WO1995026969A1

WO1995026969A1 - Derive de moranoline

Info

Publication number: WO1995026969A1
Application number: PCT/JP1995/000609
Authority: WO
Inventors: Akira Hasegawa; Makoto Kiso; Yoshiaki Yoshikuni
Original assignee: Nippon Shinyaku Co., Ltd.
Priority date: 1994-03-31
Filing date: 1995-03-30
Publication date: 1995-10-12

Description

CT/JP9S/00609

1

明細書モラノリン誘導体技術分野

本発明は、新規なモラノリン誘導体に関する。本発明に係る化合物は、医薬の分野、例えば抗炎症剤ゃ抗ウィルス剤として有用である。背景技術

最近の研究によればシアル酸を舍有する糖脂質ゃ糖タンパク質の糖鎖が、ホルモン、細菌毒素、ウィルス、その他のものに対する受容体機能をもち、また、細胞の認識、分化 '増殖、接着、がん化、免疫、老化などの基本的でかつ動的な生命現象にも深く関与していることが明らかにされつつある。

そこで、シアル酸誘導体は有用な生理活性を持った物質として注目され、種々疾病の治療、診断及び予防剤としての研究がなされている。

例えば、抗ウィルス剤として、特開昭 6 3 - 1 3 9 1 9 3号公報、特開平 3— 2 5 1 5 9 3号公報等があり、又、免疫調整剤として、特開昭 6 1 — 2 4 3 0 7 4号公報や特開昭 6 2 - 2 0 9 0 9 4号公報等がある。さらに、がんの診断や治療への応用として特開昭 6 1 - 6 3 7 0 0号公報等がある。

本発明者らはシアル酸を舍有する種々の耱鎖抗原誘導体を鋭意研究し、医薬として優れた薬理作用を有する、モラノリンを舍む新規な糖鎖抗原誘導体を見出し、既に国際特許出願を行った（WO93/15098号公報）。

しかしながら、これらシアル酸誘導体は天然界に钹量成分として存在しているがゆえに、これら化合物を生体から純粋な単一化合物として得ることは極めて難しかった。そのためシアル酸誘導体の医薬品としての研究は、近年始まったばかりであり、その ¾ 床的応用が大いに期待されている。発明の開示

本発明の目的は、医薬として有用であり、かつ新規な構造を有するモラノリ.ン糖鎖抗原誘導体を提供せんとするものである。

今回、本発明者らは、さらなる検討を重ね、鋭意研究を行った結果、一般式〔I〕で表される化合物が上記目的に適合しうることを見出し本発明を完成した。

【I】

式中、 R¹は C8〜C30アルキル、 C8〜C30ァルケ-ル、又は C8〜C30アルキ- ルを表し、 R²、 R³はそれぞれ異なり、ガラクトシル、シァリルガラクトシル、又はフコシル基を表す。

本発明に係る化合物は、文献未記載の新規化合物であるとともに、後述するような優れた薬理作用を示す。

一般式〔I〕において R¹で示されるアルキルとしては、直鎖または分枝状の炭素数 8〜30のものが好ましく、例えば、ォクチル、イソォクチル、ノニル、イソノニル、デシル、イソデシル、ゥンデシル、イソゥンデシル、ドデシル、イソドデシル、トリデシル、イソトリデシル、テトラデシル、イソテトラデシル、ペンタデシル、イソペンタデシル、へキサデシノレ、イソへキサデシル、ヘプタデシル、イソへプタデシル、ォクタデシル、イソォクタデシル、ノナデシル、イソノナデシル、ィコシル、イソィコシル等を挙げることができる。

アルケニルとしては、直鎖または分枝状の炭素数 8〜30のものが好ましく、例えば、ォクテュル、ノネニル、デセニル、ゥンデセ -ル、ドデセニル、トリデセ -ル、テトラデセニル、ペンタデセ -ル、へキサデセ -ル、ヘプタデセニル、ォクタデセ -ル、ノナデセエル、ィコセニル、等を挙げることができる。アルキ-ルとしては、直鎖または分枝状の炭素数 8〜30のものが好ましく、例えば、ォクチ-ル、ノ- -ル、デシニル、ゥンデシ-ル、ドデシ-ル、トリデシエル、テトラデシ-ル、ペンタデシュル、へキサデシ-ル、へブタデシュル、ォクタデシ-ル、ノナデシ-ル、ィコシ -ル、等を挙げることができる。本発明に係る化合物として、後記する製法に係る例に記财る化合物に加えて、ノ以下の化合物を挙げることができるが，これらは本発明化合物の一都を例示するものであって、本発明化合物はこれらに限定されるものではない。

0— （5—ァセタミドー 3, 5—ジデォキシ一 D—グリセロー α— D—ガラクトー 2 -ノヌロビラノシル酸）一 (2→3) -0- (;9—D—ガラクトビラノシル）一（1→ 4) 一 0— C (α— Lーフコピラノシル）一（1→3) ] 一 Ν—ォクチルー 1, 5—ジデォキシー 1， 5—イミノー D—グルシトール

Ο— （5—ァセタミドー 3, 5—ジデォキシー D—グリセロー α— D—ガラクトー 2 ーヌロビラノシル酸）一 (2→3) 一 0— （i?一 D—ガラクトビラノシル）一（1→ 4) 一 O— 〔（α— Lーフコビラノシル）一（1→3) 〕一 Ν—ドデシルー 1, 5—ジデォキシー 1, 5—イミノー D—グルシトール

Ο— （5—ァセタミドー 3， 5—ジデォキシー D—グリセロー α-D—ガラクトー 2 ーノヌロビラノシル酸〉一 (2→3) 一 O— （ー D-ガラクトビラノシル）一（1→ 4) -0— 〔（α— Lーフコビラノシル）一（1→3) 〕一 Ν-テトラデシルー 1, 5 ージデォキシ一 1 , 5一 f ミノ一D—グルシトール

0— （5—ァセタミドー 3, 5—ジデ才キシー D—グリセ口一 α— D—ガラクトー 2 -ノヌロビラノシル酸） ― (2→3) -0- (^一 D—ガラクトビラノシル）一（1→ 4) 一 Ο— 〔（α— Lーフコピラノシル）一（ 1→3) 〕一 Ν—へキサデシルー 1, 5 一ジデォキシー 1， 5—イミノー D—グルシトール

- 0— （5—ァセタミドー 3, 5—ジデォキシー D—グリセロー α— D—ガラクトー 2 ーノヌロビラノシル酸）一（2→3) — Ο— （/3 -D—ガラクトビラノシル）一 (1→ 4) 一 Ο— C (α— L—フコピラノシル）一 (1→3) 〕一 Ν—ォクタデシルー 1, 5 一ジデォキシー 1， 5—イミノー D—グルシトール

O— （5—ァセタミドー 3, 5—ジデォキシー D—グリセロー α— D—ガラクトー 2 ーノヌロビラノシル酸）一 (2→3) 一 0— （/9一 D-ガラクトビラノシル〉一（1→ 4) 一 Ο— 〔（α— Lーフコビラノシル）一（1→3) 〕一 Ν-ィコシルー 1, 5—ジデォキシー 1, 5—イミノー D—グルシトール

Ο— （5—ァセタミドー 3, 5—ジデォキシー D—グリセロー α— D—ガラクトー 2 ーノヌロビラノシル酸）一 (2→3) -0- ( ー D—ガラクトビラノシル）一（1→ 4) -0- 〔（α-L—フコビラノシル）一（1→3) 〕一 N—ォクテュル一 1, 5 ージデォキシ一 1, 5—イミノー D—グルシトール

O— (5—ァセタミドー 3， 5—ジデォキシー D—グリセロー α— D—ガラクトー 2 -ノヌロビラノシル酸）一（2→3) — Ο— （3 -D—ガラクトビラノシル）一 (1→ 4) 一 0— 〔（α— Lーフコビラノシル）一 ( 1→3) 〕一Ν-ドデシュルー 1, 5 ージデォキシ一 1, 5—イミノー D—グルシトール

Ο— （5—ァセタミドー 3， 5—ジデォキシー D—グリセロー α— D—ガラクトー 2 ーノヌロビラノシル酸）一（2→3) -0- (jS— D—ガラクトビラノシル）一（1→ 4) 一 O— 〔（α— Lーフコビラノシル）一（1→3) 〕一 Ν—テトラデセニルー 1， 5—ジデォキシー 1， 5—イミノー D—グルシトール

0— （5—ァセタミドー 3, 5—ジデォキシー D—グリセロー α— D—ガラクトー 2 -ノヌロビラノシル酸）一 (2→3) -0— ( 3— D—ガラクトビラノシル）一 ( 1→ 4) 一 0— 〔（α— Lーフコピラノシル）一（ 1→3) 〕一 Ν—へキサデシュルー 1, 5—ジデォキシー 1, 5 Γミノー D—グルシトール

Ο— （5—ァセタミドー 3, 5—ジデォキシー D—グリセロー α— D—ガラクトー 2 ーノヌロビラノシル酸）一 (2→3) — Ο— （/3— D—ガラクトビラノシル）一（1→ 4) 一 0— 〔（α-L-フコピラノシル）一（1→3) 〕一 N—ォクタデセ-ルー 1， 5—ジデォキシ一 1， 5—イミノー D—グルシトール

0— （5—ァセタミ.ドー 3, 5—ジデォキシー D—グリセロー α— D—ガラクトー 2 ーノヌロビラノシル酸）一（2→3) — O— （^-D—ガラクトビラノシル）一（1→ 4〉一 0— C (α— Lーフコビラノシル〉一（1→3) 〕一 Ν—ィコシ-ルー 1, 5 一ジデォキシー 1, 5—イミノー D—グルシトール

0— （5—ァセタミドー 3， 5—ジデォキシ一 D—グリセロー α— D—ガラクトー 2 ーノヌロビラノシル酸）一 (2→3) 一 O— (iS— D—ガラクトビラノシル）一（1→ 3) 一 0— 〔（α— Lーフコピラノシル）一（1→4) 〕一 Ν—ォクチルー 1, 5—ジデォキシー 1, 5—イミノー D—グルシトール

Ο— （5—ァセタミドー 3， 5—ジデォキシー D—グリセ口一 α— D—ガラクトー 2 ーノヌロビラノシル酸）一 (2→3) 一 Ο— （3— D-ガラクトビラノシル）一（1→ 3) 一 0— 〔（α— Lーフコピラノシル）一 ( 1→4) 〕一Ν—ドデシルー 1, 5—ジデォキシー 1， 5—イミノー D—グルシトール

Ο— （5—ァセタミドー 3, 5—ジデォキシー D—グリセロー α— D—ガラクトー 2 ーノヌロビラノシル酸）一 (2→3) -0- (/3— D-ガラクトビラノシル）一（1→ 3) 一 0— 〔（α-L—フコビラノシル）一（1→4) 〕一 N—テトラデシルー 1, 5 一ジデォキシー 1， 5—イミノー D—グルシトール

O— （5—ァセタミドー 3， 5—ジデォキシー D—グリセロー α— D—ガラクトー 2 ーノヌロビラノシル酸）一（2→3) — Ο— （ー D—ガラクトビラノシル）一（ 1→ 3) 一 0— C (α— Lーフコビラノシル）一（1→4) 〕一 Ν—へキサデシルー 1, 5 一ジデォキシー 1, 5—イミノー D—グルシトール

Ο— （5—ァセタミドー 3, 5—ジデォキシ一 D—グリセロー α— D—ガラクトー 2 ーノヌロビラノシル酸）一 (2→3) 一 0— （^一 D—ガラクトビラノシル） — （1→ 3) 一 0— 〔（α— Lーフコピラノシル）一（1→4) ] 一 Ν—ォクタデシル一1, 5 ージデォキシ一 1, 5—イミノー D—グルシトール

0— （5—ァセタミドー 3, 5—ジデォキシー D—グリセロー α— D—ガラクトー 2 -ノヌロビラノシル酸）一 (2→3) 一 Ο— （^一 D—ガラクトビラノシル）一（1→ 3) 一 0— 〔（a— L—フコピラノシル）一（1→4) 〕一 Ν—ィコシルー 1， 5—ジデォキシー 1, 5—イミノー D—グノレシトール

0— （5—ァセタミドー 3, 5—ジデォキシー D—グリセロー α— D—ガラクトー 2 ーノヌロビラノシル酸）一（2→3) — 0— （/9一 D—ガラクトビラノシル）一（1→ 3) 一 0- 〔（α— Lーフコビラノシル）一（1→4) 〕一Ν—ォクテュル一 1, 5 一ジデォキシー 1, 5—イミノー D—グルシトール

Ο— （5—ァセタミドー 3, 5—ジデォキシ一 D—グリセロー α— D—ガラクトー 2 ーノヌロビラノシル酸）一 (2→3) -0- (^一 D—ガラクトビラノシル）一（1→ 3) — 0— 〔（α— Lーフコピラノシル）一（1→4) 〕一 Ν-ドデシ-ルー 1, 5 一ジデォキシー 1, 5—イミノー D—グルシトール

Ο— （5—ァセタミドー 3, 5—ジデォキシ一 D—グリセロー α— D—ガラクトー 2 ーノヌロビラノシル酸）一 (2→3) 一 0- (/3— D—ガラクトビラノシル） ― (1→ 3) 一 0— 〔（α— Lーフコピラノシル）一（1→4) 〕一Ν—テトラデセ-ルー 1， 5一ジデォキシー 1， 5一^ Τミノ一 D—グルシトール

O— （5—ァセタミドー 3, 5—ジデ才キシ一 D—グリセロー α— D—ガラクトー 2 ーノヌロビラノシル酸）一 (2→3) -0- ( ー D—ガラクトビラノシル）一（1 3) — 0— C (α— Lーフコビラノシル）一（1→4) 〕一 Ν—へキサデシ二ルー 1, 5—ジデォキシー 1， 5—ィミノ一 D—グルシトール

0— （5—ァセタミドー 3, 5—ジデォキシー D—グリセロー α— D—ガラクトー 2 ーノヌロビラノシル酸） - (2→3) 一 Ο— （/3-D—ガラクトビラノシル）一（1→ 3) 一 0— 〔（α— Lーフコビラノシル）一（1→4) 〕一 Ν—ォクタデセニルー 1， 5—ジデォキシー 1， 5—イミノー D—グルシトール

0— （5—ァセタミドー 3， 5—ジデォキシー D—グリセロー α—D—ガラクトー 2 ーノヌロビラノシル酸） ― (2— 3) — O— （)9一 D-ガラクトビラノシル）一（1→ 3) 一 0— 〔（α— Lーフコピラノシル）一（1→4) 〕一Ν—ィコシ-ルー 1, 5 一ジデォキシー 1， 5—イミノー D—グルシトール

前記一般式〔I〕で表されるモラノリン誘導体は、例えば以下の方法により製造することができる。

次式の化合物〔I I〕

AcNH

["]

(式中、 Acはァセチル基、 B zはベンゾィル基、 Meはメチル基をそれぞれ表し、以下同様に表す。 ) を、酢酸ェチル等の溶媒中、少量の醉酸、及び水を添加後、 C8〜 C30のアルデヒド類と縮合し、つづいて触媒存在下に接触水素添加することにより、次式の化合物〔I I I〕

95/0060

AcNH

[HI]

(式中、 R¹は前記と同じであり、以下同様に表す。）を得ることができる。

酢酸、及び水の添加量は、溶媒の 1/100〜： 1/10量が好ましい。反応温度は、 0〜50°Cが好ましい。反応時間は、反応温度によって異なるが、通常、 0.5〜24時間である。触媒としては、水酸化パラジウムオンカーボンが好ましいが、これに眼定されるものではない。

次に化合物〔III〕の全ての o—ァシル（ァセチル及びべンゾィル）基をアルコール溶媒中、アルコキシドにより脱離させたのち、アルカリ水溶液を加えてカルボン酸のメチルエステルを加水分解し、中和したのち、次式の本発明化合物であるモラノリンを合む四耱性锆鎖を製造することができる。 AcNH

反応温度は 0〜5 0°Cが好ましい。反応時間は、反応温度によって異なるが、通常、0〜48時間である。またアルコキシドとしてナトリウムメトキシド、アルカリ水溶液として水酸化力リゥム水溶液が好ましいが、これらに限定されるものではない。

また、前記と同様にして、次式の化合物〔IV〕より、

[IV] 次式の本発明化合物を製造することができる.

さらに、前記と同様にして、次式の化合物〔V〕より,

次式の本発明化合物を製造することができる,

本発明化合物の製造に出発原料として用いる化合物〔II〕、化合物〔IV〕、及び化合物〔V〕は、 WO93/15098号公報に記載された方法により製造することができる。

細胞接着阻害活性を有する化合物は、内皮細胞に存在するセレクチンを拮抗的に阻害することにより、白血球又はガン細胞と内皮細胞との接着を阻害することから、炎症や炎症にともなう血栓形成、リウマチ、感染症、免疫疾患、エイズ及びガンの予防、治療等に有用である。

従って、 WO93/15098号公報に記载された化合物よりも優れた細胞接着阻害活性を示す本発明に係る化合物は、より優れた抗ウィルス剤、抗炎症剤、血栓形成治療剤、リゥマチ治療剤、感染症、抗エイズ治療剤、免疫疾患及びガンの予防、治療剤として有用である。

本発明化合物を医薬として投与する場合、本発明化合物はそのまま又は医薬的に許容される無毒性かつ不活性の担体中に、例えば 0.1%〜99.5%、好ましくは 0.5%〜90% 舍有する医薬組成物として、人を合む動物に投与される。

担体としては、固形、半固形、又は液状の希釈剤、充填剤、及びその他の処方用の助剤一種以上が用いられる。医薬組成物は、投与単位形態で投与することが望ましい。本発明医薬組成物は、経口投与、組織内投与、局所投与（経皮投与等）又は経直腸的に投与することができる。これらの投与方法に適した剤型で投与されるのはもちろんである。例えば、組總内投与が特に好ましい。

抗炎症治療剤としての用量は、年齢、体重、等の患者の状態、投与経路、病気の性質と程度等を者慮した上で調製することが望ましいが、通常は、成人に対して本発明の有効成分量として、 1日あたり、 100ms〜3gZ日ヒトの範囲が、好ましくは、

500mg〜lgZ日ヒトの範囲が一般的である。場合によっては、これ以下でも足りるし、また逆にこれ以上の用量を必要とすることもある。また 1日 2〜3回に分割して投与することが望ましい。

〔実施例〕

本発明の実施例を挙げて本発明を更に詳しく説明する。なお、旋光度の測定温度はすべて 25^eCである。

実施例 1

O— （5—ァセタミドー 3， 5—ジデォキシー D—グリセロー α— D—ガラクトー 2 ーノヌロビラノシル酸）一 (2→3) -0- (^一 D-ガラクトビラノシル）一（1→ 4) 一 Ο— 〔（α— Lーフコピラノシル）一（1→3) 〕一 Ν—デシルー 1, 5—ジデォキシ一 1， 5—イミノー D—グルシトールの製造

工程 1 Ο— （メチル 5—ァセタミドー 4， 7， 8, 9—テトラー 0—ァセチル一 3, 5一ジデォキシー D—グリセロー α— D—ガラクトー 2—ノヌロビラノシロネ一ト）一 (2→3) — Ο— （2, 4， 6—トリー Ο—ベンゾィル -;3-D—ガラクトビラノシル）一 (1→4)—一 0— 〔（α— Lーフコビラノシル）一（1→3) 〕 -2-0 一ァセチルー Ν—デシルー 1, 5—ジデォキシ一 1， 5—イミノー D—グルシトール WO93/15098号公報記载の方法に従って得た Ο— （メチル 5—ァセタミドー 4, 7, 8, 9ーテトラー 0—ァセチルー 3, 5—ジデォキシー D—グリセロー α— D—ガラクトー 2—ノヌロビラノシロネート）一（2→3) -0— （2， 4, 6—トリー 0 一べンゾィルー 3— D—ガラクトビラノシル）一（1→4) 一 0— C (α— L一フコピラノシル）一（1→3) 〕一 2— Ο—ァセチルー 1, 5—ジデォキシー 1, 5—ィミノ P95 0 9

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一 D—グルシトール（30mg)を酢酸ェチル (5ml)に溶解し、酢酸 (0.1ml)、水 (0.05ml)、 1ーデカナール (0.5ml)を加え、これにあらかじめ接触水素添加を行い酢酸ェチルにて洗浄した水酸化パラジゥムオン力一ボン (30mg)を加え、室温で 10時間撹拌し接敏水素添加を行った。反 iW了を TLCにて確認後、触媒を ¾ft ^しメタノールで洗浄し？ to 涑狭、洗液を合わせて減圧濃縮を行い、得られた残渣をカラムクロマトグラフィ一（ヮコーゲル C-200、流出液；ジクロロメタン：メタノール =20:1)に供し、目的化合物（50mg, 60%)を得た。

性

旋光度〔 α〕 _D +4.30 (C=0.372,ジクロロメタン）

元素分析値〔C₇₁H₉₄N₂0₂₉として〕

計算値 C = 59. 24 % H= 6. 58% N- l. 95%

実測値 C=59. 1 1% H=6. 45% N= 1. 85%

工程 2 O— （5—ァセタミドー 3， 5—ジデォキシー D—グリセロー α— D—ガラクトー 2—ノヌロビラノシル酸）一 (2→3) -0- (/3-D—ガラクトビラノシル）一 (1→4) 一 O— 〔（α— Lーフコビラノシル）一（1→3) 〕一 Ν—デシルー 1, 5—ジデォキシー 1， 5—イミノー D—グルシトール

工程 1で得た化合物（65mg)をメタノール (10ml)に溶解し、ナトリウムメトキシドを pH=12になるまで加え、室温で一晚攪拌した。その後 0.2規定 KOH水溶液 (lml)を加え、室温で一晩攪拌した。反応終了を TLCで確認後、イオン交換樹脂アンバーライト IR-120(H+ )で中和し、樹脂を爐別し、メタノール、水で洗浄した。滤液と洗液を合わせて滅圧渙縮を行い得られた残渣をゲル濂過（セフアデックス LH-20、流出液；メタノール：水 =2:1) し、目的化合物（41ms,定量的）を得た。

物性値

旋光度〔 α〕 _D -43.00。（C-0.800,メタノール：水 =2:1)

元素分析値〔C₃₉H₇。N₂〇₂₁として〕

計算値 C=5 1. 88% H= 7. 8 1 % N= 3. 10% 実測値 C=5 1. 74% H=7. 67% N= 3. 00%

実施例 2

O— （5—ァセタミドー 3, 5—ジデォキシー D—グリセロー α— D—ガラクトー 2 ーノヌロビラノシル酸）一（2— 3) — Ο二''（^一 D—ガラクトビラノシル）一（1→ 3) 一 0— C (α— Lーフコピラノシル）一（1→4) 〕一 Ν—デシルー 1， 5—ジデォキシ一 1, 5—イミノー D—グルシトールの製造

工程 1 0— （メチル 5—ァセタミドー 4， 7, 8, 9—テトラー 0—ァセチル一 3， 5—ジデォキシ一 D—グリセロー α— D—ガラクトー 2—ノヌロビラノシロネ一ト）一（2→3) — Ο— （2， 4， 6—トリー Ο—べンゾィルー) 9一 D—ガラクトビラノシル）一（1→3) — Ο— C (α— Lーフコビラノシル）一（1→4) 〕一 2— Ο 一ァセチルー Ν—デシルー 1, 5—ジデォキシー 1, 5—イミノー D—グルシトール

W093八 5098号公報記載の方法に従って得た Ο— （メチル 5—ァセタミドー 4, 7， 8, 9—テトラー Ο—ァセチルー 3, 5—ジデォキシー D—グリセー α— D—ガラクトー 2—ノヌロビラノシロネート）一（2→3) — 0— （2， 4， 6—トリー 0 一べンゾィルー)？一 D—ガラクトビラノシル）一（1→3) — Ο— 〔（α-L-フコビラノシル） - (1→4) 〕一 2— O—ァセチルー 1, 5—ジデォキシ一 1, 5—ィミノ一 D—グルシトール化合物（20mg)を酢酸ェチル (5ml)に溶解し、酢酸 (0.5ml)、水

(0.1ml)、 1ーデカナール (0.5ml)を加え、これにあらかじめ接触水素添加を行い酢酸ェチルで洗浄した水酸化パラジウムオンカーボン (20mg)を加え、室温で接触水素添加を行い一晚撹拌した。反応終了を TLCで確認後、触媒を涑別しメタノールで洗浄した。據液、洗液を合わせて滅圧浪縮を行い、得られた残渣をカラムクロマトグラフィー（ヮコ —ゲル C-200、流出液；ジクロロメタン：メタノール =20:1)に供し、目的化合物（ llmg, 56%)を得た。

物性値

旋光度〔 α〕 _D +2.52° (C=0.238,ジクロロメタン）

元素分析値〔C₇₁H₉₄N₂0₂₉として〕計算値 C=59. 24% H= 6. 58% N= 1. 95%

実測値 C-59. 18% H=6. 44% N= l. 93%

工程 2 O— （5—ァセタミドー 3， 5—ジデォキシ一 D—グリセロー α— D—ガラクトー 2—ノヌロビラノシル酸）一 (2→3) -0- (^一 D—ガラクトビラノシル）一 ( 1→3) 一 O— 〔（α— Lーフコビラノシル）一（1→4) 〕一 Ν—デシルー 1， 5ージデォキシ一 1 , 5—ィミノ一 D—グルシトール

工程 1で得た化合物（52mg)をメタノール (10ml)に溶解し、ナトリウムメトキシドを _PH=12になるまで加え、室温で一晚挽拌した。その後 0.2規定 KOH水溶液 (1ml)を加え、室温でー晚攪拌した。反応終了を TLCで確認後、イオン交換樹脂アンバーライト IR-120(H+)で中和し、樹脂を¾別し、メタノール、次いで水で洗浄した。濾液と洗液を合わせて減圧渙縮を行い得られた残渣をゲル ¾過（セフアデックス LH-20、流出欲；メタノール：水 =2:1) し、目的化合物（33mg,定量的）を得た。

物性値

旋光度〔 α〕 _D— 34.95。（C=0.618,メタノール：水 =2:1)

元素分析値〔C₃₉H₇。N₂0₂₁として〕

計算値 C = 5 1. 88% H=7. 8 1 % N=3. 10%

実測値 C=5 1. 69% H=7. 68% N= 2. 93%

„ 〔試験例〕

E— s e 1 e c t i n依存性 H L 6 0 ZHU V E C接着実験方法

常法に従って採 ¾ ·培養した継代 5世代目のヒト血管内皮細胞（以下

HUVECと略す）を、 1 %ゼラチンでコートした 9 6ウェルマイク口プレートにゥエルあたり 2 X10⁴個播種した。 37°Cの C0₂ィンキュベータ内で一晚培養した後、細胞層を 100 の RPMI/FCS/HEPES培地（RPMMI-1640, 10%FCS, 25mM HEPES, pH7.4)で 2回洗浄し、 10U/mlの IL-1 βを合む RPMI/FCS/HEPESを ΙΟΟ μΙ加え、 4時聞培釜した（活性化）。非活性化細胞における細胞接着を測定するために、同時に RPMI/FCS/HEFESのみ加えたゥエル（Basal)を作成した。培義ヒト白血病細胞 HL60を FCSを舍まない RPMI-1640(RPMI/HEPES)で 2 回洗浄した後、 10mlの 0.5%グルタルアルデヒドを舍む RPMI/FCS/HEPES培地に懸濁し、氷中で 20分閒固定した。固定後、細胞を RPMI/HEPESにより 3回洗浄し、細胞数が 2 ズ10⁶ cells/mlになるように RPMI/FCS/HEPESを用いて希釈し、使用するまで永中に保存した。

活性化後、 HUVECを 100 μ 1の RPMI/FCS/HEPESで 3回洗诤し、 50 μ 1の RPMI/FCS/HEPES(Control)あるいは RPMI/FCS/HEPESに溶解した 50 1の化合物 (300 g/ml) を添加し、室温で 30分間インキュベートした。次に固定化した HL60細胞を個（50μ1) づっ各ゥエルに添加し、室温で 45分間インキュべ一卜した。各ゥエルを RFMI/FCS/HEPESで満たし、マイクロブレート用シールを用いて気泡が入らないように密封した後、プレートを倒置し、 1時間静置することにより未結合の HL60細胞を取り除いた。

接着細胞数測定方法

接着細胞数は、 HL60細胞内に存在する酵素であるミエ口ペルォキシダーゼ (ΜΡΟ)の活性により求めた。各ゥエルに 0,5%臭化へキサデシルトリメチルアンモユウム（ΗΤΑΒ)を舍むリン酸緩衝液 (50mM， ρΗ 6.0) を 50 μ 1加え、室温で 30 分間インキュベートすることにより、 ΜΡΟを細胞内から可溶化した。同時に同様の処理を施した既知の数の HL60細胞を標準用として 96ゥエルブレートの一列に準備した。次に 0.6mMジァニシジン二塩酸塩、 0.4mM H₂0₂を舍むリン酸緩衝液 (100mM, pH 5.4)を 200 μ 1加え、 20分間室温で反応させた後、 BIO-RAD 社の Model 3550 MICRO PLATE READERを用いて 450nmの吸光度を測定した。檫準用の細胞から求めた吸光度より標準曲線を作成し接着細胞数を求めた。実験は各処理について 6ゥエル用いて行った。各ゥエルの接着細胞数より

Controlの値を 100%とした時の各処理における細胞接着率を求め、 6 ゥエル間の平均値と標準誤差を求めた。その結果を表 1に示す。表 1

細胞接着率

Control 100.0 +3.4

Basal 12.0 +0.6*

本発明実施例 1の化合物 58.8 +2.6*

本発明実施例 2の化合物 36.6 +1.7*

*:P<0.01, vs Control

〔結果〕本発明実施例 1の化合物は、細胞接着を 4 1 %阻害した（P<0.01)。本発明実施例 2の化合物は細胞接着を 6 3 %阻害した（F<0.01)。このように本発明に係る化合物は強い細胞接着抑制作用を示した。この結果から、本発明に係る化合物は細胞接着が関与して発症する疾患、例えば、炎症や免疫疾患あるいはウィルス感染症等を予防 ·治療する医薬品として有用であることが示された。

Claims

請求の範囲

1. 次の一般式〔I〕で表されるモラノリン誘導体。

式中、 R¹は C8〜C30アルキル、 C8〜C30ァルケ-ル、又は C8~C30アルキ- ルを表し、 R²、 R³はそれぞれ異なり、シァリルガラク卜シル、ガラクトシル、又はフコシル基を表す《

2. 次の式で表されるモラノリン誘導体。

ACNH

0、 C00H

10^π21

で表されるモラノリン誘導体。

C10H21

AcNH