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WO2012003374A3 - Préparation d'une bibliothèque de séquençage ciblé par recircularisation de l'adn génomique - Google Patents

Préparation d'une bibliothèque de séquençage ciblé par recircularisation de l'adn génomique Download PDF

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Abstract

Certains modes de réalisation de l'invention concernent un procédé de séquençage qui consiste à : a) dans des conditions d'hybridation, mettre un fragment génomique cible en contact avec i. un oligonucléotide-vecteur comprenant un site de liaison pour une amorce de séquençage et ii. un oligonucléotide-épissure qui hybride pour l'oligonucléotide-vecteur et pour les séquences nucléotides aux extrémités d'un fragment génomique cible, pour produire un acide nucléique circulaire; b) mettre l'acide nucléique circulaire en contact avec une ligase pour ainsi réaliser une ligature entre les extrémités de l'oligonucléotide-vecteur et les extrémités du fragment génomique cible de manière à produire une molécule d'ADN circulaire; c) séparer la molécule d'ADN circulaire de l'oligonucléotide-épissure; et d) séquencer le fragment génomique cible de la molécule d'ADN circulaire en utilisant la première amorce de séquençage.
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