた。得られたジクロロメタン層を吸引ろ過し、溶媒を減圧留去した。得られた粗生成物を得られた粗生成物をシリカゲルカラム（ハイフラッシュカラム、山善株式会社製）に充填し、酢酸エチルとヘキサンの混合溶媒にて溶離した。溶離液を減圧濃縮することにより、１－チオ－β－Ｄ－ガラクトーステトラアセテートを得た（収量２９１ｍｇ、収率８０％）。
　構造同定はＢｅｉｌｓｔｅｉｎ　Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．２０１３，９，９７４－９８２に基づき、１Ｈ－ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，重クロロホルム溶媒）にて行った。
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000025
　（４－２）１－（３－ヒドロキシ－プロパンチオ）－β－Ｄ－ガラクト―ス連結クロリンｅ６トリメチルエステルの合成と評価
　１－チオ－β－Ｄ－グルコーステトラアセテートの代わりに（４－１）で合成した１－チオ－β－Ｄ－ガラクトーステトラアセテートを用いて、実施例１と同様の製造方法を実施し、１－（３－ヒドロキシ－プロパンチオ）－β－Ｄ－ガラクト―ス連結クロリンｅ６トリメチルエステルを得た。
　上記製造方法に基づいて得られた１－（３－ヒドロキシ－プロパンチオ）－β－Ｄ－ガラクト―ス連結クロリンｅ６トリメチルエステルについて、光毒性の評価方法および腫瘍成長抑制率の評価方法に基づいて評価を実施した。結果を表１、表２および表３に示す。また腫瘍成長抑制率の評価期間内において、全てのヌードマウスが体重減少することなく生存していることを確認し、薬剤投与およびレーザー照射によるヌードマウスへの悪影響は見られなかった。
［実施例５］
１－（６－ヒドロキシ－ヘキサンチオ）－β－Ｄ－ガラクト―ス連結クロリンｅ６トリメチルエステルの製造と評価
　１－チオ－β－Ｄ－グルコーステトラアセテートの代わりに（４－１）で合成した１－チオ－β－Ｄ－ガラクトーステトラアセテートを用いて、実施例２と同様の製造方法を実施し、１－（６－ヒドロキシ－ヘキサンチオ）－β－Ｄ－ガラクト―ス連結クロリンｅ６トリメチルエステルを得た。
　上記製造方法に基づいて得られた１－（６－ヒドロキシ－ヘキサンチオ）－β－Ｄ－ガラクト―ス連結クロリンｅ６トリメチルエステルについて、光毒性の評価方法および腫瘍成長抑制率の評価方法に基づいて評価を実施した。結果を表１、表２および表３に示す。また腫瘍成長抑制率の評価期間内において、全てのヌードマウスが体重減少することなく生存していることを確認し、薬剤投与およびレーザー照射によるヌードマウスへの悪影響は見られなかった。
［実施例６］
１－（１０－ヒドロキシ－デカンチオ）－β－Ｄ－ガラクト―ス連結クロリンｅ６トリメチルエステルの製造と評価
　１－チオ－β－Ｄ－グルコーステトラアセテートの代わりに（４－１）で合成した１－チオ－β－Ｄ－ガラクトーステトラアセテートを用いて、実施例３と同様の製造方法を実施し、１－（１０－ヒドロキシ－デカンチオ）－β－Ｄ－ガラクト―ス連結クロリンｅ６トリメチルエステルを得た。
　上記製造方法に基づいて得られた１－（１０－ヒドロキシ－デカンチオ）－β－Ｄ－ガラクト―ス連結クロリンｅ６トリメチルエステルについて、光毒性の評価方法および腫瘍成長抑制率の評価方法に基づいて評価を実施した。結果を表１、表２および表３に示す。また腫瘍成長抑制率の評価期間内において、全てのヌードマウスが体重減少することなく生存していることを確認し、薬剤投与およびレーザー照射によるヌードマウスへの悪影響は見られなかった。
［実施例７］
１－（３－ヒドロキシ－プロパンチオ）－β－Ｄ－マンノ―ス連結クロリンｅ６トリメチルエステルの製造と評価
（７－１）１－チオ－β－Ｄ－マンノーステトラアセテートの合成
　２，３，４，６－テトラ－Ｏ－アセチル－Ｄ－マンノピラノース（３４８ｍｇ、１．０ｍｍｏｌ）をジクロロメタン（５．０ｍｌ）に溶解し、テトラブロモメタン（６６３ｍｇ、２．０ｍｍｏｌ）とトリフェニルホスフィン（５２５ｍｇ、２．０ｍｍｏｌ）を入れて２５℃で４時間撹拌した。得られた反応溶液に対し、ジメチルホルムアミド（２．０ｍｌ）に溶解させた二硫化炭素（１１４ｍｇ、１．５ｍｍｏｌ）と硫化ナトリウム９水和物（４８０ｍｇ、２．０ｍｍｏｌ）の混合溶液を加え、２５℃で５分撹拌した。得られた反応溶液に水（３０ｍｌ）、ジクロロメタン（５０ｍｌ）を入れて分液操作を行い、ジクロロメタン層を分取した。得られたジクロロメタン層を水（３０ｍｌ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで脱水させた。得られたジクロロメタン層を吸引ろ過し、溶媒を減圧留去した。得られた粗生成物を得られた粗生成物をシリカゲルカラム（ハイフラッシュカラム、山善株式会社製）に充填し、酢酸エチルとヘキサンの混合溶媒にて溶離した。溶離液を減圧濃縮することにより、１－チオ－β－Ｄ－マンノーステトラアセテートを得た（収量２５５ｍｇ、収率７０％）。
　構造同定はＢｅｉｌｓｔｅｉｎ　Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．２０１３，９，９７４－９８２に基づき、１Ｈ－ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、重クロロホルム溶媒）にて行った。
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000026
（７－２）１－（３－ヒドロキシ－プロパンチオ）－β－Ｄ－マンノ―ス連結クロリンｅ６トリメチルエステルの合成と評価
　１－チオ－β－Ｄ－グルコーステトラアセテートの代わりに（７－１）で合成した１－チオ－β－Ｄ－マンノ―ステトラアセテートを用いて、実施例１と同様の製造方法を実施し、１－（３－ヒドロキシ－プロパンチオ）－β－Ｄ－マンノ―ス連結クロリンｅ６トリメチルエステルを得た。
　上記製造方法に基づいて得られた１－（３－ヒドロキシ－プロパンチオ）－β－Ｄ－マンノ―ス連結クロリンｅ６トリメチルエステルについて、光毒性の評価方法および腫瘍成長抑制率の評価方法に基づいて評価を実施した。結果を表１、表２および表３に示す。また腫瘍成長抑制率の評価期間内において、全てのヌードマウスが体重減少することなく生存していることを確認し、薬剤投与およびレーザー照射によるヌードマウスへの悪影響は見られなかった。
［実施例８］
１－（６－ヒドロキシ－ヘキサンチオ）－β－Ｄ－マンノース連結クロリンｅ６トリメチルエステルの製造と評価
　１－チオ－β－Ｄ－グルコーステトラアセテートの代わりに（４－１）で合成した１－チオ－β－Ｄ－マンノ―ステトラアセテートを用いて、実施例２と同様の製造方法を実施し、１－（６－ヒドロキシ－ヘキサンチオ）－β－Ｄ－マンノ―ス連結クロリンｅ６トリメチルエステルを得た。
　上記製造方法に基づいて得られた１－（６－ヒドロキシ－ヘキサンチオ）－β－Ｄ－マンノ―ス連結クロリンｅ６トリメチルエステルについて、光毒性の評価方法および腫瘍成長抑制率の評価方法に基づいて評価を実施した。結果を表１、表２および表３に示す。また腫瘍成長抑制率の評価期間内において、全てのヌードマウスが体重減少することなく生存していることを確認し、薬剤投与およびレーザー照射によるヌードマウスへの悪影響は見られなかった。
［実施例９］
１－（１０－ヒドロキシ－デカンチオ）－β－Ｄ－マンノース連結クロリンｅ６トリメチルエステルの製造と評価
　１－チオ－β－Ｄ－グルコーステトラアセテートの代わりに（４－１）で合成した１－チオ－β－Ｄ－マンノ―ステトラアセテートを用いて、実施例３と同様の製造方法を実施し、１－（１０－ヒドロキシ－デカンチオ）－β－Ｄ－マンノ―ス連結クロリンｅ６トリメチルエステルを得た。
　上記製造方法に基づいて得られた１－（１０－ヒドロキシ－デカンチオ）－β－Ｄ－マンノ―ス連結クロリンｅ６トリメチルエステルについて、光毒性の評価方法および腫瘍成長抑制率の評価方法に基づいて評価を実施した。結果を表１、表２および表３に示す。また腫瘍成長抑制率の評価期間内において、全てのヌードマウスが体重減少することなく生存していることを確認し、薬剤投与およびレーザー照射によるヌードマウスへの悪影響は見られなかった。
［比較例１］
タラポルフィンナトリウムの評価
　市販品のタラポルフィンナトリウム（モノ－Ｌ－アスパルチルクロリンｅ６、Ｍｅｄｋｏｏ　Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ社製）を用いて、前記光毒性の評価方法および腫瘍成長抑制率の評価方法に基づいて評価を実施した。結果を表１、表２および表３に示す。また腫瘍成長抑制率の評価期間内において、全てのヌードマウスが体重減少することなく生存していることを確認し、薬剤投与およびレーザー照射によるヌードマウスへの悪影響は見られなかった。
［光毒性の評価結果］
　光毒性の評価結果を以下の表１および表２に示した。なお、表中、「ＩＣ５０」とあるのは、「ＩＣ５０」を表す。
Figure JPOXMLDOC01-appb-T000027
Figure JPOXMLDOC01-appb-T000028
［腫瘍成長抑制率の評価結果］
Figure JPOXMLDOC01-appb-T000029
　表１および表２より、１－（３－ヒドロキシ－プロパンチオ）－β－Ｄ－グルコース連結クロリンｅ６トリメチルエステル（実施例１）、１－（６－ヒドロキシ－ヘキサンチオ）－β－Ｄ－グルコース連結クロリンｅ６トリメチルエステル（実施例２）、１－（１０－ヒドロキシ－デカンチオ）－β－Ｄ－グルコース連結クロリンｅ６トリメチルエステル（実施例３）、１－（３－ヒドロキシ－プロパンチオ）－β－Ｄ－ガラクトース連結クロリンｅ６トリメチルエステル（実施例４）、１－（６－ヒドロキシ－ヘキサンチオ）－β－Ｄ－ガラクトース連結クロリンｅ６トリメチルエステル（実施例５）、１－（１０－ヒドロキシ－デカンチオ）－β－Ｄ－ガラクトース連結クロリンｅ６トリメチルエステル（実施例６）、１－（３－ヒドロキシ－プロパンチオ）－β－Ｄ－マンノース連結クロリンｅ６トリメチルエステル（実施例７）、１－（６－ヒドロキシ－ヘキサンチオ）－β－Ｄ－マンノース連結クロリンｅ６トリメチルエステル（実施例８）および１－（１０－ヒドロキシ－デカンチオ）－β－Ｄ－マンノース連結クロリンｅ６トリメチルエステル（実施例９）のＩＣ５０は、いずれもタラポルフィンナトリウム（比較例１）のＩＣ５０よりも小さいことが分かった。
　表３より、１－（３－ヒドロキシ－プロパンチオ）－β－Ｄ－グルコース連結クロリンｅ６トリメチルエステル（実施例１）、１－（６－ヒドロキシ－ヘキサンチオ）－β－Ｄ－グルコース連結クロリンｅ６トリメチルエステル（実施例２）、１－（１０－ヒドロキシ－デカンチオ）－β－Ｄ－グルコース連結クロリンｅ６トリメチルエステル（実施例３）、１－（３－ヒドロキシ－プロパンチオ）－β－Ｄ－ガラクトース連結クロリンｅ６トリメチルエステル（実施例４）、１－（６－ヒドロキシ－ヘキサンチオ）－β－Ｄ－ガラクトース連結クロリンｅ６トリメチルエステル（実施例５）、１－（１０－ヒドロキシ－デカンチオ）－β－Ｄ－ガラクトース連結クロリンｅ６トリメチルエステル（実施例６）、１－（３－ヒドロキシ－プロパンチオ）－β－Ｄ－マンノース連結クロリンｅ６トリメチルエステル（実施例７）、１－（６－ヒドロキシ－ヘキサンチオ）－β－Ｄ－マンノース連結クロリンｅ６トリメチルエステル（実施例８）および１－（１０－ヒドロキシ－デカンチオ）－β－Ｄ－マンノース連結クロリンｅ６トリメチルエステル（実施例９）の腫瘍成長抑制率は、いずれもタラポルフィンナトリウム（比較例１）の腫瘍成長抑制率よりも大きいことが分かった。
　以上の実施例と比較例より、１－（３－ヒドロキシ－プロパンチオ）－β－Ｄ－グルコース連結クロリンｅ６トリメチルエステル、１－（６－ヒドロキシ－ヘキサンチオ）－β－Ｄ－グルコース連結クロリンｅ６トリメチルエステル、１－（１０－ヒドロキシ－デカンチオ）－β－Ｄ－グルコース連結クロリンｅ６トリメチルエステル、１－（３－ヒドロキシ－プロパンチオ）－β－Ｄ－ガラクトース連結クロリンｅ６トリメチルエステル、１－（６－ヒドロキシ－ヘキサンチオ）－β－Ｄ－ガラクトース連結クロリンｅ６トリメチルエステル、１－（１０－ヒドロキシ－デカンチオ）－β－Ｄ－ガラクトース連結クロリンｅ６トリメチルエステル、１－（３－ヒドロキシ－プロパンチオ）－β－Ｄ－マンノース連結クロリンｅ６トリメチルエステル、１－（６－ヒドロキシ－ヘキサンチオ）－β－Ｄ－マンノース連結クロリンｅ６トリメチルエステルおよび１－（１０－ヒドロキシ－デカンチオ）－β－Ｄ－マンノース連結クロリンｅ６トリメチルエステルは、タラポルフィンナトリウムに比較して優れた光毒性と優れた腫瘍成長抑制効果を有する。
［使用細胞株を変更した光毒性の評価］
　食道癌細胞株：ＫＹＳＥ３０（Ｎｏ．１１Ｄ０２８；　ＥＣＡＣＣ）、ＯＥ２１（Ｎｏ．１１Ｄ０２８；ＥＣＡＣＣ）、胃癌細胞株：ＭＫＮ４５（Ｎｏ．０２５４；Ｊａｐａｎｅｓｅ　Ｃａｎｃｅｒ　Ｒｅｓｅａｒｃｈ　Ｂａｎｋ）、および、大腸癌細胞株：ＨＴ２９（Ｎｏ．ＨＴＢ－３８；ＡＴＣＣ）を使用し、以下の条件で培養した。
　ＫＹＳＥ３０：ＲＰＭＩ　１６４０
　ＯＥ２１：ＲＰＭＩ　１６４０とＨａｍ′ｓ　Ｆ１２の半量ずつの混合液
　ＭＫＮ４５：　ＲＰＭＩ　１６４０
　ＨＴ２９：　ＭｃＣｏｙ’ｓ　５Ａ
　全ての培養液は１０％牛胎児血清、１００Ｕ／ｍｌのペニシリンとストレプトマイシン、０．２５ｍｇ／ｍｌのアンホテリシンＢを含有し、５％ＣＯ２濃度、３７℃の条件下で培養した。
　上記細胞を使用し、既に説明した「光毒性の評価方法」と同様の方法で、実施例１の１－（３－ヒドロキシ－プロパンチオ）－β－Ｄ－グルコース連結クロリンｅ６トリメチルエステル（表３中「実施例１」と記載した。）、および、ＴＳ（比較例）について、ＩＣ５０（５０％癌細胞殺細胞濃度）を求め、「光毒性の評価方法」と同様の基準で評価した。結果を表４に示した。
Figure JPOXMLDOC01-appb-T000030
　表４に示した結果から、実施例１の化合物は、優れた光毒性を有しており、本発明の効果を有していることがわかった。
　一方、比較例のＴＳは、癌細胞株の種類によらず、本発明の効果を有していなかった。
［癌細胞株への取り込み性能の評価］
　細胞株として、ヒト胃癌細胞株：ＭＫＮ４５（Ｎｏ．０２５４；Ｊａｐａｎｅｓｅ　Ｃａｎｃｅｒ　Ｒｅｓｅａｒｃｈ　Ｂａｎｋ）、および、大腸癌細胞株：ＨＴ２９（Ｎｏ．ＨＴＢ－３８；ＡＴＣＣ）を使用した。
　細胞培養の条件、および、使用機器は以下のとおりである。
培養条件：
　培養液としてＭＫＮ４５についてはＲＰＭＩ　１６４０を使用し、ＨＴ２９についてはＭｃＣｏｙ’ｓ　５Ａを使用した。全ての培養液は１０％牛胎児血清、１００Ｕ／ｍｌのペニシリンとストレプトマイシン、０．２５ｍｇ／ｍｌのアンホテリシンＢを含有し、５％ＣＯ２濃度、３７℃の条件下で培養した。
使用実験機器：
Ｆｌｏｗ　ｃｙｔｏｍｅｔｒｙには、ＦＡＣＳＣａｎｔｏＩＩ（ＢＤ　Ｂｉｏｓｉｃｅｎｃｅｓ）を使用した。
（試験方法）
　６ｃｍ培養プレートを用いて、２×１０５ｃｅｌｌ／ｗｅｌｌの上記癌細胞株を、それぞれ上記条件で２８時間培養した。
　次に、培養液を除去し、（１）培養液のみ（コントロール）、（２）５μＭの実施例１のグリコシル化クロリンｅ６誘導体を含有した培養液、（３）５μＭのＴａｌａｐｏｒｆｉｎ　Ｓｏｄｉｕｍ　（ＴＳ；　レザフィリン（登録商標）、Ｍｅｉｊｉ　Ｓｅｉｋａファルマ）を含有した培養液に置換しさらに４時間培養した。
　４時間の培養後、培養液を除去しｐｈｏｓｐｈａｔｅ－ｂｕｆｆｅｒｅｄ　ｓａｌｉｎｅ（ＰＢＳ）で３回洗浄し、ＴｒｙｐＬＥ－Ｅｘｐｒｅｓｓ（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）を使用して培養プレートより細胞を回収した。
　次に、上記ＦＡＣＳＣａｎｔｏＩＩを用いて、４０５ｎｍで励起して、６８０ｎｍの蛍光発光を測定した。各サンプルで少なくとも１０，０００イベントは測定を行った。測定は、ＴＳ、および、実施例１の化合物の蛍光波長帯である６５０ｎｍ近傍を評価するＭｅａｎ　Ａｍｃｙａｎ　ａｒｅａ（ＭＡＡ）を測定し、結果を表５に示した。
Figure JPOXMLDOC01-appb-T000031
　表５に示したとおり、細胞株としてＭＫＮ４５を用いた場合、ＴＳ（比較例）のＭＡＡは２３５、実施例１の化合物のＭＡＡは１７０５１であり、実施例１の化合物のＭＡＡは、ＴＳのＭＡＡの約７０倍高い値だった。
　また、細胞株として、ＨＴ２９を用いた場合、ＴＳ（比較例）のＭＡＡは９７、実施例１の化合物のＭＡＡは１８６６９であり、実施例１の化合物のＭＡＡは、ＴＳの約１９０倍高い値だった。
　上記から、実施例１の化合物は臨床応用されているＴＳ（比較例）と比較しｉｎ　ｖｉｔｒｏでは約７０～１９０倍高い細胞内への取り込み性能を有していることがわかった。このことから、本クロリン誘導体等を用いると、強い腫瘍蛍光が得られることから、光線力学的診断（Ｐｈｏｔｏｄｙｎａｍｉｃ　Ｄｉａｇｎｏｓｉｓ；　ＰＤＤ）に適用した場合、より優れた感度が得られることが推測される。また、本クロリン誘導体等は、ＴＳと比較して、癌細胞株へのより優れた取り込み性能を有しており、このことから、本クロリン誘導体等が、ＴＳよりも優れたＰＤＴによる殺細胞効果を有していることがわかった。
［食道癌細胞株および不死化食道正常上皮細胞株を用いた細胞内取り込み性能評価］
　食道癌細胞株：ＯＥ２１（Ｎｏ．１１Ｄ０２８；ＥＣＡＣＣ）および不死化食道上皮細胞株：Ｈｅｔ－１Ａ（Ｎｏ．　３５２７８３６；ＡＴＣＣ）を使用し、細胞内取り込み性能を評価した。
　細胞培養の条件は以下のとおりである。
　ＯＥ２１：ＲＰＭＩ　１６４０とＨａｍ′ｓ　Ｆ１２の半量ずつの混合液
　Ｈｅｔ－１Ａ：ＢＥＧＭ　Ｂｕｌｌｅｔ　ｋｉｔを培養液として使用した
　全ての培養液は１０％牛胎児血清、１００Ｕ／ｍｌのペニシリンとストレプトマイシン、２５ｍｇ／ｍｌのアンホテリシンＢを含有し、５％ＣＯ２濃度、３７℃の条件下で培養した。
（試験方法）
　９６穴プレートを用いて５×１０３ｃｅｌｌ／ｗｅｌｌの細胞を２４時間培養した。その後、１μＭのＴａｌａｐｏｒｆｉｎ　Ｓｏｄｉｕｍ（ＴＳ；レザフィリン（登録商標）、Ｍｅｉｊｉ　Ｓｅｉｋａファルマ）を含有した培養液、および、１μＭの実施例１の化合物を含有した培養液でそれぞれ置換し、４時間培養した。次に、培養液を吸引除去後、ｐｈｏｓｐｈａｔｅ－ｂｕｆｆｅｒｅｄ　ｓａｌｉｎｅ（ＰＢＳ）で細胞を洗浄し、各ｗｅｌｌ　１００μｌのＰＢＳを入れ、スペクトロメーター（Ｇｅｍｉｎｉ　ＥＭ、Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ　Ｄｅｖｉｃｅ）を使用し、波長４０５ｎｍの光で励起し、細胞からの波長６５０ｎｍの蛍光発光の強度を測定した。各検体の蛍光強度はブランクで除した値とした。得られた結果はＳｏｆｔＭＡＸ　ｐｒｏ　ｓｏｆｔｗａｒｅで解析した。８回の独立した実験から結果を解析した。結果を図３に示した。なお、図３のグラフの縦軸が蛍光発光強度を示し、これが大きいほど細胞内に化合物が取り込まれていることを表している。
　図３のグラフに示した結果から、正常食道上皮であるＨｅｔ－１ＡではＴＳ（比較例）、実施例１の化合物の細胞内取り込み性能には差は見られなかった。一方、食道癌細胞株であるＯＥ２１においてはＴＳ（比較例）と比較して、実施例１の化合物の細胞内取り込み性能が有意に亢進していた（Ｂｏｎｆｅｒｒｏｎｉ検定　Ｐ＝０．０００２）。
［光線力学的療法における抗腫瘍効果の評価］
　細胞株として、マウス大腸癌細胞株：ＣＴ２６（Ｎｏ．ＣＲＬ－２６３８；ＡＴＣＣ）を使用した。細胞培養の条件、使用した動物、および、マウス皮下腫瘍モデルの作製方法は以下のとおりである。
培養条件：
　ＤＭＥＭ（Ｄｕｌｂｅｃｃｏ’ｓ　Ｍｏｄｉｆｉｅｄ　Ｅａｇｌｅ　Ｍｅｄｉｕｍ）に１０％牛胎児血清、１００Ｕ／ｍｌのペニシリンとストレプトマイシン、０．２５ｍｇ／ｍｌのアンホテリシンＢを含有し、５％ＣＯ２濃度、３７℃の条件下で培養した。
使用動物：
　マウスは８～１０週齢、雌、約２０ｇ体重マウス（ＢＡＬＢ／ｃ　ＣｒＳｌｃ）を使用した。マウスは２週間飼育し環境に順応させた。
マウス皮下腫瘍モデルの作製：
　マウス右大腿根部背側を中心として約１０ｍｍ程度の円形に除毛し、皮下に２７Ｇ針を使用して１×１０６個のＣＴ２６を接種した。接種７日後、腫瘍サイズが平均１００ｍｍ３（長径（ｍｍ）×短径（ｍｍ）×短径（ｍｍ））の皮下腫瘍モデルが作製された。
（試験方法）
　作製されたマウス皮下腫瘍モデルを３群(未治療コントロール群、実施例１の化合物による治療群、Ｔａｌａｐｏｒｆｉｎ　Ｓｏｄｉｕｍ（ＴＳ（比較例）；レザフィリン（登録商標）、Ｍｅｉｊｉ　Ｓｅｉｋａファルマ）治療群)に平均腫瘍サイズが均等になるように１０匹ずつ割り付けた。マウス尾静脈より１．５６μｍｏｌ／Ｋｇの濃度の実施例１の化合物またはＴＳを経静脈投与し、３０分後に６６４ｎｍの赤色半導体レーザー（ＫＯＹＯ－ＰＤＬ６６４、ＯＫファイバーテクノロジー）を使用し、計１００Ｊ／ｃｍ２（１５０ｍＷ／ｃｍ２）の単回照射を施行した。治療後の腫瘍サイズは３日毎に電子ノギスを使用し計測した。計測結果はｗｅｌｃｈのｔ検定を用いて２群間を比較した。結果を図４のグラフに示した。
　図４のグラフに示したとおり、実施例１の化合物を投与した群はコントロールと比較し有意に腫瘍抑制を示しつつ、かつ、マウスの死亡率は０％であった（ｎ＝１０）。さらに、腫瘍完全消失率は１０例中４例で４０％であった。一方、ＴＳを投与した群では治療後数日で全例が死亡した。
　上記の結果から、実施例１の化合物を用いた場合、投与後３０分後に光線を照射しても、マウスの死亡率は０％であり、かつ、高い抗腫瘍効果を示した。これは、実施例１の化合物が、体外へより移出されやすく、投与後の早期に光線照射しても、安全性がより高いことを示している。一方、ＴＳは、投与３０分後に光線を照射すると、マウスが全例死亡してしまうことから、投与後の早期に光線照射した場合に、安全性が劣ることが示された。
［マウスを用いた単回静脈内投与毒性試験］
　実施例１の化合物をマウス（Ｃｒｌ：ＣＤ１（ＩＣＲ）、雌雄各５匹／用量群）に、６０、１２５、および、２５０ｍｇ／ｋｇの用量で単回静脈内投与し、現れる毒性変化を確認した。
　照明条件による毒性発現の差を確認するため、本試験では通常照明下（明条件下）と暗条件下の２飼育条件を設定した。投与液量は１０ｍｌ／ｋｇとした。投与液媒体として１０％Ｃｒｅｍｏｐｈｏｒ＋５％エタノール含有局方生理食塩液を用いた。
　投与の結果：明条件飼育の２５０ｍｇ／ｋｇ群において、雄３例、雌１例が第２日、雌１例が第３日に死亡した。また、暗条件飼育の２５０ｍｇ／ｋｇ群においても、雄２例が第２日と第５日に、雌３例が第２～４日に死亡した。これらの動物の一部では、自発運動の低下、呼吸緩徐、および、体温低下が認められた。死亡の発現状況に明暗条件間の差は認められなかった。
　生存例における一般状態観察：明条件飼育の２５０ｍｇ／ｋｇ群の雄２例、雌３例において、第２日以降に尾の腫脹、第９日から耳介の変色が認められた。尾の腫脹は第１２日には消失し、回復したが、耳介の変色については、解剖時まで回復せず、雄２例では耳介の一部が欠損となった。暗条件飼育の２５０ｍｇ／ｋｇ群の雄１例においても、第１４日より耳介の変色が認められたが、耳介先端部における限局的なものであり、症状は明条件飼育において顕著に発現した。
　体重測定：明条件および暗条件飼育ともに１２５および２５０ｍｇ／ｋｇ群で第４日または第８日に体重減少が認められた。いずれも一時的なものであり、回復する傾向が認められた。体重変動に明暗条件間の差は認められなかった。
　剖検結果：２５０ｍｇ／ｋｇ群に一般症状として認められた耳介の変色、欠損、および、尾の痂皮が認められたのみであった。
　上記の結果から、実施例１の化合物の単回静脈内投与における最小致死量は、本試験条件下では明飼育条件、暗飼育条件のいずれにおいても雌雄共に２５０ｍｇ／ｋｇであると結論した。また、明条件飼育下では、２５０ｍｇ／ｋｇ群投与で尾の腫脹および耳介の変色が認められ、照明条件による差が認められた。
　上記の結果から、実施例１の化合物は、安全性が認められる用量で十分な本発明の効果が得られることが推測された。
［実施例１の化合物の薬物動態試験］
　１４Ｃ標識された実施例１の化合物を、ラットに静脈内投与し、以下の結果を得た（ｄｏｓｅ：５ｍｇ／ｋｇ）。
　最初の測定時間である投与後５分に血漿中放射能濃度２３．３０μｇ　ｅｑ．　ｏｆ　Ｓ実施例１化合物／ｍｌを示した後、急速に減少した。投与後６～８時間において、血漿中放射能濃度の再上昇が認められた後、消失半減期（ｔ１／２）４２．６５ｈで消失した。投与直後の血漿中放射能濃度（Ｃ０）は５１．５２μｇ　ｅｑ．／ｍｌ、ＡＵＣ０－ｌａｓｔは３０．４２μｇ　ｅｑ　ｈ／ｍｌ、ＡＵＣ０－∞は３１．８９μｇ　ｅｑ．・ｈ／ｍｌであった。実施例１の化合物とＴＳの結果を表６に示した。
Figure JPOXMLDOC01-appb-T000032
　表６に示した結果から、実施例１の化合物は、ＴＳと比較して、血漿中から消失しやすい（消失が早い）ものと推測される。
　投与後４時間までの胆汁中に投与放射能の８８．９％、４８時間までに９４．９％が排泄された。投与後４８時間までの尿及び糞中に、それぞれ投与放射能の４．４％及び０．８％が排泄された。投与後４８時間における体内残存率は０．８％であり、総回収率は１００．９％であった。以上の結果より，実施例１の化合物の主排泄経路は胆汁を介した糞排泄であることが示唆された。結果を表７に示した。
Figure JPOXMLDOC01-appb-T000033
　表７に示した結果から、実施例１の化合物はＴＳと比較して、０－２４時間、及び、４８時間後の排出量がいずれもＴＳを上回っており、より排出されやすいものと推測される。

Claims (18)

  1. 　下記一般式（１）で示されるグリコシル化クロリンｅ６誘導体、またはその薬学的に許容される塩。
    Figure JPOXMLDOC01-appb-C000001
    　式中：
    　Ｘ１およびＸ２は、それぞれ独立にＨまたはＲ－Ｘ－＊で表される基であり、＊は結合位置を表し、Ｘ１およびＸ２の少なくとも一方はＲ－Ｘ－＊で表される基であり、Ｒは、糖の残基であり、Ｘは、Ｃ、Ｎ、Ｏ、Ｈ、およびＳからなる群より選択される少なくとも１種の原子からなる直鎖状または分岐鎖状の２価の基であり、ＸはＲを構成する炭素原子のいずれか１つと結合し、
    　Ｒ１、Ｒ２およびＲ３は、それぞれ独立に、Ｈ、炭素数１～６のアセトキシアルキル基、または、炭素数１～６の炭化水素基であり、Ｒ１、Ｒ２およびＲ３の少なくとも１つは炭素数１～６のアセトキシアルキル基または炭素数１～６の炭化水素基である。
  2. 　前記一般式（１）において、Ｒ１、Ｒ２およびＲ３が、それぞれ独立に、炭素数１～６のアセトキシアルキル基または炭素数１～６の炭化水素基である、請求項１に記載のグリコシル化クロリンｅ６誘導体、またはその薬学的に許容される塩。
  3. 　前記一般式（１）において、Ｒ１、Ｒ２およびＲ３が、メチル基である、請求項１または２に記載のグリコシル化クロリンｅ６誘導体、またはその薬学的に許容される塩。
  4. 　前記一般式（１）において、－Ｘ－が－Ｘ３－Ｏ－であり、下記一般式（２）で示される、請求項１～３のいずれか一項に記載のグリコシル化クロリンｅ６誘導体、またはその薬学的に許容される塩。
    Figure JPOXMLDOC01-appb-C000002
    　式中：
    　Ｒは糖の残基であり、
    　Ｘ３は、Ｃ、Ｎ、Ｏ、Ｈ、およびＳからなる群より選択される少なくとも１種からなる直鎖状または分岐鎖状の２価の基であり、かつ、Ｒを構成する炭素原子のいずれか１つと結合している。
  5. 　前記一般式（２）において、Ｘ３が、Ｒのアノマー位炭素原子と結合した基、または、アノマー位炭素原子に隣接する炭素原子と結合した基である、請求項４に記載のグリコシル化クロリンｅ６誘導体、またはその薬学的に許容される塩。
  6. 　前記一般式（２）において、－Ｘ３－が－Ｓ－Ｘ４－であり、下記一般式（３）で示される、請求項４または５に記載のグリコシル化クロリンｅ６誘導体、またはその薬学的に許容される塩。
    Figure JPOXMLDOC01-appb-C000003
    　式中：
    　Ｘ４はＣおよびＨを有する直鎖状または分岐鎖状の２価の基である。
  7. 　前記一般式（３）において、Ｘ４が、炭素数１～１６の直鎖状または分岐鎖状のアルキレン基である、請求項６に記載のグリコシル化クロリンｅ６誘導体、またはその薬学的に許容される塩。
  8. 　前記一般式（３）において、Ｘ４が－（ＣＨ２）ｎ－で示されるアルキレン基であり、ｎが１～１６の整数である、請求項６または７に記載のグリコシル化クロリンｅ６誘導体、またはその薬学的に許容される塩。
  9. 　前記一般式（３）において、Ｘ４が－（ＣＨ２）ｎ－で示されるアルキレン基であり、ｎが３～１０の整数である、請求項６～８のいずれか一項に記載のグリコシル化クロリンｅ６誘導体、またはその薬学的に許容される塩。
  10. 　前記糖が、単糖類、オリゴ糖、多糖類、アミノ基を含む単糖類、アミノ基を含むオリゴ糖、またはアミノ基を含む多糖類である、請求項１～９のいずれか一項に記載のグリコシル化クロリンｅ６誘導体、またはその薬学的に許容される塩。
  11. 　前記糖が、単糖類であり、ＳがＲのアノマー位炭素原子と結合した、請求項１～１０のいずれか一項に記載のグリコシル化クロリンｅ６誘導体、またはその薬学的に許容される塩。
  12. 　前記糖が、グルコース、ガラクトースまたはマンノースである、請求項１～１１のいずれか一項に記載のグリコシル化クロリンｅ６誘導体、またはその薬学的に許容される塩。
  13. 　下記一般式（４）、（５）または（６）で示される、請求項１～１２のいずれか一項に記載のグリコシル化クロリンｅ６誘導体、またはその薬学的に許容される塩。
    Figure JPOXMLDOC01-appb-C000004
    Figure JPOXMLDOC01-appb-C000005
    Figure JPOXMLDOC01-appb-C000006
    式（４）～（６）中、ｎは３～１０の整数である。
  14. 　腫瘍、皮膚疾患、眼疾患または加齢黄斑変性の光線力学治療用であり、請求項１～１３のいずれか一項に記載のグリコシル化クロリンｅ６誘導体、またはその薬学的に許容される塩を有効成分として含む医薬組成物。
  15. 　ウイルス、微生物およびこれらのいずれかの感染細胞、腫瘍細胞、腫瘍状組織、ならびに、新生血管からなる群より選択される標的に、請求項１～１３のいずれか一項に記載のグリコシル化クロリンｅ６誘導体、またはその薬学的に許容される塩を接触させた後に、前記標的に対して、前記グリコシル化クロリンｅ６誘導体、またはその薬学的に許容される塩に吸収される波長の光を照射する工程を含む、前記標的を破壊する方法。
  16. 　請求項１～１３のいずれか一項に記載のグリコシル化クロリンｅ６誘導体、またはその薬学的に許容される塩を有効成分として含む、医薬組成物。
  17. 　腫瘍、皮膚疾患、眼疾患または加齢黄斑変性の、治療、診断または検出のための、請求項１６に記載の医薬組成物。
  18. 　クロリンｅ６と糖とを連結基を介して結合させる工程を含む、請求項１～１３のいずれか１項に記載のグリコシル化クロリンｅ６誘導体、またはその薬学的に許容される塩の製造方法。
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Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN113461697A (zh) * 2021-06-29 2021-10-01 西南交通大学 一种二氢卟吩类化合物及其制备方法和用途
WO2023048233A1 (ja) * 2021-09-24 2023-03-30 株式会社PhotoQ3 腫瘍細胞を死滅させるための医薬

Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1113914A (zh) * 1994-05-31 1995-12-27 中国人民解放军第二军医大学 血卟啉醚类衍生物及其制备方法
JP2004532890A (ja) * 2001-06-01 2004-10-28 セラムオプテック インダストリーズ インコーポレーテッド 光力学的療法用の水溶性ポルフィリン誘導体、及び、それらの使用並びに製造
WO2008102669A1 (ja) * 2007-02-19 2008-08-28 Rei Medical Co., Ltd. 新規な糖連結クロリン誘導体及びその製造方法

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1113914A (zh) * 1994-05-31 1995-12-27 中国人民解放军第二军医大学 血卟啉醚类衍生物及其制备方法
JP2004532890A (ja) * 2001-06-01 2004-10-28 セラムオプテック インダストリーズ インコーポレーテッド 光力学的療法用の水溶性ポルフィリン誘導体、及び、それらの使用並びに製造
WO2008102669A1 (ja) * 2007-02-19 2008-08-28 Rei Medical Co., Ltd. 新規な糖連結クロリン誘導体及びその製造方法

Non-Patent Citations (8)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
AKSENOVA, A. A. ET AL.: "Synthesis and properties of 0- and S-glycosylated derivatives of pyropheophorbide a", RUSSIAN JOURNAL OF BIOORGANIC CHEMISTRY, vol. 27, no. 2, 2001, pages 124 - 9, ISSN: 1068-1620 *
AKSENOVA, A. A. ET AL.: "The synthesis of galactopyranosyl-substituted derivatives of pheophorbide", RUSSIAN JOURNAL OF BIOORGANIC CHEMISTRY, vol. 26, no. 2, 2000, pages 111 - 114, XP055605928, ISSN: 1068-1620 *
CIECKIEWICZ, E. ET AL.: "Semisynthesis and in vitro photodynamic activity evaluations of halogenated and glycosylated derivatives of pheophorbide a", EUROPEAN JOURNAL OF ORGANIC CHEMISTRY, no. 27, 2015, pages 6061 - 74, XP055605942 *
FUHRHOP, J. H. ET AL.: "Chiral micellar porphyrin fibers with 2-aminoglycosamide head groups", JOURNAL OF THE AMERICAN CHEMICAL SOCIETY, vol. 114, no. 11, 1992, pages 4159 - 4165, XP055605939 *
JIANG, X. ET AL.: "Synthesis of nucleoside adducts of porphyrins and chlorophyll derivatives", TETRAHEDRON LETTERS, vol. 36, no. 3, 1995, pages 365 - 8, XP004028824, DOI: doi:10.1016/0040-4039(94)02271-C *
LONIN, I. S. ET AL.: "Synthesis of chlorophyll a glycoconjugates using olefin cross-metathesis", MENDELEEV COMMUNICATIONS, vol. 22, no. 3, 2012, pages 157 - 8, XP028512084, DOI: doi:10.1016/j.mencom.2012.05.016 *
SYLVAIN, I. ET AL.: "Synthesis and biological evaluation of thioglycosylated porphyrins for an application in photodynamic therapy", BIOORGANIC & MEDICINAL CHEMISTRY, vol. 10, no. 1, 2002, pages 57 - 69, XP055605932 *
YANO SHIGENOBU ET AL.: "Development of next generation light-sensitive sugar chain-linked photo sensitizing substance through medical engineering collaborations", MEDICAL PHOTONICS, vol. 2, no. 22, 13 July 2016 (2016-07-13), pages 19 - 28 *

Cited By (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN113461697A (zh) * 2021-06-29 2021-10-01 西南交通大学 一种二氢卟吩类化合物及其制备方法和用途
CN113461697B (zh) * 2021-06-29 2023-03-10 西南交通大学 一种二氢卟吩类化合物及其制备方法和用途
US11787816B2 (en) 2021-06-29 2023-10-17 Southwest Jiaotong University Chlorin compound, and preparation and use thereof
WO2023048233A1 (ja) * 2021-09-24 2023-03-30 株式会社PhotoQ3 腫瘍細胞を死滅させるための医薬

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