RU2369398C2 - Средство с ранозаживляющей активностью на основе супернатанта человеческих фибробластов - Google Patents
Средство с ранозаживляющей активностью на основе супернатанта человеческих фибробластов Download PDFInfo
- Publication number
- RU2369398C2 RU2369398C2 RU2007133815/15A RU2007133815A RU2369398C2 RU 2369398 C2 RU2369398 C2 RU 2369398C2 RU 2007133815/15 A RU2007133815/15 A RU 2007133815/15A RU 2007133815 A RU2007133815 A RU 2007133815A RU 2369398 C2 RU2369398 C2 RU 2369398C2
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- solution
- wound healing
- medicine
- chloride
- supernatant
- Prior art date
Links
- 230000000694 effects Effects 0.000 title claims abstract description 11
- 210000002950 fibroblast Anatomy 0.000 title claims abstract description 9
- 230000029663 wound healing Effects 0.000 title claims abstract description 7
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 title claims description 7
- 239000003814 drug Substances 0.000 title abstract description 15
- 102000004877 Insulin Human genes 0.000 claims abstract description 6
- 108090001061 Insulin Proteins 0.000 claims abstract description 6
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 claims abstract description 5
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 claims abstract description 5
- 239000008103 glucose Substances 0.000 claims abstract description 5
- 239000012141 concentrate Substances 0.000 claims abstract description 4
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 claims abstract description 3
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 claims abstract description 3
- 229940088594 vitamin Drugs 0.000 claims abstract description 3
- 239000011782 vitamin Substances 0.000 claims abstract description 3
- 235000013343 vitamin Nutrition 0.000 claims abstract description 3
- 229930003231 vitamin Natural products 0.000 claims abstract description 3
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 11
- 210000002381 plasma Anatomy 0.000 claims description 11
- NOESYZHRGYRDHS-UHFFFAOYSA-N insulin Chemical compound N1C(=O)C(NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C(CCC(O)=O)NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(NC(=O)CN)C(C)CC)CSSCC(C(NC(CO)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)NC(CC=2C=CC(O)=CC=2)C(=O)NC(CCC(N)=O)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)NC(CCC(O)=O)C(=O)NC(CC(N)=O)C(=O)NC(CC=2C=CC(O)=CC=2)C(=O)NC(CSSCC(NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(CC=2C=CC(O)=CC=2)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(C)NC(=O)C(CCC(O)=O)NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(CC=2NC=NC=2)NC(=O)C(CO)NC(=O)CNC2=O)C(=O)NCC(=O)NC(CCC(O)=O)C(=O)NC(CCCNC(N)=N)C(=O)NCC(=O)NC(CC=3C=CC=CC=3)C(=O)NC(CC=3C=CC=CC=3)C(=O)NC(CC=3C=CC(O)=CC=3)C(=O)NC(C(C)O)C(=O)N3C(CCC3)C(=O)NC(CCCCN)C(=O)NC(C)C(O)=O)C(=O)NC(CC(N)=O)C(O)=O)=O)NC(=O)C(C(C)CC)NC(=O)C(CO)NC(=O)C(C(C)O)NC(=O)C1CSSCC2NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C(CC(N)=O)NC(=O)C(NC(=O)C(N)CC=1C=CC=CC=1)C(C)C)CC1=CN=CN1 NOESYZHRGYRDHS-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 8
- DFPAKSUCGFBDDF-UHFFFAOYSA-N Nicotinamide Chemical compound NC(=O)C1=CC=CN=C1 DFPAKSUCGFBDDF-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 229940125396 insulin Drugs 0.000 claims description 4
- 239000011734 sodium Substances 0.000 claims description 4
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 claims description 4
- CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N Ascorbic acid Chemical compound OC[C@H](O)[C@H]1OC(=O)C(O)=C1O CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N 0.000 claims description 3
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 claims description 3
- CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L Magnesium sulfate Chemical compound [Mg+2].[O-][S+2]([O-])([O-])[O-] CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims description 3
- WCUXLLCKKVVCTQ-UHFFFAOYSA-M Potassium chloride Chemical compound [Cl-].[K+] WCUXLLCKKVVCTQ-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 3
- AUNGANRZJHBGPY-SCRDCRAPSA-N Riboflavin Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)CN1C=2C=C(C)C(C)=CC=2N=C2C1=NC(=O)NC2=O AUNGANRZJHBGPY-SCRDCRAPSA-N 0.000 claims description 3
- UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M Sodium bicarbonate Chemical compound [Na+].OC([O-])=O UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 3
- VVIAGPKUTFNRDU-UHFFFAOYSA-N 6S-folinic acid Natural products C1NC=2NC(N)=NC(=O)C=2N(C=O)C1CNC1=CC=C(C(=O)NC(CCC(O)=O)C(O)=O)C=C1 VVIAGPKUTFNRDU-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- AUNGANRZJHBGPY-UHFFFAOYSA-N D-Lyxoflavin Natural products OCC(O)C(O)C(O)CN1C=2C=C(C)C(C)=CC=2N=C2C1=NC(=O)NC2=O AUNGANRZJHBGPY-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- ZZZCUOFIHGPKAK-UHFFFAOYSA-N D-erythro-ascorbic acid Natural products OCC1OC(=O)C(O)=C1O ZZZCUOFIHGPKAK-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 229930003268 Vitamin C Natural products 0.000 claims description 2
- 239000004227 calcium gluconate Substances 0.000 claims description 2
- 235000013927 calcium gluconate Nutrition 0.000 claims description 2
- 229960004494 calcium gluconate Drugs 0.000 claims description 2
- 230000001143 conditioned effect Effects 0.000 claims description 2
- 235000008191 folinic acid Nutrition 0.000 claims description 2
- 239000011672 folinic acid Substances 0.000 claims description 2
- 229960001691 leucovorin Drugs 0.000 claims description 2
- 229910052943 magnesium sulfate Inorganic materials 0.000 claims description 2
- 235000019341 magnesium sulphate Nutrition 0.000 claims description 2
- 229960003966 nicotinamide Drugs 0.000 claims description 2
- 235000005152 nicotinamide Nutrition 0.000 claims description 2
- 239000011570 nicotinamide Substances 0.000 claims description 2
- 239000001103 potassium chloride Substances 0.000 claims description 2
- 235000011164 potassium chloride Nutrition 0.000 claims description 2
- 229960002477 riboflavin Drugs 0.000 claims description 2
- 235000019192 riboflavin Nutrition 0.000 claims description 2
- 239000002151 riboflavin Substances 0.000 claims description 2
- 235000017557 sodium bicarbonate Nutrition 0.000 claims description 2
- 229910000030 sodium bicarbonate Inorganic materials 0.000 claims description 2
- 235000019154 vitamin C Nutrition 0.000 claims description 2
- 239000011718 vitamin C Substances 0.000 claims description 2
- NEEHYRZPVYRGPP-UHFFFAOYSA-L calcium;2,3,4,5,6-pentahydroxyhexanoate Chemical compound [Ca+2].OCC(O)C(O)C(O)C(O)C([O-])=O.OCC(O)C(O)C(O)C(O)C([O-])=O NEEHYRZPVYRGPP-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims 1
- VVIAGPKUTFNRDU-ABLWVSNPSA-N folinic acid Chemical compound C1NC=2NC(N)=NC(=O)C=2N(C=O)C1CNC1=CC=C(C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O)C=C1 VVIAGPKUTFNRDU-ABLWVSNPSA-N 0.000 claims 1
- ZUFQODAHGAHPFQ-UHFFFAOYSA-N pyridoxine hydrochloride Chemical compound Cl.CC1=NC=C(CO)C(CO)=C1O ZUFQODAHGAHPFQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- MYVIATVLJGTBFV-UHFFFAOYSA-M thiamine(1+) chloride Chemical compound [Cl-].CC1=C(CCO)SC=[N+]1CC1=CN=C(C)N=C1N MYVIATVLJGTBFV-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract description 3
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 abstract description 2
- KEAYESYHFKHZAL-UHFFFAOYSA-N Sodium Chemical compound [Na] KEAYESYHFKHZAL-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract 1
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 19
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 10
- 208000027418 Wounds and injury Diseases 0.000 description 9
- 208000025865 Ulcer Diseases 0.000 description 8
- 206010052428 Wound Diseases 0.000 description 8
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 8
- 231100000397 ulcer Toxicity 0.000 description 8
- 238000000034 method Methods 0.000 description 6
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 5
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 4
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 4
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 4
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 4
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 4
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 4
- 239000003357 wound healing promoting agent Substances 0.000 description 4
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 3
- 239000002674 ointment Substances 0.000 description 3
- 230000001228 trophic effect Effects 0.000 description 3
- 206010048768 Dermatosis Diseases 0.000 description 2
- 102000010834 Extracellular Matrix Proteins Human genes 0.000 description 2
- 108010037362 Extracellular Matrix Proteins Proteins 0.000 description 2
- 206010061218 Inflammation Diseases 0.000 description 2
- 210000003815 abdominal wall Anatomy 0.000 description 2
- 230000000845 anti-microbial effect Effects 0.000 description 2
- 239000012620 biological material Substances 0.000 description 2
- 210000002744 extracellular matrix Anatomy 0.000 description 2
- 239000003925 fat Substances 0.000 description 2
- 230000004054 inflammatory process Effects 0.000 description 2
- IAIWVQXQOWNYOU-FPYGCLRLSA-N nitrofural Chemical compound NC(=O)N\N=C\C1=CC=C([N+]([O-])=O)O1 IAIWVQXQOWNYOU-FPYGCLRLSA-N 0.000 description 2
- 244000052769 pathogen Species 0.000 description 2
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 2
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 2
- UEJSSZHHYBHCEL-UHFFFAOYSA-N silver(1+) sulfadiazinate Chemical compound [Ag+].C1=CC(N)=CC=C1S(=O)(=O)[N-]C1=NC=CC=N1 UEJSSZHHYBHCEL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 208000017520 skin disease Diseases 0.000 description 2
- 238000011272 standard treatment Methods 0.000 description 2
- 230000004936 stimulating effect Effects 0.000 description 2
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 2
- 206010002091 Anaesthesia Diseases 0.000 description 1
- 241000606153 Chlamydia trachomatis Species 0.000 description 1
- 102000004127 Cytokines Human genes 0.000 description 1
- 108090000695 Cytokines Proteins 0.000 description 1
- 241000701022 Cytomegalovirus Species 0.000 description 1
- 102000009123 Fibrin Human genes 0.000 description 1
- 108010073385 Fibrin Proteins 0.000 description 1
- BWGVNKXGVNDBDI-UHFFFAOYSA-N Fibrin monomer Chemical compound CNC(=O)CNC(=O)CN BWGVNKXGVNDBDI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000016359 Fibronectins Human genes 0.000 description 1
- 108010067306 Fibronectins Proteins 0.000 description 1
- 208000005176 Hepatitis C Diseases 0.000 description 1
- 241000341655 Human papillomavirus type 16 Species 0.000 description 1
- 241000341657 Human papillomavirus type 18 Species 0.000 description 1
- 206010020751 Hypersensitivity Diseases 0.000 description 1
- 208000005230 Leg Ulcer Diseases 0.000 description 1
- 241000204051 Mycoplasma genitalium Species 0.000 description 1
- 241000204048 Mycoplasma hominis Species 0.000 description 1
- 206010039509 Scab Diseases 0.000 description 1
- 206010040943 Skin Ulcer Diseases 0.000 description 1
- 239000005708 Sodium hypochlorite Substances 0.000 description 1
- 206010053615 Thermal burn Diseases 0.000 description 1
- 108090000190 Thrombin Proteins 0.000 description 1
- 241000202921 Ureaplasma urealyticum Species 0.000 description 1
- 206010046996 Varicose vein Diseases 0.000 description 1
- 241000700605 Viruses Species 0.000 description 1
- 239000013543 active substance Substances 0.000 description 1
- 230000037005 anaesthesia Effects 0.000 description 1
- 230000003110 anti-inflammatory effect Effects 0.000 description 1
- 230000002421 anti-septic effect Effects 0.000 description 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 1
- 210000000988 bone and bone Anatomy 0.000 description 1
- 210000001185 bone marrow Anatomy 0.000 description 1
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 description 1
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 1
- 229940038705 chlamydia trachomatis Drugs 0.000 description 1
- WIIZWVCIJKGZOK-RKDXNWHRSA-N chloramphenicol Chemical compound ClC(Cl)C(=O)N[C@H](CO)[C@H](O)C1=CC=C([N+]([O-])=O)C=C1 WIIZWVCIJKGZOK-RKDXNWHRSA-N 0.000 description 1
- 239000003636 conditioned culture medium Substances 0.000 description 1
- 238000010411 cooking Methods 0.000 description 1
- 239000002537 cosmetic Substances 0.000 description 1
- 239000012228 culture supernatant Substances 0.000 description 1
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 1
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 1
- 230000007547 defect Effects 0.000 description 1
- 210000004207 dermis Anatomy 0.000 description 1
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 1
- 210000002257 embryonic structure Anatomy 0.000 description 1
- 238000006911 enzymatic reaction Methods 0.000 description 1
- 210000000981 epithelium Anatomy 0.000 description 1
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 1
- 229950003499 fibrin Drugs 0.000 description 1
- 239000012467 final product Substances 0.000 description 1
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 1
- 239000003102 growth factor Substances 0.000 description 1
- 230000003779 hair growth Effects 0.000 description 1
- 208000002672 hepatitis B Diseases 0.000 description 1
- 229940088597 hormone Drugs 0.000 description 1
- 239000005556 hormone Substances 0.000 description 1
- 230000002519 immonomodulatory effect Effects 0.000 description 1
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 1
- 208000014674 injury Diseases 0.000 description 1
- 230000003834 intracellular effect Effects 0.000 description 1
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 description 1
- 239000000644 isotonic solution Substances 0.000 description 1
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 description 1
- 210000004072 lung Anatomy 0.000 description 1
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 230000000813 microbial effect Effects 0.000 description 1
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 description 1
- 238000004321 preservation Methods 0.000 description 1
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 1
- 230000001172 regenerating effect Effects 0.000 description 1
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 1
- 229960003600 silver sulfadiazine Drugs 0.000 description 1
- 239000002356 single layer Substances 0.000 description 1
- 230000009759 skin aging Effects 0.000 description 1
- SUKJFIGYRHOWBL-UHFFFAOYSA-N sodium hypochlorite Chemical compound [Na+].Cl[O-] SUKJFIGYRHOWBL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000002269 spontaneous effect Effects 0.000 description 1
- 238000011301 standard therapy Methods 0.000 description 1
- 238000001356 surgical procedure Methods 0.000 description 1
- 208000011580 syndromic disease Diseases 0.000 description 1
- 208000006379 syphilis Diseases 0.000 description 1
- 229940124597 therapeutic agent Drugs 0.000 description 1
- 229960004072 thrombin Drugs 0.000 description 1
- 201000005060 thrombophlebitis Diseases 0.000 description 1
- 208000027185 varicose disease Diseases 0.000 description 1
- 201000002282 venous insufficiency Diseases 0.000 description 1
Landscapes
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Abstract
Изобретение относится к медицине, а именно к хирургии, акушерству, гинекологии и дерматологии, и касается средств, обладающих репаративным и регенераторным действием на раны различного происхождения. Предложено средство, обладающее ранозаживляющей активностью на основе супернатанта человеческих диплоидных фибробластов, при этом оно дополнительно содержит плазму крови человека О (I) группы резус-положительная, инсулин простой, нуклеинат натрия, комплекс аминокислот «Инфезол 100», концентрат жиров «Липофундин МСТ/ЛСТ 20%», соли, глюкозу и витамины. Изобретение обеспечивает создание высокоэффективного комплексного лекарственного средства, обладающего ранозаживляющей активностью и не содержащего веществ, не разрешенных к клиническому применению.
Description
Изобретение относится к медицине, а именно к средствам, обладающим репаративным и регенераторным действием на раны различного происхождения и используемым в хирургии, акушерстве и гинекологии, дерматологии.
Известны попытки использования, с одной стороны, донорской плазмы и ее компонентов («Средство для стимуляции эпителизации раны», патент №2222317; «Лекарственное средство и способ бесшовного лечения ран», патент №2002134900), с другой стороны, супернатанта клеточных культур или его фракций («Средство для изменения скорости роста или репродукции клеток, способ его получения, способ стимуляции заживления ран или лечения ожогов, способ коррекции косметического дефекта, способ ингибирования старения кожи и способ стимуляции роста волос», патент №2280459; «Therapeutic agent for dermatosis and covering material for treating dermatosis using concentrated solution of extracellular matrix», патент №JР2004339107). Однако использование кондиционированной клетками культуральной среды в клинической медицине в настоящий момент не представляется возможным, т.к. часть компонентов сред не зарегистрированы в Государственной Фармакопее и, соответственно, не имеют разрешения на клиническое применение. Использование цельной плазмы способствует формированию плотного фибринового налета на ране, который может не только стимулировать репарацию, но и, наряду с другими белковыми, липидными и углеводными компонентами плазмы, способствовать развитию микробного воспаления и ухудшению состояния раны. В то же время выделение из плазмы лишь отдельных компонентов, например, фибронектина или тромбина, лишает лекарственное средство других биологически активных составляющих плазмы, являющихся стимуляторами роста и размножения эпителия и продукции внеклеточного матрикса (ростовые факторы, цитокины, гормоны).
Наиболее близким является: «Вещество, обладающее противовоспалительной, иммуномодулирующей и ранозаживляющей активностью» (Патент на изобретение №2300384 от 10.06.2007 г.). Указанное средство имеет главный недостаток - содержит культуральную среду, обладающую вышеуказанным ограничением для медицинского использования.
Задачей изобретения является создание высокоэффективного комплексного лекарственного средства, обладающего ранозаживляющей активностью и не содержащего веществ, не разрешенных к клиническому применению. Поставленная задача достигается максимально точным воспроизведением состава культуральной среды за счет использования зарегистрированных официнальных препаратов. Кроме того, с целью усиления репаративной активности супернатанта фибробластов в конечный продукт добавлен ряд лекарственных средств, обладающих репаративной активностью (инсулин, натрия нуклеинат), а также разведенная донорская плазма, что обеспечило сохранение достаточных концентраций биологически активных веществ, но позволило избежать указанных ранее негативных моментов применения цельной плазмы. Состав ранозаживляющего средства следующий:
| - кондиционированный конфлюэнтной культурой | |
| нормальных человеческих фибробластов суточный | |
| супернатант на 0,9% изотоническом растворе | |
| натрия хлорида | 300 мл |
| - комплекс аминокислот «Инфезол 100» | 5 мл |
| - концентрат жиров «Липофундин МСТ/ЛСТ 20%» | 5 мл |
| - глюкоза | 20 мл 5% раствора |
| - кальция глюконат | 5 мл 10% раствора |
| - калия хлорид | 10 мл 4% |
| - магния сульфат | 0,4 мл 25% раствора |
| - натрия гидрокарбонат | 55 мл 4% раствора |
| - аскорбиновая кислота | 1 мл 5% раствора |
| - никотинамид | 1 мл 2,5% раствора |
| - пиридоксина хлорид | 1 мл 5% раствора |
| - тиамина хлорид | 1 мл 2,5% раствора |
| - лейковорин | 1 мл 1% раствора |
| - рибофлавин | 1 мл 1% раствора |
| - плазма крови человека 0 (I) группы резус- | |
| положительная | 75 мл |
| - инсулин простой | 200 ЕД |
| - натрия нуклеинат | 50 мл 0,25% раствора |
| - изотонический раствор натрия хлорида 0,9% | до 1 л |
Для предлагаемого состава разработана технология приготовления. Перевиваемые линии нормальных человеческих фибробластов (НЧФ) получали бесферментативным способом. Кусочки тканей (кусочки дермы, легких, губчатая кость, содержащая красный костный мозг) подвергали механической дезагрегации до фрагментов размером 0,1-0,2 мм3, добавляли питательную среду MEM, дополненную 10% сыворотки эмбрионов коров. Фрагменты тканей ресуспендировали в указанной среде, вносили в культуральные пластиковые флаконы и культивировали во влажной атмосфере с 5% СО2. В течение 1-3 суток происходила миграция фибробластов из тканевых фрагментов и прикрепление к дну культуральных флаконов. После этого фрагменты тканей со средой из флаконов удаляли, а к прикрепленным клетками добавляли свежую культуральную среду. После формирования на дне культуральных флаконов монослоя НЧФ отработанную питательную среду удаляли, клетки трижды отмывали от остатков среды стерильным изотоническим 0,9% раствором натрия хлорида, подогретого до 37°С, а затем к клеткам стерильно добавляли состав из аминокислот, жиров, глюкозы, солей и витаминов, разведенных в 0,9% изотоническом растворе натрия хлорида в указанных выше соотношениях, и вновь культивировали в течение 24 ч в стандартных условиях. Через сутки полученный таким образом кондиционированный НЧФ супернатант сливали и использовали для приготовления ранозаживляющего средства. До клинического использования биоматериала проводили обследование донора фибробластов на отсутствие возбудителей сифилиса, ВИЧ-инфекции, гепатитов В и С, а также проводили исследование самой культуры на наличие внутриклеточных возбудителей (Chlamydia trachomatis, Ureaplasma urealyticum, Mycoplasma genitalium, Mycoplasma hominis, Herpes simplex virus тип I и II, Cytomegalovirus, Human papillomavirus тип 16 и 18), при выявление которых весь биоматериал отбраковывался.
Для приготовления ранозаживляющего средства с целью последующего клинического применения в стерильную 1000 мл стеклянную бутылку к 300 мл кондиционированного конфлюэнтной культурой НЧФ супернатанта добавляли 75 мл донорской плазмы 0 (I) группы резус-положительной, которую получали на Курской ОСПК. Затем стерильно добавляли 200 ЕД простого инсулина, 50 мл 0,25% раствора натрия нуклеината и доводили общий объем до 1000 мл 0,9% раствором натрия хлорида.
Влияние препарата на сроки эпителизации ожоговой раны.
Пример 1
Проведено исследование эффективности и безопасности применения предлагаемого препарата у больных с термическим ожогом IIIa степени. Для исследования отобраны 12 больных с ожогом указанной глубины, расположенном на передней и боковых поверхностях брюшной стенки. На левую боковую поверхность накладывали стерильную салфетку, пропитанную раствором 0,05% фурацилина (контроль 1), на переднюю брюшную стенку наносили мазь «Дермазин», представляющую собой сульфадиазин серебра на гидрофильной основе и рекомендованную для лечения поверхностных и пограничных ожогов (контроль 2), на правую боковую поверхность - салфетки, пропитанные предлагаемым составом. В течение суток салфетки с растворами орошали соответствующими препаратами (фурацилин и исследуемый состав) для предотвращения их полного высыхания. Под внутривенным наркозом каждые 48 ч осуществляли перевязки с туалетом раны и сменой салфеток. При формировании струпа на ране его тангенциально иссекали в условиях операционной. Средний срок самостоятельной эпителизации ожоговой раны на участке использования предлагаемого нами препарата составил (M±tm) 10,83±1,23 сут, в контроле 1-17,83±1,27 сут, а в контроле 2-14,42±1,04 суток.
Таким образом, предлагаемый нами состав статистически значимо (р<0,05) сокращал сроки спонтанной эпителизации пограничного ожога как в сравнении со стандартным раствором антисептика, так и по сравнению с современной мазью антимикробного действия, входящей в стандартную терапию указанной травмы.
Пример 2
Проведено исследование эффективности и безопасности применения предлагаемого препарата у больных с трофическими язвами голени на фоне варикозной болезни и посттромбофлебитического синдрома. Для исследования отобраны 15 больных с одиночной язвой голени. Условием отбора являлось отсутствие гнойного воспаления, аллергических реакций на компоненты ранозаживляющего средства и белковые препараты в анамнезе. Средний срок существования язвы составил (M±tm) 2,80±1,17 мес. Средняя площадь язвы (M±tm) - 18,73±3,69 см2. Все пациенты ранее проходили стандартное лечение противомикробными мазями («Левосин» или «Левомеколь») и одним из репаративных препаратов: «Актовегин-гель» или «Куриозин» без видимого эффекта.
После туалета язвы 0,1% раствором гипохлорита натрия и просушивания стерильным марлевым тампоном на язву накладывали стерильную салфетку, пропитанные предлагаемым составом. В течение суток салфетку орошали исследуемым составом для предотвращения ее полного высыхания. Смену повязок с этапным туалетом язвы осуществляли ежедневно. Окончательную оценку эффективности проводили через 28 дней. Для статистической обработки результатов использовали парный критерий Стьюдента. В результате лечения в среднем площадь язв сократилась на (M±tm) 13,27±3,04 см и составила (M±tm) 5,47±2,46 см2 (р<0,001). При этом у 4 пациентов отмечена полная эпителизация трофических язв.
Таким образом, предлагаемый нами состав способствует статистически значимому сокращению площади трофических язв, обусловленных венозной недостаточностью, ранее рефракторных к стандартному лечению.
Claims (1)
- Средство, обладающее ранозаживляющей активностью на основе супернатанта нормальных человеческих фибробластов, отличающееся тем, что дополнительно содержит плазму крови человека О (I) группы резус-положительная, инсулин простой, нуклеинат натрия, комплекс аминокислот «Инфезол 100», концентрат жиров «Липофундин МСТ/ЛСТ 20%», соли, глюкозу и витамины при следующем соотношении компонентов:
кондиционированный конфлюэнтной культурой нормальных человеческих фибробластов суточный супернатант на 0,9% изотоническом растворе натрия хлорида 300 мл комплекс аминокислот «Инфезол 100» 5 мл концентрат жиров «Липофундин МСТ/ЛСТ 20%» 5 мл глюкоза 20 мл 5% раствора кальция глюконат 5 мл 10% раствора калия хлорид 10 мл 4% раствора магния сульфат 0,4 мл 25% раствора натрия гидрокарбонат 55 мл 4% раствора аскорбиновая кислота 1 мл 5% раствора никотинамид 1 мл 2,5% раствора пиридоксина хлорид 1 мл 5% раствора тиамина хлорид 1 мл 2,5% раствора лейковорин 1 мл 1% раствора рибофлавин 1 мл 1% раствора плазма крови человека О (I) группы резус-положительная 75 мл инсулин простой 200 ЕД нуклеинат натрия 50 мл 0,25% раствора изотонический раствор натрия хлорида 0,9%-ный до 1 л
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2007133815/15A RU2369398C2 (ru) | 2007-09-10 | 2007-09-10 | Средство с ранозаживляющей активностью на основе супернатанта человеческих фибробластов |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2007133815/15A RU2369398C2 (ru) | 2007-09-10 | 2007-09-10 | Средство с ранозаживляющей активностью на основе супернатанта человеческих фибробластов |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2007133815A RU2007133815A (ru) | 2009-03-20 |
| RU2369398C2 true RU2369398C2 (ru) | 2009-10-10 |
Family
ID=40544802
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2007133815/15A RU2369398C2 (ru) | 2007-09-10 | 2007-09-10 | Средство с ранозаживляющей активностью на основе супернатанта человеческих фибробластов |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2369398C2 (ru) |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN109106978A (zh) * | 2018-08-29 | 2019-01-01 | 希瑞干细胞科技有限公司 | 一种人皮肤成纤维细胞培养上清敷料及其制备方法 |
| RU2709502C1 (ru) * | 2019-09-23 | 2019-12-18 | Виктор Александрович Сисев | Фармацевтическая композиция для парентерального капельного введения |
Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP0272920A1 (en) * | 1986-12-23 | 1988-06-29 | Unilever Plc | Cosmetic composition |
| RU2250108C2 (ru) * | 2003-06-30 | 2005-04-20 | Бурда Юрий Евгеньевич | Способ местного лечения эрозивно-язвенных поражений кожи и слизистых |
| RU2300384C2 (ru) * | 2005-01-31 | 2007-06-10 | Юрий Евгеньевич Бурда | Вещество, обладающее противовоспалительной, иммуномодулирующей и ранозаживляющей активностью |
-
2007
- 2007-09-10 RU RU2007133815/15A patent/RU2369398C2/ru not_active IP Right Cessation
Patent Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP0272920A1 (en) * | 1986-12-23 | 1988-06-29 | Unilever Plc | Cosmetic composition |
| RU2250108C2 (ru) * | 2003-06-30 | 2005-04-20 | Бурда Юрий Евгеньевич | Способ местного лечения эрозивно-язвенных поражений кожи и слизистых |
| RU2300384C2 (ru) * | 2005-01-31 | 2007-06-10 | Юрий Евгеньевич Бурда | Вещество, обладающее противовоспалительной, иммуномодулирующей и ранозаживляющей активностью |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN109106978A (zh) * | 2018-08-29 | 2019-01-01 | 希瑞干细胞科技有限公司 | 一种人皮肤成纤维细胞培养上清敷料及其制备方法 |
| RU2709502C1 (ru) * | 2019-09-23 | 2019-12-18 | Виктор Александрович Сисев | Фармацевтическая композиция для парентерального капельного введения |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| RU2007133815A (ru) | 2009-03-20 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Ramasastry | Acute wounds | |
| EP2059206B1 (en) | Dry wound dressing and drug delivery system | |
| US9101586B2 (en) | Topical application and formulation of erythropoietin for skin wound healing | |
| KR20180030543A (ko) | 양이온성 살생물제를 포함하는 페트롤라툼-계 조성물 | |
| WO2016004212A1 (en) | Hydrogels for treating and ameliorating wounds and methods for making and using them | |
| US20220218868A1 (en) | Novel polysaccharide-based hydrogel scaffolds for wound care | |
| Melandri et al. | Use of a new hemicellulose dressing (Veloderm®) for the treatment of split-thickness skin graft donor sites: A within-patient controlled study | |
| Anitua et al. | The management of postsurgical wound complications with plasma rich in growth factors: a preliminary series | |
| Ballard et al. | Developments in wound care for difficult to manage wounds | |
| RU2369398C2 (ru) | Средство с ранозаживляющей активностью на основе супернатанта человеческих фибробластов | |
| RU2512681C2 (ru) | Способ лечения длительно незаживающей раны и/или раневой полости | |
| Chen et al. | Multicenter effect analysis of one‐step acellular dermis combined with autologous ultra‐thin split thickness skin composite transplantation in treating burn and traumatic wounds | |
| Altmeyer et al. | Wound healing and skin physiology | |
| CN112999410A (zh) | 含全氟萘烷的纳米氧合水凝胶促愈合敷料及其制法和用途 | |
| CN111759896A (zh) | 一种木瓜总三萜的制药用途 | |
| Matthews-Brzozowska et al. | Revitalization of facial skin based on preparations of patient own blood | |
| Niezgoda et al. | Wound treatment options | |
| Lindenbaum et al. | Serum-free cell culture medium induces acceleration of wound healing in guinea-pigs | |
| RU2214256C2 (ru) | Средство для стимуляции пролиферации клеток, состав для стимуляции пролиферации клеток и способ лечения ран, ожогов и язв различной этиологии | |
| Furtado et al. | Wound healing concepts: contemporary practices and future perspectives | |
| RU2228763C1 (ru) | Способ лечения гнойных ран | |
| US10292997B2 (en) | Compositions and methods for stimulating wound healing | |
| RU2209074C2 (ru) | Состав для лечения ожогов | |
| Wang et al. | A case report of extremely severe 93% total body surface area burns in a 5-year-old boy. | |
| RU2831963C1 (ru) | Способ стимуляции заживления ран |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20090911 |