RU2228190C1 - Composition eliciting immunostimulating property - Google Patents
Composition eliciting immunostimulating property Download PDFInfo
- Publication number
- RU2228190C1 RU2228190C1 RU2002135556/15A RU2002135556A RU2228190C1 RU 2228190 C1 RU2228190 C1 RU 2228190C1 RU 2002135556/15 A RU2002135556/15 A RU 2002135556/15A RU 2002135556 A RU2002135556 A RU 2002135556A RU 2228190 C1 RU2228190 C1 RU 2228190C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- echinacea
- composition
- tincture
- trekrezan
- animals
- Prior art date
Links
- 239000000203 mixture Substances 0.000 title claims abstract description 23
- 230000003308 immunostimulating effect Effects 0.000 title claims abstract description 9
- 235000014134 echinacea Nutrition 0.000 claims abstract description 25
- 240000004530 Echinacea purpurea Species 0.000 claims abstract description 5
- 244000133098 Echinacea angustifolia Species 0.000 claims description 20
- YUXPJMWDDQCARU-UHFFFAOYSA-N 2-[bis(2-hydroxyethyl)amino]ethanol;2-(2-methylphenoxy)acetic acid Chemical compound OCCN(CCO)CCO.CC1=CC=CC=C1OCC(O)=O YUXPJMWDDQCARU-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 16
- 239000003814 drug Substances 0.000 abstract description 18
- 229940098465 tincture Drugs 0.000 abstract description 13
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 7
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 abstract description 4
- 238000011161 development Methods 0.000 abstract description 2
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract description 2
- 230000007721 medicinal effect Effects 0.000 abstract 1
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 15
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 11
- 230000000242 pagocytic effect Effects 0.000 description 8
- 230000036039 immunity Effects 0.000 description 7
- 210000002540 macrophage Anatomy 0.000 description 7
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 6
- 206010057249 Phagocytosis Diseases 0.000 description 5
- 230000008782 phagocytosis Effects 0.000 description 5
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 4
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 4
- 230000028996 humoral immune response Effects 0.000 description 4
- 230000028993 immune response Effects 0.000 description 4
- 210000000987 immune system Anatomy 0.000 description 4
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 4
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 4
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 3
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 3
- 230000004936 stimulating effect Effects 0.000 description 3
- LIFNDDBLJFPEAN-BPSSIEEOSA-N (2s)-4-amino-2-[[(2s)-2-[[2-[[2-[[(2s)-5-amino-2-[[(2s)-2-[[(2s)-6-amino-2-[[(2s)-2-[[(2s)-5-oxopyrrolidine-2-carbonyl]amino]propanoyl]amino]hexanoyl]amino]-3-hydroxypropanoyl]amino]-5-oxopentanoyl]amino]acetyl]amino]acetyl]amino]-3-hydroxypropanoyl]amino Chemical compound NC(=O)C[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)CNC(=O)CNC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H]1CCC(=O)N1 LIFNDDBLJFPEAN-BPSSIEEOSA-N 0.000 description 2
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 2
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000001888 Peptone Substances 0.000 description 2
- 108010080698 Peptones Proteins 0.000 description 2
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 2
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 210000001744 T-lymphocyte Anatomy 0.000 description 2
- 238000010171 animal model Methods 0.000 description 2
- 210000003719 b-lymphocyte Anatomy 0.000 description 2
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 2
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 2
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 2
- 235000020694 echinacea extract Nutrition 0.000 description 2
- 241000411851 herbal medicine Species 0.000 description 2
- 230000004727 humoral immunity Effects 0.000 description 2
- 229960001438 immunostimulant agent Drugs 0.000 description 2
- 239000003022 immunostimulating agent Substances 0.000 description 2
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 2
- 235000019319 peptone Nutrition 0.000 description 2
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 2
- 210000000952 spleen Anatomy 0.000 description 2
- JKMHFZQWWAIEOD-UHFFFAOYSA-N 2-[4-(2-hydroxyethyl)piperazin-1-yl]ethanesulfonic acid Chemical compound OCC[NH+]1CCN(CCS([O-])(=O)=O)CC1 JKMHFZQWWAIEOD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 1
- 108010004032 Bromelains Proteins 0.000 description 1
- 102000004127 Cytokines Human genes 0.000 description 1
- 108090000695 Cytokines Proteins 0.000 description 1
- 102000009109 Fc receptors Human genes 0.000 description 1
- 108010087819 Fc receptors Proteins 0.000 description 1
- 239000007995 HEPES buffer Substances 0.000 description 1
- 206010018910 Haemolysis Diseases 0.000 description 1
- 102000001554 Hemoglobins Human genes 0.000 description 1
- 108010054147 Hemoglobins Proteins 0.000 description 1
- 206010020751 Hypersensitivity Diseases 0.000 description 1
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 description 1
- ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N L-glutamine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N 0.000 description 1
- 229930182816 L-glutamine Natural products 0.000 description 1
- HLFSDGLLUJUHTE-SNVBAGLBSA-N Levamisole Chemical compound C1([C@H]2CN3CCSC3=N2)=CC=CC=C1 HLFSDGLLUJUHTE-SNVBAGLBSA-N 0.000 description 1
- 101710189714 Major cell-binding factor Proteins 0.000 description 1
- 206010027514 Metrorrhagia Diseases 0.000 description 1
- 102000016943 Muramidase Human genes 0.000 description 1
- 108010014251 Muramidase Proteins 0.000 description 1
- 241001529936 Murinae Species 0.000 description 1
- 108010062010 N-Acetylmuramoyl-L-alanine Amidase Proteins 0.000 description 1
- 206010030113 Oedema Diseases 0.000 description 1
- 206010035664 Pneumonia Diseases 0.000 description 1
- 239000004365 Protease Substances 0.000 description 1
- 239000012980 RPMI-1640 medium Substances 0.000 description 1
- 102100030000 Recombining binding protein suppressor of hairless Human genes 0.000 description 1
- 206010070834 Sensitisation Diseases 0.000 description 1
- DBMJMQXJHONAFJ-UHFFFAOYSA-M Sodium laurylsulphate Chemical compound [Na+].CCCCCCCCCCCCOS([O-])(=O)=O DBMJMQXJHONAFJ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 230000024932 T cell mediated immunity Effects 0.000 description 1
- 206010053613 Type IV hypersensitivity reaction Diseases 0.000 description 1
- 230000003187 abdominal effect Effects 0.000 description 1
- 230000009471 action Effects 0.000 description 1
- 230000001476 alcoholic effect Effects 0.000 description 1
- 208000026935 allergic disease Diseases 0.000 description 1
- 230000003110 anti-inflammatory effect Effects 0.000 description 1
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 1
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 1
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 1
- 230000036772 blood pressure Effects 0.000 description 1
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 1
- 235000019835 bromelain Nutrition 0.000 description 1
- 206010006451 bronchitis Diseases 0.000 description 1
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000007969 cellular immunity Effects 0.000 description 1
- 230000001684 chronic effect Effects 0.000 description 1
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 1
- 230000008094 contradictory effect Effects 0.000 description 1
- 238000012937 correction Methods 0.000 description 1
- 230000007123 defense Effects 0.000 description 1
- 230000003111 delayed effect Effects 0.000 description 1
- 239000003599 detergent Substances 0.000 description 1
- 230000029087 digestion Effects 0.000 description 1
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 1
- 208000035475 disorder Diseases 0.000 description 1
- 229940039673 echinacea preparation Drugs 0.000 description 1
- 210000003743 erythrocyte Anatomy 0.000 description 1
- 210000000416 exudates and transudate Anatomy 0.000 description 1
- 239000012894 fetal calf serum Substances 0.000 description 1
- 210000002683 foot Anatomy 0.000 description 1
- 235000011389 fruit/vegetable juice Nutrition 0.000 description 1
- 230000005714 functional activity Effects 0.000 description 1
- 210000003714 granulocyte Anatomy 0.000 description 1
- 230000008588 hemolysis Effects 0.000 description 1
- 235000008216 herbs Nutrition 0.000 description 1
- 210000000548 hind-foot Anatomy 0.000 description 1
- 230000009610 hypersensitivity Effects 0.000 description 1
- 230000036737 immune function Effects 0.000 description 1
- 230000003053 immunization Effects 0.000 description 1
- 238000002649 immunization Methods 0.000 description 1
- 230000001031 immunopharmacological effect Effects 0.000 description 1
- 230000001506 immunosuppresive effect Effects 0.000 description 1
- 230000000686 immunotropic effect Effects 0.000 description 1
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 1
- 238000007912 intraperitoneal administration Methods 0.000 description 1
- 229960001614 levamisole Drugs 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 239000004325 lysozyme Substances 0.000 description 1
- 229960000274 lysozyme Drugs 0.000 description 1
- 235000010335 lysozyme Nutrition 0.000 description 1
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 1
- 230000001404 mediated effect Effects 0.000 description 1
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 1
- 238000000034 method Methods 0.000 description 1
- XBCXJKGHPABGSD-UHFFFAOYSA-N methyluracil Natural products CN1C=CC(=O)NC1=O XBCXJKGHPABGSD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000001616 monocyte Anatomy 0.000 description 1
- 210000005087 mononuclear cell Anatomy 0.000 description 1
- 210000000822 natural killer cell Anatomy 0.000 description 1
- 239000002547 new drug Substances 0.000 description 1
- 231100000957 no side effect Toxicity 0.000 description 1
- 230000000144 pharmacologic effect Effects 0.000 description 1
- 230000008092 positive effect Effects 0.000 description 1
- 239000002994 raw material Substances 0.000 description 1
- 208000023504 respiratory system disease Diseases 0.000 description 1
- 230000004044 response Effects 0.000 description 1
- 238000012552 review Methods 0.000 description 1
- 230000008313 sensitization Effects 0.000 description 1
- 239000002356 single layer Substances 0.000 description 1
- 238000003307 slaughter Methods 0.000 description 1
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 1
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 1
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 description 1
- 235000000891 standard diet Nutrition 0.000 description 1
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- 230000009897 systematic effect Effects 0.000 description 1
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 1
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 1
- RWQNBRDOKXIBIV-UHFFFAOYSA-N thymine Chemical compound CC1=CNC(=O)NC1=O RWQNBRDOKXIBIV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000005951 type IV hypersensitivity Effects 0.000 description 1
- 208000027930 type IV hypersensitivity disease Diseases 0.000 description 1
- 238000005303 weighing Methods 0.000 description 1
- 239000002023 wood Substances 0.000 description 1
Landscapes
- Medicines Containing Plant Substances (AREA)
Abstract
Description
Изобретение относится к медицине, а именно к иммунофармакологии, и может быть использовано в качестве основы для создания комбинированных лекарственных препаратов - иммуностимуляторов.The invention relates to medicine, namely to immunopharmacology, and can be used as the basis for the creation of combined drugs - immunostimulants.
В качестве иммуностимуляторов используют различные лекарственные средства, полученные как из природного сырья (тималин, нуклеинат натрия, продигиозан), так и путем химического синтеза (левамизол, метилурацил). Все эти препараты обладают рядом общих положительных свойств: способностью повышать общую сопротивляемость организма, стимулировать неспецифические факторы защиты. Однако влияние этих средств на иммунитет ограничивается эффектами на определенные иммунные реакции - преимущественно на Т-клеточный иммунитет (например, тималин), либо на В-клеточный (гуморальный) иммунитет, либо на фагоцитарное звено (продигиозан). Препараты, обладающие стимулирующим влиянием на все звенья иммунитета, участвующие в полноценном иммунном ответе, т.е. одновременно влияющие на фагоцитарное звено, Т- и В-системы иммунитета, отсутствуют. По-видимому, на данном этапе развития иммунофармакологии этим требованиям могут отвечать композиции из препаратов, обладающие разносторонним влиянием на системы иммунитета.As immunostimulants, various drugs are used, obtained both from natural raw materials (thymalin, sodium nucleinate, prodigiosan), and by chemical synthesis (levamisole, methyluracil). All these drugs have a number of common positive properties: the ability to increase the overall resistance of the body, stimulate non-specific defense factors. However, the effect of these agents on immunity is limited by effects on certain immune responses - mainly on T-cell immunity (e.g. thymalin), or on B-cell (humoral) immunity, or on the phagocytic link (prodigiosan). Drugs that have a stimulating effect on all parts of the immune system involved in a full-fledged immune response, i.e. simultaneously affecting the phagocytic link, T- and B-systems of immunity are absent. Apparently, at this stage of the development of immunopharmacology, these requirements may be met by compositions from drugs that have a versatile effect on the immune system.
Известны препараты эхинацеи пурпурной, представляющие собой спиртовые настойки травы, а также препараты на основе свежего сока растения. Получены данные, подтверждающие способность препаратов из эхинацеи влиять на иммунный ответ организма, в основном на фагоцитарное звено [1, 2]. По данным [2] при хронических неспецифических заболеваниях органов дыхания (пневмония, бронхиты) под влиянием эхинацеи у людей наблюдали повышение исходно сниженных показателей гуморального и клеточного иммунитета. Вместе с тем, по литературным данным в экспериментах на животных твердоустановленными являются эффекты эхинацеи на врожденный (естественный) иммунитет (увеличение количества и функциональной активности гранулоцитов, моноцитов/макрофагов и натуральных киллерных клеток), на продукцию цитокинов. Описаны стимулирующие эффекты эхинацеи на приобретенный (клеточный) иммунитет, тогда как данные по гуморальному иммунному ответу противоречивы [3, 4]. Более того, по данным [5] при определенных условиях выявляется иммуносупрессивный эффект эхинацеи на антителообразование у крыс.Echinacea purpurea preparations are known, which are alcohol tinctures of herbs, as well as preparations based on fresh plant juice. Data have been obtained confirming the ability of preparations from Echinacea to affect the body's immune response, mainly on the phagocytic link [1, 2]. According to [2], in case of chronic nonspecific respiratory diseases (pneumonia, bronchitis), under the influence of echinacea, people observed an increase in initially reduced indicators of humoral and cellular immunity. At the same time, according to published data in experiments on animals, the effects of echinacea on innate (natural) immunity (increase in the number and functional activity of granulocytes, monocytes / macrophages and natural killer cells) and on the production of cytokines are firmly established. The stimulating effects of echinacea on acquired (cellular) immunity are described, while the data on the humoral immune response are contradictory [3, 4]. Moreover, according to [5], under certain conditions, the immunosuppressive effect of echinacea on antibody formation in rats is detected.
Известно применение эхинацеи в составе лекарственного средства с иммуностимулирующим и противовоспалительным действием [6]. В описанных лекарственных средствах эхинацея выступает в качестве активного начала. Известна композиция [7] с иммуностимулирующим действием, где каждый из компонентов проявляет себя как агент, активно воздействующий на иммунную систему. Все компоненты (экстракт эхинацеи - Echinacea Angustofolia), лизоцим, бромелайн) являются продуктами природного происхождения.The use of echinacea in the composition of a drug with immunostimulating and anti-inflammatory effects is known [6]. In the described medicines, echinacea acts as an active principle. A known composition [7] with an immunostimulating effect, where each of the components manifests itself as an agent that actively affects the immune system. All components (Echinacea extract - Echinacea Angustofolia), lysozyme, bromelain) are products of natural origin.
Имеются данные о возникновении побочных эффектов в результате совместного применения известных химических препаратов и растительных лекарственнных средств (снижение концентрации в крови синтетических препаратов, возникновение бредовых состояний, межменструальных кровотечений, снижение кровяного давления) [8]. Не отмечено возникновения каких-либо побочных эффектов совместного применения препаратов эхинацеи на фармакологическую активность синтетических лекарственных средств.There are data on the occurrence of side effects as a result of the combined use of well-known chemicals and herbal medicines (a decrease in the concentration of synthetic drugs in the blood, the occurrence of delusional conditions, intermenstrual bleeding, and a decrease in blood pressure) [8]. No side effects of the joint use of echinacea preparations on the pharmacological activity of synthetic drugs were noted.
Известен лекарственный препарат Трекрезан (трис-(2-оксиэтил)-аммоний-орто-крезоксиацетат) - получен химическим путем [9], который является адаптогеном широкого спектра действия. Есть данные об иммунотропных свойствах трекрезана [10] и о его иммуностимулирующей активности в отношении гуморального иммунного ответа [11].The well-known drug Trekresan (tris- (2-hydroxyethyl) -ammonium-ortho-cresoxyacetate) is obtained chemically [9], which is an adaptogen of a wide spectrum of action. There is evidence of the immunotropic properties of trekrezan [10] and its immunostimulating activity with respect to the humoral immune response [11].
Задачей предлагаемого изобретения является получение нового лекарственного средства, активно воздействующего на все звенья иммунного ответа (фагоцитарные реакции, клеточный и гуморальный иммунный ответ).The objective of the invention is to obtain a new drug that actively affects all parts of the immune response (phagocytic reactions, cellular and humoral immune responses).
Указанная задача решается созданием композиции из двух лекарственных средств.This problem is solved by creating a composition of two drugs.
Два известных препарата, один из которых имеет растительное происхождение и получен из эхинацеи пурпурной (Echinacea purpurea) - спиртовая настойка эхинацеи, а другой получен синтетическим путем - трекрезан (трис-(2-оксиэтил)-аммоний-орто-крезоксиацетат), смешиваются между собою следующим образом: в 1 мл настойки эхинацеи растворяется трекрезан в количестве 100 мг (соответственно в 1 л настойки эхинацеи растворяется 100 г трекрезана и т.д. в аналогичной пропорции). Иммуностимулирующие свойства композиции проверялись в экспериментах на мышах. Однократная доза на одну мышь составляла: 1 мкл композиции (1 мкл настойки эхинацеи, содержаший трекрезан в дозе 5 мг/кг).Two well-known drugs, one of which is of plant origin and obtained from Echinacea purpurea, is an alcohol tincture of Echinacea, and the other is synthetically obtained - trekrezan (tris- (2-hydroxyethyl) -ammonium-ortho-cresoxyacetate), mixed together as follows: 100 mg of trekrezan is dissolved in 1 ml of echinacea tincture (respectively, 100 g of trekrezan is dissolved in 1 l of echinacea tincture, etc. in a similar proportion). The immunostimulating properties of the composition were tested in experiments on mice. A single dose per mouse was: 1 μl of the composition (1 μl of tincture of echinacea, containing trekrezan at a dose of 5 mg / kg).
В качестве спиртовой настойки эхинацеи пурпурной использовалась настойка Галено Фарм (Echinacea-Galeno Pharm). Трекрезан был предоставлен Иркутским институтом химии СО РАМН.As an alcoholic tincture of Echinacea purpurea, the tincture of Galeno Farm (Echinacea-Galeno Pharm) was used. Trekrezan was provided by the Irkutsk Institute of Chemistry SB RAMS.
В работе использовали здоровых половозрелых животных мышей-гибридов (CBAxC57BL/6)F1 (CBF1) обоего пола, 8-10 недельного возраста, массой тела 18-20 г. Разброс в группах по исходной массе тела не превышал ±10%. Контрольные и опытные животные одного возраста и получены одновременно из одного питомника ("Рассвет", г. Томск). До и в период эксперимента контрольные и опытные животные содержались в виварии в одинаковых условиях: стандартных пластиковых клетках с мелкой древесной стружкой (не более 10 особей) на стандартном рационе. Все исследования проводились в одно и то же время суток (утром). Средние величины (2-3 опыта, не менее 10 мышей) сравнивали с помощью непараметрического критерия U Манна-Уитни.We used healthy, sexually mature animals of hybrid mice (CBAxC57BL / 6) F1 (CBF1) of both sexes, 8-10 weeks old, weighing 18-20 g. The spread in the groups according to the initial body weight did not exceed ± 10%. Control and experimental animals of the same age and obtained simultaneously from the same cattery ("Dawn", Tomsk). Before and during the experiment, control and experimental animals were kept in the vivarium under the same conditions: standard plastic cages with small wood shavings (no more than 10 individuals) on a standard diet. All studies were carried out at the same time of day (in the morning). Average values (2-3 experiments, at least 10 mice) were compared using the non-parametric U Mann-Whitney test.
Пример 1. IgM антителообразование in vivo. Опытной группе животных вводили внутрижелудочно ежедневно в течение 5 дней композицию (1 мкл композиции, содержащей трекрезан в дозе 5 мг/кг, растворяли в 0,5 мл воды). Контрольным животным в таком же объеме и режиме вводили растворитель (воду) в объеме 0,5 мл. Кроме того, еще одной группе животных вводили трекрезан в дозе 5 мг/кг (в 0,5 мл воды в течение 5 дней), другой - настойку эхинацеи (1 мкл растворяли в 0,5 мл воды; вводили 5 дней). В день последнего введения композиции животных иммунизировали внутривенно эритроцитами барана (ЭБ) в дозе 0,5×107/мышь. Количество IgM АОК в селезенке мышей оценивали на 4-е сутки после иммунизации по количеству зон локального гемолиза в полужидкой среде модифицированным методом Cunningham (1968). Результаты выражали в абсолютном количестве IgM АОК в селезенке (таблица 1).Example 1. IgM antibody formation in vivo. The experimental group of animals was injected intragastrically daily for 5 days with the composition (1 μl of the composition containing trekrezan at a dose of 5 mg / kg was dissolved in 0.5 ml of water). Control animals in the same volume and mode were injected with a solvent (water) in a volume of 0.5 ml. In addition, another group of animals was injected with trekrezan at a dose of 5 mg / kg (in 0.5 ml of water for 5 days), the other with tincture of echinacea (1 μl was dissolved in 0.5 ml of water; 5 days were injected). On the day of the last administration, animal compositions were immunized intravenously with ram erythrocytes (EB) at a dose of 0.5 × 10 7 / mouse. The amount of IgM AOK in the spleen of mice was evaluated on the 4th day after immunization by the number of local hemolysis zones in a semi-liquid medium using the modified Cunningham method (1968). The results were expressed as the absolute amount of IgM AOK in the spleen (table 1).
Как видно из данных таблицы 1, настойка эхинаци практически не влияет на первичный гуморальный иммунный ответ, трекрезан на 59% стимулирует антителообразование, а введение композиции (достоверно) в 2,2 раза стимулирует гуморальный иммунитет по сравнению с контролем.As can be seen from the data in Table 1, the echinacy tincture has practically no effect on the primary humoral immune response, trekrezan stimulates antibody formation by 59%, and the administration of the composition (reliably) stimulates humoral immunity 2.2 times compared to the control.
Пример 2. Реакция гиперчувствительности замедленного типа (ГЗТ) in vivo. Опытной группе животных вводили внутрижелудочно ежедневно в течение 5 дней: композицию (1 мкл) в объеме 0,5 мл воды, настойку эхинацеи (1 мкл в 0,5 мл воды) и трекрезан (5 мг/кг в 0,5 мл воды). В день последнего введения композиции сенсибилизировали мышей внутрибрюшинным введением 0,25% ЭБ в объеме 0,5 мл, на 4-е сутки после сенсибилизации вводили разрешающую дозу антигена под подошвенный апоневроз правой задней лапы (50% ЭБ в объеме 50 мкл). В контрлатеральную лапу вводили растворитель в том же объеме. Контрольным животным в таком же объеме и режиме вводили растворитель соединений (воду). Реакцию ГЗТ оценивали по методике локальной ГЗТ (Crowie, 1975). Учет реакции производили через 24 часа после введения разрешающей дозы ЭБ, величину отека оценивали штангенциркулем. Результаты выражали в процентах (таблица 2, 3).Example 2. The reaction of hypersensitivity delayed type (HRT) in vivo. The experimental group of animals was administered intragastrically daily for 5 days: composition (1 μl) in a volume of 0.5 ml of water, tincture of echinacea (1 μl in 0.5 ml of water) and trekrezan (5 mg / kg in 0.5 ml of water) . On the day of the last administration, the mice were sensitized by intraperitoneal administration of 0.25% EB in a volume of 0.5 ml; on the 4th day after sensitization, a resolving dose of antigen was administered under the plantar aponeurosis of the right hind paw (50% EB in a volume of 50 μl). The solvent was injected into the contralateral paw in the same volume. The control animals in the same volume and mode were injected with a solvent of the compounds (water). HRT response was evaluated by local HRT (Crowie, 1975). The reaction was taken into account 24 hours after the introduction of the resolving dose of EB, the magnitude of the edema was evaluated with a caliper. The results were expressed as a percentage (table 2, 3).
Как видно из данных таблицы 2, трекрезан в дозе 5 мг/кг стимулирует ГЗТ на 32%, настойка эхинацеи стимулирует ГЗТ на 39%, а композиция - на 51% по сравнению с контролем.As can be seen from the data in table 2, trekrezan at a dose of 5 mg / kg stimulates HRT by 32%, tincture of echinacea stimulates HRT by 39%, and the composition by 51% compared with the control.
Пример 3. Fc-рецептор опосредованный фагоцитоз. Фагоцитарную активность макрофагов под влиянием композиции определяли спектрофотометрическим микрометодом (Rummage et al., 1985). Опытной группе животных вводили внутрижелудочно ежедневно в течение 5 дней композицию 1 мкл в объеме 0,5 мл воды, трекрезана в дозе 5 мг/ кг в 0,5 мл воды и настойку эхинацеи 1 мкл в 0,5 мл воды. Контрольным животным в таком же объеме и режиме вводили растворитель (воду). В день последнего введения композиции животным внутрибрюшинно вводили 10%-ный р-р пептона. На 4-е сутки после забоя мышей получали клетки перитонеального экссудата. Макрофаги брюшной полости, стимулированные пептоном, культивировали в концентрации 2×106/мл в течение 24 часов в 24-луночных пластиковых планшетах в среде RPMI-1640, содержащей 10% эмбриональной телячьей сыворотки, 10 мМ HEPES, 2 мМ L-глютамина при температуре 37°С в атмосфере высокой влажности с содержанием 5% СО2 в воздухе. Затем к монослою макрофагов добавляли 1 мл 2,5% опсонизированных ЭБ и культивировали в тех же условиях в течение 40 минут. После этого нефагоцитированные ЭБ лизировали гипотоническим раствором NaCl. Для разрушения макрофагов и фагоцитированных ими ЭБ в каждую лунку добавляли 0,6 мл 1%-ного р-ра содиум додецил сульфата (детергент), после чего количество гемоглобина, вышедшего из разрушенных ЭБ, определяли спектрофотометрически на “MULTISCAN” при длине волны 405 нм. Фагоцитарная активность определялась индивидуально у каждой мыши.Example 3. Fc receptor-mediated phagocytosis. The phagocytic activity of macrophages under the influence of the composition was determined by a spectrophotometric micromethod (Rummage et al., 1985). The experimental group of animals was injected intragastrically daily for 5 days with a composition of 1 μl in a volume of 0.5 ml of water, trekrezan at a dose of 5 mg / kg in 0.5 ml of water and tincture of echinacea 1 μl in 0.5 ml of water. The control animals were injected with a solvent (water) in the same volume and mode. On the day the composition was last administered, animals were injected intraperitoneally with 10% peptone. On the 4th day after slaughter, the mice received peritoneal exudate cells. Peptone-stimulated abdominal macrophages were cultured at a concentration of 2 × 10 6 / ml for 24 hours in 24-well plastic plates in RPMI-1640 medium containing 10% fetal calf serum, 10 mM HEPES, 2 mM L-glutamine at temperature 37 ° C in an atmosphere of high humidity with a content of 5% CO 2 in the air. Then, 1 ml of 2.5% opsonized EB was added to the macrophage monolayer and cultured under the same conditions for 40 minutes. After that, unfaginated EBs were lysed with a hypotonic NaCl solution. To destroy macrophages and phagocytosis-induced EBs, 0.6 ml of a 1% solution of sodium dodecyl sulfate (detergent) was added to each well, after which the amount of hemoglobin released from the destroyed EBs was determined spectrophotometrically at “MULTISCAN” at a wavelength of 405 nm . Phagocytic activity was determined individually in each mouse.
Как видно из данных таблицы 3, настойка эхинацеи на 20% по сравнению с контролем стимулирует фагоцитоз (р<0.01), композиция при введении в течение 5 дней достоверно на 52% по сравнению с контролем стимулирует фагоцитоз (р<0.01). Трекрезан не оказывает влияния на фагоцитоз.As can be seen from the data in Table 3, tincture of echinacea stimulates phagocytosis by 20% compared with the control (p <0.01), and the composition, when administered within 5 days, significantly stimulates phagocytosis (p <0.01). Trekrezan does not affect phagocytosis.
Таким образом, проведенные нами исследования и полученные нами данные показали достоверную возможность получения нового уникального иммуноактивного средства, которое обладает стимулирующей активностью в отношении всех трех видов иммунитета - гуморального (В-лимфоциты - антителообразование), клеточного (Т-лимфоциты - гиперчувствительность замедленного типа), фагоцитарного (макрофаги - фагоцитарная активность). Установленные свойства заявленной композиции позволят получить препарат с уникальными лечебными свойствами для коррекции расстройств иммунной системы супрессорного характера.Thus, our studies and our data showed a reliable possibility of obtaining a new unique immunoactive agent that has stimulating activity against all three types of immunity - humoral (B-lymphocytes - antibody formation), cellular (T-lymphocytes - delayed-type hypersensitivity), phagocytic (macrophages - phagocytic activity). The established properties of the claimed composition will allow to obtain a drug with unique therapeutic properties for the correction of disorders of the immune system of a suppressor nature.
Литература.Literature.
1. 3аявка ЕПВ 0464298, МКИ А 61 К 35/78, oпyбл. 08.01.92 г.1. 3 application EPO 0464298, MKI A 61 K 35/78, approx. 01/08/92
2. Патент РФ 2137490, МКИ А 61 К 35/78, oпyбл. 20.09.99 г.2. RF patent 2137490, MKI A 61 K 35/78, publ. September 20, 1999
3. J. Leukoc Biol. 2000 oct; 68 (4):503-10. Immunopharmacological activity of Echinacea preparation following simulated digestion on murine macrophages and human blood mononuclear cells. Rininger J.A., Kickner S. et al.3. J. Leukoc Biol. 2000 oct; 68 (4): 503-10. Immunopharmacological activity of Echinacea preparation following simulated digestion on murine macrophages and human blood mononuclear cells. Rininger J.A., Kickner S. et al.
4. Biochem. Pharmacol, 2000, Jul. 15; 60(2):155-8. Use of echinacea in medicine. Percival SS.4. Biochem. Pharmacol, 2000, Jul. fifteen; 60 (2): 155-8. Use of echinacea in medicine. Percival SS.
5. Immunopharmacol Immunoxicol 2001, Aug; 23(3):411-21. Multiple immune function in rats fed Echinacea extracts.5. Immunopharmacol Immunoxicol 2001, Aug; 23 (3): 411-21. Multiple immune function in rats fed Echinacea extracts.
6. Патент 2180586.6. Patent 2180586.
7. Патент США 6096307, опубл. 01.08.2000 г.7. US patent 6096307, publ. 08/01/2000
8. Drugs 2001; 61 (15):2163-75. Interaction between herbal medicines and prescribed drugs: a systematic review. Izzo A.A, Emst E.8. Drugs 2001; 61 (15): 2163-75. Interaction between herbal medicines and prescribed drugs: a systematic review. Izzo A.A., Emst E.
9. A.с. СССР 515742, МКИ С 07 С 215/40, 1973 г.9. A.s. USSR 515742, MKI S 07 S 215/40, 1973
10. Патент 2098088, МКИ А 61 К 31/205, С 07 С 215/40, опубл. 10.12.97 г.10. Patent 2098088, MKI A 61 K 31/205, C 07 C 215/40, publ. 12/10/97
11. В.С.Ширинский и др. Экспериментальная и клиническая фармакология. 1993, № 3, с.42.11. V.S.Shirinsky et al. Experimental and clinical pharmacology. 1993, No. 3, p. 42.
Claims (1)
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2002135556/15A RU2228190C1 (en) | 2002-12-26 | 2002-12-26 | Composition eliciting immunostimulating property |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2002135556/15A RU2228190C1 (en) | 2002-12-26 | 2002-12-26 | Composition eliciting immunostimulating property |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2228190C1 true RU2228190C1 (en) | 2004-05-10 |
| RU2002135556A RU2002135556A (en) | 2004-07-27 |
Family
ID=32679409
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2002135556/15A RU2228190C1 (en) | 2002-12-26 | 2002-12-26 | Composition eliciting immunostimulating property |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2228190C1 (en) |
Cited By (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2283657C1 (en) * | 2005-04-22 | 2006-09-20 | Аладьин Виталий Владимирович | Bioactive supplement to prevent suppression of primary and secondary immune response |
| RU2429833C1 (en) * | 2010-09-08 | 2011-09-27 | Максуд Мухамеджанович Расулов | Agent intensifying thrombocyte acid lypase activity |
| RU2444357C1 (en) * | 2010-12-22 | 2012-03-10 | Максуд Мухамеджанович Расулов | Agent to decrease cholesterol esterase activity |
| RU2679402C1 (en) * | 2018-08-20 | 2019-02-08 | Федеральное государственное автономное образовательное учреждение высшего образования "Белгородский государственный национальный исследовательский университет" (НИУ "БелГУ") | Method of immunocorrection using extracts of fatty oils from seeds of nigella damascena and echinacea purpurea |
| RU2783660C2 (en) * | 2021-11-12 | 2022-11-15 | Общество с ограниченной ответственностью "Гротекс" | Liquid pharmaceutical composition oxyethylammonium methylphenoxyacetate |
Citations (7)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2063749C1 (en) * | 1994-02-24 | 1996-07-20 | Михаил Григорьевич Воронков | Medicinal agent showing adaptogenic action |
| RU2099051C1 (en) * | 1994-10-14 | 1997-12-20 | Институт клинической иммунологии СО РАМН | Method for treating secondary immunodeficiency |
| RU2137490C1 (en) * | 1998-03-26 | 1999-09-20 | Всероссийский научно-исследовательский институт лекарственных и ароматических растений "ВИЛАР" РАСХН | Immunostimulating agent estifen and method of its preparing |
| RU2156088C1 (en) * | 1999-12-20 | 2000-09-20 | Дьяков Валерий Михайлович | Food biologically active addition |
| RU2158098C1 (en) * | 2000-01-24 | 2000-10-27 | Дьяков Валерий Михайлович | Biologically-active food additive |
| RU2187326C1 (en) * | 2001-10-01 | 2002-08-20 | Государственное унитарное предриятие Производственно-экспериментальный завод Всероссийского научно-исследовательского института лекарственных и ароматических растений РАСХН | Composition "vilarin" showing adaptogenic and general tonic effect |
| RU2191589C1 (en) * | 2001-04-20 | 2002-10-27 | Закрытое акционерное общество "Эвалар" | Immunostimulating agent "stimmunal" and method of its preparing |
-
2002
- 2002-12-26 RU RU2002135556/15A patent/RU2228190C1/en not_active IP Right Cessation
Patent Citations (7)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2063749C1 (en) * | 1994-02-24 | 1996-07-20 | Михаил Григорьевич Воронков | Medicinal agent showing adaptogenic action |
| RU2099051C1 (en) * | 1994-10-14 | 1997-12-20 | Институт клинической иммунологии СО РАМН | Method for treating secondary immunodeficiency |
| RU2137490C1 (en) * | 1998-03-26 | 1999-09-20 | Всероссийский научно-исследовательский институт лекарственных и ароматических растений "ВИЛАР" РАСХН | Immunostimulating agent estifen and method of its preparing |
| RU2156088C1 (en) * | 1999-12-20 | 2000-09-20 | Дьяков Валерий Михайлович | Food biologically active addition |
| RU2158098C1 (en) * | 2000-01-24 | 2000-10-27 | Дьяков Валерий Михайлович | Biologically-active food additive |
| RU2191589C1 (en) * | 2001-04-20 | 2002-10-27 | Закрытое акционерное общество "Эвалар" | Immunostimulating agent "stimmunal" and method of its preparing |
| RU2187326C1 (en) * | 2001-10-01 | 2002-08-20 | Государственное унитарное предриятие Производственно-экспериментальный завод Всероссийского научно-исследовательского института лекарственных и ароматических растений РАСХН | Composition "vilarin" showing adaptogenic and general tonic effect |
Cited By (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2283657C1 (en) * | 2005-04-22 | 2006-09-20 | Аладьин Виталий Владимирович | Bioactive supplement to prevent suppression of primary and secondary immune response |
| RU2429833C1 (en) * | 2010-09-08 | 2011-09-27 | Максуд Мухамеджанович Расулов | Agent intensifying thrombocyte acid lypase activity |
| RU2444357C1 (en) * | 2010-12-22 | 2012-03-10 | Максуд Мухамеджанович Расулов | Agent to decrease cholesterol esterase activity |
| RU2679402C1 (en) * | 2018-08-20 | 2019-02-08 | Федеральное государственное автономное образовательное учреждение высшего образования "Белгородский государственный национальный исследовательский университет" (НИУ "БелГУ") | Method of immunocorrection using extracts of fatty oils from seeds of nigella damascena and echinacea purpurea |
| RU2783660C2 (en) * | 2021-11-12 | 2022-11-15 | Общество с ограниченной ответственностью "Гротекс" | Liquid pharmaceutical composition oxyethylammonium methylphenoxyacetate |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US6262019B1 (en) | Method of treatment of glutathione deficient mammals | |
| US7838050B2 (en) | Cytokine modulators and related method of use | |
| MXPA04010317A (en) | Compositions for preventing or treating pollenosis, allergic nephritis, atopic dermatitits, asthma or urticaria. | |
| US8568803B2 (en) | Use of anabolic agents, anti-catabolic agents, antioxidant agents and analgesics for protection, treatment and repair of connective tissues in humans and animals | |
| US6797289B2 (en) | Use of anabolic agents, anti-catabolic agents, antioxidant agents, and analgesics for protection, treatment and repair of connective tissues in humans and animals | |
| RU2040932C1 (en) | Preparation influencing tissular metabolism and application of fusarium sambucinum fuckel var ossicolum (berkiet curf) bilai fungus strain to produce the preparation | |
| CN109090611A (en) | A kind of AGEs composite inhibiting and its application, preparation method, preparation | |
| Horie et al. | Physiological differences of soluble and insoluble dietary fibre fractions of brown algae and mushrooms in pepsin | |
| Gutyj et al. | Influence of amprolinsile and brovitacoccid on the protein synthesizing function of the liver and enzyme activity in turkey blood serum during Eimeria invasion | |
| US20070031518A1 (en) | Cytokine modulators and related methods of use | |
| JP2003002840A (en) | Cucumismelo extract coated and / or microencapsulated in a fat-soluble agent based on fatty substances | |
| RU2228190C1 (en) | Composition eliciting immunostimulating property | |
| SK94297A3 (en) | New applications of lysozyme dimer | |
| KR100304312B1 (en) | Zinc Supplemented Prostate Extract | |
| US20010009903A1 (en) | Augmentation method for antitumor activity of substance containing amygdalin, composition containing augmented amygdalin contained substance, method for assessing antitumor efficacy of treatment for amygdalin contained substance and method for assessing antitumor, substance containing amygdalin | |
| RU2215532C2 (en) | Method for complex processing sea cucumber viscera and preparing biologically active food supplements and biologically active food supplements "tingol-2" and "erogol" | |
| RU2368391C1 (en) | Method of getting complex immuno stimulating substance for improvement of autarcesis of animal organism | |
| US20230158105A1 (en) | Compositions and uses of Oligo-chromopeptides and methods of making | |
| RU2156088C1 (en) | Food biologically active addition | |
| CN118103394A (en) | Composition and use of oligopeptides and method of preparation | |
| RU2186577C1 (en) | Preparation eliciting hepatoprotective effect | |
| JP3051375B2 (en) | Antiallergic agent containing conjugated linoleic acid as active ingredient | |
| EP3842038A1 (en) | Microencapsulated formulation comprising iron and cysteine | |
| RU2228175C1 (en) | Immunostimulating agent | |
| BG4566U1 (en) | Formulation of nutritional supplement in tablet form including peptides of lyophilized pepsin |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20111227 |