WO1999053941A1

WO1999053941A1 - Preparations orales contenant des derives de trh

Info

Publication number: WO1999053941A1
Application number: PCT/JP1999/002006
Authority: WO
Inventors: Katsuji Sugita; Norihito Satoh; Takanori Yoshikawa
Original assignee: Shionogi & Co., Ltd.
Priority date: 1998-04-15
Filing date: 1999-04-15
Publication date: 1999-10-28

Description

明細書

T RH誘導体含有経口投与製剤技術分野

本発明は、甲状腺刺激ホルモン放出ホルモン（ thyrotropin releasing hormone；以下「TRH」と略称する）またはその誘導体を含有する経口投与製剤に関する。背景技術

TRHは、視床下部から発見されたホルモンで、その構造は、 L一ピログルタミル一 L一ヒスチジルー L—プロリンアミド（ p— G l u— H i s — P r o— N H₂) である。 T RHは、下垂体における甲状腺刺激ホルモンやプロラクチンの放出促進作用のみならず、中枢神経系に作用して様々な薬理作用を発現することが知られている（Medical Topics Series,神経べプチド' 9 1，メディカルレビュー社）。また中枢神経系への作用を増強した TRH 誘導体も、その構造は一般に T RH同様、 3つのアミノ酸又はその誘導体から構成されており、その多くは分子量が約 3 7 0〜 4 3 0程度のものであり、例えば以下の文献に記載されている [J. Med. Chem, 33， 2130-2137 (1990)および特開昭 6 1 — 3 3 1 9 7号（例：タルチレリン； TA— 0 9 1 0 ) ； Biomedical Research 14 (5) 317-328 (1993)および Z A 7 5 0 5 9 5 6 (例：モンチレリン； C G 3 7 0 3 ) ； Arzneim.-Forsch/Drug Res., 39, 297-303 (1989)および特開昭 5 6— 8 3 5 4号（例：ポサチレリン； R GH 2 2 0 2 ) ； Eur. J. Pharmacol.276, 177-182 (1995)および特開平 3— 2 3 6 3 9 7号（例： J T P— 2 9 4 2 ) ；特公平 2— 3 6 5 7 4号（例： 1 —メチルー L一 4， 5ジヒドロォロチルー L—ヒスチジルー L—プロリンアミド）；特開昭 5 2— 1 1 6 4 6 5 (例： 2，3，4 ,5—テトラヒドロー 2 —ォキソ— L一 5 —フランカルボ二ルー L—ヒスチジル— L—プロリンアミド）；特公平 3— 2 3 6 3 9 7 (例：（ 1 S,2 R) — 2 —メチルー 4一才キソシクロペンチルカルボ二ルー L一ヒスチジル— L一プロリンアミド）；特公昭 5 9 — 3 6 6 1 2 (例：ォロチルー L一ヒスチジルー L—プロリンアミド）； Eur. J. Pharmacol., 271, 357 (1994) (例： TRH— S R) ；特開昭 5 2— 30 80号； Eur. J. Pharmacol.277, 63-69 (1995)および特開昭 6 0— 2 7 9 8 2号（例：ァゼチレリン； YM 1 46 7 3) ；特開昭 6 0— 2 3 32 6号（例： D N 1 4 1 7 ) ：特開昭 6 2— 2 34 02 9号；特開昭 5 6— 8 3 54号； W096ノ 1 1 209号； WO 9 8/0 8 86 7号等】。

ところでこれら T RHまたはその誘導体（以下、両者を総称して単に T RH誘導体ともいう）は、一般に消化管内酵素に対する安定性は髙いものの、水溶性が高い等の理由から消化管からの吸収性が乏しい。実際、例えばタルチレリン（T

A— 0 9 1 0 ) について、ラット経口投与時のバイオアベイラビリティ一が 3. 9 %の低い値として報告されている（薬物動態 12 (5) 460-474 (1997)) 。従つて、ほとんどの T RH誘導体は、経口剤としてではなくやむなく注射剤として開発または使用されている。また TRHは、例えば脊髄小脳変性症の運動失調に対して有効性が認可されているが、経口吸収性の問題から、本疾患患者は連日通院して注射による治療が必要である。しかし、歩行障害を主症状とする脊髄小脳変性症の患者にとって、連日の通院による投薬は社会生活上困難を伴い、臨床現場からは経口剤の開発が望まれている。

このような状況下、 TRH誘導体の経口剤としては、例えば、ポリカルボン酸やォキシカルボン酸を配合した製剤（特開昭 6 0— 2 33 2 6号）等が報告されているが、さらに別タイプの経口剤の開発が要望されている。

一方、特開平 1一 2 5 7 1 5号には、消化管内酵素に対して易分解性のエステル類、ァミド類を中鎖脂肪酸卜リグリセリドに溶解又は懸濁させることにより、該酵素分解を抑制した経口剤が記載されている。また特開平 8— 9 2 0 8 8号には、難水溶性薬物であるジヒドロチェノピリジン誘導体に対して、中鎖脂肪酸トリグリセリドおよびレシチンを配合して溶解性を改善し、吸収性を向上させた経口剤が記載されている。さらに WO 8 8 / 7 8 7 1号には、レシチンを含有する経皮的または経粘膜的な投与に適合する医薬組成物が記載されている。しかしこれらの文献中には、 TRH誘導体の経口吸収性の改善方法についてなんら具体的な記載はない。また一般に薬物の経口吸収性には、水溶解性や消化管内酵素に対する安定性など種々の物性が関与しており、当業者といえども特定薬物の経口吸収性の改善方法は個々の物性に鑑み鋭意検討して始めて明らかになる類いものであり、 T RH誘導体の経口吸収改善についても上記文献等から示唆されるものではない。発明の開示

本発明者らは T R H誘導体の経口吸収性を改善する方法について種々検討した結果、中鎖脂肪酸トリグリセリドとの併用が非常に好ましいことを見出した。さらに、中鎖脂肪酸トリグリセリドにレシチンを組み合わせ経口投与すれば、 TR H誘導体の経口吸収性が改善されることも見出し、以下に示す本発明を完成した。

( 1 ) 主薬として L -ピログル夕ミル一 L—ヒスチジルー L一プロリンアミド又はその誘導体、及び中鎖脂肪酸トリグリセりドを含有することを特徴とする経口投与製剤。

(2) さらにレシチンを含有する、上記（ 1 ) 記載の製剤。

(3) レシチンが大豆レシチンである、上記（2) 記載の製剤。

(4) 中鎖脂肪酸トリグリセリドを、主薬に対して 1 ~ 2 00倍（重量比）含有する、上記（ 1 ) 記載の製剤。

( 5) レシチンを、主薬に対して 0. 1〜 1 0倍（重量比）含有する、上記（ 2 ) 記載の製剤。

( 6 ) 主薬が式：

(式中、 H e t ¹, H e t ²はそれぞれ以下に示すいずれかの基を表し

(R ¹は水素またはアルキル； Xは C H ₂又は〇）；

Zは C H ₂または S ；

R²はアルキル、一 CH₂OR³、一 C〇NHR⁴、一 COOR⁵又は— CN (R³、 R⁴及び R⁵は、それぞれ独立して水素、置換されていてもよいアルキル又は置換されていてもよいァラルキル）を表す）で示される化合物、その製薬上許容される塩またはそれらの水和物である、上記（ 1) 記載の製剤。

( 7 ) 中鎖脂肪酸トリグリセリドおよびレシチンを含有しない製剤と比較した場合に、レセルピン前処理マウスに経口投与後の体温上昇速度が約 2倍以上である、上記（ 1 ) 〜（6) のいずれかに記載の製剤。

(8) 中鎖脂肪酸トリグリセリドおよびレシチンを含有しない製剤と比較した場合に、ラットでのバイオアベイラビリティ一が約 3 0倍以上である、上記（ 1 ) ~ (6) のいずれかに記載の製剤。本製剤の主薬である TRH誘導体としては、例えば前記式（ I ) で示される化合物（ I ) を含めて、前記文献等に記載の種々の T RH誘導体が例示される。化合物（ I ) 中、 R ¹および R ²におけるアルキルは、それぞれ独立して直鎖または分枝状の炭素数 1〜 1 0のアルキルを包含し、メチル、ェチル、 n—プロピル、イソプロピル、 n—ブチル、 t 一プチル、ペンチル、へキシル、ォクチル、ノナニル、デカニル等が例示されるが、好ましくは炭素数 1〜 5のアルキルであり、より好ましくはメチルである。

R³、 R⁴および R ⁵おけるアルキルは、直鎖または分枝状の炭素数 1〜 1 6のアルキルを包含し、メチル、ェチル、 n—プロピル、イソプロピル、 n—プチル、 t—ブチル、ペンチル、へキシル、ォクチル、ノナニル、デカニル、ゥンデ力二ル、ドデカニル、トリデカニル、テトラデカニル、ペンタデカニル、へキサデ力ニル等が例示されるが、好ましくは炭素数 1〜 5のアルキルであり、より好ましくはメチル、ェチル、プロピル等である。該アルキルは、ハロゲン（例： F、 C 1、 B r、 I ) 、ヒドロキシ、ァミノ、カルボキシル、ニトロ等の置換基によつて置換されていてもよい。

R³、 R⁴および R ⁵おけるァラルキル（例：ベンジル、フエネチル等）は、上記アルキルの場合と同様の置換基によって置換されていてもよい。

これらは、製薬上許容される塩を形成していてもよく、例えば酸付加塩（例：酒石酸、シユウ酸、フマール酸、クェン酸、リンゴ酸、乳酸、ォレイン酸、パルミチン酸、酢酸、塩酸、硫酸等）等が例示される。

本製剤における TRH誘導体の含有量は、通常、製剤全体に対して約 0.1〜 2 0重量％、好ましくは約 0.5〜 2 0重量％、より好ましくは約 1〜 1 0重量％である。

中鎖脂肪酸トリグリセりドとしては、好ましくは各脂肪酸の炭素数が 8〜 1 2 のものであり、例えば ODO (日清製油）、ミグリオ一ル（ミツバ貿易）、バナセート（日本油脂）、ココナ一ド（花王）、ミリトール GM (ヘンケル白水）、 T.C.G. (高級アルコール工業）、サンフアット MCT— 6 (太陽化学）、ァクター（理研ビタミン）等が例示される。中鎖脂肪酸トリグリセリドの含有量は、製剤全体に対して、通常、約 50〜9 9重量％、好ましくは約 80~9 9重量％、より好ましくは約 90〜 9 8重量％である。また主薬に対して通常、重量比で約 1 ~200倍、好ましくは約 5〜 1 00倍、より好ましくは約 1 0~ 50倍、さらに好ましくは約 20 - 3 0倍である。中鎖脂肪酸トリグリセリドの含有量が多すぎると、主薬濃度が低くなつて所望の薬理効果が得られない恐れがあり、一方、含有量が少なすぎると充分な経口吸収が達成されないので、やはり所望の薬理効果が得られない。

本製剤において T R H誘導体の経口吸収性をよりいっそう高めるためには、レシチンの添加が好ましい。レシチンとしては、天然の卵黄レシチン、大豆レシチンおよびそれらの水添レシチンや合成のホスファチジルコリン等が例示されるが、好ましくは大豆レシチンである。レシチンを添加する場合その含有量は、製剤全体に対して、通常、約 0 . 1〜 2 0重量％、好ましくは約 0. 5〜 1 5重量％、より好ましくは約 1 ~ 1 0重量％である。また主薬に対して通常、重量比で、約 0 . 1〜 1 0倍、好ましくは約 0 . 5〜 5倍、より好ましくは約 1 ~ 3倍である。本製剤においてレシチンは溶解状態にあることが好ましい。レシチンの含有量が多すぎると、レシチンが中鎖脂肪酸トリグリセリドに溶解せずに薬物の吸収性を逆に妨害する恐れがある。

本製剤の形態は、例えば、液剤、散剤、軟カプセル剤、硬カプセル剤、錠剤、顆粒剤等であるが、好ましくは散剤、硬カプセル剤等である。また中鎖脂肪酸トリグリセリド（好ましくは O D O ) とレシチンを組み合わせてなる \WO型ェマルジョンの形態であってもよい。

本製剤は所望により、陚形剤（乳糖、デンプン、結晶セルロース等）、結合剤 (ヒドロキシプロピルセルロース等）、崩壊剤（C M C— N a、 C M C— C a等）、滑沢剤（ステアリン酸マグネシウム等）、溶解補助剤（クェン酸トリエチル、トリアセチン等）、吸収促進剤（ポリカルボン酸、ォキシカルボン酸等）、安定化剤、可溶化剤、懸濁化剤、分散剤等の医薬品添加物を含有し得る。

本製剤の製造法は特に限定されないが、通常、主薬を中鎖脂肪酸トリグリセリドに溶解又は懸濁させればよい。得られた懸濁液等を用いて散剤にすることも可能であり、またそれらをカプセル充填してもよい。

投与量は疾患の状態や年齢、投与ルート等によって異なるが、通常、成人に対して主薬として、約 0 . 1 ~ 1 0 0 mg/日、好ましくは約 1〜 2 0 mg/日の範囲内である。

本製剤においては、主薬に対して中鎖脂肪酸トリグリセりドを併用することにより経口吸収性が改善され、実際、ラット、犬、マウス等各種動物におけるバイォアベイラビリティ一の改善が確認された。その改善効果は、実際の薬効面においても現れており、例えば、レセルピンで前処理したマウスに対して本製剤を経口投与した場合には、中鎖脂肪酸トリグリセリド無添加の生理食塩水や注射用蒸留水等に溶解させた製剤と比較して、投与後、直腸温度の急速な上昇が認められた。本製剤を投与した場合の該温度上昇速度は、投与後約 2時間までにおいて、中鎖脂肪酸トリグリセりド無添加製剤の場合と比べて約 2倍以上であった。しかもその温度上昇効果は、投与後 2時間以降も急速に低下することなくある程度持続し、投与後約 7時間後における温度値も、該無添加製剤とほぼ同レベルを維持していた。

さらに本製剤において、レシチンを中鎖脂肪酸トリグリセリドに対して極少量添加するだけで、バイオアベイラビリティ一がー段と改善され、実際、ラットにおいては、対照製剤と比較して 3 0〜 4 0倍の改善効果が認められた。

これらの事実からも明らかなように、本製剤は以下の特徴を有する。

( 1 ) 主薬の少量投与でも、即効的に効率よく薬効を発揮する。

( 2 ) 薬効の持続化が達成される。

( 3 ) 経口投与が可能であるので、注射剤のような苦痛なく投与ができ、また患者の自宅療法も可能。図面の簡単な説明

図 1 は、試験例 3において行ったレセルピン前処理マウスにおける T R H誘導体経口投与後の体温上昇効果を示すグラフである。発明を実施するための最良の形態

以下に試験例、実施例を挙げて本発明を詳しく説明するが、本発明はこれらにより限定されるものではない。

試験例 1

T R H誘導体の生物学的利用率（Bioavailability) を比較するために、頸静脈力二ユレーシヨンを施したラット（ s 1 c w i s t a r系、 1 1週齢，雄，体重 2 50〜260 g， N= 4 ) に、以下に示す各被験化合物を各処方で、 10mg/ r a tの量、絶食下、経口投与した。投与後経時的に採血し、血漿分離後、血漿中の未変化体濃度を以下に示す H P L C法により定量した。結果を表 1に示す。

[H P L C法]

カラム YMC P a c k AM - 302 4. 6 mm I D. x 1 50 mm 移動相 P I C B— 5 ZM e C N = 83ノ 1 7

流速 1. Om l / min.

快出 UV= 2 00 nm

[被験化合物]

X Het² Z R ¹ R ²

T R H C *a C H C ONH₂

化合物 A o *b C M e C O NH 2

化合物 B 0 *b S M e CONH₂

化合物 C 〇 *b c M e C N

化合物!） o *b c M e Me (Me -メチル）

(注）上記各化合物は、 WO 9 8/0 886 7号に記載されている。化合物 E

[処方] 対照例 1 (水溶液）

被験化合物 1 Omgを注射用蒸留水 1 m 1 に溶解させた。

本製剤 1 (ODO懸濁液）

被験化合物 1 O mgを ODO— C (日清製油） 2 4 O mgに添加し、超音波照射後、マグネチックスターラーで攪拌して均一に分散させた。

本製剤 2 (大豆レシチン添加 ODO懸濁液）

大豆レシチン（ツル一レシチン工業社製、 S L P—ホワイト S P) 1 2.5 mg を ODO— C (日清製油） 2 2 7.5 mgに溶解させる。この溶液に被験化合物 1 Omgを加えて、超音波照射後、マグネチックスターラーで攪拌して均一に分散させた。

(表 1 )

経口投与後の Bioavailability評価（ 0— 6時間，％) Mean士 S .D. _ 製剤 T R H A B C D E_ ― 対照例 1 0.1±0.2 0.0土 0.0 0.7土 0.8 0.0±0.0 3.4士 1.4 0.9土 0.3 本製剤 1 3.4±1.0

本製剤 2 3.4±2.3 6.5土 1.7 25.5土 21.1 4.1±3.5 13.2土 4.1 33.7±24.9 (注） Bioavailabilityは、別途実施した静注実験の時の A U Cを基準に投与量を補正して算出した絶対的生物学的利用率を表わす。

対照例 1の処方に比べて、本製剤 1では、 T RH誘導体の吸収性が約 5倍に改善された。またレシチンを添加した本製剤 2ではさらに吸収性が改善され、 TR Hで約 3 0倍、 T RH誘導体では最高約 4 0倍の吸収改善効果が認められた。試験例 2

ビーグル犬（体重 9 ~ l l k g (平均 1 0.4 ± 0.7 k g) , OMK産雄性（N = 4 ) と雌性（N= 2 ) の計 6頭）に、上記被験化合物を以下の処方で、 1 0 mg/kgの量、絶食下、水 2 5 m 1 と共に経口投与した。一定時間経過後に前肢静脈より採血し、血漿分離後、血漿中の未変化体濃度を上記 H P L C法により定量した。結果を表 2に示す。

[処方】

本製剤 3 (大豆レシチン添加 ODO懸濁液）

大豆レシチン（ツル一レシチン工業社製、 S L P—ホワイト S P) 1 00 m g を ODO— C (日清製油） 1 80 Omgに溶解させる。この溶液に、被験化合物 l O Omgを加えて、超音波照射後、マグネチックスターラーで攪拌して均一に分散させた。

(表 2 )

経口投与後の Bioavailability評価（ 0— 6 h r、 %) Mean士 S . D .

製剤化合物 B 化合物 C 化合物 D

本製剤 3 19.4± 13.0 11.4±3.5 — 42.4土 12.0

(注） Bioavailabilityは、別途実施した静注実験の時の A U Cを基準に投与量を補正して算出した絶対的生物学的利用率を表わす。試験例 3

レセルピン前処置したマウス（s 1 c d d Y, 体重 3 0〜3 5 g, N= 5 ) に、化合物 Aを以下に示す処方で、 0.2 mol/k gとなるように非絶食下で経口投与 (約 0.2m l ) した。経時的に直腸体温を測定し、体温上昇を薬理効果の指標とした。

[処方】

対照例 2 (生理食塩水溶液）

化合物 A 0.7 m gを生理食塩水 1 0m l に溶解させた。

本製剤 4 (OD〇懸濁液）

00〇溶液 1 0m l に化合物 Aを 0.7 mg加えて超音波照射後、マグネチックスターラーで攪拌して均一に分散させた（レシチン含まず）。図 1に結果を示す。対照例 2の処方（一画一）では体温上昇が生理食塩水投与時（一▲一）とほぼ同じ傾向であるのに対し、本製剤 4 (-·-) では投与直後より急速な体温上昇が認められた。実施例 1

前記化合物 A 1 0 g, パナセ一ト 800 (日本油脂製） 1 00 gおよび大豆レシチン 1 0 gを、マグネチックスターラーで充分に混合攬拌して懸濁液を得る。実施例 2

前記化合物 B 1 5 g、ミグリオール（ミツバ貿易） 2 00 gおよび大豆レシチン 1 5 gを、マグネチックスターラーで充分に混合攪拌して懸濁液を得る。この懸濁液を常法に従ってカプセル機で充填し、軟カプセル剤を得る。

実施例 3

前記化合物 C 20 g、 ODO— C (日清製油） 40 0 gおよび大豆レシチン 3 O gを、マグネチックスターラーで充分に混合攪拌して懸濁液を得る。この懸濁液を常法に従ってカプセル機で充填し、硬カプセル剤を得る。

実施例 4

前記化合物 D 1 0 g、ココナード（花王） 200 gおよび大豆レシチン 1 0 g を、マグネチックスターラーで充分に混合攪拌して懸濁液を得た。この懸濁液にシリカ（カープレックス #80 , シオノギ）を添加して散剤を調製し、カプセル機で充填し硬カプセル剤を得た。産業上の利用可能性

中鎖脂肪酸トリグリセライドを含有する本製剤を用いることにより、 TRH誘導体の経口吸収性が改善され、その結果、バイオアベイラビリティ一が著しく向上した。さらに少量のレシチンを添加することで、バイオアベイラビリティ一がよりいつそう改善された。なお、中鎖脂肪酸トリグリセライドの変わりに、高級脂肪酸である大豆油や小麦胚芽油等も用いて同様に経口吸収性を調べたが、十分な改善効果は認められず、むしろ薬効の低減が認められた。一般に TRH誘導体は消化管内酵素に対する安定性が高いことから、本発明による経口吸収の改善は、 T RH誘導体の消化管粘膜透過性そのものを向上させた結果であると考えられる,

Claims

請求の範囲

1. 主薬として L -ピログルタミルー L—ヒスチジル一 L—プロリンアミド又はその誘導体、及び中鎖脂肪酸トリグリセリドを含有することを特徴とする経口投与製剤。

2. さらにレシチンを含有する、請求項 1記載の製剤。

3. レシチンが大豆レシチンである、請求項 2記載の製剤。

4. 中鎖脂肪酸トリグリセリドを、主薬に対して 1〜 2 0 0倍（重量比）含有する、請求項 1記載の製剤。

5. レシチンを、主薬に対して 0. 0 1〜 1 0倍（重量比）含有する、請求項 2記載の製剤。

6. 主薬が式：

(式中、 H e t H e t ²はそれぞれ以下に示すいずれかの基を表し

(R ¹は水素またはアルキル； Xは CH₂又は〇）

Zは C H ₂または S ；

R ²はアルキル、一 C H₂O R ³、一 C〇NHR ⁴、 — C〇O R ⁵又は— C N (R ³ R ⁴及び R ⁵は、それぞれ独立して水素、置換されていてもよいアルキル又は置換されていてもよいァラルキル）；

M eはメチルを表す）

で示される化合物、その製薬上許容される塩またはそれらの水和物である、請求項 1記載の製剤。

7 . 中鎖脂肪酸トリグリセリドおよびレシチンを含有しない製剤と比較した場合に、レセルピン前処理マウスに経口投与後の体温上昇速度が約 2倍以上である、請求項 1〜 6のいずれかに記載の製剤。

8 . 中鎖脂肪酸トリグリセリドおよびレシチンを含有しない製剤と比較した場合に、ラットでのバイオアベイラビリティ一が約 3 0倍以上である、請求項 1 〜 6 のいずれかに記載の製剤。