RU2645092C1 - Hepatoprotective injection pharmaceutical composition on the basis of silimarine and nanoparticles of selenium - Google Patents
Hepatoprotective injection pharmaceutical composition on the basis of silimarine and nanoparticles of selenium Download PDFInfo
- Publication number
- RU2645092C1 RU2645092C1 RU2017135394A RU2017135394A RU2645092C1 RU 2645092 C1 RU2645092 C1 RU 2645092C1 RU 2017135394 A RU2017135394 A RU 2017135394A RU 2017135394 A RU2017135394 A RU 2017135394A RU 2645092 C1 RU2645092 C1 RU 2645092C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- silymarin
- selenium
- pharmaceutical composition
- acid
- stabilizer
- Prior art date
Links
- BUGBHKTXTAQXES-UHFFFAOYSA-N Selenium Chemical compound [Se] BUGBHKTXTAQXES-UHFFFAOYSA-N 0.000 title claims abstract description 42
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 title claims abstract description 36
- 239000011669 selenium Substances 0.000 title claims abstract description 30
- 229910052711 selenium Inorganic materials 0.000 title claims abstract description 30
- 239000002105 nanoparticle Substances 0.000 title claims abstract description 23
- 230000002443 hepatoprotective effect Effects 0.000 title claims abstract description 15
- 238000002347 injection Methods 0.000 title claims description 6
- 239000007924 injection Substances 0.000 title claims description 6
- SEBFKMXJBCUCAI-UHFFFAOYSA-N NSC 227190 Natural products C1=C(O)C(OC)=CC(C2C(OC3=CC=C(C=C3O2)C2C(C(=O)C3=C(O)C=C(O)C=C3O2)O)CO)=C1 SEBFKMXJBCUCAI-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 64
- SEBFKMXJBCUCAI-HKTJVKLFSA-N silibinin Chemical compound C1=C(O)C(OC)=CC([C@@H]2[C@H](OC3=CC=C(C=C3O2)[C@@H]2[C@H](C(=O)C3=C(O)C=C(O)C=C3O2)O)CO)=C1 SEBFKMXJBCUCAI-HKTJVKLFSA-N 0.000 claims abstract description 63
- 229960004245 silymarin Drugs 0.000 claims abstract description 59
- 235000017700 silymarin Nutrition 0.000 claims abstract description 59
- 239000003381 stabilizer Substances 0.000 claims abstract description 20
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims abstract description 15
- MUBZPKHOEPUJKR-UHFFFAOYSA-N Oxalic acid Chemical compound OC(=O)C(O)=O MUBZPKHOEPUJKR-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 12
- 239000003638 chemical reducing agent Substances 0.000 claims abstract description 11
- CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N Ascorbic acid Chemical compound OC[C@H](O)[C@H]1OC(=O)C(O)=C1O CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N 0.000 claims abstract description 10
- KWYUFKZDYYNOTN-UHFFFAOYSA-M Potassium hydroxide Chemical compound [OH-].[K+] KWYUFKZDYYNOTN-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims abstract description 10
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 10
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 claims abstract description 9
- XUJNEKJLAYXESH-REOHCLBHSA-N L-Cysteine Chemical compound SC[C@H](N)C(O)=O XUJNEKJLAYXESH-REOHCLBHSA-N 0.000 claims abstract description 8
- 235000018417 cysteine Nutrition 0.000 claims abstract description 6
- XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N cysteine Natural products SCC(N)C(O)=O XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 6
- 235000010323 ascorbic acid Nutrition 0.000 claims abstract description 5
- 229960005070 ascorbic acid Drugs 0.000 claims abstract description 5
- 239000011668 ascorbic acid Substances 0.000 claims abstract description 5
- DNJIEGIFACGWOD-UHFFFAOYSA-N ethyl mercaptane Natural products CCS DNJIEGIFACGWOD-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 5
- AKHNMLFCWUSKQB-UHFFFAOYSA-L sodium thiosulfate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]S([O-])(=O)=S AKHNMLFCWUSKQB-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims abstract description 5
- 235000019345 sodium thiosulphate Nutrition 0.000 claims abstract description 5
- DGVVWUTYPXICAM-UHFFFAOYSA-N β‐Mercaptoethanol Chemical compound OCCS DGVVWUTYPXICAM-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 5
- 239000004475 Arginine Substances 0.000 claims abstract description 4
- ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-P L-argininium(2+) Chemical compound NC(=[NH2+])NCCC[C@H]([NH3+])C(O)=O ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-P 0.000 claims abstract description 4
- ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N arginine Natural products OC(=O)C(N)CCCNC(N)=N ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 4
- 235000006408 oxalic acid Nutrition 0.000 claims abstract description 4
- QYHFIVBSNOWOCQ-UHFFFAOYSA-N selenic acid Chemical compound O[Se](O)(=O)=O QYHFIVBSNOWOCQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 9
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N citric acid Chemical compound OC(=O)CC(O)(C(O)=O)CC(O)=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 8
- VZCYOOQTPOCHFL-OWOJBTEDSA-N Fumaric acid Chemical compound OC(=O)\C=C\C(O)=O VZCYOOQTPOCHFL-OWOJBTEDSA-N 0.000 claims description 4
- HFVMEOPYDLEHBR-UHFFFAOYSA-N (2-fluorophenyl)-phenylmethanol Chemical compound C=1C=CC=C(F)C=1C(O)C1=CC=CC=C1 HFVMEOPYDLEHBR-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- BJEPYKJPYRNKOW-REOHCLBHSA-N (S)-malic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](O)CC(O)=O BJEPYKJPYRNKOW-REOHCLBHSA-N 0.000 claims description 2
- KDYFGRWQOYBRFD-UHFFFAOYSA-N Succinic acid Natural products OC(=O)CCC(O)=O KDYFGRWQOYBRFD-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- BJEPYKJPYRNKOW-UHFFFAOYSA-N alpha-hydroxysuccinic acid Natural products OC(=O)C(O)CC(O)=O BJEPYKJPYRNKOW-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 235000015165 citric acid Nutrition 0.000 claims description 2
- 239000001530 fumaric acid Substances 0.000 claims description 2
- 235000011087 fumaric acid Nutrition 0.000 claims description 2
- 239000001630 malic acid Substances 0.000 claims description 2
- 235000011090 malic acid Nutrition 0.000 claims description 2
- 239000001384 succinic acid Substances 0.000 claims description 2
- VZCYOOQTPOCHFL-UHFFFAOYSA-N trans-butenedioic acid Natural products OC(=O)C=CC(O)=O VZCYOOQTPOCHFL-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 239000003814 drug Substances 0.000 abstract description 34
- 229940079593 drug Drugs 0.000 abstract description 31
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 11
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 abstract description 11
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract description 10
- 235000005979 Citrus limon Nutrition 0.000 abstract 1
- 244000248349 Citrus limon Species 0.000 abstract 1
- 235000011430 Malus pumila Nutrition 0.000 abstract 1
- 235000015103 Malus silvestris Nutrition 0.000 abstract 1
- 229940000207 selenious acid Drugs 0.000 abstract 1
- MCAHWIHFGHIESP-UHFFFAOYSA-N selenous acid Chemical compound O[Se](O)=O MCAHWIHFGHIESP-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract 1
- RWSXRVCMGQZWBV-WDSKDSINSA-N glutathione Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(=O)N[C@@H](CS)C(=O)NCC(O)=O RWSXRVCMGQZWBV-WDSKDSINSA-N 0.000 description 26
- 210000004185 liver Anatomy 0.000 description 16
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 16
- VZGDMQKNWNREIO-UHFFFAOYSA-N tetrachloromethane Chemical compound ClC(Cl)(Cl)Cl VZGDMQKNWNREIO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 16
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 15
- 108010024636 Glutathione Proteins 0.000 description 13
- 229960003180 glutathione Drugs 0.000 description 13
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 11
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 11
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 9
- 210000003494 hepatocyte Anatomy 0.000 description 9
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 8
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 8
- 229950005499 carbon tetrachloride Drugs 0.000 description 7
- 238000002296 dynamic light scattering Methods 0.000 description 7
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 description 7
- DNIAPMSPPWPWGF-UHFFFAOYSA-N Propylene glycol Chemical compound CC(O)CO DNIAPMSPPWPWGF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 6
- -1 konvaflavin) Substances 0.000 description 6
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 6
- 230000001154 acute effect Effects 0.000 description 5
- 230000007423 decrease Effects 0.000 description 5
- 239000006185 dispersion Substances 0.000 description 5
- 208000006454 hepatitis Diseases 0.000 description 5
- 208000019423 liver disease Diseases 0.000 description 5
- VMGAPWLDMVPYIA-HIDZBRGKSA-N n'-amino-n-iminomethanimidamide Chemical compound N\N=C\N=N VMGAPWLDMVPYIA-HIDZBRGKSA-N 0.000 description 5
- BOLDJAUMGUJJKM-LSDHHAIUSA-N renifolin D Natural products CC(=C)[C@@H]1Cc2c(O)c(O)ccc2[C@H]1CC(=O)c3ccc(O)cc3O BOLDJAUMGUJJKM-LSDHHAIUSA-N 0.000 description 5
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 5
- SEBFKMXJBCUCAI-WAABAYLZSA-N (2r,3r)-3,5,7-trihydroxy-2-[(2s,3s)-3-(4-hydroxy-3-methoxyphenyl)-2-(hydroxymethyl)-2,3-dihydro-1,4-benzodioxin-6-yl]-2,3-dihydrochromen-4-one Chemical compound C1=C(O)C(OC)=CC([C@H]2[C@@H](OC3=CC=C(C=C3O2)[C@@H]2[C@H](C(=O)C3=C(O)C=C(O)C=C3O2)O)CO)=C1 SEBFKMXJBCUCAI-WAABAYLZSA-N 0.000 description 4
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 4
- 239000013543 active substance Substances 0.000 description 4
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 4
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 4
- 239000002552 dosage form Substances 0.000 description 4
- 239000008389 polyethoxylated castor oil Substances 0.000 description 4
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 4
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 4
- 239000003826 tablet Substances 0.000 description 4
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- WVDDGKGOMKODPV-UHFFFAOYSA-N Benzyl alcohol Chemical compound OCC1=CC=CC=C1 WVDDGKGOMKODPV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- LYCAIKOWRPUZTN-UHFFFAOYSA-N Ethylene glycol Chemical compound OCCO LYCAIKOWRPUZTN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 3
- 235000010841 Silybum marianum Nutrition 0.000 description 3
- 238000010171 animal model Methods 0.000 description 3
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 3
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 3
- 208000019425 cirrhosis of liver Diseases 0.000 description 3
- 239000006184 cosolvent Substances 0.000 description 3
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 3
- 238000009826 distribution Methods 0.000 description 3
- 229930003935 flavonoid Natural products 0.000 description 3
- 235000017173 flavonoids Nutrition 0.000 description 3
- 150000002215 flavonoids Chemical class 0.000 description 3
- 231100000283 hepatitis Toxicity 0.000 description 3
- 238000000034 method Methods 0.000 description 3
- 239000003755 preservative agent Substances 0.000 description 3
- 230000002335 preservative effect Effects 0.000 description 3
- 230000008929 regeneration Effects 0.000 description 3
- 238000011069 regeneration method Methods 0.000 description 3
- GHOKWGTUZJEAQD-ZETCQYMHSA-N (D)-(+)-Pantothenic acid Chemical compound OCC(C)(C)[C@@H](O)C(=O)NCCC(O)=O GHOKWGTUZJEAQD-ZETCQYMHSA-N 0.000 description 2
- 208000008964 Chemical and Drug Induced Liver Injury Diseases 0.000 description 2
- 206010008909 Chronic Hepatitis Diseases 0.000 description 2
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N Dimethylsulphoxide Chemical compound CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000006144 Dulbecco’s modified Eagle's medium Substances 0.000 description 2
- 206010016654 Fibrosis Diseases 0.000 description 2
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 description 2
- FXHOOIRPVKKKFG-UHFFFAOYSA-N N,N-Dimethylacetamide Chemical compound CN(C)C(C)=O FXHOOIRPVKKKFG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- SECXISVLQFMRJM-UHFFFAOYSA-N N-Methylpyrrolidone Chemical compound CN1CCCC1=O SECXISVLQFMRJM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N Phosphoric acid Chemical compound OP(O)(O)=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229920002685 Polyoxyl 35CastorOil Polymers 0.000 description 2
- 241000320380 Silybum Species 0.000 description 2
- DRTQHJPVMGBUCF-XVFCMESISA-N Uridine Chemical compound O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1N1C(=O)NC(=O)C=C1 DRTQHJPVMGBUCF-XVFCMESISA-N 0.000 description 2
- 208000027418 Wounds and injury Diseases 0.000 description 2
- FPIPGXGPPPQFEQ-OVSJKPMPSA-N all-trans-retinol Chemical compound OC\C=C(/C)\C=C\C=C(/C)\C=C\C1=C(C)CCCC1(C)C FPIPGXGPPPQFEQ-OVSJKPMPSA-N 0.000 description 2
- 230000002009 allergenic effect Effects 0.000 description 2
- 239000003963 antioxidant agent Substances 0.000 description 2
- 235000006708 antioxidants Nutrition 0.000 description 2
- 230000005540 biological transmission Effects 0.000 description 2
- 230000021615 conjugation Effects 0.000 description 2
- 230000034994 death Effects 0.000 description 2
- 231100000517 death Toxicity 0.000 description 2
- 230000007812 deficiency Effects 0.000 description 2
- XXJWXESWEXIICW-UHFFFAOYSA-N diethylene glycol monoethyl ether Chemical compound CCOCCOCCO XXJWXESWEXIICW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 2
- 230000002209 hydrophobic effect Effects 0.000 description 2
- 208000014674 injury Diseases 0.000 description 2
- 239000008101 lactose Substances 0.000 description 2
- 230000003902 lesion Effects 0.000 description 2
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 2
- 230000004060 metabolic process Effects 0.000 description 2
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N methyl cyanide Natural products CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000000771 oncological effect Effects 0.000 description 2
- PXQPEWDEAKTCGB-UHFFFAOYSA-N orotic acid Chemical compound OC(=O)C1=CC(=O)NC(=O)N1 PXQPEWDEAKTCGB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000036542 oxidative stress Effects 0.000 description 2
- QUANRIQJNFHVEU-UHFFFAOYSA-N oxirane;propane-1,2,3-triol Chemical compound C1CO1.OCC(O)CO QUANRIQJNFHVEU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000007170 pathology Effects 0.000 description 2
- 150000003904 phospholipids Chemical class 0.000 description 2
- 239000004033 plastic Substances 0.000 description 2
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 2
- 230000004044 response Effects 0.000 description 2
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 2
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 2
- 239000003053 toxin Substances 0.000 description 2
- 231100000765 toxin Toxicity 0.000 description 2
- 108700012359 toxins Proteins 0.000 description 2
- 230000035899 viability Effects 0.000 description 2
- 229940088594 vitamin Drugs 0.000 description 2
- 239000011782 vitamin Substances 0.000 description 2
- 229930003231 vitamin Natural products 0.000 description 2
- 235000013343 vitamin Nutrition 0.000 description 2
- GVJHHUAWPYXKBD-IEOSBIPESA-N α-tocopherol Chemical compound OC1=C(C)C(C)=C2O[C@@](CCC[C@H](C)CCC[C@H](C)CCCC(C)C)(C)CCC2=C1C GVJHHUAWPYXKBD-IEOSBIPESA-N 0.000 description 2
- PFTAWBLQPZVEMU-DZGCQCFKSA-N (+)-catechin Chemical compound C1([C@H]2OC3=CC(O)=CC(O)=C3C[C@@H]2O)=CC=C(O)C(O)=C1 PFTAWBLQPZVEMU-DZGCQCFKSA-N 0.000 description 1
- UHDGCWIWMRVCDJ-UHFFFAOYSA-N 1-beta-D-Xylofuranosyl-NH-Cytosine Natural products O=C1N=C(N)C=CN1C1C(O)C(O)C(CO)O1 UHDGCWIWMRVCDJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FPIPGXGPPPQFEQ-UHFFFAOYSA-N 13-cis retinol Natural products OCC=C(C)C=CC=C(C)C=CC1=C(C)CCCC1(C)C FPIPGXGPPPQFEQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- JVKUCNQGESRUCL-UHFFFAOYSA-N 2-Hydroxyethyl 12-hydroxyoctadecanoate Chemical compound CCCCCCC(O)CCCCCCCCCCC(=O)OCCO JVKUCNQGESRUCL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- PXRKCOCTEMYUEG-UHFFFAOYSA-N 5-aminoisoindole-1,3-dione Chemical compound NC1=CC=C2C(=O)NC(=O)C2=C1 PXRKCOCTEMYUEG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ZGZLYKUHYXFIIO-UHFFFAOYSA-N 5-nitro-2h-tetrazole Chemical compound [O-][N+](=O)C=1N=NNN=1 ZGZLYKUHYXFIIO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N Alpha-Lactose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)O[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N 0.000 description 1
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 1
- BHPQYMZQTOCNFJ-UHFFFAOYSA-N Calcium cation Chemical compound [Ca+2] BHPQYMZQTOCNFJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010008428 Chemical poisoning Diseases 0.000 description 1
- GHOKWGTUZJEAQD-UHFFFAOYSA-N Chick antidermatitis factor Natural products OCC(C)(C)C(O)C(=O)NCCC(O)=O GHOKWGTUZJEAQD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000015943 Coeliac disease Diseases 0.000 description 1
- UHDGCWIWMRVCDJ-PSQAKQOGSA-N Cytidine Natural products O=C1N=C(N)C=CN1[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](CO)O1 UHDGCWIWMRVCDJ-PSQAKQOGSA-N 0.000 description 1
- 102000004127 Cytokines Human genes 0.000 description 1
- 108090000695 Cytokines Proteins 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N D-Glucitol Natural products OC[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N 0.000 description 1
- 206010012735 Diarrhoea Diseases 0.000 description 1
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 1
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000009180 Flamin Substances 0.000 description 1
- 208000027472 Galactosemias Diseases 0.000 description 1
- 208000012895 Gastric disease Diseases 0.000 description 1
- CEAZRRDELHUEMR-URQXQFDESA-N Gentamicin Chemical compound O1[C@H](C(C)NC)CC[C@@H](N)[C@H]1O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O[C@@H]2[C@@H]([C@@H](NC)[C@@](C)(O)CO2)O)[C@H](N)C[C@@H]1N CEAZRRDELHUEMR-URQXQFDESA-N 0.000 description 1
- 229930182566 Gentamicin Natural products 0.000 description 1
- 206010019233 Headaches Diseases 0.000 description 1
- 206010019663 Hepatic failure Diseases 0.000 description 1
- 206010019708 Hepatic steatosis Diseases 0.000 description 1
- 206010019799 Hepatitis viral Diseases 0.000 description 1
- FDQAOULAVFHKBX-UHFFFAOYSA-N Isosilybin A Natural products C1=C(O)C(OC)=CC(C2C(OC3=CC(=CC=C3O2)C2C(C(=O)C3=C(O)C=C(O)C=C3O2)O)CO)=C1 FDQAOULAVFHKBX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- CYGIJEJDYJOUAN-UHFFFAOYSA-N Isosilychristin Natural products C1=C(O)C(OC)=CC(C2C3C=C(C4C(C3=O)(O)OCC42)C2C(C(=O)C3=C(O)C=C(O)C=C3O2)O)=C1 CYGIJEJDYJOUAN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000013878 L-cysteine Nutrition 0.000 description 1
- 239000004201 L-cysteine Substances 0.000 description 1
- ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N L-glutamine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N 0.000 description 1
- 229930182816 L-glutamine Natural products 0.000 description 1
- FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N L-methionine Chemical compound CSCC[C@H](N)C(O)=O FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- 241000408529 Libra Species 0.000 description 1
- 206010067125 Liver injury Diseases 0.000 description 1
- YPIQVCUJEKAZCP-UHFFFAOYSA-N Malotilate Chemical compound CC(C)OC(=O)C(C(=O)OC(C)C)=C1SC=CS1 YPIQVCUJEKAZCP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 description 1
- MYGVPKMVGSXPCQ-JEDNCBNOSA-N Methylmethionine sulfonium salt Chemical compound [Cl-].C[S+](C)CC[C@H](N)C(O)=O MYGVPKMVGSXPCQ-JEDNCBNOSA-N 0.000 description 1
- 229930182555 Penicillin Natural products 0.000 description 1
- JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N Penicillin G Chemical compound N([C@H]1[C@H]2SC([C@@H](N2C1=O)C(O)=O)(C)C)C(=O)CC1=CC=CC=C1 JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N 0.000 description 1
- 229920002690 Polyoxyl 40 HydrogenatedCastorOil Polymers 0.000 description 1
- 244000272459 Silybum marianum Species 0.000 description 1
- 229920001304 Solutol HS 15 Polymers 0.000 description 1
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 description 1
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 1
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 1
- 102000004142 Trypsin Human genes 0.000 description 1
- 108090000631 Trypsin Proteins 0.000 description 1
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 1
- 238000000862 absorption spectrum Methods 0.000 description 1
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 1
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 1
- 229940087168 alpha tocopherol Drugs 0.000 description 1
- 229910000147 aluminium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 description 1
- 229940088710 antibiotic agent Drugs 0.000 description 1
- 230000003078 antioxidant effect Effects 0.000 description 1
- 230000006907 apoptotic process Effects 0.000 description 1
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 1
- 239000012298 atmosphere Substances 0.000 description 1
- 235000019445 benzyl alcohol Nutrition 0.000 description 1
- DRTQHJPVMGBUCF-PSQAKQOGSA-N beta-L-uridine Natural products O[C@H]1[C@@H](O)[C@H](CO)O[C@@H]1N1C(=O)NC(=O)C=C1 DRTQHJPVMGBUCF-PSQAKQOGSA-N 0.000 description 1
- 239000013060 biological fluid Substances 0.000 description 1
- 239000012620 biological material Substances 0.000 description 1
- 229910001424 calcium ion Inorganic materials 0.000 description 1
- 229960003144 calcium pangamate Drugs 0.000 description 1
- JWLAOERSRUNGEF-JQVJEGKNSA-L calcium;(2r,3s,4r,5r)-6-[2-(dimethylamino)acetyl]oxy-2,3,4,5-tetrahydroxyhexanoate Chemical compound [Ca+2].CN(C)CC(=O)OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)C([O-])=O.CN(C)CC(=O)OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)C([O-])=O JWLAOERSRUNGEF-JQVJEGKNSA-L 0.000 description 1
- 239000002775 capsule Substances 0.000 description 1
- 210000000170 cell membrane Anatomy 0.000 description 1
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 1
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 1
- 230000007882 cirrhosis Effects 0.000 description 1
- 239000000084 colloidal system Substances 0.000 description 1
- 239000013078 crystal Substances 0.000 description 1
- 210000004748 cultured cell Anatomy 0.000 description 1
- UHDGCWIWMRVCDJ-ZAKLUEHWSA-N cytidine Chemical compound O=C1N=C(N)C=CN1[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](CO)O1 UHDGCWIWMRVCDJ-ZAKLUEHWSA-N 0.000 description 1
- 231100000433 cytotoxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000001472 cytotoxic effect Effects 0.000 description 1
- 230000007850 degeneration Effects 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 1
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 description 1
- LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I dipotassium trisodium dihydrogen phosphate hydrogen phosphate dichloride Chemical compound P(=O)(O)(O)[O-].[K+].P(=O)(O)([O-])[O-].[Na+].[Na+].[Cl-].[K+].[Cl-].[Na+] LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I 0.000 description 1
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 1
- 208000035475 disorder Diseases 0.000 description 1
- 238000004090 dissolution Methods 0.000 description 1
- 239000008298 dragée Substances 0.000 description 1
- 238000001493 electron microscopy Methods 0.000 description 1
- 239000003480 eluent Substances 0.000 description 1
- 239000000284 extract Substances 0.000 description 1
- 239000012091 fetal bovine serum Substances 0.000 description 1
- 230000004761 fibrosis Effects 0.000 description 1
- 230000005714 functional activity Effects 0.000 description 1
- 210000001035 gastrointestinal tract Anatomy 0.000 description 1
- 229960002518 gentamicin Drugs 0.000 description 1
- 208000005594 glucose-galactose malabsorption Diseases 0.000 description 1
- 235000011187 glycerol Nutrition 0.000 description 1
- 239000008187 granular material Substances 0.000 description 1
- 231100000869 headache Toxicity 0.000 description 1
- 231100000234 hepatic damage Toxicity 0.000 description 1
- 231100000784 hepatotoxin Toxicity 0.000 description 1
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 1
- 230000001771 impaired effect Effects 0.000 description 1
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 1
- 230000035987 intoxication Effects 0.000 description 1
- 231100000566 intoxication Toxicity 0.000 description 1
- FDQAOULAVFHKBX-DBMPWETRSA-N isosilybin Chemical compound C1=C(O)C(OC)=CC(C2C(OC3=CC(=CC=C3O2)[C@@H]2[C@H](C(=O)C3=C(O)C=C(O)C=C3O2)O)CO)=C1 FDQAOULAVFHKBX-DBMPWETRSA-N 0.000 description 1
- 210000003292 kidney cell Anatomy 0.000 description 1
- 201000005264 laryngeal carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 231100000636 lethal dose Toxicity 0.000 description 1
- 230000004322 lipid homeostasis Effects 0.000 description 1
- 230000003859 lipid peroxidation Effects 0.000 description 1
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 238000004811 liquid chromatography Methods 0.000 description 1
- 210000005229 liver cell Anatomy 0.000 description 1
- 231100000832 liver cell necrosis Toxicity 0.000 description 1
- 230000008818 liver damage Effects 0.000 description 1
- 231100000835 liver failure Toxicity 0.000 description 1
- 208000007903 liver failure Diseases 0.000 description 1
- 229950000470 malotilate Drugs 0.000 description 1
- 210000001161 mammalian embryo Anatomy 0.000 description 1
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 1
- 230000010534 mechanism of action Effects 0.000 description 1
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 1
- 229930182817 methionine Natural products 0.000 description 1
- 239000013642 negative control Substances 0.000 description 1
- 239000004006 olive oil Substances 0.000 description 1
- 235000008390 olive oil Nutrition 0.000 description 1
- 230000010494 opalescence Effects 0.000 description 1
- 229960005010 orotic acid Drugs 0.000 description 1
- 230000001151 other effect Effects 0.000 description 1
- 108700024047 pangamic acid Proteins 0.000 description 1
- 239000011713 pantothenic acid Substances 0.000 description 1
- 229940055726 pantothenic acid Drugs 0.000 description 1
- 235000019161 pantothenic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 1
- 230000001717 pathogenic effect Effects 0.000 description 1
- 239000008188 pellet Substances 0.000 description 1
- 230000035515 penetration Effects 0.000 description 1
- 229940049954 penicillin Drugs 0.000 description 1
- 239000002831 pharmacologic agent Substances 0.000 description 1
- 230000000144 pharmacologic effect Effects 0.000 description 1
- 239000002953 phosphate buffered saline Substances 0.000 description 1
- 231100000614 poison Toxicity 0.000 description 1
- 235000010482 polyoxyethylene sorbitan monooleate Nutrition 0.000 description 1
- 150000008442 polyphenolic compounds Chemical class 0.000 description 1
- 235000013824 polyphenols Nutrition 0.000 description 1
- 229920000053 polysorbate 80 Polymers 0.000 description 1
- 239000013641 positive control Substances 0.000 description 1
- 230000008092 positive effect Effects 0.000 description 1
- 230000002035 prolonged effect Effects 0.000 description 1
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 1
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 1
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 1
- HNJBEVLQSNELDL-UHFFFAOYSA-N pyrrolidin-2-one Chemical compound O=C1CCCN1 HNJBEVLQSNELDL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000002994 raw material Substances 0.000 description 1
- 238000011084 recovery Methods 0.000 description 1
- 230000001172 regenerating effect Effects 0.000 description 1
- 230000008439 repair process Effects 0.000 description 1
- 230000000241 respiratory effect Effects 0.000 description 1
- 230000011506 response to oxidative stress Effects 0.000 description 1
- 235000020944 retinol Nutrition 0.000 description 1
- 239000011607 retinol Substances 0.000 description 1
- 229960003471 retinol Drugs 0.000 description 1
- 239000012047 saturated solution Substances 0.000 description 1
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 1
- 230000009919 sequestration Effects 0.000 description 1
- 229950000628 silibinin Drugs 0.000 description 1
- 229950004304 silidianin Drugs 0.000 description 1
- 235000014899 silybin Nutrition 0.000 description 1
- CYGIJEJDYJOUAN-JSGXPVSSSA-N silydianin Chemical compound C1=C(O)C(OC)=CC([C@H]2[C@H]3C=C([C@@H]4[C@@](C3=O)(O)OC[C@@H]42)[C@@H]2[C@H](C(=O)C3=C(O)C=C(O)C=C3O2)O)=C1 CYGIJEJDYJOUAN-JSGXPVSSSA-N 0.000 description 1
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 1
- 239000001509 sodium citrate Substances 0.000 description 1
- NLJMYIDDQXHKNR-UHFFFAOYSA-K sodium citrate Chemical compound O.O.[Na+].[Na+].[Na+].[O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O NLJMYIDDQXHKNR-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 229960001790 sodium citrate Drugs 0.000 description 1
- 235000011083 sodium citrates Nutrition 0.000 description 1
- NTHWMYGWWRZVTN-UHFFFAOYSA-N sodium silicate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-][Si]([O-])=O NTHWMYGWWRZVTN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000000600 sorbitol Substances 0.000 description 1
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 description 1
- 230000006641 stabilisation Effects 0.000 description 1
- 238000011105 stabilization Methods 0.000 description 1
- 239000000021 stimulant Substances 0.000 description 1
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 1
- 208000018556 stomach disease Diseases 0.000 description 1
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 1
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 1
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 1
- 239000004094 surface-active agent Substances 0.000 description 1
- 208000011580 syndromic disease Diseases 0.000 description 1
- 230000002195 synergetic effect Effects 0.000 description 1
- 150000003573 thiols Chemical class 0.000 description 1
- 229960000984 tocofersolan Drugs 0.000 description 1
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 description 1
- 231100000816 toxic dose Toxicity 0.000 description 1
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 description 1
- 239000003440 toxic substance Substances 0.000 description 1
- 231100000419 toxicity Toxicity 0.000 description 1
- 230000001988 toxicity Effects 0.000 description 1
- 230000002110 toxicologic effect Effects 0.000 description 1
- 231100000027 toxicology Toxicity 0.000 description 1
- 238000012546 transfer Methods 0.000 description 1
- 230000001052 transient effect Effects 0.000 description 1
- 230000005945 translocation Effects 0.000 description 1
- YNJBWRMUSHSURL-UHFFFAOYSA-N trichloroacetic acid Chemical compound OC(=O)C(Cl)(Cl)Cl YNJBWRMUSHSURL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000012588 trypsin Substances 0.000 description 1
- DRTQHJPVMGBUCF-UHFFFAOYSA-N uracil arabinoside Natural products OC1C(O)C(CO)OC1N1C(=O)NC(=O)C=C1 DRTQHJPVMGBUCF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940045145 uridine Drugs 0.000 description 1
- 201000001862 viral hepatitis Diseases 0.000 description 1
- 229940100445 wheat starch Drugs 0.000 description 1
- 239000002676 xenobiotic agent Substances 0.000 description 1
- 230000002034 xenobiotic effect Effects 0.000 description 1
- 239000002076 α-tocopherol Substances 0.000 description 1
- 235000004835 α-tocopherol Nutrition 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/095—Sulfur, selenium, or tellurium compounds, e.g. thiols
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
- A61K36/18—Magnoliophyta (angiosperms)
- A61K36/185—Magnoliopsida (dicotyledons)
- A61K36/28—Asteraceae or Compositae (Aster or Sunflower family), e.g. chamomile, feverfew, yarrow or echinacea
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/02—Inorganic compounds
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
- A61K47/08—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite containing oxygen, e.g. ethers, acetals, ketones, quinones, aldehydes, peroxides
- A61K47/12—Carboxylic acids; Salts or anhydrides thereof
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
- A61K47/16—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite containing nitrogen, e.g. nitro-, nitroso-, azo-compounds, nitriles, cyanates
- A61K47/18—Amines; Amides; Ureas; Quaternary ammonium compounds; Amino acids; Oligopeptides having up to five amino acids
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
- A61K47/22—Heterocyclic compounds, e.g. ascorbic acid, tocopherol or pyrrolidones
-
- B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
- B82—NANOTECHNOLOGY
- B82B—NANOSTRUCTURES FORMED BY MANIPULATION OF INDIVIDUAL ATOMS, MOLECULES, OR LIMITED COLLECTIONS OF ATOMS OR MOLECULES AS DISCRETE UNITS; MANUFACTURE OR TREATMENT THEREOF
- B82B1/00—Nanostructures formed by manipulation of individual atoms or molecules, or limited collections of atoms or molecules as discrete units
Landscapes
- Medicinal Preparation (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
Abstract
Description
Изобретение относится к области фармацевтики и может быть использовано при лечении заболеваний печени различного генеза как в человеческой, так и ветеринарной медицине.The invention relates to the field of pharmaceuticals and can be used in the treatment of liver diseases of various origins in both human and veterinary medicine.
Гепатопротекторные средства предназначены для нормализации функции и метаболизма печени при ее поражениях, ускорения регенерации и восстановления функциональной активности гепатоцитов. Они находят применение для патогенетической терапии острых, хронических гепатитов, а также цирроза печени и жирового гепатоза токсической, лекарственной и алкогольной этиологии. Менее эффективны гепатопротекторные препараты при вирусном гепатите.Hepatoprotective agents are intended to normalize the function and metabolism of the liver during its lesions, accelerate the regeneration and restore the functional activity of hepatocytes. They find application for the pathogenetic therapy of acute, chronic hepatitis, as well as liver cirrhosis and fatty hepatosis of toxic, drug and alcohol etiology. Hepatoprotective drugs with viral hepatitis are less effective.
Фармакологические средства, оказывающие положительное влияние на гепатоциты при патологии печени, подразделяются по механизму действия на несколько основных групп. Первую группу представляют антиоксиданты - растительные полифенолы (легалон, силибор, катерген, фламин, конвафлавин), витамины (α-токоферол, ретинол, пантотеновая кислота, витогепат), тиолы (цистеин, N-ацетилцестиин, малотилат). Во вторую группу входят средства, осуществляющие репарацию мембран гепатоцитов (препараты фосфолипидов - эсенциале, липостабил). Третью группу представляют стимуляторы регенерации паренхимы печени (кальция пангамат, метилметионинсульфония хлорид, метионин, уридин, цитидин, оротовая кислота). Таким образом, круг веществ с гепатозащитными свойствами достаточно велик, однако в соответствии с современной классификацией лекарственных средств из их числа выделяют сравнительно небольшую группу гепатопротекторов, обладающих избирательным терапевтическим влиянием на печень. К ним относят препараты, содержащие в качестве активных компонентов вещества флавоноидной природы (силимарин, катерген и другие) («Руководство по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ» // под общ. ред. Члена-корреспондента РАМН, профессора ред. Р.У. Хабриева. - М.: ОАО «Издательство «Медицина», 2005, - 832 с.).Pharmacological agents that have a positive effect on hepatocytes in liver pathology are divided according to the mechanism of action into several main groups. The first group is represented by antioxidants - plant polyphenols (legalon, silibor, katergen, flamin, konvaflavin), vitamins (α-tocopherol, retinol, pantothenic acid, vitohepat), thiols (cysteine, N-acetylcestiene, malotilate). The second group includes agents that repair the membranes of hepatocytes (preparations of phospholipids - esentiale, lipostabil). The third group is represented by stimulants of regeneration of the liver parenchyma (calcium pangamate, methyl methionine sulfonium chloride, methionine, uridine, cytidine, orotic acid). Thus, the range of substances with hepatoprotective properties is quite large, however, in accordance with the current classification of drugs, a relatively small group of hepatoprotectors with a selective therapeutic effect on the liver are distinguished from among them. These include preparations containing flavonoid substances (silymarin, catergen, and others) as active components (“Guidelines for the experimental (preclinical) study of new pharmacological substances” // Ed. By the corresponding member of the Russian Academy of Medical Sciences, Professor Ed. R. U. Khabrieva. - M.: OJSC "Publishing House" Medicine ", 2005, - 832 p.).
Широко применяемый во многих странах мира силимарин, представляющий собой смесь различных флавоноидов (силибинин, силикристин, силидианин, изосилибинин и дегидросилибинин), выделяемых из лекарственного сырья расторопши пятнистой (Silybummarianum), является активным компонентом многих препаратов, используемых для профилактики и лечения заболеваний печени.Widely used in many countries of the world, silymarin, which is a mixture of various flavonoids (silibinin, silikristin, silidianin, isosilibinin and dehydrosilibinin), extracted from medicinal raw materials of Milk Thistle (Silybummarianum), is an active component of many drugs used to prevent and treat liver diseases.
Сложность терапевтического применения субстанции силимарина связана с ее низкой растворимостью в воде и в биологических жидкостях, что затрудняет разработку инъекционных препаратов на ее основе. Поэтому известные лекарственные препараты на основе силимарина выпускаются, как правило, в виде таблеток, гранул, драже или капсул, которые предназначены для перорального введения. Они обладают недостаточной биодоступностью и низкой терапевтической активностью вследствие малой скорости высвобождения и низкой всасываемости в желудочно-кишечном тракте, а также наличием различного рода побочных эффектов.The complexity of the therapeutic use of the substance silymarin is associated with its low solubility in water and biological fluids, which complicates the development of injectable drugs based on it. Therefore, known drugs based on silymarin are available, as a rule, in the form of tablets, granules, dragees or capsules, which are intended for oral administration. They have insufficient bioavailability and low therapeutic activity due to the low release rate and low absorption in the gastrointestinal tract, as well as the presence of various kinds of side effects.
Из таблетированных форм силимарина наиболее известен препарат «Карсил» (синонимы: Левасил, Гепарсил, Легалон, Силибор, Силимарин Гексал) - см. Машковский М.Д. Лекарственные средства. - М., издание пятнадцатое, Новая волна, 2005, т. 1. с. 526-527), который согласно инструкции предупреждает разрушение клеточных мембран печени и нормализует обмен веществ, стимулирует синтез белков, а также фосфолипидов (особенных сложных липидов, содержащих в себе остаток фосфорной кислоты), необходимых для восстановления гепатоцитов, препятствует проникновению в клетки печени токсинов (сайт Интернет: http://carsil.ru/, 2017 г.). Однако при применении «Карсила», содержащего в своем составе помимо силимарина лактозу и сахарозу, необходимо соблюдать осторожность при назначении его пациентам с галактоземией, недостаточностью лактозы, синдромом мальабсорбции глюкозы-галактозы, глюкозо-изомальтозным дефицитом. Входящие в состав препарата другие компоненты могут также оказать негативное воздействие на организм: сорбитол может вызывать расстройство стула и гастропатию, пшеничный крахмал опасен для больных целиакией, глицерин может вызывать головную боль и диарею (см. Григорьев П.Я. и др. Диагностика и лечение хронического гепатита и цирроза печени. - Советская медицина, 1985, No 12, с. 61-67 или Блинков И.Л. и др. Опыт клинического применения гепатопротективного средства Легалон. Симпозиум «Клиническое значение препарата Легалон». – М., 1981, с 113-123). Аналогичным препаратом является «Дарсил» (ДАРСИЛ® Инструкция по применению, ресурсы Интернет http://compendium.com.ua/info/83070/darsil-sup-sup-, 2017 г.) Данный препарат является дженериком своего предшественника «Карсила» и обладает теми же нежелательными последствиями.Of the tabletted forms of silymarin, the most famous drug is Karsil (synonyms: Levasil, Heparsil, Legalon, Silibor, Silymarin Geksal) - see Mashkovsky M.D. Medicines - M., fifteenth edition, New Wave, 2005, v. 1. p. 526-527), which according to the instructions prevents the destruction of the cell membranes of the liver and normalizes metabolism, stimulates the synthesis of proteins, as well as phospholipids (special complex lipids containing the remainder of phosphoric acid), necessary for the restoration of hepatocytes, prevents the penetration of toxins into liver cells ( Internet site: http://carsil.ru/, 2017). However, when using Karsil, which contains lactose and sucrose in addition to silymarin, care must be taken when prescribing it to patients with galactosemia, lactose deficiency, glucose-galactose malabsorption syndrome, glucose-isomaltose deficiency. Other components that are part of the drug can also have a negative effect on the body: sorbitol can cause stool disorder and gastropathy, wheat starch is dangerous for patients with celiac disease, glycerin can cause headache and diarrhea (see P.Ya. Grigoryev and others. Diagnosis and treatment chronic hepatitis and cirrhosis of the liver. - Soviet medicine, 1985, No. 12, pp. 61-67 or Blinkov I.L. et al. Experience of the clinical use of the hepatoprotective agent Legalon. Symposium "Clinical significance of the drug Legalon." - M., 1981, from 113-123). A similar drug is Darsil (DARSIL® Instructions for use, Internet resources http://compendium.com.ua/info/83070/darsil-sup-sup-, 2017) This drug is a generic of its predecessor Karsil and has the same undesirable consequences.
Известны стабильные растворы флавоноидов, в том числе содержащие силимарин, используемые в препаратах для наружного применения при лечении дерматологических заболеваний (патент США US 2010227826 от 09.09.2010 г., MercierMichel F.). Однако для их растворения в данных композициях используются органические растворители в дозах, не приемлемых для инъекционного применения.Stable solutions of flavonoids are known, including those containing silymarin used in preparations for external use in the treatment of dermatological diseases (US patent US 2010227826 from 09.09.2010, MercierMichel F.). However, for their dissolution in these compositions, organic solvents are used in doses that are not acceptable for injection use.
Известна инъекционная лекарственная форма для лечения и профилактики заболеваний печени у животных (прототип - патент на изобретение РФ №2504347, опубликован 20.01.2014 г.), содержащая силимарин (гидрофобные экстракты расторопши пятнистой), органический растворитель, солюбилизатор, консервант и сорастворитель при следующем соотношении компонентов, мас. %: силимарин - 1-10, органический растворитель - 5-50, солюбилизатор - 3-30, консервант - 0,01-1, сорастворитель - остальное. При этом указанная лекарственная форма содержит: в качестве органического растворителя – диметилацетамид, или 1-метил-2-пирролидон, или солюфор Р, или транскутол, или пропиленгликоль, или этиленгликоль, или глицероформаль, или диметилсульфоксид; в качестве солюбилизатора - кремофор EL или кремофор ELP, или кремофор RH40, или твин 80, или солютол HS15; в качестве консерванта - бензиловый спирт или парабены; в качестве сорастворителя -дистиллированную воду или раствор смеси водорастворимых витаминов.Known injectable dosage form for the treatment and prevention of liver diseases in animals (prototype patent for the invention of the Russian Federation No. 2504347, published January 20, 2014) containing silymarin (hydrophobic extracts of milk thistle), an organic solvent, solubilizer, preservative and cosolvent in the following ratio components, wt. %: silymarin - 1-10, organic solvent - 5-50, solubilizer - 3-30, preservative - 0.01-1, co-solvent - the rest. Moreover, the specified dosage form contains: as an organic solvent, dimethylacetamide, or 1-methyl-2-pyrrolidone, or solufor P, or transcutol, or propylene glycol, or ethylene glycol, or glyceroformal, or dimethyl sulfoxide; as a solubilizer, Cremophor EL or Cremophor ELP, or Cremophor RH40, or Tween 80, or Solutol HS15; benzyl alcohol or parabens as a preservative; as a co-solvent, distilled water or a solution of a mixture of water-soluble vitamins.
Основным недостатком данной лекарственной формы является то, что она представляет собой водную дисперсию (мицелярная форма), которую формируют такие фармацевтические субстанции, как органические растворители, применяемые для растворения гидрофобного активного вещества силимарина (диметилацетамид, 1-метил-2-пирролидон, солюфор P (2-пирролидон), транскутол, пропиленгликоль и др.), и солюбилизаторы, используемые для стабилизации дисперсии (кремофор EL, или кремофор ELP и др.). Однако указанные растворители, входящие в состав дисперсии, несмотря на то, что являются фармакопейными, представляют собой токсичные вещества, которые ограничивают применение препарата в связи с тем, что не у всех млекопитающих есть переносимость к данным компонентам. Введение в препарат солюбилизаторов приводит к повышению аллергенной активности препарата, что так же ограничивает спектр его применения. Кроме того, сама дисперсия обладает довольно низкой стабильностью в отношении активного вещества силимарина, концентрация которого в препарате напрямую зависит от его растворимости в органическом растворителе.The main disadvantage of this dosage form is that it is an aqueous dispersion (micellar form), which is formed by pharmaceutical substances such as organic solvents used to dissolve the hydrophobic active substance silymarin (dimethylacetamide, 1-methyl-2-pyrrolidone, solufor P ( 2-pyrrolidone), transcutol, propylene glycol, etc.), and solubilizers used to stabilize the dispersion (Cremophor EL, or Cremophor ELP, etc.). However, these solvents, which are part of the dispersion, despite the fact that they are pharmacopeia, are toxic substances that limit the use of the drug due to the fact that not all mammals have tolerance to these components. The introduction of solubilizers into the drug leads to an increase in the allergenic activity of the drug, which also limits the spectrum of its use. In addition, the dispersion itself has a rather low stability with respect to the active substance of silymarin, the concentration of which in the preparation directly depends on its solubility in an organic solvent.
Таким образом, проблема повышения эффективности терапевтического действия препаратов на основе силимарина с инъекционным введением в настоящее время остается актуальной.Thus, the problem of increasing the effectiveness of the therapeutic effect of drugs based on silymarin with injection is currently relevant.
Техническим результатом заявляемого изобретения является повышение терапевтической активности и биодоступности фармацевтической композиции на основе силимарина, снижение побочных эффектов данного лекарственного препарата при терапевтических манипуляциях.The technical result of the claimed invention is to increase the therapeutic activity and bioavailability of a pharmaceutical composition based on silymarin, to reduce the side effects of this drug during therapeutic manipulations.
Технический результат достигается тем, что гепатопротекторная инъекционная фармацевтическая композиция на основе силимарина и наночастиц селена содержит силимарин, дистиллированную воду и согласно изобретению дополнительно содержит наночастицы селена, восстановленные из селенистой кислоты с образованием коллоидного селена, при этом в качестве восстановителя для коллоидного селена используют цистеин, или аскорбиновую кислоту, или тиосульфат натрия, или меркаптоэтанол, кроме того, содержит в качестве стабилизатора рН гидроксид натрия, или гидроксид калия, или аргинин, кроме того, содержит стабилизатор для силимарина, в качестве которого используют янтарную, или фумаровую, или яблочную, или лимонную, или щавелевую кислоту, при следующем соотношении компонентов, масс. %:The technical result is achieved in that the hepatoprotective injection pharmaceutical composition based on silymarin and selenium nanoparticles contains silymarin, distilled water, and according to the invention further comprises selenium nanoparticles reduced from selenic acid to form colloidal selenium, using cysteine as a reducing agent for colloidal selenium, or ascorbic acid, or sodium thiosulfate, or mercaptoethanol, in addition, contains sodium hydroxide as a stabilizer Ia or potassium hydroxide, or arginine, in addition, contain a stabilizer to silymarin, which is used as succinic or fumaric acid, or malic acid, or citric acid, or oxalic acid, with the following component ratio, wt. %:
Новым является то, что введение в активно действующее вещество «силимарин» наночастиц селена впервые предложено для повышения терапевтической активности патентуемого лекарственного препарата, при этом сочетание наночастиц селена и силимарина вызывает усиление гепатопротекторного эффекта за счет синергизма данных ингредиентов. Повышение биодоступности данной композиции и снижение ее побочных эффектов при терапевтических манипуляциях осуществлено за счет разработки стабильной водорастворимой субстанции силимарина (инъекционной формы силимарина) без использования органических растворителей и солюбилизаторов. В результате синтеза препарата происходит восстановление наночастиц селена из селенистой кислоты благодаря восстановителю для коллоидного селена, в качестве которого используют цистеин, или аскорбиновую кислоту, или тиосульфат натрия, или меркаптоэтанол. Образующиеся наночастицы селена создают комплекс с силимарином, который остается стабильным в водной среде при подобранной авторами изобретения оптимальной концентрациии стабилизатора и рН, равным 8,3-8,8.It is new that the introduction of selenium nanoparticles into the active substance “silymarin” was first proposed to increase the therapeutic activity of the patented drug, while the combination of selenium and silymarin nanoparticles causes an increase in the hepatoprotective effect due to the synergism of these ingredients. Increasing the bioavailability of this composition and reducing its side effects during therapeutic manipulations was achieved by developing a stable water-soluble substance of silymarin (injectable form of silymarin) without the use of organic solvents and solubilizers. As a result of the synthesis of the drug, selenium nanoparticles are reduced from selenic acid due to a reducing agent for colloidal selenium, which is used as cysteine, or ascorbic acid, or sodium thiosulfate, or mercaptoethanol. The resulting selenium nanoparticles create a complex with silymarin, which remains stable in the aquatic environment at the optimum stabilizer concentration and pH selected by the inventors and a pH of 8.3-8.8.
На фиг. 1 изображены: а - гистограмма распределения размера наночастиц селена, измеренного методом динамического рассеяния света (ДРС) в патентуемой гепатопротекторной инъекционной фармацевтической композиции, б - фотография, полученная с использованием трансмиссионного электронного микроскопа, на которой показано электронно-микроскопическое изображение распределения наночастиц селена в патентуемой фармкомпозиции. На фиг. 2 изображена гистограмма, отражающая концентрации глутатиона, определенные в печени мышей в экспериментальных группах. На фиг. 3 изображена гистограмма, отражающая концентрации формазана, определенные в отношении онкологических линий клеток: а - SPEV-2, б - Нер-2 (вертикальные штрихи означают доверительные интервалы для среднеарифметических при уровне значимости 95%).In FIG. 1 shows: a is a histogram of the size distribution of selenium nanoparticles measured by dynamic light scattering (DLS) in a patented hepatoprotective injection pharmaceutical composition, b is a photograph obtained using a transmission electron microscope, which shows an electron microscopic image of the distribution of selenium nanoparticles in a patented pharmaceutical composition . In FIG. Figure 2 shows a histogram showing the concentration of glutathione determined in the liver of mice in the experimental groups. In FIG. Figure 3 shows a histogram showing the concentrations of formazan determined in relation to oncological cell lines: a - SPEV-2, b - Hep-2 (vertical bars indicate confidence intervals for arithmetic mean values at a significance level of 95%).
Способ получения патентуемой фармацевтической композиции состоит в следующем. В дистиллированной воде объемом 60 мл растворяют 0,4-2,0 г гидроксида натрия (NaOH), или гидроксида калия (KОН), или аргинина, используемого в качестве стабилизатора рН, затем вносят навеску стабилизатора для силимарина, в качестве которого используют янтарную, или фумаровую, или яблочную, или лимонную, или щавелевую кислоту, в количестве 0,4-2,0 г, тщательно перемешивают до полного растворения кислоты. В полученный раствор вносят навеску силимарина в количестве 0,5-3 г, перемешивают до полного растворения. Далее готовят навеску, содержащую 0,01-0,1 г селенистой кислоты, которую растворяют в 10 мл дистиллированой воды и вносят в реакционную смесь, тщательно перемешивают и измеряют рН, который должен быть в интервале 8,3-8,8 (при необходимости доводят рН до требуемого значения стабилизатором рН). Объем раствора доводят до 90 мл дистиллированой водой и при перемешивании приливают 10 мл водного раствора, содержащего 0,05-0,4 г восстановителя для коллоидного селена, в качестве которого используют цистеин, или аскорбиновую кислоту, или тиосульфат натрия, или меркаптоэтанол. После завершения реакции образовавшийся коллоидный раствор разливают по флаконам и лиофильно высушивают.A method of obtaining a patentable pharmaceutical composition is as follows. In distilled water with a volume of 60 ml, 0.4-2.0 g of sodium hydroxide (NaOH), or potassium hydroxide (KOH), or arginine, used as a pH stabilizer, is dissolved, then a weighed stabilizer for silymarin is used, which is used as amber. or fumaric, or malic, or citric, or oxalic acid, in an amount of 0.4-2.0 g, are thoroughly mixed until the acid is completely dissolved. In the resulting solution make a weighed sample of silymarin in an amount of 0.5-3 g, mix until completely dissolved. Next, prepare a sample containing 0.01-0.1 g of selenic acid, which is dissolved in 10 ml of distilled water and introduced into the reaction mixture, mixed thoroughly and the pH is measured, which should be in the range of 8.3-8.8 (if necessary adjust the pH to the desired value with a pH stabilizer). The volume of the solution was adjusted to 90 ml with distilled water, and 10 ml of an aqueous solution containing 0.05-0.4 g of a reducing agent for colloidal selenium, which used cysteine, or ascorbic acid, or sodium thiosulfate, or mercaptoethanol, was poured with stirring. After completion of the reaction, the resulting colloidal solution is poured into vials and freeze-dried.
Селен в патентуемой фармацевтической композиции находится в наноразмерном состоянии, что подтверждено путем электронного микроскопирования. Диаметр d синтезированных наночастиц определяли с использованием трансмиссионного электронного микроскопа Libra 120 (CarlZeiss, Germany) и методом динамического рассеяния света (ДРС) на анализаторе ZetasizerNano-ZS (Malvern, UK), как описано в работе (KhlebtsovN.G., DykmanL.A. OpticalpropertiesandbiomedicalapplicationSofplasm Onicnanoparticles.J. Quant. Spectrosc. Radiat. Transfer, 2010, 111: 1-35 (doi:10.1016/j.jqsrt.2009.07.012). На фиг. 1(a) с приведенной гистограммой распределения размера наночастиц селена в патентуемой фармкомпозиции, измеренного методом динамического рассеяния света (ДРС), показано, что по результатам метода ДРС размер 97% всех наночастиц селена в фармкомпозиции находится в пределах d~16-44 нм. Следует отметить, что полученная взвесь конъюгата селеновых наночастиц с силимарином, приобретая красно-коричневую окраску и становясь прозрачной с отсутствием видимой опалесценции, в течение длительного времени сохраняет стабильность: после хранения при 15°C-45°C в течение восьми недель раствор не имеет видимого осадка. Таким образом, достигнутая стабилизация коллоидной взвеси селена силимарином сопровождается увеличением ее степени дисперсности (уменьшением значений d), характерным для коллоидных систем подобного типа, что подтверждается также результатами электронно-микроскопических наблюдений (фиг. 1б).Selenium in the patented pharmaceutical composition is in a nanoscale state, as confirmed by electron microscopy. The diameter d of the synthesized nanoparticles was determined using a Libra 120 transmission electron microscope (CarlZeiss, Germany) and dynamic light scattering (DLS) on a ZetasizerNano-ZS analyzer (Malvern, UK), as described in (KhlebtsovN.G., Dykman L.A. OpticalpropertiesandbiomedicalapplicationSofplasm Onicnanoparticles.J. Quant. Spectrosc. Radiat. Transfer, 2010, 111: 1-35 (doi: 10.1016 / j.jqsrt.2009.07.012). Fig. 1 (a) shows a histogram of the size distribution of selenium nanoparticles in the patented pharmaceutical composition measured by dynamic light scattering (DLS), it is shown that according to the results of the DLS method, the size is 97% x selenium nanoparticles in the pharmaceutical composition is in the range of d ~ 16-44 nm.It should be noted that the suspension of the conjugate of selenium nanoparticles with silymarin, acquiring a red-brown color and becoming transparent with no visible opalescence, remains stable for a long time: after storage at 15 ° C-45 ° C for eight weeks, the solution has no visible precipitate. Thus, the achieved stabilization of the colloidal suspension of selenium with silymarin is accompanied by an increase in its degree of dispersion (a decrease in d values) characteristic of colloidal systems of this type, which is also confirmed by the results of electron microscopic observations (Fig. 1b).
Определение концентрации силимарина как основного активного (действующего) вещества в конечном препарате проводили методом высокоэффективной жидкостной хроматографии. Хроматографический анализ выполняли на жидкостном хроматографе «Стайер» (ЗАО «Аквилон», Россия) с использованием спектрофотометрического детектора А288. Для разделения компонентов использовали колонку OnixMonolithic С 18 производства ЗАО «Аквилон» по лицензии фирмы MerckKGaA (Германия) (Скорость потока - 0,9 см3/мин; Элюэнт - ацетонитрил «для жидкостной хроматографии» - 1% раствор уксусной кислоты в соотношении 2:3 по объему). Результаты показали, что активное вещество в препарате в процессе синтеза не разрушалось и концентрация силимарина составляла 0,5-3 масс. %, что соответствовало его концентрации в препарате.The concentration of silymarin as the main active (active) substance in the final preparation was determined by high performance liquid chromatography. Chromatographic analysis was performed on a Stayer liquid chromatograph (ZAO Akvilon, Russia) using an A288 spectrophotometric detector. For separation of the components, a OnixMonolithic C 18 column manufactured by ZAO Akvilon was licensed by MerckKGaA (Germany) (Flow rate - 0.9 cm 3 / min; Eluent - acetonitrile “for liquid chromatography” - 1% acetic acid solution in the ratio 2: 3 by volume). The results showed that the active substance in the preparation was not destroyed during the synthesis and the concentration of silymarin was 0.5-3 mass. %, which corresponded to its concentration in the drug.
Введение в фармкомпозицию силимарина в концентрации ниже чем 0,5 масс. % приводит к тому, что в результате нехватки силимарина в реакционной смеси происходит образование избытка незащищенных частиц селена и селен выпадает в осадок в виде аморфного селена. Введение в фармкомпозицию силимарина в концентрации выше чем 3 масс. % приводит к тому, что данная концентрация силимарина близка к насыщенному раствору, начальный раствор не стабилен и силимарин выпадает в осадок. Введение в фармкомпозицию селенистой кислоты в концентрации ниже чем 0,01 масс. % приводит к тому, что при синтезе фармкомпозиции в результате нехватки наночастиц образуется осадок несвязавшегося силимарина. Введение в фармкомпозицию селенистой кислоты в концентрации выше чем 0,1 масс. % приводит к тому, что при синтезе фармкомпозиции происходит выпадение красного осадка аморфного селена. Введение в фармкомпозицию восстановителя для коллоидного селена в концентрации ниже чем 0,05 масс. % приводит к тому, что в процессе реакции в связи с нехваткой восстановителя образуется осадок из смеси силимарина и аморфного селена. Введение в фармкомпозицию восстановителя для коллоидного селена в концентрации выше чем 0,4 масс. %, восстановитель в процессе реакции выпадает в осадок в виде белых кристаллов. Введение в фармкомпозицию стабилизатора рН в концентрации ниже чем 0,4 масс. % приводит к тому, что при изменении баланса стабилизатора РН и стабилизатора для силимарина изменяется рН реакционной смеси, при этом в данном случае происходит увеличение рН более 8,8 с образованием аморфного селена. Введение в фармкомпозицию стабилизатора рН в концентрации выше чем 2,0 масс. % приводит к тому, что при изменении баланса стабилизатора РН и стабилизатора для силимарина изменяется рН реакционной смеси, при этом в данном случае происходит снижение рН ниже 8,3 и выпадает в осадок силимарин.Introduction to the pharmaceutical composition of silymarin in a concentration lower than 0.5 mass. % leads to the fact that as a result of the lack of silymarin in the reaction mixture, an excess of unprotected particles of selenium is formed and selenium precipitates in the form of amorphous selenium. Introduction to the pharmaceutical composition of silymarin in a concentration higher than 3 mass. % leads to the fact that this concentration of silymarin is close to a saturated solution, the initial solution is not stable and silymarin precipitates. Introduction to the pharmaceutical composition of selenic acid in a concentration lower than 0.01 mass. % leads to the fact that in the synthesis of the pharmaceutical composition as a result of a lack of nanoparticles, a precipitate of unbound silymarin is formed. Introduction to the pharmaceutical composition of selenic acid in a concentration higher than 0.1 mass. % leads to the fact that during the synthesis of the pharmaceutical composition, a red precipitate of amorphous selenium occurs. Introduction to the pharmaceutical composition of a reducing agent for colloidal selenium in a concentration lower than 0.05 mass. % leads to the fact that during the reaction due to the lack of a reducing agent, a precipitate is formed from a mixture of silymarin and amorphous selenium. Introduction to the pharmaceutical composition of a reducing agent for colloidal selenium in a concentration higher than 0.4 mass. %, the reducing agent during the reaction precipitates in the form of white crystals. Introduction to the pharmaceutical composition of a pH stabilizer in a concentration lower than 0.4 mass. % leads to the fact that when the balance between the pH stabilizer and the stabilizer for silymarin changes, the pH of the reaction mixture changes, in this case, an increase in pH of more than 8.8 occurs with the formation of amorphous selenium. Introduction to the pharmaceutical composition of a pH stabilizer in a concentration higher than 2.0 mass. % leads to the fact that when changing the balance between the pH stabilizer and the stabilizer for silymarin, the pH of the reaction mixture changes, in this case, the pH drops below 8.3 and the silymarin precipitates.
Для определения гепатопротекторных свойств патентуемой фармацевтической композиции на основе силимарина и наночастиц селена была изучена его эффективность при лечении экспериментального гепатита в сравнении с препаратом-прототипом. При проведении эксперимента было сформировано 4 группы экспериментальных животных (белые нелинейные мыши) по 10 голов в каждой (таблица 1). Для моделирования экспериментального поражения печени был использован четыреххлористый углерод как эффективный токсикологический агент (Slater T.F. (1981) Activation of carbontetrachloride: chemical principles and biological significance. In: McBrien D.C.H., Slater T.F. (Eds.), Free Radicals, Lipid Peroxidation and Cancer, Academic Press, London, pp. 243-270.; Renner H. (1985) The limited relevance of models used for testing human hepatic diseases and their prevention. In: Keppler E., Popper H., Bianchi L., and Reutter W. (Eds.), Mechanisms of Hepatocyte Injury and Death, MTP Press Ltd., Lancaster, pp. 311-320.), который, в зависимости от дозы, продолжительности воздействия, или времени наблюдения, вызывает множество эффектов, которые в целом являются токсичными и обозначаются общим термином CCl4. При низких дозах четыреххлористого углерода преобладают переходные эффекты, такие как потеря ионов кальция клетками (Са2 + секвестр), нарушение липидного гомеостаза, выделение цитокинов и апоптоз, с последующей регенерацией. Другие эффекты, которые связаны, с более высокими дозами четыреххлористого углерода или его длительным воздействием, вызывают жировую дистрофию, фиброз, цирроз печени, а в ряде случаев рак. Кроме того, в остротоксичных дозах, когда некроз клеток печени превышает ее регенеративную способность, происходит летальная печеночная недостаточность (Berger L.M., Bhatt H., Combes B., and Estabrock R.W. (1986) CCl4-induced toxicity in isolated hepatocytes: The importance of direct solvent injury. Hepatology 6: 36-45).To determine the hepatoprotective properties of the patented pharmaceutical composition based on silymarin and selenium nanoparticles, its effectiveness in the treatment of experimental hepatitis in comparison with the prototype preparation was studied. During the experiment, 4 groups of experimental animals were formed (white non-linear mice) with 10 animals each (table 1). To model experimental liver damage, carbon tetrachloride was used as an effective toxicological agent (Slater TF (1981) Activation of carbontetrachloride: chemical principles and biological significance. In: McBrien DCH, Slater TF (Eds.), Free Radicals, Lipid Peroxidation and Cancer, Academic Press, London, pp. 243-270 .; Renner H. (1985) The limited relevance of models used for testing human hepatic diseases and their prevention. In: Keppler E., Popper H., Bianchi L., and Reutter W. (Eds.), Mechanisms of Hepatocyte Injury and Death, MTP Press Ltd., Lancaster, pp. 311-320.), Which, depending on the dose, duration of exposure, or time of observation, causes many effects, which in general are xy and are denoted by the general term CCl 4 . At low doses of carbon tetrachloride, transient effects predominate, such as loss of calcium ions by cells (Ca2 + sequestration), impaired lipid homeostasis, release of cytokines and apoptosis, followed by regeneration. Other effects that are associated with higher doses of carbon tetrachloride or its prolonged exposure cause fatty degeneration, fibrosis, liver cirrhosis, and in some cases cancer. In addition, in acute toxic doses, when liver cell necrosis exceeds its regenerative capacity, fatal liver failure occurs (Berger LM, Bhatt H., Combes B., and Estabrock RW (1986) CCl4-induced toxicity in isolated hepatocytes: The importance of direct solvent injury. Hepatology 6: 36-45).
Объем четыреххлористого углерода для провокации острого токсического гепатита в группах экспериментальных животных вводили в 1/16 от летальной дозы. При этом мышам в 1-3 группах внутрибрюшинно вводили 50% раствор четыреххлористого углерода на оливковом масле в объеме 1,22 мл/кг живой массы. Эксперимент проводили в течение 14 дней. Лечение животных 1-й группы не проводили (положительный контроль). Второй группе животных проводили терапию гепатита с использованием патентуемой фармкомпозиции в значении компонентов по примеру 1. Препарат вводили ежедневно со второго по тринадцатый день. Третьей группе животных проводили терапию гепатита препаратом-прототипом, уравновешенным по концентрации силимарина с патентуемой фармкомпозицией, применяемой во второй группе. Препарат вводили со второго дня ежедневно до конца эксперимента. Четвертой группе - фоновой - инъекции с четыреххлористым углеродом и препаратом с силимарином не проводились (отрицательный контроль, условно здоровые животные).The volume of carbon tetrachloride for the provocation of acute toxic hepatitis in groups of experimental animals was administered at 1/16 of the lethal dose. At the same time, mice in groups 1-3 were intraperitoneally injected with a 50% solution of carbon tetrachloride in olive oil in a volume of 1.22 ml / kg of live weight. The experiment was carried out for 14 days.
В ходе изучения гепатопротекторных свойств патентуемой фармацевтической композиции на модели острого токсического гепатита выявлено, что смертность лабораторных животных за 14 дней эксперимента составила в первой группе 80%, во второй 10%, в третьей группе - 40% и в четвертой (фоновой) признаков интоксикации и гибели животных не отмечалось (таблица 1).In the course of studying the hepatoprotective properties of the patented pharmaceutical composition on the model of acute toxic hepatitis, it was found that the mortality of laboratory animals for 14 days of the experiment was 80% in the first group, 10% in the second, 40% in the third group and signs of intoxication in the fourth (background) and no deaths were observed (table 1).
Через 14 суток после начала эксперимента осуществляли умерщвление животных в экспериментальных группах методом транслокации шейных позвонков с последующим взятием биологических материалов, в которых определяли концентрацию глутатиона. Глутатион является одним из основных антиоксидантов в гепатоцитах печени. Он защищает гепатоциты от свободных радикалов и в целом определяет их окислительно-восстановительный потенциал. Соотношение восстановленной и окисленной форм глутатиона в клетке является одним из важнейших параметров, который показывает уровень окислительного стресса. Поэтому уровень глутатиона в печени прямо пропорционален ее способности противостоять окислительному стрессу (способности нейтрализовать токсины).14 days after the start of the experiment, animals were killed in the experimental groups by cervical vertebra translocation followed by biological materials in which the concentration of glutathione was determined. Glutathione is one of the main antioxidants in liver hepatocytes. It protects hepatocytes from free radicals and generally determines their redox potential. The ratio of reduced and oxidized forms of glutathione in the cell is one of the most important parameters that shows the level of oxidative stress. Therefore, the level of glutathione in the liver is directly proportional to its ability to withstand oxidative stress (the ability to neutralize toxins).
Для определения концентрации глутатиона печень извлекали и гомогенизировали в 10% трихлоруксусной кислоте из расчета 10 мл на 1 г печени. Взвесь печени центрифугировали при 3000 об/мин в течение 15 минут. К 500 мкл супернатанта добавляли 2 мл 0.3 М раствора Na2HPO4*2H2O и 200 мкл 5,50 -dithiobis (2-nitrobenzoic acid) в 1% sodiumcitrate (0.4 mg/mL). Спектр поглощения измеряли при 412 нм, на спектрофотометре Genesis 10S-UV-VIS (USA). В качестве стандарта использовали глутатион (Sigma).To determine the concentration of glutathione, the liver was removed and homogenized in 10% trichloroacetic acid at the rate of 10 ml per 1 g of liver. A suspension of the liver was centrifuged at 3000 rpm for 15 minutes. To 500 μl of the supernatant was added 2 ml of a 0.3 M solution of Na 2 HPO 4 * 2H 2 O and 200 μl of 5.50 -dithiobis (2-nitrobenzoic acid) in 1% sodiumcitrate (0.4 mg / mL). The absorption spectrum was measured at 412 nm using a Genesis 10S-UV-VIS spectrophotometer (USA). Glutathione (Sigma) was used as a standard.
При анализе концентрации глутатиона в печени через 14 суток после начала эксперимента (фиг. 2) выявлено, что его концентрация резко снижается в группе 1, не получающей лечение. Данный факт указывает на закономерное истощение глутатиона в ответ на окислительный стресс, вызванный введением гепатотоксина. Вместе с этим, во 2-й и 3-й группах мышей, которым применяли препараты с силимарином, концентрация глутатиона была достоверно выше, и находилась на одном уровне с интактными животными 4-й группы. Это объясняется тем, что силимарин, входящий в состав препаратов, обладает ярко выраженными антиоксидантными свойствами и препятствует истощению глутатиона в гепатоцитах в ответ на воздействие данного ксенобиотика. Таким образом, в ходе эксперимента показано, что концентрация глутатиона как одного из основных токсиннейтрализующих компонентов печени у условно здоровых животных является более высокой по сравнению с животными, имеющими поражения печени, при лечении которых препаратами с силимарином уровень глутатиона возрастает по мере выздоровления. При этом, как видно на фиг. 2, эффективность патентуемой фармкомпозиции является более высокой по сравнению с препаратом-прототипом. Проведенные исследования подтвердили гепатопротекторные свойства патентуемой фармкомпозиции при острой патологии печени, вызванной токсическим действием четыреххлористого углерода.When analyzing the concentration of glutathione in the liver 14 days after the start of the experiment (Fig. 2), it was found that its concentration decreases sharply in
Помимо исследований, подтверждающих гепатопротекторные свойства патентуемой фармкомпозиции, были проведены эксперименты по изучению ее эффективности в отношении онкологических линий клеток. Исследования проводились с использованием клеточных культур SPEV-2 (клетки почки эмбриона свиньи, несущие онковирусы) и Нер-2 (клетки карциномы гортани). В отношении каждой из указанных клеточных культур SPEV-2 и Нер-2 эксперименты проводили следующим образом. Клетки выращивали в пластиковых матрасах на среде Игла, модифицированной по способу Дульбекко (DMEM) (Biologicallndustries, Израиль), содержащей L-глутамин, 15 mMHEPES, 10% фетальной коровьей сыворотки и антибиотики (20 мкг пенициллина с активностью 1000000 ед. и 25 мкл гентамицина с активностью 1000 ед. на 100 мл среды). Культивирование проводили в СО2-инкубаторе при температуре 37°C в атмосфере, содержащей 5% СО2. Клетки отделяли от пластика обработкой раствором Трипсин/Версена при температуре 37°C в течение 10-15 мин, затем осаждали центрифугированием при 900 g в течение 20 мин. Осадок ресуспендировали в фосфатно-солевом буфере при рН 7,2-7,4 и повторно центрифугировали при указанном выше режиме. После ресуспендирования клеток в полной DMEM их вносили в лунки культурального планшета при концентрации 1×105 клеток на лунку. Затем в лунки одного культурального планшета (1) вносили патентуемую фармкомпозицию в дозе 8 мкг по силимарину на лунку. Для сравнения активности патентуемого препарата с его основой в лунки другого культурального планшета (2) вносили исходные селеновые наночастицы (исходный коллоидный раствор селена, раствор наночастиц селена), которые получали добавлением к 67 мл раствора селенистой кислоты 40 мл раствора L-цистеина, полученная взвесь при этом приобретала красно-коричневую окраску. В лунки третьего культурального планшета (3) вносили препарат-прототип, уравновешенный по концентрации силимарина с патентуемой фармкомпозицией, применяемой в культуральном планшете (1). Лунки четвертого культурального планшета (4) содержали клетки, культивированные без внесения препарата с силимарином (контроль). Жизнеспособность культивируемых клеток определяли по их способности восстанавливать нитротетразолевый синий до формазана в тесте МТТ с определением концентрации формазана. Как показано на фиг. 3 (а и б), в результате проведенной работы было установлено, что внесение к клеточным культурам патентуемой фармкомпозиции приводило к уменьшению дыхательной активности клеток, что выявляется в снижении концентрации формазана на 55,6% у клеток линии SPEV-2 (фиг. 3а). Более интенсивная ответная реакция на введение патентуемой фармкомпозиции наблюдалась у клеток линии Нер-2 (фиг. 3б) - препарат вызывал уменьшение количества жизнеспособных клеток (концентрации формазана) на 84,6%, притом что раствор наночастиц селена снижал этот показатель у данной линии только на 34,6%. Учитывая полученные результаты, усиление цитотоксического действия при конъюгации селеновых наночастиц с силимарином в патентуемой фармкомпозиции можно объяснить синергетическим эффектом в результате конъюгирования этих компонентов.In addition to studies confirming the hepatoprotective properties of the patented pharmaceutical composition, experiments were conducted to study its effectiveness in relation to oncological cell lines. Studies were performed using cell cultures of SPEV-2 (kidney cells of a pig embryo bearing oncoviruses) and Hep-2 (cells of the laryngeal carcinoma). For each of these cell cultures, SPEV-2 and Hep-2 experiments were performed as follows. Cells were grown in plastic mattresses on an Eagle medium modified by the Dulbecco method (DMEM) (Biologicallndustries, Israel) containing L-glutamine, 15 mMHEPES, 10% fetal bovine serum and antibiotics (20 μg of penicillin with an activity of 1,000,000 units and 25 μl of gentamicin with an activity of 1000 units per 100 ml of medium). Cultivation was carried out in a CO 2 incubator at a temperature of 37 ° C in an atmosphere containing 5% CO 2 . Cells were separated from plastic by treatment with Trypsin / Versen solution at a temperature of 37 ° C for 10-15 min, then they were besieged by centrifugation at 900 g for 20 min. The pellet was resuspended in phosphate-buffered saline at pH 7.2-7.4 and centrifuged again under the above conditions. After resuspending the cells in complete DMEM, they were introduced into the wells of the culture plate at a concentration of 1 × 10 5 cells per well. Then, a patentable pharmaceutical composition was introduced into the wells of one culture plate (1) at a dose of 8 μg per silymarin per well. To compare the activity of the patented preparation with its base, the source selenium nanoparticles (the initial colloidal solution of selenium, the solution of selenium nanoparticles) were added to the wells of another culture tablet (2), which were obtained by adding to 67 ml of selenic acid solution 40 ml of L-cysteine solution, obtained by suspension this acquired a red-brown color. The prototype preparation, balanced by the concentration of silymarin with the patented pharmaceutical composition used in the culture tablet (1), was introduced into the wells of the third culture tablet (3). Wells of the fourth culture plate (4) contained cells cultured without application of the drug with silymarin (control). The viability of cultured cells was determined by their ability to restore nitrotetrazole blue to formazan in the MTT test with the determination of the concentration of formazan. As shown in FIG. 3 (a and b), as a result of the work carried out, it was found that the introduction of a patentable pharmaceutical composition to cell cultures led to a decrease in the respiratory activity of cells, which is revealed in a decrease in the concentration of formazan by 55.6% in cells of the SPEV-2 line (Fig. 3a) . A more intense response to the introduction of a patented pharmaceutical composition was observed in Hep-2 cells (Fig. 3b) - the drug caused a decrease in the number of viable cells (formazan concentration) by 84.6%, while a solution of selenium nanoparticles reduced this indicator only by 34.6%. Given the results obtained, the enhancement of the cytotoxic effect upon conjugation of selenium nanoparticles with silymarin in the patented pharmaceutical composition can be explained by the synergistic effect as a result of conjugation of these components.
Опираясь на полученные результаты, можно отметить, что разработанная лекарственная форма обладает ярко выраженными гепатопротекторными свойствами и по терапевтической эффективности превосходит известные препараты. Кроме того, отсутствие поверхностно-активных веществ в разработанной фармацевтической композиции снижает аллергенную реакцию препарата и делает его более безопасным по сравнению с препаратами-аналогами. Кроме того, патентуемая фармкомпозиция эффективна в отношении снижения жизнеспособности онкологических линий клеток.Based on the results obtained, it can be noted that the developed dosage form has pronounced hepatoprotective properties and surpasses known drugs in therapeutic effectiveness. In addition, the absence of surfactants in the developed pharmaceutical composition reduces the allergenic reaction of the drug and makes it safer compared to analogues. In addition, the patented pharmaceutical composition is effective in reducing the viability of cancer cell lines.
Claims (2)
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2017135394A RU2645092C1 (en) | 2017-10-05 | 2017-10-05 | Hepatoprotective injection pharmaceutical composition on the basis of silimarine and nanoparticles of selenium |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2017135394A RU2645092C1 (en) | 2017-10-05 | 2017-10-05 | Hepatoprotective injection pharmaceutical composition on the basis of silimarine and nanoparticles of selenium |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2645092C1 true RU2645092C1 (en) | 2018-02-15 |
Family
ID=61226972
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2017135394A RU2645092C1 (en) | 2017-10-05 | 2017-10-05 | Hepatoprotective injection pharmaceutical composition on the basis of silimarine and nanoparticles of selenium |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2645092C1 (en) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2800150C2 (en) * | 2021-12-16 | 2023-07-19 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Саратовский государственный университет генетики, биотехнологии и инженерии имени Н.И. Вавилова" | Injectable dosage form for the treatment and prevention of liver diseases in animals |
Citations (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US20100227826A1 (en) * | 2005-12-07 | 2010-09-09 | Mercier Michel F | Stable Flavonoid Solutions |
| RU2504347C1 (en) * | 2012-09-21 | 2014-01-20 | Общество с ограниченной ответственностью "Научно-внедренческий центр Агроветзащита" | Injection drug form for treatment and prevention of liver diseases in animals |
| RU2557992C1 (en) * | 2013-12-30 | 2015-07-27 | Федеральное государственное бюджетное учреждение науки Иркутский институт химии им. А.Е. Фаворского Сибирского отделения Российской академии наук | Antioxidant agent of nanostructured selenium with hepatoprotective effect and methods for producing and using it |
| WO2016149685A1 (en) * | 2015-03-19 | 2016-09-22 | Cydex Pharmaceuticals, Inc. | Compositions containing silymarin and sulfoalkyl ether cyclodextrin and methods of using the same |
| WO2017011471A1 (en) * | 2015-07-15 | 2017-01-19 | Unigen, Inc. | Compositions, methods, and medical compositions for treatment of and maintaining the health of the liver |
-
2017
- 2017-10-05 RU RU2017135394A patent/RU2645092C1/en not_active IP Right Cessation
Patent Citations (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US20100227826A1 (en) * | 2005-12-07 | 2010-09-09 | Mercier Michel F | Stable Flavonoid Solutions |
| RU2504347C1 (en) * | 2012-09-21 | 2014-01-20 | Общество с ограниченной ответственностью "Научно-внедренческий центр Агроветзащита" | Injection drug form for treatment and prevention of liver diseases in animals |
| RU2557992C1 (en) * | 2013-12-30 | 2015-07-27 | Федеральное государственное бюджетное учреждение науки Иркутский институт химии им. А.Е. Фаворского Сибирского отделения Российской академии наук | Antioxidant agent of nanostructured selenium with hepatoprotective effect and methods for producing and using it |
| WO2016149685A1 (en) * | 2015-03-19 | 2016-09-22 | Cydex Pharmaceuticals, Inc. | Compositions containing silymarin and sulfoalkyl ether cyclodextrin and methods of using the same |
| WO2017011471A1 (en) * | 2015-07-15 | 2017-01-19 | Unigen, Inc. | Compositions, methods, and medical compositions for treatment of and maintaining the health of the liver |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2800150C2 (en) * | 2021-12-16 | 2023-07-19 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Саратовский государственный университет генетики, биотехнологии и инженерии имени Н.И. Вавилова" | Injectable dosage form for the treatment and prevention of liver diseases in animals |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN111787910B (en) | Oral pharmaceutical formulation comprising cannabinoid and poloxamer | |
| CN111757729B (en) | Modified release compositions comprising cannabinoids | |
| ES2704439T3 (en) | Compositions comprising monoglycerides of polyunsaturated fatty acids or derivatives thereof and uses thereof | |
| BR112021001406A2 (en) | solid self-emulsifying pharmaceutical compositions | |
| Mukhtar et al. | Hepatoprotective activity of silymarin encapsulation against hepatic damage in albino rats | |
| RU2462250C2 (en) | New composition of cholest-4-en-3-one oxime | |
| CA3025702C (en) | Stable cannabinoid formulations | |
| PT1901734E (en) | Compositions comprising crystalline trans-(+/-)-delta-9-tetrahydrocannabinol | |
| CN104337859B (en) | A kind of licorice flavonoid self-microemulsion composition and preparation method thereof | |
| JP2013508312A (en) | Taxane pharmaceutical solution containing pH regulator and method for producing the same | |
| JP2022176377A (en) | Formulation of resiniferatoxin | |
| CN101703468A (en) | Nano-emulsion of vitamin E oil and preparation method thereof | |
| JP2017533970A (en) | Stable solid lipid particle composition for improved bioavailability of fat soluble compounds for age-related diseases | |
| RU2645092C1 (en) | Hepatoprotective injection pharmaceutical composition on the basis of silimarine and nanoparticles of selenium | |
| KR102758107B1 (en) | Liquid formulation containing phenol and apocynin | |
| RU2504347C1 (en) | Injection drug form for treatment and prevention of liver diseases in animals | |
| JP2016034918A (en) | Composition for delivery of poorly water-soluble antioxidant substance | |
| CN105267187A (en) | Medicinal composition for treating fatty liver and preparation method and application thereof | |
| CN104771360B (en) | A kind of Artemether nanoemulsion drug combination and preparation method thereof | |
| US20230263732A1 (en) | Compositions comprising quillaja extract and methods of preparations and use thereof | |
| US11622947B2 (en) | Compositions comprising quillaja extract and methods of preparations and use thereof | |
| RU2684111C1 (en) | Method for preparing medicine with methionine and turmeric extract in granular type with intestinal sustainable coating of system action | |
| BR112019011748A2 (en) | manufacturing process for preparing a solid powder composition, solid powder composition, pharmaceutical, nutraceutical and cosmetic formulations and use of solid powder composition and pharmaceutical, nutraceutical and cosmetic formulations | |
| CN103830322B (en) | Soft capsule containing salvia miltiorrhiza extract and preparation method thereof | |
| Hao et al. | Potential benefits of orally deliverable silymarin-loaded spirulina platensis in mitigating alcoholic liver disease |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20191006 |