NL1012825C2 - Farmaceuticum voor de behandeling van virale infecties in het bijzonder van het humane immunodeficiency virus (HIV). - Google Patents
Farmaceuticum voor de behandeling van virale infecties in het bijzonder van het humane immunodeficiency virus (HIV). Download PDFInfo
- Publication number
- NL1012825C2 NL1012825C2 NL1012825A NL1012825A NL1012825C2 NL 1012825 C2 NL1012825 C2 NL 1012825C2 NL 1012825 A NL1012825 A NL 1012825A NL 1012825 A NL1012825 A NL 1012825A NL 1012825 C2 NL1012825 C2 NL 1012825C2
- Authority
- NL
- Netherlands
- Prior art keywords
- hiv
- pharmaceutical
- cells
- blm
- virus
- Prior art date
Links
- 241000725303 Human immunodeficiency virus Species 0.000 title claims abstract description 19
- 208000036142 Viral infection Diseases 0.000 title claims abstract description 7
- 230000009385 viral infection Effects 0.000 title claims abstract description 7
- OYVAGSVQBOHSSS-UAPAGMARSA-O bleomycin A2 Chemical compound N([C@H](C(=O)N[C@H](C)[C@@H](O)[C@H](C)C(=O)N[C@@H]([C@H](O)C)C(=O)NCCC=1SC=C(N=1)C=1SC=C(N=1)C(=O)NCCC[S+](C)C)[C@@H](O[C@H]1[C@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@H](CO)O1)O[C@@H]1[C@H]([C@@H](OC(N)=O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1)O)C=1N=CNC=1)C(=O)C1=NC([C@H](CC(N)=O)NC[C@H](N)C(N)=O)=NC(N)=C1C OYVAGSVQBOHSSS-UAPAGMARSA-O 0.000 claims abstract description 32
- 108010006654 Bleomycin Proteins 0.000 claims abstract description 31
- 229960001561 bleomycin Drugs 0.000 claims abstract description 31
- NCDNCNXCDXHOMX-UHFFFAOYSA-N Ritonavir Natural products C=1C=CC=CC=1CC(NC(=O)OCC=1SC=NC=1)C(O)CC(CC=1C=CC=CC=1)NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)N(C)CC1=CSC(C(C)C)=N1 NCDNCNXCDXHOMX-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 6
- OEUUFNIKLCFNLN-LLVKDONJSA-N chembl432481 Chemical compound OC(=O)[C@@]1(C)CSC(C=2C(=CC(O)=CC=2)O)=N1 OEUUFNIKLCFNLN-LLVKDONJSA-N 0.000 claims abstract description 6
- 229960000311 ritonavir Drugs 0.000 claims abstract description 6
- NCDNCNXCDXHOMX-XGKFQTDJSA-N ritonavir Chemical compound N([C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@H](C[C@H](O)[C@H](CC=1C=CC=CC=1)NC(=O)OCC=1SC=NC=1)CC=1C=CC=CC=1)C(=O)N(C)CC1=CSC(C(C)C)=N1 NCDNCNXCDXHOMX-XGKFQTDJSA-N 0.000 claims abstract description 6
- BXZVVICBKDXVGW-NKWVEPMBSA-N Didanosine Chemical compound O1[C@H](CO)CC[C@@H]1N1C(NC=NC2=O)=C2N=C1 BXZVVICBKDXVGW-NKWVEPMBSA-N 0.000 claims abstract description 4
- 229960002656 didanosine Drugs 0.000 claims abstract description 4
- 239000000137 peptide hydrolase inhibitor Substances 0.000 claims abstract description 4
- UBQYURCVBFRUQT-UHFFFAOYSA-N N-benzoyl-Ferrioxamine B Chemical compound CC(=O)N(O)CCCCCNC(=O)CCC(=O)N(O)CCCCCNC(=O)CCC(=O)N(O)CCCCCN UBQYURCVBFRUQT-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 3
- 229960000958 deferoxamine Drugs 0.000 claims abstract description 3
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 claims abstract description 3
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 claims abstract description 3
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 claims abstract description 3
- 239000003419 rna directed dna polymerase inhibitor Substances 0.000 claims abstract description 3
- 241000700605 Viruses Species 0.000 claims description 10
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 claims description 8
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims description 6
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 claims description 5
- 229940124158 Protease/peptidase inhibitor Drugs 0.000 claims description 3
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 claims description 3
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 claims description 2
- XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N Iron Chemical compound [Fe] XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract description 22
- 229910052742 iron Inorganic materials 0.000 abstract description 11
- 239000002738 chelating agent Substances 0.000 abstract description 7
- 239000000203 mixture Substances 0.000 abstract description 4
- 239000003443 antiviral agent Substances 0.000 abstract description 3
- GGOZGYRTNQBSSA-UHFFFAOYSA-N pyridine-2,3-diol Chemical class OC1=CC=CN=C1O GGOZGYRTNQBSSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract description 2
- 229940042399 direct acting antivirals protease inhibitors Drugs 0.000 abstract 1
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 abstract 1
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 49
- 102100037904 CD9 antigen Human genes 0.000 description 45
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 23
- 210000005105 peripheral blood lymphocyte Anatomy 0.000 description 23
- 241000713772 Human immunodeficiency virus 1 Species 0.000 description 22
- 230000010076 replication Effects 0.000 description 20
- 231100000135 cytotoxicity Toxicity 0.000 description 15
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 15
- 230000004663 cell proliferation Effects 0.000 description 14
- 230000003013 cytotoxicity Effects 0.000 description 12
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 12
- TZXKOCQBRNJULO-UHFFFAOYSA-N Ferriprox Chemical compound CC1=C(O)C(=O)C=CN1C TZXKOCQBRNJULO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 10
- 210000004980 monocyte derived macrophage Anatomy 0.000 description 9
- 230000035755 proliferation Effects 0.000 description 9
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 description 8
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 8
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 7
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 6
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 6
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 6
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 6
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 6
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 6
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 6
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 6
- 230000002195 synergetic effect Effects 0.000 description 6
- 230000029812 viral genome replication Effects 0.000 description 6
- 238000010161 Student-Newman-Keuls test Methods 0.000 description 5
- 230000000996 additive effect Effects 0.000 description 5
- 238000000540 analysis of variance Methods 0.000 description 5
- 210000004698 lymphocyte Anatomy 0.000 description 5
- 210000001616 monocyte Anatomy 0.000 description 5
- 208000031886 HIV Infections Diseases 0.000 description 4
- 238000000134 MTT assay Methods 0.000 description 4
- 231100000002 MTT assay Toxicity 0.000 description 4
- 231100000433 cytotoxic Toxicity 0.000 description 4
- 230000001472 cytotoxic effect Effects 0.000 description 4
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 4
- 238000000034 method Methods 0.000 description 4
- 238000007619 statistical method Methods 0.000 description 4
- 238000010600 3H thymidine incorporation assay Methods 0.000 description 3
- 208000037357 HIV infectious disease Diseases 0.000 description 3
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 3
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 3
- 238000004364 calculation method Methods 0.000 description 3
- 230000005889 cellular cytotoxicity Effects 0.000 description 3
- 239000012228 culture supernatant Substances 0.000 description 3
- 231100000673 dose–response relationship Toxicity 0.000 description 3
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 3
- 208000033519 human immunodeficiency virus infectious disease Diseases 0.000 description 3
- 210000003819 peripheral blood mononuclear cell Anatomy 0.000 description 3
- CEAZRRDELHUEMR-URQXQFDESA-N Gentamicin Chemical compound O1[C@H](C(C)NC)CC[C@@H](N)[C@H]1O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O[C@@H]2[C@@H]([C@@H](NC)[C@@](C)(O)CO2)O)[C@H](N)C[C@@H]1N CEAZRRDELHUEMR-URQXQFDESA-N 0.000 description 2
- 229930182566 Gentamicin Natural products 0.000 description 2
- 239000000654 additive Substances 0.000 description 2
- 230000003042 antagnostic effect Effects 0.000 description 2
- 230000000840 anti-viral effect Effects 0.000 description 2
- MYSWGUAQZAJSOK-UHFFFAOYSA-N ciprofloxacin Chemical compound C12=CC(N3CCNCC3)=C(F)C=C2C(=O)C(C(=O)O)=CN1C1CC1 MYSWGUAQZAJSOK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 2
- 230000002349 favourable effect Effects 0.000 description 2
- 239000000463 material Substances 0.000 description 2
- AZKSAVLVSZKNRD-UHFFFAOYSA-M 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide Chemical compound [Br-].S1C(C)=C(C)N=C1[N+]1=NC(C=2C=CC=CC=2)=NN1C1=CC=CC=C1 AZKSAVLVSZKNRD-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-M Bicarbonate Chemical compound OC([O-])=O BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 1
- 108010051152 Carboxylesterase Proteins 0.000 description 1
- 102000013392 Carboxylesterase Human genes 0.000 description 1
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 description 1
- 230000006820 DNA synthesis Effects 0.000 description 1
- 102100037362 Fibronectin Human genes 0.000 description 1
- 108010067306 Fibronectins Proteins 0.000 description 1
- 238000002738 Giemsa staining Methods 0.000 description 1
- 108010002350 Interleukin-2 Proteins 0.000 description 1
- ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N L-glutamine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N 0.000 description 1
- 229930182816 L-glutamine Natural products 0.000 description 1
- 229920002274 Nalgene Polymers 0.000 description 1
- 108010047620 Phytohemagglutinins Proteins 0.000 description 1
- 239000012980 RPMI-1640 medium Substances 0.000 description 1
- 108091027981 Response element Proteins 0.000 description 1
- 239000004809 Teflon Substances 0.000 description 1
- 229920006362 Teflon® Polymers 0.000 description 1
- IQFYYKKMVGJFEH-XLPZGREQSA-N Thymidine Chemical compound O=C1NC(=O)C(C)=CN1[C@@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)C1 IQFYYKKMVGJFEH-XLPZGREQSA-N 0.000 description 1
- GLNADSQYFUSGOU-GPTZEZBUSA-J Trypan blue Chemical compound [Na+].[Na+].[Na+].[Na+].C1=C(S([O-])(=O)=O)C=C2C=C(S([O-])(=O)=O)C(/N=N/C3=CC=C(C=C3C)C=3C=C(C(=CC=3)\N=N\C=3C(=CC4=CC(=CC(N)=C4C=3O)S([O-])(=O)=O)S([O-])(=O)=O)C)=C(O)C2=C1N GLNADSQYFUSGOU-GPTZEZBUSA-J 0.000 description 1
- 108020005202 Viral DNA Proteins 0.000 description 1
- 108020000999 Viral RNA Proteins 0.000 description 1
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 1
- 230000008485 antagonism Effects 0.000 description 1
- 230000036436 anti-hiv Effects 0.000 description 1
- 230000001028 anti-proliverative effect Effects 0.000 description 1
- 229940121357 antivirals Drugs 0.000 description 1
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 1
- 210000000601 blood cell Anatomy 0.000 description 1
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 1
- 239000006285 cell suspension Substances 0.000 description 1
- 230000009920 chelation Effects 0.000 description 1
- 229960003405 ciprofloxacin Drugs 0.000 description 1
- 238000002648 combination therapy Methods 0.000 description 1
- -1 deferipone) Chemical class 0.000 description 1
- 230000006735 deficit Effects 0.000 description 1
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 1
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 1
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 1
- 239000000890 drug combination Substances 0.000 description 1
- 230000000857 drug effect Effects 0.000 description 1
- 230000007717 exclusion Effects 0.000 description 1
- 239000012894 fetal calf serum Substances 0.000 description 1
- 238000003306 harvesting Methods 0.000 description 1
- 208000002672 hepatitis B Diseases 0.000 description 1
- 210000005104 human peripheral blood lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 1
- 230000002779 inactivation Effects 0.000 description 1
- 238000010348 incorporation Methods 0.000 description 1
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 1
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 210000002540 macrophage Anatomy 0.000 description 1
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 1
- 238000012544 monitoring process Methods 0.000 description 1
- VGKONPUVOVVNSU-UHFFFAOYSA-N naphthalen-1-yl acetate Chemical compound C1=CC=C2C(OC(=O)C)=CC=CC2=C1 VGKONPUVOVVNSU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 231100000065 noncytotoxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000002020 noncytotoxic effect Effects 0.000 description 1
- 239000002777 nucleoside Substances 0.000 description 1
- 150000003833 nucleoside derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 230000037361 pathway Effects 0.000 description 1
- 230000001885 phytohemagglutinin Effects 0.000 description 1
- 239000004033 plastic Substances 0.000 description 1
- 230000034190 positive regulation of NF-kappaB transcription factor activity Effects 0.000 description 1
- 230000001566 pro-viral effect Effects 0.000 description 1
- 230000005180 public health Effects 0.000 description 1
- 239000003642 reactive oxygen metabolite Substances 0.000 description 1
- BOLDJAUMGUJJKM-LSDHHAIUSA-N renifolin D Natural products CC(=C)[C@@H]1Cc2c(O)c(O)ccc2[C@H]1CC(=O)c3ccc(O)cc3O BOLDJAUMGUJJKM-LSDHHAIUSA-N 0.000 description 1
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 1
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 1
- 238000010186 staining Methods 0.000 description 1
- 230000003068 static effect Effects 0.000 description 1
- 230000000638 stimulation Effects 0.000 description 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 1
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 1
- 230000008685 targeting Effects 0.000 description 1
- 230000001988 toxicity Effects 0.000 description 1
- 231100000419 toxicity Toxicity 0.000 description 1
- 238000013518 transcription Methods 0.000 description 1
- 230000035897 transcription Effects 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- A61K38/55—Protease inhibitors
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/16—Amides, e.g. hydroxamic acids
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/33—Heterocyclic compounds
- A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
- A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
- A61K31/44—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof
- A61K31/4412—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof having oxo groups directly attached to the heterocyclic ring
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/04—Peptides having up to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
- A61K38/14—Peptides containing saccharide radicals; Derivatives thereof, e.g. bleomycin, phleomycin, muramylpeptides or vancomycin
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K45/00—Medicinal preparations containing active ingredients not provided for in groups A61K31/00 - A61K41/00
- A61K45/06—Mixtures of active ingredients without chemical characterisation, e.g. antiphlogistics and cardiaca
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/12—Antivirals
- A61P31/14—Antivirals for RNA viruses
- A61P31/18—Antivirals for RNA viruses for HIV
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P39/00—General protective or antinoxious agents
- A61P39/04—Chelating agents
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Virology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Immunology (AREA)
- Communicable Diseases (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
- AIDS & HIV (AREA)
- Oncology (AREA)
- Toxicology (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
- Agricultural Chemicals And Associated Chemicals (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
Description
Farmaceuticum voor de behandeling van virale infecties in het bijzonder van het humane immunodeficiency virus (HIV).
De onderhavige uitvinding heeft betrekking op een farmaceuticum voor de behandeling van virale infecties in het bijzonder van het humane immunodeficiency virus (HIV).
Virale infecties in het bijzonder infecties door het 5 humane immunodeficiency virus (HIV) vormen een ernstige bedreiging voor de volksgezondheid. Wereldwijd worden veel inspanningen gedaan om te komen tot een farmaceuticum voor de bestrijding van deze veelal ongeneeslijke ziekte.
Het is bekend, dat ijzer betrokken is bij de repli-10 catie van de humane immunodeficiency virus. In de eerste plaats, het HIV-1 long terminal repeat (LTR) gedeelte bevat nucleaire factor (NF)-kB respons elementen, die provirale transcriptie reguleren. NF-kB activering kan worden beïnvloed met ijzer via de productie van reactieve zuurstof species.
15 Een tweede route waarlangs ijzerchelatie HIV repli catie kan beïnvloeden is de remming van de DNA synthese door inactivering van ijzer-afhankelijke rebonucleotide reductase.
Een andere strategie, die kan worden toegepast bij targeting van ijzerchelatoren tegen HIV-1 is een directe vi-20 rale DNA/RNA aanval.
De onderhavige uitvinding beoogt thans een farmaceuticum te verschaffen voor een efficiënte behandeling van virale infectie in het bijzonder van het humane immunodeficiency virus, waartoe het farmaceuticum het kenmerk heeft, 25 dat het farmaceuticum een preparaat omvat dat als actief bestanddeel een ijzerchelator bevat.
Geschikte ijzerchelatoren volgens de uitvinding kunnen zijn gekozen uit de groep van de hydroxamaten (zoals deferoxamine), de familie van de hydroxypyridinonen (zoals 30 deferipon), en de nucleïnezuur-bindende chemotherapeutica (zoals bleomycine).
Bijzonder verrassend is gebleken dat wanneer men in vitro naast het preparaat met als actief bestanddeel een ijzerchelator, tevens een preparaat dat een andere virusrem-35 mende verbinding bevat gebruikt bijzonder gunstige resultaten 2 worden verkregen tengevolge van het optreden van een syner-gistisch effect. Hierbij bleek een proteaseremmer, in het bijzonder ritonavir, bijzonder geschikt te zijn als virusrem-mend middel.
5 Een ander virusremmend middel dat met ijzerchelato- ren een gunstige synergi oplevert is reverse transcriptase-remmer, in het bijzonder dideoxyinosine.
Aanvraagster heeft in dit verband de invloed onderzocht van deferoxiamine (DF), deferipron (LI) en bleomycine 10 (BLM) op de HIV-1 replicatie in primaire bloedcellen. Daarbij werd gebruik gemaakt van humane perifere bloedlymfocyten (PBL) en monocyten-afgeleide macrofagen (MDM) zijnde de belangrijkste targetcellen voor HIV. Gebleken is hierbij dat de aanzienlijke afname van HIV-1 replicatie door DF gepaard ging 15 met proliferatie-inhibitie. Soortgelijks werd waargenomen met LI. Verrassend was dat BLM de virale replicatie in PBL en MDM remde zonder invloed te hebben op de lymfocytenproliferatie. De toepassing van de combinatie van ijzerchelatoren met de op zichzelf bekende antivirale middelen voor antivirale combina-20 tietherapie werd onderzocht. Wanneer DF werd toegepast in combinatie met de nucleoside analoog dideoxyinosine (ddl) bleek een verrassende synergistische inhibitie van p24 in HIV-geïnfecteerde PBL op te treden.
25 De bii de studie gebruikte materialen en toecrepaste methoden zi~in als volgt.
Cel isolatie.
Perifere bloedmononucleaire cel (PBMC) fracties werden geïsoleerd uit gehepariniseerd bloed van HIV-1-, HIV-2-30 en hepatitis B-seronegatieve donoren (Bloedbank, Utrecht) via Ficoll-Isopaque gradiënt separatie. De cellen werden twee keer gewassen en vervolgens hetzij onderworpen aan een tegenstroom centrifugale elutriatie onder oplevering van monocyte fracties, hetzij liet men monocyten in de PBMC fractie hech-35 ten aan met fibronectine beklede kolven voorafgaande aan het oogsten van de PBL fractie. De monocyten hadden een zuiverheid van >95% volgens de criteria van celmorfologie op May-Grünwald-Giemsa-gekleurde cytosmears en via niet-specifieke esterase kleuring onder gebruikmaking van a-naftylacetaat 3 (Sigma Chemical Co., St. Louis, MO) en PBL >85% zuiverheid via May-Grünwald-Giemsa-kleuring. Het percentage levende cellen van beide celtypes was >95% bij het begin van het experiment, zoals bepaald volgens de trypan-blauw exclusie. Geïso-5 leerde monocyten werden gekweekt in een suspensie bij een concentratie van 2 x 106 cellen/ml in teflon kolven teneinde hechting tot het minimum te beperken (Nalgene, Rocherster, NY), waarbij men de monocyten liet differentiëren gedurende 7 dagen. Het MDM medium bestond uit Dulbecco's gemodificeerd 10 Eagle's medium aangevuld met 10% hitte-geinactiveerde menselijk AB serum, negatief voor anti-HIV antilichamen (Bloedbank, Utrecht), 10 /tg/ml gentamycine (Life Technologies Ltd., Paisley, Schotland) , 5 jig/ml ciprofloxacine (Beyer,
Leverkusen, Duitsland), 0,6 mg/ml L-glutamine (Sigma) en 3,4 15 g/L bicarbonaat (Merck, Darmstadt, Duitsland). Geïsoleerd PBL werd gedurende 3 dagen gestimuleerd te profileren onder toevoeging van 4 μg/ml phytohemagglutinine (PHA; Sigma) in RPMI-1640 (Life Technologies Ltd.) medium aangevuld met 10% hitte geïnactiveerde foetaal kalf serum (Life Technologies Ltd.) en 20 10 μg/ml gentamycine. Na PHA stimulatie werd het PBL gekweekt in een medium met daarin 10 U/ml humane recombinant IL-2 (Boehringer, Mannheim, Duitsland). Alle incubaties werden uitgevoerd in 96-druppelplaatjes met vlakke bodem bij 37°C, 5% C02 en 95% lucht.
25 HIV infectie en p24 metingen.
De cellen werden gedurende 2 uur geïnfecteerd met HIV-Isa.! Macrofagen werden geïnfecteerd met multipliciteit (MOD van 0,005 en lymfocyten met een MOI van 0,001. De cel-30 len werden vervolgens twee keer gewassen ter verwijdering van de overmaat virus en vervolgens geïncubeerd met hetzij DF (Novartis Pharma, Arnhem), LI (afkomstig van Duchefa Farma B.V., Haarlem) hetzij BLM (H. Lundbeck A/S. Kopenhagen, Denemarken) gedurende 5 dagen. Virus in het kweeksupernatant 35 werd geïnactiveerd in een eindconcentratie van 0,05% empigen (Calbiochem-Novabiochem Co., La Jolla, CA). De aanwezigheid van HIV-1 in het geïnactiveerde supernatant werd gevolgd door controle van het p24 antigeen via de enzyme-gekoppelde immunosorbent test (ELISA).
4
Lymfocyte proliferatie metingen.
Aangezien ijzerchelatoren cellulaire proliferatie kunnen beïnvloeden werd het effect van de drie ijzerchelatoren op PBL proliferatie onderzocht. Dit werd uitgevoerd door 5 gedurende de nacht de 3H-thymidine (3H-TdR) inbouw in DNA te volgen. Er werd 25 μΐ 3H-TdR (0,5 μ0±, Amersham International plc, Engeland) toegevoegd in aanwezigheid van DF, LI, BLM of DF/ddl combinatie, in een totaal volume van 200 μΐ celsuspen-sie na 4 dagen incubatie met de verschillende concentraties 10 van de toegepaste verbinding. Celincubaties werden in 96- putjes bevattende kunststof platen (Costrar, Cambridge, MA, Amerika). Na incubatie gedurende de nacht met 3H-TdR werden de cellen geoogst onder gebruikmaking van een automatische microcelverzamelaar (Titertek® celverzakelaar 530). Het fil-15 ter werd vervolgens gedroogd en ondergedompeld in een scin-tillatie cocktail (Wallace UK). De radioactiviteit werd geteld in een Mark II vloeibaar scintillatiesysteem (Model x, tricton analytics, Inc.).
2 0 Cyto toxiciteit.
Mogelijke cytotoxiciteit van DF, LI of BLM werd onderzocht door de MTT [3-(4,5 dimethylthiazol-2-yl)-2,5-dife-nyltetrazoliumbromide] (Sigma) test.
25 Studies van DF-ddl combinatie.
Drie afzonderlijke experimenten werden uitgevoerd in hoofdzaak zoals uiteengezet onder hoofdstuk HIV infectie en p24 metingen. Meervoudig verdunde gefixeerde verhoudingscom-binaties van de geneesmiddelen, of enkelvoudige geneesmidde-30 len werden toegevoegd bij elk incubatiepunt. De IC50 (remmende concentratie) voor elk geneesmiddel werd berekend onder gebruikmaking van het computer software programma CalcuSyn.
Het gecombineerde geneesmiddel effect werd geëvalueerd door middel van het gemiddelde effect principe en de isobologram 35 methode. Deze methode omvat het uitzetten van het dosis-effect curve voor elk geneesmiddel alleen dan wel in combinatie van elkaar. De helling van de gemiddelde-effect curve en de x intercept van de curve werden vervolgens toegepast voor de computerberekening van een combinatie-index 5 (Cl). De Cl waarden werden gebaseerd op de klassieke isobolo-gram vergelijking en Cl waarden van <1, 1 en >1 wijzen op synergisme (groter dan het verwachte additieve effect), addi-tieve effecten en antagonisme (minder dan het verwachte addi-5 tieve effect). De aangetaste fractie (fa) werd berekend voor elke geneesmiddelcombinatie en voor elk geneesmiddel alleen na p24 metingen in geïnfecteerd PBL geïncubeerd gedurende 5 dagen met de onderzochte verbindingen (zie HIV infectie en p24 metingen).
10
Statistische analyse.
Herhaalde metingen ANOVA en student Newman-Keuls test werden toegepast voor het analyseren van de gegevens. P waarden beneden 0,05 werden als significant beschouwd.
15
Resultaten
Effect van DF op HIV-1 replicatie, cellulaire proliferatie en cytotoxiciteit in FBI.
DF bleek p24 concentraties in kweek supernatanten te 20 verlagen. Bij een concentratie van 3 μΜ DF werd een 40% afname van virus replicatie in PBL (19 versus 11 ng p24/ml, n=3, p<0,05) waargenomen. Een concentratie aan de verbinding van 30 μΜ bleek de p24 niveaus te verminderen met >90% (fig. IA) 25 van 19 tot 1,9 ng p24/ml(n=3). Teneinde de mogelijkheid uit te sluiten dat deze remmende invloed te danken zou zijn aan cytotoxiciteit werd het percentage levende cellen gemonitord. Een DF concentratie van 100 μΜ bleek cytotoxisch te zijn (fig. 1B) . Bovendien werd tengevolge van de anti-prolifera-30 tieve eigenschappen van DF ook de cellulaire proliferatie gemonitord. De waargenomen afname in p24 ging gepaard met een afname in proliferatie (fig. 1C). Gebleken is dat non-cyto-toxische DF concentraties geschikt waren voor het doen afnemen van de HIV replicatie, welke afname gepaard ging met cel-35 lulaire proliferatie-remming.
Effect van LI op HIV-1 replicatie, cellulaire proliferatie en cytotoxiciteit in PBL> HIV-1 replicatie in lymfocyten nam af tot minimale 6 concentraties door 100 μΜ LI (fig. 2A). Deze concentratie was niet cytotoxisch in PBL (fig. 2B). Er blijkt een drempelwaarde te zijn in LI concentratie, waarbij de remmingscurve zeer steil was, welk verschijnsel eveneens gepaard ging met een 5 afname in proliferatie (fig. 2C). Zo kon de waargenomen HIV-inhibitie met LI worden toegeschreven aan de cellulaire proliferatie inhibitie. Bij lagere concentraties aan de onderzochte verbinding kon een geringe toename in p24 antigeen productie worden waargenomen (fig. 2A).
10
Effect van BLM op HIV-1 replicatie, cellulaire proliferatie en cyto toxiciteit in PBL.
BLM bleek dosisafhankelijk HIV-1 replicatie te verminderen in lymfocyten (fig. 3A). Deze verbinding bleek niet 15 cytotoxisch te zijn in PBL (fig. 3B). Bij concentraties in het traject van 3-300 ng BLM/ml bleek een 20-50% verlaging teweeg te worden gebracht, hetgeen overeenkwam met een afname van 19 tot 15 (20%) of 9,5 (50%) ng p24/ml (n=3) (fig. 3A). Cellulaire proliferatie bleef in tact (fig. 3C). Hieruit 20 blijkt dat de HIV-1 inhibitie door BLM, in tegenstelling tot DF en LI, via een ander mechanisme verliep dan de cellulaire proliferatie inhibitie.
Invloed van DF, LI, en BLM op HIV-1 replicatie en 25 cytotoxiciteit in MDM.
In MDM, DF concentraties rond de 100 μπι bleek de levende replicatie te verminderen met maximaal 50% (1,2 versus 0,6 ng p24/ml) in een dosis afhankelijke manier (fig. 4AI) . Deze p24 afname bleek echter gepaard te gaan met de aantas-30 ting van de cytotoxiciteit (fig. 4AII). LI in de bestudeerde concentraties bleek de p24 antigeen productie verrassenderwijs tweevoudig te doen toenemen bij 30 μΜ (fig. 4BI). Deze concentraties bleken niet cytotoxisch te zijn (fig. 4BII) .
In MDM werd voorts eveneens een dosis afhankelijke 35 afname in p24 concentraties waargenomen met een 50% vermindering bij 300 ng BLM/ml van 1,2 tot 0,6 ng p24/ml (fig. 4CI). Gebleken is dat BLM concentraties, soortgelijke concentraties als PBL, het percentage levende cellen in MDM (fig. 4CII) niet hebben aangetast.
7
Gecombineerde antivirale invloed van DF-ddl.
Een matig tot sterk synergisme werd waargenomen bij gebruik van DF in combinatie met ddl. Fig. 5 toont een representatieve grafiek voor de combinatie index (Cl) met betrek-5 king tot een fractie die is aangetast (fa) voor de inhibitie van HIV door een mengsel van DF en ddl (molair verhouding 4:1) . IC50 van DF was 8,5 μΜ en dat van ddl 3,7 μΜ. Uit fig. 5 blijkt duidelijk dat er een aanzienlijk synergisme is bij alle fa, die zijn verkregen met verschillende combinaties, 10 waarbij het synergisme sterker is naarmate fa toeneemt. Rondom de IC50 concentraties van beide DF en ddl (combinatiepunten op fig. 5: 10 μΜ DF: 2,5 μΜ ddl), werd de hoogste fa waarde verkregen en de combinatie was sterk synergistisch. Cellulaire proliferatie werd gemonitord met deze combinaties met elk 15 geneesmiddel afzonderlijk. Gebleken is dat ddl in combinatie met DF niet een additionele remmende invloed had op cellulaire proliferatie vergeleken met DF alleen.
De uitvinding wordt nader toegelicht aan de hand van figuren 1-6.
20 - Fig. 1. Effect van DF op HIV-1 replicatie (A) , cytotoxi- citeit (B) en cellulaire proliferatie (C) in PBL na 5 dagen incubatie met DF.
Voor de bepaling van de HIV-1 replicatie werden cellen 2 uur geïnfecteerd met HIV-1^,^ bij een MOI van 0,001; de 25 cellen werden vervolgens 2 keer gewassen en geïncubeerd met verschillende DF concentraties. Na 5 dagen werd het supernatant gebruikt voor p24 ELISA. Virus replicatie werd uitgedrukt als % p24 reductie na DF incubaties, vergeleken met p24 gemeten bij controle HlV-geïnfecteerde cellen geïncubeerd in 30 de afwezigheid van DF (gesteld op 100% p24). Cytotoxiciteit werd bepaald met de MTT test en wordt weergegeven als % levende cellen na 5 dagen incubatie met DF, vergeleken met levende cellen van controle HlV-geïnfecteerde cellen geïncubeerd in de afwezigheid van DF (gesteld op 100% levende cel-35 len). PBL proliferatie werd gemeten door overnacht 3H-thymi-dine incorporatie, na 4 dagen incubatie van de cellen met DF; het is weergegeven als 'counts per minute' (cpm) na DF incubaties, vergeleken met cpm in controle cellen, geïncubeerd in de afwezigheid van DF. Resultaten zijn gemiddelden van 3 ex- 8 perimenten in duplo (statistische analyse met behulp van herhaalde ANOVA en student Newman-Keuls test, *p<0,05). 100% p24 productie komt overeen met 19 ng p24/ml.
- Fig. 2. Effect van LI op HIV-1 replicatie (A), cytotoxi-5 citeit (B) en cellulaire proliferatie (C) in PBL na 5 dagen incubatie met LI.
Voor de bepaling van de HIV-1 replicatie werden cellen 2 uur geïnfecteerd met HIV-lBa_L bij een MOI van 0,001; de cellen werden vervolgens 2 keer gewassen en geïncubeerd met 10 verschillende LI concentraties. Na 5 dagen werd het supernatant gebruikt voor p24 ELISA. Virus replicatie werd uitgedrukt als % p24 reductie na LI incubaties, vergeleken met p24, gemeten bij controle HlV-geïnfecteerde cellen, geïncubeerd in de afwezigheid van LI (gesteld op 100% p24). Cyto-15 toxiciteit werd bepaald met de MTT test en wordt weergegeven als % levende cellen na 5 dagen LI incubatie met LI, vergeleken met levende cellen van controle HlV-geïnfecteerde cellen, geïncubeerd in de afwezigheid van LI (gesteld op 100% levende cellen). PBL proliferatie werd gemeten door overnacht 3H-thy-20 midine incorporatie, na 4 dagen incubatie van de cellen met LI; het is weergegeven als 'counts per minute' (cpm) na LI incubaties, vergeleken met cpm in controle cellen, geïncubeerd in de afwezigheid van LI. Resultaten zijn gemiddelden van 3 experimenten in duplo (statistische analyse met behulp 25 van herhaalde ANOVA en student Newman-Keuls test, *p<0,05). 100% p24 productie komt overeen met 19 ng p24/ml.
- Fig. 3. Effect van BLM op HIV-1 replicatie (A) , cytoto-xiciteit (B) en cellulaire proliferatie (C) in PBL na 5 dagen incubatie met BLM.
30 Voor de bepaling van de HIV-1 replicatie werden cel len 2 uur geïnfecteerd met HIV-lBa_L bij een MOI van 0,001; de cellen werden vervolgens 2 keer gewassen en geïncubeerd met verschillende BLM concentraties. Na 5 dagen werd het supernatant gebruikt voor p24 ELISA. Virus replicatie werd uitge-35 drukt als % p24 reductie na BLM incubaties, vergeleken met p24, gemeten bij controle HlV-geïnfecteerde cellen geïncubeerd in de afwezigheid van BLM (gesteld op 100% p24). Cyto-toxiciteit werd bepaald met de MTT test en wordt weergegeven als % levende cellen na 5 dagen incubaties met BLM, vergele- 9 ken met levende cellen van controle HIV-geinfecteerde cellen geïncubeerd in de afwezigheid van BLM (gesteld op 100% levende cellen). PBL proliferatie werd gemeten door overnacht 3H-thymidine incorporatie, na 4 dagen incubatie van de cellen 5 met BLM; het is weergegeven als 'counts per minute' (cpm) na BLM incubaties, vergeleken met cpm in controle cellen, geïn-cubeerd in de afwezigheid van BLM. Resultaten zijn gemiddelden van 3 experimenten in duplo (statistische analyse met behulp van herhaalde ANOVA en student Newman-Keuls test, 10 *p<0,05). 100% p24 productie komt overeen met 19 ng p24/ml.
- Fig. 4. Effect van DF (AI-II), LI (BI-II) en BLM (CI-II) op HIV-1 replicatie (A-CI) en cytotoxiciteit (A-CII) in MDM na 5 dagen incubatie.
Voor de bepaling van de HIV-1 replicatie werden cel-15 len 2 uur geïnfecteerd met HIV-lBa.L bij MOI van 0,001; de cellen werden vervolgens 2 keer gewassen en geïncubeerd met verschillende concentraties agens. Na 5 dagen werd het supernatant gebruikt voor p24 ELISA. Virus replicatie werd uitgedrukt als % p24 reductie na incubaties, vergeleken met p24, 20 gemeten bij controle HlV-geïnfecteerde cellen, geïncubeerd in de afwezigheid van de verbindingen (gesteld op 100% p24). Cytotoxiciteit werd bepaald met de MTT test en wordt weergegeven als % levende cellen na 5 dagen incubatie, vergeleken met levende cellen van controle HlV-geïnfecteerde cellen geïncu-25 beerd in de afwezigheid van de verbindingen (gesteld op 100% levende cellen). Resultaten zijn gemiddelden van 3 experimenten in duplo (statistische analyse met behulp van herhaalde ANOVA en student Newman-Keuls test, *p<0,05). 100% p24 productie komt overeen met 1,2 ng p24/ml.
30 - Fig. 5. Grafische presentatie van de combinatie index (Cl) gebaseerd op de fractie remming (fa = fraction affected) van het p24-antigeen door een mix van DF en ddl (molaire ratio 4:1). Data punten op de grafiek wordt aangegeven als conc DF en ddl beide in μΜ. C1<1, = 1 en >1 duiden respectievelijk 35 op synergistische, additieve en antagonistische effecten. De onderverdelingen in het synergistisch gebied (CI>0,7, 0,3-0,7 en <0,3 duiden respectievelijk op matig synergisme, synergis-me en sterk synergisme) is volgens Chou en Talalay. De parameters worden verkregen met de gemiddelde effectberekening 10 van Chou en Talalay en het CalcuSync cqmputer software programma zoals beschreven bij "materialen en methoden". De IC50 van DF was 8,5 μΜ en die van ddl was 3,7 μΜ in dit experiment. Deze grafiek is representatief voor 3 onafhankelijke 5 experimenten.
- Fig. 6. Grafische presentatie van de combinatie index (Cl) gebaseerd op de fractie remming (fa = fraction affected) van het p24-antigeen door een mix van bleomycine (BLM) en ritonavir (ratio 30:1). Perifere bloed lymfocyten (PBL) werden 10 2 uur geïnfecteerd met HIV-lBa_L bij een MOI van 0,001. De cel len werden vervolgens 2 keer gewassen om overmaat virus te verwijderen en daarna 5 dagen geïncubeerd met alleen BLM, alleen ritonavir of verschillende combinaties van beide stoffen. Virus in het supernatant van de celkweken werd geïnacti-15 veerd in een eindconcentratie van 0,05% empigen en de aanwezigheid van HIV-1 in het geïnactiveerde supernatant werd gemeten door bepaling van het p24 antigeen met enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA). CI<1, = l en >1 duiden respectievelijk op synergistische, additieve en antagonistische ef-20 fecten, volgens Chou en Talalay. De parameters worden verkregen met de gemiddelde effectberekening (median effect equation) van Chou en Talalay en het CalcuSync computer software programma. De IC50 van BLM was 1,9 μg/ml en die van ritonavir was 0,04 μΜ in dit experiment. Deze grafiek is representatief 25 voor twee onafhankelijke experimenten.
Claims (7)
1. Farmaceuticum voor de behandeling van virale infecties in het bijzonder van het humane immunodeficiency virus (HIV), met het kenmerk, dat het farmaceuticum een preparaat omvat dat als actief bestanddeel een ijzerchelator 5 bevat.
2. Farmaceuticum volgens conclusie 1, met het kenmerk, dat de ijzerchelator gekozen is uit de groep van de hy-droxamaten (zoals deferoxamine), de familie van de hydroxypy-ridionen (zoals deferipon), en de nucleInezuur-bindende 10 chemotherapeutica (zoals bleomycine).
3. Farmaceuticum volgens conclusie 1 of 2, met het kenmerk, dat het farmaceuticum naast het preparaat dat de ij-zerchelator bevat tevens een preparaat omvat, dat een ander virusremmend middel bevat.
4. Farmaceuticum volgens conclusie 3, met het ken merk, dat het virusremmende middel een proteaseremmer is.
5. Farmaceuticum volgens conclusie 4, met het kenmerk, dat de proteaseremmer ritonavir is.
6. Farmaceuticum volgens conclusie 3, met het ken- 20 merk, dat het virusremmende middel een reverse transcrip- tease-remmer is.
7. Farmaceuticum volgens conclusie 6, met het kenmerk, dat de reverse transcriptaseremmer een dideoxyinosine 25 is. 1012825
Priority Applications (6)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| NL1012825A NL1012825C2 (nl) | 1999-08-13 | 1999-08-13 | Farmaceuticum voor de behandeling van virale infecties in het bijzonder van het humane immunodeficiency virus (HIV). |
| PCT/NL2000/000559 WO2001012168A2 (en) | 1999-08-13 | 2000-08-09 | Antiviral pharmaceutical compositions containing iron chelators |
| EP00952070A EP1257261B1 (en) | 1999-08-13 | 2000-08-09 | Antiviral pharmaceutical compositions containing iron chelators |
| AU64831/00A AU6483100A (en) | 1999-08-13 | 2000-08-09 | Pharmaceutical product for the treatment of viral infections, in particular of the human immunodeficiency virus (hiv) |
| DE60016044T DE60016044D1 (de) | 1999-08-13 | 2000-08-09 | Eisenchelator enthaltende antivirale pharmazeutische zusammensetzungen |
| AT00952070T ATE282430T1 (de) | 1999-08-13 | 2000-08-09 | Eisenchelator enthaltende antivirale pharmazeutische zusammensetzungen |
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| NL1012825A NL1012825C2 (nl) | 1999-08-13 | 1999-08-13 | Farmaceuticum voor de behandeling van virale infecties in het bijzonder van het humane immunodeficiency virus (HIV). |
| NL1012825 | 1999-08-13 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| NL1012825A1 NL1012825A1 (nl) | 2001-02-14 |
| NL1012825C2 true NL1012825C2 (nl) | 2001-02-23 |
Family
ID=19769735
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| NL1012825A NL1012825C2 (nl) | 1999-08-13 | 1999-08-13 | Farmaceuticum voor de behandeling van virale infecties in het bijzonder van het humane immunodeficiency virus (HIV). |
Country Status (6)
| Country | Link |
|---|---|
| EP (1) | EP1257261B1 (nl) |
| AT (1) | ATE282430T1 (nl) |
| AU (1) | AU6483100A (nl) |
| DE (1) | DE60016044D1 (nl) |
| NL (1) | NL1012825C2 (nl) |
| WO (1) | WO2001012168A2 (nl) |
Families Citing this family (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| AU2003210850A1 (en) | 2002-02-05 | 2003-09-02 | Bristol-Myers Squibb Company | N-substituted3-hydroxy-4-pyridinones and pharmaceuticals containing thereof |
| US20120095058A1 (en) * | 2003-12-03 | 2012-04-19 | Hanauske-Abel H M | Method of preventing survival of retrovirally cells and of inhibiting formation of infectious retroviruses |
| WO2016102541A1 (en) * | 2014-12-22 | 2016-06-30 | Université Libre de Bruxelles | Composition comprising vancomycin and orlistat |
Citations (10)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP0484071A2 (en) * | 1990-11-01 | 1992-05-06 | Merck & Co. Inc. | Synergism of HIV reverse transcriptase inhibitors |
| WO1992015329A1 (en) * | 1991-02-28 | 1992-09-17 | The United States Of America, Represented By The Secretary, United States Department Of Commerce | Methods and pharmaceutical compositions for inhibiting protease from human immunodeficiency virus |
| WO1992016200A1 (en) * | 1991-03-20 | 1992-10-01 | The United States Of America, As Represented By The Secretary, U.S. Department Of Commerce | The use of hydroxamic acid derivatives to inhibit viral replication |
| WO1994026717A1 (en) * | 1993-05-07 | 1994-11-24 | Merck & Co., Inc. | Hiv protease inhibitors useful for the treatment of aids |
| WO1995017899A2 (en) * | 1993-12-20 | 1995-07-06 | Compagnie De Developpement Aguettant | Mixtures of dideoxy-nucleosides and hydroxycarbamide for inhibiting retroviral spread |
| WO1995027485A1 (en) * | 1994-04-08 | 1995-10-19 | The Procter & Gamble Company | Methods of using iron chelating compounds to reduce free radical damage in mammals |
| WO1997021683A1 (en) * | 1995-12-13 | 1997-06-19 | Abbott Laboratories | Retroviral protease inhibiting compounds |
| US5905068A (en) * | 1996-09-24 | 1999-05-18 | Abbott Laboratories | Retroviral protease inhibiting compounds |
| US5977086A (en) * | 1997-03-07 | 1999-11-02 | R.I.G.H.T. | Method of inhibiting human immunodeficiency virus by combined use of hydroxyurea, a nucleoside analog, and a protease inhibitor |
| WO1999059601A1 (nl) * | 1998-05-20 | 1999-11-25 | Faculteit Geneeskunde Universiteit Utrecht | Use of a nucleic acid-comprising chemotherapeutic agent, and a pharmaceutical composition |
-
1999
- 1999-08-13 NL NL1012825A patent/NL1012825C2/nl not_active IP Right Cessation
-
2000
- 2000-08-09 AU AU64831/00A patent/AU6483100A/en not_active Abandoned
- 2000-08-09 DE DE60016044T patent/DE60016044D1/de not_active Expired - Lifetime
- 2000-08-09 AT AT00952070T patent/ATE282430T1/de not_active IP Right Cessation
- 2000-08-09 EP EP00952070A patent/EP1257261B1/en not_active Expired - Lifetime
- 2000-08-09 WO PCT/NL2000/000559 patent/WO2001012168A2/en active IP Right Grant
Patent Citations (10)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP0484071A2 (en) * | 1990-11-01 | 1992-05-06 | Merck & Co. Inc. | Synergism of HIV reverse transcriptase inhibitors |
| WO1992015329A1 (en) * | 1991-02-28 | 1992-09-17 | The United States Of America, Represented By The Secretary, United States Department Of Commerce | Methods and pharmaceutical compositions for inhibiting protease from human immunodeficiency virus |
| WO1992016200A1 (en) * | 1991-03-20 | 1992-10-01 | The United States Of America, As Represented By The Secretary, U.S. Department Of Commerce | The use of hydroxamic acid derivatives to inhibit viral replication |
| WO1994026717A1 (en) * | 1993-05-07 | 1994-11-24 | Merck & Co., Inc. | Hiv protease inhibitors useful for the treatment of aids |
| WO1995017899A2 (en) * | 1993-12-20 | 1995-07-06 | Compagnie De Developpement Aguettant | Mixtures of dideoxy-nucleosides and hydroxycarbamide for inhibiting retroviral spread |
| WO1995027485A1 (en) * | 1994-04-08 | 1995-10-19 | The Procter & Gamble Company | Methods of using iron chelating compounds to reduce free radical damage in mammals |
| WO1997021683A1 (en) * | 1995-12-13 | 1997-06-19 | Abbott Laboratories | Retroviral protease inhibiting compounds |
| US5905068A (en) * | 1996-09-24 | 1999-05-18 | Abbott Laboratories | Retroviral protease inhibiting compounds |
| US5977086A (en) * | 1997-03-07 | 1999-11-02 | R.I.G.H.T. | Method of inhibiting human immunodeficiency virus by combined use of hydroxyurea, a nucleoside analog, and a protease inhibitor |
| WO1999059601A1 (nl) * | 1998-05-20 | 1999-11-25 | Faculteit Geneeskunde Universiteit Utrecht | Use of a nucleic acid-comprising chemotherapeutic agent, and a pharmaceutical composition |
Non-Patent Citations (7)
| Title |
|---|
| DATABASE WPI Week 199908, Derwent World Patents Index; AN 1999-094401, XP002139698 * |
| FEORINO P M ET AL: "PREVENTION OF ACTIVATION OF HIV-1 BY ANTIVIRAL AGENTS IN OM-10.1 CELLS", ANTIVIRAL CHEMISTRY & CHEMOTHERAPY,GB,BLACKWELL SCIENTIFIC PUBL., LONDON, vol. 4, no. 1, 1 January 1993 (1993-01-01), pages 55 - 63, XP000576587, ISSN: 0956-3202 * |
| GAO ET AL.: "Anti-human immunodeficiency virus type 1 activity of hydroxyurea in combination with 2',3'-dideoxynucleosides", MOL. PHARMACOL., vol. 46, no. 4, 1994, pages 767 - 772, XP000573476 * |
| MALLEY S D ET AL: "SYNERGISTIC ANTI-HUMAN IMMUNODEFICIENCY VIRUS TYPE 1 EFFECT OF HYDROXAMATE COMPOUNDS WITH 2',3'-DIDEOXYINOSINE IN INFECTED RESTING HUMAN LYMPHOCYTES", PROCEEDINGS OF THE NATIONAL ACADEMY OF SCIENCES OF USA,US,NATIONAL ACADEMY OF SCIENCE. WASHINGTON, vol. 91, 1 November 1994 (1994-11-01), pages 11017 - 11021, XP000572692, ISSN: 0027-8424 * |
| MAYHEW ET AL.: "Effective use of ribonucleotide reductase inhibitors (didox and trimidox) alone or in combination with didanosine (ddI) to suppress disease progression and increase survival in murine acquired immunodeficiency syndrome (MAIDS)", CELL. MOL. BIOL., vol. 43, no. 7, 1997, pages 1019 - 1029, XP000913821 * |
| R M BURGER ET AL: "Mechanism of bleomycin action: in vitro studies", LIFE SCIENCES,GB,PERGAMON PRESS, OXFORD, vol. 28, no. 7, 1 January 1981 (1981-01-01), pages 715 - 727, XP002095487, ISSN: 0024-3205 * |
| SAPPEY ET AL: "Iron chelation decreases NF-kB and HIV type 1 activation due to oxidative stress", AIDS RESEARCH AND HUMAN RETROVIRUSES,US,MARY ANN LIEBERT, vol. 11, no. 9, 1995, pages 1049 - 1061, XP002104523, ISSN: 0889-2229 * |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| ATE282430T1 (de) | 2004-12-15 |
| WO2001012168A3 (en) | 2002-06-06 |
| DE60016044D1 (de) | 2004-12-23 |
| AU6483100A (en) | 2001-03-13 |
| EP1257261B1 (en) | 2004-11-17 |
| WO2001012168A2 (en) | 2001-02-22 |
| NL1012825A1 (nl) | 2001-02-14 |
| EP1257261A2 (en) | 2002-11-20 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Harakeh et al. | Suppression of human immunodeficiency virus replication by ascorbate in chronically and acutely infected cells. | |
| US6093702A (en) | Mixtures of dideoxy-nucleosides and hydroxycarbamide for inhibiting retroviral spread | |
| Sappey et al. | Iron Chelation Decreases NF-k B and HIV Type 1 Activation due to Oxidative Stress | |
| CA2179627C (en) | Mixtures of dideoxy-nucleosides and hydroxycarbamide for inhibiting retroviral spread | |
| HO et al. | Glutathione and N-acetylcysteine suppression of human immunodeficiency virus replication in human monocyte/macrophages in vitro | |
| US20040167204A1 (en) | Pharmacological agents and methods of treatment that inactivate pathogenic prokaryotic and eukaryotic cells and viruses by attacking highly conserved domains in structural metalloprotien and metalloenzyme targets | |
| EP1023284B1 (en) | Anti-viral pharmaceutical compositions containing saturated 1,2-dithiaheterocyclic compounds | |
| WO1998001440A9 (en) | Anti-viral pharmaceutical compositions containing saturated 1,2-dithiaheterocyclic compounds and uses thereof | |
| Pereira et al. | Anti-HIV drug development-an overview | |
| TURANO et al. | Inhibitory effect of papaverine on HIV replication in vitro | |
| HRP960070A2 (en) | Use of quinoxaline and protease inhibitors in a composition for the treatment of aids and/or hiv infections | |
| NL1012825C2 (nl) | Farmaceuticum voor de behandeling van virale infecties in het bijzonder van het humane immunodeficiency virus (HIV). | |
| US5824664A (en) | Suppression of HIV expression by organic thiophosphate | |
| YANG et al. | Inhibition of HIV-1 latency reactivation by dehydroepiandrosterone (DHEA) and an analog of DHEA | |
| Koup et al. | Nevirapine synergistically inhibits HIV-1 replication in combination with zidovudine, interferon or CD4 immunoadhesin | |
| CA2386325C (en) | Gallium complexes of 3-hydroxy-4-pyrones to treat infection by intracellular prokaryotes, dna viruses and retroviruses | |
| KR100403545B1 (ko) | Hiv-1감염증의예방및치료를위한조성물및방법 | |
| EP2908821A1 (en) | Treatment of viral and infectious diseases using an inhibitor of cbp/catenin | |
| RU2182828C1 (ru) | Композиция, обладающая антивич и антигерпесной активностью | |
| Kira et al. | 2-Glycineamide-5-chlorophenyl 2-pyrryl ketone, a non-benzodiazepin Tat antagonist, is effective against acute and chronic HIV-1 infections in vitro | |
| WO2018142428A1 (en) | Herbal microbicide formulation for preventing hiv | |
| Mahmood et al. | Medicinal Chemistry: Anti‐HIV Activity and Mechanism of Action of Macrocyclic Diamide SRR‐SB3 | |
| WO1992003052A1 (en) | Method for suppression of hiv replication by ascorbate for chronic and acute hiv infection | |
| Sadaie et al. | 9-Nitrocamptothecin selectively inhibits human immunodeficiency virus type 1 replication in freshly infected parental but not 9-nitrocamptothecin-resistant U937 monocytoid cells | |
| EP1631145A2 (en) | P38 kinase inhibitor compositions and methods of using the same |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| AD1B | A search report has been drawn up | ||
| PD2B | A search report has been drawn up | ||
| VD1 | Lapsed due to non-payment of the annual fee |
Effective date: 20050301 |