WO1997003042A1

WO1997003042A1 - Acide 2,2-dideutero-5-aminolevulinique

Info

Publication number: WO1997003042A1
Application number: PCT/JP1996/001948
Authority: WO
Inventors: Hisao Takayanagi
Original assignee: Mitsubishi Chemical Corporation
Priority date: 1995-07-12
Filing date: 1996-07-12
Publication date: 1997-01-30
Also published as: EP0845457A1; EP0845457A4; CA2226544A1; US5945564A

Description

明細書

2 , 2 —ジジュ一テロ一 5 —アミノレブリン酸技術分野

本発明は、 M R I (磁気共鳴画像）用造影剤として有用な 2， 2—ジジユーテ口一 5 —アミノレブリン酸に関する。より詳細には、 2， 2—ジジュ一テロ— 5 一アミノレブリン酸、その塩、それらの水和物または溶媒和物およびこれを必須成分とする M R I用造影剤に関する。背景技術

M R Iは、生体の病理学的な形態変化を可視的に画像化することで疾患を正確に診断する優れた手法であり、すでに広範に利用されている診断法のひとつである。現在用いられている MR Iはを検出核としており、生体中の水分子が、その存在する組織により、あるいは組織の病理学的な異常の有無により異なった環境に置かれることによって生じる核の緩和時間の差を画像化するものである。

核の緩和時間に影響を与えることにより、環境差の顕在化、あるいは画像の鮮明化を図ることができ、このような目的で M R I造影剤がしばしば用いられる。現在用いられている M R I造影剤には種々のコンセプ卜のものがあるが、いずれもょ11核を検出核種とする MR I診断に用いられるものであることに変わりはない。もっとも、これら M R I造影剤は、消化管用の一部の造影剤を除いていずれも血管内投与されるため、患者にほとんど苦痛を与えないという M R I診断の利点を損なっているのが現状である。従って、患者にほとんど苦痛を与えない経口投与可能な M R I造影剤が求められている。

一方、生体内の水分子を測定するのではなく、 NM R分光学的に検出可能な以外の核種を測定核種として用いる M R I診断法も試みられている。このような測定核種として、例えば¹⁹ F、 ^2ΰΝ a , ³¹ P、 ¹³ Cを利用することができる。生体組織に存在しない核種を用いたこの方法では、を核種とする M R I診断では不可能な検出核をトレ一サ一とした画像診断を行うことができ、を核種とする MR I診断では得られないケミカルシフ卜の情報を得ることもできるので、その有用性は極めて高い。

重水素（D= ²H) は NMR分光学的に検出可能な安定核種であり（Ch em. P h a r m. B u l l . V o l . 38， N o. 9 , p 2 6 1 0 - 26 1 3, 1 9 90 ；超伝導型生体超分子 NMRシステムの開発平成 4年度 N o. 03558029, p 38, 1993等）、それに加えて、天然存在比が 0. 015 %と非常に低く、生体組織には存在しないに等しい。従って、重水素を測定核種とする MR I診断法は、極めて有用な診断方法となることが期待される。それにも拘わらず、重水素を測定核種として含む造影剤に関する研究はほとんどなされていない（例えば、米国特許第 5, 042, 488号明細書、及び特開平 6— 206883号公報などを参照のこと）。

従って、本発明の目的は、重水素を測定核種として含む MR I診断用造影剤を提供することにあり、より具体的には、重水素を測定核種として含み、特定の生体組織に高い親和性を有する造影剤を提供することにある。また、本発明の別の目的は、上記の特徴を有する MR I診断用造影剤であって、経口投与可能な造影剤を提供することにある。発明の開示

本発明者らは、上記課題を解決すべく鋭意検討を重ねた結果、生体内に投与された 2 , 2—ジジユーテロ— 5—アミノレプリン酸が M R Iにより測定可能であり、肝臓などの生体組織に特異的に集積して高い造影効果を発揮できることを見いだした。また、 2, 2—ジジユーテロ— 5—アミノレブリン酸の上記造影効果が、経口投与によっても十分に発揮できることを見いだした。本発明は上記の知見を基にして完成されたものである。

すなわち、本発明によれば、 2， 2—ジジユーテロ一 5—アミノレブリン酸及びその塩、並びにそれらの水和物及び溶媒和物が提供される。本発明の別の態様によれば、 2, 2—ジジュ一テロ— 5—アミノレブリン酸及びその塩、並びにそれらの水和物及び溶媒和物からなる群から選ばれる物質を含む MR I診断用造影剤が提供される。本発明のさらに別の態様によれば、 2 ， 2 —ジジユーテロ一 5 —アミノレプリン酸の製造方法であって、以下の工程：（a ) 5 , 5 —ジメトキシ— 2 —ピペリドンを重水素化する工程；及び（b ) 上記工程で得られた重水素化合物を加水分解する工程を含む方法、並びに、 2， 2 —ジジュ一テロ— 5 —アミノレブリン酸の製造方法であって、以下の工程：（c ) 2， 2—ジジユーテロ— 4 —ペンテン酸の二重結合をエポキシ化する工程；（ d ) 上記工程で得られたェポキシ化合物にアジド化合物を反応させてエポキシ環を開環する工程；（e ) 上記工程で得られた開環体の水酸基（保護されていてもよい）を酸化する工程；及び、（ f ) ァジド基を還元してアミノ基に変換する工程を含む方法が提供される。図面の簡単な説明

第 1図は、本発明の M R I診断用造影剤を M R I測定した際のスぺクトルである。発明を実施するための最良の形態

本発明の 2， 2 —ジジユーテロ一 5 —アミノレプリン酸は下記式（ I )

で表される。

上記の 2， 2 —ジジュ一テロ一 5—アミノレブリン酸が形成しうる塩としては、例えば、塩酸塩、臭化水素酸塩、ヨウ化水素酸塩、硝酸塩、リン酸塩等の無機酸塩、コハク酸塩、シユウ酸塩、フマル酸塩、マレイン酸塩、乳酸塩、酒石酸塩、クェン酸塩、酢酸塩、グリコール酸塩、メタンスルホン酸塩、トルエンスルホン酸塩等の有機酸塩、アルカリ金属塩、アルカリ土類金属塩、アンモニゥムあるいはアルキルアンモニゥム塩等が挙げられる。また、上記の 2， 2—ジジュ一テロ一 5—アミノレプリン酸およびその塩は、水和物または溶媒和物を形成することもできる。溶媒和物としてはメタノール、エタノール、イソプロパノール、ァセトン、酢酸ェチル、塩化メチレン等が挙げられる。本発明化合物のうち、最も好ましい化合物としては、 2， 2—ジジユーテロ 5—アミノレブリン酸の塩酸塩を挙げることができる。

本発明化合物は、例えば下記反応ル一卜に従って合成することができる。

(A) (B)

OR D

R0ィ化合物 ( I )

H

(C)

(上記式中、 Rはメチル基、ェチル基等の低級アルキル基を表す。）

文献既知（J . Am. C h em. S o c. , 8_0, 37 1 7 ( 1 958) ) のピぺリジンー 2， 5—ジオン（Α) に、メタノール、エタノール等の低級モノァルコール、エチレングリコール等のジオールを酸性触媒あるいは脱水剤の存在下に作用させた後、酸性触媒の存在下でオルトエステルを作用させ、さらに 5位力ルポニル基をァセタールとして保護した 5, 5—ジメトキシ— 2—ピぺリドン（Β) を得る。ついで、塩基の存在下で、 5, 5—ジメトキシ— 2—ピぺリドン（Β) を重水素化合物との水素、重水素交換反応に付して 3, 3 -ジジュ—テロ— 5， 5—ジメトキシ一 2—ピペリドン（C) とし、これを酸加水分解することにより対応する酸の塩として 2， 2—ジジユーテロ— 5—ァミノレブリン酸を製造できる。

(Α) からアルコールとの反応によって（Β) を製造する際、酸性触媒としては、塩酸、 P — トルエンスルホン酸、リン酸等のプロトン酸、塩化カルシウム、三フッ化ホウ素エーテラート等の非プロトン酸のいずれを用いてもよい。その使用量は 1当量から触媒量、好ましくは触媒量であり、脱水剤としては分子ふるい及び酸性触媒を兼ねて塩化カルシウム等が用いられる。反応は、一般的には、当該アルコールを溶媒兼用で用い、 0 °Cからアルコールの沸点温度の範囲の反応温度で行なう。あるいは塩化メチレン、エーテル、トルエン等適当な溶媒を用いて共沸蒸留操作により脱水を行いつつ反応を行ってもよい。オルトエステルとしてはオルトギ酸メチル、オルトギ酸ェチル等が用いられ、溶媒として対応するメタノール、エタノール等を用いることができる。触媒としては上記のアルコールとの反応で用いられる酸性触媒を利用できる。

( B ) から（C ) の製造において、重水素化化合物としては重水（D₂ 0 ) 、重水素化メタノール（C H₃ O Dあるいは C D。 O D ) 等の重水素を容易に解離しうる化合物が用いらる。塩基としては、これらの重水素化化合物に可溶で、ケトンのひ一位プロトンを引き抜く能力を有し、かつ、解離しうるプロ卜ンを持たない塩基を用いることができる。例えば、重水素化水酸化ナトリウム、ナトリウムメ卜キシド等の金属アルコキシドが用いられる。用いる重水素化化合物の重水素化率および作用させる当量数に応じて（C ) の重水素化率を任意に選ぶことができるが、重水素化化合物は、通常、 1から 2 0 0当量を溶媒兼用で用い、塩基は触媒量を使用すればよい。一般的に、水素、重水素交換反応は- 2 0 °Cから溶媒の沸点、好ましくは 0から 5 0 °Cの反応温度で、 3 0分から 1 0日間、好ましくは 5時間から 2日間行なえばよい。

( C ) から 2， 2 —ジジュ一テロ一 5 —アミノレブリン酸の製造において用いられる酸としては、薬理学的に許容される塩酸、臭酸等の無機酸、あるいはメタンスルホン酸、 p —トルエンスルホン酸等の有機酸があげられる。反応は、（C ) に対して 1から 1 0当量、好ましくは 1から 3当量の酸を用い、メタノール、エタノール、テトラヒドロフラン等の水と混和する有機溶媒を含む水、あるいは水のみを溶媒として、 0から 2 0 0 °C、好ましくは 5 0から 1 0 0ての温度で、 3 0分から 5日間、好ましくは 3時間から 1 0時間行えばよい。

また、化合物（ I ) は、 2， 2 —ジジュ一テロ— 4 一ペンテン酸（D .) より、例えば、以下の合成経路によっても製造できる,

(D) (E)

(F) (G)

(H) (J) 化合物（ I )

(上記式中、 R¹ はメチル基、ェチル基などの低級アルキル基、又はベンジル基を表し、 R² は置換シリル基で保護されていてもよい水酸基を表す。 )

化合物（D) は文献（J . Am. C h e m. S o c . ， 1 1 8, 2 6 3 4

( 1 996 ) ) の方法によっても合成できるが、酢酸— d₄ をァリル化する方法によっても合成できる。

化合物（D) から、例えば、（ 1 ) ジァゾメタンを作用させる方法、（2) 酸クロリドとした後にアルコールを作用させる方法、（3) 鉱酸、有機酸、ルイス酸などの酸触媒の存在下でアルコールとの脱水反応を行う方法、あるいは（4 ) ジシクロへキシルカルボニルジイミド、カルボニルジイミダゾ一ル等のカルボキシル基の活性化剤を用いる方法等、通常のエステル化の方法により化合物（E ) を得ることができる。

その後、この化合物に対して、孤立二重結合をエポキシ化するのに用いられる方法、例えば、有機過酸、アルキルヒドロペルォキシド、過酸化水素などの酸化剤を作用させる方法、あるいは含水有機溶媒中で N—プロモスクシンイミド等の N—ハロカルボン酸アミドを作用し、生成するハロヒドリンを塩基処理する方法等により化合物（F) を製造できる。有機過酸としては、過酢酸、 m—クロ口過安息香酸などを用いることができ、塩化メチレン、クロ口ホルム等の適当な有機溶媒中で、化合物（E) に対して 0. 1〜1 0当量、好ましくは 1〜1. 5当量の有機過酸を— 2 0°C〜 1 5 0°C、好ましくは 0°C〜 1 00°Cの反応温度で 1時間から 1 0日間、好ましくは 5時間から 3日間作用させる。アルキルヒドロペルォキシド、過酸化水素を用いる場合には、チタニウム、アルミニウム、バナジム、モリブデン等の金属酸化物錯体を触媒として用いることができる。反応条件を適宜選択することにより、化合物（E) を単離 ·精製することなく、化合物（D) から化合物（F) を製造することも可能である。

上記の方法で製造した化合物（F) から、エポキシ環をアジドア二オンで開環する方法、例えば、アルコール系溶媒中でアンモニゥムアジドを作用させる方法

( J . O r g. C h em. , _ _Q_， 1 556 ( 1 985) を参照）、過塩素酸リチウム等の金属塩の存在下にァセトニトリル中でナトリウムアジドを作用させる方法（T e t r a h e d r o n L e t t e r s, 3 1 , 5 64 1 ( 1 990) を参照）、トリメチルシリルアジド、トリー η—ブチルスタニルァジド等のアジド化合物を触媒なしで作用させる方法、（ T e t r a h e d r o n L e t t e r s, 30, 4 1 5 3 ( 1 989 ) を参照）、あるいは卜リメチルシリルァジド、トリ— n—プチルスタニルアジド等のアジド化合物を触媒存在下に作用させる方法（T e t r a h e d r o n : A s ymm e t r y， ^_， 4 3 7

(1 99 1 ) 参照）等により化合物（G) を製造することができる。

上記の反応において、トリメチルシリルアジド、トリ— n—ブチルス夕ニルァジドの替わりに、例えば、 t―ブチルジメチルシリルァジド、 t -ブチルジメチルスタニルアジドを用いることにより、水酸基が t—プチルジメチルシリル基で保護された化合物を製造することができる。また、アンモニゥムアジドとの反応の際に、特に R¹ がメチル基、ェチル基の場合、エステルの加水分解が起こり易く、 R¹ が水素原子である化合物、すなわちカルボン酸塩が生成する場合がある。この化合物の R¹ の水素原子を R² の水酸基と脱水反応させるとラクトンが生成する。また、カルボン酸の抽出溶液に、例えばジァゾメタン等のエステル化剤を直ちに作用させると、 R¹ がメチル基、 R² が水酸基の化合物（G) を製造できる。上記のラクトン体は、水酸化リチウム、水酸化ナトリウム等の金属水酸化物を作用させることによりカルボン酸塩に変換することができるので、この方法により一旦生成したラクトンを R² が水酸基であるエステル体に変換することが可能である。 R² の水酸基を保護している置換シリル基は、例えば、保護された化合物をメタノール等の適当なプロトン性溶媒中に溶解して攪拌することにより容易に除去され、 R² が水酸基の化合物に誘導することができる。

上記の方法で製造した R² が水酸基である化合物（G) から、二級アルコールをケトンに酸化する方法、例えば（1) ジヨーンズ試薬、クロ口クロム酸ピリジニゥム等のクロム酢酸化、（2) ジメチルスルホキシド（DM SO) —三酸化硫黄 —ピリジン系、 DMS 0—無水トリフルォロ酢酸系を用いる DMS 0酸化、あるいは（3) 次亜塩素酸ナトリウム、次亜塩素酸カルシウムを用いる次亜ハロゲン酸酸化などにより、化合物（H) を製造できる。また、酸化剤の種類に応じて、例えば、ジヨーンズ試薬などを用いて酸化を行う場合には、 R² として置換シリル基で保護された水酸基を有する化合物（G) から、脱保護することなく直接化合物（H) を製造できる。

このようにして得た化合物（H) から、例えば、 R¹ に対応するアルコールを溶媒として用い、 1当量からそれ以上の塩酸の存在下で、例えば、活性炭に担持したパラジウム、パラジウム黒、酸化白金等の接触水素添加用触媒を用いて接触還元を行うことにより化合物（： ί を製造することができ、続いて、化合物（ J ) を水溶液中で酸性加水分解して化合物（ I ) を得ることができる。 R¹ がべンジル基である場合や、この反応をアルコールの替わりに含水溶媒中で行う場合には、化合物（J ) を単離することなく化合物（ I ) を製造することが可能である。本発明の化合物（ I ) は MR I診断用の造影剤として用いることができる。本発明の造影剤としては、上記の化合物（ I ) を単独で用いてもよいが、該化合物を薬理学的に許容される担体と複合して医薬組成物の形態で用いてもよい。本発明の造影剤は、経口的又は非経口的に投与することができ、例えば、顆粒剤、細粒剤、散剤、錠剤、硬シロップ剤、軟カプセル剤、シロップ剤、乳剤、懸濁剤、リボソーム、若しくは液剤等の形態の経口投与用組成物、又は、注射剤、点滴剤、若しくは座剤などの形態の非経口投与用組成物として投与することができる。本発明の造影剤は、経口投与によって十分な造影効果を発揮できるという特徴を有しているが、短時間での造影診断のためには注射剤として静脈内に投与する方法も好ましい。本発明の M R I診断用造影剤は、例えば肝臓などの組織に集積する性質を有しているので、例えば、肝臓癌などの癌組織、動脈硬化、リウマチ部位に選択的な造影剤として用いることができる。投与量は、経口投与の場合に約

1 0 O m gから 1 0 g程度、好ましくは 5 0 0 m gから 5 g程度である。

経口投与用の固体組成物を製造する際に用いられる賦形剤としては、例えば、乳糖、ショ糖、デンプン、タルク、セルロース、デキストリン、カオリン、炭酸カルシウム等が挙げられる。経口投与のための液体組成物、即ち乳剤、シロップ剤、懸濁剤、液剤等には、一般的に用いられる希釈剤などの不活性な液体媒体、例えば植物油等を混合することができ、さらに補助剤、例えば湿潤剤、懸濁補助剤、甘味剤、芳香剤、着色剤または保存剤等を配合してもよい。経口投与用の液体組成物を製造した後、ゼラチンのような吸収性物質のカプセル中に該液体組成物を含ませてもよい。非経口剤投与の製剤、即ち注射剤等の製造に用いられる溶剤、または懸濁化剤としては、例えば、水、プロピレングリコール、ポリエチレングリコール、ベンジルアルコール、ォレイン酸ェチル、レシチン等が挙げられる。上記の医薬組成物の製造方法としては、当業者に周知 ·慣用の方法を用いればよい。実施例

以下、実施例によって本発明を具体的に説明するが、本発明の範囲は下記の実施例に限定されるものではない。なお、実施例中に記載した化合物（A .) などの番号は、前記スキーム中に示した化合物番号に対応している。

例 1 ：化合物 B ( R =メチル基）の合成 2, 5—ピペリジンジオン（ 1. 8 g， 16mmo 1 ) のメタノール溶液 20m 1 に、オルトギ酸メチル 5m 1の溶液に約 5m gの p— トルエンスルホン酸を加えたものを加え、 12時間加熱還流した。冷却後 1 m 1のトリエチルァミンを加え、ロータリ一エバポレ一タ一にて濃縮した。残渣をシリ力ゲルカラムクロマトグラフィー（CHC 1₃ ： Me 0H= 15 ： 1 ) にて精製後、酢酸ェチル /エーテルから再結晶し、目的とする 5， 5—ジメ卜キシ一 2—ピペリドン（ 1. 85 g, 81 %) を得た。

m. p. 89 - 90 °C

½ - NMR (CDC 1₃ 300MH z) δ ： 2. 01 ( t , 2 H, J = 7.

OH z, NCOCH₂ -) 2. 43 (t, 2 H, J = 7. OH z, NCOCH₂ CH₂ -) , 3. 25 ( s , 6 H， 0 M e ) , 3. 36 (d， 2 H, J = 2. 5 H z， NCH₂ C (OMe) ) , 5. 89 (b s， 1 H， NH) .

P- S I MS (G l y c e r i n ma t r i ) 1 82 (M+ + 1. 8%) , 160 ( 1 00 %) , 1 28 ( 34 %) , 10 1 (5%) . 例 2 ：化合物（C) の合成

例 1で合成した 5， 5—ジメトキシー 2—ピぺリドン（ 5 0 0mg, 3. 4mmo 1 ) を、窒素雰囲気下で重水素化メタノール（CD₃ OD) 5m lに溶解し、これに NaODの 40%D。 0溶液を 0. 05 m 1加え、室温にて一昼夜かき混ぜた。冷却後、酢酸を徐々に加え、 pHを約 6. 5とし、ロータリ一エバポレーターにて濃縮した。さらに真空ポンプで溶媒等を留去し、残渣に 5 m 1のクロ口ホルムを加え、かき混ぜた後、濾過した。不溶物をさらにクロ口ホルムにて洗浄し、濾液を口一タリーエバポレーターにて濃縮した。酢酸ェチルノエ一テルから再結晶し、目的とする 3， 3—ジジュ一テロ一 5， 5—ジメトキシ— 2—ピペリドン（485 mg， 95%) を得た。

m. p. 87 - 88 °C

½-NMR (C D C 13 , 300 MH z, TMS) 5 : 1. 99 (s， 2 H, NCOCD₂ CH₂ -) , 3. 25 ( s , 6H， OMe) , 3. 35 (d， 2H， J = 2. 5 H z , NCH₂ C (OMe ) ₂ ) ， 6. 93 (b s， 1 H, NH) - P - S IMS (G l y c e r i n ma t r i x) 1 84 (M + 1. 5 %) 1 62 ( 1 00 %) , 1 30 (3 1 %) , 1 03 ( 5 %) . 例 3 ：本発明の化合物（ I ) の合成

例 2で合成した 3， 3—ジジユーテロ一 5， 5—ジメトキシー 2—ピぺリドン

(50 Omg, 3. 4mmo 1 ) を、窒素雰囲気下で 1 N塩酸水溶液に溶解し、 80°Cの油浴上 5時間かき混ぜた。ロータリ一エバポレータ一にて濃縮後、残渣をエタノール、エーテルから再結晶し、目的とする 2， 2—ジジュ一テロ一 5— アミノレプリン酸塩酸塩（462mg, 80%) を得た。

m. p. 147 - 149。C

½-NMR (D₂ 0, 30 OMH z) δ ： 2. 75 (s， 2 H, - CH₂ CD₉

―) , 3. 99 (s， 2H， NCH₂ -） .

P - S I MS (G l y c e r i n ma t r i ) 134 (M⁺ + 1 %) , 1 16

(1 8%) . 例 4 ：化合物（D) の合成

ジイソプロピルアミン（48m 1 , 0. 34mo l ) のテトラヒドロフラン溶液（20 Om 1 ) を— 1 0°Cから— 7 °Cで攪拌しながら、 n—ブチルリチウム— n—へキサン溶液（ 1 M溶液， 207 m l， 0. 34 m o 1 ) を加えた。このジイソプロピルアミド溶液に同温度で酢酸一 ( 10 g, 0. 1 56mo l ) とへキサメチルホスホロァミド（90m l ) を加えた。 3 0分後、了リルブロミド (1 3. 3m 1， 0. 1 56mo 1 ) を加えると、内温は一 7°Cから 30°Cに上昇した。室温で一夜攪拌した後、大部分のテトラヒドロフランを減圧留去し、残渣を氷水浴上で攪拌しながら酸性になるまで冷 1 N塩酸水を加え、ジェチルエーテルにて有機物を抽出した。エーテル層を乾燥（MgC 1₀)した後、濃縮して得られた残渣を蒸留して、目的とする 2， 2—ジジュ一テロ一 5—ペンテン酸（9. 3 g, 58%) を得た。

b. p. 79 - 82 °C OmmHg)

½ - NMR (CDC 1。， 300MH z ) δ : 2. 39 (d， 2H， J = 6. 3 H z, -CH₂ CD₂ -）， 5. 01 -5. 13 (m, 2 H, CH₂ =) , 5. 77 - 5. 89 (m, 1 H, CH₂ =C旦一） . 例 5 ：化合物（E) (R¹ =メチル基）の合成

例 4で得たカルボン酸（ 9. 1 g, 8 9 mm o 1 ) の塩化メチレン溶液 (27m l ) を氷水浴上で攪拌しつつ、カルボ二ルジィミダゾ一ル（17. 3 g, 106mmo 1 ) を少量ずつ加えた。 3時間攪拌した後、メタノール（5. 4 m 1 , 1 33mmo 1 ) を加え、一夜攪拌を継続した。反応混合物を冷水、飽和食塩水で洗浄した後、有機相を乾燥（MgC 1 して濃縮し、残渣を蒸留して目的とするメチルエステル体（3. 8 g, 26%) を得た。

b. p. 1 26 - 1 27。C

½ - NMR (CDC 1₃ , 300MH z) δ ： 2. 38 (d, 2 H, J = 6. 0H z， =CHC ₂ ) ， 3. 68 (s, 3H， OMe) , 4. 98— 5. 09

(m， 2H， C H₂ =) ， 5. 77 - 5. 89 (m, 1 H， C H„ = C E -) . 例 6 ：化合物（F) の合成

例 5で得たエステル体（ 2. 3 g , 2 0 mm o 1 ) の塩化メチレン溶液

( 120m I ) に m—クロ口過安息香酸（純度 55 %, 7. 5 g, 24 mm o 1 ) を攪拌しながら少量ずつ加えた。一昼夜室温で攪拌を継続した後、氷浴上で反応混合物に飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を加えて激しく攪拌した。有機相を分液し、水相を塩化メチレンで抽出して有機相と合わせた後、この有機相を水洗して乾燥（MgC 1。）した。溶媒を減圧留去して得られた残渣を減圧蒸留して、目的とするエポキシエステル体（2. 2 g, 85%) を得た。

b. p. 98 - 99°C C 36 mmH g )

NMR (CDC 1₃ ， 300 MH z ) δ : 1. 77 ( b d d, 1 H, J = 8. 5, 4. OH z, Cii_a H_b CD₉ -）， 1. 98 (b d d, 1 H, J = 8. 5, 2. 7Hz, CH^ H_b CD₂ -) , 2. 51 (d d, 1 H， J = 4. 9H z, 2. 7 H z, C —H H, D 0-) , 2. 76 ( t， 1 H, J = 2. 7 H z , CH。旦 _b CD₉ ， 2. 99 (m, 1 H， C旦 CH₂ CD₂ ) , 3. 69 ( s, 3 H， OMe) . 例 7 ：化合物（F ) の合成

例 4で得たカルボン酸（7. 5 g, 73. 5mmo 1 ) より、例 5と同様にしてエステル化及び後処理してエステル体を含む塩化メチレン溶液を得た。この溶液を蒸留精製することなく、例 6と同様に m—クロ口過安息香酸で酸化することにより、例 6で得たエポキシエステル体と同一の化合物を得ることができた（8. 0 g, 82%) 。例 8 ：化合物（G ) の合成

例 6で得たエポキシエステル体（7. 5 g, 56. 7mmo l ) 、トリメチルシリルアジド（ 1 2 m 1， 90 mm o 1 ) 、 DMF ( 12m l ) の混合物を、窒素ガス雰囲気下に 90°Cの油浴上で 40時間加熱攪拌した。冷却後、過剰の反応剤及び DM Fを減圧留去（約 42°C/9mmHg) し、残渣を少量のシリカゲルを用いたカラムクロマトグラフィー（n—へキサン：酢酸ェチル = 20 : 1 ) により精製し、目的とするアジド体（ 1 3. 4 g, 95%) を得た。

画 R (CDC 1₃ , 300 MHz) δ 0. 20 (s， 9H， - S i Me_g

) , 1. 85 (m, 2 H, CH₀ CD₉ ) , 3. 21 (d d， 1 H， J = 1 2. 5， 7. 7 H z, CH_a H_b N₃ ) , 3. 28 (d d， 1 H， J = 12. 5, 4. 3 H z, CH_a H_b N₃ ) , 3. 72 (s， 3 H, OMe) , 3. 86— 3. 93

(m， 1 H， CHO-) . 例 9 ：化合物（H) の合成

例 8で得たアジド体（ 13. 1 g, 53 mm 01 ) のァセトン溶液（150m l ) を氷冷下で攪拌し、ジョ—ンズ試薬（ 4 [0] mmo 1 /m 1 , 25 m 1 ) を滴下した。滴下終了後、氷水浴を外して薄層クロマトグラフィー上で原料が消失するまでさらに攪拌を継続した。反応液から大部分のァセトンを減圧留去した後、残渣にエーテル及び水を加えて分液した。有機相を 2回水洗した後に乾燥 (M g C 1₉)し、減圧濃縮して得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー (n—へキサン：酢酸ェチル = 7 ： 2) で精製して、ケトン体（6. 3 g, 69 %) を得た。

½-NMR (CDC 13 , 300 MHz) δ ： 2. 73 (s, 2 H, CH₂ CDg

) , 3. 69 (s, 3 H, 一 OMe) , 4. 03 (s， 2 H, N。 CH₂ -） . 例 10：化合物（ J ) の合成

例 9で得たアジド一カルボニル体（440 mg， 2. 5mmo l ) のメタノ一ル溶液（ 1 0m l ) に濃塩酸（ 0. 5m l ) を加え、 1 0 %パラジゥム /炭素

( 50 m g ) の存在下に水素を吸収させて、室温で約 2時間接触還元を行った。触媒を濾去し、触媒を洗浄した後、濾液を濃縮して目的とするァミン塩酸塩

(44 Omg, 94%) を得た。

m. p. 1 1 8— 1 2 1。C

^-NMR (CDC 13 , 30 OMH z ) δ ： 2. 87 ( s， 2 H, CH₂ CD₂

) , 3. 66 ( s， 3 H, -OMe , 4. 09 ( s， 2 H, NH₂ CH₂ -) . 例 11 :化合物（ I) の合成

例 10と同様にして、例 9で得たアジド—カルボニル体（ 3. 9 g, 2 2. 5mmo 1 ) をメタノール（70m l ) に溶解し、濃塩酸（2. 5m l ) と 10 ?4パラジウムノ炭素（40 Omg) の存在下で、室温下に接触還元を行った。得られた粗ァミン塩酸塩を 1 N塩酸水溶液（20m l ) に溶解し、一昼夜室温で放置した。シリカゲル薄層クロマトグラフィー（展開液， n—ブ夕ノール：水：酢酸 = 6 '· 2. 5 : 1. 5) で反応の完結を確認した後、反応液を濃縮して粗結晶を得た。メタノールとェチルエーテルの混合物から再結晶して、例 3で得た化合物（ I ) と同一の物理化学的性状を有する 2， 2—ジジユーテロ _ 5—アミノレブリン酸塩酸塩（ 3. 54 g, 92%) を得た。

このようにして製造した本発明の 2， 2—ジジュ一テロ一 5—アミノレブリン酸（塩酸塩）は無色から淡黄色の結晶であり、その — NMRスぺクトルは、重水素化していない 5—了ミノレブリン酸に観測される 2位プロトン（ 2. 59 p pm； t , 2 H, J = 2. 5 H z) が消失すると共に、 2. 77 p pm ( t , 2 Η, J = 2. 5 Η ζ ) の 3位プロトンが 1重線として 2. 75 p pmに出現していることから、 5 —アミノレプリン酸の 2位プロトンが重水素で置換されていることが証明された。さらに、 2， 2 —ジジユーテロ一 5 —アミノレブリン酸の塩酸塩の S I —MSスぺクトルは、 5—ァミノレブリン酸塩酸塩についての測定値より 2だけ分子量の大きな分子イオンピークを与え、 2 , 2—ジジュ一テロ— 5—アミノレブリン酸の構造を支持していた。なお、例 3で得られた 2， 2—ジジユーテロ一 5 —アミノレブリン酸（塩酸塩）の 0. 1 M水溶液を 1 力月間室温に放置した後、濃縮して — NMRスぺクトル分析を行ったところ、 D原子の減少は観測されなかった。試験例 1

1 Om 1のガラスサンプル瓶に充填した本発明の化合物（例 3の化合物）の 0. 1 M水溶液（D原子濃度は 2 0 0 μΜ) を、スぺクトル幅 1 O KH z、 F 0 V = 2 5 c m. スライス厚 = 1 O mm、 T R - O . 3秒、 T E = 5 0 m秒、サンプリング数 2 5 6、撮影マトリックス 2 5 6 x 2 5 6ポイント、積算回数 6 4回の条件で MR装置 B EM4 0 0/ 8 0 ( S M I M社製、 2テスラ）により MR測定したところ、明確な D画像が得られた。この結果は、重水（D₂ 0) 以外の有機化合物中の D原子によっても MR画像化が可能であることを示している。

一方、動物としてマウス（b a 1 b Z c、 5週齢、メス、 1 6 — 1 7 g ) を用い、マウス結腸癌 c 0 1 o n 2 6を大腿部外部にマウス当たり 5 X 1 0⁶ 個を皮下投与することにより接種した後、 1 3日目（癌体積約 l c m³ ) に本発明の化合物を強制経口投与（2 0 0 O m gZK g， 0. 1 111 1 体重1 0 ₂ ) し、 6時間後にペントバルビタールにて屠殺した。

この動物を用いて、同 MR装置で MR測定をおこなった。 iH及び Dの共鳴周波数は、それぞれ 8 5. 5 6 2と 1 3. 1 3 4 MH zであった。測定条件は、スぺクトル幅 5 0 0 0 H z、繰り返し時間（ T R ) 0. 4 1秒、待ち時間 2 0 0〃秒、積算 2 0 4 8である。その結果、第 1図に示すとおりの Dスペクトルが得られた。

5—アミノレプリン酸は、動物に投与された後に体内でボルフィリンに変換され、癌、動脈硬化、リウマチの各組織に集積することが知られている。その癌への集積量は、ラッ卜を用いた動物実験によれば、癌組織 1 g当たり、ポルフィリンとして 20— 40 mo 1に達する（G a s t r o e n t e r o l o g y、 1 03、 647 - 65 1 ( 1 992 ) を参照）。ポルフィリンは 5—アミノレブリン酸 8分子より構成されており、本発明の化合物は 5—アミノレブリン酸のポルフィリンに至る生合成経路上で脱離の起こらない 2個の水素原子が D原子で置換された化合物であるところから、癌組織に 20 0 1 Zg組織のポルフィリンが集積したとすると、癌組織中の D原子の量は、 20 x 8 x 2 = 320 im o l 組織であり、濃度では 320 Mとなる。実際に担癌動物から Dスぺクトルを観測できたことから、本発明の MR I診断用造影剤を用いて癌、動脈硬化、リゥマチ等の組織の選択的な D画像化が可能であることが示された。産業上の利用可能性

本発明の化合物は重水素（D= ²H) を検出核種とする MR I診断用造影剤として有用である。特に、本発明の化合物は経口的に吸収可能であるところから、患者にほとんど苦痛を与えないという MR I診断の利点を損なわない MR I診断用造影剤として有用である。

Claims

請求の範囲

1. 2 , 2—ジジユーテロ一 5—アミノレブリン酸若しくはその塩、又はそれらの水和物若しくはそれらの溶媒和物。

2. 2， 2—ジジユーテロ— 5—アミノレブリン酸塩酸塩。

3. 2, 2—ジジュ一テロ一 5—アミノレブリン酸及びその塩、並びにそれらの水和物及びそれらの溶媒和物からなる群から選ばれる物質を含む M R I診断用造影剤。

4. 2, 2—ジジュ一テロ一 5—アミノレプリン酸塩酸塩を含む M R I診断用造影剤。

5. 2, 2—ジジュ一テロ一 5—アミノレブリン酸の製造方法であって、以下の工程：

(a) 5, 5—ジメトキシー 2—ピペリドンを重水素化する工程；及び

( b ) 上記工程で得られた重水素化合物を加水分解する工程

を含む方法。

6. 2， 2—ジジユーテロ一 5—アミノレブリン酸の製造方法であって、以下の工程：

(c) 2, 2—ジジユーテロ— 4一ペンテン酸の二重結合をエポキシ化する工程；

( d ) 上記工程で得られたェポキシ化合物にァジド化合物を反応させてエポキシ環を開環する工程；

( e .) 上記工程で得られた開環体の水酸基（保護されていてもよい）を酸化する工程；及び

( f ) アジド基を還元してァミノ基に変換する工程；

を含む方法。