WO1992016541A1

WO1992016541A1 - Synthesis of sialic acid and synthetic intermediate therefor

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Publication number: WO1992016541A1
Application number: PCT/JP1992/000298
Authority: WO
Inventors: Tetsuo Shiba; Tadashi Teshima; Toshihiro Yamamoto
Original assignee: Mect Corporation
Priority date: 1991-03-12
Filing date: 1992-03-12
Publication date: 1992-10-01
Also published as: AU1566192A

Description

明細書

シアル酸の合成法及びそれに用いる合成中間体技術分野

本発明は、シアル酸（N—ァセチルノイラミン酸）の新規な合成方法及びそれに用いる合成中間体に関する。さらに本発明は、シァル酸の新規な異性体であるィソシアル酸、その合成法及びそれに用いる合成中間体に関する。背景技術

シアル酸は種々の生体機能に関与する糖脂質ガングリオンドの重要な構成成分である。シアル酸は、その生理活性を利用して医薬品としても利用されつつある〔特公昭 6 3 — 0 2 8 4 1 1号、米国特許 4， 6 9 8， 3 3 2号，欧州特許公開 0 1 7 7 7 8 3 A 2〕。しかし、従来、シアル酸は、主に天然物からの抽出法により得られている。そこで比較的多量のシアル酸を供給するためには、簡便な台成法の提供が望まれる。シアル酸の合成法は、数多く報告されている。その中では、 N-ァセチルマンノサミンとォキサ口酢酸とからー段階で合成する方法が最も簡便である（M. J. How, M. D. A. Iialford, M. Stacey. and E. Vickers, Carbohydr, Res. , 11. 313 (1969)) 。しかし、 N—ァセチルマンノサミンは非常に高価である。従って、この方法は、実用的ではない。

そこで本発明者らは、安価な原料を用いて、比較的効率良く、シアル酸を合成できる方法を探索した。特に、入手が容易で安価なグルコースとォキサ口酢酸とからシアル酸を合成する方法について検討した。

本発明の目的は、シアル酸を安価な原料を用いて高収率で合成する方法を提供することにある。さらに本発明の別の目的は、上記合成法に有用な中間体及びその製造方法を提供することにある。

また、本発明は、生理活性を有することが期待されるシアル酸の異性体を提供することを目的とする。

さらに、本発明の目的は、シアル酸の異性体の合成法に有用な中間体及びその製造方法を提供することにある。発明の開示

本発明は、下記一般式（ I a) 、 ( U a ) . (Ill a) , (l b) 、（U b) 、（I d) 又は（n d) で表わされる化合物に関する。

R (III a )

(一般式中、 R ¹ は水素原子又は R ^{i e}- Ph-NHCO 基（R '^Dは水素原子又は炭素数 1〜 6のアルキル基を示す）を示し、 R² は水素原子又はトリフルォロメタンスルホニル基を示し、 R³ 及び R ⁵ は、同一又は異なり、水素原子又は炭素数 1〜 6のアルキル基を示し、

R ¹ は N ₃ 基又は Cll₃C0NH 基を示し、但し、 R⁴ が CH₃C0Nll 基のとき、 R ¹ 、 R ³ 及び R ⁵ は同時に水素原子ではなく、 R⁶ は水素原子又は R ' - Ph-NHCO 基（R ^{1 (1}は水素原子又は炭素数 1〜 6のァルキル基を示す）を示し、 R⁷ は 0 H基、 0S0₂CF₃ 基、 N₃ 基、

CihCONH 基又は NH₂ 基を示し、 R ⁸ 及び R ^B は、同一又は異なり. 水素原子又は炭素数 1〜6のアルキル基を示し、 Rは R^{I D}-Ph- NHC0 基（R '。は水素原子又は炭素数 1〜 6のアルキル基を示す）を示す。）さらに、本発明は、 D—グルコースとォキサ口酢酸とを反応させ、得られる反応生成物と炭素数 1〜 6のアルキルアルコールを反応させ、得られる生成物の混合物を分離することを含む、アルキルグリコシドアルキルエステル体（IVa) 、 (IVb) 及び（IVd) を合成する方法に関する。

さらに本発明は、上記のアルキルグリコシドアルキルエステル体

(IVa) (式中 R³ 及び R⁵ は炭素数 1〜6のアルキル基を示す）， (IVb) 又は（IVd) (式中 R⁸ 及び R⁹ は炭素数 1〜6のアルキル基を示す）をゲン化し、カルポジイミド化合物を反応させ、さらにフヱニルイソシァネ一ト又は炭素数 1〜 6のアルキル置換フエ二ルイソシァネートを反応させてラクトン体（III a) 、（lib) 又は（lid) (但し、上記一般式中、 Rは R'°- Ph-NHCO基（ R^{I ()}は水素原子又は炭素数 1〜 6のアルキル基を示す）を示し、 R³ 及び R 5 並びに R⁸ 及び R⁹ は、それぞれ炭素数！〜 6のアルキル基を示す。）を得ることを特徴とする合成中間体の合成法に関する。

さらに、本発明は上記のラクトン体（III a) を開環してヒドロキシエステル体（V a) を得る工程、

ヒドロキンエステル体（V a) にトリフルォロメタンスルホン酸無水物を反応させてトリフルォロメタンスルホニル体（Via) を得る工程、

トリフルォロメタンスルホニル体（Via) にアジド化剤を反応させてアジド体（VII a) を得る工程、

アジド体（VII a) を還元し、ァセチル化することにより保護シアル酸（Villa) を得る工程、及び

(Via)

保護シアル酸（Villa) を脱保護化してシアル酸を得る工程、 (但し、上記一般式中、 Rは R^{I D}-Ph- NHC0基（ R^{1 D}は水素原子又は炭素数 1〜 6のアルキル基を示す）を示し、 R³ 及び R⁵ はそれぞれ炭素数〗〜 6のアルキル基を示す。）の各工程を含むシアル酸の合成法に関する。

さらに本発明は、トリフルォロメ夕ンスルホニル体（Via) 、 ( VIb) 又は（VI d) にアジド化剤を反応させてアジド体（Vil a) 、（VII b) 又は（VII d) を得る（但し、上記一般式中、 Rは R ^{1 P}- Ph- NHC0基（ R '°は水素原子又は炭素数 1〜 6のアルキル基を示す）を示し、 R³ 及び R^s 並びに R⁸ 及び R⁹ はそれぞれ炭素数 1 〜 6のアルキル基を示す。）ことを特徴とする合成中間体の合成法に関する。

また、本発明は、前記のラタトン体（lib) 又は（lid) を開環してヒドロキシエステル体（Vb) 又は（Vd) を得る工程、

ヒドロキシエステル体（Vb) 又は（Vd) にトリフルォロメタンスルホン酸無水物を反応させてトリフルォロメタンスルホニル体 (VI b) 又は（VI d) を得る工程、

トリフルォロメタンスルホニル体（VIb) 又は（Vld) にアジド化剤を反応させてアジド体（ Vllb) 又は（ Vlld) を得る工程、

アジド体（VII b) 又は（VII d) を還元し、ァセチル化し、次いで脱 R -Ph- N1IC0基をするか、またはアジド体（VII b) 又は（ VII d) を脱 R'^D-Ph- NHC0基し、次いで還元することによりァミノ体（ I Xb) 又は（ I Xd) を得る工程、

(Kb)

アミノ体（I Xb) 又は（I Xd) をァセチル化してァセチル体（Xb ) 又は（Xd) を得る工程、

ァセチル体（Xb) 又は（Xd) を脱保護化してイソシアル酸（ 1 b 又は（ 1 d) を得る工程、

(但し、上記一般式中、 Rは R^{I D}-Ph- NHC0基（ R^{I D}は水素原子又は炭素数 1〜 6のアルキル基を示す）を示し、 R⁸ 及び R⁹ は炭素数 1〜 6のアルキル基を示す。）の各工程を含むイソシアル酸の合成法に関する。以下本発明をスキームに従って説明する。

スキーム 1 — 1〜3は、シアル酸の合成法及びその合成中間体についてのスキームである。スキーム 1中の化合物 (2)、（3)、（4)、（6)、 (7)及び (8)はそれぞれ化合物（IV a) 、 (fll a ) , ( V a ) . (VI a ) 、（Vila) 及び（Villa ) の実施態様である。また、化合物 (9)は化合物（IV a) の実施態様である。

スキーム 2は、イソシアル酸（ 1 b) の合成法及びその合成中間体についてのスキームである。スキーム 2中の化合物（ 2 b) 、 ( 3 b) 、 (4 b) , ( 5 b) , ( 6 b) . (7 b) , (9 b) , ( 1 O b) は、それぞれ化合物（IVb：) 、（II b ) 、（ V b：) 、（VI b ) 、 (VEb) 、（Mb ) 、 (IXb) 及び（X b) の実施態様である。

スキーム 3は、イソシアル酸（ 1 d) の合成法及びその合成中間体についてのスキームである。スキーム 3中の化合物（ 2 d) 、 ( 3 d) 、（4 d) 、（5 d) 、 ( 6 d) . ( 8 d) . (9 d) 、 ( 1 0 d) は、それぞれ化合物（IV d) 、（II d ) 、（ V d) 、 (VI d ) 、（VHd) 、（Vlfld ) 、 (IX d ) 及び（Xd) の実施態様である o

)CO NH R：

00

スキーム 2

6b ( R： Ph-NHCO)

7b ( R： Ph-NHCO) 9b

10b 1 b スキーム 3

4 (J ( R： Ph-NHCO) 5d ( R： Ph-NHCO)

6d (R:Ph-NHCO)

ォキサ口酢酸と D—グルコースとをアルドール縮合さ甘ると、化合物（ 1 ) 並びに化合物（ 2 b) 及び（ 2 d) の前駆体である異性体の混合物が得られる〔 Shirai, II. Ogura. Tetrahedron Lett. 30, 2263( 1989)3 。この反応は、 pHを 9〜13に調節し、反応温度を 0 °C〜室温として、反応時間 1時間〜 7日間とすることで行うごとが適当である。

化合物（ 1 ) 並びに化合物（2 b) 及び（2 d) の前駆体である異性体の混合物を、塩化水素の存在下、炭素数 1〜6のアルキルァルコールを用いて、エステル化する。好ましくは、メタノールを用いてメチルエステル化後、完全ァセチル体に導く。塩化水素—メタノール（アルキルアルコール）処理は、例えば氷冷中から還流温度までの温度範囲で、 1時間〜 7日間で行うことができる。

生成物は、アルキルグリコシドアルキルエステル体（IV a) 、（ IV b) 及び（Wd) の混合物であり、この混合物を H P L C等の手段により分離精製して、アルキルグリコシドアルキルエステル体（ IV a) 、（IV b) 及び（IV d) をそれぞれ得る。上記アルキルアルコールとしてメタノールを用いると、化合物 (2)、（2b) 及び（2d) が、それぞれ得られる。

アルキルグリコシドアルキルエステル体（IV a) 、例えば化合物 (2)は、水酸化ナトリゥム水溶液で処理すると脱アルキル化してアルキルグリコシド (9)が得られる。さらに、アルキルグリコシド (9)は、酸、例えばアンバーリスト（酸性イオン交換樹脂））で脱アルキルグリコシド化して化合物 (1)を得ることができる。

アルキルエステル体（IV a) 、例えば化合物 (2)を水又は水と水溶性溶媒との混合溶媒屮で水酸化バリゥム等を用いてゲン化する。ケン化反応は ϋ X：〜還流温^で行うことができる。反応は迅速であり、比較的短時^で反応は終了させることができる。次いで生成物に、ピリジンの存在下、有機溶媒中カルポジイミド化合物を作用させる。尚、ピリジンに加えて 4 --ジメチルァミノピリジン等を存在させることもできる。カルボジィミド化合物としては、例えばジシク口へキシルカルボジィミド（D C C ) 、ジィソプロピルカルボジィミド- エチルジメチルァミノプロピルカルボジイミド等を例示できる。力ルボジイミド化合物はアルキルエステル体（IV a ) のゲン化物に対して 1当量以上用いることが適当である。反応は 0 °C〜還流温度で 1時間〜 7日間行う。生成物に 1当量（4モル）以上のフヱニルイソシァネ一ト又は炭素数 1〜 6のアルキル置換フエ二ルイソシァネ -トを作用させてラクトン体（III a ) 、例えば化合物（3 ) を得ることができる。反応は、例えば、ピリジン、 4ージメチルアミノビリジン等の有機溶媒中、（） °C〜還流温度で 1時間〜 7日間行うことができる。

アルキルエステル体（IV b ) 、例えば化合物（2b) 、及びアルキルエステル体（IV d ) 、例えば化合物（2d) は、上記と同様の反応に付して、ラクトン体（li b：) 、例えば化合物（3b) 及びラクトン体（li d ) 、例えば化合物（3d) を、それぞれ得ることができる。

ラクトン体（Ifl a ) 、例えば化合物 (3)を塩化水素の存在下炭素数 1〜 6のアルキルアルコール、例えば、メタノールで処理することにより、ヒドロキンエステル体（V a ) 、例えば化合物 (4)を得ることができる。反応は例えば 0 °C〜還流温度で 5分〜 2 4時間行うことができる。

ラクトン体（Π b：) 、例えば化合物（3b) 及びラタトン体（D d ) 、例えば化合物（3d) は、上記と同様の反応に付して、ヒドロキシエステル休（V b ) 、例えば化合物（4b)及びヒドロキシエステル体（V d ) 、例えば化合物（4d)を得ることができる。

ヒドロキシエステル体（V a ) 、例えば化合物 (4)は、ピリジン、 4ージメチルァミノピリジン等の存在下、塩化メチレン等の有機溶媒中、トリフルォロメタンスルホン酸無水物と反応させることによりトリフルォロメタンスルホニル体（Vi a ) 、例えば化合物 (6)を得ることができる。ピリジン又は 4ージメチルアミノピリジン及びトリフルォロメタンスルホン酸無水物はいずれもヒドロキシエステル体（V) に対して 1当量以上使用することが適当である。

ヒドロキンエステル体（V b) 、例えば化合物（4b)及びヒドロキシエステル体（V d) 、例えば化合物（4d)は、上記と同様の反応に付して、トリフルォロメタンスルホニル体（VIb ) 、例えば化合物 (5b)及びトリフルォロメタンスルホニル体（Vld ) 、例えば化合物 (5d)をそれぞれ得ることができる。

トリフルォロメタンスルホニル体（Via ) 、例えば化合物 (6)は、ベンゼン等の有機溶媒中、アジド化剤と反応させることでアジド体 (Vila ) 、例えば化合物 (7)を得ることができる。この反応は、例えば 0 °C〜還流温度で 5分〜 2 4時間で行うことができる。尚、アジド化剤としては、テトラ一 n—プチルアンモニゥムアジドゃ NaN₃又は NaN₃とクラウンエーテルを用いることもできる。

トリフルォロメタンスルホニル体（VIb ) 、例えば化合物（5b)及びトリフルォロメタンスルホニル体（Vld ) 、例えば化合物（5d) は、上記と同様の反応に付して、アジド体（VDb ) 、例えば化合物 (6b)及びアジド体（VEd ) 、例えば化合物（6d)をそれぞれ得ることができる。

アジド体（Wa ) 、例えば化合物 (7)は、接触還元し、次いでァセチル化することにより保護シアル酸（Via ) 、例えば化合物 (8)を得ることができる。接触還元には、 Pd- (；、 Pd- ブラック、 Pd-(OH)- C 、 Pt0₂等の触媒を用いることができる。又、接触還元以外に、 Zn/liCl -H₂0, CrCl/H* ， H₂S/ピリジン、 Sn(SPh)₂/PhSH 等を用いて還元することもできる。ァセチル化は、ピリジン、 4—ジメチルアミノビリジン等の存在下、無水酢酸を反応させることにより行うことができる。尚、接触元及びァセチル化とも、適当な溶媒の存在下で行うことが好ましい。

保護シアル酸（ ia ) 、例えば化合物 (8)は、常法により脱保護化、即ち脱フヱニルカルバモイル化、脱アルキルエステル化、脱アルキノレグリコシド化を行うことにより、目的物であるシアル酸を得ることができる。脱保護化は、水酸化ナトリウム又は CH₃0Na等を用い、水又は水と水溶性有機溶媒（例えばテトラヒドロフラン、アルコール類、ジォキサン等）との混合溶媒中で処理して脱フヱニルカルバモイル化及び脱アルキルエステル化することができる。次いで、酸 (例えばアンバーリスト（酸性イオン交換樹脂））で脱アルキルグリコシド化を行うことができる。

スキーム 2に示すように、アジド体（Wb ) 、例えば化合物（6b) は、上記と同様に接触還元及びァセチル化すると、ァセチルァミノ体（ ib) 、例えば化合物（7b)が得られる。ァセチルァミノ体（珊 b) 、例えば化合物（7b)は、上記と同様に水酸化ナトリウムで脱保護化すると、アミノ体（Ka) 、例えば化合物（9b)が得られる。次いで、アミノ体（Ka) 、例えば化合物（9b)を N—ァセトキシコハク酸ィミドと反応させてァセチルアミノ体（Xb) 、例えば化合物 (10b) が得られる。さらに、ァセチルァミノ体（Xb) 、例えば化合物（10b) を酸（例えばアンバーリスト（酸性イオン交換樹脂））で脱アルキルグリコシド化を行うことにより、目的生成物であるィソシアル酸（lb) を得ることができる。

尚、アジド体（Wd) 、例えば化合物（6d)も、上記と同様に接触還元、ァセチル化、脱保護化、ァセチルァミノ化、及び脱アルキルグリコシド化を行うことにより、目的生成物である 4一ェピ—イソシアル酸（Id) を得ることができる。

あるいはスキーム 3に示すように、了ジド体（Wd ) 、例えば化合物（6d)は、水酸化ナトリウムで脱保護化（脱フ二ルカルバモイル化及び脱アルキルエステル化）すると、脱保護アジド体（ d) 、例えば化合物（8d)が得られる。脱保護アジド体（ Id) 、例えば化合物（8d)は、接触還元すると、アミノ体（IX d) 、例えば化合物（9 dが得られる。次いで、アミノ体（IXd) 、例えば化合物（9d)を N ーァセトキシコハク酸イミドと反応させてァセチルァミノ体（X d ) 、例えば化合物（lOd) が得られる。さらに、ァセチルァミノ体（ X d) 、例えば化合物（10d) を酸（例えばアンバーリスト（酸性ィオン交換樹脂））で脱アルキルグリコシド化を行うことにより、目的生成物であるイソシアル酸（Id) を得ることができる。

尚、アジド体（Vllb ) 、例えば化合物（6b)も、上記と同様に脱保護化、接触還元、ァセチルァミノ化、及び脱アルキルグリコシド化を行うことにより、目的生成物であるイソシアル酸（lb) を得ることができる。

尚、各反応工程後、生成物を常法により精製した後に次の工程に進むこともできる。有用性

本発明の製造法によれば、安価な原料であるグルコースとォキサ口酢酸とからシアル酸を効率良く製造することができる。

さらに、本発明によれば、新規なシアル酸の異性体であるイソシアル酸及びその製造方法を提供できる。

又、本発明の化合物は合成中問体として有用である。特に、ラクトン体（111 a )及びトリフルォロメ夕ンスルホニル体（Via) は、シアル酸の合成中間体として有用である。さらに、本発明の化合物は、ィンフルェンザウィルス，ノイラミダーゼ活性に対する阻害作用も有する。実施例

以下、本発明を実施例によりさらに説明する。

実施例 1 (化合物（ 2 ) の合成）

ォキサ口酢酸（9. 8 3 ， 74. 4 mmol) を水 (7 5 ml) に溶解し、 1 ϋ M NaOII を加えて pill 1に調整した。四ほう酸ナトリウム（ 38. 6 g, 1 9 2ramol) 、グルコース（ 1 3 4 g， 7 4 3 mmol) 、水（ 1 7 5ml) を加え撹拌しながら 1 0 M NaOH を用いて pHl 1 に保ち、 7 2時間撹拌した。酢酸を加えて ρίΠにした後 Dowex5 0 ( H型）を加えて pH2にした。 1時間後樹脂を瀘取し瀘液を 2. 8 %ァンモニァ水で中和し、 Dowex l (HC00型）に通し目的物を吸着させた。水洗後 0. 3 M—ギ酸で溶出した。目的物の分画を減圧濃縮した後残渣をメ夕ノール（ 2 5 0 0 ral) に溶解し 3 M—塩化水素一メタノール（62. 5 ml) を加え 3時間還流下に加熱した。アンバーリスト 2 1 (OH型）を加え中和し濾取した。濾液を減圧濃縮し H P L Cにより精製して化合物（2 ) を得た。（カラム YMC— O D S， 3 0 mmx 2 5 0 ram. 溶出液： 1 %ァセトニトリルー水）収量： 6 4 1 m g (2. 9 %) 、他の異性体を含む収量： 4. 5 2 g ( 20. 5 %)

Ή-NMR ( 2 7 0 MHz) (D₂0 (DOH: <54.70 ))

H3e： δ 2.05 (1H, dd， J=5.1, 13.2 Hz)

H3a： δ 1.91 (1H， dd， J=ll.7, 13.2 Hz)

H4 ： δ 4.05 (1H， ddd， J=3.2, 5.1， 11.7 Hz)

H9 ： δ 3.65 (1H, dd， J=6.5, 11.8 Hz)

H5， H6， H7， H8， H9 : δ 3.72-3.99 (5H, m )

0CH₃ ： δ 3.22 (3H, s )

C00CH₃ ： δ 3.84 (3H, s )

実施例 2 (化合物（3 ) の合成）

化合物（2 ) (27. Omg, 91.2^mol ) を水（250 に溶解し 0. 5 M水酸化バリウム水溶液（365 1 ) を加え 1 5分撹拌した。ァンバーリスト 1 5を加え、 pH 3にした後濾取した。濾液を減圧濃縮し得られた残渣をピリジン（3.3ml) に溶解した。氷冷下ジシクロへキシルカルボジィミド（42.9mg；、 208 ^mol ) を加え、その後室温で 14時間撹拌した。氷冷下にイソシアン酸フヱニル（271 fi 1, 2.4 9mmol ) を加え室温で一夜撹拌した。氷冷下にメタノール（500 1 ) を加え減圧濃縮し、得られた残渣を調製的薄層クロマトにより精製した。（メルク社製、シリカゲル厚さ 0.5mm， 2 0 cm X 2 0 cm ( 2枚），展開溶媒：ベンゼン一酢酸ェチル（ 5 : 1 ) ) 目的物の分画を濃縮し油状物として化合物（ 3 ) を得た。収量 23.7mg (35.1

%) 。

¹ II - N M R ( 2 7 0 MHz) (CDC1₃)

H3 δ 2.03 (III, dd， J=2. , 14.9 Hz)

H3 δ 2.73 (1H, dd, J=9.5， 14.9 Hz)

114 δ 5.12 (111, ID)

H5 δ 5.15 (111，ブロード s )

H6 δ 4.28 (111， d， J=4.6 Hz)

H7 δ 5.50 (1H， dd, J=4.6, 6.4 Hz)

H8 6 5.35 (1H， ddd， J=4.2, 4.2, 6.6 Hz) H9 δ 4.28 (1H， dd, J=4.4, 12.0 Hz)

H9 δ 4.65 (1H， dd, J=4.4, 12.0 Hz)

0CH₃ ： δ 3.61 (3H, s )

フエニル，： δ 6.79-7.40 (24H, m )

実施例 3 (化合物（4 ) の合成）

化合物（ 3 ) (92.5mg、 1 2 5 ^mol ) をメタノール（ 9 2 5 1 ) に溶解し 3 M—塩化水素ーメタノール（ 1 3 9 w 1 ) を加え 4 . 5時間室温で撹拌した。アンバーリスト 2 1 (OH型）を中性になるまで加え濾過した。濾液を濃縮し得られた油状物を調製的薄層クロマトにより精製した。（メルク社製、シリカゲル厚さ 0.5mm , 2 0 cm X 2 0 cm ( 2枚），展開溶媒：ベンゼン—酢酸ェチル（ 2 ： 1 ) ) 目的物の分画を濃縮し油状物として化合物（4 ) を得た。収 it 55. 8 mg ( 57. 8 %) 。

111 - N M R ( 2 7 U MHz) (CDC1₃)

II3e： o 2.17 (III, dd, J=5.2, 12.7 IIz)

H3a： δ 2.29 (III, dd, J = 12.0, 12.7 Hz)

H4 ： δ 5.14 (HI, ddd, J = 2.3, 5.2， 12.0 Hz)

115 ： δ 4.47 (III, ブロード s ) H6 δ 3.96 (1Η, d， J=6.3 Hz)

H7 δ 5.66 (1Η， dd, J=5.6, 6.3 Hz)

H8 δ 5.43 (1H, ddd, J:4.0， 5.6, 5.6 Hz) H9 δ 4.25 (III, dd, J=4.0, 11.7 Hz) H9 δ 4.58 (1H, dd, J=5.6, 11.7 Hz) 0CH₃ δ 3.19 (3H, s )

COOCH₃ ： δ 3.69 (3H, s )

フヱニル，匪： δ 6.99-7.64 (24Η， m )

実施例 4 (化合物（6 ) の合成）

化合物（4 ) ( 55. 8 mg、 72. 2 βΐαοΐ ) を塩化メチレン（1· 5 ml) に溶解し、ピリジン（ 1 1 4 rog) とトリフルォロメタンスルホン酸無水物（ 81. 4 mg、 2 8 8 //mol ) を氷冷下に加えその後室温で 2時間攪拌した。反応溶液に飽和炭酸水素 IIナトリゥム水溶液を加え、塩化メチレンで抽出した。塩化メチレン層をO水洗後無水硫酸マグネシゥムで乾燥した。濃縮すると油状物が得られ、シリカゲル力ラムにより精製した。（シリカゲル 2. 5 g、溶出液トルエン一

—琴

酢酸ェチル（4 : 1 ) ) 目的物の分画を濃縮し油状物として -化合物

( 6 ) を得た。収量 60. 6 mg ( 92. 8 %)

Ή-NMR ( 2 7 0 MHz) (CDC1₃)

H3e： δ 2.35 (1H, dd, J=5.2, 12.9 Hz)

II 3a： δ 2.23 (1H, dd, J = 12.5, 12.9 Hz)

H 4, H8 ： δ 5.25-5.35 (211, m )

H5 ： δ 5.78 (1Η，ブロード s )

H6 ： δ 4.18 (1Η， d, J=9.0 Hz)

H7 ： δ 5.65 (1Η， dd, J=5.2, 9.0 Hz)

II 9 ： δ 4.33 (III,

H9 ： δ 4.65 (1H,

0CH₃ ： δ 3.27 (311, s )

C00CH₃ ： δ 3.69 (3Η, s ) フエニル， Nil: δ 6.77-7.64 (24Η, m )

実施例 5 (化合物（7) の合成）

化合物（6) (23.6mg, 26.1 zmol ) をベンゼン（500 〃1)に溶解し、 0.2M テトラ- n- ブチルアンモニゥムアジドのベンゼン溶液 (653 u 1, 131/inu)l)を加え、室温で攪拌した。 30分後減圧濃縮し、残渣を調製的薄層クロマトにより精製した（Merck 社製シリカゲル厚さ 0.5 nun, 20 X 20cm, 展開溶媒：ベンゼン—酢酸ェチル（2： 1)) 。目的物の分画を濃縮し油状物として化合物（7) を得た。収量 19.2mg(92.3 %)₀

H - N M R (270 MHz ) (CDC )

H3a δ 1.79 (1H, dd， J = 11.5， 12.9 Hz) H3e δ 2.70 (1Η， dd， J=5.1， 12.9 Hz)

H5 δ 3.47 (1Η, dd, J=9.8， 10.0 Hz)

H6 δ 3.83 (1H， dd, J = l.2, 10.0 Hz)

119 δ 4.24 (III, dd, J=4.6, 12.5 Hz)

H9 δ 4.65 (1H, dd, J=2.7, 12.5 Hz)

H4 δ 5.32 (IH, ddd, J=5.1， 9.8， 11.5 Hz) H8 δ 5.45 (1H， ddd, J=2.7, 4.6, 7.8 Hz) H7 δ 5.65 (1H， dd, J = l.2, 7.8 Hz)

0CH₃ δ 3.23 (3H， s )

COOCH; δ 3.81 (3H, s )

フェニル， NH: δ 6.80 7.45 (24H, m )

実施例 6 (化合物（ 8 ) の合成）

化合物（7) (28.6mg, 35.8^mol ) を酢酸ェチル一メタノール (6 ml- 3 ml )に溶解し Pd- C (10 mg) を加え水素気流中接触還元を行った。 Pd- C(10 mg) を 3回追加し 7.5時間反応すると原料が消失した。触媒を瀘取し減圧濃縮した。残渣と 4-ジメチルァミノピリジン（35.0 mg， 286 〃 mo 1 )をジクロロメタン（2 ml)に溶解し、氷冷下無水酢酸（16.9 1, 179 / mol)を加えた。室温で 1.5 時間攪拌 9 0098 後減圧濃縮し、残渣を調製的薄膜層クロマ卜により精製した（Merck 社製シリカゲル厚さ 0.5 mm, 20X 20 cm, 展開溶媒：ベンゼン - 酢酸ェチル（1:1) ) 。目的物の分画を濃縮し化合物（8 ) を得た。収量 10.4 mg (35.0 %) 。

1 H - N M R (270 Mi ）（CDC1₃

H3a： δ 1.93 (1Η， dd, J = ll.5, 12.7 Hz) H3e： δ 2.58 (1Η， dd, J=4.6， 12.7 Hz) H 5, 6, 9 δ 4.15 4, 33 (3H, m)

H9ノ： δ 4.77 (1H, dd, J=3.4， 12.0 Hz) H4, 7,8: δ 5.40 5.45 (3H, m)

CH₃ CONH: δ 5.89 (1H, d, J=8.8 Hz)

CH₃ CO: δ 1.79 (3H, S)

0CH₃ ： δ 3.32 (3H, s )

COOCHa ： δ 3.81 (3H, s )

フュニル、題： δδ 66..9955 〜7.50 (2411, m )

実施例 7 (Ν-ァセチルノイラミン酸（シアル酸）の合成）

化合物（8 ) (5.6 mg, 6.75〃moI)をテトラヒドロフラン（500 1)に溶解し、 5¾水酸化ナトリウム水溶液（1 ral)を加え、還流下に加熱した。放冷後アンバーリスト 15を加えて、 pH5 とした後、樹脂を濾取した。濾液を減圧濃縮し残渣を水（1 ml)に溶解しアンバーリスト 15(400 mg)を加え、 80°Cで 4 時間加熱した。放冷後榭脂を瀘取し、濾液を減圧濃縮した。残渣を H P L C (Cosmosil 5C18- AR(1 0 X 250 mm) 、溶出溶液：ァセトニトリル一 0.1% TFA水溶液、保持時間： 4.7 分、ついで YMC- NH2 (4.6 x 150 mm) 、溶出溶液：ァセトニトリル- ϋ. TFA 水溶液，保持時間： 6.7 分、）により精製し、凍結乾燥して 13的物である N-ァセチルノイラミン酸を得た。収 fil.3 mg(62.3 V

ΊΙ - NMR (270 MHz ) (U TFA-d, - D₂0)

H3a： o 1.80 (III, dd, J = ll.5, 13.2 Hz) H3e： δ 2.24 (1H, dd， J=4.8， 13.2 Hz)

H 4， 5， 6， 7， 8, 9， 9 ' : 5 3.46 〜4.04 (7H， m)

CH₃ CO: δ 1.97 (3H, S)

実施例 8 (化合物（ 2 b) の合成）

ォキサ口酢酸（ 9. 8 3 g、 7 4. 4 mm 0 1 ) を水（7 5 m l ：) に溶解し、 1 0 M Na OHを加えて p H 1 1に調製した。四ほう酸ナトリウム（ 3 8. (ί g . 1 9 2 mm o 1 ) . グルコース（ 1 3 4 g、 7 4 3 mm o l ) 、水（ 1 7 5 m l ) を加え攪拌しながら 1 0 M N a OHを用いて p H 1 1に保ち、 7 2時間攪拌した。酢酸を加えて p H 7にした後、 D o w e x 5 0 (H型）を加えて p H 2にした。 1時間後樹脂を濾取し濾液を 2. 8 %アンモニア水で中和し、 D o w e x l (H C O O型）に通し目的物を吸着させた。水洗後、 0. 3 M—ギ酸で溶出した。目的物の分画を減圧濃縮した後残渣をメタノール（ 2 5 0 0 m 1 ) に溶解し、 3 M—塩化水素一メタノール（6 2. 5 m 1 ) を加え 3時間還流下に加熱した。アンバ一リスト 2 1 (OH型）を加え中和し濾取した。濾液を減圧濃縮し、 H P L Cにより精製して化合物（2 b) を得た。（カラム YMC — O D S、 3 0 mm x 2 5 0 mm、溶出液： 1 %ァセトニトリル— 水）収量： 2. 1 0 g ( 9. 5 %) , 他の異性体を含む収量： 4. 5 2 g ( 2 0. 5 %) 。

化合物（ 2 b ) (1)₂0(画： δ 4.70))

113: δ 2.16 11 dd, J=2.4, 14.7 ilz)

113: δ 2.50 丄"， dd， J = 7.8, 14.7 Hz)

114: δ 4.37 丄 I ddd, J=2.4, 3.7， 7.8

116: 0 3.91 V 1 Π j dd, J = 2.0, 6.1 Hz)

117: δ 4.23 上 π， dd, J = 3.7, 6.1 Hz)

115, 118, H9， H9 5 3.60 - 5 3.84 (4H, m)

COOCIIa： δ 3.82 (3H， s)

0CII₃: δ 3.28 (311， s) 実施例 9 (化合物（3 b) の合成）

化合物（2 b) (3 0 8 mg、 1. 0 4 mmo l ) を水（2. 8 m l ) に溶解し、 0. 5 M水酸化バリウム水溶液（4. 1 6 m l ) を加え、 1 5分攪拌した。アンバーリスト 1 5を加え p H 3にした後瀘取した。瀘液を減圧濃縮し得られた残渣をピリジンに溶解した。氷冷下ジシクロへキシルカルポジイミド（ 4 5 4 m g、 2. 2 0 mm o 1 ) を加え、その後室温で 5時間攪拌した。氷冷下にイソシァン酸フヱニル（2. 8 8 g、 2 4. 2 mm o I ) を加え室温で一夜攪拌した。氷冷下にメタノール（5 m l ) を加え減圧濃縮し、得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトにより精製した。（シリ力ゲル： 3 0 g、 2 0 mm X 3 3 0 mm. 溶出液：トルエン（2 0 0 m l ) . トルエン—酢酸ェチル（ 1 0 : 1 ) (2 0 0 m l ) 、その後トルエン一酢酸ェチル（5 : 1 ) ) 目的物の化合物（3 b) の分画を濃縮し、油状物を得た。収量 3 1 8 mg (4 1. 2 %) 。

(化合物に含まれる異性体を除いて換算した収率： 5 8. 4 %) 化合物 _(3 b) (CDC1₃)

113 δ 2.31 (III, dd， J=3.9, 14.6 Hz) H3 δ 2.77 (1Η, dd, J=8.1， 14.6 Hz) H4 δ 5.33 (1H， dd, J=3.9, 8.1 Hz) H5 δ 4.94 (1H，ブロード s)

H6 δ 4.75 (HI, d， J=5.6 Hz)

H7 δ 5.55 (1H， dd, J=5.6, 5.6 Hz) H8 δ 5.42 (1H, dt， J=4.2, 5.6 Hz) H9 δ 4.63 (1H, dd, J=4.2, 12.0 Hz) H9 δ 4.40 (1H, dd, J=4.2， 12.0 Hz) 0CH₃ δ 3.56 (311, s)

フエニル、 NH: (5 6.79 - 5 7.40 (24H， m)

実施例 1 0 (化合物（4 b) の合成）

化合物（3 b) (2 6 4 mg、 3 5 7 zmo l ) をメタノール（ 3 m l ) に溶解し、 3 M—塩化水素ーメタノール（ 1 0 0 z l ) を加え 1時間室温で攪拌した。アンバーリスト 2 1 (O H型）を中性になるまで加え濾過した。濾液を濃縮し得られた油伏物をシリカゲルカラムクロマトにより精製した。（シリカゲル： 1 0 g、 1 5 m m x 2 5 0 mm、溶出液：トルェン一酢酸ェチル（ 3 ： 1 ) ) 目的物の化合物（4 b) の分画を濃縮し油状物を得た。収量 2 1 6 m g

( 7 8. 4 。

化合物（4 b) (CDC1₃)

113 δ 2.36 (1Η, dd， J = 1.0， 14.7 Hz) H3 δ 2.59 (111， dd, J=7.8, 14.7 Hz) H4 δ 5.29 (1H，ブロード d)

H5 δ 4.62 (1H, ブロード s)

H6 δ 4.27 (1H, ブロード s)

117, 118 δ 5.40 δ 5.49 (2H， m)

H9: δ 4.37 (1H, dd, J=4.9, 11.7 Hz) 119: δ 4.65 (1H, dd, J=4.2， 11.7 Hz) 0CH₃: δ 3.16 (311, s)

COOCH; δ 3.81 (3H, s)

フエニル、 NH: (5 6.81 - 5 7.38 (24H， m)

実施例 1 1 (化合物（ 5 b) の合成）

化合物（ 4 b) ( 2 3 m g. 3 0 9 //m o l ) を塩化メチレン ( 5 m l ) に溶解し、ピリジン（ 2 4 9 / 1 ) とトリフルォ口メタンスルホン酸無水物（ 1 2 4 〃 1 、 Ί 3 Ί m o \ ) を氷冷下に加えその後室温でし 5時問攪拌した。反応溶液に飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を加え、塩化メチレンで抽出した。塩化メチレン層を水洗後無水硫酸マグネシゥムで乾燥した。濃縮すると油状物が得られた。シリカゲルカラムにより精製した。（シリカゲル 1 0 g、溶出液：トルエン一酢酸ェチル） 5 : 1 ) ) 目的物の分画を濃縮し油状物として化合物（ 5 b ) を得た。収量 2 ϋ 7 m g ( 7 4. 0 。仆し^ "物 Ύ ( 5 b) (CD i ( トリフレ- - ) no · δ 2.44 Π丄"Η》 d J=14.3 Hz)

δ 2.67 (1H dd J=8.4 14 3 Hz) ί · δ 5.29 ΠΗ m)

δ 4.84 丄 u s)

Hfi Η7· δ 5.79 m)

Η8· δ 5.49 (1H m)

HQ- δ 4· 34 (1H dd J=5.9 11.4 Hz)

0CH-> · δ 3.41 (3H, s)

C00CH-? · δ 3.80 (3H, s)

フエ二ル： δ 6.93 - S 7.53 (20H, m)

N Mhil .: δ 8.80 (In, s)

δ 8.88 (IH, s)

δ 9.24 (HI, s)

δ 9.42 (IH, s)

実施例 1 2 (化合物（6 b ) の合成）

化合物（5 b) ( 2 1. 5 m g、 2 3. 8 ^ m o 1 ) をベンゼン ( l m l ) に溶解し、 0. 2 Mテトラー n—プチルアンモニゥムァジドのベンゼン溶液（5 9 3 1、 1 1 9 m o l ) を加え、室温で攪拌した。 3 0分後に減圧濃縮し、残渣を調製的薄層クロマ卜により精製した。（M e r c k社製シリカゲル厚さ 0 · 5 mm、 2 0 X 2 0 c m、展開溶媒：ベンゼン一酢酸ェチル） 2 : 1 ) ) 目的物の分画を濃縮し油状物として化合物（6 b) を得た。収量 1 4. 0 m g ( 7 3. 7 %) 。

•H-NMR( 270MHz )(CDC1 a )

113 δ 2.35 (IH, dd, J=2.8, 14.7 Hz) H3 δ 2.69 (IH, dd, J=8.8, 14.7 Hz) H5 δ 4.72 (IH, dd, J=2.1, 4.8 Hz) H6 δ 4.30 (1Η， m)

H9 δ 4.17 (III, dd, J = 6.0， 12.1 Hz) H9: δ 4.61 (1H, dd, J=2.0， 12.1 Hz) H4 δ 5.78 (1H， m)

0CH₃: δ 3.36 (3H， s)

COOCH3 ： δ 3.81 (3H， s)

フエニル， NH: δ 6.78 - δ 7.89 (24H, m)

実施例 1 3 (化合物（7 b) の合成）

化合物（6 b) (3 9. 8 mg、 4 9. d m o 1 ) を酢酸ェチル一メタノ一ル（6 m l ： 3 m l ) に溶解し、 P d— C ( 1 0 m g ) を加え水素気流中接触還元を行った。 P d— C ( 1 0 m g) を 3 回追加し、 7. 5時間反応すると原料が消失した。触媒を濾取し減圧濃縮した。残渣と 4ージメチルアミノビリジン（

11 4 8. 8 mg、 3 9 9 0 1 ) をジクロロメタン（2 m l ) に溶 CO解し、氷冷下無

O C

水酢酸（2 3. 6〃 1、 2 5 0 0 1 ) を加えた。室温で 1. 5

> *—

時間攪拌後減圧濃縮し、残渣を調製的薄層クロマトにより精製した。（M e r c k社製シリカゲル厚さ 0. 5mm、 2 0 x 2 0 c3 tS m. 展開溶媒：ベンゼン一酢酸ェチル） 1 : 1 ) ) 目的物の分画を濃縮し油状物として化合物（7 b) を得た。収量 7. 7 mg ( 1 8. G %) 。

^,!I-NMR(270MHz)(CDCl₃)

H3: δ 2.33 (1H, dd,

113 ^r ： δ 2.64 (III, dd,

115: δ 4.51 (1Η， m)

116: δ 4.78 (1Η， m)

114,117,118: δ 5.35 - δ 5.54 (311, m)

δ 6.86 (III, d, J = 8.1 Hz) CH₃CO: δ 2.06 (3H, s)

OCH₃： δ 3.28 (3H, s)

COOGH₃： δ 3.72 (311, s)

フエニル， Nil: δ Ί.00 - δ 7.46 (24H, m)

Η9: δ 4.23 (1H， dd, J=5.9， 11.7 Hz)

119' ： δ 4.60 (III, dd, J=4.3, 11.7 Hz) 実施例 1 4 (化合物（9 b) の合成）

化合物（7 b) ( 8 1. 4 m g、 9 2. 6 〃m o l ) をテトラヒドロフラン（ 2. 0 m l ) に溶解し、 5 %N a OH ( l . 0 m l、 1. 2 5 mm o 1 ) を加え 8 0 °Cにて 4時間加熱攪拌した。アンバ —リスト 1 5を加え、 p H 4にした後瀘取した。 0. 2 M—酢酸— ピリジン緩衝液（p H 5. 5 ) にて洗浄し、濾液を減圧濃縮した。得られた残渣を H P L C (C o s m o s i 1 5 C 1 8 -AR < 1 0 X 2 5 0 mm〉、溶出液： 1 %ァセトニトリル— 0. 1 %TFA 水溶液、保持時間： 6. 9分、検出：紫外吸収 2 1 0 nm) により精製し、凍結乾燥して目的化合物（9 b) を得た。収量 1 5. 1 m g ( 5 8. 0 %) 。

卜 NMIU270匪 z DzO)

H3: δ 2.21 (III, dd, J=4. , 14.4 Hz)

H3: δ 2.48 (1H， dd, J=8.3, 14.4 Hz)

Η4, 5， 6, 7,

8， 9， 9: (？ 3.64 - (5 4.61 (7H, m)

0CH₃： δ 3.30 (3H, s)

実施例 1 5 (化合物（ 1 ί) b) の合成）

化合物（ 9 b) ( 9. l m g、 3 2. 4 m o l ) をジメチルホルムアミド（ 4 5 0〃 1 ) に溶解し、氷冷した。 N—ァセトキシコハク酸イミド（ 5. 6 m g ^ 3 8. 9 o 1 ) 、さらにトリェチルァミン（ 5. 4 / 1、 3 8. 9 zm o l ) を加えて p H 7とし、室温で 3時間攪拌した。減圧濃縮により得られた残渣を H P L C ( C o s m o s i 1 5 C 1 8 - A R < 1 0 x 2 5 0 mm〉、溶出液： 1 %ァセトニトリル— （） . 1 %T F Α水溶液、保持時間： 7. 8 分、検出：紫外吸収 2 1 0 n m) により精製し、凍結乾燥して目的化合物（ 1 0 b ) を得た。収量 6. 5 m g ( 6 2. 0 。

JH-NMR(270MHz D₂0)

H3: δ 2.12 (1H， d， J = 14.6 Hz)

H3: δ 2.36 (1H, dd， J=6.3， 14.6 Hz)

H4, 5, 6, 7, 8, 9,9: δ 3.52 δ 4.38 (7H， m)

C0CH₃ ： δ 2.00 (3H， s)

0CH₃: δ 3.24 (3H, s)

実施例 1 6

(ィソシアル酸（6 —ァセチルァミノ体）（ l b) の合成）化合物（ 1 0 b ) ( 3. 5 m g、 1 0. 8 1110 1 ) を水（3 5 0 fi I ) に溶解し、ァンバーリスト 1 5を加え 5 0 °Cにて 4時間加熱攪拌した。濾過後、凍結乾燥して得られた残渣を H P L C (C o s m o s i 1 5 C 1 8 ~ A R < 1 0 x 2 5 0 mm〉、溶出液： 1 %ァセ卜二トリル一 0. 1 %T F A水溶液、保持時間： 5. 5分、検出：紫外吸収 2 1 0 n m) により精製し、凍結乾燥して目的物をァノマー混合物（3 ： 2 ) として得た。収量 2. 2 m g ( 6 5. 9 %) 。

¹H-NMR(270MHz D_z0)

113 δ 2.10 (0.611, dd, J = 2.9， 14.3 Hz)

113 δ 2.60 (0.611, dd, J = 6.6, 14.3 Hz) 1†2H 113 δ 2.40 (0.811, d， J = 6.1 Hz)

H4, 5， 6，， 8， 9， 9: δ 3.52 - δ 4.38 (7H， m)

C0CII₃ ： δ 1.99 (1.811， s) Λ

COCI ： δ 2.02 (1.2H, s) J計 3H

l³C-NMR (67.5MHz, Ml

C3: δ 44.21, δ 44.21 92/00298

C6: δ 52.29, δ 53.30

C9: δ 63.46， δ 63.58

C4，5，7, 8: δ 72.60, δ 72.73, δ 72.73, δ 72.28，

δ 72.89, δ 72.89, δ 85.95， δ 86.62

C2： δ 103.60, (5103.32

C1 ： (5174.76， δ 174.88

C0Cil₃ ： δ 22.87, 5 22.87

C0CH₃ ： S 174.28, (5174.28

実施例 1 7 (化合物（2 d) の合成）

ォキサ口酢酸（9. 8 3 g、 7 4. 4 mm 0 1 ) を水（7 5 m l ) に溶解し、 1 0 M、 Na OHを加えて p H 1 1に調製した。四ほう酸ナトリウム（ 3 8. 6 . 1 9 2 mm o l ) 、グルコース（ 1 3 4 g、 7 4 3 mm o l ) 、水（ 1 7 5 m l ) を加え攪拌しながら 1 0 M、 N a OHを用いて p H 1 1に保ち、 7 2時間攪拌した。酢酸を加えて P H 7にした後、 D 0 w e X 5 0 (H型）を加えて p H 2にした。 1時間後樹脂を濾取し濾液を 2. 8 %アンモニア水で中和し、 D o w e X 1 (H C O O型）に通し目的物を吸着させた。水洗後、 0. 3 M—ぎ酸で溶出した。目的物の分画を減圧濃縮した後残渣をメタノール（2 5 0 0 m l ) に溶解し、 3 M—塩化水素ーメタノール（ 6 2. 5 m 1 ) を加え 3時間環流下に加熱した。アンバ一リスト 2 1 (OH型）を加え中和し濾取した。濾液を減圧濃縮し、 II P L Cにより精製して化合物（2 d) を得た。（カラム YMC— OD S、 3 0 mm X 2 5 0 mm、溶出液： 1 %ァセトニトリル一水：) 収量： 3 9 7 m g ( 1. 8 %) . 他の異性体を含む収量： 4. 5 2 g ( 2 0. 5 。

化合物 ( 2 d) (D₂0(D0H: δ 4.70))

Η3: δ 2.42 (Ιίί, dd， J = l.7, 15.1 Hz)

Η3: δ 2.52 (ΙΗ' dd, J=5.1， 15.1 Hz)

114： δ 4.48 (1Η， ddd， J = 1.7, 3.4, 5.1 Hz) (611, m)

COOCHs： δ 3.83 (3H, s)

OCH: δ 3.27 (3H， s)

実施例 1 8 (化合物（3 d) の合成）

ィ匕合物（2 d ) ( 1 7 4 m g、 5 8 8〃m o l ) を水（ 1. 6 2 m 1 ) に溶解し、 0. 5 M水酸化バリゥム水溶液（ 2. 3 5 m l ) を加え、 1 5分攪拌した。ァンバ一リスト 1 5を加え p H 3にした後濾取した。濾液を減圧濃縮し得られた残渣をピリジン（ 1 7. 9 m 1 ) に溶解した。氷冷下ジシク口へキシルカルボジィミド（ 2 3 l m g、 1. 1 2 mm 0 1 ) を加え、その後室温で 1 0時間攪拌した。氷冷下にィソシアン酸フェニル（ 1. 4 6 m l、 1 3. 4 mm o 1 ) を加え室温で一夜攪拌した。氷冷下にメタノール（5 m l ) を加え減圧濃縮し、得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトにより精製した。（シリカゲル： 1 0 g、 1 5 mm X 2 5 0 mm. 溶出液：トルエン（ 2 0 0 m 1 ) 、トルエン—酢酸ェチル（ 1 0 : 1 ) ( 2 0 0 m 1 ) 、その後トルエン一酢酸ェチル（ 5 ： 1 ) ) 目的物の分画を濃縮し、油状物として化合物（3 d) を得た。収量 2 5 8 m g ( 5 9. 2 。

化合物 (3 d) (DMSO-de)

H3: δ 2.21 (III, dd, J = 3.2, 14.7 Hz)

H3: δ 2.54 (III, dd, J = 10.5， 14.7 Hz)

H4: δ 5.35 (III, in)

H5: δ 5· 13 (1Η, d， J = 6.8 Hz)

116: δ 4.99 (111, d, J = 1.5 Hz)

H7: δ 5.53 (1Η， dd, J = l.7, 7.1 Hz)

118: δ 5.35 (1Η， m)

119: δ 4.39 (III, dd, J=5.4, 12.2 Hz) H9: δ 4.77 (1Η， dd, J-2. , 12.2 Hz) 0CH₃： δ 3.46 (3H, s)

7工ニル、 H: δ 6.90 δ 9.74 (24H, m)

実施例 1 9 (化合物（4 d) の合成）

化合物（3 d) ( 2 5 8111 、 3 4 8 // 1110 1 ) をメタノール（ 2. 5 8 m l ) に溶解し、 3 M—塩化水素ーメタノール（ 3 8 7 〃 1 ) を加え 1時間室温で攪拌した。アンバーリスト 2 1 (OH型）を中性になるまで加え濾過した。濾液を濃縮し得られた油状物をシリ力ゲル力ラムクロマトにより精製した。（シリカゲル： 1 0 g、 1 5 mm x 2 5 0 mm、溶出液：トルエン一酢酸ェチル（ 3 : 1 ) ) 目的物の分画を濃縮し油状物の化合物（4 d) を得た。収量 1 6 5 m g ( 6 1. 2 。

化合物（4 d) _(CDC1₃)

H3: δ 2.43 (1Η， dd, J=5.4, 14.2 Hz)

II

H3: δ 2.66 (1Η， dd, J=6.8, 14.2 Hz)

H4: δ 5.64 (1H, dd, J=5. , 6.8 Hz)

115: δ 4.55 O C

H6: δ 4.25 (1H, d, J=3.4 Hz)

H7, H8: δ 5.52 - δ 5.56 (2H， m)

119: "V δ 4.60 - δ 4.72 (2H， m)

H9: J

0CH₃: δ 3.11 (311, s)

C00CH₃ ： δ 3.77 (311, s)

フエニル、 NH δ 6.94 - δ 7.53 (24H, m)

実施例 2 0 (化合物（5 d) の合成）

化合物（4 d ) ( 7 0. l m g、 9 0. 7 ^m o l ) を塩化メチレン（ 1. 7 4 m l ) に溶解し、ピリジン（ 1 4 7〃 1 ) とトリフルォロメタンスルホン酸無水物（6 1. 0 〃 1 、 3 6 3 z m 0 1 ) を氷冷下に加えその後室温で 2時間攪拌した。反応溶液に飽和炭酸水素ナトリゥム水溶液を加え、塩化メチレンで抽出した。塩化メチレン層を水洗後無水硫酸マグネシゥムで乾燥した。濃縮すると油状物が得られた。シリカゲルカラムにより精製した。（シリカゲル 2 . 5 g、溶出液：トルエン—酢酸ェチル） 4 : 1 ) ) 目的物の分画を濃縮し油状物として化合物（ 5 d) を得た。収量 7 8. 2 m g ( 9 5. 3 %) 。

化合物（ 5 d) _ (CDC1₃)

H3: δ 2.60 - δ 2.74 (2Η, m)

Η3:

H4，H7， H8 δ 5.67 - δ 5.72 (3Η, m)

H6 δ 5.39 (1Η，ブロード s) H5: 、

H9 δ 4.50 - δ 4.55 (3Η, m)

H9

OCIU: δ 3.31 (3Η， s)

COOCHa： δ 3.75 (3H, s)

フエニル， Nil δ 6.90 - δ 7.37 (24H, m)

実施例 2 1 (化合物（ 6 d) の合成）

化合物（5 d) ( 7 8. 2 mg、 8 6. 4 βτηο 1 ) をベンゼン ( 1. 6 4 m l ) に溶解し、 0. 2 Mテトラー n—ブチルアンモニゥムアジドのベンゼン溶液（2. 1 6 m l、 4 3 2 mo l ) を加え、室温で攪拌した。 1 Γ)時間後に減圧濃縮し、残渣を調製的薄層クロマトにより精製した。（M e r c k社製シリカゲル厚さ 0. 5 mm、 2 0 X 2 0 c m, 展開溶媒：ベンゼン—酢酸ェチル） 2 ： 1 ) ) 目的物の分画を濃縮し油状物として化合物（6 d) を得た。収量 4 1. 8 m g ( 6 0. 7 %) 。

1H-NMR(270MHz)(CDCl₃)

113: δ 2.56 (III, dd, J=2.3, 15.3 Hz)

H3: δ 2.68 (1H， dd, J=5.7， 15.3 Hz) H5, H6: δ A.21 - δ 4.40 (2H, m)

H9: δ 4.48 (1H， dd, J=6.8, 12.1 Hz)

Η9' ： «5 4.75 (1H, dd, J=2.9， 12.1 Hz)

Η4: δ 5.47 (1H, dd, J=2.3， 3.7, 5.7 Hz)

Η7, Η8: δ b. Gl - ό 5.77 (2H， m)

0CII₃： δ 3.29 (311, s)

C00CH₃： δ 3.74 (3H, s)

フエニル， ΝΗ: δ 6.95 - c) 7.37 (24H, m)

実施例 2 2 (化合物（7 d) の合成）

化合物（6 d) (15.6mg、 19.6〃mol)を酢酸ェチル—メタノール

(6ml :3ml)に溶解し、 Pd- C( 10mg)を加え水素気流中接触還元を行つた。 Pd- C(10mg)を 3回追加し、 7.5 時間反応すると原料が消失した。触媒を瀘取し減圧濃縮した。残渣と 4ージメチルァミノピリジン

(19.2mg、 157 niol )をジクロロメタン（2ml)に溶解し、氷冷下無水酢酸（9.3 1 . 98.0 imol)を加えた。室温で 1. 5時間攪拌後減圧濃縮し、残渣を調製的薄層クロマトにより精製した。（M e r c k社製シリカゲル厚さ ϋ. 5 mm. 2 0 x 2 0 c m、展開溶媒：ベンゼン一酢酸ェチル） 1 : 1 ) ) 目的物の分画を濃縮し油状物として化合物（7 d) を得た。収量 4. 2 m g (2 5. 8 。

1H-NMR(270MHz)(CDCl₃)

H3: δ 2.48 (1Η, dd, J=2.7, 15.1 Hz)

113 ^r ： δ 2.68 (1Η， dd, J=6.1， 15.1 Hz)

H4, 7,8： δ 5.37-5.51 (3Η, m)

115: δ 4.29 (Hi, dd, J=4.8， 7.7 Hz)

H6: δ 5.05 (1H, m)

119: δ 4.36 (III, dd， J=4.6, 12.0 Hz)

119' ： δ 4.66 (HI, dd, J=3.8， 12.0 Hz)

CH₃ con: δ 6.78 (1Η， d， J=9.8 Hz)

CH₃C0: δ 1.99 (3Η, s) 0CH₃: δ 3.22 (3Η， s)

C00CH₃ ： δ 3.70 (3Η， s)

フエニル， NH: δ 7.00 δ 7.60 (24Η， m)

実施例 2 3 (化合物（ 8 d ) の合成）

化合物（6 d ) ( 9 0. 0 m g、 1 1 3 〃m o l ) をテトラド口フラン（ 4. 0 m l ) に溶解し、 5 %N a OH ( 2. 0 m l 、 2. 5 0 mm o 1 ) を加え 8 0 °Cにて 4時間加熱攪拌した。ァンバ一リスト 1 5を加え、 p H 4にした後濾取した。 H P L C (溶出液： 1 %ァセトニトリル— 0. 1 %T F A水溶液、検出：紫外吸収 2 1 0 n m) により精製し、凍結乾燥して目的化合物（8 d) を得た。収量 1 8. 5 m g ( 5 3. 4 。

'H-NMR(270MHz D₂0)

H3 δ 2.33 (1Η， dd， J = 2.2， 15.1 Hz)

H3 δ 2.40 (1Η， dd， J=4.6, 15.1 Hz)

H4 δ 4.45 (1H， ddd, J=2.2， 3.2， 4.6 Hz) 115 δ 4.20 (1H， dd， J=3.2, 9.9 Hz)

116 δ 3.97 (1H, dd， J=2.7, 9.9 Hz)

H7 δ 3.94 (1H, dd， J=2.7, 8.4 Hz)

ΙΙδ δ 3.84 (1H, ddd, J = 2.7, 6.4， 8.4 Hz) H9 δ 3.55 (III, dd, J=6.4, 12.0 Hz)

H9 δ 3.75 (1H, dd, J=2.7, 12.0 Hz)

OCH δ 3.18 (3H， s)

実施例 2 4 (化合物（ 9 d) の合成）

化合物（8 d ) ( 1 8. 5 m g、 6 0. 3 m o 1 ) を水（ 5. 0 m 1 ) に溶解し、 P d - - C ( 1 0 m g) を加え水素気流中室温にて接触還元を行った。 1時間後原料の消失を確認し、触媒を濾取し、凍結乾燥により目的化合物（ 9 d ) を得た。収量 1 6. 1 m g ( 9 5. 3 。

¹!I-NMR(270MHz D₂0) H3 δ 2.21 (1Η， dd， 3 = 1.7， 14.9 Hz)

H3 δ 2.37 (1Η， dd， J=5.6, 14.9 Hz)

H4 δ 4.57 (1H, ddd, J = 1.7, 3.9， 5.6 Hz) H5 δ 4.36 (1H, dd， J=3.9, 5.4 Hz)

H6, 7, 8,9,9: δ 3.58 - d 3.91 (5H, m)

OCHa： δ 3.15 (3H, s)

実施例 2 5 (化合物（ 1 0 d ) の合成）

化合物（9 d) ( 1 6. l mg、 5 7. 3 /m o l ) をジメチルホルムァミド（ 1. 6 m l ) に溶解し、氷冷した。 N—ァセトキシコハク酸イミド（ 1 0. (I m g、 6 9. 0 m o l ) 、さらにトリェチルァミン（9. 6〃 1、 6 9. 0 m 0 1 ) を加えて p H 7 とし、室温で 3時間攪拌した。減圧濃縮により得られた残渣を H P L C (C o s m o s i 1 5 C 1 8— ARく 1 0 x 2 5 0 mm〉、溶出液： 1 %ァセトニトリル— 0. 1 %T F A水溶液、保持時間： 1 1. 7分、検出：紫外吸収 2 1 0 nm) により精製し、凍結乾燥して目的化合物（ 1 0 d) を得た。収量 9. 5 mg ( 5 1. 4 。

rH-NMR( 270MHz D₂0)

H3: δ 2.34 (2H， d, J=2.9 Hz)

H4: δ 4.30 (1H, ddd, J=2.9, 2.9， 2.9 Hz)

H5: δ 4.39 (1H， dd， J=2.9, 9.8 Hz)

H6: 6 4.23 (1H, dd, J=2.7, 9.8 Hz)

117： δ 3.69 (III, dd, J=2.7， 9.0 Hz)

118: δ 3.82 (III, ddd, J=2.7, 6.6， 9.0 Hz)

H9: δ 3.50 (III, dd, J=6.6, 11.8 Hz)

H9: δ 3.71 (1H, dd, J=2.7, 11.8 Hz)

COCHa ： δ 1.91 (3H, s)

0CH₃： δ 3.20 (3H, s)

実施例 2 6

(4-ェピ—イソシアル酸（6-ァセチルァミノ体）（Id)の合成）ィ匕合物（ 1 0 d) ( 9. 5 mg、 2 9. 4 / m o 1 ) を水（ 1. O m l ) に溶解し、ァンバーリスト 1 5を加え 5 0度にて 4時間加熱攪拌した。濾過後、凍結乾燥して得られた残渣を H P L C (C o s m o s i 1 5 C 1 8 - A R < 1 0 x 2 5 0 mm > ^ 溶出液： 1 %ァセトニトリル— 0. 1 %T F Α水溶液、保持時間： 8. 5分、検出：紫外吸収 2 1 0 nm) により精製し、凍結乾燥して目的物 4 一ェピ一イソシアル酸（ 1 d) をァノマー混合物（ 3 ： 2 ) として得た。収量 4. 2 m g ( 4 6. 3 %) 。

1H-NMR(270MHz D₂0)

Η3: δ 2.06 - δ 2.27 (1H， m)

Η3: δ 2.46 - δ 2.52 (1Η， m)

Η4, 5, 6, 7,

8， 9,9: δ 3.52 δ 4.38 (7Η, m)

C0CH₃ ： δ 1.92 (3Η， s)

実施例 2 7 (化合物（ 9) の合成）

化合物（2) (3 3. 5 mg、 0. 1 1 3 mm o 1 ) を水（ 1. 0 m l ) に溶解し、 5 %N a OH ( 1 3 6 / l、 0. 1 7 0 mm o 1 ) を加え、室温にて 3 0分間攪拌した。氷冷後ァンバ一リスト 1 5を加え p H 3にした後、濾取した。濾液を凍結乾燥して目的化合物（9 ) を得た。 H P L C保持時間： 8. 2分（分析条件： T S K g e l Am i d e— 8 0く 4. 6 x 2 5 0 m m >、溶出液： 7 5 %ァセトニトリル—水、流速： 1. 0 m l Zm i n、検出：示差屈折率）収量 3 0. 4 m g ( 9 5. 6 。

l-NMR(270MHz D₂0)

H3: δ 1.84 (1H, dd， J = 12.0, 13.2 Hz)

113: δ 1.98 (III, dd， J=5.1， 13.2 Hz)

114: δ 3.99 (111, ddd， J=2.9, 5.1， 12.0 Hz)

H5, 6,7,8: δ 3.75 - 3.92 (411, m)

Η9: δ 3.58 (1H, dd， J=6.4, 12.0 Hz) H9: δ 3.68 (1H， dd, J-3. , 12.0 Hz)

OCHs： δ 3.16 (3H， s)

実施例 2 8 (化合物（ 1 ) の合成）

化合物（9 ) ( 3 0. 4 m g、 0. 1 0 8 mm o 1 ) を水（ 1. 0 m l ) に溶解し、ァンバ一リスト 1 5を加え 5 0 °Cにて 4時間加熱攪拌した。濾過後凍結乾燥して得られた残渣を H P L C (YMC S H - 3 6 3 — 5く 3 0 X 2 5 0 mm〉、溶出液： 1 %ァセトニトリノレ一 0. 1 %T F Α水溶液、流速： 2 0. 0 m l /m i n、保持時間： 8. 2分、検出：紫外吸収 2 1 0 nm) により精^し、凍結乾燥して目的物化合物（ 1 ) を得た。 H P L C保持時間： 1 1. 5分（分析条件： T S K g e l Am i d e— 8 0く 4. 6 x 2 5 0 mm >、溶出液： 7 5 %ァセトニトリル—水、流速： 1. 0 m 1 i n、検出：示差屈折率）収量 1 3. 6 m g ( 4 7. 0 。

1H-NMR(27QMHz D₂0)

δ 1.85 一 2.06 (1.4H, m)

H3: δ 2.35 (0.37H, d， J = 6.8 Hz) 計 2H δ 2.59 (0.23H, dd, J=7.5, 14.3 Hz Η4, 5, 6， 7, 8, 9,9: δ 3.51 - 4.39 (7H, m)

実施例 2 9 (ノイラダーゼ阻害活性の測定）

(1)試薬調製

1 ) 0. 2 Μリン酸塩緩衝液（Ρ Η 6. 0 )

2 ) 2. 5 mM過ヨウ素酸（0. 1 2 5 N硫酸中）試薬

3 ) 2 %亜ヒ酸ナトリウム（0. 5 N塩酸中）試薬

4 ) 0. 1 M 2—チォバビツール酸（p H 9. 0 ) 試薬

5 ) n—ブタノール試薬

(n—ブタノール：塩酸 = 9 5 : 5 v/v)

)方法

表 1 に示す各ウィルス含有液 5 0 1 に、表 1 に示す阻害剤 5 0 fi 1を加え、 3 7でで 1 5分間ィンキュベートした。次いで、 1 0 ϋ 1 のフヱツイン含有緩衝液（ 1 0 m gZm 1 ) と 1 0 1 の 5 ϋ mMの塩化カルシウム水溶液を加え 3 7 °Cで 5時間ィンキュベ一卜した。冷却後、 0. 2 5 m lの 2. 5 mM過ヨウ素酸試薬を加え 3 7 °Cで 3 0分間ィンキュペートした。次いで、 0. 2 5 m l の 2 %亜ヒ酸ナトリウム試薬を加え、さらに 2. 0 m lの 0. 1 M 2 — チォバビツール酸試薬を加え 1 0 0 °Cで 7. 5分間ィンキュベ一トした。次いで 4 m 1 の n—ブタノール試薬を加え、激しく攪拌し、 3 0 0 0 r p mで 2 0分間遠心分離した。上澄み液の吸光度（O D 。）を測定した。その結果から、阻害率を求め、表 1に示す。尚、ウィルス含有液中のウィルス量は、 Aが 7. 5 gZm lであり、 A₂ 力《 1. 0 g/ 1 であり、 B力く 1 0. 0 n g/m 1 であつた。

表 1 阻害剤阻害率（％) (検体濃度 1 0 0

ィンフルェンインフルェンインフルェンザ Aウィルスザ A₂ウイルスザ Bウィルス化合物（ 2 ) 1 0. 2 2. 5 < 0. 0 化合物（ l b) 8 4. 9 7 0， 3 6 8， 5 化合物（ I d ) 6 7. 6 4 1. 4 3 1. 2 化合物（ 9 ) 5 0. 6 3 1. 8 5 6， 2 化合物（ 1 ) 2 9. 9 1 0. 3 4 3. 0

Claims

請求の範囲

1. 下記一般式（ l a) 、（n a) 、（ffl a) 、 ( l b) . (li b ) ( I d) 又は（II d) で表わされる化合物。

R

(一般式中、 R ' は水素原子又は R '°- Ph-NHCO 基（R '^eは水素原子又は炭素数 1〜 6のアルキル基を示す）を示し、

R² は水素原子又はトリフルォロメタンスルホ二ル基を示し、

R³ 及び R⁵ は、同一又は異なり、水素原子又は炭素数 1〜 6のアルキル基を示し、

R⁴ は N ₃ 基又は CH₃C0NH 基を示し、但し、 R⁴ 力 CH₃C0NH 基のとき、 R ¹ 、 R ³ 及び R⁵ は同時に水素原子ではなく、

R ⁶ は水素原子又は R ^{I D}- Ph-NHCO 基（R ^{I D}は水素原子又は炭素数 1〜 6のアルキル基を示す）を示し、

R⁷ は 0H基、 0S0₂CF₃ 基、 N ₃ 基、 CI1₃C0NH 基又は NH₂ 基をし、

R⁸ 及び R ⁹ は、同一又は異なり、水素原子又は炭素数 1〜 6のアルキル基を示し、

Rは R '。- Ph-NHCO基（R '°は水素原子又は炭素数 1〜 6のアルキル基を示す）を示す。）

2. D—グルコースとォキサ口酢酸とを反応させ、得られる反応生成物と炭素数 1〜 6のアルキルアルコールを反応させ、得られる生成物の混合物を分離することを含む、アルキルグリコシドアルキルエステル体（IVa) 、（IVb) 及び（IVd) を合成する方法。

3. 請求の範囲 2に記載のアルキルグリコシドアルキルエステル体 (IVa) (式中 R³ 及び R⁵ は炭素数 1〜 6のアルキル基を示す）、 (IVb ) 又は（IVd) (式中 R⁸ 及び R⁹ は炭素数 1〜6のアルキル基を示す）をゲン化し、カルポジイミド化合物を反応させ、さらにフヱ二ルイソシァネート又は炭素数 1〜 6のアルキル置換フェ二ルイソシァネートを反応させてラクトン体（III a) 、 (lib) 又は（lid) (但し、上記一般式中、 Rは R'°-Ph-NHC0基（ R'^Dは水素原子又は炭素数 1〜 6のアルキル基を示す）を示し、 R³ 及び R⁵ 並びに R⁸ 及び R^e は、それぞれ炭素数 1〜 6のアルキル基を示す。）を得ることを特徴とする合成中間体の合成法。

4. 請求の範囲 3に記載のラクトン体（III a) を開環してヒドロキシエステル体（V a) を得る工程、

ヒドロキシエステル体（V a) にトリフルォロメタンスルホン酸無水物を反応させてトリフルォロメタンスルホニル体（Via) を得る工程、

アジド体（VII a) を還元し、ァセチル化することにより保護シアル酸（VIII a) を得る工程、及び

保護シアル酸（Villa) を脱保護化してシアル酸を得る工程、 (但し、上記一般式中、 Rは R'^e- Ph- NHC0基（ R^{I D}は水素原子又は炭素数〗〜 6のアルキル基を示す）を示し、 R³ 及び R⁵ はそれぞれ炭素数 1〜 6のアルキル基を示す。）の各工程を含むシアル酸の合成法。

5. トリフルォロメタンスルホニル体（Via) 、 (VI b) 又は（Vi d) にアジド化剤を反応させてアジド体（VII a) 、 (VII b) 又は（VII d) を得る（但し、上記一般式中、 Rは R -Ph- NHC0基（ R '°は水素原子又は炭素数 1〜 6のアルキル基を示す）を示し、 R " 及び R⁵ 並びに R⁸ 及び R⁹ はそれぞれ炭素数 1〜 6のアルキル基を示す。）ことを特徴とする合成中間体の合成法。

6. 請求の範囲 3に記載のラクトン体（lib) 又は（lid) を開環してヒドロキシエステル体（Vb) 又は（Vd) を得る工程、

ヒドロキンエステル体（V b) 又は（V d) にトリフルォロメタンスルホン酸無水物を反応させてトリフルォロメタンスルホニル体 (VI b) 又は（VI d) を得る工程、

トリフルォロメタンスルホニル体（VI b) 又は（VId) にアジド化剤を反応させてアジド体（ Vllb) 又は（ Vlld) を得る工程、

アジド体（VII b) 又は（VII d) を還元し、ァセチル化し、次いで脱 R'°- Ph-NHCO基をするか、またはアジド体（VII b) 又は（ VII d) を脱 R '°- Ph-NHCO基し、次いで還元することによりァミノ体（ I Xb) 又は（ I Xd) を得る工程、

アミノ体（ I Xb) 又は（ I Xd) をァセチル化してァセチル体（Xb ) 又は（Xd) を得る工程、

ァセチル体（Xb) 又は（Xd) を脱保護化してイソシアル酸（ 1 b ：) 又は（ I d) を得る工程、

(但し、上記一般式中、 Rは R ^{I D}-Ph- NHC0基（ R ^{1 (1}は水素原子又は炭素数 1〜 6のアルキル基を示す）を示し、 R⁸ 及び R ⁹ は炭素数

1〜 6のアルキル基を示す。）の各工程を含むイソシアル酸の合成法。