+

WO2008135661A2 - Utilisation de la citrulline pour pour le traitement de pathologies liees a une augmentation de la carbonylation des protéines - Google Patents

Utilisation de la citrulline pour pour le traitement de pathologies liees a une augmentation de la carbonylation des protéines Download PDF

Info

Publication number
WO2008135661A2
WO2008135661A2 PCT/FR2008/000379 FR2008000379W WO2008135661A2 WO 2008135661 A2 WO2008135661 A2 WO 2008135661A2 FR 2008000379 W FR2008000379 W FR 2008000379W WO 2008135661 A2 WO2008135661 A2 WO 2008135661A2
Authority
WO
WIPO (PCT)
Prior art keywords
treatment
citrulline
composition
intended
nutrition
Prior art date
Application number
PCT/FR2008/000379
Other languages
English (en)
Other versions
WO2008135661A3 (fr
Inventor
Christophe Moinard
Stéphane WALRAND
Yves Boirie
Luc Cynober
Original Assignee
Universite Paris Descartes
Institut National De La Recherche Agronomique
Assistance Publique-Hopitaux De Paris
Universite D'auvergne
Centre Hospitalier Universitaire De Clermont-Ferrand
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Universite Paris Descartes, Institut National De La Recherche Agronomique, Assistance Publique-Hopitaux De Paris, Universite D'auvergne, Centre Hospitalier Universitaire De Clermont-Ferrand filed Critical Universite Paris Descartes
Priority to CN200880009440A priority Critical patent/CN101686919A/zh
Priority to EP08787826A priority patent/EP2136777A2/fr
Priority to CA002689608A priority patent/CA2689608A1/fr
Priority to JP2009554063A priority patent/JP2010522146A/ja
Priority to US12/532,299 priority patent/US20100093863A1/en
Publication of WO2008135661A2 publication Critical patent/WO2008135661A2/fr
Publication of WO2008135661A3 publication Critical patent/WO2008135661A3/fr
Priority to IL200830A priority patent/IL200830A0/en

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/185—Acids; Anhydrides, halides or salts thereof, e.g. sulfur acids, imidic, hydrazonic or hydroximic acids
    • A61K31/19—Carboxylic acids, e.g. valproic acid
    • A61K31/195—Carboxylic acids, e.g. valproic acid having an amino group
    • A61K31/197—Carboxylic acids, e.g. valproic acid having an amino group the amino and the carboxyl groups being attached to the same acyclic carbon chain, e.g. gamma-aminobutyric acid [GABA], beta-alanine, epsilon-aminocaproic acid or pantothenic acid
    • A61K31/198—Alpha-amino acids, e.g. alanine or edetic acid [EDTA]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23L—FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; PREPARATION OR TREATMENT THEREOF
    • A23L33/00—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
    • A23L33/10—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof using additives
    • A23L33/17—Amino acids, peptides or proteins
    • A23L33/175—Amino acids
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K8/00—Cosmetics or similar toiletry preparations
    • A61K8/18—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
    • A61K8/30—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing organic compounds
    • A61K8/40—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing organic compounds containing nitrogen
    • A61K8/44—Aminocarboxylic acids or derivatives thereof, e.g. aminocarboxylic acids containing sulfur; Salts; Esters or N-acylated derivatives thereof
    • A61K8/442—Aminocarboxylic acids or derivatives thereof, e.g. aminocarboxylic acids containing sulfur; Salts; Esters or N-acylated derivatives thereof substituted by amido group(s)
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
    • A61P19/02—Drugs for skeletal disorders for joint disorders, e.g. arthritis, arthrosis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P21/00—Drugs for disorders of the muscular or neuromuscular system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/14—Drugs for disorders of the nervous system for treating abnormal movements, e.g. chorea, dyskinesia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/14—Drugs for disorders of the nervous system for treating abnormal movements, e.g. chorea, dyskinesia
    • A61P25/16—Anti-Parkinson drugs
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/28—Drugs for disorders of the nervous system for treating neurodegenerative disorders of the central nervous system, e.g. nootropic agents, cognition enhancers, drugs for treating Alzheimer's disease or other forms of dementia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P27/00—Drugs for disorders of the senses
    • A61P27/02—Ophthalmic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P27/00—Drugs for disorders of the senses
    • A61P27/02—Ophthalmic agents
    • A61P27/12—Ophthalmic agents for cataracts
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/02—Nutrients, e.g. vitamins, minerals
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/10—Drugs for disorders of the cardiovascular system for treating ischaemic or atherosclerotic diseases, e.g. antianginal drugs, coronary vasodilators, drugs for myocardial infarction, retinopathy, cerebrovascula insufficiency, renal arteriosclerosis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61Q—SPECIFIC USE OF COSMETICS OR SIMILAR TOILETRY PREPARATIONS
    • A61Q19/00—Preparations for care of the skin
    • A61Q19/08—Anti-ageing preparations
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
    • A23V2002/00—Food compositions, function of food ingredients or processes for food or foodstuffs

Definitions

  • the subject of the present invention is a new use of citrulline, namely its use in the context of an increase in the carbonylation of proteins and the treatment of pathologies resulting therefrom.
  • proteins of the extra- and intracellular media are, in vivo, a preferred target for the reactive species of oxygen and the reactive species of nitrogen. It has been estimated that proteins can capture up to 50 to 70% of the radical species synthesized by the cell.
  • the observed damages are of several types: oxidation (or nitration) of the side chains of the amino acids, or oxidation of the polypeptide chain (of which a particular case is the carbonylation) followed by fragmentation and / or the formation of inter- or intra-chains.
  • the carbonylation of proteins is a phenomenon that can be independent of an oxidation phenomenon.
  • protein carbonylation refers to a chemical modification of proteins related to the production of CO groups. This carbonylation (which may be a special case of protein oxidation) then leads to a loss of protein function (see Nystrom, The EMBO Journal (2005) 24, 1311-1317 and Dalle-Donne et al, J. Mol. Med, Vol.10, No. 2, 2006, pp. 389-406). Although the body has a number of defense systems (glutathione, catalase, SOD, etc.), these can be out of date and insufficient in certain situations. Carbonyl compounds are an interesting marker that accompanies aging and many pathologies.
  • Citrulline (or 2-amino-5- (carbamoyl amino) pentanoic acid) is an ⁇ -acid . - amine and was isolated for the first time from the watermelon. Citrulline is a non-essential amino acid that the body produces from other nutrients. For example, citrulline plays a particularly important role, with Pornithine and arginine, in the urea cycle. Finally, citrulline plays a major role in the homeostasis of arginine and nitric oxide.
  • Citrulline is used to date in some pharmaceutical applications.
  • EP 1 495 755 relates to the use of citrulline for the preparation of a medicament for the treatment of pathologies related to intestinal insufficiency. More particularly, the pathologies mentioned in this application are as follows: short bowel syndrome following intestinal resection, celiac disease, inflammatory bowel diseases, age-related intestinal insufficiency and intestinal insufficiency related to irradiation.
  • this application does not mention the carbonylation of proteins.
  • compositions comprising a statin associated with citrulline for the preparation of a medicament used in the treatment of primary or secondary atherosclerosis, and in that of degenerative diseases such as Alzheimer's disease.
  • the use of these compositions is synergistic compared to compositions comprising a statin or citrulline alone.
  • Application FR 2691359 describes the use of citrulline malate in a patient suffering from chronic obstructive pulmonary disease (COPD) and in a patient suffering from REYE-JOHNSON myopathy (mitochondrial myopathy). This beneficial effect of citrulline malate would be due to a better muscle utilization of fats leading to an economy of muscle proteolysis.
  • COPD chronic obstructive pulmonary disease
  • REYE-JOHNSON myopathy mitochondrial myopathy
  • United States Patent Application US 2004/0235953 describes and claims a method for the prevention and therapeutic treatment of pathologies related to the reduction of the formation of nitric oxide, in particular sepsis (generalized infection), said method comprising the administration of a precursor of nitric oxide which may be citrulline.
  • United States Patent Application US 2001/0056068 relates to the use of L-citrulline for the treatment of diseases related to nitrogen oxide deficiency such as atherosclerosis, cerebral ischemia and Alzheimer's disease. Alzheimer.
  • XP 00 24 56 361 discloses ophthalmic formulations containing citrulline and their use in Chinese medicine in the treatment of cataracts. These formulations act on the ciliary vascular system and on the pericorneal vasoganglion.
  • European Patent Application EP 1752156 discloses an oxygen scavenger containing a wild watermelon extract containing citrulline and its use especially in Alzheimer's dementia, cataract problems, and cutaneous lesions.
  • the present invention relates to the use of L-citrulline of formula (I) below:
  • a pharmaceutical composition intended to inhibit the increase of the carbonylation of the responsible proteins observed in certain pathologies therefore especially intended for the treatment of neurodegenerative diseases such as Alzheimer's or Parkinson's diseases, for the treatment of retinopathy, rheumatoid arthritis, atherosclerosis, amyotrophic lateral sclerosis, cerebral ischemia, the treatment of cataract problems or generalized infections (sepsis), the treatment of pathologies related to skin aging such as wrinkles, hypo and hyperpigmented spots and loss of elasticity and more particularly to the senescence of tissues such as eye, muscle and brain, to the treatment of pathologies related to the dysfunction of mitochondria, namely the myopathies resulting from mitochondriopathies, the treatment of cachexia linked to undernutrition and increase n the longevity of mammals, especially that of pets.
  • neurodegenerative diseases such as Alzheimer's or Parkinson's diseases
  • retinopathy retinopathy, rheumatoid arthritis, atherosclerosis, amyotrophic lateral
  • the present invention also relates to the use of a composition comprising L-citrulline or a cosmetically acceptable salt thereof, for the cosmetic treatment of disorders related to the carbonylation of the responsible proteins, especially in the case pathologies related to skin aging such as wrinkles, hypo and hyperpigmented spots and loss of elasticity.
  • the present invention also relates to the use of a composition comprising L-citrulline or a nutraceutically acceptable salt thereof, for the nutraceutical treatment of disorders related to the increase in the carbonylation of proteins, by inhibition of the increase of the carbonylation of the responsible proteins, thus especially intended for the treatment of neurodegenerative diseases such as Alzheimer's or Parkinson's diseases, the treatment of retinopathy, rheumatoid arthritis, atherosclerosis, sclerosis amyotrophic lateral, from cerebral ischemia, to the treatment of cataract problems or generalized infections (sepsis), to the treatment of diseases related to skin aging such as wrinkles, hypo and hyperpigmented spots and loss of elasticity and more particularly to the senescence of the tissues such as eye, muscle and brain, to the treatment of the pathologies l Mitochondrial dysfunction, namely myopathies from mitochondriopathies, treatment of cachexia related to malnutrition and increased mammalian longevity.
  • neurodegenerative diseases such as Alzheimer's or
  • Nutraceutical means any product describing health claims (health food, food, border products, etc.).
  • the present invention also relates to the use of a composition comprising L-citrulline, said composition being intended to be a dietary supplement suitable for use in the context of neurodegenerative diseases such as Alzheimer's or Parkinson's diseases.
  • retinopathy retinopathy, rheumatoid arthritis, atherosclerosis, amyotrophic lateral sclerosis, cerebral ischemia, cataract problems or generalized infections (sepsis), skin aging such as wrinkles, stains hypo and hyperpigmented and the loss of elasticity and more particularly of the senescence of the tissues such as eye, muscle and brain, pathologies related to the dysfunction of the mitochondria, namely the myopathies resulting from the mitochondriopathies, the treatment of the cachexia related to undernutrition and increased longevity of mammals, particularly that of c OMPANY.
  • L-citrulline is understood to mean the product commercially available, in particular provided by Sigma, Biocodex or Kyowa Hakko, or the natural product derived from plants, in particular watermelon, or watermelon (Citruilus lanatus). ), especially in the form of juice, pulp or extract.
  • pharmaceutically acceptable salt means citrulline salts such as citrulline malate, citrulline ⁇ -ketoglutarate, citrulline citrate or citrulline paracetoisocaproate. .
  • L-citrulline is used for the preparation of a pharmaceutical composition, a composition intended for the cosmetic treatment, a composition intended to be a dietary supplement, and a composition for the nutraceutical treatment or health food such that the unit dose of L-citrulline is from about 2 g to about 20 g, in particular about 10 g, for a dosage of about 0.1 g / kg / day to about 0.5 g / kg / day, especially about 0.25 g / kg / day.
  • L-citrulline is provided in one to three daily doses, preferably in one dose.
  • the pharmaceutical composition and the composition for the nutraceutical treatment are in dry form, in the form of an aqueous solution, in hydroalcoholic or oily form, in the form of a oil-in-water or water-in-emulsion oil or multiple, an aqueous or oily gel.
  • the composition for the cosmetic treatment it is possible to use any suitable vehicle, that is to say any excipient, vehicle or carrier cosmetically, in particular dermatologically, acceptable.
  • Such carriers are well known to those skilled in the art and also result from cosmetic or dermatological compositions which have a general scope.
  • mixtures, formulas, monolamellar (micelles), bilamellar (liposomes), multilamellar (sphémlites) encapsulations, and any other medium known in cosmetics may be used.
  • the present invention relates to the use of L-citrulline as defined above.
  • enterally or parenterally administrable form for the preparation of a pharmaceutical composition in an orally, enterally or parenterally administrable form.
  • enteral nutrition or parenteral nutrition it can be mixed with nutrition or, preferentially, administered as a bolus in the enteral nutrition tube or in Y in parenteral nutrition.
  • L-citrulline as defined above, for the preparation of a composition for the cosmetic treatment in a form that can be administered topically. It also relates to the use of L-citrulline as defined above, for the preparation of a composition for the nutraceutical treatment in an orally administrable form.
  • the enteral administration corresponds in particular to administration by nasogastric or naso-intestinal tube, by gastrostomy or jejunostomy; the parenteral administration corresponds in particular to administration by central, peripheral or subcutaneous intravenous infusion.
  • L-citrulline is used in the context of the invention for the preparation of a pharmaceutical composition, a composition for the cosmetic treatment, a composition for a food supplement or a health food for the nutraceutical treatment also comprising one or more other compounds intended for the treatment of malnutrition-related cachexia such as leucine, glutamine, arginine, restroomthine and their various usable salts such as ⁇ -ketoglutarate or ⁇ -ketoisocaproate.
  • the compounds can be used alone or in a nutritional mixture for oral nutrition.
  • L-citrulline is used in the context of. the invention for the preparation of a pharmaceutical composition, a composition for the cosmetic treatment, a dietary supplement bu a composition for nutraceutical treatment (health food) also comprising one or more other compounds for the treatment of cachexia related to malnutrition such as leucine, glutamine, the arginine, ornithine and their various usable salts such as ⁇ -ketoglutarate or P ⁇ -ketoisocaproate, alone or in a nutritional mixture for oral nutrition.
  • a pharmaceutical composition a composition for the cosmetic treatment, a dietary supplement bu a composition for nutraceutical treatment (health food) also comprising one or more other compounds for the treatment of cachexia related to malnutrition such as leucine, glutamine, the arginine, ornithine and their various usable salts such as ⁇ -ketoglutarate or P ⁇ -ketoisocaproate, alone or in a nutritional mixture for oral nutrition.
  • the invention relates to products comprising: - L-citrulline or a pharmaceutically acceptable or mitraceutical salt thereof, - and at least one other compound intended for the treatment of malnutrition-related cachexia such as leucine, glutamine, arginine, ornithine and their various usable salts such as ⁇ -ketoglutarate or ⁇ -ketoisocaproate, alone or in a nutritional mixture intended for parenteral nutrition, or a mixture intended for enteral nutrition or a mixture intended for oral nutrition, as combination products for simultaneous, separate or spreading use in the context of the treatment of pathologies related to an increase in carbonylation proteins, said pathologies being as defined above. Examples 1 and 2 which follow and Figure 1 illustrate the invention.
  • Figure 1 shows the carbonylation of muscle proteins in the rat.
  • the ordinate axis corresponds to the amount of carbonyl proteins in ⁇ mol / g.
  • Column “1" corresponds to healthy rats; column “2” corresponds to undernourished rats; Column “3” corresponds to rats renounced with a standard diet and Column “4" corresponds to rats renaturated and having had a diet enriched with citrulline.
  • Acclimation of rats is carried out for 2 weeks, during which spontaneous food consumption is measured. They are fed a standard diet (A (M, UAR, Villemoisson-sur-Orge, France) containing 17% protein, 3% lipids, 59% carbohydrates and 21% water, fiber, vitamins and minerals. The average food intake during this period is 34.4 g / day.
  • A M, UAR, Villemoisson-sur-Orge, France
  • group R and the rats of the two remaining groups are renourished for one week with 90% of spontaneous ingesta (or 30.9 g), or with a diet enriched in non-essential amino acids (AANE group: alanine, asparagine, glycine, serine, histidine, and proline provided equimolarly) or a diet enriched with citrulline (5g / kg / day) (citrulline group).
  • AANE group alanine, asparagine, glycine, serine, histidine, and proline provided equimolarly
  • citrulline 5g / kg / day
  • the processes of oxidation of proteins affecting the structure of the amino acids that compose them are complex and all give rise to the formation of carbonyl groups. This is why it was chosen to evaluate overall the oxidation of muscle proteins by quantifying the carbonyl derivatives from a 300 mg sample of tibialis anterior.
  • the method used is therefore a non-specific technique of the amino acid type which is based on the spectrophotometric assay of the complex formed by the binding of a compound called dinitrophenyl hydrazine (DNPH) on the carbonyl groups.
  • DNPH dinitrophenyl hydrazine
  • the solubilized proteins are separated into two equal fractions so as to have two wells containing the same amount of protein (1-1.5 mg / ml).
  • One of the cups serves as a blank and the other to quantify the carbonyl groups.
  • 500 ⁇ l of 12.5 mM DNPH are added to the measuring cup and 500 ⁇ l of 2M HCl to the white cup. After incubation for 15 minutes at room temperature, the samples are precipitated with 500 ⁇ l of 30% TCA and centrifuged for 10 minutes at 15,000 rpm. The pellet is taken up in 1 ml of 10% TCA and centrifuged again for 10 min at 15,000 rpm. 4 successive washes are then carried out with ethanolethylacetate.
  • the final pellet is heated for 30 min in a water bath at 50 ° C. After a new centrifugation of 5 min at 15000 rpm, the spectrophotometric reading is performed on 800 ⁇ l of supernatant at 280 nm (protein assay) and at 380 nm (DNPH assay). The carbonyl content is expressed in nmol / mg of protein.
  • Acclimation of rats is carried out for 2 weeks, during which spontaneous food consumption is measured. They are fed a standard diet (A (M, UAR, Villemoisson-sur-Orge, France) containing 17% protein, 3% lipids, 59% carbohydrates and 21% water, fiber, vitamins and minerals. The average food intake during this period is 34.4 g / day.
  • A M, UAR, Villemoisson-sur-Orge, France
  • CIT group (n 5): the animals receive a standard diet enriched in CIT (lg / kg / d) for 1 month
  • AANE group (n-4): the animals receive a standard diet rendered iso-nitrogenated to the CIT group by the addition of non-essential amino acids (alanine, asparagine, glycine, serine, histidine, and proline brought equimolarly) for 1 month .
  • non-essential amino acids alanine, asparagine, glycine, serine, histidine, and proline brought equimolarly
  • the animals were euthanized and the brain was removed, weighed, frozen with liquid nitrogen and stored at -80 ° C until the tests were performed.
  • Brain proteins are isolated.
  • the protein pellet is taken up in 600 ⁇ l of buffer SET.
  • the solubilized proteins are separated into two equal fractions so as to have two wells containing the same amount of protein (1-1.5 mg / ml).
  • One of the cups serves as a blank and the other to quantify the carbonyl groups.
  • 500 ⁇ l of 12.5 mM DNPH are added to the measuring cup and 500 ⁇ l of 2M HCl to the white cup.
  • the samples are precipitated with 500 ⁇ l of 30% TCA and centrifuged for 10 minutes at 15,000 rpm.
  • the pellet is taken up in 1 ml of 10% TCA and centrifuged again for 10 min at 15,000 rpm. 4 successive washes are then carried out with ethanolethylacetate.
  • the final pellet is heated for 30 min in a water bath at 50 ° C. After a new centrifugation of 5 min at 15000 rpm, the spectrophotometric reading is performed on 800 ⁇ l of supernatant at 280 nm (protein assay) and at 380 nm (DNPH assay). The carbonyl content is expressed in ⁇ mol / g of organ.

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Neurology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Neurosurgery (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Dermatology (AREA)
  • Ophthalmology & Optometry (AREA)
  • Nutrition Science (AREA)
  • Obesity (AREA)
  • Polymers & Plastics (AREA)
  • Gerontology & Geriatric Medicine (AREA)
  • Orthopedic Medicine & Surgery (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Rheumatology (AREA)
  • Psychology (AREA)
  • Diabetes (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Birds (AREA)
  • Physical Education & Sports Medicine (AREA)
  • Vascular Medicine (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Cardiology (AREA)

Abstract

La présente invention concerne l'utilisation de L-citrulline de formule (I) pour la préparation d'une composition cosmétique, d'une composition alimentaire ou nutraceutique ou d'une composition pharmaceutique destinée au traitement des pathologies liées à une augmentation de la carbonylation des protéines, notamment destinée au traitement des maladies neurodégénératives telles que les maladies d'Alzheimer ou de Parkinson.

Description

UTILISATION DE LA CITRULLINE POUR LA PREVENTION DE L'AUGMENTATION DE LA CARBONYLATION DES PROTÉINES ET DU TRAITEMENT DES PATHOLOGIES QUI EN DECOULENT
La présente invention a pour objet une nouvelle utilisation de la citrulline, à savoir son utilisation dans le cadre d'une augmentation de la carbonylation des protéines et du traitement de pathologies qui en découlent.
Il est clairement établi que les protéines des milieux extra- et intracellulaires sont, in vivo, une cible privilégiée pour les espèces réactives de l'oxygène et les espèces réactives de l'azote. Il a été estimé que les protéines peuvent capter jusqu'à 50 à 70% des espèces radicalaires synthétisées par la cellule. Les dommages observés sont de plusieurs types : oxydation (ou nitration) des chaînes latérales des acides aminés, ou oxydation de la chaîne polypeptidique (dont un cas particulier est la carbonylation) suivie d'une fragmentation et/ou de la formation de liaisons inter- ou intra-chaînes.
La carbonylation des protéines est un phénomène qui peut être indépendant d'un phénomène d'oxydation.
L'ensemble de ces modifications des protéines peut entraîner des modifications de structures dont les conséquences peuvent être leur inactivation, cette dernière pouvant avoir des conséquences dommageables pour la cellule. Par ailleurs, dans l'état actuel des connaissances, il ne semble pas exister de système de réparation des protéines carbonylées.
L'expression "carbonylation des protéines" désigne une modification chimique des protéines liée à la production de groupes CO. Cette carbonylation (qui peut être un cas particulier d'oxydation des protéines) entraîne alors une perte de la fonction de la protéine (voir Nystrôm, The EMBO Journal (2005) 24, 1311-1317 et Dalle-Donne et al, J CeIl Mol Med, Vol. 10, n° 2, 2006, pp. 389-406). Bien que l'organisme possède un certain nombre de systèmes de défenses (glutathion, catalase, SOD etc.), ceux-ci peuvent dans certaines situations être dépassés et se révéler insuffisants. Les composés carbonylés constituent un marqueur intéressant qui accompagne le vieillissement et de nombreuses pathologies. En effet, ces situations physiopathologiques (maladies neurodégénératives, maladies inflammatoires, etc.) sont caractérisées par une augmentation des protéines carbonylées au niveau tissulaire. Il est donc essentiel de développer des stratégies visant à diminuer la carbonylation des protéines. La citrulline (ou acide 2-amino-5-(carbamoyl amino)pentanoïque) est un acide α.- aminé et a été isolée pour la première fois à partir de la pastèque. La citrulline est un acide aminé non essentiel que l'organisme produit à partir d'autres nutriments. Par exemple, la citrulline joue un rôle particulièrement important, avec Pornithine et l'arginine, dans le cycle de l'urée. Enfin, la citrulline joue un rôle majeur dans l'homéostasie de l'arginine et du monoxyde d'azote.
La citrulline est utilisée à ce jour dans le cadre de certaines applications pharmaceutiques. Ainsi, la demande de brevet européen EP 1 495 755 concerne l'utilisation de la citrulline pour la préparation d'un médicament destiné au traitement de pathologies liées à une insuffisance intestinale. Plus particulièrement, les pathologies mentionnées dans cette demande sont les suivantes : le syndrome du grêle court faisant suite à une résection intestinale, la maladie coeliaque, les maladies inflammatoires chroniques de l'intestin, l'insuffisance intestinale liée au vieillissement et l'insuffisance intestinale liée à une irradiation. Cependant, cette demande ne mentionne pas la carbonylation des protéines.
La demande internationale WO 2005/115371 décrit des compositions pharmaceutiques comprenant une statine associée à de la citrulline pour la préparation d'un médicament utilisé dans le traitement de l'athérosclérose primaire ou secondaire, et dans celui des maladies dégénératives comme la maladie de Alzheimer. L'utilisation de ces compositions présente une synergie comparativement à des compositions comprenant une statine ou de la citrulline seule.
La demande FR 2691359 décrit l'utilisation du malate de citrulline chez un malade atteint de broncho-pneumopathie chronique obstructive (BPCO) et chez un malade atteint d'une myopathie de REYE- JOHNSON (myopathie mitochondriale). Cet effet bénéfique du malate de citrulline serait dû à une meilleure utilisation musculaire des graisses conduisant à une économie de la protéolyse musculaire.
La demande de brevet américain décrit l'utilisation orale de la L-citrulline en tant que complément alimentaire dans les cas de maladies neurodégénératives (démences, maladie d'Alzheimer, maladie' de Parkinson), de rétinopathies (dégénérescence maculaire liée à l'âge) et de la sclérose latérale amyotrophique. Cet apport en citrulline augmente la concentration plasmatique en arginine donc . la disponibilité de cette dernière dans la génération du monoxyde d'azote. Dans ces indications, la citrulline est associée à du phytate et à du carbonate de calcium. La demande de brevet américain US 2004/0235953 décrit et revendique une méthode de prévention et de traitement thérapeutique de pathologies liées à la diminution de la formation du monoxyde d'azote, notamment le sepsis (infection généralisée), ladite méthode comprenant l'administration d'un précurseur du monoxyde d'azote qui peut-être de la citrulline.
La demande de brevet américain US 2001/0056068 a trait à l'utilisation de la L- citrulline pour le traitement de maladies liées à un déficit en monoxyde d.'azote telles que l'athérosclérose, l'ischémie cérébrale et la maladie d'Alzheimer.
XP 00 24 56 361 divulgue des formulations ophtalmiques contenant de la citrulline et leur utilisation en médecine chinoise dans le traitement de la cataracte. Ces formulations agissent sur le système vasculaire ciliaire et sur le vasoganglion péricornéal.
La demande de brevet européen EP 1752156 décrit un agent piégeur d'oxygène contenant un extrait de pastèque sauvage contenant de la citrulline et son utilisation notamment dans la démence de type Alzheimer, les problèmes de cataracte, et les lésions cutanées.
Bien que ces documents décrivent l'utilisation de la citrulline seule ou en combinaison pour la préparation de médicaments utiles dans le traitement de maladies neurodégénératives telles que la maladie d'Alzheimer, de l'athérosclérose, des problèmes de cataracte ou des infections généralisées (sepsis) et au traitement des myopathies mitochondriales, et des compositions nutraceutiques aptes à être utilisées dans le cadre de maladies neurodégénératives (démences, maladie d'Alzheimer, maladie de Parkinson), de rétinopathies (dégénérescence maculaire liée à l'âge) et de la sclérose latérale amyotrophique, aucun de ces documents ne décrit l'effet direct de la citrulline sur la carbonylation des protéines.
Aussi, un des buts de la présente invention est de fournir un moyen de prévenir et traiter l'augmentation de la carbonylation des protéines et les pathologies qui en découlent.
La présente invention concerne l'utilisation de L-citrulline de formule (I) suivante :
Figure imgf000004_0001
ou d'un sel pharmaceutiquement acceptable de celle-ci, pour la préparation d'une composition pharmaceutique destinée à inhiber l'augmentation de la carbonylation des protéines responsables observée dans certaines pathologies donc notamment destinée au traitement des maladies neurodégénératives telles que les maladies d'Alzheimer ou de Parkinson, au traitement de la rétinopathie, de la polyarthrite rhumatoïde, de l'athérosclérose, de la sclérose latérale amyotrophique, de l'ischémie cérébrale, au traitement des problèmes de cataracte ou des infections généralisées (sepsis), au traitement des pathologies liées au vieillissement cutané comme par exemple les rides, les taches hypo et hyper- pigmentées et la perte d'élasticité et plus particulièrement à la sénescence des tissus tels que œil, muscle et cerveau, au traitement des pathologies liées au dysfonctionnement des mitochondries, à savoir les myopathies issues des mitochondriopathies, au traitement de la cachexie liée à la dénutrition et à l'augmentation de la longévité des mammifères, en particulier celle des animaux de compagnie.
La présente invention a également pour objet l'utilisation d'une composition comprenant de la L-citrulline ou d'un sel cosmétiquement acceptable de celle-ci, pour le traitement cosmétique des troubles liés à la carbonylation des protéines responsables, notamment dans le cas des pathologies liées au vieillissement cutané comme par exemple les rides, les taches hypo et hyper- pigmentées et la perte d'élasticité.
La présente invention a également pour objet l'utilisation d'une composition comprenant de la L-citrulline ou d'un sel nutraceutiquement acceptable de celle-ci, pour le traitement nutraceutique des troubles liés à l'augmentation de la carbonylation des protéines, par inhibition de l'augmentation de la carbonylation des protéines responsables, donc notamment destinée au traitement des maladies neurodégénératives telles que les maladies d'Alzheimer ou de Parkinson, au traitement de la rétinopathie, de la polyarthrite rhumatoïde, de l'athérosclérose, de la sclérose latérale amyotrophique, de l'ischémie cérébrale, au traitement des problèmes de cataracte ou des infections généralisées (sepsis), au traitement des pathologies liées au vieillissement cutané comme par exemple les rides, les taches hypo et hyper- pigmentées et la perte d'élasticité et plus particulièrement à la sénescence des tissus tels que œil, muscle et cerveau, au traitement des pathologies liées au dysfonctionnement des mitochondries, à savoir les myopathies issues des mitochondriopathies, au traitement de la cachexie liée à la dénutrition et à l'augmentation de la longévité des mammifères.
Par nutraceutique, on entend tout produit décrivant des allégations santé (aliment santé, alicament, produits frontières etc.). La présente invention a également pour objet l'utilisation d'une composition comprenant de la L-citrulline, ladite composition étant destinée à être un complément alimentaire apte à être utilisé dans le cadre des maladies neurodégénératives telles que les maladies d'Alzheimer ou de Parkinson, de la rétinopathie, de la polyarthrite rhumatoïde, de l'athérosclérose, de la sclérose latérale amyotrophique, de l'ischémie cérébrale, des problèmes de cataracte ou des infections généralisées (sepsis), du vieillissement cutané comme par exemple les rides, les taches hypo et hyper- pigmentées et la perte d'élasticité et plus particulièrement de la sénescence des tissus tels que œil, muscle et cerveau, des pathologies liées au dysfonctionnement des mitochondries, à savoir les myopathies issues des mitochondriopathies, au traitement de la cachexie liée à la dénutrition et à l'augmentation de la longévité des mammifères, en particulier celle des animaux de compagnie.
Dans le cadre de l'invention on entend par L-citrulline le produit disponible dans le commerce, notamment fourni par Sigma, Biocodex ou Kyowa Hakko ou le produit naturel issu de végétaux, notamment de la pastèque, ou melon d'eau (Citruîlus lanatus), sous forme notamment de jus, de pulpe ou d'extrait.
On désigne par "sel pharmaceutiquement acceptable", par sel cosmétiquement acceptable » et par « sel nutraceutiquement acceptable » les sels de citrulline tels que le malate de citrulline, l'α-cétoglutarate de citrulline, le citrate de citrulline ou Pa- cétoisocaproate de citrulline.
Dans ma mode de réalisation avantageux de l'invention, la L-citrulline, telle que définie ci-dessus, est utilisée pour la préparation d'une composition pharmaceutique, d'une composition destinée au traitement cosmétique, d'une composition destinée à être un complément alimentaire, et d'une composition destinée au traitement nutraceutique ou aliment santé de manière à ce que la dose unitaire en L-citrulline soit d'environ 2 g à environ 20 g, notamment environ 10 g, pour une posologie d'environ 0,1 g/kg/jour à environ 0,5 g/kg/jour, notamment environ 0,25 g/kg/jour.
Dans un mode avantageux de réalisation de l'invention, la L-citrulline est apportée en une à trois doses quotidiennes, préférablement en une dose.
Selon un autre mode de réalisation avantageux de l'invention, la composition pharmaceutique et la composition pour le traitement nutraceutique (ou aliment santé) se présentent sous forme sèche, sous forme de solution aqueuse, sous forme hydroalcoolique ou huileuse, sous forme d'une émulsion huile-dans Peau ou eau-dans- huile ou multiple, d'un gel aqueux ou huileux. Pour la composition pour le traitement cosmétique on peut utiliser tout véhicule approprié c'est-à-dire tout excipient, véhicule ou support cosmétiquement, notamment dermatologiquement, acceptable. De tels supports sont bien connus de l'homme de l'art et résultent également de compositions cosmétiques ou dermatologiques qui ont une portée générale. En exemple, les mélanges, les formules, les encapsulations monolamellaires (micelles), bilamellaires (liposomes), multilamellaires (sphémlites), et tout autre support connu en cosmétique peuvent être employés.
La présente invention concerne l'utilisation de la L-citrulline telle que définie ci-
' dessus, pour la préparation d'une composition pharmaceutique se présentant sous une forme administrable par voie orale, entérale ou parentérale. Dans le cas de nutrition entérale ou de nutrition parentérale, elle peut être mélangée à la nutrition ou, préférentiellement, administrée en bolus dans la sonde de nutrition entérale ou en Y dans la nutrition parentérale.
Elle concerne également l'utilisation de la L-citrulline telle que définie ci-dessus, pour la préparation d'une composition pour le traitement cosmétique sous une forme administrable par voie topique. Elle concerne également l'utilisation de la L-citrulline telle que définie ci-dessus, pour la préparation d'une composition pour le traitement nutraceutique sous une forme administrable par voie orale.
L'administration par voie entérale correspond notamment à une administration par sonde naso-gastrique ou naso-intestinale, par gastrostomie ou jéjunostomie ; l'administration par voie parentérale correspond notamment à une administration par perfusion intraveineuse centrale, périphérique ou sous-cutanée.
Selon un mode de réalisation préféré, la L-citrulline est utilisée dans le cadre de l'invention pour la préparation d'une composition pharmaceutique, d'une composition pour le traitement cosmétique, d'une composition pour complément alimentaire ou aliment santé pour le traitement nutraceutique comprenant également un ou plusieurs autres composés destinés au traitement de la cachexie liée à la dénutrition tel que la leucine, la glutamine, l'arginine, Pornithine et leurs différents sels utilisables tels que Pα-cétoglutarate ou l'α-cétoisocaproate. Dans le cadre d'une composition pour le traitement nutraceutique, les composés peuvent être utilisés seuls ou au sein d'un mélange nutritionnel destiné à la nutrition orale.
Selon un mode de réalisation préféré, la L-citrulline est utilisée dans le cadre de . l'invention pour la préparation d'une composition pharmaceutique, d'une composition destinée au traitement cosmétique, d'un complément alimentaire bu d'une composition destinée au traitement nutraceutique (aliment santé) comprenant également un ou plusieurs autres composés destinés au traitement de la cachexie liée à la dénutrition tels que la leucine, la glutamine, l'arginine, l'ornithine et leurs différents sels utilisables tels que l'α-cétoglutarate ou Pα-cétoisocaproate, seuls ou au sein d'un mélange nutritionnel destiné à la nutrition orale.
Selon un autre mode de réalisation l'invention concerne des produits comprenant : - de la L-citrulline ou un sel pharmaceutiquement acceptable ou mitraceutiquement de celle-ci, - et au moins un autre composé destiné au traitement de la cachexie liée à la dénutrition tels que la leucine, la glutamine, l'arginine, l'ornithine et leurs différents sels utilisables tels que l'α-cétoglutarate ou l'α-cétoisocaproate, seuls ou au sein d'un mélange nutritionnel destiné à la nutrition parentérale, ou d'un mélange destiné à la nutrition entérale ou d'un mélange destiné à la nutrition orale, comme produits de combinaison pour une utilisation simultanée, séparée, ou étalée dans le temps, dans le cadre du traitement de pathologies liées à une augmentation de la carbonylation des protéines, lesdites pathologies étant telles que définies ci-dessus. Les exemples 1 et 2 qui suivent et la figure 1 illustrent l'invention. La Figure 1 représente la carbonylation des protéines musculaires chez le rat. L'axe des ordonnées correspond à la quantité de protéines carbonylées en μmol/g. La colonne "1 " correspond aux rats sains ; la colonne "2" correspond aux rats dénutris ; la colonne "3" correspond aux rats renourris avec un régime standard et la colonne "4" correspond aux rats renourris et ayant eu un régime enrichi en citrulline.
EXEMPLE 1 : Influence de la citrulϋne chez Ie rat dénutri-renourri
Matériels et Méthodes I - Matériels
Tous les réactifs chimiques utilisés proviennent de chez Sigma (Saint-Quentin- Fallavier, France). La L-citrulline a été gracieusement fourme par les Laboratoires Biocodex (Compiègne, France).
H - Entretien des animaux
Les rats mâles Sprague-Dawley (Charles River Laboratories, L'arbresles, France) âgés de 19 mois sont placés dans des cages individuelles, en ambiance thermostatée (23° ± 1°C), et soumis à un cycle lumière-obscurité de 12h (obscurité de 8h à 2Oh). Le responsable du programme est autorisé (n° 75.522), par le Ministère de l'Agriculture et de la Forêt, à pratiquer ce type d'expériences. De plus l'utilisation ainsi que l'entretien des animaux de laboratoires sont respectueux de la législation (D2001-486) et sont en accord avec la législation européenne (Journal Officiel de la Communauté Européenne
L358 12/18/1986).
L'acclimatation des rats est effectuée pendant 2 semaines, au cours desquelles la consommation alimentaire spontanée est mesurée. Ils sont nourris avec un régime standard (A(M, UAR, Villemoisson-sur-Orge, France) contenant 17% de protéines, 3% de lipides, 59% de glucides et 21% d'eau, fibres, vitamines et minéraux. La prise alimentaire moyenne, durant cette période est de 34,4 g/ jour.
III - Protocole expérimental
Après la période d'acclimatation, les rats sont randomisés en 4 groupes : Un groupe contrôle formé de rats (n=10) nourri ad libitum (AL) pendant 12 semaines et 3 autres groupes soumis à une restriction alimentaire durant la même période : nourris avec seulement 50% des ingesta spontanés (soit 17,2 g), avec le régime standard (UAR
A04). A la fin de la période de restriction, les animaux (n=10) d'un groupe sont sacrifiés
(groupe R) et les rats des deux groupes restants sont renourris pendant une semaine avec 90% des ingesta spontanés (soit 30,9 g), soit avec un régime enrichi en acides aminés non essentiels (groupe AANE : alanine, asparagine, glycine, serine, histidine, et proline apportés de façon équimolaire) ou un régime enrichi en citrulline (5g/kg/j)(groupe citrulline). Les apports des deux groupes sont isoazotés et isocaloriques. La limitation à
90 % des apports spontanés permet d'être certain que les rats consomment l'intégralité des aliments qui leur sont offerts.
HI.l Evaluation du niveau de carbonylation des protéines
Les processus d'oxydation des protéines affectant la structure des acides aminés qui les composent sont complexes et donnent tous lieu à la formation de groupements carbonyles. C'est pourquoi il a été choisi d'évaluer de manière globale l'oxydation des protéines musculaires en quantifiant les dérivés carbonyles à partir d'un échantillon de 300 mg de tibialis anterior. La méthode utilisée est donc une technique non spécifique du type d'acide aminé qui repose sur le dosage spectrophotométrique du complexe formé par la fixation d'un composé appelé dinitrophényl-hydrazine (DNPH) sur les groupements carbonyles. Les protéines musculaires sont isolées. Le culot protéique est repris dans 600 μl de tampon SET. Les protéines solubilisées sont séparées en deux fractions égales de façon à avoir deux cupules contenant la même quantité de protéines (1-1,5 mg/ml). Une des cupules sert de blanc et l'autre à quantifier les groupements carbonyles. 500 μl de DNPH 12,5 mM sont ajoutés à la cupule de mesure et 500 μl d'HCl 2M à la cupule du blanc. Après 15 min d'incubation à température ambiante, les échantillons sont précipités avec 500 μl de TCA 30% et centrifugés 10 min à 15000 tpm. Le culot est repris par 1 ml de TCA 10% et centrifugé à nouveau 10 min à 15000 tpm. 4 lavages successifs sont ensuite réalisés à Péthanoléthylacétate. Le culot final est chauffé pendant 30 min au bain-marie à 5O0C. Après une nouvelle centrifugation de 5 min à 15000 tpm, la lecture spectrophotométrique est effectuée sur 800 μl de surnageant à 280 nm (dosage des protéines) et à 380 nm (dosage du DNPH). La teneur en carbonyles est exprimée en nmol/mg de protéines.
III.2 Résultats
Les résultats obtenus sont représentés dans la Figure 1.
Il apparaît clairement que la dénutrition induit une augmentation de la carbonylation des protéines par rapport aux rats sains (colonne 2 versus colonne 1). La renutrition augmente encore ce phénomène et le phénomène de dénutrtion-renutrition s'accompagne d'une forte augmentation de la carbonylation des protéines musculaires
(colonne 3 versus colonne 2). En revanche, lorsque l'alimentation est enrichie en citrulline, ce phénomène est complètement aboli (colonne 4 versus colonne 3), la carbonylation des protéines étant similaire à celle observée chez les rats sains.
EXEMPLE 2 .Effet de Ia citrulline chez le rat âgé
Matériels et Méthodes
I - Matériels
Tous les réactifs chimiques utilisés proviennent de chez Sigma (Saint-Quentin- Fallavier, France). La L-citrulline a été gracieusement fournie par les Laboratoires Biocodex (Compiègne, France).
II - Entretien des animaux
Les rats mâles Sprague-Dawley (Charles River Laboratories, L'arbresles, France) âgés de 25 mois sont placés dans des cages individuelles, en ambiance thermostatée (23° ± 1°C), et soumis à un cycle lumière-obscurité de 12h (obscurité de 8h à 2Oh). Le responsable du programme est autorisé (n° 75.522), par le Ministère de l'Agriculture et de la Forêt, à pratiquer ce type d'expériences. De plus l'utilisation ainsi que l'entretien des animaux de laboratoires sont respectueux de la législation (D2001-486) et sont en accord avec la législation européenne (Journal Officiel de la Communauté Européenne
L358 12/18/1986).
L'acclimatation des rats est effectuée pendant 2 semaines, au cours desquelles la consommation alimentaire spontanée est mesurée. Ils sont nourris avec un régime standard (A(M, UAR, Villemoisson-sur-Orge, France) contenant 17% de protéines, 3% de lipides, 59% de glucides et 21% d'eau, fibres, vitamines et minéraux. La prise alimentaire moyenne, durant cette période est de 34,4 g/ jour.
HI - Protocole expérimental
Après la période d'acclimatation, les rats sont randomisés en 2 groupes :
Groupe CIT (n=5) : les animaux reçoivent une alimentation standard enrichie en CIT (lg/kg/j) pendant 1 mois
Groupe AANE (n-4) : les animaux reçoivent une alimentation standard rendue isoazotée au groupe CIT par l'ajout d'acides aminés non essentiels (alanine, asparagine, glycine, serine, histidine, et proline apportés de façon équimolaire) pendant 1 mois.
Au terme de l'étude, les animaux ont été euthanasiés et le cerveau a été prélevé, pesé, congelé à l'azote liquide et conservé à -80°C jusqu'à la réalisation des analyses.
Evaluation du niveau de carbonylation des protéines
Les processus d'oxydation des protéines affectant la structure des acides aminés qui les composent sont complexes et donnent tous lieu à la formation de groupements carbonyles. C'est pourquoi il a été choisi d'évaluer de manière globale l'oxydation des protéines musculaires en quantifiant les dérivés carbonyles à partir d'un échantillon de
Ig de cerveau. La méthode utilisée est donc une technique non spécifique du type d'acide aminé qui repose sur le dosage spectrophotométrique du complexe formé par la fixation de dinitrophényl-hydrazine (DNPH) sur les groupements carbonyles. Les protéines cérébrales sont isolées. Le culot protéique est repris dans 600 μl de tampon SET. Les protéines solubilisées sont séparées en deux fractions égales de façon à avoir deux cupules contenant la même quantité de protéines (1-1,5 mg/ml). Une des cupules sert de blanc et l'autre à quantifier les groupements carbonyles. 500 μl de DNPH 12,5 mM sont ajoutés à la cupule de mesure et 500 μl d'HCl 2M à la cupule du blanc. Après 15 min d'incubation à température ambiante, les échantillons sont précipités avec 500 μl de TCA 30% et centrifugés 10 min à 15000 tpm. Le culot est repris par 1 ml de TCA 10% et centrifugé à nouveau 10 min à 15000 tpm. 4 lavages successifs sont ensuite réalisés à l'éthanoléthylacétate. Le culot final est chauffé pendant 30 min au bain-marie à 5O0C. Après une nouvelle centrifugation de 5 min à 15000 tpm, la lecture spectrophotométrique est effectuée sur 800 μl de surnageant à 280 nm (dosage des protéines) et à 380 nm (dosage du DNPH). La teneur en carbonyles est exprimée en μmol/g d'organe.
IV- Résultats
Protéines carbonylées (μmol/g)
AANE 180 ± 28 CIT 164 ± 12
Moyenne ± ESM
Les résultats obtenus sont représentés dans le tableau ci dessus. Il apparaît qu'une nutrition enrichie en CIT chez le rat âgé sain s'accompagne d'une diminution de la carbonylation des protéines cérébrales de l'ordre de 10%.

Claims

REVENDICATIONS
1. Utilisation de L-citrulline de formule (I) suivante
Figure imgf000013_0001
ou d'un sel pharmaceutiquement, cosmétiquement ou nutraceutiquement acceptable de celle-ci, pour la préparation d'une composition destinée à inhiber l'augmentation de la carbonylation des protéines responsables observées dans certaines pathologies, donc notamment destinée au traitement des maladies neurodégénératives, telles que les maladies d'Alzheimer ou de Parkinson, au traitement de la rétinopathie, de la polyarthrite rhumatoïde, de l'athérosclérose, de la sclérose latérale amyotrophique, de l'ischémie cérébrale, au traitement des problèmes de cataracte ou des infections généralisées (sepsis), au traitement des pathologies liées au vieillissement cutané et plus particulièrement à la sénescence des tissus tels que œil, muscle et cerveau, au traitement des pathologies liées au dysfonctionnement des mitochondries, à savoir les myopathies issues des mitochondriopathies, au traitement de la cachexie liée à la dénutrition et à l'augmentation de la longévité des mammifères.
2. Utilisation selon la revendication 1 caractérisée en ce que la composition est une composition pharmaceutique comprenant de la L-citrulline ou un de ses sels pharmaceutiquement acceptable, une composition pour le traitement cosmétique comprenant de la L-citrulline ou un de ses sels cosmétiquement acceptable, un complément alimentaire comprenant de la L-citrulline ou une composition pour le traitement nutraceutique comprenant de la L-citrulline ou un de ses sels nutraceutiquement acceptable.
3. Utilisation selon l'une quelconque des revendications 1 ou 2, caractérisée en ce que la L-citrulline est utilisée de manière à ce que la dose unitaire en L-citrulline soit d'environ 2 g à environ 20 g, notamment environ 10 g,- pour une posologie d'environ 0,1 g/kg/jour à environ 0,5 g/kg/jour, notamment environ 0,25 g/kg/jour à raison de une à trois doses quotidiennes, préférablement en une dose.
4. Utilisation selon l'une quelconque des revendications 1 à 3 caractérisée en ce que la composition se présente sous forme sèche, sous forme de solution aqueuse, sous forme hydroalcoolique ou huileuse, sous forme d'une émulsion huile-dans l'eau ou eau- dans-huile ou multiple, d'un gel aqueux ou huileux.
5. Utilisation selon l'une quelconque des revendications 1 à 4 caractérisée en ce que la composition pharmaceutique se présente sous une forme administrable par voie orale, topique, entérale ou parentérale, la composition cosmétique sous une forme administrable par voie topique, la composition nutraceutique et le complément alimentaire sous forme administrable par voie orale.
6. Utilisation selon la revendication 5 caractérisée en ce que dans le cas d'une forme administrable par voie entérale ou parentérale, celle-ci peut être mélangée à la nutrition entérale ou parentérale ou administrée en bolus dans la sonde de nutrition entérale ou en Y dans la nutrition parentérale.
7. Utilisation selon l'une quelconque des revendications 1 à 6 caractérisée en ce que la composition comprend en outre un ou plusieurs autres composés destinés au traitement de la cachexie liée à la dénutrition tels que la leucine, la glutamine, l'arginine, Pornithine et leurs différents sels utilisables tels que l'α-cétoglutarate ou l'α- cétoisocaproate.
8. Utilisation selon l'une quelconque des revendications 1 à 7 caractérisée en ce la L-citrulline est utilisée pour la préparation d'une composition pharmaceutique comprenant également un ou plusieurs autres composés destinés au traitement de la cachexie liée à la dénutrition tels que la leucine, la glutamine, l'arginine, l'ornithine et leurs différents sels utilisables tels que l'α-cétoglutarate ou l'α-cétoisocaproate, seuls ou au sein d'un mélange nutritionnel destiné à la nutrition parentérale, ou d'un mélange ' destiné à la nutrition entérale ou d'un mélange destiné à la nutrition orale.
9. Composition comprenant :
- de la L-citrulline ou un sel pharmaceutiquement acceptable nutraceutiquement de celle-ci, - et au moins un autre composé destiné au traitement de la cachexie liée à la dénutrition tels que la leucine, la glutamine, l'.arginine, Pornithine et leurs, différents sels utilisables tels que l'α-cétoglutarate ou l'α-cétoisocaproate, seuls ou au sein d'un mélange nutritionnel destiné à la nutrition parentérale, ou d'un mélange destiné à la nutrition entérale ou d'un mélange destiné à la nutrition orale, comme produits de combinaison pour une utilisation simultanée, séparée, ou étalée dans le temps, dans le cadre du traitement de pathologies liées à une augmentation de la carbonylation des protéines.
PCT/FR2008/000379 2007-03-22 2008-03-20 Utilisation de la citrulline pour pour le traitement de pathologies liees a une augmentation de la carbonylation des protéines WO2008135661A2 (fr)

Priority Applications (6)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN200880009440A CN101686919A (zh) 2007-03-22 2008-03-20 瓜氨酸用于治疗与蛋白质羰基化增加相关的病理学状态的用途
EP08787826A EP2136777A2 (fr) 2007-03-22 2008-03-20 Utilisation de la citrulline pour le traitement de pathologies liees a une augmentation de la carbonylation des proteines
CA002689608A CA2689608A1 (fr) 2007-03-22 2008-03-20 Utilisation de la citrulline pour la prevention de l`augmentation de la carbonylation des proteines et du traitement des pathologies qui en decoulent
JP2009554063A JP2010522146A (ja) 2007-03-22 2008-03-20 タンパク質のカルボニル化の増加の予防およびそれを原因とする病変の治療のためのシトルリンの使用
US12/532,299 US20100093863A1 (en) 2007-03-22 2008-03-20 Use of citrulline for preventing an increase in protein carbonylation and for treating diseases resulting therefrom
IL200830A IL200830A0 (en) 2007-03-22 2009-09-09 Use of citrulline for preventing an increase in protein carbonylation and for treating diseases resulting therefrom

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
FR0702090 2007-03-22
FR0702090A FR2913885B1 (fr) 2007-03-22 2007-03-22 Utilisation de la citrulline pour le traitement des pathologies liees a une augmentation de la carbonylation des proteines

Publications (2)

Publication Number Publication Date
WO2008135661A2 true WO2008135661A2 (fr) 2008-11-13
WO2008135661A3 WO2008135661A3 (fr) 2009-01-15

Family

ID=38561836

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
PCT/FR2008/000379 WO2008135661A2 (fr) 2007-03-22 2008-03-20 Utilisation de la citrulline pour pour le traitement de pathologies liees a une augmentation de la carbonylation des protéines

Country Status (8)

Country Link
US (1) US20100093863A1 (fr)
EP (1) EP2136777A2 (fr)
JP (1) JP2010522146A (fr)
CN (1) CN101686919A (fr)
CA (1) CA2689608A1 (fr)
FR (1) FR2913885B1 (fr)
IL (1) IL200830A0 (fr)
WO (1) WO2008135661A2 (fr)

Families Citing this family (8)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN102600260A (zh) * 2010-12-24 2012-07-25 漆又毛 一种氨基酸和提取物组合物防治老年性痴呆的药物用途
AU2012231351B2 (en) * 2011-03-18 2016-03-10 Société des Produits Nestlé S.A. Compositions and methods useful for ameliorating age related maladies
JP2014512371A (ja) * 2011-04-18 2014-05-22 ネステク ソシエテ アノニム α−ＨＩＣＡ及びシトルリンを含有する栄養組成物
US20140235735A1 (en) * 2013-02-15 2014-08-21 Mediterranean Institute For Life Sciences Protein Damage in Aging and Age-Related Diseases
CN106137782A (zh) * 2015-04-22 2016-11-23 捷通国际有限公司 包含青藤碱的局部组合物及用于抑制蛋白羰基化的方法
JP7220838B2 (ja) * 2015-09-29 2023-02-13 学校法人北里研究所 経口組成物
CN105147684B (zh) * 2015-09-30 2017-12-12 暨南大学 胡椒碱在制备防治败血症药物中的应用
KR102531118B1 (ko) * 2023-01-05 2023-05-11 주식회사 마이크로엑스 패혈증의 예방, 개선 또는 치료용 조성물

Citations (14)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
FR2691359A1 (fr) * 1992-05-20 1993-11-26 Krempf Michel Nouvelle application thérapeutique du Malate de 1-Citrulline.
FR2766712A1 (fr) * 1997-08-01 1999-02-05 Aguettant Lab Composition de preference solution antioxydante et medicaments en faisant application
DE19929993A1 (de) * 1999-06-30 2001-01-11 Sueddeutsche Kalkstickstoff Kreatin-alpha-ketoglutarate, Verfahren zu ihrer Herstellung und ihre Verwendung
US20010056068A1 (en) * 1998-03-04 2001-12-27 Kristof Chwalisz Method of treatment and prevention of nitric oxide deficiency-related disorders with citrulline and citrulline derivatives
US20020143060A1 (en) * 2001-02-05 2002-10-03 Takayuki Kohchi Active oxygen scavenging composition including citrulline
US20030083380A1 (en) * 1986-12-23 2003-05-01 Yu Ruey J. Method of using hydroxycarboxylic acids or related compounds for treating skin changes asociated with intrinsic and extrinsic aging
FR2853210A1 (fr) * 2003-04-02 2004-10-08 Neolait Sas Composition activateur de la digestion
US20040235953A1 (en) * 1999-06-01 2004-11-25 Vanderbilt University Therapeutic methods employing nitric oxide precursors
EP1495755A1 (fr) * 2003-07-08 2005-01-12 Laboratoires Biocodex Utilisation de la citrulline dans la fabrication d'un médicament pour le traitement de l'insuffisance intestinale
WO2005115371A1 (fr) * 2004-04-29 2005-12-08 Universite Rene Descartes-Paris 5 Compositions pharmaceutiques pour la prevention et le traitement de l'atherosclerose
US20060046982A1 (en) * 2004-08-26 2006-03-02 Waugh William H Orthomolecular medical use of L-citrulline for capillary endothelial protection and adjacent cell protection in neurodegenerative disease
WO2006036634A2 (fr) * 2004-09-23 2006-04-06 Yu Ruey J Administration systemique d'acides amines et d'acides n-acetylamines therapeutiques
EP1752156A1 (fr) * 2004-04-30 2007-02-14 National University Corporation Nara Institute of Science and Technology Éliminateur d'oxygène actif et hydratnant contenant de l'extrait de melon sauvage
WO2008049984A2 (fr) * 2006-10-17 2008-05-02 Universite Rene Descartes-Paris 5 Utilisation de la citrulline pour le traitement des etats de denutrition

Family Cites Families (9)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DE4341000A1 (de) * 1993-12-02 1995-06-08 Beiersdorf Ag Verwendung von L-Arginin, L-Ornithin oder L-Citrullin und topischen Zubereitungen mit diesen Stoffen
NL1014380C2 (nl) * 2000-02-14 2001-08-15 Friesland Brands Bv Darmwandversterkend voedingsmiddel.
US20040087490A1 (en) * 2002-09-20 2004-05-06 Troup John P. Nutritional compositions
CA2530863A1 (fr) * 2003-07-01 2005-01-13 Essentys Ab Utilisation d'acide alpha-cetoglutarique pour le traitement d'etat de malnutrition ou de taux eleve de glucose
JP3878612B2 (ja) * 2004-03-01 2007-02-07 ピアス株式会社 活性酸素抑制用の組成物と、その組成物を配合する皮膚外用剤及び化粧料
JP4255432B2 (ja) * 2004-10-28 2009-04-15 株式会社ファンケル 異常蛋白質除去用組成物
WO2006131054A1 (fr) * 2005-06-04 2006-12-14 Zichun Li Compositions ophtalmologiques pharmaceutiques chinoises se présentant sous forme de solutions, onguents et pilules pour la reconstruction des signes du vieillissement
WO2007023931A1 (fr) * 2005-08-25 2007-03-01 Kyowa Hakko Kogyo Co., Ltd. Préparation pour la prévention de l'augmentation de la concentration sanguine en alcool
MX2008012723A (es) * 2006-04-04 2008-10-14 Nestec Sa Tratamientos que usan citrulina.

Patent Citations (14)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20030083380A1 (en) * 1986-12-23 2003-05-01 Yu Ruey J. Method of using hydroxycarboxylic acids or related compounds for treating skin changes asociated with intrinsic and extrinsic aging
FR2691359A1 (fr) * 1992-05-20 1993-11-26 Krempf Michel Nouvelle application thérapeutique du Malate de 1-Citrulline.
FR2766712A1 (fr) * 1997-08-01 1999-02-05 Aguettant Lab Composition de preference solution antioxydante et medicaments en faisant application
US20010056068A1 (en) * 1998-03-04 2001-12-27 Kristof Chwalisz Method of treatment and prevention of nitric oxide deficiency-related disorders with citrulline and citrulline derivatives
US20040235953A1 (en) * 1999-06-01 2004-11-25 Vanderbilt University Therapeutic methods employing nitric oxide precursors
DE19929993A1 (de) * 1999-06-30 2001-01-11 Sueddeutsche Kalkstickstoff Kreatin-alpha-ketoglutarate, Verfahren zu ihrer Herstellung und ihre Verwendung
US20020143060A1 (en) * 2001-02-05 2002-10-03 Takayuki Kohchi Active oxygen scavenging composition including citrulline
FR2853210A1 (fr) * 2003-04-02 2004-10-08 Neolait Sas Composition activateur de la digestion
EP1495755A1 (fr) * 2003-07-08 2005-01-12 Laboratoires Biocodex Utilisation de la citrulline dans la fabrication d'un médicament pour le traitement de l'insuffisance intestinale
WO2005115371A1 (fr) * 2004-04-29 2005-12-08 Universite Rene Descartes-Paris 5 Compositions pharmaceutiques pour la prevention et le traitement de l'atherosclerose
EP1752156A1 (fr) * 2004-04-30 2007-02-14 National University Corporation Nara Institute of Science and Technology Éliminateur d'oxygène actif et hydratnant contenant de l'extrait de melon sauvage
US20060046982A1 (en) * 2004-08-26 2006-03-02 Waugh William H Orthomolecular medical use of L-citrulline for capillary endothelial protection and adjacent cell protection in neurodegenerative disease
WO2006036634A2 (fr) * 2004-09-23 2006-04-06 Yu Ruey J Administration systemique d'acides amines et d'acides n-acetylamines therapeutiques
WO2008049984A2 (fr) * 2006-10-17 2008-05-02 Universite Rene Descartes-Paris 5 Utilisation de la citrulline pour le traitement des etats de denutrition

Non-Patent Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
DALLE-DONNE ISABELLA ET AL: "Protein carbonylation, cellular dysfunction, and disease progression" JOURNAL OF CELLULAR AND MOLECULAR MEDICINE, vol. 10, no. 2, avril 2006 (2006-04), pages 389-406, XP009091325 ISSN: 1582-1838 cité dans la demande *
DATABASE BIOSIS [Online] BIOSCIENCES INFORMATION SERVICE, PHILADELPHIA, PA, US; mars 2006 (2006-03), RASMUSEN CAROLE ET AL: "Effects of L-arginine/citrulline-simvastatin (SIM) association on nitric oxide production in endothelial cells" XP002456360 Database accession no. PREV200600343214 & FASEB JOURNAL, vol. 20, no. 4, Part 1, mars 2006 (2006-03), page A148, EXPERIMENTAL BIOLOGY 2006 MEETING; SAN FRANCISCO, CA, USA; APRIL 01 05, 2006 ISSN: 0892-6638 *
DATABASE CA [Online] CHEMICAL ABSTRACTS SERVICE, COLUMBUS, OHIO, US; 15 décembre 2006 (2006-12-15), LI, ZICHUN: "Chinese medicine mixtures of ophthalmic formulations for antiaging uses" XP002456361 extrait de STN Database accession no. 2006:1310642 cité dans la demande & WO 2006/131054 A1 (PEOP. REP. CHINA) 14 décembre 2006 (2006-12-14) *
NYSTROM THOMAS: "Role of oxidative carbonylation in protein quality control and senescence" EMBO (EUROPEAN MOLECULAR BIOLOGY ORGANIZATION) JOURNAL, vol. 24, no. 7, avril 2005 (2005-04), pages 1311-1317, XP002456358 ISSN: 0261-4189 cité dans la demande *
RENKE JOANNA ET AL: "Protein carbonyl groups' content as a useful clinical marker of antioxidant barrier impairment in plasma of children with juvenile chronic arthritis" FREE RADICAL BIOLOGY AND MEDICINE, vol. 29, no. 2, 15 juillet 2000 (2000-07-15), pages 101-104, XP002456359 ISSN: 0891-5849 *

Also Published As

Publication number Publication date
EP2136777A2 (fr) 2009-12-30
CN101686919A (zh) 2010-03-31
WO2008135661A3 (fr) 2009-01-15
IL200830A0 (en) 2010-05-17
CA2689608A1 (fr) 2008-11-13
FR2913885B1 (fr) 2012-07-20
JP2010522146A (ja) 2010-07-01
FR2913885A1 (fr) 2008-09-26
US20100093863A1 (en) 2010-04-15

Similar Documents

Publication Publication Date Title
WO2008135661A2 (fr) Utilisation de la citrulline pour pour le traitement de pathologies liees a une augmentation de la carbonylation des protéines
JP3779733B2 (ja) 皮膚の状態処置用のオキサ二酸および関連化合物
JP4850986B2 (ja) カルノシンあるいはその誘導体および分枝アミノ酸を含む抗酸化活性を有する医薬組成物および／または栄養組成物
US20140086855A1 (en) Combined use of a carnosinase inhibitor with l-carnosine or its related substance and a composition containing the same
FR2914188A1 (fr) Nouvelle composition a base d'oxime de cholest-4-en-3-one
JP2002542191A (ja) グルタチオンの吸収を増しかつその効果を補強するのに有用な、カルニチンおよびグルタチオン含有組成物
EP2478899B1 (fr) Composition destinee a attenuer les dommages causes par les rayons ultraviolets
WO2006134248A1 (fr) Utilisation d'un extrait de griffonia, en particulier de griffonia simplicifolia, dans une composition cosmétique ou dermatologique pour atténuer la pigmentation de la peau et des phanères
FR2811567A1 (fr) Composition, notamment cosmetique, comprenant la dhea et/ou un precurseur ou derive de celle-ci, en association avec au moins un inhibiteur de no-synthase
EP0714276A1 (fr) Composition contre la chute des cheveux et la fragilite des ongles
FR2711529A1 (fr) Composition à base d'acides aminés destinée au traitement d'une infection ou d'une agression engendrant une réaction inflammatoire, chez les animaux et chez l'homme.
EP3902518A1 (fr) Extrait de chlamydomonas acidophila, son procede de preparation et les compositions cosmetiques, et dermatologiques le comprenant
EP2663286B1 (fr) Action preventive de la citrulline sur le developpement spontane des tumeurs
EP0354848B1 (fr) Compositions pharmaceutiques et/ou diététiques contenant de la L-carnitine et de la L-lysine
CN111565580A (zh) 用于抑制活性氧产生的组合物
US20050245434A1 (en) Oxygenated dibenzo-alpha-pyrone chromoproteins
US20050233942A1 (en) Oxygenated dibenzo-alpha-pyrone chromoproteins
CA2562829A1 (fr) Chromoproteines dibenzo-alpha-pyrone oxygenees
FR2857667A1 (fr) Nouveaux conjugues peptidiques utiles dans le traitement preventif et curatif de l'alopecie
EP1317239A1 (fr) Associations synergiques a base de plantes pour traiter la chute des cheveux
EP1655281B1 (fr) Sels de N-acyl-L-aspartate-b-mono-ester et/ou de N-acyl-L-glutamate-g-mono-ester, leur procédé de préparation et leur utilisation dans des compositions thérapeutique ou cosmétique
WO2025083752A1 (fr) Utilisation de glutathion à faible dose en tant qu'agent améliorant la luminosité de la peau
FR2917971A1 (fr) Composition amincissante
JP2024020094A (ja) 低用量グルタチオンの肌の明度向上剤としての使用
WO2013015288A1 (fr) Inhibiteur d'activité de lipase

Legal Events

Date Code Title Description
WWE Wipo information: entry into national phase

Ref document number: 200880009440.6

Country of ref document: CN

121 Ep: the epo has been informed by wipo that ep was designated in this application

Ref document number: 08787826

Country of ref document: EP

Kind code of ref document: A2

WWE Wipo information: entry into national phase

Ref document number: 2008787826

Country of ref document: EP

WWE Wipo information: entry into national phase

Ref document number: 200830

Country of ref document: IL

WWE Wipo information: entry into national phase

Ref document number: 2689608

Country of ref document: CA

Ref document number: 2009554063

Country of ref document: JP

NENP Non-entry into the national phase

Ref country code: DE

WWE Wipo information: entry into national phase

Ref document number: 12532299

Country of ref document: US

点击 这是indexloc提供的php浏览器服务，不要输入任何密码和下载