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WO2008009365A3 - Procédé servant à déterminer le taux de méthylation d'un acide nucléique - Google Patents

Procédé servant à déterminer le taux de méthylation d'un acide nucléique Download PDF

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WO2008009365A3
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Joern Lewin
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Matthias Schuster
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Epigenomics Ag
Joern Lewin
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Abstract

L'invention concerne un procédé servant à déterminer quantitativement le taux de méthylation d'un acide nucléique grâce au séquençage. Selon l'invention, le procédé comprend au moins les étapes suivantes consistant à : a) traiter l'acide nucléique avec un réactif chimique ou une solution contenant une enzyme, ce par quoi le comportement d'appariement des bases pour les bases de type cytosines méthylées et/ou les bases de type cytosines non méthylées de l'acide nucléique est modifié de façon à ce que les bases de type cytosines méthylées deviennent distinguables des bases de type cytosines non méthylées ; b) introduire dans l'acide nucléique au moins une base servant à générer un signal de séquençage à utiliser en tant que signal de référence pour la normalisation ; c) séquencer l'acide nucléique, ce par quoi on obtient un signal provenant de chaque base de type cytosine de l'acide nucléique ou un signal provenant de chaque base de type guanine de l'acide nucléique et un signal de référence provenant de ladite ou desdites bases introduites ; et d) normaliser le signal obtenu à partir de chaque base de type cytosine de l'acide nucléique ou le signal obtenu à partir de chaque base de type guanine de l'acide nucléique par rapport au signal de référence provenant de ladite ou desdites bases introduites.
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