KR20060028654A

KR20060028654A - Ｖｅｇｆ 길항제와 항증식성 제제의 조성물

Info

Publication number: KR20060028654A
Application number: KR1020067000521A
Authority: KR
Inventors: 조셀린 홀라시; 로버트 제프; 리민 휴; 조지 디. 얀코포울로스
Original assignee: 리제네론 파라마큐티칼스 인코포레이티드; 더 리젠츠 오브 더 유니버시티 오브 캘리포니아
Priority date: 2003-07-25
Filing date: 2004-07-23
Publication date: 2006-03-30
Anticipated expiration: 2024-07-23
Also published as: BRPI0412798A; CA2529742C; AU2004261165C1; IL172406A; UY28438A1; AU2004261165A1; RU2353353C2; WO2005011734A3; MXPA05013642A; NZ544570A; US20050032699A1; RU2006105496A; US7354579B2; MY149169A; AR046510A1; KR101175990B1; TW200524589A; CA2529742A1; AU2004261165B2; JP2007500131A

Abstract

예를 들어, VEGF 트랩과 같은 혈관 내피 세포 성장 인자(VEGF) 길항제, 예를 들어, 탁솔과 같은 항증식성 제제, 및 약학적으로 허용가능한 담체를 포함하는 약학적 조성물을 투여하는 것을 포함하는 그것을 필요로 하는 피험체에서 암을 치료하고 및/또는 종양 성장을 감소 또는 억제하는 방법.

VEGF 트랩, 혈관 내피 세포 성장 인자(VEGF) 길항제, 탁솔, 항증식성 제제.

Description

ＶＥＧＦ 길항제와 항증식성 제제의 조성물{Composition of a VEGF Antagonist and an Anti-Proliferative Agent }

본 발명의 분야는 항증식성 제제와 조합하여 혈관 내피 성장 인자(VEGF) 길항제로 포유동물의 암을 치료하는 방법과, VEGF 길항제 및 항증식성 제제를 포함하는 약학적 조성물에 관련한다.

혈관 내피 성장 인자(VEGF)는 병리학적 상태에서 엔지오제네시스의 초기 자극으로서 인지되었다. VEGF를 차단하는 방법에 대한 접근법은 가용성 수용체 구조물, 안티센스 분자, RNA 압타머(aptamer), 및 항체를 포함한다. 예를 들어, VEGF-수용체 기재 트랩 길항제의 설명에 대해서는, PCT WO/0075319 호 참조.

항-종양성 제제가 단독으로 및 수술 및/또는 방사선과 함께 암의 치료를 위해 널리 사용되고 있다. 항-VEGF 항체 및 화학요법제로서, 파클리탁셀(Taxol^TM)과 같은 것을 이용하는 조합 치료법이 공지되어 있다(예를 들어, 미국 6,432,219 호 참조).

발명의 간단한 개요

한 양태에서, 본 발명은 항증식성 제제와 함께 혈관 내피 세포 성장 인자(VEGF) 길항제를 피험체에 투여하는 것을 포함하는 그것을 필요로 하는 피험체 내 암을 치료하는 방법을 특징으로 하며, 이때 암이 치료된다. 치료되는 피험체가 어떤 포유동물 종을 포함할 수도 있지만, 필요로 하는 피험체는 바람직하게는 암을 앓고 있는 사람이다.

특정 구체예에서, VEGF 길항체는 VEGF에 대한 높은 친화성 결합을 할 수 있는 VEGF 트랩이다. 더 특이적으로, VEGF 트랩은 FltlD2.FlklD3.Fc△C1(a)(SEQ ID NO: 1-2),또는 VEGFRlR2-Fc△Cl(a)(SEQ ID NO: 3-4)이다. 특이적 구체예에서, 항증식성 제제는 예를 들어, 파클리탁셀과 같은 미세소관 안정화제, 또는 예를 들어, 도세탁셀(Taxotere®), 또는 그것의 복합체; 예를 들어, 시스플라틴, 카르보플라틴, 이프로플라틴과 같은 백금-기재 화학요법 화합물, 및 관련 화합물; 또는 다른 종래의인 세포독성 화합물이다. 파클리탁셀의 하나의 상업상 이용가능한 형태는 Taxol^TM(Bristol-Myers Squibb)이다.

제 2의 양태에서, 본 발명은 항증식성 제제와 함께 혈관 내피 세포 성장 인자(VEGF) 길항제에 투여하는 것을 포함하는, 필요한 피험체에서 종양 성장을 감소, 축소, 또는 억제시키는 방법을 특징으로 하며, 이때 종양 성장이 감소, 축소, 또는 억제된다.

제 3의 양태에서, 본 발명은 VEGF 길항제와 함께 화학요법제를 투여하는 것을 포함하는 바람직한 치료적 효과를 달성하기 위해 필요한 화학요법제의 양을 감소시키는 방법을 특징으로 한다. 더 구체적으로, 화학요법제는 파클리탁셀과 같은 항증식성 제제, 또는 그것의 유도체, 유사체, 또는 혼합물; 예를 들어, 시스플라틴, 카르보플레인, 이프로플라틴과 같은 백금-기재 화학요법 화합물, 및 관련 화합물; 또는 기타 종래의 세포독성 화합물이며, VEGF 길항제는 VEGF 트랩이다. 한 구체예에서, 예를 들어, 종양 성장의 억제제와 같은 바람직한 치료적 효과를 달성하기 위해 필요한 화학요법제의 양은 공동 투여되는 VEGF 트랩의 존재하에서 적어도 20% 이하이다. 더 특정한 구체예에서, 필요한 화학요법제의 양은 VEGF 트랩의 존재하에서 약 40-50% 이하이다.

제 4의 양태에서, 본 발명은 혈관 내피 세포 성장 인자(VEGF) 길항제, 항증식성 제제, 및 약학적으로 허용가능한 담체를 포함하는 약학적 조성물을 특징으로 한다. 더 특이적인 구체예에서, VEGF 및 항증식성 제제에 대한 높은 친화성 결합을 할 수 있는 VEGF 길항제 VEGF 트랩은 예를 들어, 파클리탁셀과 같은 미세소관 안정화제 또는 그것의 유도체, 유사체, 또는 혼합물이다. 보다 더 구체적으로, VEGF 트랩은 FltlD2.FlklD3.Fc△C1(a)(SEQ ID NO:1-2), VEGFRlR2-Fc△C1(a)(SEQ ID NO: 3-4), 또는 그것의 기능상 등가물이다. 바람직한 구체예에서, 약학적 조성물은 VEGFR1R2-Fc△C1(a) (SEQ ID NO: 3-4) 및 파클리탁셀이다.

다른 목적 및 이점은 다음의 발명의 상세한 설명으로부터 명백해질 것이다.

도 1-2는 비히클 단독(대조군), VEGF 트랩 단독, TaxolTM 단독 또는 VEGF 트 랩 + Taxol^TM으로 처리된 동물 내 종양 감소(도 1) 및 복수액 부피(도 2)를 나타내는 막대 그래프이다.

상세한 설명

본 발명의 방법 및 조성물이 설명되기 전에, 본 발명은 방법 및 상태가 다양할 수 있는 것으로 설명되는 특정 방법, 및 실험 상태로 한정되지 않음이 이해된다. 또한, 본원에서 사용되는 용어는 단지 특정한 구체예를 설명하기 위한 목적이며, 한정하고자 하는 의도는 아닌데, 왜냐하면, 본 발명의 범위는 오직 첨부한 청구범위에 의해 한정되기 때문임이 이해될 것이다.

본 명세서 및 첨부한 청구범위에서 사용되는 바와 같이, 단수 형태의 표현들은 문맥상 분명하게 달리 지시하지 않는다면 복수의 언급을 포함한다. 따라서, 예를 들어, "방법"에 대한 언급은 하나 이상의 방법, 및/또는 본원에서 설명되는 유형의 단계들을 포함하며 및/또는 이 명세서 등을 읽는 동안에 당업계 숙련자에게 명백할 것이다.

달리 정의하지 않는다면, 본원에서 사용되는 모든 기술 및 과학 용어들은 본 발명이 속하는 당업자에 의해 공통적으로 이해되는 바와 같은 의미를 가진다. 본원에서 설명되는 바와 같거나 동일한 어떤 방법 및 물질들이 본 발명의 실행 또는 테스트에서 사용되지만, 바람직한 방법 및 물질이 이제 설명된다. 본원에서 언급되는 모든 문헌들은 문헌들이 인용되는 방법 및/또는 물질들을 설명하기 위해 참고로서 본원에서 인용된다.

일반적 설명

본 발명은 예를 들어, 탁솔과 같은 항증식성 제제와 함께 예를 들어, VEGF 트랩 VEGFR1R2-Fc△C1(a)과 같은 VEGF 길항제의 공동 투여는 종양 성장의 극적인 억제를 야기한다는 발견을 기초로 한다. 종양 성장에 있어서 VEGF 트랩 및 파클리탁셀(Taxol^TM)의 조합의 예기치 않은 상승 효과는 사람 암의 치료에 대한 장래의 치료적 접근법을 제공한다. VEGF-수용체-기재 길항제 VEGF 트랩 FltlD2.FlklD3. FcAC1(a)(SEQ ID NO:1-2) 및 VEGFR1R2-Fc△C1(a) (SEQ ID NO: 3-4)에 대해서는, 전체가 본원에서 참고로서 인용되는 PCT WO/0075319호 참조.

파클리탁셀은 주목(Taxus brevifolia)(태평양 주목) 나무(Wani et al.(1971)J. Am. Chem. Soc. 93:2325-2327)의 나무껍질로부터 처음에 유도된 디테르펜 항암 화합물이다. Taxol^TM은 상업적으로 이용가능한 형태의 파클리탁셀이다. 본 발명의 방법에서 VEGF 길항제와 함께 유용한 다른 화학요법 화합물은 도세탁셀(Taxotere®; Aventis Antony, France); 니트로소우레아, 시클로포스파미드, 독소루비신, 에피루비신, 5-플루오로우라실, 토포테칸 및 이리노테칸, 카르부스틴, 및 에스트라무스틴을 포함하나, 이에 한정되지는 않는다. 바람직한 화학요법제는 예를 들어, 시스플라틴, 카르보플라틴, 및 이프로플라틴과 같은 백금-기재 화합물을 포함한다. 그들과 같은 다른 종래의 세포독성 화합물이 문헌[Wiemann et al. (1985) in Medical Oncology (Calabresi et al.,eds.), Chapter 10, McMillan Publishing]에서 개시되었다.

투여의 방법

본 발명은 VEGF 트랩과 같은 VEGF 길항제, 및 파클리탁셀과 같은 항증식성 제제를 포함하는 유효량의 약학적 조성물을 피험체에 투여하는 것을 포함하는 치료의 방법을 제공한다. 각종 송달 시스템이 알려져 있으며 본 발명의 조성물을 투여하기 위해 사용될 수 있는데, 예를 들어, 리포좀, 극미립자, 마이크로캡슐 내 캡슐화, 화합물을 발현시킬 수 있는 재조합 세포, 수용체-매개 엔도사이토시스(예를 들어, [Wu and Wu, 1987, J. Biol. Chem. 262:4429-4432), 레트로바이러스 또는 기타 벡터의 일부로서 핵산의 구조화 등이다. 도입의 방법은 장 또는 비경구일 수 있으며 이에 한정되지는 않지만, 피내, 근육내, 복막내, 정맥내, 피하, 비내, 안내, 및 경구 루트를 포함한다. 화합물은 예를 들어, 주입 또는 볼러스 주사에 의해, 상피 또는 점막피부 내층(예를 들어, 경구 점막, 직장 및 장 점막 등)을 통한 흡수에 의해 투여될 수도 있으며 다른 생물학적으로 활성인 제제와 함께 투여될 수도 있다. 투여는 전신 또는 국소일 수 있다. 투여는 급성 또는 만성이거나(예를 들어, 매일, 매주, 매월 등) 또는 다른 제제와 함께일 수 있다. 폐의 투여는 예를 들어, 흡입기 또는 분무기, 및 에어로졸화 제제를 포함하는 제형의 사용에 의해 이용될 수 있다.

다른 구체예에서, 활성제는 비히클, 특히 리포좀 내에, 제어 방출 시스템 내에, 또는 펌프로 송달될 수 있다. 다른 구체예에서, 본 발명의 활성제가 단백질을 코딩하는 핵산인 경우, 핵산은 적절한 핵산 발현 벡터의 일부로서 그것을 구조화하고 그것을 세포 내로 투여함으로써, 예를 들어, 레트로바이러스 벡터의 사용(예를 들어, 미국 특허 제 4,980,286호 참조), 직접 주사, 또는 극미립자 충격 (microparticle bombardment), 또는 지질 또는 세포 표면 수용체 또는 형질감염제를 포함하는 코팅, 또는 핵에 들어가는 것으로 알려진 호메오박스-유사 펩티드에의 연결로 그것을 투여함(예를 들어, Joliot et al., 1991, Proc. Natl. Acad. Sci. USA 88: 1864-1868) 등에 의해 그것의 코딩된 단백질의 발현을 촉진하기 위해 생체 내에 투여될 수 있다. 선택적으로, 핵산은 동종 재조합에 의해 세포 내로 도입되고 발현을 위한 숙주 세포 DNA로 통합될 수 있다.

특정 구체예에서, 치료를 필요로 하는 부위에 국소적으로 본 발명의 약학적 조성물을 투여하는 것이 바람직할 수도 있다; 이것은 예를 들어, 제한을 두지 않고서, 외과 수술 중 국소 주입에 의해, 국소 적용, 예를 들어, 주사에 의해, 카테터에 의해, 또는 이식물에 의해 달성될 수 있는데, 상기 이식물은 예를 들어, 실라스틱 막, 섬유질, 또는 상업상의 피부 대용물과 같은 막을 포함하여, 다공성, 비다공성, 또는 젤라틴 물질이다.

본 발명의 방법을 실행하는데 유용한 조성물은 용액, 현탁액, 또는 그들 모두에 본 발명의 제제를 포함하는 액체일 수도 있다. 용어 "용액/현탁액"은 활성제의 첫번째 부분은 용액으로 존재하고 활성제의 두번째 부분은 액체 기질 내 현탁액에 미립자 형태로 존재하는 액체 조성물을 나타낸다. 액체 조성물은 또한 젤을 포함한다. 액체 조성물은 수성 또는 연고의 형태일 수도 있다.

본 발명의 방법을 실행하기에 유용한 수성 현탁액 또는 용액/현탁액은 부유제로서 하나 이상의 폴리머를 함유할 수도 있다. 유용한 폴리머는 예를 들어, 셀룰로오스 폴리머와 같은 수용성 폴리머 및 예를 들어, 가교 결합된 카르복실-함유 폴 리머와 같은 수용성 폴리머를 포함한다. 본 발명의 수성 현탁액 또는 용액/현탁액은 바람직하게는 점성 또는 점막-부착성, 또는 더욱 더 바람직하게는, 점성 및 점막부착성이다.

규칙적인 화학요법

규칙적인 화학요법은 향상된 방식의 투여 화학요법으로서 나타난다. 종래의인 화학요법은 예를 들어, 최대 허용 투여량(MTD)에서, 생명을 위협하는 수준의 독성을 야기하지 않고서 가능한 가장 높은 투여량으로서 단일 투여량 또는 단기간 코스의 치료법으로 투여되었다. MTD 치료법은 연속 사이클의 치료법 사이에 2-3 주의 연장된 치료중지기간을 필요로 한다. 그것들을 테스트하기 위해 착수된 다수의 이러한 화학요법 및 많은 수의 임상적 실험에도 불구하고, 치료 또는 암에 걸린 환자의 수명을 현저하게 연장시키는 점에서 진보가 크지는 않았다(Kerbel & Kamen (2004) Nature Reviews Cancer 4:423-436).

규칙적인 화학요법은 연장된 약물이 없는 기간을 갖는 현저하게 MTD 이하인 투여량에서 화학요법의 투여를 빈번히, 매일 조차를 의미한다. 감소된 급성 독성에 더하여, 규칙적인 화학요법의 효능은 VEGF(상기 문헌 Kerbel & Kramen(2004))의 억제제와 같은 특이적인 항-엔지오넨 약물과 함께 투여되는 경우 증가하는 것으로 보인다. 따라서, 본 발명은 항증식성 제제와 함께 혈관 내피세포 성장 인자(VEGF) 길항제를 피험체에 투여하는 것을 포함하는 필요한 피험체에서 암을 치료하기 위한 규칙적인 화학요법을 특징으로 하는데, 이때 암이 치료된다. 본 발명의 이 구체예에서, VEGF 길항제 및 항증식성 제제는 비교적 짧은 시간의 기간, 예를 들어, 1-12 주 동안 함께 또는 순차적으로 투여될 수도 있으며, 후속하여 연장된 시간의 기간, 예를 들어, 6-24 개월에 걸쳐서 항증식성 제제를 규칙적 투여할 수도 있다.

약학적 조성물

본 발명은 VEGF 길항제, 항증식성 제제, 및 약학적으로 허용가능한 담체를 포함하는 약학적 조성물을 제공한다. 용어 "약학적으로 허용가능한"은 동물에 있어서의 사용, 및 더 구체적으로, 사람에서의 사용을 위해 연방정부 또는 주정부의 조절국에 의해 승인되거나 미국 약전 또는 기타 일반적으로 인지된 약전에서 열거된 것을 의미한다. 용어 "담체"는 치료제가 투여되는 희석제, 애쥬번트, 부형제, 또는 비히클을 나타낸다. 이러한 약학적 담체는 예를 들어, 땅콩 기름, 대두유, 광유, 참깨 오일과 같은 석유, 동물, 식물 또는 합성 기원의 것을 포함하여 예를 들어, 물 및 오일과 같은 멸균 액체일 수 있다. 적당한 약학적 부형제는 녹말, 글루코스, 락토스, 수크로스, 젤라틴, 맥아, 쌀, 밀가루, 백악, 실리카 겔, 스테아르산 나트륨, 모노스테아르산 글리세롤, 활석, 염화 나트륨, 탈지유, 글리세롤, 프로필렌, 글리콜, 물, 에탄올 등을 포함한다. 바람직하다면, 조성물은 또한 소량의 습윤제 또는 유화제, 또는 pH 완충제를 함유할 수 있다. 이들 조성물은 용액, 현탁액, 에멀젼, 정제, 환약, 캡슐, 분말, 서방형 제형 등의 형태를 취할 수 있다. 적합한 약학적 담체의 예는 문헌 ["Remington's Pharmaceutical Sciences" by E.W, Martin]에 설명되어 있다.

본 발명의 조성물은 중성 또는 염 형태로서 제형될 수 있다. 약학적으로 허용가능한 염은 예를 들어, 염산, 인산, 아세트산, 옥살산, 타르타르산 등으로부터 유도된 것, 및 예를 들어, 나트륨, 칼륨, 암모늄, 칼슘, 제2철 수산화물, 이소프로필아민, 트리에틸아민, 2-에틸아미노 에탄올, 히스티딘, 프로카인 등으로 형성된 것과 같은 유리 아미노기로부터 형성된 것을 포함한다.

의도한 치료적 사용을 위해 효과적일 본 발명의 조성물의 양은 본 설명을 기초로 하여 표준 임상적 기술에 의해 결정될 수 있다. 또한, 시험관 내 분석법은 최적 투약 범위를 확인하는데 선택적으로 사용될 수도 있다. 일반적으로, 정맥 내 투여를 위한 적당한 투약 범위는 일반적으로 약 20-500 ㎍의 활성 화합물/kg 체중이다. 비내 투여를 위한 적당한 투약 범위는 일반적으로 약 0.01 pg/kg 체중 내지 1 mg/kg 체중이다. 유효한 투여량은 시험관 내 또는 동물 모델 테스트 시스템으로부터 유도된 투여량-반응 곡선으로부터 외삽될 수도 있다.

전신 투여를 위해, 치료적으로 유효한 양은 시험관 내 분석법으로부터 초기에 산정될 수 있다. 예를 들어, 투여량은 세포 배양에서 결정되는 바와 같은 IC₅₀을 포함하는 순환 농도 범위를 달성하기 위해 동물 모델에서 제형될 수 있다. 이러한 정보는 사람 내 유용한 투여량을 더 정확하게 결정하기 위해 사용될 수 있다. 초기 투여량은 또한 당업계 주지되어 있는 기술을 사용하여, 생체 내 데이타, 예를 들어, 동물 모델로부터 평가될 수 있다. 당업계 통상의 기술을 가진 자는 동물 데이타를 기초로 하여 사람에 대한 투여를 용이하게 최적화시킬 수 있다.

투여량 및 간격은 치료적 효과를 유지하기에 충분한 화합물의 혈장 수준을 제공하기 위해 개별적으로 조절될 수도 있다. 국소 투여 또는 선택적인 흡수의 경 우에, 화합물의 효과적인 국소 농도는 혈장 농도와 관련되지 않을 수도 있다. 당업계 통상의 기술을 가진 자는 과도한 실험없이 치료적으로 유효한 국소 투여량을 최적화할 수 있을 것이다.

투여되는 화합물의 양은 물론, 치료할 피험체, 피험체의 체중, 고통의 심각도, 투여의 방법, 및 처방하는 의사의 판단에 의존적일 것이다. 치료법은 증상이 검출가능한 동안 또는 그들이 검출가능하지 않을 때 조차도 간헐적으로 반복될 수도 있다. 치료법은 단독으로 또는 다른 약물과 함께 제공될 수도 있다.

키트

본 발명은 또한 패키징 물질 및 패키징 물질 내 함유된 약학적 제제를 포함하는 제조 물품을 제공하며, 이때 약학적 제제는 적어도 하나의 VEGF 길항제 및 적어도 하나의 항증식성 제제를 포함하고, 패키징 물질은 VEGF 길항제 및 항증식성 제제가 암을 치료하거나 종양 성장을 감소시키기 위해 사용될 수 있음을 나타내는 표지 또는 포장 삽입물을 포함한다.

특정 구체예

실시예 1에서 설명되는 바와 같이, OVCAR3로 접종된 마우스를 비히클 단독(대조군), VEGF 트랩 단독, Taxol^TM 단독, 또는 VEGF 트랩 및 Taxol^TM으로 처치하였다. 결과는 VEGF 트랩 단독 또는 Taxol^TM과 조합하여 받은 마우스에서 증명할 수 있는 복수가 존재하지 않음을 나타냈다. VEGF 트랩 + Taxol^TM의 조합은 97%의 증가된 종양 억제를 야기하였으며, 조합치료를 받는 마우스는 정상의, 종양을 지니지 않는 동물과 같이 튼튼하고 부작용이 없는 것으로서 나타났다. 이 실험은 또한 VEGF 트랩의 첨가가 종양 성장의 억제를 달성하기 위해 필요한 항증식성 제제의 양을 증명한다. 또한, 실시예 2에서 설명되는 바와 같이, 조합 치료를 받는 3/5의 동물(60%)은 치료 기간의 마지막 이후에, 상당히 살아 있으며 이 시점에서 건강을 유지하고 있다.

본 발명의 다른 특징은 본 발명의 실례를 위해 제공되며 그들을 제한하도록 의도되지 않는 전형적인 구체예의 하기 설명의 과정에서 명백해질 것이다.

하기 실시예는 본 발명의 방법 및 조성물을 만들고 사용하는 방법의 완벽한 개시 및 설명과 함께 당업계 통상의 기술을 제공하기 위해 제안되며, 발명자들이 그들의 발명으로서 간주하는 범위를 제한하도록 의도되지 않는다. 사용된 숫자(예를 들어, 합계, 온도 등)에 관한 정확성을 보증하기 위해 노력하였으나, 일부 실험적 오차 및 편차값이 계산되어야 한다. 달리 나타내지 않는다면, 부들은 중량부이며, 분자량은 평균 분자량이고, 온도는 섭씨 온도이며, 압력은 대기압 또는 대기압 근처이다.

실시예 1. VEGF-트랩 ± Taxol ^TM 을 이용한 종양 처리

실험 계획. 두개의 실험으로서, 각각 4 그룹의 암컷의 흉선없는 누드 마우스(5-7 주, 20 마우스/실험, 총 n=40)를 OVVAR3 세포로 복막내 접종하였다. 접종 2주 후에, 1 그룹을 VEGF-트랩 피하 주 2회 + 파클리탁셀 복막내 4주동안 주 3회로 처 리하였다. 제 2 그룹을 VEGF-트랩 단독으로 처리하였다. 제 3 그룹을 파클리탁셀 단독으로 처리하였다. 나머지 그룹을 비히클로 처리하였다. 실험의 마지막에, 마우스를 안락사시키고, 복수의 부피를 측정하고 모든 눈에 보이는 종양을 절단하고 무게를 쟀다.

종양 성장의 대조군. VEGF-트랩 + 파클리탁셀에서의 종양 부하는 대조군과 비교하여, 97.7%(p<0.01)까지 현저하게 감소하였다. VEGF-트랩 단독 및 파클리탁셀군에서의 종양 부하는 대조군(도 1)(표 1)과 비교하여 각각 55.7%(p<0.05) 및 54.8%(p<0.05)까지 감소하였다.

복수 형성의 대조군. 조합된 치료 군 또는 VEGF-트랩 단독(도 2)으로 처리된 군에서 복수는 거의 발전되지 않았다. 파클리탁셀 단독은 대조군과 비교하여 복수를 85.5%(p<0.01)까지 현저히 감소시켰다. 형태학적 연구에서 창백, 점상 종양이 VEGF-트랩 + 파클리탁셀로 처리된 군에서 크게 괴사성 및 무혈관성임이 증명되었다. 미처리 대조군 및 VEGF-트랩 단독군의 마우스의 90% 및 파클리탁셀 단독 군의 마우스의 80%는 횡경막 상에 종양을 가졌다. 대조군의 마우스의 90% 및 VEGF-트랩 단독 및 파클리탁셀 단독 군 내 마우스의 60%는 간의 문(hilus)에 종양을 가졌다. 그러나, 조합된 VEGF 트랩 + 파클리탁셀 군에서 이들 위치에서 종양은 발견되지 않았다. VEGF-트랩 + 파클리탁셀 군의 외관 및 행동은 정상인, 동일한 연령의 비접종 마우스와 시각적으로 구분가능하였다. 이들 데이타는 VEGF-트랩 + 파클리탁셀의 조합 치료가 종양 부하 및 최소의 검출가능한 부작용을 갖는 발전된 상피 난소 종양에 있어서 복수 형성을 현저하게 감소시키는 유효한 방법일 수도 있다.

	Taxol^TM	VEGF 트랩	VEGF 트랩 + Taxol^TM
복수 감소%	85.4	96.5	100
종양 부하 감소%	55.9	56.7	97.7

실시예 2. 생존 시간에 대한 VEGF-트랩 ± Taxol ^TM 으로 치료한 효과

생존율 연구에서, 두개의 그룹의 흉선없는 마우스를 사람 난소암 셀라인으로부터의 세포로 접종시키고, 2주 후에 상기 실시예 1에서 설명되는 바와 같이 VEGF-트랩 + 파클리탁셀 또는 비히클(대조군)의 조합으로 4주 동안 처리하였다. 그러나, 4주의 마지막에 마우스를 희생시키는 것에 대신하여, 그들을 암 세포 접종의 시간으로부터 110일 동안 또는 안락사가 필요할 때 까지 관찰하였다. 모든 대조군 마우스를 불연속적 처리 5-13일 후 안락사를 겪게 하였다. 반대로, VEGF-트랩 + 파클리탁셀로 처리된 마우스의 그룹에서, 첫번째 그룹 중 3/5 마우스는 종양 세포 접종 110일 후에 정상적 섭식 및 육체적 행동을 가지고서 살아 있다(불연속적 처리 68일 후). 이들 중 하나는 접종 부위에 0.5 x 0.6 mm 종양을 가진다. 4번째 마우스는 호흡 곤란으로 인하여 종양 세포 접종 89일 후 안락사를 시켰고 호흡관 부근에 종양을 가졌으며, 5번째는 유혈 복수 및 0.53 g 종양 부하를 갖는 종양 세포 접종 81일 후 안락사를 시켰다. 두번째로, 생존율 연구에서 마우스의 현재 진행중인 그룹은 첫번째 그룹과 유사한 방식으로 수행된다.

본 발명은 그것의 취지 또는 필수적 특징들에서 벗어나지 않고 다른 특정 형태로 구체화될 수도 있다.

<110> Regeneron Pharmaceuticals, Inc. The Regents of the University of California <120> Composition of a VEGF Antagonist and an Anti-Proliferative Agent <130> REG 715B-WO <150> US60/493,971 <151> 2003-08-08 <160> 2 <170> KopatentIn 1.71 <210> 1 <211> 1377 <212> DNA <213> Homo sapiens <400> 1 atggtcagct actgggacac cggggtcctg ctgtgcgcgc tgctcagctg tctgcttctc 60 acaggatcta gttccggaag tgataccggt agacctttcg tagagatgta cagtgaaatc 120 cccgaaatta tacacatgac tgaaggaagg gagctcgtca ttccctgccg ggttacgtca 180 cctaacatca ctgttacttt aaaaaagttt ccacttgaca ctttgatccc tgatggaaaa 240 cgcataatct gggacagtag aaagggcttc atcatatcaa atgcaacgta caaagaaata 300 gggcttctga cctgtgaagc aacagtcaat gggcatttgt ataagacaaa ctatctcaca 360 catcgacaaa ccaatacaat catagatgtg gttctgagtc cgtctcatgg aattgaacta 420 tctgttggag aaaagcttgt cttaaattgt acagcaagaa ctgaactaaa tgtggggatt 480 gacttcaact gggaataccc ttcttcgaag catcagcata agaaacttgt aaaccgagac 540 ctaaaaaccc agtctgggag tgagatgaag aaatttttga gcaccttaac tatagatggt 600 gtaacccgga gtgaccaagg attgtacacc tgtgcagcat ccagtgggct gatgaccaag 660 aagaacagca catttgtcag ggtccatgaa aaggacaaaa ctcacacatg cccaccgtgc 720 ccagcacctg aactcctggg gggaccgtca gtcttcctct tccccccaaa acccaaggac 780 accctcatga tctcccggac ccctgaggtc acatgcgtgg tggtggacgt gagccacgaa 840 gaccctgagg tcaagttcaa ctggtacgtg gacggcgtgg aggtgcataa tgccaagaca 900 aagccgcggg aggagcagta caacagcacg taccgtgtgg tcagcgtcct caccgtcctg 960 caccaggact ggctgaatgg caaggagtac aagtgcaagg tctccaacaa agccctccca 1020 gcccccatcg agaaaaccat ctccaaagcc aaagggcagc cccgagaacc acaggtgtac 1080 accctgcccc catcccggga tgagctgacc aagaaccagg tcagcctgac ctgcctggtc 1140 aaaggcttct atcccagcga catcgccgtg gagtgggaga gcaatgggca gccggagaac 1200 aactacaaga ccacgcctcc cgtgctggac tccgacggct ccttcttcct ctacagcaag 1260 ctcaccgtgg acaagagcag gtggcagcag gggaacgtct tctcatgctc cgtgatgcat 1320 gaggctctgc acaaccacta cacgcagaag agcctctccc tgtctccggg taaatga 1377 <210> 2 <211> 458 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 2 Met Val Ser Tyr Trp Asp Thr Gly Val Leu Leu Cys Ala Leu Leu Ser 1 5 10 15 Cys Leu Leu Leu Thr Gly Ser Ser Ser Gly Ser Asp Thr Gly Arg Pro 20 25 30 Phe Val Glu Met Tyr Ser Glu Ile Pro Glu Ile Ile His Met Thr Glu 35 40 45 Gly Arg Glu Leu Val Ile Pro Cys Arg Val Thr Ser Pro Asn Ile Thr 50 55 60 Val Thr Leu Lys Lys Phe Pro Leu Asp Thr Leu Ile Pro Asp Glu Lys 65 70 75 80 Arg Ile Ile Trp Asp Ser Arg Lys Gly Phe Ile Ile Ser Asn Ala Thr 85 90 95 Tyr Lys Glu Ile Gly Leu Leu Thr Cys Glu Ala Thr Val Asn Gly His 100 105 110 Leu Tyr Lys Thr Asn Tyr Leu Thr His Arg Gln Thr Asn Thr Ile Ile 115 120 125 Asp Val Val Leu Ser Pro Ser His Gly Ile Glu Leu Ser Val Gly Glu 130 135 140 Lys Leu Val Leu Asn Cys Thr Ala Arg Thr Glu Leu Asn Val Gly Ile 145 150 155 160 Asp Phe Asn Trp Glu Tyr Pro Ser Ser Lys His Gln His Lys Lys Leu 165 170 175 Val Asn Arg Asp Leu Lys Thr Gln Ser Gly Ser Glu Met Lys Lys Phe 180 185 190 Leu Ser Thr Leu Thr Ile Asp Gly Val Thr Arg Ser Asp Gln Gly Leu 195 200 205 Tyr Thr Cys Ala Ala Ser Ser Gly Leu Met Thr Lys Lys Asn Ser Thr 210 215 220 Phe Val Arg Val His Glu Lys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys 225 230 235 240 Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro 245 250 255 Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys 260 265 270 Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp 275 280 285 Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu 290 295 300 Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu 305 310 315 320 His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn 325 330 335 Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly 340 345 350 Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu 355 360 365 Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Thr 370 375 380 Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn 385 390 395 400 Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe 405 410 415 Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn 420 425 430 Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr 435 440 445 Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys 450 455

Claims

암의 치료를 위한 약제의 제조에 있어서 암의 치료를 위한 혈관 내피 성장 인자(VEGF) 길항제 및 항증식성 제제의 조합의 사용.
제 1 항에 있어서, VEGF 길항제는 VEGF 트랩인 것을 특징으로 하는 사용.
제 2 항에 있어서, VEGF 트랩은 VEGFR1R2-Fc△C1(a) 또는 Flt1D2.FlkaD3.Fc△Ca(a)인 것을 특징으로 하는 사용.
제 1 항 내지 제 3 항 중 어느 한 항에 있어서, 항증식성 제제는 미세소관 안정화제인 것을 특징으로 하는 사용.
제 4 항에 있어서, 항증식성 제제는 파클리탁셀, 도세탁셀, 또는 유도체, 유사체, 또는 그것의 혼합물인 것을 특징으로 하는 사용.
제 1 항 내지 제 3 항 중 어느 한 항에 있어서, 항증식성 제제는 시스플라틴, 카르보플라틴, 및 이프로플라틴으로 이루어진 군으로부터 선택되는 백금-기재 화학요법제인 것을 특징으로 하는 사용.
제 1 항 내지 제 5 항 중 어느 한 항에 있어서, VEGF 길항제는 VEGFR1R2-Fc△C1(a)이고 항증식성 제제는 파클리탁셀 또는 도세탁셀인 것을 특징으로 하는 사용.
제 1 항 내지 제 7 항 중 어느 한 항에 있어서, 피험체는 사람 피험체인 것을 특징으로 하는 사용.
피험체 내 종양 성장을 감소시키기 위한 약제의 제조에 있어서 VEGF 길항제 및 항증식성 제제의 조합의 사용.
항증식성 제제와 함께 혈관 내피 세포 성장 인자(VEGF) 길항제를 피험체에 투여하는 것을 포함하는, 필요한 피험체에서 종양 성장을 억제 또는 감소시키는 방법으로서, 종양 성장이 억제되고, VEGF 길항제는 VEGF 트랩이며, 항증식성 제제는 파클리탁셀, 도세탁셀 또는 파클리탁셀의 유도체, 유사체, 또는 혼합물, 및 백금-기재 화학요법제로 이루어진 군으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는 방법.
혈관 내피 세포 성장 인자(VEGF) 길항제, 항증식성 제제, 및 약학적으로 허용가능한 담체를 포함하는 약학적 조성물.
제 11 항에 있어서, VEGF 길항제는 VEGF 트랩인 것을 특징으로 하는 약학적 조성물.
제 12 항에 있어서, VEGF 트랩은 VEGFR1R2-Fc△Ca(a) 또는 Flt1D2.Flk1D3.Fc△C1(a)인 것을 특징으로 하는 방법.
제 11 항에 있어서, 항증식성 제제는 미세소관 안정화제인 것을 특징으로 하는 약학적 조성물.
제 14 항에 있어서, 미세소관 안정화제는 파클리탁셀, 도세탁셀, 또는 그것의 유도체, 유사체, 또는 혼합물인 것을 특징으로 하는 약학적 조성물.
암을 치료하기 위한 VEGF 길항제 및 화학요법제의 조합의 사용으로서, 조합은 암을 치료하기 위한 약제의 제조에 있어서, 원하는 효과를 달성하기에 필요한 화학요법제의 양을 감소시키는 것을 특징으로 하는 사용.
제 16 항에 있어서, 화학요법제는 파클리탁셀, 또는 파클리탁셀의 유도체, 유사체, 또는 혼합물 및 백금-기재 화학요법제로 이루어진 군으로부터 선택되는 항증식성 제제인 것을 특징으로 하는 사용.
제 17 항에 있어서, VEGF 길항제는 VEGFR1R2-Fc△C1(a) 및 Flt1D2.Flk1D3.Fc△C1(a)으로 구성되는 군으로부터 선택된 VEGF 트랩인 것을 특징으로 하는 사용.
제 18 항에 있어서, 원하는 치료 효과를 달성하기에 필요한 화학요법제의 양이 최소 20%까지 감소하는 것을 특징으로 하는 사용.
제 19 항에 있어서, 원하는 치료 효과를 달성하기에 필요한 화학요법제의 양이 최소 30-50%까지 감소하는 것을 특징으로 하는 사용.
(a) 패키징 물질; 및

(b) 패키징 물질 내 함유된 약학적 제제를 포함하는 제조 물품으로서, 약학적 제제는 적어도 하나의 투여량의 혈관 내피 성장 인자(VEGF) 트랩의 및 적어도 하나의 항증식성 제제를 포함하고, 패키징 물질은 VEGF 길항제 및 항증식성 제제가 암을 치료하거나 종양 성장을 감소시키기 위해 사용될 수 있는 제조 물품.