WO1999033864A1

WO1999033864A1 - Derives peptidiques

Info

Publication number: WO1999033864A1
Application number: PCT/JP1998/005862
Authority: WO
Inventors: Shinobu Sakurada; Masaki Hagiwara; Tetsuhisa Miyamae; Toru Okayama; Tadashi Ogawa; Tomomi Oya; Eriko Nukui; Masako Yagisawa
Original assignee: Daiichi Pharmaceutical Co., Ltd.; Fuji Chemical Industries, Ltd.
Priority date: 1997-12-26
Filing date: 1998-12-24
Publication date: 1999-07-08
Also published as: TW474945B

Description

明細書ぺプチド誘導体技術分野

本発明は、オビオイド受容体等に対する作用を介して、鎮痛等の薬理作用を発揮するぺプチド誘導体に関するものである。背景技術

モルヒネ等のオビオイドが結合するオビオイド受容体は、 1970 年代前半にその存在が証明された。ォピオイド受容体は現在 μ、 δおよび κの 3種に大別されている。モルヒネは主に μ受容体にァゴニストとして作用し、鎮痛、腸管運動抑制、呼吸抑制等の薬理学的効果を発現する。 1975 年以降、オビオイド受容体に結合する内因性のモルヒネ様物質が相次いで発見された。現在までのところ、これらの物質は全てペプチドであり、オビオイドペプチドと総称されている。オビオイドペプチドの薬理学的効果は基本的にはモルヒネと同様と考えられ、元来生体内に存在する物質であることから、モルヒネ以上の安全性を有する薬剤となる可能性が予想される。しかし、天然のォピオイドペプチドでは体內動態面での問題もあり、未だ医薬品として使用はされていない。

1980 年代には D-体のァラニンを含有するデルモルフインが力エルの皮膚から単離された。デルモルフインの鎮痛効果は脳室內投与でモルヒネの約 1 , 000 倍強力であり、 ί本內で比較的安定であることが判明した。その後、 D -体のアミノ酸を含む合成オビオイドぺプチドが提案されており、特に c受容体選択性の高い合成オビオイドペプチドが麻薬性のない鎮痛薬として期待され、臨床試験も実施されている。しかしながら、その有効性、 /cァゴニストであることに起因すると思われる副作用、及び採算性の面で医薬品としての可能性は疑問視されている。さらに、これらの合成オビオイドぺプチドは経口剤としての利用が困難であり、例えば近年癌疼痛治療薬として広く使用されている硫酸モルヒネの徐放性経口剤である MSコンチンの代替薬とはなり得ない。本発明者らは、 L-Tyr- (L又は D) -Arg- Phe を基本骨格とし、 N 末端にアミジノ基を有するオリゴペプチド誘導体（国際公開 W095/24421、同 W097/ 10261、及び同 W097/10262) を提供してきたが、これらの誘導体といえども、経口投与時のバイオアべィラピリティーは必ずしも満足すべきものとはいえない。 MSコンチンは一日投与量がグラム単位にまで増加し、その服用に困難を伴う場合があり、また、ヒスタミン遊離作用に起因すると考えられるかゆみ等の副作用が発現し、投与の中止を余儀なくされる場合もある。したがって、モルヒネ以上の安全性および薬効を有する経口投与可能な代替薬が望まれる。発明の開示

本発明者らは、上記課題を解決すべく鋭意研究を行ったところ、例えば L -チ口シン一 D—メチォニンスルホキシド—フエ二ルァラニン一 N—メチルー β—了ラニンを基本骨格とし、 Ν -末端にィミノエチル基を有するオリゴぺプチド誘導体において、卜位チロシン水酸基のァシル化及びノ又は C-末端カルボキシル基のェステル化を施すことにより、経口投与によっても優れた鎮痛活性を発揮できるォピオイドぺプチドを提洪できることを見出した。本発明者らはさらに研究を行い、本発明を完成するに至った。

すなわち本発明は、下記の式（I) ：

HN=C (R¹) -AA'-AA'-AA^:,-AA'-OR"

[式中、

R'は C_{l ri}アルキル基、アミノ基、モノ C_{l tl}アルキルアミノ基、ジ C_{l fi}アルキルァミノ基、又はフエ二ル基を示し：

^は水素原子、（：アルキル基、ハロゲン化（ _ltiアルキル基、ヒドロキシ (：_{| |6}ァルキル基、 C, _luアルコキシ置換【。アルキル基、。アルコキシ - _sアルコキシ置換 C_{l ri}アルキル基、ァミノアルキル基、モノ C, _Hアルキルアミノ C_{l l6}アルキル基、ジ c,__sアルキルアミノし'_{| 16}アルキル基、 c₃_,。シクロアルキル基、。シクロアルキル置換 c_{I B}アルキル基、 C₂__LSアルケニル基、 C.w₆アルキニル基、 ,。ァリ一ル基、ァリール置換 C, ₆アルキル基、 C_B__1B7リール- ( _Hアルコキシ置換 c_{l ri}アルキル基、置換基を有することもあるフタリジル基、 C_{I H}アルコキシ力 /レポニルォキシ C アルキル基、又は C₂_₇アルカノィルォキシ C ₆アルキル基を示し：

AA' は下記の式：

{式中、 X は水素原子を示すか、又は、下記の式： -CO-Y- R³ (式中、 R³は _₁₆ァルキル基、ヒドロキシ ,_₁₆アルキル基、ァミノ（：ト₁₆アルキル基、モノ < ₆アルキノレアミノ c卜 _|6アルキノレ基、ジ c ₆アルキルアミノ < ₁₆アルキル基、 c ,。シクロアルキル基、。シクロアルキル置換 C ₆アルキル基、 C.₂-_LFIアルケニル基、（ _₁₆ァルキニル基、 C_H__H)7リール基、 C_{RI |()}ァリール置換 _κアルキル基、又は複素環基を示す）で表される基を示し、 R'及び R⁵はそれぞれ独立に水素原子、 C,.«ァルキル基、ハロゲン化 < _TIアルキル基、又はハロゲン原子を示し、 Y は酸素原子又は単結合を示す } で表される L-α-アミノ酸残基を示し；

AA² は下記の式：

(式中、 R^riはアミノ基、モノ C,_₆アルキルアミノ基、 -₆ァシルァミノ基、 C_{I B}ァルキル基を有することもあるグァニジノ基、卜ィミノ _₆アルキル基、 C,__fiアルキル基を有することもあるウレィド基、 C_{l 6}アルキルチオ基、 C,_₆アルキルスルフィニル基、 C, アルキルスルホニル基、 C_{I H}ァシル基，又は卜ヒドロキシ C_{l ti} アルキル基を示し、 _n は 1〜4 の整数を示す）で表される D- α -アミノ酸残基を示し；

ΑΑ³ は下記の式：

(式中、 R⁷は水素原子、 C_1-6アルキル基、ハロゲン化 C_{l -6}アルキル基、又はハロゲン原子を示す）で表される α - アミノ酸残基を示し；

ΑΑ⁴ は下記の式： -N(R⁸) -CH(R⁹) -CH(R^,0) -C0- (式中、 R R⁹、及び R¹⁰ はそれぞれ独立に水素原子、 C,_₆アルキル基、（ ₆アルケニル基、 C_Mアルキニル基、 C₆ _,。ァリール基、又はァリール置換（ ₆アルキル基を示す）で表される ]3 -ァミノ酸残基を示し：

ただし、 R^fiがアミノ基、モノ C,_₆アルキルアミノ基、ァシルァミノ基、 C_{l ri}ァルキル基を有することもあるグァニジノ基、 1 -ィミノ C_{1 H}アルキル基、アルキル基を有することもあるウレィド基、アルキルチオ基、 C_{1 H}アルキルスルフィニル基、又は ₆アルキルスルホニル基であり、かつ及び X が共に水素原子である場合を除く]

で表される化合物又はその塩を提供するものである。

別の観点からは、上記の式（I) で表される化合物又は生理学的に許容されるその塩を有効成分として含み、例えば鎮痛剤として有用な医薬が提供される。この医薬の好ましい態様によれば、有効成分である上記の式（I) で表される化合物又は生理学的に許容されるその塩と製剤用添加物とを含む医薬用組成物の形態の医薬が提供される。さらに別の観点からは、上記の医薬の製造のための式（I) で表される化合物又は生理学的に許容されるその塩の使用；及び、疼痛の予防及び/ 又は治療方法であって、上記の式（I) で表される化合物又は生理学的に許容されるその塩の有効量をヒトを含む哺乳類動物に投与する工程を含む方法が提供される。発明を実施するための最良の形態

上記定義において、「アルキル基」、又は 1個又は 2個以上のアルキル部分を含む置換基（例えばモノアルキルアミノ基、ハロゲン化アルキル基、アルコキシ基、アルコキシ置換アルキル基など）についての「アルキル部分」は、直鎖又は分枝鎖のいずれでもよい。例えば、 C_{1 S}アルキル基という場合には、炭素数 1個ないし 6個の直鎖又は分枝鎖のアルキル基を意味しており、より具体的には、メチル基、ェチル基、 _n-プロピル基、ィソプロピノレ基、 n-ブチル基、 sec -ブチル基、 tert- ブチル基、 n-ペンチル基、ネオペンチル基、 n-へキシル基などを挙げることができる。例えば 1個又は 2個以上の C ₆アルキル部分を含む置換基において、 C,_₆ アルキル部分としては上記に例示した（：,„₆アルキル基を用いることができる。ジアルキルァミノ基又はジアルキルァミノ部分を含む置換基（例えばジアルキルァミノアルキル基）において、アミノ基上に置換する 2個のアルキルは同一でも異なっていてもよい。

本明細書において「ハロゲン」という場合には、フッ素、塩素、臭素、又はョゥ素のいずれでもよい。ハロゲン化アルキル基に置換しているハロゲン原子の置換位置、個数及び種類は特に制限されず、モノハロゲン化アルキル基ないしパーハロゲン化アルキル基までいずれも利用可能である。 2個以上のハロゲン原子が存在する場合には、それらは同一でも異なっていてもよい，ハロゲン化アルキル基としては、例えば、トリフルォロメチル基、 2，2, 2-トリフルォロェチル基などを例示することができるが、これらの例に限定されることはない。ヒドロキシァルキル基に置換している水酸基の置換位置及び個数は特に限定されず、例えば 1 ないし 4個、より好ましくは 1ないし 2個、特に好ましくは 1個の水酸基が任意の位置に置換していてもよい。ヒドロキシアルキル基としては、例えばヒドロキシメチル基などを用いることができる。

アルコキシ置換アルキル基としては、例えば、メトキシメチル基、エトキシメチル基、メ卜キシェチル基、 _n-ヘプトキシメチル基などを挙げることができ、ァルコキシーアルコキシ置換アルキル基としては、メ卜キシメトキシメチル基、メトキシェトキシメチル基などを挙げることができるが、これらに限定されることはない。ァミノアルキル基に置換しているァミノ基の個数は好ましくは 1又は 2 個、特に好ましくは 1個である。 C₃__l0シクロアルキル基の環の個数は特に限定されないが、 1個ないし 3個程度が好適であり、例えばシクロプロピル基、シクロブチル基、シクロペンチル基、シクロへキシル基、ァダマンチル基などを用いることができる。 C_{:l l(},シクロアルキル部分を含む置換基（例えば（：₃_₁₀シクロアルキル置換アルキル基など）の（^_|0シクロアルキル部分としては、上記に例示したシクロアルキル基を用いることができる。これらのシクロアルキル基の環上には 1個又は 2個以上の C ₆アルキル基が存在していてもよい。

C_2-l6アルケニル基及びアルキニル基は、直鎖又は分枝鎖のいずれであってもよい，これらの基にそれぞれ含まれる二重結合及び三重結合の数は特に限定されないが、好ましくは 1ないし 4個、より好ましくは 1又は 2個、特に好ましくは 1個である。上記定義において、「ァリール基」、又は 1個又は 2個以上のァリ —ル部分を aむ置換基（例えばァリールアルキル基、ァリールアルコキシ置換ァルキル基など）についての「ァリール部分」としては、例えば、フエニル基、ナフチル基などを用いることができる。ァリ一ルアルキル基としてはべンジル基、フエネチル基などを用いることができる。ァリールアルコキシ置換ァルキル基としては、ベンジルォキシ基、フエネチルォキシ基などを用いることができる _c 置換基を有することもあるフタリジル基としては、ベンゼン環部分に 1個又は 2個以上の置換基を有するフタリジル基を用いる二とができる。このような置換基としては、例えば、 C _{L B}アルキル基、ハロゲン化 _hアルキル基、 C アルコキシ基、水酸基、ハロゲン原子、アミノ基、モノ若しくはジアルキルアミノ基、カルボキシル基、 C , ₆ アルコキシカルボニル基、 _₆ アルキル力ノレボニル基、スルホン酸基などを挙げることができるが、これらに限定されることはない。フタリジル基としては無置換のものが好ましい。アルコキシカルボニルォキシアルキル基としては、例えばェ卜キシカルボニルォキシメチル基などを用いることができ、アルカノィルォキシアルキル基としては例えばァセ卜キシメチル基などを用いることができる。

R³が示す複素環基としては、例えば、環を構成する原子として 1個又は 2個以上のへテロ原子（例えば、窒素原子、酸素原子、硫黄原子など）を含む 5ないし 10 員の飽和、部分不飽和、又は芳香族の複素環基を用いることができる。へテ口原子を 2個以上含む場合には、へテ口原子の種類は同一でも異なつていてもよレ、。上記定義において、「ァシル基」、又はァシル部分を含む置換基（例えばァシルァミノ基など）についての「ァシル部分」としては、例えば、ァセチル基、プ口ピオニル基などのアルカノィル基、卜リフルォロアセチル基などのハロゲン化アルカノィル基、ベンゾィル基、ナフトイル基などのァロイル基、フエニル基、ナフチル基などを用いることができる。

AA'が示す基における R ¹及び R⁵、 AA^:Iが示す基における R⁷のベンゼン環上における置換位置は特に限定されない。 R\ R\ 又は R⁷が示すハロゲン化アルキル基としては、トリハロゲン化メチル基が好ましい。また、本明細書において、「ァミノ酸残基」という用語はペプチド化学の分野における通常の意味で用いられており、より具体的にはひアミノ酸においてひ位の関係にあるアミノ基及びカルボキシル基、又は /3アミノ酸において j3位の関係にあるアミノ基及びカルボキシル基から、それぞれ水素原子及び/又はヒドロキシ基を除いた残りの構造を意味している。

なお、上記の式（I )で表されるペプチド誘導体において、 R^RIがアミノ基、モノ C, _rtアルキルアミノ基、（：^ァシルァミノ基、 C, _₆アルキル基を有することもあるグァニジノ基 [- NH- C (N ) =NH]、卜ィミノ ₆アルキル基、アルキル基を有することもあるウレィド基（- NH- CO- N )、（ ₆アルキルチオ基、 C_1-6アルキルスルフィニル基（- S0-C卜 ₆アルキル）、又はアルキルスルホニル基（-SO.厂 C卜 ₆ァルキル）であり、かつ及び X が共に水素原子である場合は、本発明の範囲に包含されなゝ

上記の式（I)で示される本発明のぺプチド誘導体に存在する不斉炭素は、上記定義において特に言及した場合を除いて、 S-又は R-の任意の立体配置を有していてもよい。また、酸素原子が置換した硫黄原子（スルホキシドなど）について S-又は R-の立体配置が存在する場合には、その立体配置はそれらのいずれでもよい。一例を挙げれば、 M²が D-メチォニンスルホキシド残基を示す場合には、 D-メチォニン-（RS) -スルホキシド残基、 D-メチォニン-（R) -スルホキシド残基、 D - メチォニン -（S) -スルホキシド残基のいずれの場合も本発明の範囲に包含される。体內安定性などの観点から適宜の立体配置のぺプチド誘導体を選択することが望ましい。

本発明の式（I)で示されるぺプチド誘導体には、任意の光学活性体またはラセミ体、ジァステレオ異性体またはそれらの任意の混合物がすべて包含される。また、本発明のペプチド誘導体には、塩酸塩、酢酸塩、又はパラトルエンスルホン酸などの酸付加塩や、アンモニゥム塩又は有機ァミン塩などの塩基付加塩が包含されるほか、遊離形態及び塩の形態のぺプチド誘導体の任意の水和物及び溶媒和物も包含される。さらに、上記の一般式で示されるペプチド誘導体の他、上記べプチド誘導体の 2量体ないし多量体である化合物、及びこれらのぺプチド誘導体の C-末端と N-末端が結合した環状の化合物も本発明の範囲に包含される。

式（I ) で表される本発明の化合物の具体例としては、

( 1) R'が C,__ttアルキル基又はアミノ基、より好ましくは R'がメチル基、ェチル基、又はァミノ基である化合物：

(2) AA¹が置換若しくは無置換の L-又は D-フエ二ルァラニン残基、好ましくは AA³ がいフエ二ルァラニン残基、 D-フエ二ルァラニン残基、 L- p-フルオロフェニルァラニン残基、 D-p-フルオロフェニルァラニン残基、 L-0-トリフルォロメチルフェニルァラニン残基、又は D- 0-卜リフルォロメチルフエ二ルァラニン残基である化合物：

(3) AA¹が N-メチル - 0 -ァラニン残基である化合物：

(4) AA¹力；し-チロシン残基、 2, 6-ジメチル- L -チロシン残基、 0-ァシル -L -チロシン残基、 0-アルコキシカルボニル- L-チロシン残基、又はフエノキシカルボ二ル- L-チロシン残基である化合物；

(5) AA^;が D-メチォニンスルホキシド残基、 D-アルギニン残基、又は！)-シ卜ルリン残基である化合物；

(6) が D-N⁵-ァセチルオル二チン残基、 D- 5-ォキソノルロイシン残基、又は D-5 - ヒドロキシノルロイシン残基である化合物：

(7) R^zが（ _1Kアルキル基、。ァリ一ル基、 C₆„_ltiァリール置換 C,_₆アルキル基、 C,.₁₀ アルコキシ置換ァノレキノレ基、 C_{l 6}アルコキシカルボニルォキシ C卜 ₆アルキノレ基、又はフタリジル基である化合物：及び

(8) 上記（1)〜（7)までの具体的アミノ酸残基又は置換基を適宜組み合わせた化合物

を挙げることができるが、本発明の化合物はこれらに限定されることはない。本発明の化合物のうち、特に好ましい化合物の例としては、

(9) R¹がメチル基であり、 AA'力； L - 0-ァセチルチロシン残基であり、力； D-メチォニンスルホキシド残基であり、 AA³が L-フエ二ルァラニン残基であり、 A が N-メチル - -ァラニン残基であり、が水素原子である化合物；

( 10) R'がメチル基であり、 AA'がし-チロシン残基であり、 AA²が D-メチォニンスルホキシド残基であり、 AA³が L-フエ二ルァラニン残基であり、 AA⁴が N-メチル- -ァラニン残基であり、が- (CH₂) ₁₅CH_:!である化合物；

( 11) R¹がメチル基であり、 AA'力； L-0-ァセチルチロシン残基であり、 AA 力； D-メチォニンスルホキシド残基であり、 M³が L-フエ二ルァラニン残基であり、 AA¹力； N-メチル - -ァラニン残基であり、 R²が- CH (CH_:,) 0C0.A である化合物； ( 12) R¹がメチル基であり、 AA'力；チロシン残基であり、 D-5 -ヒドロキシノルロイシン残基であり、 AA^:i力；いフエ二ルァラニン残基であり、 AA⁴が N-メチル- -ァラニン残基であり、 R^:が水素原子である化合物；

( 13) R'がメチル基であり、 AA'がチロシン残基であり、 AA²が D -メチォニンスルホキシド残基であり、 AA^:iが L-フエ二ルァラニン残基であり、 AA⁴が N-メチル- 0 -ァラニン残基であり、力; -（C ) ₇CE,である化合物；及び

( 14) R'がメチル基であり、ΑΑ'が 2， 6-ジメチル-し-チロシン残基であり、AA^; D-N⁵- ァセチルオル二チン残基であり、 AA^:iが P-フルオロフェニルァラニン残基であり、 AA⁴が N-メチル- β -ァラニン残基であり、力; - CH₂CH₃である化合物

を挙げることができる。

本発明のペプチド誘導体は、優れた鎮痛効果を有しており、医薬の有効成分、好ましくは鎮痛剤の有効成分として有用である。本発明のペプチド誘導体は、鎮痛作用に伴うヒスタミン遊離作用や心拍数の低下作用がモルヒネに比して相対的に弱く、モルヒネとの交差耐性の程度も低いので、癌疼痛治療に適することが予想される。また、既知の鎮痛性ペプチド化合物はいずれも経口投与によっては十分な有効性を発揮できないという問題を有していたが、本発明のぺプチド誘導体は経口投与により優れた鎮痛作用を発揮できるという特徴を有しており、硫酸モルヒネの徐放性経口剤である MS コンチンに匹敵する有用性が期待できる。

従って、上記式（I)のぺプチド誘導体又は生理学的に許容されるその塩を有効成分として含む本発明の医薬は、疼痛の予防及びノ又は治療を目的として使用することができ、静脈內投与、皮下投与などの非経口投与のほか、経口投与により適用可能である。また、経鼻吸収を含む粘膜吸収製剤および経皮吸収製剤にも有用性が期待される。本発明の医薬の有効成分としては、上記式（I )のペプチド誘導体又は生理学的に許容されるその塩の水和物又は溶媒和物を用いてもよい。投与量は特に限定されないが、例えば、経皮投与の場合には単回投与量を 0. l〜10mg とし、経口投与の場合には単回投与量を l〜100 mgとして、一日あたり 2〜3回投与することができる。本発明のぺプチド誘導体は、ぺプチド合成に通常用いられる固相法および液相法で合成することができる。例えば、固相法によりアミジノ基を有しないぺプチド鎖を合成し、さらに N末端のチロシンのァミノ基にァミジノ基を導入することによって目的のペプチド誘導体を製造することができ、また、予めアミジノ基を導入した後 C末端を修飾することもできる。

アミノ基等の保護基および縮合反応の縮合剤等は、優れたものが種々知られており、以下の実施例を参考に、また、例えば：鈴木紘ー編「タンパク質工学—基礎と応用」丸善（株）（1992)及びそこに引用された文献： M. Bondanszky, et al. , "Peptide Synthesis John Wi ley & Sons, N. Y. , 1976 ;並びに J. M. Stewart and D. J. Young, " Sol id Phase Peptide Synthesis , W. H. Freeman and Co. , San Francisco, 1969 等を参照して適宜選択使用することができる。固相法では市販の各種べプチド合成装置、例えばパーキン ·エルマ一 · ジャパン製（Perkin Elmer Japan,旧社名 Appl ied Biosystems)の Model 430A を利用するのが便利なこともある。合成に使用する樹脂、試薬等は市販品等を容易に入手でき、それらの例は実施例に示した。実施例

以下に実施例により本発明をさらに具体的に説明するが、本発明はこれら実施例に限定されるものではない。本実施例を参照し、あるいは本実施例の方法を修飾 ·変更することによって、あるいは出発原料または反応試薬を適宜選択することにより、一般式（I) に包含される本発明の所望の本発明ペプチド誘導体を容易に製造することができる。実施例において、アミノ酸基の意味は通常用いられているものと同様である。 D-体と L-体とが存在するアミノ酸が言及されている場合、特に D -と表示していない場合には、そのアミノ酸は L -アミノ酸を意味する。また、以下の略号を使うことがあり、特に示していない場合にも同様な略号を用いる場合がある。なお、 H₂NC (NH) - Phe -、 Boc-Phe- 又は Z- Phe-などの表記は、フエ二ルァラニンの Ν'-末端窒素原子がそれぞれ H.,NC (NH) -、 Boc 又は 1 で修飾されていることを示し、ァミノ酸についてはアミノ酸残基を示す場合がある。卜 Ada 1 -ァダマンチノレ

Boc tert- ブトキシカノレボニノレ

Bzl ベンジル

cHex シク口へキシノレ

DIEA ジィソプロピルェチノレアミン

DMAP 4-ジメチルァミノピリジン

DMF Ν,Ν-ジメチルホルムァミド

DMT 2, 6 -ジメチルチ口シン

ECE 1 - (エトキシカルボニルォキシ）ェチル

HNLE 5-ヒドロキシノ /レロイシン

HNLE(MOM) 5-メトキシメトキシノルロイシン

HOBt 1-ヒドロキシべンゾトリアゾール

MetO メチォニンスルホキシド

MOM- CI クロロメチノレメチノレエーテノレ

ONLE 5 -ォキソノノレロイシン

Phtl フタリジル

POM ピバロィルォキシメチル

Tyr(C0CH_:!) ： 0 -ァセチルチロシン

TyrCCOCH H^) 0 -プピオ二ルチロシン

Tyr[C0(CH)₂CH_:i] 0-ブチリルチロシン

Tyr[C0CH(CH₃)₂] 0 -ィソブチリルチロシン

Tyr(COcHex) 0 -シク口へキシノレ力/レポニノレチロシン

Tyr(COPh) 0 -べンゾィルチロシン

Tyr[C0(C¾),Ph] 0 - 3-フエニルプロピオ二ルチロシン

Tyr[C0(CH,) Ph] 0 - 4-フエ二ルブチリノレチロシン Tyr[C0C(CH₍)_:t ： 0 -ビバロイルチロシン

Tyr[C0(l- Ada)] ： 0-卜ァダマンチルカルボ二ルチロシン

Tyr(C0,CH,) ： 0 -メトキシカルボ二ルチロシン

Tyr(C0,CH) 0 -ェトキシカルボ二ルチロシン

Tyr[C0,CH(CH,),] 0-ィソプロポキシカノレボニルチロシン

Tyr(C0,Ph) 0-フエノキシカルボ二ルチロシン

Tyr(COCH h) 0-ベンジ/レオキシカノレボニルチロシン

WSCI 1-ェチル- 3-(3 -ジメチルァミノプロピル）カルボジィミド塩酸塩 Z ベンジノレォキシカノレボニノレ

(A) 原料化合物の製造

(1) Z-Phe-Me β Ala-0CH₃

H-Me^ Ala-O e-HCl (6.14g) を DMF (50ml)に溶解し、 -10 °Cで卜リエチルァミン（5.54 ml), HOBt (5.41g), Z- Phe-OH (lOg)を加えた後、 WSCI (8.3g) を加えて室温で 20 時間撹拌した。反応液に酢酸ェチルを加え、 1N塩酸、次いで飽和重曹水で洗浄した。有機層を硫酸マグネシウムで乾燥後、溶媒を減圧濃縮して無色油状物として 13 gの目的物を得た。

(2) Boc-D-Met0-Phe-Me β Ala - 0CH_:i

上記（1)で得た Z-Phe- MeiSAla - 0CH_:1 (6.1 g) を DMF (lOOinl) に溶解し、触媒として 5% Pd-C (10g) を加え室温で 3 時間接触還元を行った。触媒を濾別後、濾液に Boc- D- MetO- 0H (7.98 g)、 HOBt (4 g)、 WSCI (6.7 g)を 0 °Cで加え、室温で終夜撹拌した。反応液に酢酸ェチルを加え、 1N 塩酸、飽和重曹水、次いで飽和食塩水で;先浄した。有機層を硫酸マグネシウムで乾燥後、溶媒を減圧濃縮して無色油状物として 9.1 g の目的物を得た。

(3) Boc-Tyr-D-MetO-Phe-Me β Ala-OCH,

上記（2)で得た Boc- D- MetO- Phe- Me Ala- 0CH₃ (4.5 g) を 90 % TFA (50 ml) に溶解し、室温で 30分撹拌した。溶媒を減圧濃縮して得られた残留物を DMF (20 ml) に溶解した。この溶液に卜リエチルァミンを加えて中和した後、 Boc-Tyr - 0H(2. 2 g)、 HOBt (3. 5 g)、 WSCI (2. 5 g)を 0 °Cで加え、室温で終夜撹拌した。反応液に酢酸ェチルを加え、 1N 塩酸、飽和重曹水、次いで飽和食塩水で洗浄した。有機層を硫酸マグネシゥムで乾燥後、溶媒を減圧濃縮して白色固体として 4. 5 g の目的物を得た。

(4) Boc-Tyr-D-MetO-Phe-Me β Ala- OH

上記（3)で得た Boc-Tyr-D-MetO-Phe-Me β Ala-0CH_:1 (2. 23 g) をメタノール（20 ml)および水（10 ml)混合液に溶解した。この溶液に 0 °Cで 2N NaOH水溶液（3. 3 ml) を加え、室温で 3時間撹拌した。反応液に 0 °Cで 1 N塩酸を加えて pHを 2に調整後、酢酸ェチルで抽出した。有機層を飽和食塩水で洗浄した後、硫酸マグネシゥムで乾燥し、溶媒を減圧濃縮した。得られた残留物をイソプロピルエーテルより結晶化して白色固体 1. 83 g を得た。

(5) Boc-D-Met0-Phe-0CH₃

H-Phe-OMe -HCl (88 g)を DMF (500 ml)に溶解し、 -10。じで卜リェチルァミン（56 ml) , HOBt (46 g)， Boc- D-MetO-OH (90 g) を加えた後、 WSCI (76 g) を加えて室温で 20 時間撹拌した。反応液に酢酸ェチルを加え、 1N 塩酸、次いで飽和重曹水で洗浄した。有機層を硫酸マグネシウムで乾燥後、溶媒を減圧濃縮した。得られた残留物をへキサンより結晶化して白色固体として 117 g の目的物を得た.，

(6) Boc-Tyr-D-MetO-Phe-OCH,

上記（5)で得た Boc- D- MetO- Phe-0C¾ ( 10 g)を、ァニソ一ル（10 ml)を含有する 90% TFA (100 ml) に溶解し、室温で 30 分撹拌した。溶媒を減圧濃縮して得られた残留物を DMF (40 ml) に溶解し、トリェチルァミンを加えて中和した。この溶液を、予め Boc- Tyr- 0H (5. 6 g)、 HOBt (3. 5 g)および WSCI (5. 4 g)を DMF (20 ml) に溶解して 0 °Cで 30分撹拌した溶液に加え、室温で終夜撹拌した。反応液に酢酸ェチルを加え、 1N塩酸、飽和重曹水、次いで飽和食塩水で洗浄した。有機層を硫酸マグネシウムで乾燥後、溶媒を減圧濃縮した。得られた残留物をへキサンより結晶化して白色固体として 11 gの目的物を得た。 (7) Boc-Tyr-D-MetO-Phe-OH

上記（6)で得た Boc-Tyr-D - MetO- Phe- 0C¾ (110 g) をメタノール（187 ml) に溶解した。この溶液に 0 °Cで 2N NaOH 水溶液（187 ml) を加え、室温で 30分撹伴した。反応液に 0 °Cで 1N塩酸を（1 L)を加えた後、酢酸ェチルで抽出した。有機層を飽和食塩水で洗浄した後、硫酸マグネシウムで乾燥し、溶媒を减圧濃縮して白色固体として 104 g の目的物を得た。

(8) Boc-Tyr-D-MetO-Phe-Me β Ala-OC (CH_:!)

上記（7) で得た Boc- Tyr- D- MetO-Phe - OH (11. 5 g)、 H-Me β Ala- 0C (C ) ₃ (3. 82 g)、 HOBt (3. 24 g) および WSCI (4. 60 g) を 0 °Cで加え、室温で終夜撹拌した。反応液に酢酸ェチルを加え、 1N塩酸、飽和重曹水、次いで飽和食塩水で洗浄した。有機層を硫酸マグネシウムで乾燥後、溶媒を減圧濃縮して得られた残留物をィソプロピルエーテルより結晶化して白色結晶 12. 6gを得た。

(9) Z-D-HNLE (M0M) -0H

ナトリウム（1. 17 g) を無水メタノール（100 ml)に溶解し、この溶液に- 12 °C で (R) - 3 - Benzyloxycarbonyl - 4 - (3- oxobutyl) - 5 - oxazol idinone (9. 90 g) [J. M. Scoltz and P. A. Bartlett, Synthesis, pp. 542-544, 1989 に記載の方法に従つて合成した] を加えた。この温度で 45分撹拌後、 6N HC1 を滴下して中和した。折出した無機塩を濾別後、 0°Cで水素化ホウ素ナトリウム（1. 29 g) を加えた。反応液を 5分間撹袢後、 6N HC1を滴下して中和した。メタノールを減圧留去し、残留物にジェチルェ一テルを加えて飽和食塩水で洗浄した。有機層を硫酸マグネシゥムで乾燥後、溶媒を减圧濃縮して得られた残留物をシリ力ゲルカラムクロマ卜グラフィ一（クロ口ホルム：メタノール = 100： 1 にて溶出）で精製して Z- D - HNLE-OMeを無色油状物として 8. 88 g 得た。

この化合物（8. 50 g) を塩化メチレン（25 ml)に溶角？し、 0 °Cで DIEA (6. 1 ml) および M0M-C1 (2. 62 ml)を加えた.:. 室温で 15時間撹拌後、塩化メチレンを減圧留去し、残留物を酢酸ェチルに溶解した。この溶液を 10% クェン酸、飽和重曹水、次いで飽和食塩水で洗浄した。有機層を硫酸マグネシウムで乾燥後、溶媒を減圧濃縮して Z- HNLE(M0M)-0Me (7.83 g)を無色油状物として得た。この化合物 (7.50 g) をメタノール（20 ml)に溶解し、 0 °Cで 2N NaOH (16.5 ml) を加えた。この溶液を室温で 1時間撹拌後、 1NHC1で中和してメタノールを減圧留去した。残留物に 1M NaHSO, を加えて pH=3 とした後、酢酸ェチルを加えて分液し、有機層を飽和食塩水で洗浄した。硫酸マグネシウムで乾燥後、溶媒を减圧濃縮して標題の化合物 7.08 gを無色油状物として得た。

(B) 本発明のペプチド誘導体の製造

例 1 ： H₃C- C(NH)- Tyr- D-MetO- Phe- Me ^Ala- 0C¾ ·酢酸塩

Boc-Tyr - D - MetO - Phe- Me β Ala - 0CH₃ (1.35 g) を 90% TFA (10 ml)に溶解し、 0 °C で 30分撹拌した。溶媒を減圧濃縮して得られた残留物を DMF (8 ml)に溶解し、ァセトイミド酸ェチル塩酸塩（1.38 g)およびトリェチルァミン（0.84 ml)を溶解した。この溶液を室温で 1時間 30 分撹拌後した。反応液を减圧濃縮し、得られた残留物を 0DS カラムクロマトグラフィー（富士シリシァ DM 1020T、 50 g) にチャージして 20%メタノール /0.1 N酢酸溶液にて溶出した。目的物を含む画分を集めて凍結乾燥し、標題の化合物を白色粉末として 0.61 g得た。

FAB マススぺクトル m/z ： 617 (M+H* )

[a]_u ^2:i +31.1 ^ (c=0.97， IN 麵)

Rf ： 0.66 (n-BuOH:AcOH:H0:ピリジン = 15 :3： 10： 12) 例 2〜 7

例 1の方法に従って表 1に示す化合物を合成した。表中、 m/zは M+H を表し、旋光度は c=0.90〜2.00, 1N酢酸、 23°Cで測定した結果を示す。 Rf の測定には、 n-Bu0H:Ac0H:H,0:ピリジン = 15:3:10:12 を展開溶媒として用いた（以下の表において同様である）。 Orn(Ac) は N ァセチルオル二チン残基を意味し、 Phe(p-F) はパラフルオロフヱ二ルァラニン残基を意味する。例構造式 m/z Rf

2 H ΓΓΗ -Γ (NH¹) -Tvr-D-M tD-Ph - P A T a-ΟΓΗ I3 *J + 1 ? « V/. uu

3 H.C-C (NH) -Tyr-D-Orn (Ac) - Phe- Me β Ala- 0CH_:! 626 +23. 8 0. 65

4 H_:!C-C (NH) - Tyr - D-Orn (Ac) - Phe (p-F) -Me β Ala- OCH_:, 644 +23. 9 0. 65

0 H_:iC- C (NH) -DMT-D-Orn (Ac) -Phe (p-F) -Me β Ala- OC 672 +41. 7 0. 66

6 H_:iC- C (NH) -Tyr-D-MetO-Phe (p-F) -Me β Ala-0CH 635 + 16. 4 0. 64

7 H_;!C-C (NH) - DMT- D- Me tO- Phe (p-F) -Me β Ala- OCH₃ 663 +38. 3 0. 65 例 8 ： H:,C - C (NH) - Tyr- D-MetO- Phe- Me β Ala- 0 (CH ) ₇CH_;! ·酢酸塩

( 1) Boc-Me ^ Ala-0 (CH,) ₇CH_:!

Boc - Me ]3 Ala - OH (6· 14g)を塩化メチレン（20ml) に溶解し、ォクチルアルコール（641 mg) および DMAP (10 mg)を加えた後、 0 。じで WSCI ( 1. 12 g) を加えて室温で 20 時間撹拌した。反応液を 1N 塩酸、飽和重曹水、次いで飽和食塩水で洗浄した。有機層を硫酸マグネシウムで乾燥後、溶媒を減圧濃縮して得られた残留物をシリカゲルカラムク口マトグラフィ一（塩化メチレン：メタノール =50： 1 にて溶出）で精製して無色油状物 1. 36 g を得た。

(2) Boc-Tyr-D-MetO-Phe-Me β Ala- 0 (CH,) ₇CH₃

上記（1)で得た Boc-Me ^ Ala-0 (CH,) ₇CH, (6. 14g) を 4N HC1/酢酸ェチル溶液（20 ml)に溶解し、室温で 30分撹拌した。反応液にジェチルェ一テルを加えて析出した結晶を濾取した。この結晶を DMF (20 ml) に溶解し、トリェチルアミンを加えて中和した後、 Boc- Tyr-D- MetO- Phe-0H (3. 45 g)、 HOBt (0. 89 g) および WSCI ( 1. 72 g) を 0 °Cで加え、室温で終夜撹拌した。反応液に酢酸ェチルを加え、 1N 塩酸、飽和重曹水、次いで飽和食塩水で洗浄した。有機層を硫酸マグネシウムで乾燥後、溶媒を減圧濃縮して得られた残留物をシリカゲルカラムクロマ卜グラフィ一（塩化メチレン：メタノール =20 ： 1 にて溶出）で精製して白色結晶 3. 0g を得た。

(3) H_:!C - C ( H) - Tyr-D- MetO- Phe- Me β Ala- 0 (C¾) ₇CH_;! ·酢酸塩

上記（2)で得た Boc-Tyr-D-MetO-Phe-Me β Ala-0(CH₂)₇C¾ (1.1 g)、ァセ卜イミド酸ェチル塩酸塩 (0.5 g) およびトリェチルァミン（0.54 g) を用い、例 1と同様に反応を行った。得られた粗生成物を 0DS カラムクロマトグラフィー（富士シリシァ DM 1020T、 40 g) にチャージして 30〜50 %メタノール水溶液にて段階的グラジント溶出した。目的物を含む画分を集めて凍結乾燥し、標題の化合物を白色粉末として 0.33 g得た。 FAB マススぺクトル m/z ： 715 (M+H" )

[α]_ΰ ^α +14.5 ° (c=1.00, IN 酢酸）

Rf ： 0.68 (n-BuOH:AcOH:H,0:ピリジン = 15:3: 10: 12) 例 9 〜15

例 8の方法に従って表 2に示す化合物を合成した。表 2 例構造式 m/z [a JD Rf

9 H,C- C(NH)-Tyr- D-MetO-Phe- Me fiMa- 0CH,CH_:! 631 +23.7 0.66

10 H_:1C- C(NH)-Tyr- D-MetO-Phe- Me ^ Ala- -0(C¾)_:,C¾ 659 +24.4 0.68 11 H:,C- C(NH)-Tyr- D-MetO-Phe- e i5 Ala- 0(CH,)₅CH_;i 687 +32.8 0.71

12 H_:!C- C( H)-Tyr- D - MetO- Phe - ·Me^Ala- -0(CH,)₉CH_:( 743 十 15.6 0.71

13 H:,C C(N^TH)-Tyr- D-MetO-Phe- ·Me^Ala■ -0(C¾)_uCH_;) 771 + 14.9 0.70

14 H:,C. -C( H)-Tyr- D-MetO-Phe- -Me Ala. -0(CH,)₁₅CH, 827 + 14.6 0.73

15 H:,C -C(NH) -Tyr- -D-MetO-Phe- -Me ^ Ala -0C(CH_:!)_:! 659 +23.0 0.69

16 H_:tC -C(NH)-Tyr- -D-MetO-Phe- -Me Ala -0CH,CF_:! 685 +24.1 0.71

17 H,C -C(NH)-Tyr- -D-MetO-Phe- -Me Ala -OcHex 685 -25.0 0.70

18 H:,C -C(NH)-Tyr- -D-MetO-Phe- -Me ^ Ala -0CH,cHex 699 +25.0 0.70 19 H_:!C-C (NH) -Tyr-D-MetO-Phe-Me β Ala- OPh 679 +25.1 0.66 0 H,C-C (NH) -Tyr-D-MetO-Phe-Me β Ala-OBzl 693 +32.8 0.68 1 H_:iC-C (NH) -Tyr-D-MetO-Phe-Me β Ala-OPht 1 735 +14.1 0.66 2 H_:tC-C (NH) -Tyr-D-MetO-Phe-Me β Ala- OECE 719 +16.6 0.67

23 H_:iC- C (NH) - Tyr- D-MetO- Phe-Me β Ala- OPOM 717 +17.0 0.68

24 H_;!C-C (NH) - Tyr- D-MetO- Phe-Me β Ala-OCH,CH,N (CH_;¾) _; 674 +17.3 0.40 例 25： H,C-C (NH) -Tyr [COCH (CH_:t) ₂] -D-MetO- Phe-Me β Ala- OH

(1) Boc-Tyr [COCH (CH_;i) J - D-MetO- Phe- Me β Ala- OC (CH₃) ₃

Boc - Tyr- D- MetO- Phe-Mei3 Ala- 0C(CH₃)₃ (2.5 g)を塩化メチレン（30 ml) に溶解し、 0 °Cで塩化イソ酪酸（0.55 ml)およびトリェチルァミン（0.97 ml)を加えた後、室温で 20時間撹拌した。反応液に酢酸ェチルを加え、 1N塩酸、飽和重曹水、次いで飽和食塩水で洗浄した。有機層を硫酸マグネシウムで乾燥後、溶媒を減圧濃縮して得られた残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィ一（クロロホルム：メタノール =40： 1 にて溶出）で精製して白色結晶 1.79 gを得た。

(2) H₃C - C (NH) -Tyr [COCH (CH₃) ₂] - D-MetO- Phe- Me β Ala- OH

上記（1)で得た Boc- Tyr [COCH (CH₃)₂]-D-MetO- Phe-Me j3 Ala- 0C(CH₃) 3 (1.56 g) 、ァセ卜イミド酸ェチル塩酸塩（1.22 g)および KHC0_:! (1.39 g)を用い、例 1 と同搽に反応を行った。得られた粗生成物を 0DS カラムクロマトグラフィー（富士シリシァ DM 1020T、 150 g)にチャージして 5〜16% ァセトニトリル /0.1 酢酸溶液にて段階的グラジュン卜溶出した。目的物を含む画分を集めて凍結乾燥し、標題の化合物を白色粉末として 0.46 g得た。

FAB マススぺク卜ル m/z ： 645 (Μ+Η')

Ca]_t) ²³ +17.2° (c=0.99, I 酢酸）

Rf ： 0.60 (n-BuOH:AcOH:H,0:ピリジン = ：3: 10: 12) 例 26〜45

例 25 の方法に従って表 3に示す化合物を合成した。表中、 Cit はシ卜ルリン残基 [-HN- CH(CH.厂 CH₂- CH厂 NH- CO- NH. -C0_]を示す。表 3 例構造式 m/_Z [α]_Β Rf

26 H₃C-C (NH) -Tyr (C0CH) -D-MetO-Phe-Me β Ala-OH 659 +17.5 0.62

27 H_;iC-C (NH) -Tyr (C0CH₂CH) -D-MetO-Phe-Me β Ala-OH 673 +20.4 0.67

28 H,C-C (NH) -Tyr [CO (CH₂) ₂CH,] -D-MetO-Phe-Me β Ala-OH 729 +19.8 0.65

29 ¾C-C (NH) -Tyr [CO (CH) _eCH_:!] -D-MetO-Phe-Me β Ala-OH 673 +22.3 0.63

30 H,C-C (NH) -Tyr (C0CH_:i) -D-Arg-Phe-Me β Ala-OH 654 +21.8 0.56 31 ¾C-C (NH) -Tyr (C0CH₃) -D-C i t -Phe-Me β Ala-OH 655 +24.1 0.68

32 HC-C (NH) -Tyr (C0CH₃) -D-Orn (Ac) -Phe-Me β Ala-OH 654 +24.8 0.63

33 H₃C-C (NH) -Tyr (COcHex) -D-MetO-Phe-Me β Ala-OH 713 +22.0 0.65

34 HC-C (NH) -Tyr (COPh) -D-MetO-Phe-Me β Ala-OH 707 +17.0 0.63

35 ¾C-C (NH) -Tyr [CO (CH₂) ₂Ph] -D-MetO-Phe-Me β Ala-OH 735 +15.4 0.65

36 H ,C-C (NH) -Tyr [CO (CH,) ,Ph] -D-MetO-Phe-Me β Ala-OH 749 +15.3 0.65

37 H,C-C(NH) -Tyr[C0C(CH₃)_:!]-D-Met0-Phe-Me β Ala-OH 687 +29.8 0.65

38 H_;iC-C (NH) -Tyr [CO (1 -Ada) ] -D-MetO-Phe-Me β Ala-OH 765 +25.7 0.63

39 H,C-C (NH) -Tyr [C0CH_;!] -D-MetO-Phe-Me β Ala-OH 661 -16.8 0.61

40 H_;(C-C (NH) -Tyr [C0,CH₂CH_:i] -D-MetO-Plie-Me β Ala-OH 675 +37.1 0.63 41 H_:iC-C (NH) -Tyr [C0CH (CH_:() J -D-MetO-Phe-Me β Ala-OH 703 +39.1 0.66

42 H,C-C(NH) -Tyr (CO,Ph)-D-MetO-Phe-Me β Ala-OH 723 ÷27.1 0.63

43 H_:iC-C (NH) -Tyr (C0,CH,Ph) -D-MetO-Phe-Me β Ala-OH 737 -33.0 0.64

44 H..N-C (NH) -Tyr (C0CH_;j) -D-MetO-Phe-Me β Ala-OH 646 -24.0 0.62

45 R.N-C (NH) -Tyr (COCH,) -D-Arg-Phe-Me β Ala-OH 655 +23.9 0.52 例 46： ¾C-C (NH) -Tyr (COCE,) -D-MetO-Phe-Me β Ala-0 (CH) ₇CH_:i ·酢酸塩

(1) Boc- Tyr (C0C ) -D- MetO- Phe- Me β Ala-0 (CH,) ₇CH,

例 26 で得た Boc- Tyr(C0CH₃)- D- MetO- Phe- Me/Ula- OH (1.00 g) を塩化メチレン（20 ml)に溶解し、 0 。Cでォクチルアルコール（0.64 g)、 DMAP (10 mg)および WSCI (1.12 g) を加えた後、室温で 20 時間撹拌した。反応液に酢酸ェチルを加え、 1N 塩酸、飽和重曹水、次いで飽和食塩水で洗浄した。有機層を硫酸マグネシゥムで乾燥後、溶媒を減圧濃縮して得られた残留物をシリ力ゲルカラムクロマ卜グラフィ一（クロ口ホルム：メタノール =50： 1 にて溶出）で精製して白色結晶 1.36 gを得た。

(2) H_:,C-C (NH) -Tyr (C0CH₃) -D-MetO-Phe-Me β Ala-0 (CH,) ₇C¾ ·酢酸塩

上記（1) で得た Boc- Tyr(C0CH_:,)- D- MetO- Phe- Me /3 Ala- 0(01₂)₇(¾ (1.00 g) 、ァセトイミド酸ェチル塩酸塩（0.30 g)およびトリェチルァミン（0.5 ml) を用い、例 1と同様に反応を行った。得られた粗生成物を 0DS カラムクロマトグラフィ ― (富士シリシァ DM 1020T、 50 g) にチャージして 10〜36%ァセトニトリル /0. IN 酢酸溶液にて段階的グラジェント溶出した。目的物を含む画分を集めて凍結乾燥し、標題の化合物を白色粉末として 0.14 g得た。

FAB マススぺクトル m/z ： 757 (Μ+Η⁺ )

[α] ₍₎ +15.0 ° (c=l.01, IN 酢酸）

Rf ： 0.70 (n- BuOH:AcOH:H₂0:ピリジン = 15:3:10:12) 例 47〜50

例 46の方法に従って表 4に示す化合物を合成した。表 4 例構造式 m/z [a]_D Rf

47 H_:iC-C ( H) -Tyr (C0CH_;t) -D-MetO-Phe-Me β Ala-0 (CH,) ,₅CH_:! 867 +10.5 0.71

48 H_;1C-C (NH) -Tyr (C0CH_:!) -D-MetO-Phe-Me β Ala-OECE 761 +16.3 0.69

49 H.C-C (NH) -Tyr (COCH,) -D-MetO-Phe-Me β Ala-OPht 1 777 +15.0 0.67

50 H_:iC- C (NH) -Tyr [CO,CH (CH_:!) ,j - D- MetO- Phe- Me β Ala-0 (CH,) ,CH_:1

759 +5.6 0.71 例 51： H,C-C (NH) -Tyr-D-HNLE-Phe-Me β Ala-OH

(1) Z-D-HNLE (MOM) -Phe- Me β Ala- OCH_:,

Boc-Phe-Me β Ala-OCH_:! (9.56 g) を 4N HC1/ 酢酸ェチル溶液 (50 ml)に溶解し、室温で 45 分撹拌した。反応液を減圧濃縮し、塩化メチレンに溶解後、飽和重曹水で洗浄した。この溶液を硫酸マグネシウムで乾燥後、溶媒を減圧濃縮して得られた残留物を DMF (10 ml) に溶解した。この溶液に Z- D-HNLE(M0M)-0H (6.83 g) 、 HOBt (2.97 g) および WSCI (1.72 g) を- 12 °Cで加え、 -12 °Cで 30 分、さらに室温で終夜撹拌した。反応液に酢酸ェチルを加え、 10% クェン酸、飽和重曹水、次いで飽和食塩水で洗浄した。有機層を硫酸マグネシウムで乾燥後、溶媒を减圧濃縮して無色油状物 11.9 gを得た。

(2) Z-Tyr (Bz 1) -D-HNLE (MOM) -Phe-Me fl Ala-0CH_;t

上記（1)で得た Z- D- HNLE (MOM) - Phe- Me β Ala-0CH_:i (11.4 g) をメタノール (50ml) に溶解し、触媒として 5% Pd-C (2g)を加え室温で 2 時間接触還元を行つた。触媒を濾別後、濾液を減圧濃縮した。得られた残留物を DMF (20 ml) に溶解し、 Z-Tyr (Bzl)-OH (7.30g) 、 HOBt (2.70 g) 、 WSCI (3.83 g) を -12 °Cで加え、 1時間撹拌後、室温で終夜撹拌した。反応液に酢酸ェチ'レを加え、 1N塩酸、飽和重曹水、次いで飽和食塩水で洗浄した。有機層を硫酸マグネシウムで乾燥後、溶媒を減圧濃縮して無色無定型固体として 14.1 gの目的物を得た,、 (3) Z - Tyr(Bzl)- D- HNLE-Phe- Me β Ala-OMe

上記（2)で得た Z-Tyr(Bzl)-D-HNLE( OM)-Phe-Me β Ala-0CH (12.0 g) をメタノール（200 ml)に溶解し、濃塩酸 (0.3 ml) を加えて 1 時間 20分間還流した。メタノールを減圧濃縮して得られた残留物に酢酸ェチルを加え、 1N 塩酸、飽和重曹水、次いで飽和食塩水で洗浄した。有機層を硫酸マグネシウムで乾燥後、溶媒を減圧濃縮して溶媒を减圧濃縮して得られた残留物をシリ力ゲル力ラムクロマトグラフィ一（クロ口ホルム：メタノール = 100 ： 1 にて溶出）で精製して白色粉末 6.27 g を得た。

(4) Z-Tyr (Bz 1 ) - D- HNLE- Phe-Me β Ala- OH

上記（3)で得た Z- Tyr(Bzl) - D-HNLE - Phe- Me Ala-OMe (2.34 g)をメタノール（33 ml)に溶解した。この溶液に 0 °Cで 2N NaOH 水溶液（3 ml) を加え、室温で 4 時間、さらに 40°Cで 40分撹拌した。反応液に 0 °Cで 6N塩酸を加えて pHを 2 に調整後、酢酸ェチルで抽出した。有機層を飽和食塩水で洗浄した後、硫酸マグネシゥムで乾燥し、溶媒を減圧濃縮して無色油状物として 2.3 g 得た。

(5) H₃C-C (NH) -Tyr-D-HNLE-Phe-Me β Ala- OH

上記（4)で得た Z-Tyr (Bz 1) -D-HNLE (MOM) -Phe-Me β Ala-0H (2.3 g)をメタノール（30ml) に溶解し、触媒として 5% Pd-C (1 g) を加え室温で 3 時間接触還元を行った。触媒を濾別後、濾液を減圧濃縮した,:，得られた残留物を DMF (20ml) に溶解し、ァセトイミド酸ェチル塩酸塩（1.11 g)および KHC0:, (1.2 g) を加えた。二の溶液を室温で 2時間撹拌後した。反応液を减圧濃縮し、得られた残留物を 0DS カラムクロマ卜グラフィ一（富士シリシァ DM 1020T、 125 g ) にチャージして 5〜 18 %ァセ卜二卜リル /0.1 N 酢酸溶液にて段階的グラジェン卜溶出した，目的物を含む画分を集めて凍結乾燥し、標題の化合物を白色粉末として 0.66 g 得た。 FAB マススぺク卜ノレ m/z ： 585 (Μ+Η' )

[ ^ +30.2³ (c=1.00, IN 酢酸）

Rf ： 0.61 (n-Bu0H:Ac0H:H,0:ピリジン = 15： 3： 10： 12) ί列 52： H_:JC-C (NH) -Tyr-D-ONLE-Phe-Me β Ala-OH

(1) Z - Tyr(Bzl)-D— ONLE- Phe- Me β Ala-OMe

例 51- (3)で得た Z-Tyr(Bzl)-D-HNLE-Phe-Me β Ala-0CH_:i (12.0 g) を塩化メチレン（20 ml) に溶解し、 PCC (1.94 g)を加えて 2 時間撹拌した。反応液に塩化メチレン（30 ml)で希釈し、硫酸マグネシウムを加えて暫く撹拌後濾過した。濾液を減圧濃縮して得られた残留物をシリカゲルカラムクロマ卜グラフィ一（クロ口ホルム：メタノール = 100： 1 にて溶出）で精製して無色油状物 3.1 gを得た。

(2) Z-Tyr (Bz 1) - D-ONLE- Phe- Me Ala-OH

上記（1) で得た Z - Tyr(Bzl) - D- ONLE-Phe-Me 0 Ala-OMe (2.34 g)をメタノール (33 ml)に溶解した。この溶液に 0°Cで 2N NaOH 水溶液（3 ml) を加え、室温で 4 時間、さらに 40°Cで 40分撹拌した。反応液に 0 °Cで 6N塩酸をを加えて pHを 2 に調整後、酢酸ェチルで抽出した。有機層を飽和食塩水で洗浄した後、硫酸マグネシゥムで乾燥し、溶媒を減圧濃縮して無色油状物 2.3 gを得た。

(3) H_;!C-C (NH) -Tyr-D-ONLE-Phe-Me β Ala-OH

上記（2) で得た Z-Tyr (Bzl) -D-ONLE-Phe-Me β Ala-OH (2.65 g) を例 51- (5)と同様に反応を行った。得られた粗生成物を 0DS カラムクロマトグラフィー（富士シリシァ DM 1020T、 125 g) にチャージして 5〜20 %ァセ卜二トリル /0.1 N酢酸溶液にて段階的グラジェント溶出した。目的物を含む画分を集めて凍結乾燥し、標題の化合物を白色粉末として 0.72 g得た。

FAB マススぺクトノレ m/z ： 583 (Μ+Η' )

[α] „ ·'^:1 +23.0° (c=1.05, IN 酢酸）

f ： 0.64 (n-Bu0H:Ac0H:H,0:ピリジン = 15:3: 10: 12) 例 53及び 54

例 8の方法に従って表 5に示す化合物を合成した。表 5 例構造式 m/_Z [α]„ Rf

53 HC-C(NH)-Tyr-D-Cit-Phe-Mei3Ala-0CH,0(CH,) 0CH, 701 +23.5 0.65

54 H_:)C-C (NH) -Tyr-D-Ci t-Phe-Me β Ma~0 (CH,) ₇CH 725 +18.1 0.68 例 55： H,C-C (NH) -DMT-D-Orn (Ac) - Phe (p-F) -Me β Ala-OEt ·酢酸塩

Boc-DMT-D-Orn (Ac) -Phe (p-F) -Me β Ala-OEt (3.0 g)を 4N HC1/酢酸ェチル (15 ml)に溶解し、室温で 30分間撹拌した。反応液にジェチルエーテルを加えて析出した結晶を濾取した。この結晶を水（25 ml)に溶解し、ァセトイミド酸ェチル塩酸塩（1.33 g)及び炭酸水素カリウム（1.80 g)を加えた。この溶液を室温で 1時間 30分攪拌した。反応液を減圧濃縮し、得られた残留物を 0DS カラムクロマトグラフィ一（富士シリシァ DM 1020T、 140 g) にチャージして 12〜16% ァセトニトリル /0.1 N 酢酸溶液にて段階的グラジェント溶出した。目的物を含む画分を集めて凍結乾燥し、標題の化合物を白色粉末として 1.20 g得た。

FAB マススぺクトル m/z ： 685 (M+1T )

[a]_D ²³ +42.3 ° (c=1.00， IN酢酸）

Rf ： 0.67 (n-BuOH:AcOH:H_¾0:ピリジン = 15: 3: 10: 12) 56：本発明のぺプチド誘導体の鎮痛活性

本発明のペプチド誘導体の鎮痛活性を国際公開 W097/10262 に記載の方法に従つて圧刺激法にて評価した。マウスの尾根部に 10 難 Hg/秒の割合で圧刺激を加え、もがき、刺激部位への嚙みつきなどの行動を示す圧力を測定し、これを疼痛反応閎 ί直とした。実験には予め 40〜50 mmHgの圧力に反応するマウスを用いた。また、最大刺激圧は 100 mmHgとした。鎮痛効果は次式：％ of MPE=(Pt-Po)/(Pc- Po) X 100 (式中、 Poは薬物処理前の疼痛反応閾値： Ptは薬物処理 t分後の疼痛汉、閱慨； Pcは最大刺激圧である) に従い、 percent of maximum possible effect (% of MPE) として算出した。経口投与により得られた鎮痛効果の結果を以下の表 5に示す。また、バイオアベイラビリティ一（BA) は、薬物をマウスに皮下投与又は経口投与して得られる鎮痛活性値（ED^ mg/kg)の比〔ED (経口） /ED₅₀ (皮下）〕として算出した。対照としてモルヒネを用いた。この結果から、本発明のペプチド誘導体は経口投与においても極めて優れた鎮痛活性を発揮できることが明らかである。表 6 実施例 No. 構造 ED₅。 (経口） ED_sn (皮下） BA

26 H_:iC- C (NH) - Tyr (C0CH_:i) - D- MetO- Phe- Me β Ala- OH

1. 2 mg/kg 0. 14 mg/kg 9

14 H.,C-C (NH) -Tyr-D-MetO-Phe-Me β Ala- 0 (C¾) ₁₅CH_;j

3. 6 0. 38 10

48 H₃C-C (NH) -Tyr (C0CH₃) - D- MetO- Phe-Me β Ala-OECE

2. 7 0. 25 11

51 H₃C-C (NH) - Tyr- D- HNLE- Phe- Me β Ala- OH 7. 9 0. 80 10 55 H_;)C-C (NH) -DMT-D-Orn (Ac ) -Phe (p-F) -Me β Ala-OEt

〈10. 0 0. 49 〉20 モルヒネ（対照） 22. 2 3. 3 7 産業上の利用可能性

本発明のぺプチド誘導体は優れた鎮痛作用と経口吸収性を兼ね備えており、癌疼痛等の予防及びノ又は治療のための医薬の有効成分として有用である。

Claims

求の範囲

1. 下記の式（I) ：

HN=C(R') - AAに AA²-AA^:i- AA'¹- OR²

[式中、

R'は C_{1 W}アルキル基、アミノ基、モノ（ ₆アルキルアミノ基、ジ（ ₆アルキルァミノ基、又はフエ二ル基を示し；

R²は水素原子、 C_{I 6}アルキル基、ハロゲン化 C,__l6アルキル基、ヒドロキシ（：卜₁₆ァルキル基、。ァノレコキシ置換ァノレキノレ基、 C_1-6アルコキシ -C卜 ₆アルコキシ置換 C,__tiアルキル基、ァミノ C,_₁₆アルキル基、モノアルキルアミノ C_1-16アルキル基、ジ（：卜₆アルキルアミノ（：ト₁₆ァノレキノレ基、 C_:i_„)シクロアルキル基、。シクロアルキル置換アルキル基、 C₂_₁₆アルケニル基、（^_|6アルキニル基、 C₆ 。ァリール基、 C_fi_₁₆7リール置換 C₁₆アルキル基、（：《__|6ァリール- C₁₆アルコキシ置換 C_{l 6}アルキル基、置換基を有することもあるフタリジル基、（^₆アルコキシ力ルボニルォキシ C卜 ₆アルキル基、又は C₂_₇アルカノィルォキシ _₆アルキル基を示し；

AA¹は下記の式：

{式中、 X は水素原子を示すか、又は、下記の式： -CO- Y- R^:t (式中、 R^:iは C_{l l6}ァルキル基、ヒドロキシ C_Mt)アルキル基、ァミノアルキル基、モノ C，_₆アルキルァミノ C卜 ₁₆アルキル基、ジ _ήアルキルアミノ C卜 _|6アルキル基、 C_3-l0シクロアルキル基、。シクロアルキル置換 C,-₆アルキル基、 c₂-₁₆アルケニル基、（^ ₁₆ァルキニル基、 C_ti_,。ァリール基、（：₆ ァリール置換（：卜₆アルキル基、又は複素環基を示す）で表される基を示し、 R⁴及び R⁵はそれぞれ独立に水素原子、 C_{I S}アルキル基、ハロゲン化 C_{I H}アルキル基、又はハロゲン原子を示し、 Y は酸素原子又は単結合を示す } で表される L -ひ-アミノ酸残基を示し；

KK¹ は下記の式：

R⁶

(CH₂)_n

(式中、 R "はアミノ基、モノ C ₆アルキルアミノ基、 C,_₆ァシルァミノ基、 C,-₆ァルキル基を有することもあるグァニジノ基、 1-ィミノ _₆アルキル基、（：卜₆ァノレキル基を有することもあるウレィド基、 < ₆アルキルチオ基、 C_1-6アルキルスルフィニノレ基、（：卜₆アルキルスルホニル基、 C_1-6ァシル基，又は 1-ヒドロキシ C卜 ₆ アルキル基を示し、 _n は 1〜4 の整数を示す）で表される D- α -アミノ酸残基を示し；

ΑΑ³は下記の式：

(式中、 R⁷は水素原子、（：卜₆アルキル基、ハロゲン化 C_{l ti}アルキル基、又はハロゲン原子を示す）で表される a -アミノ酸残基を示し；

AA'は下記の式： - N OT) - CH(R⁹) -CH (R'ⁿ) - CO- (式中、 R R、及び R¹" はそれぞれ独立に水素原子、 C_{l 6}アルキル基、 C_{2 6}アルケニル基、 C_{2 6}アルキニル基、 ,。ァリール基、又は C₆-₁₆ァリール置換 ₆アルキル基を示す）で表される / -ァミノ酸残基を示し；

ただし、 R⁶がァミノ基、モノ C_{1 6}アルキルアミノ基、 C_{1 6}ァシルァミノ基、 C,_₆ァルキル基を有することもあるグァニジノ基、卜ィミノ C_{I H}アルキル基、 C_{1 6}アルキル基を有することもあるウレィド基、 C_1-6アルキルチオ基、（：卜 _sアルキルスルフィエル基、又はアルキルスルホニル基であり、かつ及び X が共に水素原子である場合を除く]

で表される化合物又はその塩。

2 . R¹が C_{l 6}アルキル基又はァミノ基である請求の範囲第 1項に記載の化合物又はその塩。

3 . R'がメチル基、ェチル基、又はアミノ基である請求の範囲第 2項に記載の化合物又はその塩。

4 . AA^:iが置換若しくは無置換の L-フヱニルァラニン残基、又は置換若しくは無置換の D-フヱニルァラニン残基である請求の範囲第 1項ないし第 3項のいずれか 1項に記載の化合物又はその塩。

5 . AA³が L-フエ二ルァラニン残基、 D-フエ二ルァラニン残基、 L- P-フルオロフェニルァラニン残基、 D-p-フルオロフヱ二ルァラニン残基、 L-0-トリフルォロメチルフヱ二ルァラニン残基、及び D- 0-トリフルォロメチルフエ二ルァラニン残基からなる群から選ばれるァミノ酸残基である請求の範囲第 1項ないし第 4項の V、ずれか 1項に記載の化合物又はその塩。

6 . AA'が N-メチル - -ァラニン残基である請求の範囲第 1項ないし第 5項のいずれか 1項に記載の化合物又はその塩。

7 . AA¹が L-チロシン残基、 2, 6-ジメチル -L-チロシン残基、 0-ァシル -L-チロシン残基、 0-アルコキシカルボニル- L-チロシン残基、又はフエノキシカルボ二ル- L -チロシン残基である請求の範囲第 1項ないし第 6項のいずれか 1項に記載の化合物又はその塩。

8 . AA が D-メチォニンスルホキシド残基、 D-アルギニン残基、又は D-シトルリン残基である請求の範囲第 1項ないし第 7項のいずれか 1項に記載の化合物又はその塩。

9 . AA²が D-N⁵-ァセチルオル二チン残基、 D- 5-ォキソノルロイシン残基又は D - 5 - ヒドロキシノルロイシン残基である請求の範囲第 1項ないし第 7項のいずれか 1 項に記載の化合物又はその塩。

1 0 . ^が C卜 _1Hアルキル基、（：_{6- |0}ァリール基、 C_{K |6}ァリール置換 C, _sアルキル基、アルコキシ置換 C_l 。アルキル基、（ _TTアルコキシカルボニルォキシ C,_₆アルキル基、又はフタリジル基である請求の範囲第 1項ないし第 9項のいずれか 1項に記載の化合物又はその塩。

1 1 . R¹がメチル基、ェチル基、又はアミノ基であり、 R²が C_{1- 16}アルキル基、 C₆__l0 ァリール基、ァリ一ル置換 C ₆アルキル基、 C H。アルコキシ置換。アルキル基、アルコキシカルボニルォキシ c _tiアルキル基、又はフタリジル基であり、 AA'力； L -チロシン残基、 2， 6-ジメチル -L-チロシン残基、 0-ァシル -L-チロシン残基、 0-アルコキシカルボニル -L-チロシン残基、又はフエノキシカルボ二ル- L-チロシン残基であり、 AA²が D- N⁵-ァセチルオル二チン残基、 D- 5-ォキソノル口イシン残基又は D- 5-ヒドロキシノルロイシン残基であり、 AA³がいフエ二ルァラニン残基、 D-フエ二ルァラニン残基、 L-p-フルオロフェニルァラニン残基、 D - P- フルオロフェニルァラニン残基、 L-o-卜リフルォロメチルフエ二ルァラニン残基、及び D- 0-卜リフルォロメチルフエ二ルァラニン残基からなる群から選ばれるァミノ酸残基であり、 AA⁴が N-メチル- -ァラニン残基である請求項 1に記載の化合物又はその塩。

1 2 . R¹がメチル基であり、 AA'が L-0-ァセチルチロシン残基であり、力； D - メチォニンスルホキシド残基であり、 AA^:iが L-フエ二ルァラニン残基であり、 M⁴ が N-メチルァラニン残基であり、 R'²が水素原子である請求の範囲第 1項に記載の化合物又はその塩。

1 3 . R¹がメチル基であり、 AA'がぃチロシン残基であり、 AA²力； D-メチォニンスルホキシド残基であり、 AA³が L-フエ二ルァラニン残基であり、 AA⁴ 力； N-メチル- /3 -ァラニン残基であり、 R²力;-（CH₂) _l5C¾ である請求の範囲第 1項に記載の化合物又はその塩。

1 4 . R¹がメチル基であり、 AA¹がい 0-ァセチルチロシン残基であり、 M²が D- メチォニンスルホキシド残基であり、 AA³がし-フエ二ルァラニン残基であり、 AA⁴ が N-メチル - -ァラニン残基であり、力; - CH (CH:,) OC0 H₅である請求の範囲第 1項に記載の化合物又はその塩。

1 5 . R¹がメチル基であり、 AA¹が L-チロシン残基であり、 AA²が D-5 -ヒドロキシノルロイシン残基であり、 M³が L-フエ二ルァラニン残基であり、 AA⁴力； N-メチル- β -ァラニン残基であり、 R'²が水素原子である請求の範囲第 1項に記載の化合物又はその塩。

1 6 . R¹がメチル基であり、 AA'が L-チロシン残基であり、 ΑΑ²が D -メチォニンスルホキシド残基であり、 Μ³が L-フエ二ルァラニン残基であり、 Μ⁴が Ν-メチノレ- /3 -ァラニン残基であり、 R²カ (CH₂) ₇CH₃である請求の範囲第 1項に記載の化合物又はその塩。

1 7 . R¹がメチル基であり、 M¹が 2, 6 -ジメチル- L-チロシン残基であり、 M²力； D-N⁵-ァセチルオル二チン残基であり、 AA³が P-フルオロフェニルァラニン残基であり、 AA⁴が N-メチル - ]3 -ァラニン残基であり、 R²が- C C である請求の範囲第 1項に記載の化合物又はその塩。

1 8 . 請求の範囲第 1項ないし第 17 項のいずれか 1項に記載の化合物又は生理学的に許容されるその塩を有効成分として含む医薬。

1 9 . 疼痛の予防及び/又は治療に用いる請求の範囲第 18項に記載の医薬。

2 0 . 経口投与用の医薬用組成物の形態の請求の範囲第 18項又は第 19項に記載の医薬。

2 1 . 請求の範囲第 18項ないし第 20項のいずれか 1項に記載の医薬の製造のための請求の範囲第 1項ないし第 17 項のいずれか 1項に記載の化合物又は生理学的に許容されるその塩の使用。

2 2 . 疼痛の予防及び/又は治療方法であって、請求の範囲第 1項ないし第 17 項のいずれか 1項に記載の化合物又は生理学的に許容されるその塩の予防及びノ又は治療有効量を患者に投与する工程を含む方法。