WO2008005559A3 - Stratégie servant à détecter des mutations de faible abondance - Google Patents
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Abstract
La présente invention concerne, par exemple, un procédé servant à rechercher par criblage des mutations dans un échantillon d'ADN, ledit procédé consistant à (a) diluer et diviser l'échantillon pour obtenir une pluralité de petites quantités d'échantillon qui, en moyenne, contiennent entre environ 2 et 10 équivalents génome de l'ADN ; (b) amplifier par ACP l'ADN dans un nombre suffisant de petites quantités d'échantillon, avec au moins un ensemble d'amorces pour ACP, de façon à générer des amplicons tels que, si des mutations sont présentes à une fréquence d'environ 1-10 % dans un gène donné présent dans l'échantillon, la probabilité qu'il y ait une mutation dans ce gène dans au moins l'un des amplicons soit d'au moins 95 % ; et (c) cribler les amplicons en ce qui concerne la présence de mutations, en utilisant un procédé qui peut détecter des mutations non spécifiées au niveau de sites non spécifiés à l'intérieur d'un amplicon (par exemple par électrophorèse capillaire à gradient de température (TGCE) ou séquençage cyclique de l'ADN).
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DANI ET AL, GENETICS AND MOLECULAR RESEARCH, vol. 3, no. 3, September 2004 (2004-09-01), pages 395 - 409 * |
MARGRAF ET AL, JOURNAL OF CLINICAL MICROBIOLOGY, vol. 42, no. 10, October 2004 (2004-10-01), pages 4545 - 4551 * |
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