RU2568365C1 - Способ коррекции эндотелиальной дисфункции комбинацией розувастатина и тиоктовой кислоты при гипоэстроген-l-name-индуцированном дефиците оксида азота - Google Patents

Info

Publication number

RU2568365C1

RU2568365C1 RU2014132712/14A RU2014132712A RU2568365C1 RU 2568365 C1 RU2568365 C1 RU 2568365C1 RU 2014132712/14 A RU2014132712/14 A RU 2014132712/14A RU 2014132712 A RU2014132712 A RU 2014132712A RU 2568365 C1 RU2568365 C1 RU 2568365C1

Authority

RU

Russia

Prior art keywords

name

rosuvastatin

endothelial dysfunction

correction

dysfunction

Prior art date

2014-08-08

Links

• Espacenet
• Global Dossier
• Discuss

• 206010048554 Endothelial dysfunction Diseases 0.000 title claims abstract description 26
• 230000008694 endothelial dysfunction Effects 0.000 title claims abstract description 26
• BPRHUIZQVSMCRT-VEUZHWNKSA-N rosuvastatin Chemical compound CC(C)C1=NC(N(C)S(C)(=O)=O)=NC(C=2C=CC(F)=CC=2)=C1\C=C\[C@@H](O)C[C@@H](O)CC(O)=O BPRHUIZQVSMCRT-VEUZHWNKSA-N 0.000 title claims abstract description 18
• 229960000672 rosuvastatin Drugs 0.000 title claims abstract description 18
• 238000012937 correction Methods 0.000 title claims abstract description 13
• 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 11
• AGBQKNBQESQNJD-SSDOTTSWSA-N (R)-lipoic acid Chemical compound OC(=O)CCCC[C@@H]1CCSS1 AGBQKNBQESQNJD-SSDOTTSWSA-N 0.000 title claims description 10
• AGBQKNBQESQNJD-UHFFFAOYSA-N alpha-Lipoic acid Natural products OC(=O)CCCCC1CCSS1 AGBQKNBQESQNJD-UHFFFAOYSA-N 0.000 title claims description 10
• 235000019136 lipoic acid Nutrition 0.000 title claims description 10
• 229960002663 thioctic acid Drugs 0.000 title claims description 10
• 230000007812 deficiency Effects 0.000 title claims description 4
• KCWZGJVSDFYRIX-YFKPBYRVSA-N N(gamma)-nitro-L-arginine methyl ester Chemical compound COC(=O)[C@@H](N)CCCN=C(N)N[N+]([O-])=O KCWZGJVSDFYRIX-YFKPBYRVSA-N 0.000 claims abstract description 17
• 241000700159 Rattus Species 0.000 claims abstract description 9
• 238000009806 oophorectomy Methods 0.000 claims abstract description 8
• 230000004064 dysfunction Effects 0.000 claims abstract description 7
• 230000002146 bilateral effect Effects 0.000 claims abstract description 4
• MWUXSHHQAYIFBG-UHFFFAOYSA-N Nitric oxide Chemical compound O=[N] MWUXSHHQAYIFBG-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 12
• 241000700157 Rattus norvegicus Species 0.000 claims 1
• 239000007928 intraperitoneal injection Substances 0.000 claims 1
• 238000001356 surgical procedure Methods 0.000 claims 1
• 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 8
• 239000003814 drug Substances 0.000 abstract description 4
• 239000000126 substance Substances 0.000 abstract description 2
• 230000003213 activating effect Effects 0.000 abstract 1
• 230000002980 postoperative effect Effects 0.000 abstract 1
• 229940069308 thioctic acid 50 mg Drugs 0.000 abstract 1
• 230000036772 blood pressure Effects 0.000 description 11
• 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 8
• 230000003078 antioxidant effect Effects 0.000 description 7
• 239000003963 antioxidant agent Substances 0.000 description 6
• 235000006708 antioxidants Nutrition 0.000 description 6
• 230000035487 diastolic blood pressure Effects 0.000 description 6
• 210000003038 endothelium Anatomy 0.000 description 6
• 230000036542 oxidative stress Effects 0.000 description 6
• 239000005526 vasoconstrictor agent Substances 0.000 description 6
• 101800000733 Angiotensin-2 Proteins 0.000 description 5
• 102400000345 Angiotensin-2 Human genes 0.000 description 5
• 229940121710 HMGCoA reductase inhibitor Drugs 0.000 description 5
• CZGUSIXMZVURDU-JZXHSEFVSA-N Ile(5)-angiotensin II Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CC=1NC=NC=1)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C([O-])=O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=[NH2+])NC(=O)[C@@H]([NH3+])CC([O-])=O)C(C)C)C1=CC=C(O)C=C1 CZGUSIXMZVURDU-JZXHSEFVSA-N 0.000 description 5
• 230000035488 systolic blood pressure Effects 0.000 description 5
• 206010020772 Hypertension Diseases 0.000 description 4
• 230000004913 activation Effects 0.000 description 4
• 229950006323 angiotensin ii Drugs 0.000 description 4
• 238000006065 biodegradation reaction Methods 0.000 description 4
• 230000009245 menopause Effects 0.000 description 4
• SFLSHLFXELFNJZ-QMMMGPOBSA-N (-)-norepinephrine Chemical compound NC[C@H](O)C1=CC=C(O)C(O)=C1 SFLSHLFXELFNJZ-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 3
• 102000008299 Nitric Oxide Synthase Human genes 0.000 description 3
• 108010021487 Nitric Oxide Synthase Proteins 0.000 description 3
• OUUQCZGPVNCOIJ-UHFFFAOYSA-M Superoxide Chemical compound [O-][O] OUUQCZGPVNCOIJ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
• OIPILFWXSMYKGL-UHFFFAOYSA-N acetylcholine Chemical compound CC(=O)OCC[N+](C)(C)C OIPILFWXSMYKGL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
• 229960004373 acetylcholine Drugs 0.000 description 3
• 230000009471 action Effects 0.000 description 3
• 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 3
• 238000011161 development Methods 0.000 description 3
• 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 3
• 230000003205 diastolic effect Effects 0.000 description 3
• 150000002535 isoprostanes Chemical class 0.000 description 3
• 229960002748 norepinephrine Drugs 0.000 description 3
• SFLSHLFXELFNJZ-UHFFFAOYSA-N norepinephrine Natural products NCC(O)C1=CC=C(O)C(O)=C1 SFLSHLFXELFNJZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
• 230000024883 vasodilation Effects 0.000 description 3
• IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
• WSMYVTOQOOLQHP-UHFFFAOYSA-N Malondialdehyde Chemical compound O=CCC=O WSMYVTOQOOLQHP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
• 102100028255 Renin Human genes 0.000 description 2
• 108090000783 Renin Proteins 0.000 description 2
• FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
• YEESUBCSWGVPCE-UHFFFAOYSA-N azanylidyneoxidanium iron(2+) pentacyanide Chemical compound [Fe++].[C-]#N.[C-]#N.[C-]#N.[C-]#N.[C-]#N.N#[O+] YEESUBCSWGVPCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
• RNFNDJAIBTYOQL-UHFFFAOYSA-N chloral hydrate Chemical compound OC(O)C(Cl)(Cl)Cl RNFNDJAIBTYOQL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
• 229960002327 chloral hydrate Drugs 0.000 description 2
• 229940079593 drug Drugs 0.000 description 2
• 210000003989 endothelium vascular Anatomy 0.000 description 2
• 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 2
• 244000144993 groups of animals Species 0.000 description 2
• 239000002471 hydroxymethylglutaryl coenzyme A reductase inhibitor Substances 0.000 description 2
• 239000003112 inhibitor Substances 0.000 description 2
• 238000007912 intraperitoneal administration Methods 0.000 description 2
• 229940118019 malondialdehyde Drugs 0.000 description 2
• 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 2
• 229960002460 nitroprusside Drugs 0.000 description 2
• 238000011084 recovery Methods 0.000 description 2
• 239000000523 sample Substances 0.000 description 2
• 230000004936 stimulating effect Effects 0.000 description 2
• 230000002792 vascular Effects 0.000 description 2
• DZUXGQBLFALXCR-UHFFFAOYSA-N (+)-(9alpha,11alpha,13E,15S)-9,11,15-trihydroxyprost-13-en-1-oic acid Natural products CCCCCC(O)C=CC1C(O)CC(O)C1CCCCCCC(O)=O DZUXGQBLFALXCR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
• 206010002091 Anaesthesia Diseases 0.000 description 1
• 108010064733 Angiotensins Proteins 0.000 description 1
• 102000015427 Angiotensins Human genes 0.000 description 1
• 102000004127 Cytokines Human genes 0.000 description 1
• 108090000695 Cytokines Proteins 0.000 description 1
• LCGLNKUTAGEVQW-UHFFFAOYSA-N Dimethyl ether Chemical compound COC LCGLNKUTAGEVQW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
• 102000002045 Endothelin Human genes 0.000 description 1
• 108050009340 Endothelin Proteins 0.000 description 1
• 102100033902 Endothelin-1 Human genes 0.000 description 1
• 101800004490 Endothelin-1 Proteins 0.000 description 1
• 206010015150 Erythema Diseases 0.000 description 1
• DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 description 1
• 206010061218 Inflammation Diseases 0.000 description 1
• 102000004889 Interleukin-6 Human genes 0.000 description 1
• 108090001005 Interleukin-6 Proteins 0.000 description 1
• MRAUNPAHJZDYCK-BYPYZUCNSA-N L-nitroarginine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCCNC(=N)N[N+]([O-])=O MRAUNPAHJZDYCK-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
• 102000004895 Lipoproteins Human genes 0.000 description 1
• 108090001030 Lipoproteins Proteins 0.000 description 1
• 208000019695 Migraine disease Diseases 0.000 description 1
• 108010007843 NADH oxidase Proteins 0.000 description 1
• 108010002998 NADPH Oxidases Proteins 0.000 description 1
• 102000004722 NADPH Oxidases Human genes 0.000 description 1
• 108090000854 Oxidoreductases Proteins 0.000 description 1
• 102000004316 Oxidoreductases Human genes 0.000 description 1
• QNVSXXGDAPORNA-UHFFFAOYSA-N Resveratrol Natural products OC1=CC=CC(C=CC=2C=C(O)C(O)=CC=2)=C1 QNVSXXGDAPORNA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
• LUKBXSAWLPMMSZ-OWOJBTEDSA-N Trans-resveratrol Chemical compound C1=CC(O)=CC=C1\C=C\C1=CC(O)=CC(O)=C1 LUKBXSAWLPMMSZ-OWOJBTEDSA-N 0.000 description 1
• 206010047139 Vasoconstriction Diseases 0.000 description 1
• XJLXINKUBYWONI-DQQFMEOOSA-N [[(2r,3r,4r,5r)-5-(6-aminopurin-9-yl)-3-hydroxy-4-phosphonooxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl] [(2s,3r,4s,5s)-5-(3-carbamoylpyridin-1-ium-1-yl)-3,4-dihydroxyoxolan-2-yl]methyl phosphate Chemical group NC(=O)C1=CC=C[N+]([C@@H]2[C@H]([C@@H](O)[C@H](COP([O-])(=O)OP(O)(=O)OC[C@@H]3[C@H]([C@@H](OP(O)(O)=O)[C@@H](O3)N3C4=NC=NC(N)=C4N=C3)O)O2)O)=C1 XJLXINKUBYWONI-DQQFMEOOSA-N 0.000 description 1
• 210000003815 abdominal wall Anatomy 0.000 description 1
• 230000004075 alteration Effects 0.000 description 1
• 230000037005 anaesthesia Effects 0.000 description 1
• 238000010171 animal model Methods 0.000 description 1
• 208000037849 arterial hypertension Diseases 0.000 description 1
• 210000001367 artery Anatomy 0.000 description 1
• 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 1
• 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 1
• 230000017531 blood circulation Effects 0.000 description 1
• 244000309464 bull Species 0.000 description 1
• 210000001715 carotid artery Anatomy 0.000 description 1
• 230000004663 cell proliferation Effects 0.000 description 1
• 208000029078 coronary artery disease Diseases 0.000 description 1
• 229940066901 crestor Drugs 0.000 description 1
• XEYBHCRIKKKOSS-UHFFFAOYSA-N disodium;azanylidyneoxidanium;iron(2+);pentacyanide Chemical compound [Na+].[Na+].[Fe+2].N#[C-].N#[C-].N#[C-].N#[C-].N#[C-].[O+]#N XEYBHCRIKKKOSS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
• 210000002889 endothelial cell Anatomy 0.000 description 1
• 230000003511 endothelial effect Effects 0.000 description 1
• ZUBDGKVDJUIMQQ-UBFCDGJISA-N endothelin-1 Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(O)=O)NC(=O)[C@H]1NC(=O)[C@H](CC=2C=CC=CC=2)NC(=O)[C@@H](CC=2C=CC(O)=CC=2)NC(=O)[C@H](C(C)C)NC(=O)[C@H]2CSSC[C@@H](C(N[C@H](CO)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N2)=O)NC(=O)[C@@H](CO)NC(=O)[C@H](N)CSSC1)C1=CNC=N1 ZUBDGKVDJUIMQQ-UBFCDGJISA-N 0.000 description 1
• 230000029142 excretion Effects 0.000 description 1
• 210000003191 femoral vein Anatomy 0.000 description 1
• 238000011990 functional testing Methods 0.000 description 1
• 230000004054 inflammatory process Effects 0.000 description 1
• 229940100601 interleukin-6 Drugs 0.000 description 1
• 210000003734 kidney Anatomy 0.000 description 1
• 150000002632 lipids Chemical class 0.000 description 1
• 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 1
• 230000001404 mediated effect Effects 0.000 description 1
• 239000012528 membrane Substances 0.000 description 1
• 239000002207 metabolite Substances 0.000 description 1
• 206010027599 migraine Diseases 0.000 description 1
• 229930027945 nicotinamide-adenine dinucleotide Natural products 0.000 description 1
• BOPGDPNILDQYTO-NNYOXOHSSA-N nicotinamide-adenine dinucleotide Chemical compound C1=CCC(C(=O)N)=CN1[C@H]1[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](COP(O)(=O)OP(O)(=O)OC[C@@H]2[C@H]([C@@H](O)[C@@H](O2)N2C3=NC=NC(N)=C3N=C2)O)O1 BOPGDPNILDQYTO-NNYOXOHSSA-N 0.000 description 1
• 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 1
• 210000001672 ovary Anatomy 0.000 description 1
• 230000008506 pathogenesis Effects 0.000 description 1
• 230000001717 pathogenic effect Effects 0.000 description 1
• 238000005502 peroxidation Methods 0.000 description 1
• 239000002831 pharmacologic agent Substances 0.000 description 1
• 230000000144 pharmacologic effect Effects 0.000 description 1
• 238000001050 pharmacotherapy Methods 0.000 description 1
• 230000036470 plasma concentration Effects 0.000 description 1
• 230000004983 pleiotropic effect Effects 0.000 description 1
• 238000012545 processing Methods 0.000 description 1
• 230000000770 proinflammatory effect Effects 0.000 description 1
• 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 1
• 230000036454 renin-angiotensin system Effects 0.000 description 1
• 238000011160 research Methods 0.000 description 1
• 235000021283 resveratrol Nutrition 0.000 description 1
• 229940016667 resveratrol Drugs 0.000 description 1
• LALFOYNTGMUKGG-BGRFNVSISA-L rosuvastatin calcium Chemical compound [Ca+2].CC(C)C1=NC(N(C)S(C)(=O)=O)=NC(C=2C=CC(F)=CC=2)=C1\C=C\[C@@H](O)C[C@@H](O)CC([O-])=O.CC(C)C1=NC(N(C)S(C)(=O)=O)=NC(C=2C=CC(F)=CC=2)=C1\C=C\[C@@H](O)C[C@@H](O)CC([O-])=O LALFOYNTGMUKGG-BGRFNVSISA-L 0.000 description 1
• 238000009097 single-agent therapy Methods 0.000 description 1
• 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 1
• 239000011734 sodium Substances 0.000 description 1
• 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 1
• 229940083618 sodium nitroprusside Drugs 0.000 description 1
• 239000003356 suture material Substances 0.000 description 1
• 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 1
• 238000012360 testing method Methods 0.000 description 1
• 230000006442 vascular tone Effects 0.000 description 1
• 230000025033 vasoconstriction Effects 0.000 description 1
• 230000000304 vasodilatating effect Effects 0.000 description 1
• 230000001457 vasomotor Effects 0.000 description 1
• 238000005303 weighing Methods 0.000 description 1

Description

Изобретение относится к медицине, в частности к экспериментальной кардиофармакологии, и может быть использовано для коррекции эндотелиальной дисфункции.

Известен способ коррекции эндотелиальной дисфункции с помощью розувастатина, относящегося к статинам, описанный Е.И. Красильниковой, Е.М. Нифонтовым, Е.Г. Сергеевой, Т.В. Антоновой, А.А. Жлоба, О.В. Галкиной, М.А. Романовой «Показатели адгезионной дисфункции эндотелия и факторы иммунного воспаления у больных гипертонической болезнью в сочетании с ишемической болезнью сердца: динамика на фоне терапии Крестором». Артериальная гипертензия - 2009.- Т.15.- №3.- с.268-274, который заключается в пероральном приеме этого препарата у больных для коррекции эндотелиальной дисфункции.

Основным недостатком известного способа является более узкая патогенетическая направленность действия розувастатина при эндотелиальной дисфункции, связанная с его плейотропными эффектами, в частности снижением уровня провоспалительного цитокина - интерлейкина-6, который ассоциируется с развитием эндотелиальной дисфункции, в то время как одна из причин - повышенная биодеградация оксида азота в результате перекисного окисления остается некомпенсированной. Кроме того, в используемой модели гипоэстроген-L-NAME идуцированного дефицита NO развитие эндотелиальной дисфункции связано не только с повышенной биодеградацией, но и с уменьшением биодоступности оксида азота в результате повышения окислительного стресса на фоне гипоэстрогении. Установлено, что у женщин в период менопаузы имеется множество факторов, которые могут играть важную роль в стимуляции окислительного стресса. Одним из таких факторов является активность ренина в плазме (АРП) и, соответственно, активность ренин-ангиотензиновой системы (РАС). В исследованиях James и сотр., в которых АРП измерялась в динамике на протяжении 9 лет у мужчин и женщин, уровни АРП были выше у женщин после менопаузы, чем до менопаузы (James GD, Sealey JE, Muller F et al. Renin Relationship to Sex, Race and Age in Normotensive Population. J Hypertension 1986; 4(Suppl 5): S387-S389). Ангиотензин-2, вводимый как в высоких (Rajagopalan S, Kerry S, Munzel T et al. Angiotensin ll-mediated hypertension in the ratincreases vascular superoxide production via membrane NADH/NADPH oxidase activation. Contribution to alterations of vasomotor tone. J Clin Invest 1996; 97: 1916-1923), так и в физиологических дозах (Reckelhoff JF, Zhang H, Srivastava К et ai. Subpressor doses of angiotensin II increases-plasma F2-isoprostanes in rats. Hypertension 2000; 35: 476-479), способен стимулировать окислительный стресс, о чем свидетельствует повышение плазменных уровней Р2-изопростанов. Кроме того, исследования показали, что Р2-изопростан, помимо того, что он сам является почечным вазоконстриктором (Yura T, Fukunaga M, Kahn R et al. Free-radical-generated F2-isoprostane stimulates cell-proliferation and endothelin-1 expression in endothelial cells. Kidney Int 1999; 56: 471-478), усиливает сосудосуживающее действие АТ2 (Sametz W, Grobuschek T, Hammer-Kogler S et al. Influence of Isoprostanes on Vasoconstrictor Effects of Noradrenaline and Angiotensin II. Eur J Pharm 1999; 378:47-55). Оба вещества - АТ2 и эндотелин - повышают синтез супероксида посредством стимуляции субъединиц НАДФ (Н) оксидазы (Sametz W, Grobuschek T, Hammer-Kogler S et al. Influence of Isoprostanes on Vasoconstrictor Effects of Noradrenaline and Angiotensin II. Eur J Pharm 1999; 378:47-55). Супероксид соединяется с оксидом азота (N0), что приводит к подавлению его биологической активности (т. е. вазодилатации) (Sametz W, Grobuschek T, Hammer-Kogler S et al. Influence of Isoprostanes on Vasoconstrictor Effects of Noradrenaline and Angiotensin II. Eur J Pharm 1999; 378:47-55), в связи с чем уменьшение биодоступности NO способно привести к вазоконстрикции и увеличению уровня АД. Кроме того, о повышении активности окислительного стресса, о чем свидетельствуют высокие уровни не только Р2-изопростана, но и малондиальдегида в плазме (маркеры окислительного стресса) (Helmersson J, Mattsson P, Basu S. Prostaglandin F (2alpha) metabolite and F2-isoprostane excretion in migraine. Clin Sci (Lond) 2002; 102:39-43), (Signorelli SS, Neri S, Sciacchitano S et al. Duration of menopause and behavior of mal-ondialdehyde, lipids, lipoproteins and carotid wall artery intima-media thickness. Maturitas 2001; 39: 39-42).

Следовательно, монотерапия эндотелиальной дисфункции розувастатином рассматривается как недостаточная, так как не воздействует на звенья патогенеза эндотелиальной дисфункции, связанные с активацией окислительного стресса, и обуславливает поиск более эффективных способов фармакотерапии, одним из которых является сочетание розувастатина с антиоксидантом.

Наиболее близким к заявленному решению является способ коррекции эндотелиальной дисфункции при L-NAME - индуцированном дефиците оксида азота, включающий моделирование эндотелиальной дисфункции ежедневным в течение 7 суток внутрибрюшинным введением L-нитро-аргинин-метилового эфира крысам-самцам линии Wistar в дозе 25 мг/кг и одновременное проведение коррекции дисфункции комбинацией статина и антиоксиданта (RU №2438188 С1, публ. 27.12.2011).

Основным недостатком способа является отсутствие у резвератрола действия, улучшающего ангионевральный кровоток, являющегося одним из механизмов эндотелиопротективного действия.

Техническим результатом предлагаемого изобретения является способ коррекции эндотелиальной дисфункции, включающий использование розувастатина, относящегося к статинам, и тиоктовой кислоты, обладающей антиоксидантной активностью.

Технический результат достигается тем, что моделирование эндотелиальной дисфункции ежедневным в течение 7 суток внутрибрюшинным введением L-нитро-аргинин-метилового эфира крысам-самкам линии Wistar в дозе 25 мг/кг осуществляют с одновременным проведением коррекции дисфункции комбинацией статина и антиоксиданта, причем при моделировании эндотелиальной дисфункции дополнительно в течение 6 недель формируют гипоэстрогенное состояние путем проведения билатеральной овариэктомии, а в качестве статина используют розувастатин, который вводят внутрижелудочно однократно в сутки в дозе 0,85 мг/кг, а в качестве антиоксиданта используют тиоктовую кислоту, которую вводят совместно с розувастатином в дозе 50 мг/кг, оценивая при этом степень коррекции эндотелиальной дисфункции по соотношению эндотелийзависимой и эндотелийнезависимой вазодилатации.

Дополнительное введение тиоктовой кислоты приводит к активизации коррекции эндотелиальной дисфункции, так как она является антиоксидантом и предотвращает биодеградацию оксида азота в сосудистом эндотелии свободными радикалами.

СПОСОБ ОСУЩЕСТВЛЯЕТСЯ СЛЕДУЮЩИМ ОБРАЗОМ

Опыты проводят на самках белых крыс массой 200-250 г линии Wistar в возрасте 3,5 месяца. Для моделирования эндотелиальной дисфункции крыс наркотизировали хлоралгидратом (300 мг/кг) и проводили билатеральную овариэктомию. Для этого в асептических условиях вскрывали переднюю брюшную стенку, перевязывали трубный и брюшинный отделы яичников, используя атравматический шовный материал, после чего производили эксцизию последних. Рана послойно ушивалась. На 43 день (через 6 недель после проведения операции) внутрибрюшинно вводился ингибитор NO-синтазы N-нитро-L-аргинин метиловый эфир (L-NAME, Sigma) один раз в сутки в дозе 25 мг/кг в объеме 1 мл/кг в течение 7 дней (n=10 животных). Животным интактной группы вводится физиологический раствор NaCl в том же объеме (n=10 животных). Тиоктовая кислота и розувастатин, а также их комбинация вводятся ежедневно внутрижелудочно (через зонд) в дозах 50 мг/кг/сут и 0,85 мг/кг/сут соответственно в течение 7 дней одновременно с L-NAME.

На 8 сутки под наркозом (хлоралгидрат 300 мг/кг и золетил 150 мг/кг, внутрибрюшинно) животное брали в эксперимент и на первом этапе оценивали артериальное давление и реакции артериального давления на эндотелийзависимую (ацетилхолин в дозе 40 мкг/кг) и эндотелийнезависимую (нитропруссид в дозе 30 мкг/кг) вазодилатацию посредством введения в сонную артерию катетера. Фармакологические агенты вводили болюсно в правую бедренную вену.

Регистрировали систолическое артериальное давление (САД), диастолическое артериальное давление (ДАД) и частоту сердечных сокращений (ЧСС) с помощью датчика TSD104A и аппаратно-программного комплекса MP150, производства Biopac System, Inc., США.

Для оценки степени развития эндотелиальной дисфункции у экспериментальных животных и ее коррекции исследуемыми препаратами произведен расчет коэффициента эндотелиальной дисфункции (КЭД):

$$КЭД=\frac{S_{АДНП}}{S_{АД\text{ АХ}}},$$

где КЭД - коэффициент эндотелиальной дисфункции; S_{АД НП} - площадь треугольника над кривой восстановления АД при проведении функциональной пробы с введением нитропруссида натрия, S_{АД АХ} - площадь треугольника над кривой восстановления АД при проведении функциональной пробы с введением ацетилхолина в дозе 40 мкг/кг (патент RU №2301015 от 20.06.2007 г., бюлл. №17).

При статистической обработке данных рассчитывается среднее значение, величина стандартного отклонения. Различия считаются достоверными при p<0,05.

ПРИМЕР КОНКРЕТНОГО ВЫПОЛНЕНИЯ

Блокада NO-синтазы, вызванная 7-дневным введением L-NAME крысам, приводила к нарушению взаимоотношений вазодилатирующих и вазоконстрикторных механизмов регуляции сосудистого тонуса, о чем свидетельствуют результаты сосудистых проб на эндотелийзависимое (ацетилхолин) и эндотелийнезависимое (нитропруссид натрия) расслабление сосудов и увеличение КЭД с 0,8±0,1 у интактных животных до 4,6±0,7 (р<0,05).

В группе животных, где на фоне введения ингибитора NO-синтазы L-NAME вводился только розувастатин, это отношение соответствовало значению 1,7±0,2, а в группе с дополнительным введением к розувастатину тиоктовой кислоты - 1,4±0,3, что меньше, чем в группе животных с введением L-NAME.

Артериальное давление у интактных животных составляло: систолическое (САД) - 128,1±6,0 мм рт.ст., диастолическое (ДАД) - 95,7±4,0 мм рт.ст. При введении L-NAME на фоне овариэктомии происходило увеличение артериального давления до 169,9±7,3 мм рт.ст. и 123,2±7,5 мм рт.ст. соответственно.

Введение розувастатина на фоне гипоэстрогении и L-NAME снижало артериальное давление до 151,2±6,2 мм рт.ст. и 113,8±3,3 мм рт.ст. соответственно (р<0,05), а введение комбинации розувастатина и тиоктовой кислоты приводило к большему снижению артериального давления, которое составило 135,5±2,9 мм рт.ст., ДАД - 97,6±7,1 мм рт.ст. соответственно (р<0,05).

Динамика показателей систолического (САД), диастолического (ДАД) артериального давления, коэффициента эндотелиальной дисфункции в экспериментальных группах животных приведена ниже в таблице 1.

Таблица 1

Показатель Группа	САД, мм рт.ст.	ДАД, мм рт.ст.	КЭД, отн.ед.
Интактные	128,1±6,0	95,7±4,0	0,8±0,1
Овариэктомия+L-NAME	169,9±7,3*	123,2±7,5*	4,6±0,7*
Овариэктомия+L-NAME+ розувастатин	151,2±6,2*	113,8±3,3*	1,7±0,2**
Овариэктомия+L-NAME+ розувастатин+тиоктовая кислота	135,5±2,9*	97,6±7,1*	1,4±0,3**

Примечание: КЭД - коэффициент эндотелиальной дисфункции; * - р<0,05 в сравнении с группой интактных; ** - р<0,05 в сравнении с группой L-NAME.

Кроме того, результаты исследований поясняются графическими изображениями, на которых отображена динамика показателей систолического (САД), диастолического (ДАД) артериального давления, коэффициента эндотелиальной дисфункции в экспериментальных группах животных.

Таким образом, полученные результаты позволяют констатировать активизацию фармакологической коррекции эндотелиальной дисфункции розувастатином при сочетанном его применении с тиоктовой кислотой, так как она является антиоксидантом и предотвращает биодеградацию оксида азота в сосудистом эндотелии свободными радикалами.

Cited By (2)