RU2008147664A

RU2008147664A - Производные аллергена

Info

Publication number: RU2008147664A
Application number: RU2008147664/13A
Authority: RU
Inventors: Таня БАЛЬ (AT); Таня БАЛЬ; Биргит ЛИНХАРТ (AT); Биргит ЛИНХАРТ; Петер ВАЛЕНТ (AT); Петер ВАЛЕНТ; Ангелика СТЁКЛИНГЕР (AT); Ангелика СТЁКЛИНГЕР; Кристиан ЛУПИНЕК (AT); Кристиан ЛУПИНЕК; Йозеф ТАЛЬХАМЕР (AT); Йозеф ТАЛЬХАМЕР; Рудольф ВАЛЕНТА (AT); Рудольф ВАЛЕНТА
Original assignee: Биомей Аг (At); Биомей Аг; Аллергофарма Йоахим Ганцер Кг (De); Аллергофарма Йоахим Ганцер Кг
Priority date: 2006-05-03
Filing date: 2007-05-03
Publication date: 2010-06-10
Also published as: WO2007124526A1; AU2007246152A1; CA2649057A1; AT503296A4; JP2009535041A; CN101432298A; AT503296B1; EP2027147A1; US20090098167A1

Abstract

1. Способ получения производных белкового аллергена дикого типа Ph1 p 1 c пониженной аллергенной активностью по сравнению с аллергеном дикого типа, который включает следующие стадии: ! получение белкового аллергена дикого типа Ph1 p 1, ! фрагментирование указанного белкового аллергена дикого типа по меньшей мере на три фрагмента, причем по меньшей мере один из указанных по меньшей мере трех фрагментов содержит по меньшей мере один Т-клеточный эпитоп, а указанные по меньшей мере три фрагмента обладают пониженной аллергенной активностью либо не обладают аллергенной активностью, и ! воссоединение указанных по меньшей мере трех фрагментов в таком порядке, который отличается от порядка фрагментов у аллергена дикого типа. ! 2. Способ по п.1, отличающийся тем, что снижение аллергенной активности измеряют по уменьшению IgE-связывающей способности по меньшей мере на 10%, предпочтительно по меньшей мере на 20%, более предпочтительно по меньшей мере на 30%, в особенности по меньшей мере на 50% по сравнению с аллергеном дикого типа. ! 3. Способ по п.1 или 2, отличающийся тем, что снижение аллергенной активности измеряют по отсутствию связывания IgE-антител из сыворотки сенсибилизированных антигеном пациентов с дот-блотом данного производного или способом анализа высвобождения содержимого базофилов. ! 4. Способ по п.1, отличающийся тем, что перед фрагментированием данного белкового аллергена дикого типа по меньшей мере на три фрагмента определяют Т-клеточные эпитопы данного аллергена. ! 5. Способ по п.1, отличающийся тем, что данные по меньшей мере три фрагмента включают аминокислотные остатки 25-39, аминокислотные остатки 34-45, аминокислотны

Claims

1. Способ получения производных белкового аллергена дикого типа Ph1 p 1 c пониженной аллергенной активностью по сравнению с аллергеном дикого типа, который включает следующие стадии:

получение белкового аллергена дикого типа Ph1 p 1,

фрагментирование указанного белкового аллергена дикого типа по меньшей мере на три фрагмента, причем по меньшей мере один из указанных по меньшей мере трех фрагментов содержит по меньшей мере один Т-клеточный эпитоп, а указанные по меньшей мере три фрагмента обладают пониженной аллергенной активностью либо не обладают аллергенной активностью, и

воссоединение указанных по меньшей мере трех фрагментов в таком порядке, который отличается от порядка фрагментов у аллергена дикого типа.

2. Способ по п.1, отличающийся тем, что снижение аллергенной активности измеряют по уменьшению IgE-связывающей способности по меньшей мере на 10%, предпочтительно по меньшей мере на 20%, более предпочтительно по меньшей мере на 30%, в особенности по меньшей мере на 50% по сравнению с аллергеном дикого типа.

3. Способ по п.1 или 2, отличающийся тем, что снижение аллергенной активности измеряют по отсутствию связывания IgE-антител из сыворотки сенсибилизированных антигеном пациентов с дот-блотом данного производного или способом анализа высвобождения содержимого базофилов.

4. Способ по п.1, отличающийся тем, что перед фрагментированием данного белкового аллергена дикого типа по меньшей мере на три фрагмента определяют Т-клеточные эпитопы данного аллергена.

5. Способ по п.1, отличающийся тем, что данные по меньшей мере три фрагмента включают аминокислотные остатки 25-39, аминокислотные остатки 34-45, аминокислотные остатки 73-84, аминокислотные остатки 91-102, аминокислотные остатки 100-111, аминокислотные остатки 109-133, аминокислотные остатки 121-135, аминокислотные остатки 127-138, аминокислотные остатки 157-168, аминокислотные остатки 169-183 или аминокислотные остатки 226-240 аллергена Ph1 p 1.

6. Способ по п.1, отличающийся тем, что указанные по меньшей мере три фрагмента выбирают из группы, состоящей из аминокислотных остатков 1-64 (А), аминокислотных остатков 65-125 (В), аминокислотных остатков 126-205 (С) и аминокислотных остатков 206-240 (D) аллергена Ph1 p 1.

7. Способ по п.6, отличающийся тем, что порядок указанных фрагментов в производном аллергена таков: B-D-A-С.

8. Способ по п.1, отличающийся тем, что указанные производные смешивают с фармацевтически приемлемым наполнителем и создают фармацевтический препарат.

9. Способ по п.1, отличающийся тем, что указанные производные смешивают с подходящим адъювантом для вакцин и создают фармацевтически приемлемый вакцинный препарат.

10. Способ по п.9, отличающийся тем, что указанные производные смешивают по меньшей мере с одним дополнительным аллергеном для получения комбинированной вакцины.

11. Способ по п.10, отличающийся тем, что указанный дополнительный аллерген представляет собой аллерген дикого типа, в особенности смесь аллергенов дикого типа, рекомбинантные аллергены дикого типа, производные белковых аллергенов дикого типа или их смесь.

12. Способ по любому из пп.9-11, отличающийся тем, что указанный препарат дополнительно содержит экстракт аллергена.

13. Способ по п.10, отличающийся тем, что указанный дополнительный аллерген выбирают из группы, состоящей из основных аллергенов пыльцы березы, в частности Bet v 1 и Bet v 4, основных аллергенов пыльцы тимофеевки луговой, в частности Рh1 р 2, Рh1 р 5, Рh1 р 6 и Рh1 р 7, основных аллергенов клеща домашней пыли, в частности Der p 1 и Der p2, основного аллергена кошек Fel d 1, основных аллергенов пчел, основных аллергенов ос, профилинов, в особенности Рh1 р 12, и аллергенов складского клеща, в особенности Lep d 2.

14. Производное аллергена, получаемое способом по любому из пп.1-7.

15. Аллерген-производное белкового аллергена дикого типа Ph1 р 1, отличающееся тем, что указанное производное содержит по меньшей мере три фрагмента данного белкового аллергена дикого типа, слитые друг с другом в таком порядке, который отличается от порядка этих фрагментов у аллергена дикого типа, причем указанные по меньшей мере три фрагмента аллергена дикого типа обладают пониженной аллергенной активностью либо не обладают аллергенной активностью, а по меньшей мере один из указанных по меньшей мере трех фрагментов содержит один или более Т-клеточных эпитопов.

16. Производное аллергена по п.15, отличающееся тем, что указанные по меньшей мере три фрагмента аллергена включают по меньшей мере 6 аминокислотных остатков, предпочтительно по меньшей мере 10 аминокислотных остатков, в особенности по меньшей мере 15 аминокислотных остатков.

17. Производное аллергена по п.15 или 16, отличающееся тем, что указанные по меньшей мере три фрагмента включают аминокислотные остатки 25-39, аминокислотные остатки 34-45, аминокислотные остатки 1-64, аминокислотные остатки 73-84, аминокислотные остатки 91-102, аминокислотные остатки 100-111, аминокислотные остатки 109-133, аминокислотные остатки 121-135, аминокислотные остатки 65-125, аминокислотные остатки 126-205, аминокислотные остатки 127-138, аминокислотные остатки 157-168, аминокислотные остатки 169-183, аминокислотные остатки 206-240 или аминокислотные остатки 226-240 аллергена Ph1 p 1.

18. Производное аллергена по п.15, отличающееся тем, что указанные по меньшей мере три фрагмента выбраны из группы, состоящей из аминокислотных остатков 1-64 (А), аминокислотных остатков 65-125 (В), аминокислотных остатков 126-205 (С) и аминокислотных остатков 206-240 (D) аллергена Рh1 р 1.

19. Производное аллергена по п.18, отличающееся тем, что порядок указанных фрагментов в производном аллергена предпочтительно таков: B-D-A-C.

20. Композиция аллергена, включающая производное аллергена по любому из пп.14-19 и дополнительные аллергены, предпочтительно аллергены дикого типа, в особенности смесь аллергенов дикого типа, рекомбинантные аллергены дикого типа, производные белковых аллергенов дикого типа либо их смеси.

21. Композиция аллергена по п.20, отличающаяся тем, что указанная композиция дополнительно содержит экстракт аллергена.

22. Композиция аллергена по п.20 или 21, отличающаяся тем, что она содержит фармацевтически приемлемый наполнитель.

23. Композиция аллергена по п.20, отличающаяся тем, что указанная композиция дополнительно включает один или более аллергенов, выбранных из группы, состоящей из основных аллергенов пыльцы березы, в частности Bet v 1 и Bet v 4, основных аллергенов пыльцы тимофеевки луговой, в частности Рh1 р 1, Рh1 р2, Рh1 р 5, Рh1 р6 и Рh1 р 7, основных аллергенов клеща домашней пыли, в частности Der р 1 и Der р 2, основного аллергена кошек Fel d 1, основных аллергенов пчел, основных аллергенов ос, профилинов, в особенности Рh1 р 12, и аллергенов складского клеща, в особенности Lep d 2.

24. Применение производного аллергена или композиции аллергена по любому из пп.14-23 для получения медикамента для аллерген-специфической иммунотерапии.

25. Применение производного аллергена или композиции аллергена по любому из пп.14-23 для получения медикамента для активной иммунизации.

26. Применение производного аллергена или композиции аллергена по любому из пп.14-23 для получения медикамента для профилактической иммунизации.

27. Применение по любому из пп.24-26, отличающееся тем, что указанный медикамент дополнительно содержит адъюванты, разбавители, консерванты либо их смеси.

28. Применение по любому из пп.24-27, отличающееся тем, что медикамент содержит от 10 нг до 1 г, предпочтительно от 100 нг до 10 мг, в особенности от 0,5 мкг до 200 мкг указанного рекомбинантного производного аллергена.

29. Способ получения производного аллергена по любому из пп.15-18, который характеризуется следующими стадиями:

получение молекулы ДНК, кодирующей производное аллергена по любому из пп.15-18,

трансформация клеток-хозяев указанной молекулой ДНК и

экспрессия указанного производного в указанных клетках-хозяевах и выделение указанного производного.

30. Способ по п.29, отличающийся тем, что указанным хозяином являются эукариотические клетки, предпочтительно дрожжевые или растительные клетки, либо прокариотические клетки, предпочтительно Escherichia coli.

31. Способ получения производного аллергена по любому из пп.15-18, отличающийся тем, что производное аллергена получают путем химического синтеза.