RU2001614C1

RU2001614C1 - R (+)-N-Пропаргил-1-аминоиндан и его фармацевтически пригодные кислотно-аддитивные соли и фармацевтическа композици , обладающа ингибирующей B-форму фермента моноаминооксидазы активностью

Info

Publication number: RU2001614C1
Application number: SU914894485A
Authority: RU
Inventors: Б.Х.Юдим Мойша; П.М.Финберг Джон; Леви Рут; Стерлинг Джеффри; Лернер Дэвид; Бергер-Паскин Тиртсох; Йеллин Хайли
Original assignee: Тева Фармасьютикал Индастриз Лтд. (Il); Текникон Рисерч энд Дивелопмент Фаундейшн Лтд. (IL)
Priority date: 1990-01-03
Filing date: 1991-01-02
Publication date: 1993-10-30
Also published as: CS691A3; US5519061A; HU215451B; JPH03294248A; RO107552B1; US5457133A; ZA909997B; LU91195I2; ES2057604T3; CZ288222B6; US5786390A; EP0436492B1; US5668181A; IL92952A; CA2031714A1; US5532415A; DK0436492T3; HU908051D0; ATE106860T1; IE904376A1

Abstract

Использование: в качеаве ингибиторов В-формы фермента моноаминооксидазы Продукт - Р{+)-Ы-пропаргют-1-аминоиндак его фармацевтически пригодные кислотно-аддитивные соли, дл хлоргидрата. тт 184 - 185&deg;С. а)+30.90 Реагент 1:Р-{-)-1-аминоиндан Реагент 2: пропар- гилхлорид Услови реакции: в среде ацетонтрила в присутствии К СО иомпозци содержаща Р(+ЬМ-тфстартол-Ь-а11Иноиндам в количестве 1 - 20 мг на дозу и фармацевтически приемлемый носитель в форме дл орального введени инъекционного раствора, эмульсии свечи. 16 ил, 7 табл.

Description

§

Изобретение относитс к области избирательных необратимых ингибиторов фер мента моноэминооксидазы (далее будет называтьс МАО) и R{+) энантиомера N- пропаргил-1-аминоиндэна (далее будет называтьс PAI), который вл етс иэгира- тельным необратимым ингибитором В-фор- мы моноаминооксидазного фермента (далее будет называтьс МЛО-В) Изобретение относитс также к фармацевтическим композици м, содержащим R(-)PAI который может найти применение дл печени болезни Паркинсона, расстройства пам ти и слабоуми типа болезни Алцгеймера (DAT), депрессии и гиперфункционального синдрома у детей.

Болезнь Паркинсона, как шипоко изест- но, вл етс результатом деградации предсинаптических допэминэргических нейронов в головном мозге с последующим снижением количества нейроперенос щего допамина. который выдел етс Таким образом , неправильное выделение допамина приводит к симптоматическим нарушени м регул ции произвольно сокращающихс мышц или болезни Паркинсона.

Ранее уже существовали различные процедуры дл лечени болезни Паркинсона . в насто щее врем широко используетс , например, ввод l-Допа г-месте с декарбоксилазным ингибитором таким как L-карбидопа или бензеразид Декарбок- силазный ингибитор защищает молекулу L-Допа от периферичес чого декапбокси- лировани и таким образом гчрантируот поглощение L-Допа оставшимис допами- нзргическими нейронами в полосатом теле головного мозга. В данном случае L-Допа превращаетс в допамин. дава в результате повышенные концентрации допамина в этих нейронах. В ответ нэ физиологические импульсы нейроны способны, такиг.-. , выдел ть более высокие каличества доп - мина. концентраци которых приближаетс к нормальным требуемые концентраци м Таким образом, такое лечение устран ет симптомы заболеваний и приводит к хорошему состо нию больного

Однако лечение препаратом L Допз имеет свои недостатки, одним из которых вл етс то, что эффективность оптимальна лишь е течение первых нескольких лет после начала лечени . После начального периода реакци на препарат снижаетс и имеют место обратные побочные эффекты, включа дискинезию, переменчиьос1ь эффективности в течение дн (повышенный- пониженный эффект), и психиатрические симптомы, такие как состо ни дизор гч тд- ции во времени, параной и галлюцинации.

Этот ослабл ющий эффект при лечении L- Доп обусловлен р дом факторов, включа естественное прогрессирование заболевани , альтернацию допаминовых рецепторов вследствие повышенного продуцировани допэмина или пониженных концентраций метаболитов допамина и фармакокинетиче- ские проблемы поглощени L-Допа.

Дл того чтобы устранить недостатки лечени препаратом L-Допа. были предложены различные способы лечени , в которых L-Допа комбинируетс с ингибиторами МАО с целью снижени метаболического распада свежеобразованного допамина. МАО существует в двух известных формах МАО-А и МАО-В. которые обладают избирательностью дл различных субстратов и ингибиторов. Так, например, МАО-В более эффективно метаболизирует субстраты такие как 2-фенилэтиламин. и он избирательно и необратимо ингибируетс С-)-де4 енилом

Однако следует подчеркнуть, что комбинаци L-Допэ с ингибитором как МАО-А, так и МАО-В нежелательно приводит к обратным побочным действи м, св занным с по- ВЫШРННОЙ концентрацией катехоламинов по всей центральной нервной системе. Кро- |ис того, полное ингибировэние МАО также HI-желательно, поскольку оно усиливает депствие симпатомиметических аминов, таких как тирамин. привод щих к так называемому сырному эффекту

Поскольку МАО-В, как было показано, вл етс преобладающей формой МАО в головном мозге, то избирательные ингибиторы этой формы могут рассматриватьс как возможный путь снижени разложени допамина с. одной стороны, вместе со снижением до минимума системных эффектов общего ингибировэни МАО, с другой стороны .

Один из этих избирательных МАО-В ингибиторов (-)-депренил, был тщательно изучен и использован как МАО-В ингибитор дл усиленно обработки препаратом L-Допа. Э ги обработка (-)-депренилом обычном благопри тна она не вызывает сырного эффекта при дозах, привод щих почти к полному ингибированию МАО-В, Кроме того введение (-)-депренипэ в комбинации со смешанным ингибитором L-Допа и декар- боксил-ззы в организм пациентов с болезнью Поркинсона приводит к повышению акинезии и к общей функциональной емкости , а также к устранению изменений типа повышени -снижени .

Гасим образом (-)-депренил повышает и удлин ет эффект L-Допа и позвол ет снизить дозу L-Допа, в результате чего ограни- чиваюс обратные эффекты лечени L-Допэ.

Однако (-)-депренил сам имеет нежелательные побочные действи , которые включают активацию уже имеющейс звы желудка и возможные гипертонические влени . Кроме того, (-)-депренил вл етс амфетаминовым производным и метаболи- зируетс . дава в результате амфетамин и метамфетамины, которые могут привести к нежелательным побочным действи м, вы- зыванным этими веществами, например к повышенной частоте сердцебиени .

Известны и другие соединени , которые вл ютс избирательными необратимыми ингибиторами МАО-В, но которые не имеют нежелательных действий, св занных с (-)-депренилом. Одно такое соединение, а именно г -пропаргил-1-аминоидан. HCI (рацемический PAI.HCI)(патенты Великобритании N 1003686) и № 1037014 и патент США № 3513244). Это сильнодействующий избирательный необратимый ингибитор МАО-В, не метаболизируетс до амфетаминов и не дает нежелательных симпатомиметических эффектов.

В сопоставительных испытани х на животных рацемический PAI показал значительное преимущество по сравнению с (-)-депренилом, так, например, рацемический PAI не приводит к значительной тахикардии , не повышает кров ное давление (эффекты, создаваемые дозами 5 мг/кг (-)- депренила) и не приводит к сокращению моргательной мембраны и к увеличению частоты сердцебиени при дозах вплоть до 5 мг/кг (эффекты, вызванные (г)-депренилом при дозах более 0,5 мг/кг). Кроме того, рацемический PAI.HCI не вызывает усилени действи тирамина на сердечно-сосудистую систему.

Целью изобретени вл етс разделение рацемических PAI соединений и получение энантиомера с ингибирующей активностью МАО-В.

Поскольку депренил имеет такую же структуру, так и PAI, и поскольку, как известно , (-)-энантиомер депренила, то есть (- депренил значительно более фармацевтически активен, чем (+)-этантиомер. то лишь (-) этан- тиомер PAI будет вл тьс активным МАО-В ингибитором.

Однако в противоположность этим эффектам при разделении энантиомеров было найдено, что согласно изобретению (+}-PAI энантиомер вл етс фактически активным МАО-В ингибитором, в то врем как (-) энантиомер обладает чрезвычайно низкой МАО- В ингибирующей активностью. Кроме того, (+)PAI энантиомер обладает значительно более высокой степенью избирательности дл МАО-В ингибировани , чем соответствующа рацемическа форма, и может таким образом иметь менее нежелательные по- 5 бочные действи при лечении указанных заболеваний . Эти выводы основаны на экспериментах, проводимых в услови х ин виво и ин витро.

Было показано, что (+)-PAI имеет право0 вращающую R абсолютную конфигурацию. Это было впервые обнаружено на основании структурной аналогии с депренилом и амфетаминами.

Отмечена также высока степень сте5 реоизбирательности фармакологического действи между R (+)-PAI и S (-)энантиоме- ром. Соединение R (+}-PAI примерно на четыре пор дка величины более активно, чем S (-)энантиомер в соотношении МАО-В инги0 бировани . Это отношение значительно больше, чем то. которое наблюдаетс между двум депрениловыми энантиомерами. Кроме того, при осуществлении некоторых физиологических испытаний (+) депренил

5 показал такую же или даже еще более высокую активность, чем (-)энантиомер.

М-Метил-Ы-пропаргил-1-аминоиндал (MPAI) вл етс более сильным ингибитором действи МАО, но с более низкой изби0 рательностью к МАО-В, чем к А. В этом случае обнаружено лишь небольшое различие относительных активностей двух раздел емых энантиомеров, что еще более подчеркивает замечательный эффект дл

5 случа R (+)-PAI (см.табл.1 А).

Соединение R (+)-PAI. отвечающее данному изобретению, обладает способностью восстанавливать пам ть, благодар чему оно может использоватьс дл лечени за0 болеваний, св занных с потерей пам ти, слабоумием и особенно полезны дл лечени болезни Алцгеймера, дл лечени депрессии и гиперактивного синдрома у детей.

5Изобретение охватывает новое соединение R (+)-энантиомер М-пропаргил-1-ами- ноиндана R (+)PAIJ формулы I

50

N-CH2-C CH н

и его кислотно аддитивные соли, пригодные дл фармацевтического использовани . Изобретение охватывает также приготовление препарата R (+JPAI, фармацевтических композиций, содержащих соединение R (+)PAI вместе с подход щими носител ми, и использование R (+)PAI дл лечени людей с болезнью Паркинсона, с потерей пам ти,

слабоумием типа болезни Алцгеймера и гиперактивным синдромом. R (-t)PAI может быть получен путем оптического разделени рацемических смесей R и S-энантио- мера PAI. Такое разделение может осуществл тьс общеприн тым способом разделени . Это разделение может осуществл тьс , например, путем препаративной хроматографии в хиральной колонке Другим примером возможного способа разделени вл етс получение диастерео- изомерных солей с хиральной кислотой, такой как винна кислота, блочна кислота, миндальна кислота или М-эцетиловые производные аминокислот, такие как N-аце- тиллейцин, с последующей перекристаллизацией дл выделени диастереопзомерной соли желаемого R энантиомера.

Рацемическа смесь R и S энлнтиоме- ров PAI может быть получена как например, описано в патентах Великобритании № 1003676 и N 1037014. Рацемическа смесь PAI может быть получена также в результат э химического взаимодействи 1-хлориндана или 1-броминдана с пропаргиламином. Как другой возможный вариант, рацемат может быть получен путем химического взаимодействи nponapiиламина с Ч-индунонсм с образованием соответствующего имина; с последующим восстановленирм /глеродо- азотной двойной св зи имина соответствующим агентом, таким как боргидоид натри .

Согласно изобретению, R энантномер PAI может быть получен также ; епосредст- венно из оптически активного R-энантиоме- ра 1-аминоиндана путем реакции с пропаргилбромидом или пропаргилхлори- дом в присутствии органического или неорганического основани и при желании в присутствии подход щего растворител ,

Подход щими органическими или неорганическими основани ми дл использовани в указанной реакции вл ютс , например, тризтиламин. пиридин, карбонаты или бикарбонаты щелочною металла и т.д. Если реакци протекает в присутствии растворител , то этим растпоритетем может быть, например, толуол, метиленхло- рид и ацетонитрил. Предпочтительным способом получени указанного соединени вл етс реакци между R-1-ами- ноинданом и пропаргилхлоридом с использованием с использованием бикарбоната кали как оснований иацегонитрила как растворител .

Указанна реакци 1-аминоиндинз обычно приводит к образованию смеси непрореагировавшего первичного амина, желаемого вторичного амина и третичного

амина N N-биспропэргилэмина. Желаемый вторичный амин то есть М-пропаргил-1- аминоиндон, может быть выделен изданной смеси общеприн тым способом разделени . таким как хроматографи , отгонка, избирательна экстракци и т.д.

Исходный материал R-1-аминоиндан может быть получен известными способами (Европейский патент N 235590).

0R-1-Аминоиндан может быть также получен путем разделени рацемической смеси R и S энантиомеров, например путем образовани диастереоизомерных солей с хиральными кислотами, или другими изве5 стными способами.

Как другой возможный вариант, исходный материал R-1-аминоиндан может быть получен путем реакции 1-инданона с оптически активным амином с последующим

0 восстановлением углеродо-азотной двойной св зи полученного имина путем гидрогенизации над подход щим катализатором. таким как палладий на угле, окиси платины, никель Рэкел и т.д. Подход щими оптически

5 активными аминами вл ютс , например, один иг, антиподов фенетиламина или сложного эфира аминокислоты, такой как валин или фенилаланин. Далее бензилова N-C св зь может быть расщеплена путем гидро0 тонизации в услови х неинтенсивного перемешивани .

Другим способом получени R-1-амино- индана вл етс гидрогенизаци оксимо- вых простых эфиров индан-1-она, где

5 алкильна группа эфира имеет оптически чистый хиральный центр. Согласно другому возможному варианту, нехиральное производное индан-1-она, содержащее углеро- до-азотную двойную св зь, например

0 амин или оксим, может быть восстановлено восстановителем хирального соединени , таким как комплексное соединение гидрид лити -алюмини и эфедрин. Дл получени фармацевтически пригодных

5 кгслотно-аддитивных солей соединени R (+)РА1 свободное основание может химически взаимодействовать с желаемыми кислотами в присутствии подход щего растворител подход ща ми способами. Аналогичным обра0 зом кислотно-аддитивна соль может быть превращена в форму свободного основани известным образом.

Согласно изобретению, соединение R (+)РА1 может быть приготовлено в форме

5 композиции. Такие композиции могут включать соединени R (+)PAI или его кислотно аддитивные фармацевтически пригодные соли вместе с фармацевтически пригодными носител ми и/или эксцепиентами. Например , эти композиции могут быть

приготовлены в виде Форм дл приема орально, парэнтерально, через пр мую кишку или трансдермально. Подход щими формами препарата дл орального ввода вл ютс таблетки, спрессованные или с нанесенными покрыти ми пилюли, драже, лепешки , твердые или м гкие желатиновые капсулы, предъ эычные таблетки, сиропы и суспензии; дл парэнтерального ввода согласно данному изобретению предусматриваютс ампулы или флаконы, содержащие водный или не водный раствор или эмульсию; дл ввода через пр мую кишку предусматриваютс свечи с гидрофильными или гидрофобными носител ми; и дл локального нанесени в виде мазей и дл трансдер- мального ввода предусматриваютс специальные средства ввода, известные в данной области

Указанные композиции могут использоватьс как таковые дл лечени болезни Паркинсона. заболевани Алцгеймера или депрессии, или же в случае болезни Паркинсона они могут использоватьс в сочетании с обычными процедурами лечени препаратом L-Допа.

Предпочтительные дозы активного ингредиента , то есть соединений R-PAI в указанных композици х наход тс в следующих пределах: дл орального ввода или ввода в виде свечей. 2-20 мг на единичную дозу, вводимую ежедневно, и более предпочтительно 5-10 мг на единичную дозу , вводимую ежедневно, дл инъекционно вводимых препаратов 1-10 мг/мл на единичную дозу, вводимую ежедневно, и более предпочтительно 2-5 мг/мл на единичную дозу, вводимую ежедневно

На фиг. 1-3 показано графическое воспроизведение результатов согласно примеру 19; на фиг. 4-11 - то же, по примеру 20; на фиг. 12-15 - то же, согласно примеру 21; на фиг. 16 - то же согласно примеру 22.

Пример 1. Рацемический хлоргидрат N-пропаргил-1-аминоиндан а

Рацемический 1-аминоиндан (10,0 г) и 10,4 г карбоната кали ввод т в 75 мл ацето- нитрила. Полученна суспензи нагреваетс до 60°С и ввод тс по капл м 4,5 г пропаргилхлорида.

Смесь перемешиваетс при 60°С в течение 16 ч. после наибольша часть летучих веществ удал етс путем отгонки в вакууме. Остаток от отгонки распредел етс между 10%-ным вводным раствором гидрата окиси натри и метиленхлоридом. Органическа фаза высушиваетс , растворитель удал етс путем отгонки Остаточный продукт подвергаетс испарительной хроматографии на силикагеле с использованием дл элюировани смеси 40% этилацетат и 60% гексана. Фракции, содержащие желаемое соединение в виде свободного основани , соедин ютс и элюант вытесн етс простым 5 эфиром. Эфирный раствор обрабатываетс газообразной HCI, образующийс осадок извлекаетс путем Фильтрации с отсосом и перекристзллизовываетс из изо- пропанола с образованием 7.3 г желаемого

0 конечного соединени с т-рой плавлени 182-184°С

Данные хроматографического и спектроскопического анализа соответствуют опубликованным в литературе данным

5 (США № 3513244) и аутентиому образцу.

ЯМР((3, ): 2,45 (2Н, м), 2,60 (1Н, т), 2.90(1Н,м), 3,45(1 Н,м),3,70(2Н,д), 4,95(Ж. т), 7,5 (4Н, м) ч/млн.

Пример 2. Хлоргидрат 5-(-)-М-Пропэр0 гил-эминоиидана.

Указанное желаемое соединение в форме свободного основани извлекаетс путем разделени рацемической смеси свободного основани из примера 1 на Хи5 рацеле OJ (целлюлозо-трис пара-метилбен- зоат) в колонке препаративной жидкостной хроматографии высокого разрешени при элюировании смесью 10% изопропанола/ /90% гексана и с извлечением первого элю0 ированного основного пика. Полученное масло превращаетс в конечное желаемое соединение (хлоргидрат) путем обработки 10%-ного диэтилэфирного раствора данного масла газообразным HCI. полученный

5 осадок извлекаетс путем фильтрации с отсосом

-29,2 (1%, этианол). Т-ра плавлени 182-184°С Другие данные хроматографического и спектроскопического анализа

0 идентичны данным дл хлоргидратной соли соединени из примера 1.

Пример 3. Хлоргидрат Я-(+)-М-Про- паргил-1-аминоиндана.

Конечное желаемое соединение получа5 ют таким же образом, как описано в примере 2, с той разницей, что извлекаетс второй элюированный пик из колонки препаративной жидкостной хроматографии высокого разрешени

0 «Ь +29,1° (0,8%, этанол), т-ра плавлени 179-181°С. Другие данные хроматографического и спектроскопического анализа идентичны этим данным дл хлоргидратной соли соединени из примера 1.

5П р и м е р 4. Хлоргидрат R-{+)-N-nponapгил-1-аминоиндана .

R-(-)- 1-аминоиндан (12,4 г) и 12.9 г карбоната кали ввод т в 95 мл ацетонитрила. Полученна суспензи нагреваетс до 60°С

и вводитс по капл м 5,6 г пропэргилхлори- да. Смесь перемешиваетс при 60°С в течение 16 ч. после чего наибольша часть летучих удал етс путем отгонки в вакууме. Остаточный продукт отгонки распредел етс между 10%-ным водным раствором гидрата окиси натри и метиленхлоридом.

Органическа фаза высушиваетс и растворитель удал етс в вакууме, полученный в остатке продукт подвергаетс испарительной хроматографии на силикагеле при элю- ировании смесью 40% этилацетага (60%) гексана. Фракции, содержащие свободное основание конечного желаемого соединени , соедин ютс , растворитель сытесн ет- с простым эфиром. Эфирный раствор обрабатываетс газообразным HCI и полученный осадок извлекаетс путем фильтрации с отсосом и пеоекристзллизо- вываетс из изопропанола. в результате получаетс 6,8 г конечного желаемого соединени , т-ра плавлени 183-135°С. « о +30,90 (2%. этанол). Данные спектрального анализа идентичны данным дл соединени из примера 1.

Пример 5. Хлоргидрат S-(-)-N-nponap- гил-1 -аминоиндэна

Данное желаемое соединение получают способом, описанным в примере 4, с той разницей, что в качестве исходного материала используетс 5-()-1-амичг 11ндэн Данный продукт имеет значение -30,3 (2%. этанол), т-ра плавлени составл ет 183- 185°С. Данные спектрального анализа идентичны этим данным дл соединени из примера 1.

Пример 6. Ди(Я-{-|)-Ы-пропаргил-1- аминоиндан) L-тартарат.

В раствор L-тартаровой кислоты (4 А г) в 48 мл кип щего метанола ввод т раствор Р-(+)-Ы-пропаргил-1-аминоинданового свободного основани (5.0 г) в метаноле (48 мл). Раствор нагреваетс с обратим оподиль- ником и в него вводитс 284 мл трет-бутил- метилового простого эфира в 20 мин. Смесь нагреваетс дополнит ьно в течение 30 мин, охлаждаетс , слученный осажденный продукт извпекаето.ч путем фильтрации с отсосом, в результате полу1«а- етс 6,7 г конечного желаемого соединени

Т-ра плавлени 175-177°С.

(1,5, НаО) +34,3; Данные элементарного анализа Рассчитано дл C28H320eN2, %: С 68,26 Н 6.56, N 5 Г9 Найдено , %: С 68,76: Н 6,57: N 5,61

Пример 7 Хлоргидрат . метпл- М-пропаргил-1-аминоичдэна

Р-(+)-Ы-пропаргил-1 -аминоиндан о форме свободного основани из примера 4 (1.2 г), карбонат кали {0,97 г) и метилиодид (1 0 ввод т в 15 мл ацетона, полученна суспензи нагреваетс с обратным холодильником в атмосфере азота в течение 8 ч, После этого летучие вещества удал ютс

при пониженном давлении, остаточный продукт распредел етс между 10%-ным водным раствором гидрата окиси натри (30 мл) и метиленхлоридом (30 мл). Органическа фаза высушиваетс и растворитель удал етс а вакууме. Остаток этого удалени подвергаетс испарительному хроматогра- Фическсму разделению на силикагеле с элю- ированием смесью 40% этилацетата /60% гексана. Фракции, содержащие конечное

желаемое соединение в форме свободного основани , соедин ютс и растворитель вытесн етс простым диэтиловым эфиром. Эфирный раствор обрабатываетс газооб- разчым HCI, летучие вещества удал ютс в

ьэкууме и остаточный продукт перекристал- лизовываетс из изопропанола, в результате получаетс 400 мг конечного желаемого соединени в виде белого кристаллического твердого вещества с т-рой плавлени 134136°С а о +31,40 (этанол), ЯСР (д CDCb): 2.55(2Н.м.).2.7(1Н,ц|.с):2.8(ЗН.с):3.0(1Н, м), 3 4 (1 Н, м); 3,9 (2Н, ш.с.); 5,05 (1Н. м); 7,7 f44, м ч/млн.

П р и м е р 8. Хлоргидрат 3-(-)-М-метилГ пропаргил-1-аминоинданз.

Указанное желаемое соединение получаетс так же. как и в примере 7, с той разницей, то в качестве исходного материала используетс 5-(-)-Ы-пропаргил-1-аминоиндан (в форме свободного основани ) из примера 5 Все данные физического и спектрального анализа данного конечного соединени идентичны данным соединени из примера 7, за исключением того, что

- 3-1,9° (этанол).

Пример 9. Таблеточна композици ,

NT

Хлоргидрзт R (+)-N-nponap- гил-1-аминоиндана5,0

Предварительно желатинизироьаиный крахмал47,0

Водна лактоза66,0

Микрокристаллическа целлюлоза20,0

Гликол гнатриевого

крахмала3,0

Т г Льк1,5

Стезрат магни 0,7

Очищенна вода, вводима согласно

требованию дл гранулировани .

Пример 10. Таблеточна композици , мг:

Хлоргидрат R(+)-N-nponapгил-1 аминоиндана1,0

Водна лактоза50,0

Предварительно желатинированный крахмал36.0 Микрокристаллическа целлюлоза14,0 Гликол т натрийкрахмала 2,2 Тальк1,0 Стеарат магни 0,5 Очищенна вода, вводима согласно ребованию дл гранулировани .

Пример 11, Капсульнэ композици , г:

Хлоргидрат R(+)-N-nponap- гил-1-аминоиндана5.0

Предварительно желатинированный крахмал10,0 Крахмал 44,0 Микрокристаллическа целлюлоза 25.0 Этилцеллюлоза 1.0 Тальк 1.5 Очищенна вода, вводима согласно ребованию дл гранулировани .

Пример 12 Инъекционна композии , мг:

Хлоргидрат R(+)-N-nponap- гил-1-аминоиндана5.0

Безводна декстроза41,0

HCI, вводимый до величины рН 5 Очищенна вода, вводима согласно ребованию дл 1 мл

Пример 13 Инъекционна композии , мг:

Хлоргидрат R(+)-N-nponap- гил-1-аминоиндана1,0

Хлорид натри 6,9

HCI, вводимый до величины рН 5 Очищенна вода, вводима согласно ребованию дл 1 мл.

Пример 14. Инъекционна композии , мг:

Хлоргидрат Р(+)-М-пропаргил- 1-аминоиндана2.0

Хлорид натри 8.9

HCI, вводимый до величины рН 5 Очищенна вода, вводима согласо треованию дл 1 мл.

Пример 15. Сиропна композици , г:

Хлоргидрат R(+)-N-nponap- гил-1-аминоиндана5,0

Сахароза2250.0

Натрийсахарин.5,0

Метилпарабен6,0

Пропилпарабен1.0

Вкусовое вещество20.0

Глицерин USP500

Спирт 95%-ный, USP200

Очищенна вода согласно требованию о 5 мл.

П р и м ер 16. Подъ зычные таблетки.

0

5

Хлоргидрат R(+)-N-nponsp- гил- 1-аминоиндана Микрокристаллическа целлюлоза Водна лактоза Предварительно желатинированный крахмал Повидон Окрашивающее вещество

2.5

20,0 5:0

3.0 0,3

Незначительное количество То же

Вкусовое вещество Подслащивающий гент Тальк0,3

Смешивают эксципиенты и активный ингредиент и осуществл ют гранулирова- 0 ние вместе с этанольным раствором Пови- дона. После сушки и взвешивани осуществл етс перемешивание с тальком и прессование.

Пример 17. Подъ зычные таблетки 5 PAI. мг:

Хлоргидрат R(+)-N-nponap- гил-1-аминоиндана5,0

Микрокристаллическа целлюлоза15.0

0Предварительно желатинированный крахмал12.0

Этилцеллюлоза0,3

Тальк0,3

Очищенна вода, вводима согласно 5 требованию дл гранулировани .

Пример 18. Таблеточна композици , мг:

Хлоргидрат R(+)-N-nponap- гил-1-аминоиндана5,0

0 Леводопа (-)-3-3,4-диоксифенилаланин100 ,0

Карбидопэ25,0

Предварительно желатинированный крахмал24,0 5 Крахмал 40.0 Микрокристаллическа целлюлоза 49.5 Краситель D и С желтый № 10 0.5 Краситель D и С желтый № 6 0,02 0 Спирт USP, вводимый по согласно требованию дл гранулировани .

Приведенные ниже примеры, таблицы и рисунки относ тс к биологическим экспериментам осуществл емым согласно изо- 5 бретению.

Пример 19. Ангибирование действи МАО в услови х.ин витро. Процедура эксперимента .

Источником фермента МАО вл етс го- могенат головного мозга крысы в 0,3 мол

сахароза, котора центрифугируетс с ускорением 600д в течение 15 мин. Поверхностный слой разбавл етс примерно о 0,05 мол. буферном растворе фосфата и предварительно инкубируетс с последовательными разбавлени ми соединений общей формулы I: R (+}-PAI, S (-)-PAI и рацемическим -PAI в течение 20 мин при 37 С, Затем ввод тс моченые С субстраты (2-фенилэтиламин, далее будет называтьс PEA; 5 окситрип- тамин, далее будет называтьс 5-НТ), и инкубирование продолжаетс еще в течение 20 мин (PEA) или в течение 30-45 мин (5-НТ). Используемые концентрации субстрата составл ют 50 мкмол (PEA) и 1 ммол (5-НТ). В случае PEA концентраци фермента выбираетс таким образом, чтобы в оде проге- кани , реакции метаболиэировалось не более чем 10% субстрата. Затем реакци прекращаетс путем ввода транилципро- мина(до конечной концентрации 1 ммол), и инкубат фильтруетс через небольшую колонку с Амберлитом СС-50, доводитс до буферного раствора с величиной рН 6,3. Колонка промываетс 1,5 мл воды, элюаты сливаютс , методом жидкостной сцинтил- л ционной спектрометрии определ етс степень оэдиакгивности Постл ку ами- ноеые субстраты полностью сохран ютс в колонке, радиоактивное ь ЭАКХНГЭ пел-а- зывает продуцирование нейтральных и кислотных метаболитов, обоо уемы кз: результат действи МАО. Дейг-епе МАО в образце выражаетс как процент ксстроп,- нойактивности при огсутотоь1/ ингибиторов после вычитании соответствующих ний холостой пробы Т кое действие которое определ етс с использованием PEA как субстрата, относитс г №АОР, действие , которое определ етс с использованием 5-НТ, относитс к МАО-А

Результаты

Изучаетс по отдельности в ycvoei i ин витро ингибирующее действие R (t-/-PAI, S {-)-РА1 и рацемических PAI С тр- ин мий формулы I, и результаты типичных np. д«нных экспериментов показаны нл фиг. } и 2. Весь эксперимент повтор ете -ри ,/азг Концентраци ингибитора, дают о 50%- ное ингибирование метаболизма у(5о, тз (1С-50) рассчитываетс по крш-ыг п.гиОи ровани , и представлена в таГ)/1 1 i i -лил данных видно, что.

(a)R (+)-РА в два раза активное рацемата дл ингибировани МАО-В;

(b)R (+)-РА1 в 29 раз активнее дл:- инги- бировани МАО-В, чем МАО-А,

(c)S (-)-PAI составл ет лишь 1/Ь СЮО от активности R (+)-PAI дл ингиоипс,,эчи МАО-В и про вл ет небольшую или совсем

не про вл ет избирательности между МАО- В и МАО-/В та.ш 1А представлены результаты этого же эксперимента с использованием

К(т)и S(-)MPA1 (М-метил-Ы-пропаргил-1-ами- моиндана) Каждый из энантиомеров MPAI менее избирателей между ингибированием МАО-В и МАО-А, чем R (+)PAI. Кроме того, R (-)MPAI лишь в п ть раз более антивен, чем

S (-)МР L отношении ингибировани МАО- 6 ь противоположность R (+)PAI, который примррно в 7000 раз более активен, чем S (-)РА в данном испытании.

Проводились также некоторые эксперименты с кортикальными ткан ми человеческого головного мозга, вз тыми через 6 ч посла смерти, обработанными как описано више. Резу ,таты такого эксперимента приведены на Фиг 3 (где R(+)PAI, S(-)PA и рацег .ическии PAI соединени - это соединени . эквивалентные формуле 1.

П р и м е р 20. Ингибирование действи МАО в услови х ин виво: неотложное лечение Процедура эксперимента.

Крьсы (самцы разности SpragueDawley ) массой 250±20 г обрабатываютс o;4n/iv и чнаншомеров или рацемической ормо 1 РА| ./сем внугрибрюшинной инъекции (ip,t или орального ввода путем подачи

epc j зпн/4 (рс) и обсзглэоливаютс соот- с ic через 1 ч или через 2 ч, опреде- лл отсч действие МАО в головном мозге и в ,им указанным способом. Коли- (.°сгео бел d при каждом инкубированииопр«дйл етс- методом Folin-Lowry, активность Фермента рассчитываетс как нмол метабо- лиэирован| ого субстрата на час инкубации дл мг белка. Действие МАО в тка- linx ЖИБО.НЫХ, обработанных ингибиторами , выражаетс как процент ферментного дсйг а группе контрольных животных, с введенным носителем (вода дл орального p r 0;j4, п П , ный солевой раствор дл внут- pii6ootu 4o:/i инъекции, Ip) и которые умерL MT-iMrO i ак указано. Ре л /чл&ты.

Ни ОДНР из дозировэннь х концентра- . испг.льзуемых с лекарствами иигибито- рами, н давала каких-либо вных

n Ms r ,шй к поведении.

.. -маты представлены на фиг. 4-11. После ргутрибрюшинного ввода соединение R (t-)-PA давало 90%-ное ингибирова- ниг действи МАО-В при дозе 0,5 мг/кг. Та

же сама доза давала лишь 20%-ное инги- бированиь действие МАО-А. В случае орального ирода та же доза R (+)-PAI давала 80%-лое инп-бирование МАО-В без замет- iioso инги прЗВУНИЯ МАО-А. В основном получены о/ 1наксвые результаты дл ингибировани печеночного МАО как и дл мозгового МАО. Обеспечиваемое указанными дозами 50%-ное ингибироеание МАО-А и МАО-В (1С-50) рассчитывалось по кривым ингибировани и показано в табл. 2. Эти данные показывают:

(а)что ингибирующее действие соединени R (+)-РА1 на МАО сохран етс в организме крыс в услови х ин виво,

(б)что в услови х ин виво сохран етс избирательность ингибировани МАО-В, а не МАО-А соединением R (+)-РА1,

(c)что в услови х ин виво сохран етс значительно более высока активность действи (+)-энантиомера по сравнению с (-)- энантиомером,

(d)что данные соединени эффективно поглощаютс после их орального ввода в организм,

(e)что данные соединени эффективно проход т через гематоэнцефалический барьер и эффективно ингибируют МАО мозга . Тот факт, что R (+J-PAI примерно в два раза активнее рацемического соединени в отношении ингибировани МАО-В вл етс показателем чрезвычайно низкой активности S(-)-PAI в отношении ингибировани МАО-В.

Пример 21. Ингибированиедействи МАО в услови х ин длительное лечение .

Процедура эксперимента.

Крысы (те же. что в примере 20: по 4 животных на каждую дозированную порцию ) подвергаютс обработке соединением R{+)-PAI или рацемической формой трем дозированными порци ми (0.05: 0,1 и 0,5 мг/кг) путем орального ввода, по одной дозе в день в течение 21 дн . затем их обезглавливают через 2 ч после ввода последней дозированной порции. Действие МАО типов А и В определ етс в головном мозге и в печени как описано в примере 20

Результаты.

Соединение R(+)-PAI. вводимое дозой 0,1 мг/кг. ежедневно дает хорошую степень избирательного ингибировани МАО, составл ющую более чем 80% дл МАО-В в головном мозге и 20% и менее дл МАО-А в головном мозге. При более высокой дозе, составл ющей 0,5 мг/кг в день, МАО-А все еще ингибруетс менее чем на 50% (фиг. 12 и 13). Печеночный МАО показывает аналогичную степень избирательного ингибировани (фиг. 14 и 15). Соединение R(+)-PAI также вл етс более сильным, чем рацемический , форма ингибитора примерно в два раза.

В случае МАО головного мозга: R(+)-PAI имеет более высокую степень избирательного ингибирующего действи на МАО-В, чем рацемическа форма соединени .

Эти результаты показывают, что после длительного лечени данными соединени ми избирательность ингибировани МАО-В может сохран тьс . Как и в случае других необратимых ингибиторов, степень ровани фермента больше при длительных лечени х, чем после ввода единичной дозы

0 лекарства. Соединение R(+)-PAI имеет более высокую степень избирательности ингибировани МАО-В головного мозга, чем рацемическое соединение.

Пример 22. Необратимый характер

5 ингибировани МАО.

Процедура эксперимента. В организм крыс, по четыре крысы в каждой группе, вводитс одиночна доза соединени R(+)-PAI (1 мг/кг), животные умер0 щвл ютс через 2. 6, 18, 24, 48 и 72 ч. Действие МАО-В определ етс на всех ткан х головного мозга, как описано выше. Результаты. Результаты представлены на фиг. 16.

5 Максимальное ингибирование МАО-В достигаетс через 6 ч после инъекции. Действие МАО доходит лишь до 30% контрольного действи через 72 ч после инъекции . Данный эксперимент показывает не0 обратимый характер ингибировани МАО соединением R(+)-PAI.

Пример 23. Усиление сосудосуживающего эффекта тирамина у наход щихс в сознании крыс. Процедура эксперимента.

5 В организм крыс вводитс смесь пен- тобарбитал (30 мг/кг) и хлоральгидрате (1200 мг/кг) путем внутрибрюшинной инъекции . Лева сонна артери и ремна вена каннюлируютс посредством тонкой

0 полиэтиленовой трубки (сонна артери ) или тонкой трубки из силиконовой резины, подсоединенной к полиэтиленовой трубке (вена), периферический конец которой подводитс под кожу к фиксирующей точке

5 позади шеи. Трубка заполн етс гепарини- зироеанным солевым раствором.закупориваетс тонким стальным стержнем. Животные подвергаютс обработке 20 мг хлорамфеникола путем внутримышечной

0 инъекции и затем им дают выздороветь после этой операции в течение ночи. На следующий день крыс помещают в емкость с высокими стенками дл возможности их свободного передвижени . Артериальный

5 катетер подсоедин етс к датчику давлени через наполненную солевым раствором по- . лиэтиленовую трубку длиной 100 см с узким отверстием, венный катетер подсоедин етс к шприцу (1 мл) через трубку такой же длины, котора вместе со шприцем содержит раствор хлоргидрата тирамина в физиологическом растворе (1 мг/мл)

После периода уравновешивани , составл ющего 30-40 мин осуществл ютс инъекции тирамина (50 или 100 мкг) и за- мер ютс значени кров ного давлени Продолжительность времени между инъекци ми составл ет не менее чем 15 мин после доведени кров ного давлени до контрольных показателей Устанавливают- с контрольные сосудосуживающие реакции , затем путем внутрибргошинной инъекции вводитс один из препарата реакции на терамин повтор ютс в течение следующих 4 ч Находитс площадь под кри- вой реакции на кров ное давление и определ етс отношение этой площади после обработки к этой площади до обработки с использованием среднего значени 3-4 показаний , полученных с контрольный пери- од, и через 1-3 ч после инъекции данных соединений.

Результаты

Результаты представлены в табл 3 Соединение R(+)-PAI, вводимое дозой 1 мг/кг (которое вызывает полное ингибирование МАО-В в головном мозге и в печени), не вызывает эначитеаьного усилена сссудо суживающей реакции на тирамии Пр более высокой дозе соединени R{H-PM, составл ющей 5 мг/кг (котора приводит к более сильному ингибированию МАО-В в головном моаге и в периферических ках), наблюдаетс значительное ус.- сосудосуживающей реакции на тирам i 1 ко тора по своей силе зизлогична реакции 1 . ту же дозу депренила, и меньше, чем peai ци на хлоргилин (при дозе, которс ингиб.- рует действие МАО-А в печени более чем ма 85%.

Из данного эксперимента мож о сделать вывод, что соединение R(-«}-PA но вызывает усилени сосудосуживающего эффекта тирамина при дозах, которые эффективно гнги- бируют МАО-В

Пример 24 Подавление индуциро ванной МРТР допаминергичрской током ности посредством R(+)-PA

1 Метил-4-фенил-1 2 3,6-гетрлгидропи- ридин (МРТР) вл етс нейроточсином ко- торый повреждает нигростриагн о / CTJMH- нергические нейроны у мчнь х млекопитающих животных вкл ОЧПР мм ьой, и создает синдром паркинсонизма у .лов - ка и приматов Критически вэж н 1 ный этап механизма нейротокси псы заключает в себе конверсию в его токсической метаболит 1-мегил-4- енилпи- ридиновый ион (MPP-I-) Эта реакци кот лч зируетс ферментом МАО-В и по ыеи

веро тности протекает за пределами допа- минерпг-ес/их нейронов, а именно в ней- роглие Известно, что МРТР вл етс как субсгртюм так и необратимым ингибитором МАО-В Предварительна обработка экспериментальных животных ингибиторами МАО-Б такими как депренил или парги- лин предотвращает и защищает от вызванного МРТР повреждени нигростри- агных нейронов, поскольку блокируетс окислитольнап конверси МРТР в МРР+. Одна из основных существующих гипотез предпо/iaiaeT, что прогрессирующее вырождение нигростриатов у пациентов с болезнью Паркинсона может быть обусловлено воздействием образующихс вокружа- юших услови х экзогенных типа МРТР нейротоксинов, В таком случае имеетс дополнительное веское показание начала сис- томоги ILCKOTO лечени ингибитором МАО-В см заботевони Паркинсона на очень ранней (, гэдми в надежде, что этот препарат нейграппзуот повреждающие эффекты таких путагивных МРТР-типа токсинов и таким образом приостановит или снизит скорое,ь прогрессировани заболеваний Успешное действие препарата, ингибиру- юшеги лАО-В, обусловлено его способно- стью Олькирозать ьызванное МРТР потрем. нигростриатных допаминер- in-tecmx. нейронов в услови х ин виво. м( проведено испытание (-) и (+) энантиомироо PAI на их способность пред- GTipauiaTb или ослабл ть вызванные MDTn i пощени стриарного допамина у

МЬ Ц.СЙ

эксперимента.

Мыши разновидности черной породы ( 57 (мы г ой 20-25 г) подвергаютс инъекции МРТР hU (30 мг/кг) растворов в дистилли- ровчннпй веде, (подкожный ввод)или одним лишо нгс.аелем, или через час после пред- B4piiT тьной обработки изомерами (-) или (- Р/к| 2 5 мг/кг, внутрибрюшинный ввод) и/к-, Д1 п,,унилом (5 мг/кг, внутрибрюшин- HOJ i en ci 6 дней их обезглавливают. Уда- Л(ют головной мозг, полосатое тело i иД -л ьот на охлажденной льдом стекл н- , и iCTHHG и замораживают на сухом

ЬДУ

. полосатого тела гомогенизиругс 0 ч мол хлорной кислотен лишенные C iKi i -чп гсоти, содержащие диоксибен- и . в качестве внутреннего стандарта, at j,uir. 1руЮ|СЯ на допамин и его основной метаболит -- 3,4-диокси-фенилуксус- ную киг пу (ДОРАС) методом жидкостной хрома ог о 1фии высокого разрешени с оЫгр/ч онием электрохимическим методов

Се . /н таты

В табл. 4 представлены результаты данного эксперимента. Обработка одним лишь МРТР приводит к образованию характерного стриатного допамина (DA) и к истощени м DOPAC. Обработка (-) и (+) энантиомерами PAI или (-) депренилом не вли ет на концентрации стриатного DA. Предварительна обработка (-) изомером PAI не вли ет на вызванные МРТР концентрации DA и DOPAC в полосатом теле. (+) - изомер PAI, введенный до МРТР, полностью исключает снижение концентраций DA и DOPAC вызванных токсином, в полосатом теле. Придозе2,5мг/кгон по силе действи равен (-) депренилу (5 мг/кг) в отношении его защитного эффекта.

Указанные значени дл DA и DOPAC выражены как средние величины ±сред.отн.отд: число крыс (п) в каждой группе равно 7-11.

Данные результаты показывают, что R(+)-PAI вл етс прекрасным МАО-В ингибитором в услови х ин виво и особенно эффективен при лечении болезни Паркинсона.

Хот данное изобретение описываетс со ссылкой на изложенные примеры и отно- с щиес к ним рисунки и таблицы, они не вл ютс ограничением изобретени . Возможны различные модификации и различные области применени данного изобретени , например, соединени формулы I могут быть комбинированы синергетиче- ские с альфа-токоферолом (производное витамина Е) дл лечени болезни Паркинсона.

Пример 25. Вли ние энантиомеров PAI на вызванное амфетамином стереотип- мое поведение у постаревших крыс.

Амфетамин, как известно, индуцирует стереотипное поведение за счет мобилизации эндогенного допамина. Амфетамин не метаболизируетс МАО-В. Ингибироаание МАО-В посредством эффективного ингибитора и ввод амфетамина вызывает выделение допамина, который не подвергаетс раздрожению ингибированным МАО-В. Так, увеличение сипантического допамина происходит после ввода амфетамина и эффективного МАО-В ингибитора, привод щего к увеличению стереотипного поведени - усилени амфетаминового эффекта. Оценка этого поведени даетс в соответствии с числом латеральных головных вращений в течение одной минуты.

Процедура эксперимента.

Испытываемое соединение вводитс дозой 0,5 мг/кг/день в питьевой воде за 24 ч до начала гипоксии (92% азота + 8% кислорода в течение б ч). После этого вводитс амфетамин путем подкожной иньекции дозой 0,5 мг/кг, спуст 45 мин подсчитываетс латеральные головные движени .

Результаты данных экспериментов показаны в табл. 5.

Данные в скобках показывают число подвергнутых испытанию животных Р 0,001 по отношению к необработанной подвергнутой кислородному голоданию группе или необработанной контрольной группе соответственно.

Результаты, приведенные в табл. 5, показывает , что (+)PAI вызывает значительное усиление вызванного амфетамином стереотипного поведени как у поврежденных кислородным голоданием, так и у контрольных крыс. (-)РА в этом отношении совершенно неактивно. Такое поведение в услови х ин виво подтверждает результаты предыдущих биохимических исследований в том, что (+)PAI вл етс активным ингибитором МАО-В в головном мозге, в то врем как (-)PAI в этом отношении вл етс неактивным .

Пример 26. Вли ние R(+)-PAI на улучшение или восстановление пам ти.

Новорожденных крыс т подвергают кратковременному зпиз.одическому кислородному голоданию и затем наблюдают их рост обычным путем с длительным повреждением их пам ти. Это повреждение пам ти про вл етс в ухудшении поведени при испытании на устранение пассивности. Если лекарство эффективно, оно увеличивает скрытый период реакции до вхождени в темный отсек или камеру, в которой ранее осуществл лась электросудорожна терапи на испытываемых крысах. Скрытый период максимальной реакции составл ет 300с.

Процедура эксперимента.

Молодых крыс подвергают послеродовому кислородному голоданию как описано в примере 27. Соединение R(+)PAI или S(-)PAI вводитс согласно одной из следующих процедур.

Процедура А:

В организм корм щей матери вводитс доза любого изомера 1-1,5 мг/кг/день в питьевой воде до окончани грудного кормлени через 21 день. После этого в откормленных грудным молоком крыс т ввод т ту же дозу в течение 20 дней. Обработка завершаетс на 40 день, испытание осуществл етс на 60-й день, то есть через 20 дней после ввода последней дозы лекарства.

Процедура В:

Доза препарата снижени до 0,5 мг/кг/ день, вводитс в организм корм щей матери до окончани грудного кормлени на 21 день, затем в молодых крыс т ввод т непосредственно дозу препарата до 60 дн , после чего начинаетс испытание.

Испытание на устранение пассивности

Аппаратура состоит из световой камеры , св занной с темной камерой и скольз щей дверцей, раздел ющей эти две камеры. Предварительно крысу помещают в свето- еую камеру на 30 с, затем дверцу открывают . Крыса перемещаетс в темную камеру с замедлением, которое регистрируетс . При входе крысы в темный отсек дверца закрываетс и на 3 с ей сообщаетс электроим- пульс 0.3 мА в ступню.

Сохранение (пам ти) определ етс через 48 ч путем повторени испытани и регистрации задержки перехода из световой камеры в темную камеру до произвольного максимального значени 300 с.

Результаты данных экспериментов представлены в табл. 6

Приведенные значени показывают задержку времени (в секундах) вхождени крысы в темную камеру, в которой испытываема крыса сначала подвергнута электросудорожному воздействию.

Экспериментальные результаты показывают , что (+)PAI, но не (-)PAI эффективно улучшении пам ти поврежденных кислородным голоданием и контрольных крыс Лекарства, про вл ющие активность в дачном испытании, могут быть полезны дл лечени различных расстройств пам ти слабоуми и особенно старческого сппбо уми типа болезни Алцгеймера

Пример 27 Вои ние R(+)PAI на вызванный кислородным голоданием -и- перактивный синдром у молодых крыс

Крыс подвергают кислородному ЮЛОДР- нию и затем они растут в нормальных услови х , про вл при этом повышенную двигательную активность на открытом пространстве в возрасте от 10 до 42 дней

Изучали вли ни R (1РА1 и S (-)А1 на гиперактивный синдром

Процедура эксперимента

Крыс т на первый день после гожченип подвергают кислородному голоданию и/ помещают в стекл нную камеру и подвергают воздействию 100% азота а течение 96

мин Их реанимируют путем периодического м гкого массажа грудной клетки и затем их снова оозвращают к матери Контрольные крысы подвергают такой же обработке, но с использованием воздуха вместо азота. R HPAI или S (-)PAI (0.5 мг/кг/день) вводитс е организм корм щих крыс вместе с питьевой водой, это соединение вместе с грудным молоком переноситс в организм крыс т.

Передвижение определ етс в шести полностью компьютиризироеанных клетках (28 см х 28 см) путем регистрации числа перекрестных проходов в течение заданного периода времени Пересечение сетки инфракрасных лучей с интервалами 4 см инициирует электрические импульсы, которые подаютс счетчику. Регистраци двигательной чктивности осуществл ютс на крыс тах в возрасте 15 и 20 дней в течение 15 мин

Результаты эксперимента представлены е табл 7

Приведенные числовые значени показывают чисто пересечений сетки инфракрасных лучей в клетке активности в течение 15 мин

э Р 0 001 по сравнению с подвергнутой кислородному голоданию необработанной группой.

b Р 0 05 по сравнению с подвергнутой кислородному голоданию необработанной группой

с Р 0 05 по сравнению с контрольной

руППОЙ

Данные результаты показывают, что систематическое лечение препаратом R (+)РА1 дозой 0.5 мг/кг, вводимой в корм щих матерей и поступающей в организм питающегос грудным молоком детеныша, значительно улучшает синдром гиперактивности, Следовательно R (-t-)PAI вл етс лекарством, которое может использоватьс дл лечени сиидромц гиперактивности у детей.

(56) Патент Великобритании № 1037014.

л С 2 (, 1463

Таблица 1

Величины IC-50 (нМ) ингибировс-ни 1QA-A ч МАО-В посредством рацемического PAI и его R(+) и S(-) энанчиомеров в гомскензте головного мо а крысы в услови х ин витро

МАО-А

)

Соединение S (-) PAI R () PA Pan. 26000 73 140

Величины IC-50 (нМ) ингибировани МОА-А и МАО-8 посредством R(+) и S(-) нднтиомррог MPAI и гомогенате головного мопгл крысы в услови х ин витпо

Показатели 1С-50(мг/кг) ингибировани МАО-А и МАО-В соединени ми P(-)-PAI. S(-)PA или рацемическим PAI при внутрибрюшинной (IP) инъекции или при оральном вводе (РО)

Усиление сосудосуживающего эффекта тирамина у наход щихс в сознании крыс посредством ингибиторов МАО

Т б л и ц и 1 А

Таблица 2

10-50. мг/кг

Таблица 3

Вли ние предварительной обработки (-) и («) энантиомерэми МАО-В ингибитора PAI на истощени стриатных DA и DOPAC. вызванных МРТР у мышей в услови х ин виво

Таблица 5

Вли ние PAI изомеров на вызванное амфетамином стереотипное поведение у постаревших крыс (контрольные и поврежденные кислородным голоданием)

Группа

Контрольный (6) Контрольные (5) Контрольные (4) Поврежденные кислородным голоданием (5)

Поврежденные кислородным голоданием (6)

Вли ние изомеров PAI на реакцию устранени пассивности у молодых крыс т

(возрастом 60 дней)

Процедура А

Таблица 4

бработка

(+) PAI (-) PAI

MPAI

Оценка стереотипного поведени

I

87±10

126±16

94±18

93±12 143 ±6

Таблица 6

Процедура В

Указанные увеличени процентов вз ты по отношению к подвергнутым голоданию или контрольным группам соответственно.

Вли ние каждого из двух энантиомеров на вызванный кислородным голоданием

синдром гиперактивности

Цифры в скобках показывают число испытываемых животных.

Claims

1. R(+) - М-Пропаргил-1-аминоиндан формулы

л NH-CH -Сн С 2

V

и его фармацевтически пригодные кислотно-аддитивные соли, обладающие ингиби- рующейВ-формуфермента

моноаминооксидаэы активностью.

2. Фармацевтическа композици , обладающа ингибирующей В-форму фермента моноаминооксидазы активностью содержаща производное 1-аминоиндана

Продолжение тэбл 6

Таблица 7

и фармацевтически приемлемый носитель, отличающа с тем, что, с целью повышени активности и уменьшени побочных эффектов, она содержит в качестве производного 1-аминоиндана R(+) - N - пропар- гил - 1 - аминоиндан формулы

, NH-CH -C CH

2

в количестве 1 - 20 мг на дозированную единицу.

3.Композици по п.2, отличающа с тем, что она представл ет собой форму дл орального введени .

4.Композици по п.2. отличающа с тем, что она представл ет собой раствор или эмульсию дл инъекционного введени .

5.Композици по п.2, отличающа с тем, что она представл ет собой свечу.

6.Композици по п.2, отличающейс тем, что она представл ет собой форму дл подкожного введени .

7.Композици по п.З илм 5, отличающа с тем, что она содержит производное 1-амииоиндана а количестве 5 - 10 мг и дозированную единицу.

в. Композици по .4, отличающа с тем, что он« содержит производное 1-ами- ноиндана указанной формулы а количестве 1 -10 мг/м .

9.Композици по п.8, отличающа с тем, что она содержит производное 1-ами- ноиндаиа указанной формул а количестве 2-5 мг/мл.

10.Фармацевтическа композици , обладающа иигибирующей В-форму фермента моноамииооксидааы активностью в форме, таблеток или капсул, содержаща производное 1-аминоиндана и фармецев- тичаски приемлемый носитель, отличающа с тем, что, с целью повышени активности, она дополнительно содержит лееодопа и декарбокеилазиый ингибитор,

Фиг. /

а в качестве производного - R(+)-N-nponap- гил-1-аминоиндан формулы

NH-CH -Cs CH

2

при следующем содержании компонентов , 1мг:

R (+) - N - лропвргил-аминоин- дан2-10

Лееодопа50 - 250

Двкарбоксилаэный ингибитор 10-50

11. Композици по п. 10. отличающа с том, что она содержит в качестве декарбок- силаэного ангибиторе 1-карбидола при следующем содержании компонентов, мг: R(+)- N - пропаргил - амиио- индан2-10

Лоаодопа .50 - 250

1-Карбидо а10-25

..rv - о

12. Композици по п. 10, отличающа с тем, что она содержит в качестве декарбок- силазного ингибитора бвизераэид при следующем содержании компонентов, мг: Н(+)-И-Пропаргн вмипоиндан 2-10 Яееодопа50-200

Бензеразид12.5 - 50

.«(+)

o 3(-)PAI L aC/wz/)

Ј

9

8

2001614

S

Mwyess/rr/rffq //; z/s/euet// / pt/e. 2

Фиг.5

Яо о

о

UI

о о4

s

о

ч

о о

- -

о о о

0

О

о о

СЛ

о

о о

-нсл о

Я о о

СЛ

о

о о

СЛ О

о о

к- . t

г

€

о о

150

100 450 +

0,001

0,0100,1001 00010,000

Фиг. 6

0,0010,010

0,100

1,000

10,000

Фиг. 7

$-гпф Ova v мин wHs о

JH/JN teOlT

ooo o t

000 I

Q-гпф

iva(+)n

000 01OOO t

л /м( w«if

frl9l002

OOl o

0

v..

,T

VJ .

Т 001

051

ttdH °OOL O

0

j- --::.|::.;.::.:.r.r,.,..joOL

fO

о о

о

«

0

0 0500,100

100

Д

О

0,0500.100

R(+)PAI

Л RAC

pan

фщ. М

фф R( + )PAI

ЛЛ RAC

р§п

ipoo

фиг. 1$

07050

0,100

80-0 ,050

0,100

1;000

фиг. U

фф R(+)PAI

ЛЛ РАС

pan

1,000

Фиг. 5

20 30 40

фаг. 16

50

60 70