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WO1997037040A3 - Isolation et/ou amplification d'acides nucleiques du virus de l'hepatite c (hcv) a partir d'echantillons susceptibles de contenir ce virus - Google Patents

Isolation et/ou amplification d'acides nucleiques du virus de l'hepatite c (hcv) a partir d'echantillons susceptibles de contenir ce virus Download PDF

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Cornelis Johannes Andreas Sol
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Jaap Goudsmit
Marcellinus Gualbertus Hu Beld
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Abstract

Procédés permettant de séparer aisément une substance composée d'acides nucléiques monocaténaires (HCV) d'une substance composée d'acides nucléiques bicaténaires, ces substances étant contenues dans un échantillon. Par le choix judicieux d'au moins un agent chaotropique, de préférence un sel de guanidine, à une concentration sélectionnée, et d'autres conditions appropriées, relatives à la présence d'agents chélateurs, à la valeur du pH, etc., il est possible de lier une substance bicaténaire à une phase solide, telle que des particules de silice, alors que, dans ces mêmes conditions, une substance monocaténaire ne se lie pas. En séparant les particules de silice de l'échantillon, on en extrait en même temps la substance composée d'acides nucléiques bicaténaires, qui peut être aisément séparée par élution des particules de silice. Au cours d'une deuxième étape, on peut lier la substance composée d'HCV monocaténaire à une phase solide en sélectionnant un ensemble de conditions différentes. De nouveau, on peut séparer les particules de l'échantillon, et la substance monocaténaire peut alors être extraite par élution. On peut répéter ce processus pour améliorer l'efficacité de séparation. Après séparation, chaque type d'acide nucléique peut être amplifié. On décrit des procédés d'amplification ne nécessitant pas de données de séquençage de la substance à amplifier. Selon ces procédés, une amorce sera pourvue d'un motif d'amplification et d'un motif d'hybridation aléatoire.
PCT/NL1997/000167 1996-04-03 1997-04-03 Isolation et/ou amplification d'acides nucleiques du virus de l'hepatite c (hcv) a partir d'echantillons susceptibles de contenir ce virus WO1997037040A2 (fr)

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