JP2017060482A - 操作された抗−ＩＬ−２３ｐ１９抗体 - Google Patents

Abstract

【課題】操作された抗−ＩＬ−２３ｐ１９抗体を提供する。
【解決手段】ヒトＩＬ−２３ｐ１９に結合する、ヒト化抗体またはキメラ組換え抗体を含めた抗体またはその断片などの結合性化合物であって、特定の配列からなる群から選択される少なくとも１つ、２つ、または３つのＣＤＲを有する抗体軽鎖可変ドメインまたはその抗原結合性断片を含む結合性化合物を提供する。また、結合性化合物は、特定の配列からなる群から選択される少なくとも１つのＣＤＲＬ１、特定の配列からなる群から選択される少なくとも１つのＣＤＲＬ２、および特定の配列からなる群から選択される少なくとも１つのＣＤＲＬ３を含む軽鎖可変ドメインを含む。
【選択図】なし

Description

（発明の分野）
本発明は、一般に、インターロイキン−２３ｐ１９（ＩＬ−２３ｐ１９）特異抗体およ
びその使用に関する。より具体的には、本発明は、ヒトＩＬ−２３ｐ１９を認識し、特に
炎症性障害、自己免疫障害、および増殖障害でその活性を調整するヒト化抗体に関する。

（発明の背景）
免疫系は、感染性因子、たとえば細菌、多細胞生物、およびウイルスからならびに癌か
ら個体を防御するために機能する。この系は、単球、マクロファージ、樹状細胞（ＤＣ）
、好酸球、Ｔ細胞、Ｂ細胞、および好中球などのいくつかのタイプのリンパ系細胞および
骨髄系細胞を含む。これらのリンパ系細胞および骨髄系細胞は、サイトカインとして知ら
れているシグナル伝達タンパク質を産生することが多い。免疫応答は、炎症、つまり、全
身的なまたは体の特定の位置での免疫細胞の蓄積を含む。感染性因子または外来性物質に
応答して、免疫細胞は、免疫細胞の増殖、発生、分化、または遊走を引き続いて調整する
サイトカインを分泌する。免疫応答は、たとえば、免疫応答が、自己免疫障害でのように
過剰な炎症を伴う場合、病的結果をもたらし得る（たとえばＡｂｂａｓら（編）（２００
０年）Ｃｅｌｌｕｌａｒ ａｎｄ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ、Ｗ．Ｂ
． Ｓａｕｎｄｅｒｓ Ｃｏ．、Ｐｈｉｌａｄｅｌｐｈｉａ、ＰＡ；Ｏｐｐｅｎｈｅｉｍ
およびＦｅｌｄｍａｎｎ（編）（２００１年）Ｃｙｔｏｋｉｎｅ Ｒｅｆｅｒｅｎｃｅ、
Ａｃａｄｅｍｉｃ Ｐｒｅｓｓ、Ｓａｎ Ｄｉｅｇｏ、ＣＡ；ｖｏｎ Ａｎｄｒｉａｎお
よびＭａｃｋａｙ（２０００年）Ｎｅｗ Ｅｎｇｌ． Ｊ． Ｍｅｄ． ３４３：１０２
０〜１０３４頁；ＤａｖｉｄｓｏｎおよびＤｉａｍｏｎｄ（２００１年）Ｎｅｗ Ｅｎｇ
ｌ． Ｊ． Ｍｅｄ． ３４５：３４０〜３５０頁を参照されたい）。

インターロイキン−１２（ＩＬ−１２）は、ｐ３５サブユニットおよびｐ４０サブユニ
ットから構成されるヘテロ二量体分子である。研究により、ＩＦＮγを分泌するＴ−ヘル
パー１型ＣＤ４＋リンパ球へのナイーブＴ細胞の分化にＩＬ−１２が重大な役割を果たす
ことが示されている。ＩＬ−１２は、インビボでのＴ細胞依存性の免疫応答および炎症応
答に必須であることもまた示されている。たとえばＣｕａら（２００３年）Ｎａｔｕｒｅ
４２１：７４４〜７４８頁を参照されたい。ＩＬ−１２受容体は、ＩＬ−１２β１サブ
ユニットおよびＩＬ−１２β２サブユニットから構成される。

インターロイキン−２３（ＩＬ−２３）は、２つのサブユニット、ＩＬ−２３に特有の
ｐ１９およびＩＬ−１２と共有されるｐ４０から構成されるヘテロ二量体サイトカインで
ある。ｐ１９サブユニットは、ＩＬ−６、顆粒球コロニー刺激因子（Ｇ−ＣＳＦ）および
ＩＬ−１２のｐ３５サブユニットに構造的に関係する。ＩＬ−２３は、ＩＬ−２３Ｒおよ
びＩＬ−１２受容体によって共有されるＩＬ−１２β１から構成されるヘテロ二量体受容
体に結合することによってシグナル伝達を媒介する。ｐ４０の遺伝子欠損の結果（ｐ４０
ノックアウトマウス；ｐ４０ＫＯマウス）は、ｐ３５ＫＯマウスで認められるものよりも
重症であることが多くの初期の研究で実証された。これらの結果のいくつかは、ＩＬ−２
３の発見およびｐ４０ＫＯがＩＬ−１２だけではなくＩＬ−２３の発現をも妨げるといっ
た知見によって最終的に説明された（たとえばＯｐｐｍａｎｎら（２０００年）Ｉｍｍｕ
ｎｉｔｙ １３：７１５〜７２５頁；Ｗｉｅｋｏｗｓｋｉら（２００１年）Ｊ． Ｉｍｍ
ｕｎｏｌ． １６６：７５６３〜７５７０頁；Ｐａｒｈａｍら（２００２年）Ｊ． Ｉｍ
ｍｕｎｏｌ． １６８：５６９９〜７０８頁；Ｆｒｕｃｈｔ（２００２年）Ｓｃｉ ＳＴ
ＫＥ ２００２、Ｅ１−Ｅ３； Ｅｌｋｉｎｓら（２００２年）Ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ Ｉ
ｍｍｕｎｉｔｙ ７０：１９３６〜１９４８頁を参照されたい）。

ｐ４０ＫＯマウスの使用を通しての最近の研究は、ＩＬ−２３およびＩＬ−１２の両方
の遮断が多様な炎症性障害および自己免疫障害の有効な処置となることを示した。しかし
ながら、ｐ４０を通してのＩＬ−１２の遮断は、日和見微生物感染に対する感受性の増加
などの多様な全身性の結果を有するようにみえる。Ｂｏｗｍａｎら（２００６年）Ｃｕｒ
ｒ． Ｏｐｉｎ． Ｉｎｆｅｃｔ． Ｄｉｓ． １９：２４５頁。

治療用抗体は、サイトカイン活性を遮断するために使用されてもよい。インビボで治療
薬として抗体を使用する際の最も重要な制約は抗体の免疫原性である。ほとんどのモノク
ローナル抗体はげっ歯類に由来するので、ヒトで繰り返し使用すると、治療用抗体に対す
る免疫応答が発生する。そのような免疫応答は、少なくとも治療効果の損失をもたらし、
最大で、致命的になる可能性のあるアナフィラキシー応答をもたらす。げっ歯類抗体の免
疫原性を低下させるための最初の試みは、マウス可変領域をヒト定常領域と融合させるキ
メラ抗体の産生を伴った。Ｌｉｕら（１９８７年）Ｐｒｏｃ． Ｎａｔｌ． Ａｃａｄ．
Ｓｃｉ． ＵＳＡ ８４：３４３９〜４３頁。しかしながら、ヒト可変領域およびマウ
ス定常領域のハイブリッドを注射されたマウスは、ヒト可変領域に対して向けられる強い
抗抗体応答を起こし、そのようなキメラ抗体中でのげっ歯類Ｆｖ領域全体の保持が患者で
、望まれない免疫原性をなおもたらし得ることを示唆する。

可変ドメインの相補性決定領域（ＣＤＲ）ループは、抗体分子の結合部位を含むと一般
に考えられている。そのため、げっ歯類ＣＤＲループのヒトフレームワークへの移植（つ
まりヒト化）が、げっ歯類配列をさらに最小限とするために試みられた。Ｊｏｎｅｓら（
１９８６年）Ｎａｔｕｒｅ ３２１：５２２頁；Ｖｅｒｈｏｅｙｅｎら（１９８８年）Ｓ
ｃｉｅｎｃｅ ２３９：１５３４頁。しかしながら、ＣＤＲループの交換は、なお、元の
抗体と同じ結合特性を有する抗体を均一にもたらさない。ヒト化抗体中の、ＣＤＲループ
支持に関与する残基であるフレームワーク残基（ＦＲ）の変更もまた、抗原結合親和性を
維持するために必要とされる。Ｋａｂａｔら（１９９１年）Ｊ． Ｉｍｍｕｎｏｌ． １
４７：１７０９頁。多くのヒト化抗体構築物でのＣＤＲ移植の使用およびフレームワーク
残基維持が報告されてきたが、特定の配列が、所望の結合特性および時に生物学的特性を
有する抗体をもたらすかどうかを予測するのは困難である。たとえばＱｕｅｅｎら（１９
８９年）Ｐｒｏｃ． Ｎａｔｌ． Ａｃａｄ． Ｓｃｉ． ＵＳＡ ８６：１００２９頁
、Ｇｏｒｍａｎら（１９９１年）Ｐｒｏｃ． Ｎａｔｌ． Ａｃａｄ． Ｓｃｉ． ＵＳ
Ａ ８８：４１８１頁、およびＨｏｄｇｓｏｎ（１９９１年）Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇ
ｙ （ＮＹ） ９：４２１〜５頁を参照されたい。その上、ほとんどの先の研究は、異な
るヒト配列を、動物の軽鎖可変配列および重鎖可変配列に使用し、そのような研究の予測
的な性質を疑わしいものにした。知られている抗体の配列が使用されてきたまたはより典
型的には、知られているＸ線構造を有する抗体、抗体ＮＥＷおよび抗体ＫＯＬの配列が使
用されてきた。たとえばＪｏｎｅｓら、前掲；Ｖｅｒｈｏｅｙｅｎら、前掲；およびＧｏ
ｒｍａｎら、前掲を参照されたい。正確な配列情報は、少数のヒト化構築物について報告
されてきた。ＩＬ−２３ｐ１９に対する、例示的な操作された抗体は、同一の譲受人に譲
渡された米国仮特許出願第６０／８９１，４０９号および第６０／８９１，４１３号（両
方とも２００７年２月２３日に出願された）に、特許文献１および特許文献２に、ならび
に特許文献３、特許文献４、および特許文献５に開示される。

たとえば炎症性障害、自己免疫障害、および増殖障害の処置での使用のための抗−ｈｕ
ＩＬ−２３ｐ１９抗体の必要性が存在する。好ましくは、そのような抗体は、たとえばフ
レームワーク領域中に、ヒト被験体での免疫原性を低下させるためにヒト生殖細胞系列配
列を導入するように操作される。好ましくは、そのような抗体は、ｈｕＩＬ−２３ｐ１９
に対する高い親和性を有し、ｈｕＩＬ−２３ｐ１９に対する高い特異性で結合する。

米国特許出願公開第２００７／０００９５２６号明細書 米国特許出願公開第２００７／００４８３１５号明細書 国際公開第２００７／０７６５２４号 国際公開第２００７／０２４８４６号 国際公開第２００７／１４７０１９号

（発明の要旨）
本発明は、ヒトＩＬ−２３ｐ１９に結合する、ヒト化抗体またはキメラ組換え抗体を含
めた抗体またはその断片などの結合性化合物であって、配列番号３２〜４６からなる群か
ら選択される少なくとも１つ、２つ、または３つのＣＤＲを有する抗体軽鎖可変ドメイン
またはその抗原結合性断片を含む結合性化合物を提供する。一実施形態では、本発明の結
合性化合物は、配列番号３２〜３６からなる群から選択される少なくとも１つのＣＤＲＬ
１、配列番号３７〜４１からなる群から選択される少なくとも１つのＣＤＲＬ２、および
配列番号４２〜４６からなる群から選択される少なくとも１つのＣＤＲＬ３を含む軽鎖可
変ドメインを含む。
例えば、本発明は以下の項目を提供する。
（項目１）
配列番号３２〜４６からなる群から選択される１つまたは複数のＣＤＲ配列を含む抗体
軽鎖可変ドメインまたはその抗原結合性断片を含む、ヒトＩＬ−２３ｐ１９に結合する結
合性化合物。
（項目２）
配列番号１５〜３１からなる群から選択される１つまたは複数のＣＤＲ配列を含む抗体
重鎖可変ドメインまたはその抗原結合性断片を含む、ヒトＩＬ−２３ｐ１９に結合する結
合性化合物。
（項目３）
項目１に記載の抗体軽鎖可変ドメインまたはその抗原結合性断片および
項目２に記載の抗体重鎖可変ドメインまたはその抗原結合性断片
を含む、ヒトＩＬ−２３ｐ１９に結合する結合性化合物。
（項目４）
配列番号３２〜４６からなる群から選択される２つ以上のＣＤＲ配列を含む抗体軽鎖可
変ドメインまたはその抗原結合性断片を含む、項目１に記載の結合性化合物。
（項目５）
配列番号１５〜３１からなる群から選択される２つ以上のＣＤＲ配列を含む抗体重鎖可
変ドメインまたはその抗原結合性断片を含む、項目２に記載の結合性化合物。
（項目６）
項目４に記載の抗体軽鎖可変ドメインまたはその抗原結合性断片および項目５に記載の
抗体重鎖可変ドメインまたはその抗原結合性断片
を含む、項目３に記載の結合性化合物。
（項目７）
配列番号３２〜４６からなる群から選択される３つのＣＤＲ配列を含む抗体軽鎖可変ド
メインまたはその抗原結合性断片を含む、項目４に記載の結合性化合物。
（項目８）
配列番号１５〜３１からなる群から選択される３つのＣＤＲ配列を含む抗体重鎖可変ド
メインまたはその抗原結合性断片を含む、項目５に記載の結合性化合物。
（項目９）
項目７に記載の抗体軽鎖可変ドメインまたはその抗原結合性断片および
項目８に記載の抗体重鎖可変ドメインまたはその抗原結合性断片
を含む、項目６に記載の結合性化合物。
（項目１０）
配列番号３２〜３６からなる群からの少なくとも１つのＣＤＲＬ１、
配列番号３７〜４１からなる群からの少なくとも１つのＣＤＲＬ２、および
配列番号４２〜４６からなる群からの少なくとも１つのＣＤＲＬ３
を含む軽鎖可変ドメインまたはその抗原結合性断片を含む、ヒトＩＬ−２３ｐ１９に結合
する結合性化合物。
（項目１１）
配列番号１５〜１９からなる群からの少なくとも１つのＣＤＲＨ１、
配列番号２０〜２６からなる群からの少なくとも１つのＣＤＲＨ２、および
配列番号２７〜３１からなる群からの少なくとも１つのＣＤＲＨ３
を含む重鎖可変ドメインまたはその抗原結合性断片を含む、ヒトＩＬ−２３ｐ１９に結合
する結合性化合物。
（項目１２）
項目１０に記載の抗体軽鎖可変ドメインまたはその抗原結合性断片および
項目１１に記載の抗体重鎖可変ドメインまたはその抗原結合性断片
を含む、ヒトＩＬ−２３ｐ１９に結合する結合性化合物。
（項目１３）
ＣＤＲＬ１、ＣＤＲＬ２、およびＣＤＲＬ３を含む軽鎖可変ドメインまたはその抗原結
合性断片を含む、ヒトＩＬ−２３に結合する結合性化合物であって、
ＣＤＲＬ１は、配列番号３６の配列またはその改変体を含み、
ＣＤＲＬ２は、配列番号４１の配列またはその改変体を含み、
ＣＤＲＬ３は、配列番号４６の配列またはその改変体を含み、
各改変体は、５つまでの保存的に改変されたアミノ酸置換を含む結合性化合物。
（項目１４）
前記軽鎖可変ドメインまたはその抗原結合性断片は、配列番号１４の残基１〜１０８を
含む、項目１３に記載の結合性化合物。
（項目１５）
ＣＤＲＨ１、ＣＤＲＨ２、およびＣＤＲＨ３を含む重鎖可変ドメインまたはその抗原結
合性断片を含む、ヒトＩＬ−２３に結合する結合性化合物であって、
ＣＤＲＨ１は、配列番号１９の配列またはその改変体を含み、
ＣＤＲＨ２は、配列番号２４〜２６からなる群から選択される配列またはその改変体を含
み、
ＣＤＲＨ３は、配列番号３１の配列またはその改変体を含み、
各改変体は、５つまでの保存的に改変されたアミノ酸置換を含む結合性化合物。
（項目１６）
前記重鎖可変ドメインまたはその抗原結合性断片は、配列番号６〜８の残基１〜１１６
からなる群から選択される配列を含む、項目１５に記載の結合性化合物。
（項目１７）
項目１３に記載の抗体軽鎖可変ドメインまたはその抗原結合性断片および
項目１５に記載の抗体重鎖可変ドメインまたはその抗原結合性断片
を含む、ヒトＩＬ−２３ｐ１９に結合する結合性化合物。
（項目１８）
項目１４に記載の抗体軽鎖可変ドメインまたはその抗原結合性断片および
項目１６に記載の抗体重鎖可変ドメインまたはその抗原結合性断片
を含む、ヒトＩＬ−２３ｐ１９に結合する結合性化合物。
（項目１９）
軽鎖および重鎖を含み、
前記軽鎖は、配列番号１４の配列を含み、
前記重鎖は、配列番号６〜８からなる群から選択される配列を含む、
項目１８に記載の結合性化合物。
（項目２０）
配列番号１４の残基１〜１０８の配列またはその改変体を含む抗体軽鎖可変ドメインま
たはその抗原結合性断片および
配列番号６〜８の残基１〜１１６からなる群から選択される配列またはその改変体を含む
抗体重鎖可変ドメインまたはその抗原結合性断片
を含む、ヒトＩＬ−２３に結合する結合性化合物であって、
各改変体は、２０個までの保存的に改変されたアミノ酸置換を含む結合性化合物。
（項目２１）
配列番号１４の残基１〜１０８の配列から本質的になる抗体軽鎖可変ドメインまたはそ
の抗原結合性断片および
配列番号６〜８の残基１〜１１６からなる群から選択される配列から本質的になる抗体重
鎖可変ドメインまたはその抗原結合性断片
を含む、ヒトＩＬ−２３に結合する結合性化合物。
（項目２２）
配列番号１４の残基１〜１０８に対して少なくとも９０％の相同性を有する軽鎖可変ド
メインおよび
配列番号６〜８の残基１〜１１６からなる群から選択される配列に対して少なくとも９０
％の相同性を有する重鎖可変ドメイン
を含む、ヒトＩＬ−２３に結合する結合性化合物。
（項目２３）
配列番号４７の残基２０〜３０または残基８２〜１１０を含むエピトープでヒトＩＬ−
２３に結合する結合性化合物。
（項目２４）
前記結合性化合物は、配列番号４７の残基２０〜３０および残基８２〜１１０を含むエ
ピトープに結合する、項目２３に記載の結合性化合物。
（項目２５）
前記結合性化合物は、配列番号４７の残基Ｋ２０、Ｔ２３、Ｗ２６、Ｓ２７、Ｐ３０、
Ｅ８２、Ｓ９５、Ｌ９６、Ｌ９７、Ｐ９８、Ｄ９９、Ｐ１０１、Ｇ１０３、Ｑ１０４、Ｈ
１０６、Ａ１０７、およびＬ１１０を含むエピトープに結合する、項目２４に記載の結合
性化合物。
（項目２６）
交差遮断アッセイで、項目１９に記載の結合性化合物とヒトＩＬ−２３の結合を遮断す
ることができる抗体。
（項目２７）
項目１７に記載の結合性化合物の軽鎖可変ドメインまたは重鎖可変ドメインの少なくと
も１つをコードする単離核酸。
（項目２８）
制御配列に作動可能に連結された項目２７に記載の核酸を含む発現ベクターであって、
宿主細胞に該ベクターをトランスフェクトした際、該制御配列が、該宿主細胞によって認
識される発現ベクター。
（項目２９）
項目２８に記載の発現ベクターを含む宿主細胞。
（項目３０）
ポリペプチドを産生するための方法であって、
前記核酸配列が発現される条件下で培地中で項目２９に記載の宿主細胞を培養し、それに
よって、前記軽鎖可変ドメインおよび重鎖可変ドメインを含むポリペプチドを産生する工
程ならびに該宿主細胞または培地から該ポリペプチドを回収する工程を含む方法。
（項目３１）
γ１ヒト重鎖定常領域またはその改変体を含む重鎖定常領域をさらに含み、該定常領域
改変体は、２０個までの保存的に改変されたアミノ酸置換を含む、項目１７に記載の結合
性化合物。
（項目３２）
γ４ヒト重鎖定常領域またはその改変体を含む重鎖定常領域をさらに含み、該定常領域
改変体は、２０個までの保存的に改変されたアミノ酸置換を含む、項目１７に記載の結合
性化合物。
（項目３３）
Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆａｂ’−ＳＨ、Ｆｖ、ｓｃＦｖ、Ｆ（ａｂ’）２、およびダイア
ボディからなる群から選択される抗体断片である、項目１７に記載の結合性化合物。
（項目３４）
ヒト被験体で免疫応答を抑制する方法であって、ＩＬ−２３の生物学的活性を遮断する
のに有効な量で、ＩＬ−２３に特異的な抗体またはその抗原結合性断片をその必要のある
被験体に投与する工程を含み、該抗体は項目１７に記載の抗体である方法。
（項目３５）
前記免疫応答は炎症性応答である、項目３４に記載の方法。
（項目３６）
前記被験体は、関節炎、乾癬、および炎症性腸疾患からなる群から選択される障害を有
する、項目３５に記載の方法。
（項目３７）
前記免疫応答は自己免疫応答である、項目３４に記載の方法。
（項目３８）
前記被験体は、多発性硬化症、全身性エリテマトーデス、および糖尿病からなる群から
選択される障害を有する、項目３７に記載の方法。
（項目３９）
前記被験体は癌を有し、前記免疫応答はＴｈ１７応答である、項目３４に記載の方法。
（項目４０）
免疫抑制剤または抗炎症剤を投与する工程をさらに含む、項目３４に記載の方法。
（項目４１）
薬学的に許容可能な担体または希釈剤と組み合わせた項目１７に記載の結合性化合物を
含む医薬組成物。
（項目４２）
免疫抑制剤または抗炎症剤をさらに含む、項目４１に記載の医薬組成物。

一実施形態では、結合性化合物は、配列番号１５〜３１からなる群から選択される少な
くとも１つ、２つ、または３つのＣＤＲを有する抗体重鎖可変ドメインまたはその抗原結
合性断片を含む。一実施形態では、本発明の結合性化合物は、配列番号１５〜１９からな
る群から選択される少なくとも１つのＣＤＲＨ１、配列番号２０〜２６からなる群から選
択される少なくとも１つのＣＤＲＨ２、および配列番号２７〜３１からなる群から選択さ
れる少なくとも１つのＣＤＲＨ３を含む重鎖可変ドメインを含む。

他の実施形態では、本発明の結合性化合物は、前の２つの段落に記載の軽鎖可変ドメイ
ンおよび重鎖可変ドメインまたはその抗原結合性断片を含む。

いくつかの実施形態では、結合性化合物は、フレームワーク領域を含み、ここでフレー
ムワーク領域のアミノ酸配列は、すべてまたは実質的にすべてのヒト免疫グロブリンアミ
ノ酸配列である。

いくつかの実施形態では、軽鎖可変ドメインおよび／または重鎖可変ドメインは、１つ
または複数のＣＤＲの改変体を含む。種々の実施形態では、改変体ドメインは、各配列番
号の配列と比較して、最大１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０またはそれ以上の
保存的に改変されたアミノ酸残基を含む。保存的アミノ酸置換は、表１に提供される。

いくつかの実施形態では、軽鎖可変ドメインは、配列番号１４の残基１〜１０８または
その改変体を含む。いくつかの実施形態では、重鎖可変ドメインは、配列番号６、配列番
号７、または配列番号８などの配列番号６〜８の残基１〜１１６からなる群から選択され
る配列を含む。種々の実施形態では、改変体可変ドメインは、各配列番号の配列と比較し
て、最大１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１５、２０、３０、４０、もしく
は５０またはそれ以上の保存的に改変されたアミノ酸残基を含む。まだその上さらなる実
施形態では、結合性化合物は、本段落に記載の軽鎖可変ドメインおよび重鎖可変ドメイン
またはその抗原結合性断片を含む。

一実施形態では、結合性化合物は、配列番号１４の軽鎖配列および／または配列番号６
〜８からなる群から選択される重鎖配列を含む。

他の実施形態では、本発明の結合性化合物は、配列番号１４の残基１〜１０８から本質
的になる軽鎖可変ドメインもしくはその抗原結合性断片および／または配列番号６、配列
番号７、もしくは配列番号８などの配列番号６〜８の残基１〜１１６からなる群から選択
される配列から本質的になる重鎖可変ドメインもしくはその抗原結合性断片を含む。

他の実施形態では、本発明の結合性化合物は、配列番号１４の残基１〜１０８と少なく
とも５０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、９８％、もしくは９９％の配列
相同性を有する軽鎖可変ドメインもしくはその抗原結合性断片および／または配列番号６
、配列番号７、もしくは配列番号８などの配列番号６〜８の残基１〜１１６からなる群か
ら選択される配列と少なくとも５０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、９８
％、もしくは９９％の配列相同性を有する重鎖可変ドメインもしくはその抗原結合性断片
を含む。

一実施形態では、本発明の結合性化合物は、残基２０〜３０もしくは残基８２〜１１０
またはその両方を含むエピトープでヒトＩＬ−２３ｐ１９（配列番号４７）に結合する。
他の実施形態では、ＩＬ−２３ｐ１９結合性化合物は、残基Ｋ２０、Ｔ２３、Ｗ２６、Ｓ
２７、Ｐ３０、Ｅ８２、Ｓ９５、Ｌ９６、Ｌ９７、Ｐ９８、Ｄ９９、Ｐ１０１、Ｇ１０３
、Ｑ１０４、Ｈ１０６、Ａ１０７、およびＬ１１０のいくつかまたはすべてならびに任意
選択で残基Ｌ２４、Ｌ８５、Ｔ９１、Ｓ１００、およびＶ１０２を含むエピトープに結合
する。種々の実施形態では、興味のある抗体に対するエピトープは、抗体：抗原複合体の
Ｘ線結晶構造を得ることによっておよびＩＬ−２３ｐ１９上のどの残基が、興味のある抗
体上の残基の特定された距離内にあるのかを決定することによって決定され、ここで特定
された距離はたとえば４Åまたは５Åである。いくつかの実施形態では、エピトープは、
残基の少なくとも３０％、４０％、４５％、５０％、または５４％は抗体の特定された距
離内にある、ＩＬ−２３ｐ１９配列に沿った１１個以上の長さの隣接アミノ酸残基である
と定義される。

一実施形態では、本発明は、交差遮断アッセイ（ｃｒｏｓｓ−ｂｌｏｃｋｉｎｇ ａｓ
ｓａｙ）で、本発明の結合性化合物とヒトＩＬ−２３の結合を遮断することができる抗体
に関する。他の実施形態では、本発明は、ＩＬ−２３媒介性の活性を遮断することができ
る結合性化合物に関し、そのような活性は、その受容体に結合することおよびＴＨ１７細
胞の増殖または生存を促進することを含むが、これらに限定されない。

いくつかの実施形態では、本発明の結合性化合物は、重鎖定常領域をさらに含み、ここ
で重鎖定常領域は、γ１、γ２、γ３、もしくはγ４のヒト重鎖定常領域またはその改変
体を含む。種々の実施形態では、軽鎖定常領域は、ラムダ（ｌａｍｂｄａ）ヒト軽鎖定常
領域またはカッパ（ｋａｐｐａ）ヒト軽鎖定常領域を含む。

種々の実施形態では、本発明の結合性化合物は、ポリクローナル抗体、モノクローナル
抗体、キメラ抗体、ヒト化抗体、もしくは完全ヒト抗体またはその断片である。本発明は
また、抗原結合性断片が、たとえばＦａｂ、Ｆａｂ’、Ｆａｂ’−ＳＨ、Ｆｖ、ｓｃＦｖ
、Ｆ（ａｂ’）２、およびダイアボディからなる群から選択される抗体断片であることを
企図する。

本発明は、ヒト被験体で免疫応答を抑制する方法であって、ＩＬ−２３の生物学的活性
を遮断するのに有効な量で、ＩＬ−２３に特異的な抗体（またはその抗原結合性断片）を
その必要のある被験体に投与する工程を含む方法を包含する。いくつかの実施形態では、
ＩＬ−２３に特異的な抗体は、ヒト化抗体またはキメラ抗体である。更なる実施形態では
、免疫応答は、関節炎、乾癬、および炎症性腸疾患を含む炎症応答である。他の実施形態
では、免疫応答は、多発性硬化症、ブドウ膜炎、全身性エリテマトーデス、および糖尿病
を含む自己免疫応答である。他の実施形態では、被験体は癌を有し、免疫応答はＴｈ１７
応答である。

本発明はまた、さらなる免疫抑制剤または抗炎症剤を投与することをも企図する。本発
明の結合性化合物は、薬学的に許容可能な担体または希釈剤と組み合わせて、結合性化合
物またはその抗原結合性断片を含む医薬組成物の形とすることができる。更なる実施形態
では、医薬組成物は、免疫抑制剤または抗炎症剤をさらに含む。

本発明は、本発明の結合性化合物の抗体の実施形態のポリペプチド配列をコードする単
離核酸を包含する。核酸は、発現ベクターをトランスフェクトした宿主細胞によって認識
される制御配列に作動可能に連結された発現ベクターの形とすることができる。ベクター
を含む宿主細胞、ならびに核酸配列が発現される条件下で宿主細胞を培養し、それによっ
てポリペプチドを産生する工程および宿主細胞または培地からポリペプチドを回収する工
程を含む、ポリペプチドを産生するための方法もまた包含される。

種々の実施形態では、本発明は、炎症疾患、自己免疫疾患、癌、感染症（たとえば、慢
性感染症を含む細菌感染症、マイコバクテリア感染症、ウイルス感染症、または真菌感染
症）、関節炎、乾癬、炎症性腸疾患、多発性硬化症、ブドウ膜炎、全身性エリテマトーデ
ス、および糖尿病を含むが、これらに限定されない障害を処置するための薬剤の製造にお
ける本発明の結合性化合物の使用に関する。

他の実施形態では、本発明は、炎症疾患、自己免疫疾患、癌、感染症（たとえば、慢性
感染症を含む細菌感染症、マイコバクテリア感染症、ウイルス感染症、または真菌感染症
）、関節炎、乾癬、炎症性腸疾患、多発性硬化症、ブドウ膜炎、全身性エリテマトーデス
、および糖尿病を含むが、これらに限定されない障害を処置するための、本発明の結合性
化合物を含む医薬組成物に関する。

いくつかの実施形態では、本発明の結合性化合物または医薬組成物は、たとえば再発寛
解型疾患の処置において、被験体での投薬間隔を結合性化合物の半減期よりもはるかに長
くまで延長することができるので、被験体において、疾患症状からの長期の寛解をもたら
す。種々の実施形態では、一方の投与と他方の投与の間隔は、６、８、１０、１２、１６
、２０、２４、３０週間、またはそれ以上である。他の実施形態では、単回投与は、再発
を永続的に防止するのに十分である。

マウス抗ヒトＩＬ−２３ｐ１９抗体クローンの重鎖可変ドメイン配列の比較 を示す図である。クローンｍ１Ａ１１、ｍ１１Ｃ１、ｍ５Ｆ５、ｍ２１Ｄ１、ｍ１３ Ｂ８、ｈ１３Ｂ８ａ、ｈ１３Ｂ８ｂおよびｈ１３Ｂ８ｃに関する配列を提供する。Ｃ ＤＲ（複数）を示す。両図中で、接頭辞「ｍ」はマウス抗体を意味し、かつ「ｈ」は ヒト化抗体を意味する。接尾辞「ａ」、「ｂ」および「ｃ」は、以下でさらに詳細に 論じるように、ヒト化１３Ｂ８重鎖可変ドメインの配列改変体を指す。 マウス抗ヒトＩＬ−２３ｐ１９抗体クローンの軽鎖可変ドメイン配列の比較 を示す図である。クローンｍ１Ａ１１、ｍ１１Ｃ１、ｍ５Ｆ５、ｍ２１Ｄ１、ｍ１３ Ｂ８、ｈ１３Ｂ８に関する配列を提供する。ＣＤＲ（複数）を示す。

（詳細な説明）
本明細書に使用されるように、添付される特許請求の範囲を含めて、「１つの（ａ）」
、「１つの（ａｎ）」、および「その（ｔｈｅ）」などの単語の単数形は、文脈が明瞭に
別段の記載をしない限り、それらの対応する複数形の言及を含む。下記の表７は、本出願
で使用される配列識別名の一覧を提供する。本明細書で引用されるすべての参考文献は、
あたかも各個々の刊行物、特許出願、または特許が、参照によって組み込まれるように具
体的におよび個別に示されるのと同程度に、参照によって組み込まれる。本明細書での参
考文献の引用は、前述のもののいずれも、関連する先行技術であるといったことを許容す
るものとして意図されず、引用は、これらの刊行物または文書の内容または日付に関する
どのような許容をも成さない。
Ｉ．定義
「増殖活性」は、たとえば、正常な細胞分裂ならびに癌、腫瘍、異形成、細胞の形質転
換、転移、および新脈管形成を促進するまたはそれに必要であるまたはそれに特異的に関
連する活性を包含する。

「投与」および「処置」は、動物、ヒト、実験被験体、細胞、組織、器官、または生物
学的液体に適用されるように、外因性の医薬品、治療剤、診断用薬、または組成物の、動
物、ヒト、被験体、細胞、組織、器官、または生物学的液体に対する接触を指す。「投与
」および「処置」は、たとえば、治療方法、薬物動態学的方法、診断方法、研究方法、お
よび実験方法を指すことができる。細胞の処置は、細胞に対する試薬の接触および細胞と
接触している液体に対する試薬の接触を包含する。「投与」および「処置」はまた、たと
えば、試薬、診断薬、結合性組成物による、または他の細胞による細胞のインビトロおよ
びエキソビボ（ｅｘ ｖｉｖｏ）での処置をも意味する。「処置」は、ヒト被験体、獣医
学的被験体、または研究被験体に適用されるように、治療処置、予防的または防止的手段
、研究への応用、および診断への応用を指す。「処置」は、ヒト被験体、獣医学的被験体
、もしくは研究被験体または細胞、組織、もしくは器官に適用されるように、動物被験体
、細胞、組織、生理的コンパートメント、または生理的液体との作用物質（ａｇｅｎｔ）
の接触を包含する。「細胞の処置」はまた、作用物質が、たとえば液体相またはコロイド
相中でＩＬ−２３受容体（ＩＬ−２３Ｒ／ＩＬ−１２Ｒベータ１ヘテロ二量体）と接触す
る状況だけではなく、アゴニストまたはアンタゴニストが細胞または受容体と接触しない
状況をも包含する。

本明細書に使用されるように、用語「抗体」は、所望の生物学的活性を呈する抗体の任
意の形態を指す。したがって、それは、最も広い意味で使用され、具体的には、所望の生
物学的活性を呈する限り、モノクローナル抗体（完全長モノクローナル抗体を含む）、ポ
リクローナル抗体、多重特異性抗体（たとえば二重特異性抗体）、キメラ抗体、ヒト化抗
体、完全ヒト抗体などを包含する。

本明細書に使用されるように、用語「ＩＬ−２３ｐ１９結合性断片」、「その結合性断
片」、または「その抗原結合性断片」は、ＩＬ−２３ｐ１９活性を阻害するその生物学的
活性をなお実質的に保持する、抗体の断片または誘導体を包含する。したがって、用語「
抗体断片」またはＩＬ−２３ｐ１９結合性断片は、完全長抗体の一部分、一般にその抗原
結合領域または可変領域を指す。抗体断片の例として、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）
２、およびＦｖ断片、ダイアボディ、直鎖状抗体、１本鎖抗体分子、たとえばｓｃＦｖ、
ならびに抗体断片から形成される多重特異性抗体を含む。典型的には、結合性断片または
誘導体は、そのＩＬ−２３ｐ１９阻害活性の少なくとも１０％を保持する。好ましくは、
結合性断片または誘導体は、そのＩＬ−２３ｐ１９阻害活性の少なくとも２５％、５０％
、６０％、７０％、８０％、９０％、９５％、９９％、もしくは１００％（またはそれ以
上）を保持するが、所望の生物学的効果を発揮するのに十分な親和性を有するあらゆる結
合性断片が有用である。ＩＬ−２３ｐ１９結合性断片は、その生物学的活性を実質的に変
化させない保存的アミノ酸置換を有する改変体を含むことができることもまた意図される
。

用語「モノクローナル抗体」は、本明細書に使用されるように、実質的に均質な抗体の
集団から得られる抗体を指す、つまり、集団を構成する個々の抗体は、少量で存在し得る
可能性のある自然発生の変異がなければ同一である。モノクローナル抗体は、高度に特異
的であり、単一の抗原エピトープに対して向けられる。対照的に、従来の（ポリクローナ
ル）抗体調製物は、異なるエピトープに対して向けられる（またはそれに特異的な）多数
の抗体を典型的には含む。修飾語句「モノクローナル」は、抗体の実質的に均質な集団か
ら得られるような抗体の特徴を示し、任意の特定の方法による抗体の産生を必要とするも
のとして解釈されないものとする。たとえば、本発明に従って使用されるモノクローナル
抗体は、Ｋｏｈｌｅｒら（１９７５年）Ｎａｔｕｒｅ ２５６：４９５頁によって最初に
記載されたハイブリドーマ法によって作製されてもよいまたは組換えＤＮＡ法によって作
製されてもよい（たとえば米国特許第４，８１６，５６７号を参照されたい）。「モノク
ローナル抗体」はまた、たとえばＣｌａｃｋｓｏｎら（１９９１年）Ｎａｔｕｒｅ ３５
２：６２４〜６２８頁およびＭａｒｋｓら（１９９１年）Ｊ． Ｍｏｌ． Ｂｉｏｌ．
２２２：５８１〜５９７頁に記載の技術を使用してファージ抗体ライブラリーから単離さ
れてもよい。

本明細書のモノクローナル抗体は、重鎖および／または軽鎖の一部分は、特定の種に由
来するまたは特定の抗体のクラスもしくはサブクラスに属する抗体中の対応する配列と同
一であるまたはそれに相同性であるが、鎖（複数可）の残りの部分は、他の種に由来する
または他の抗体のクラスもしくはサブクラスに属する抗体中の対応する配列と同一である
またはそれに相同性である「キメラ」抗体（免疫グロブリン）ならびに所望の生物学的活
性を呈する限り、そのような抗体の断片を具体的には含む。米国特許第４，８１６，５６
７号；Ｍｏｒｒｉｓｏｎら（１９８４年）Ｐｒｏｃ． Ｎａｔｌ． Ａｃａｄ． Ｓｃｉ
． ＵＳＡ ８１：６８５１〜６８５５頁。

「ドメイン抗体」は、重鎖の可変領域または軽鎖の可変領域のみを含有する免疫学的に
機能的な免疫グロブリン断片である。いくつかの例では、２個以上のＶＨ領域は、ペプチ
ドリンカーを用いて共有結合で結合されて、２価ドメイン抗体を作り出す。２価ドメイン
抗体の２個のＶＨ領域は、同じまたは異なる抗原を標的にしてもよい。

「２価抗体」は、２つの抗原結合部位を含む。いくつかの例では、２つの結合部位は、
同じ抗原特異性を有する。しかしながら、２価抗体は、二重特異性であってもよい（下記
を参照されたい）。

本明細書に使用されるように、用語「１本鎖Ｆｖ」抗体または「ｓｃＦｖ」抗体は、抗
体のＶＨドメインおよびＶＬドメインを含み、これらのドメインは単一のポリペプチド鎖
中に存在する抗体断片を指す。一般に、Ｆｖポリペプチドは、ｓＦｖが抗原結合のために
所望の構造を形成することを可能にするポリペプチドリンカーを、ＶＨドメインおよびＶ
Ｌドメインの間にさらに含む。ｓＦｖの検討については、Ｐｌｕｃｋｔｈｕｎ（１９９４
年）ＴＨＥ ＰＨＡＲＭＡＣＯＬＯＧＹ ＯＦ ＭＯＮＯＣＬＯＮＡＬ ＡＮＴＩＢＯＤ
ＩＥＳ、第１１３巻、ＲｏｓｅｎｂｕｒｇおよびＭｏｏｒｅ編Ｓｐｒｉｎｇｅｒ−Ｖｅｒ
ｌａｇ、Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ、２６９〜３１５頁を参照されたい。

本明細書のモノクローナル抗体はまた、ラクダ化単一ドメイン抗体をも含む。たとえば
Ｍｕｙｌｄｅｒｍａｎｓら（２００１年）Ｔｒｅｎｄｓ Ｂｉｏｃｈｅｍ． Ｓｃｉ．
２６：２３０頁；Ｒｅｉｃｈｍａｎｎら（１９９９年）Ｊ． Ｉｍｍｕｎｏｌ． Ｍｅｔ
ｈｏｄｓ ２３１：２５頁；国際公開第９４／０４６７８号；国際公開第９４／２５５９
１号；米国特許第６，００５，０７９号を参照されたい）。一実施形態では、本発明は、
単一ドメイン抗体が形成されるような改変を有する２個のＶＨドメインを含む単一ドメイ
ン抗体を提供する。

本明細書に使用されるように、用語「ダイアボディ」は、２個の抗原結合部位を有する
小さな抗体断片を指し、この断片は、同一ポリペプチド鎖（ＶＨ−ＶＬまたはＶＬ−ＶＨ
）中に軽鎖可変ドメイン（ＶＬ）につなぎ合わされた重鎖可変ドメイン（ＶＨ）を含む。
短過ぎるために、同一鎖上の２個のドメインの間で対合させることができないリンカーを
使用することによって、ドメインは、他の鎖の相補ドメインと対合することを強いられて
、２個の抗原結合部位を作り出す。ダイアボディは、たとえば欧州特許第４０４，０９７
号；国際公開第９３／１１１６１号；およびＨｏｌｌｉｇｅｒら（１９９３年）Ｐｒｏｃ
． Ｎａｔｌ． Ａｃａｄ． Ｓｃｉ． ＵＳＡ ９０：６４４４〜６４４８頁に、より
十分に記載されている。操作された抗体改変体の検討については、一般に、Ｈｏｌｌｉｇ
ｅｒおよびＨｕｄｓｏｎ（２００５年）Ｎａｔ． Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ． ２３：１１
２６〜１１３６頁を参照されたい。

本明細書に使用されるように、用語「ヒト化抗体」は、非ヒト（たとえばマウス）抗体
およびヒト抗体からの配列を含有する抗体の形態を指す。そのような抗体は、非ヒト免疫
グロブリンに由来する最小限の配列を有する。一般に、ヒト化抗体は、少なくとも１つ、
典型的には２つの可変ドメインの実質的にすべてを含み、超可変ループのすべてまたは実
質的にすべては非ヒト免疫グロブリンのものに対応し、ＦＲ領域のすべてまたは実質的に
すべてはヒト免疫グロブリン配列のものである。ヒト化抗体はまた、免疫グロブリン定常
領域（Ｆｃ）、典型的にはヒト免疫グロブリンの定常領域の少なくとも一部分を任意選択
で含む。接頭語「ｈｕｍ」、「ｈｕ」、または「ｈ」は、ヒト化抗体（たとえばｈｕｍ１
３Ｂ８）をげっ歯類親抗体（たとえばマウス１３Ｂ８またはｍ１３Ｂ８）から区別するの
に必要な場合、抗体クローンの名称に付加される。げっ歯類抗体のヒト化形態は、げっ歯
類親抗体と同じＣＤＲ配列を一般に含むが、ヒト化抗体の親和性を増加させるために、安
定性を増加させるために、または他の理由で、ある種のアミノ酸置換が含まれていてもよ
い。

本発明の抗体はまた、変化したエフェクター機能を提供するために改変（または遮断）
Ｆｃ領域を有する抗体を含む。たとえば米国特許第５，６２４，８２１号；国際公開第２
００３／０８６３１０号；国際公開第２００５／１２０５７１号；国際公開第２００６／
００５７７０２号；Ｐｒｅｓｔａ（２００６年）Ａｄｖ． Ｄｒｕｇ Ｄｅｌｉｖｅｒｙ
Ｒｅｖ． ５８：６４０〜６５６頁を参照されたい。そのような改変は、診断および治
療での可能性のある有益な効果を伴って、免疫系の多様な反応を増強するまたは抑制する
ために使用することができる。Ｆｃ領域の変更は、アミノ酸変化（置換、欠失、および挿
入）、糖鎖付加または糖鎖除去、ならびに複数のＦｃの付加を含む。Ｆｃに対する変更は
また、治療用抗体中の抗体の半減期を変化させることもでき、より長い半減期により、投
薬がそれほど頻繁ではなくなり、同時に利便性が増加し、材料の使用量が減少する。Ｐｒ
ｅｓｔａ（２００５年）Ｊ． Ａｌｌｅｒｇｙ Ｃｌｉｎ． Ｉｍｍｕｎｏ１．１１６：
７３１および７３４〜３５頁を参照されたい。

用語「完全ヒト抗体」は、ヒト免疫グロブリンタンパク質配列のみを含む抗体を指す。
完全ヒト抗体は、マウス、マウス細胞、またはマウス細胞に由来するハイブリドーマ中で
産生される場合、マウス糖鎖を含有していてもよい。同様に、「マウス抗体」は、マウス
免疫グロブリン配列のみを含む抗体を指す。完全ヒト抗体は、ヒトで、ヒト免疫グロブリ
ン生殖細胞系列配列を有するトランスジェニック動物で、ファージディスプレイ法によっ
て、または他の分子生物学的方法によって生成されてもよい。

本明細書に使用されるように、用語「超可変領域」は、抗原結合を担う、抗体のアミノ
酸残基を指す。超可変領域は、「相補性決定領域」または「ＣＤＲ」からのアミノ酸残基
（たとえば、軽鎖可変ドメイン中の残基２４〜３４（ＣＤＲＬ１）、５０〜５６（ＣＤＲ
Ｌ２）、および８９〜９７（ＣＤＲＬ３）ならびに重鎖可変ドメイン中の残基３１〜３５
（ＣＤＲＨ１）、５０〜６５（ＣＤＲＨ２）、および９５〜１０２（ＣＤＲＨ３）（Ｋａ
ｂａｔら（１９９１年）Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ ｏｆ Ｐｒｏｔｅｉｎｓ ｏｆ Ｉｍｍｕ
ｎｏｌｏｇｉｃａｌ Ｉｎｔｅｒｅｓｔ、第５版Ｐｕｂｌｉｃ Ｈｅａｌｔｈ Ｓｅｒｖ
ｉｃｅ、Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅｓ ｏｆ Ｈｅａｌｔｈ、Ｂｅｔｈｅｓ
ｄａ、Ｍｄ．）ならびに／または「超可変ループ」からのそれらの残基（つまり、軽鎖可
変ドメイン中の残基２６〜３２（Ｌ１）、５０〜５２（Ｌ２）、および９１〜９６（Ｌ３
）ならびに重鎖可変ドメイン中の２６〜３２（Ｈ１）、５３〜５５（Ｈ２）、および９６
〜１０１（Ｈ３）（ＣｈｏｔｈｉａおよびＬｅｓｋ（１９８７年）Ｊ． Ｍｏｌ． Ｂｉ
ｏｌ． １９６：９０１〜９１７頁）を含む。本明細書に使用されるように、用語「フレ
ームワーク」または「ＦＲ」残基は、ＣＤＲ残基として本明細書に定義される超可変領域
残基以外の可変ドメイン残基を指す。残基の上記番号付けは、Ｋａｂａｔ番号体系に関す
るものであり、添付の配列表の配列番号付けと詳細には必ずしも対応しない。

「結合性化合物（ｂｉｎｄｉｎｇ ｃｏｍｐｏｕｎｄ）」は、標的に結合することがで
きる分子、小分子、高分子、ポリペプチド、抗体またはその断片もしくは類似体、または
可溶性受容体を指す。「結合性化合物」はまた、標的に結合することができる、分子の複
合体、たとえば非共有結合複合体、イオン化分子、共有結合でまたは非共有結合で改変さ
れた分子、たとえばリン酸化、アシル化、架橋、環化、または限定切断で改変された分子
を指すものであってもよい。抗体に関して使用される場合、用語「結合性化合物」は、抗
体およびその抗原結合性断片の両方を指す。「結合（ｂｉｎｄｉｎｇ）」は、結合性組成
物の標的との関連性を指し、その関連性は、結合性組成物が溶液中に溶解するまたは懸濁
することができる場合、結合性組成物の通常のブラウン運動の低下をもたらす。「結合性
組成物」は、安定剤、賦形剤、塩、緩衝剤、溶媒、または添加剤と組み合わせた、標的に
結合することができる分子、たとえば結合性化合物を指す。

「保存的修飾改変体」または「保存的置換」は、当業者に公知のアミノ酸の置換を指し
、ポリペプチドの必須領域中でさえ、結果として生じる分子の生物学的活性を変化させず
に一般に作製されてもよい。そのような例示的な置換は、好ましくは、以下の通り表１に
記載の置換に従って成される。

加えて、当業者は、一般に、ポリペプチドの非必須領域中の単一アミノ酸置換は生物学
的活性を実質的に変化させないことを認識する。たとえばＷａｔｓｏｎら（１９８７年）
Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ ｏｆ ｔｈｅ Ｇｅｎｅ、Ｔｈｅ Ｂｅｎｊａｍ
ｉｎ／Ｃｕｍｍｉｎｇｓ Ｐｕｂ． Ｃｏ．、２２４頁（第４版）を参照されたい。

明細書および特許請求の範囲の全体にわたって使用されるような語句「〜から本質的に
なる（ｃｏｎｓｉｓｔｓ ｅｓｓｅｎｔｉａｌｌｙ ｏｆ）」または「〜から本質的にな
る（ｃｏｎｓｉｓｔ ｅｓｓｅｎｔｉａｌｌｙ ｏｆ）」もしくは「〜から本質的になる
（ｃｏｎｓｉｓｔｉｎｇ ｅｓｓｅｎｔｉａｌｌｙ ｏｆ）」などの変形は、任意の記載
される要素または要素の群の包含および特定された投薬計画、方法、または組成物の基本
的なまたは新規な特性を実質的に変化させない、記載される要素と類似のまたはそれと異
なる性質を持つ他の要素の任意選択の包含を示す。非限定的な例として、記載されるアミ
ノ酸配列から本質的になる結合性化合物はまた、結合性化合物の特性に実質的に影響しな
い１つまたは複数のアミノ酸残基の置換を含む、１つまたは複数のアミノ酸を含んでいて
もよい。

「有効量」は、病状（ｍｅｄｉｃａｌ ｃｏｎｄｉｔｉｏｎ）の症候または徴候を改善
するまたは防止するのに十分な量を包含する。有効量はまた、診断を可能にするまたは容
易にするのに十分な量をも意味する。特定の患者または獣医学的被験体にとっての有効量
は、処置されている状態、患者の全体的な健康状態、投与の方法の経路および用量、なら
びに副作用（ｓｉｄｅ ａｆｆｅｃｔ）の重症度などの要因に依存して変動してもよい。
たとえば米国特許第５，８８８，５３０号を参照されたい。有効量は、著しい副作用（ｓ
ｉｄｅ ｅｆｆｅｃｔ）または毒性作用を回避する最大用量または投薬プロトコルとする
ことができる。その効果は、１００％を、正常被験体によって示される診断パラメーター
として定義する場合、少なくとも５％、一般に少なくとも１０％、より一般に少なくとも
２０％、最も一般に少なくとも３０％、好ましくは少なくとも４０％、より好ましくは少
なくとも５０％、最も好ましくは少なくとも６０％、理想的には少なくとも７０％、より
理想的には少なくとも８０％、および最も理想的には少なくとも９０％、診断の尺度また
は診断パラメーターの改善をもたらす。たとえばＭａｙｎａｒｄら（１９９６年）Ａ Ｈ
ａｎｄｂｏｏｋ ｏｆ ＳＯＰｓ ｆｏｒ Ｇｏｏｄ Ｃｌｉｎｉｃａｌ Ｐｒａｃｔｉ
ｃｅ、Ｉｎｔｅｒｐｈａｒｍ Ｐｒｅｓｓ、Ｂｏｃａ Ｒａｔｏｎ、ＦＬ；Ｄｅｎｔ（２
００１年）Ｇｏｏｄ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ ａｎｄ Ｇｏｏｄ Ｃｌｉｎｉｃａｌ Ｐ
ｒａｃｔｉｃｅ、Ｕｒｃｈ Ｐｕｂｌ．、Ｌｏｎｄｏｎ、ＵＫを参照されたい。

「免疫状態」または「免疫障害」は、たとえば、病的炎症、炎症性障害、および自己免
疫障害または自己免疫疾患を包含する。「免疫状態」はまた、免疫系による根絶に抵抗す
る感染症、腫瘍、ならびに癌を含む感染症、持続性感染症、ならびに癌、腫瘍、および新
脈管形成などの増殖状態を指す。「癌性状態」は、たとえば、癌、癌細胞、腫瘍、新脈管
形成、および異形成などの前癌性状態を含む。

「炎症性障害」は、その病理が、全体的にまたは部分的に、たとえば、免疫系の細胞の
数の変化、遊走の速度の変化、または活性化の変化から生じる障害または病的状態を意味
する。免疫系の細胞は、たとえば、Ｔ細胞、Ｂ細胞、単球もしくはマクロファージ、抗原
提示細胞（ＡＰＣ）、樹状細胞、ミクログリア、ＮＫ細胞、ＮＫＴ細胞、好中球、好酸球
、肥満細胞、または免疫に特異的に関連する他の任意の細胞、たとえば、サイトカイン産
生内皮細胞もしくはサイトカイン産生上皮細胞を含む。

「ＩＬ−１７産生細胞」は、ＴＨ１７細胞と呼ばれる、古典的ＴＨ１型Ｔ細胞または古
典的ＴＨ２型Ｔ細胞ではないＴ細胞を意味する。ＴＨ１７細胞は、ＣｕａおよびＫａｓｔ
ｅｌｅｉｎ（２００６年）Ｎａｔ． Ｉｍｍｕｎｏｌ． ７：５５７〜５５９頁；Ｔａｔ
ｏおよびＯ’Ｓｈｅａ（２００６年）Ｎａｔｕｒｅ ４４１：１６６〜１６８頁；Ｉｗａ
ｋｕｒａおよびＩｓｈｉｇａｍｅ（２００６年）Ｊ． Ｃｌｉｎ． Ｉｎｖｅｓｔ． １
１６：１２１８〜１２２２頁により詳細に論じられる。「ＩＬ−１７産生細胞」はまた米
国特許出願公開第２００４／０２１９１５０号の表１０Ｂの遺伝子またはポリペプチド（
たとえばマイトジェン応答Ｐタンパク質、ケモカインリガンド２、インターロイキン−１
７（ＩＬ−１７）、ＲＡＲ関連転写因子、および／またはサイトカインシグナル伝達抑制
因子３）を発現するＴ細胞を意味し、ＩＬ−２３アゴニストによる処置を用いる発現は、
ＩＬ−１２アゴニストを用いる処置よりも大きく、ここで「よりも大きい」は、以下のよ
うに定義される。ＩＬ−２３アゴニストを用いる発現は、通常、ＩＬ−１２処置を用いる
よりも、少なくとも５倍大きい、典型的には少なくとも１０倍大きい、より典型的には少
なくとも１５倍大きい、最も典型的には少なくとも２０倍大きい、好ましくは少なくとも
２５倍大きい、および最も好ましくは少なくとも３０倍大きい。発現は、たとえば、実質
的に純粋なＩＬ−１７産生細胞の集団の処置で測定することができる。Ｔｈ１７応答は、
Ｔｈ１７細胞の活性および／または増殖が、Ｔｈ１応答の抑制と典型的には共役して増強
される免疫応答である。

その上、「ＩＬ−１７産生細胞」は、上記に定義されるように、細胞発生または細胞分
化の経路で、ＩＬ−１７産生細胞への分化に傾倒する前駆細胞（ｐｒｏｇｅｎｉｔｏｒ
ｃｅｌｌ）または前駆細胞（ｐｒｅｃｕｒｓｏｒ ｃｅｌｌ）を含む。ＩＬ−１７産生細
胞に至る前駆細胞（ｐｒｏｇｅｎｉｔｏｒ ｃｅｌｌ）または前駆細胞（ｐｒｅｃｕｒｓ
ｏｒ ｃｅｌｌ）は、流入領域リンパ節（ＤＬＮ）中に見つけることができる。加えて、
「ＩＬ−１７産生細胞」は、たとえばホルボールエステル、イオノフォア、および／また
は発癌物質によってたとえば活性化された、さらに分化された、保存された、凍結された
、乾燥された、不活性化された、たとえばアポトーシス、タンパク質分解、もしくは脂質
酸化によって部分的に分解された、またはたとえば組換え技術によって改変された上記に
定義されるようなＩＬ−１７産生細胞を包含する。

本明細書に使用されるように、用語「単離核酸分子」は、単離核酸分子が抗体核酸の天
然源（ｎａｔｕｒａｌ ｓｏｕｒｃｅ）中に通常付随している少なくとも１つの混入核酸
分子から同定され、分離される核酸分子を指す。単離核酸分子は、自然に見つけられる形
態または状況以外のものである。したがって、単離核酸分子は、天然細胞中に存在する核
酸分子と区別される。しかしながら、単離核酸分子は、たとえば、核酸分子が、天然細胞
の位置と異なる染色体位置にある、抗体を通常発現する細胞中に含有される核酸分子を含
む。

「制御配列」という表現は、特定の宿主生物中で作動可能に連結されたコード配列の発
現に必要なＤＮＡ配列を指す。原核生物に適切な制御配列は、たとえば、プロモーター、
任意選択でオペレーター配列、およびリボソーム結合部位を含む。真核細胞は、プロモー
ター、ポリアデニル化シグナル、およびエンハンサーを利用することが知られている。

核酸は、他の核酸配列との機能的な関係に置かれる場合、「作動可能に連結される」。
たとえば、プレ配列もしくは分泌リーダーのＤＮＡは、ポリペプチドの分泌に関与するプ
レタンパク質として発現される場合、ポリペプチドのＤＮＡに作動可能に連結される、プ
ロモーターもしくはエンハンサーは、配列の転写に影響する場合、コード配列に作動可能
に連結される、またはリボソーム結合部位は、翻訳を容易にするように位置する場合、コ
ード配列に作動可能に連結される。一般に、「作動可能に連結される」は、連結されてい
るＤＮＡ配列が隣接することを意味し、分泌リーダーの場合には、隣接し、リーディング
フレーム中にあることを意味する。しかしながら、エンハンサーは隣接する必要はない。
連結は、好都合な制限部位でライゲーションによって達成される。そのような部位が存在
しない場合、合成オリゴヌクレオチドのアダプターまたはリンカーが、従来の方式に従っ
て使用される。

本明細書に使用されるように、「細胞」、「細胞系列」、および「細胞培養」という表
現は、交換可能に使用され、そのような名称はすべて子孫を含む。したがって、単語「形
質転換体」および「形質転換細胞」は、初代被験体細胞および植え継ぎ数に関係なくそれ
らに由来する培養物を包含する。計画的なまたは偶発性の変異のために、すべての子孫は
ＤＮＡ含有量が正確に同一であるとは限らないこともまた理解される。最初に形質転換さ
れた細胞についてスクリーニングされたものと同じ機能または生物学的活性を有する変異
子孫が包含される。個別の名称が表わされる場合、それは文脈から明らかとなる。

本明細書に使用されるように、「ポリメラーゼ連鎖反応」または「ＰＣＲ」は、たとえ
ば米国特許第４，６８３，１９５号に記載されるように、核酸、ＲＮＡ、および／または
ＤＮＡの微量の特定片が増幅される手順または技術を指す。一般に、興味のある領域の末
端からの配列情報またはそれ以降の配列情報は、オリゴヌクレオチドプライマーを設計す
ることができるために、入手可能である必要があり、これらのプライマーは、増幅される
こととなる鋳型の反対の鎖に配列が同一であるまたは類似している。２つのプライマーの
５’末端ヌクレオチドは、増幅物質の末端と一致し得る。ＰＣＲは、特定のＲＮＡ配列、
全ゲノムＤＮＡからの特定のＤＮＡ配列、および全細胞ＲＮＡから転写されたｃＤＮＡ、
バクテリオファージまたはプラスミド配列などを増幅するために使用することができる。
一般にＭｕｌｌｉｓら（１９８７年）Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ Ｓｙｍｐ
． Ｑｕａｎｔ． Ｂｉｏｌ． ５１：２６３頁；Ｅｒｌｉｃｈ編、（１９８９年）ＰＣ
Ｒ ＴＥＣＨＮＯＬＯＧＹ（Ｓｔｏｃｋｔｏｎ Ｐｒｅｓｓ、Ｎ．Ｙ．）を参照されたい
。本明細書に使用されるように、ＰＣＲは、核酸の特定片を増幅するまたは生成するため
のプライマーとして知られている核酸および核酸ポリメラーゼの使用を含む、核酸試験サ
ンプルを増幅するための核酸ポリメラーゼ反応法の一例とみなすが、唯一の例とはみなさ
ない。

本明細書に使用されるように、用語「生殖細胞系列配列」は、げっ歯類（たとえばマウ
ス）生殖細胞系列配列およびヒト生殖細胞系列配列を含む非再配列免疫グロブリンＤＮＡ
配列の配列を指す。非再配列免疫グロブリンＤＮＡの任意の適切な供給源が使用されても
よい。ヒト生殖細胞系列配列は、たとえば、米国Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ
ｓ ｏｆ ＨｅａｌｔｈのＮａｔｉｏｎａｌ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ ｏｆ Ａｒｔｈｒｉ
ｔｉｓ ａｎｄ Ｍｕｓｃｕｌｏｓｋｅｌｅｔａｌ ａｎｄ Ｓｋｉｎ Ｄｉｓｅａｓｅ
ｓのウェブサイト上のＪＯＩＮＳＯＬＶＥＲ（登録商標）生殖細胞系列データベースから
得られてもよい。マウス生殖細胞系列配列は、たとえばＧｉｕｄｉｃｅｌｌｉら（２００
５年）Ｎｕｃｌｅｉｃ Ａｃｉｄｓ Ｒｅｓ． ３３：Ｄ２５６〜Ｄ２６１頁に記載され
るように得られてもよい。

ＩＬ−２３活性の阻害の程度を検査するために、たとえば、所与の、たとえばタンパク
質、遺伝子、細胞、または生物を含むサンプルまたはアッセイは、可能な活性化作用物質
または阻害作用物質を用いて処置し、作用物質なしの対照サンプルと比較される。対照サ
ンプル、つまり作用物質を用いて処置されていないサンプルに１００％の相対的活性値を
割り当てる。阻害は、対照と比較した活性値が、約９０％以下、典型的には８５％以下、
より典型的には８０％以下、最も典型的には７５％以下、一般に７０％以下、より一般に
６５％以下、最も一般に６０％以下、典型的には５５％以下、一般に５０％以下、より一
般に４５％以下、最も一般に４０％以下、好ましくは３５％以下、より好ましくは３０％
以下、さらにより好ましくは２５％以下、および最も好ましくは２５％未満である場合、
達成される。活性化は、対照と比較した活性値が、約１１０％、一般に少なくとも１２０
％、より一般に少なくとも１４０％、より一般に少なくとも１６０％、多くの場合、少な
くとも１８０％、より多くの場合、少なくとも２倍、最も多くの場合、少なくとも２．５
倍、一般に少なくとも５倍、より一般に少なくとも１０倍、好ましくは少なくとも２０倍
、より好ましくは少なくとも４０倍、および最も好ましくは４０倍、より高い場合、達成
される。

活性化または阻害の終点（ｅｎｄｐｏｉｎｔ）は、以下のようにモニターすることがで
きる。たとえば細胞、生理的液体、組織、器官、および動物またはヒト被験体の、処置に
対する活性化、阻害、および応答は、終点によってモニターすることができる。終点は、
サイトカイン、毒性酸素、またはプロテアーゼの放出などの、所定の数量またはパーセン
テージのたとえば炎症、腫瘍原性、または細胞脱顆粒もしくは細胞分泌の兆候を含んでい
てもよい。終点は、たとえば、所定の数量のイオンフラックス（ｉｏｎ ｆｌｕｘ）また
は輸送、細胞遊走、細胞接着、細胞増殖、転移の可能性、細胞分化、および表現型の変化
、たとえば、炎症、アポトーシス、形質転換、細胞周期、または転移に関する遺伝子の発
現の変化を含んでいてもよい（たとえばＫｎｉｇｈｔ（２０００年）Ａｎｎ． Ｃｌｉｎ
． Ｌａｂ． Ｓｃｉ． ３０：１４５〜１５８頁；ＨｏｏｄおよびＣｈｅｒｅｓｈ（２
００２年）Ｎａｔｕｒｅ Ｒｅｖ． Ｃａｎｃｅｒ ２：９１〜１００頁；Ｔｉｍｍｅら
（２００３年）Ｃｕｒｒ． Ｄｒｕｇ Ｔａｒｇｅｔｓ ４：２５１〜２６１頁；Ｒｏｂ
ｂｉｎｓおよびＩｔｚｋｏｗｉｔｚ（２００２年）Ｍｅｄ． Ｃｌｉｎ． Ｎｏｒｔｈ
Ａｍ． ８６：１４６７〜１４９５頁；ＧｒａｄｙおよびＭａｒｋｏｗｉｔｚ（２００２
年）Ａｎｎｕ． Ｒｅｖ． Ｇｅｎｏｍｉｃｓ Ｈｕｍ． Ｇｅｎｅｔ． ３：１０１〜
１２８頁；Ｂａｕｅｒら（２００１年）Ｇｌｉａ ３６：２３５〜２４３頁；Ｓｔａｎｉ
ｍｉｒｏｖｉｃおよびＳａｔｏｈ（２０００年）Ｂｒａｉｎ Ｐａｔｈｏｌ． １０：１
１３〜１２６頁を参照されたい）。

阻害の終点は、一般に対照の７５％以下、好ましくは、対照の５０％以下、より好まし
くは、対照の２５％以下、および最も好ましくは、対照の１０％以下である。一般に、活
性化の終点は、少なくとも対照の１５０％、好ましくは、少なくとも対照の２倍、より好
ましくは、少なくとも対照の４倍、および最も好ましくは、少なくとも対照の１０倍であ
る。

「小分子」は、１０ｋＤａ未満、典型的には２ｋＤａ未満、および好ましくは、１ｋＤ
ａ未満である分子量を有する分子として定義される。小分子は、無機分子、有機分子、無
機成分を含有する有機分子、放射性原子を含む分子、合成分子、ペプチド模倣物質、およ
び抗体模倣物質を含むが、これらに限定されない。治療剤として、小分子は、大分子より
も細胞に対してより透過性があり、分解に対してより感受性が少なく、および免疫応答を
誘発する傾向がより少なくあり得る。抗体およびサイトカインのペプチド模倣物質などの
小分子ならびに小分子トキシンが記載されている。たとえばＣａｓｓｅｔら（２００３年
）Ｂｉｏｃｈｅｍ． Ｂｉｏｐｈｙｓ． Ｒｅｓ． Ｃｏｍｍｕｎ． ３０７：１９８〜
２０５頁；Ｍｕｙｌｄｅｒｍａｎｓ（２００１年）Ｊ． Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ． ７４
：２７７〜３０２頁；Ｌｉ（２０００年）Ｎａｔ． Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ． １８：１
２５１〜１２５６頁；Ａｐｏｓｔｏｌｏｐｏｕｌｏｓら（２００２年）Ｃｕｒｒ． Ｍｅ
ｄ． Ｃｈｅｍ． ９：４１１〜４２０頁；Ｍｏｎｆａｒｄｉｎｉら（２００２年）Ｃｕ
ｒｒ． Ｐｈａｒｍ． Ｄｅｓ． ８：２１８５〜２１９９頁；Ｄｏｍｉｎｇｕｅｓら（
１９９９年）Ｎａｔ． Ｓｔｒｕｃｔ． Ｂｉｏｌ． ６：６５２〜６５６頁；Ｓａｔｏ
およびＳｏｎｅ（２００３年）Ｂｉｏｃｈｅｍ． Ｊ． ３７１：６０３〜６０８頁；米
国特許第６，３２６，４８２号を参照されたい。

「特異的に」または「選択的に」結合するは、リガンド／受容体、抗体／抗原、または
他の結合対を指す場合、タンパク質および他の生物製剤の不均質な集団中のタンパク質の
存在の決定因である結合反応を示す。したがって、指定された条件下で、特定されたリガ
ンドは、特定の受容体に結合し、サンプル中に存在する他のタンパク質に相当な量で結合
しない。本明細書に使用されるように、抗体が、ＩＬ−２３ｐ１９の配列を含むポリペプ
チドに結合するが、ＩＬ−２３ｐ１９の配列を欠くタンパク質に結合しない場合、抗体は
、所与の配列（この場合、ＩＬ−２３ｐ１９）を含むポリペプチドに特異的に結合すると
表現される。たとえば、ＩＬ−２３ｐ１９を含むポリペプチドに特異的に結合する抗体は
、ＩＬ−２３ｐ１９のＦＬＡＧ（登録商標）タグ付き形態に結合してもよいが、他のＦＬ
ＡＧ（登録商標）タグ付きタンパク質に結合しない。

企図される方法の抗体または抗体の抗原結合部位に由来する結合性組成物は、無関係な
抗原との親和性よりも、少なくとも２倍大きい、好ましくは、少なくとも１０倍大きい、
より好ましくは、少なくとも２０倍大きい、および最も好ましくは、少なくとも１００倍
大きい親和性でその抗原に結合する。好ましい実施形態では、抗体は、たとえば、スキャ
チャード解析（Ｓｃａｔｃｈａｒｄ ａｎａｌｙｓｉｓ）によって決定されるように、約
１０９リットル／モルよりも大きな親和性を有する。 Ｍｕｎｓｅｎら（１９８０年）Ａ
ｎａｌｙｔ． Ｂｉｏｃｈｅｍ． １０７：２２０〜２３９頁。

本明細書に使用されるように、用語「免疫調節剤」は、免疫応答を抑制するまたは調整
する天然作用物質または合成作用物質を指す。免疫応答は、液性応答または細胞性応答で
あり得る。免疫調節剤は、免疫抑制剤または抗炎症剤を包含する。

本明細書に使用されるような「免疫抑制剤」、「免疫抑制薬」、または「免疫抑制物質
」は、免疫系の活性を阻害するまたは防止するために免疫抑制治療で使用される治療剤で
ある。臨床的に、それらは、移植器官および移植組織（たとえば骨髄、心臓、腎臓、肝臓
）の拒絶を防止するためにならびに／または自己免疫疾患もしくは自己免疫性が起源であ
る可能性がすこぶる高い疾患（たとえば関節リウマチ、重症筋無力症、全身性エリテマト
ーデス、潰瘍性大腸炎、多発性硬化症）の処置で使用される。免疫抑制薬は、４つの群に
分類することができる：グルココルチコイド細胞増殖抑制剤；抗体（生物学的応答調節物
質またはＤＭＡＲＤを含む）；イムノフィリンに作用する薬剤；増殖障害の処置で使用さ
れる既知の化学療法剤（ｃｈｅｍｏｔｈｅｒｐｅｕｔｉｃ ａｇｅｎｔ）を含む他の薬剤
。多発性硬化症については、特に、本発明の抗体は、コパキソン（ｃｏｐａｘｏｎｅ）と
して知られている、新しいクラスのミエリン結合性タンパク質様治療剤と共に投与するこ
とができる。

「抗炎症剤」または「抗炎症薬」は、ステロイド性治療剤および非ステロイド性治療剤
の両方を表わすために使用される。コルチコステロイドとしても知られているステロイド
は、副腎によって天然に産生されるホルモンであるコルチゾールに非常によく類似してい
る薬剤である。ステロイドは、全身性血管炎（血管の炎症）および筋炎（筋肉の炎症）な
どのある種の炎症状態の主な処置として使用される。ステロイドはまた、関節リウマチ（
体の両側の関節に生じる慢性炎症性関節炎）；全身性エリテマトーデス（異常な免疫系機
能によって引き起こされる全身性疾患）；シェーグレン症候群（眼乾燥症および口腔乾燥
症を引き起こす慢性の障害）などの炎症状態を処置するために選択的に使用されてもよい
。

ＮＳＡＩＤと一般に略される非ステロイド性抗炎症薬は、鎮痛効果、解熱効果、および
抗炎症効果を有する薬剤であり、それらは、痛み、発熱、および炎症を低下させる。用語
「非ステロイド性」は、これらの薬剤とステロイドを区別するために使用され、これらは
（広範囲の他の効果の中で）、類似のエイコサノイド抑制、抗炎症作用を有する。ＮＳＡ
ＩＤは、以下の状態の症状の軽減のために一般に必要とされる：関節リウマチ；骨関節炎
；炎症性関節症（たとえば強直性脊椎炎、乾癬性関節炎、ライター症候群）；急性痛風；
月経困難症；転移部骨痛；頭痛および片頭痛；術後痛；炎症および組織傷害のための軽度
から中程度の痛み；発熱；ならびに腎仙痛。ＮＳＡＩＤは、サリチル酸塩、アリールアル
カン酸（ａｒｌｙａｌｋｎｏｉｃ ａｃｉｄ）、２−アリールプロピオン酸（プロフェン
）、Ｎ−アリールアントラニル酸（フェナム酸）、オキシカム、コキシブ、およびスルホ
ンアニリドを含む。
ＩＩ．総論
本発明は、炎症性障害、自己免疫障害、および増殖障害を処置するための操作された抗
ＩＬ−２３抗体およびその使用を提供する。

多くのサイトカインは、神経障害の病理または回復での役割を有する。ＩＬ−６、ＩＬ
−１７、インターフェロン−ガンマ（ＩＦＮガンマ、ＩＦＮ−γ）、および顆粒球コロニ
ー刺激因子（ＧＭ−ＣＳＦ）は、多発性硬化症と関連してきた。Ｍａｔｕｓｅｖｉｃｉｕ
ｓら（１９９９年）Ｍｕｌｔｉｐｌｅ Ｓｃｌｅｒｏｓｉｓ ５：１０１〜１０４頁；Ｌ
ｏｃｋら（２００２年）Ｎａｔｕｒｅ Ｍｅｄ． ８：５００〜５０８頁。ＩＬ−１アル
ファ、ＩＬ−１ベータ、および形質転換成長因子ベータ１（ＴＧＦ−ベータ１）は、ＡＬ
Ｓ、パーキンソン病、およびアルツハイマー病で役割を果たす。Ｈｏｏｚｅｍａｎｓら（
２００１年）Ｅｘｐ． Ｇｅｒｏｎｔｏｌ． ３６：５５９〜５７０頁；Ｇｒｉｆｆｉｎ
およびＭｒａｋ（２００２年）Ｊ． Ｌｅｕｋｏｃｙｔｅ Ｂｉｏｌ． ７２：２３３〜
２３８頁；Ｉｌｚｅｃｋａら（２００２年）Ｃｙｔｏｋｉｎｅ ２０：２３９〜２４３頁
。ＴＮＦ−アルファ、ＩＬ−１ベータ、ＩＬ−６、ＩＬ−８、インターフェロン−ガンマ
、およびＩＬ−１７は、脳虚血に対する応答を調整するようにみえる。たとえばＫｏｓｔ
ｕｌａｓら（１９９９年）Ｓｔｒｏｋｅ ３０：２１７４〜２１７９頁；Ｌｉら（２００
１年）Ｊ． Ｎｅｕｒｏｉｍｍｕｎｏｌ． １１６：５〜１４頁を参照されたい。血管内
皮細胞成長因子（ＶＥＧＦ）はＡＬＳと関連する。ＣｌｅｖｅｌａｎｄおよびＲｏｔｈｓ
ｔｅｉｎ（２００１年）Ｎａｔｕｒｅ ２：８０６〜８１９頁。

炎症性腸障害、たとえばクローン病、潰瘍性大腸炎、セリアック病、および過敏性腸症
候群は、免疫系の細胞およびサイトカインによって媒介される。たとえば、潰瘍性大腸炎
は、ＩＬ−５、ＩＬ−１３、および形質転換成長因子ベータ（ＴＧＦベータ）の増加と関
連するが、クローン病は、ＩＬ−１２およびＩＦＮγの増加と関連する。ＩＬ−１７発現
もまた、クローン病および潰瘍性大腸炎を増加させ得る。たとえばＰｏｄｏｌｓｋｙ（２
００２年）Ｎｅｗ Ｅｎｇｌ． Ｊ． Ｍｅｄ． ３４７：４１７〜４２９頁；Ｂｏｕｍ
ａおよびＳｔｒｏｂｅｒ（２００３年）Ｎａｔ． Ｒｅｖ． Ｉｍｍｕｎｏｌ． ３：５
２１〜５３３頁；Ｂｈａｎら（１９９９年）Ｉｍｍｕｎｏｌ． Ｒｅｖ． １６９：１９
５〜２０７頁；Ｈａｎａｕｅｒ（１９９６年）Ｎｅｗ Ｅｎｇｌ． Ｊ． Ｍｅｄ． ３
３４：８４１〜８４８頁；Ｇｒｅｅｎ（２００３年）Ｔｈｅ Ｌａｎｃｅｔ ３６２：３
８３〜３９１頁；ＭｃＭａｎｕｓ（２００３年）Ｎｅｗ Ｅｎｇｌ． Ｊ． Ｍｅｄ．
３４８：２５７３〜２５７４頁；ＨｏｒｗｉｔｚおよびＦｉｓｈｅｒ（２００１年）Ｎｅ
ｗ Ｅｎｇｌ． Ｊ． Ｍｅｄ． ３４４：１８４６〜１８５０頁；Ａｎｄｏｈら（２０
０２年）Ｉｎｔ． Ｊ． Ｍｏｌ． Ｍｅｄ． １０：６３１〜６３４頁；Ｎｉｅｌｓｅ
ｎら（２００３年）Ｓｃａｎｄ． Ｊ． Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌ． ３８：１８０
〜１８５頁；Ｆｕｊｉｎｏら（２００３年）Ｇｕｔ ５２：６５〜７０頁を参照されたい
。

ＩＬ−２３受容体は、ＩＬ−２３ＲサブユニットおよびＩＬ−１２Ｒβ１サブユニット
のヘテロ二量体複合体である。Ｐａｒｈａｍら（２０００年）Ｊ． Ｉｍｍｕｎｏｌ．
１６８：５６９９頁を参照されたい。ＩＬ−１２受容体は、ＩＬ−１２Ｒβ１サブユニッ
トおよびＩＬ−１２Ｒβ２サブユニットの複合体である。Ｐｒｅｓｋｙら（１９９６年）
Ｐｒｏｃ． Ｎａｔ’ｌ Ａｃａｄ． Ｓｃｉ． ＵＳＡ ９３：１４００２頁を参照さ
れたい。ＩＬ−２３Ｒは、重大な遺伝因子（ｇｅｎｅｔｉｃ ｆａｃｔｏｒ）として炎症
性腸障害、クローン病および潰瘍性大腸炎に関係してきた。Ｄｕｅｒｒら（２００６年）
Ｓｃｉｅｎｃｅｘｐｒｅｓｓ ２６−２００６年１０月：１頁。全ゲノム関連研究により
、ＩＬ−２３Ｒの遺伝子は、まれなコード改変体（Ａｒｇ３８１Ｇｌｎ）を有するクロー
ン病と非常に関連し、疾患から強く保護することが分かった。この遺伝的関連性は、先の
生物学的知見を確証するものであり（Ｙｅｎら（２００６年）Ｊ． Ｃｌｉｎ． Ｉｎｖ
ｅｓｔｉｇａｔｉｏｎ １１６：１２１８頁）、ＩＬ−２３およびその受容体は、ＩＢＤ
の処置に近づくための新しい治療剤の有望な標的であることを示唆する。

皮膚、関節、ＣＮＳの炎症疾患および増殖障害は、類似の免疫応答を誘発し、したがっ
て、ＩＬ−２３遮断は、全身性感染症と戦うための宿主の能力を含まずに、これらの免疫
媒介性炎症性障害の阻害をもたらすはずである。ＩＬ−２３の拮抗は、炎症性腸疾患、ク
ローン病、潰瘍性大腸炎、関節リウマチ、乾癬性関節炎、乾癬、強直性脊椎炎、およびア
トピー性皮膚炎に関連する炎症を軽減するはずである。ＩＬ−２３阻害剤の使用はまた、
増殖障害、たとえば癌、自己免疫障害、たとえば多発性硬化症、Ｉ型糖尿病、およびＳＬ
Ｅの阻害をもたらす。これらの多様な障害におけるＩＬ−２３の記載は、以下の公開され
たＰＣＴ出願に見つけることができる：国際公開第０４／０８１１９０号；国際公開第０
４／０７１５１７号；国際公開第００／５３６３１号；および国際公開第０１／１８０５
１号。ＩＬ−２３阻害剤はまた細菌感染症、マイコバクテリア感染症、ウイルス感染症、
および真菌感染症などの慢性感染症を含む感染症の処置での使用を見い出し得る。

ＩＬ−２３のｐ１９サブユニットは、造血性サイトカインの「長鎖」ファミリーのメン
バーであり（Ｏｐｐｍａｎｎら（２０００年）前掲）、アップ−アップ−ダウン−ダウン
トポロジーを有する、Ａ、Ｂ、Ｃ、およびＤと称される４つのまとめられたα−ヘリック
スを含む。４個のヘリックスは３個のポリペプチドループによってつなぎ合わされている
。Ａ−ＢループおよびＣ−Ｄループは、それらが平行ヘリックスをつなぎ合わせるので、
比較的長く形作られている。短いＢ−Ｃループは、逆平行のＢヘリックスおよびＣヘリッ
クスをつなぎ合わせている。ＩＬ−２３のｐ１９サブユニットは、ヘリックス状サイトカ
インのＩＬ−６ファミリーのメンバーである。サイトカインのこのファミリーは、３つの
保存されたエピトープを通してそれらの同族の受容体に結合する。（部位Ｉ、ＩＩ、およ
びＩＩＩ；ＢｒａｖｏおよびＨｅａｔｈ（２０００年）ＥＭＢＯ Ｊ． １９：２３９９
〜２４１１頁）。ｐ１９サブユニットは、３つのサイトカイン受容体サブユニットと相互
作用して、十分な（ｃｏｍｐｅｔｅｎｔ）シグナル伝達複合体を形成する。細胞中で発現
されると、ｐ１９サブユニットは、第１に、それがＩＬ−１２と共有するｐ４０サブユニ
ットと複合体を形成する。上記に示されるように、ｐ１９ｐ４０複合体は、ヘテロ二量体
タンパク質として細胞から分泌され、ＩＬ−２３と呼ばれる。たとえばＯｐｐｍａｎｎら
、前掲を参照されたい。ＩＬ−２３シグナルを伝達するために必要とされる細胞受容体複
合体は、サイトカインのＩＬ−６／ＩＬ−１２ファミリーのトール（ｔａｌｌ）シグナル
伝達受容体サブユニットの２つのメンバー、ＩＬ−２３特異的ＩＬ−２３Ｒ（たとえばＰ
ａｒｈａｍら、前掲を参照されたい）およびＩＬ−１２と共有されるＩＬ−１２Ｒｂ１か
らなる。

「長鎖」サイトカイン／受容体認識の構造的な基礎に対する洞察により、大部分のタン
パク質表面は、サイトカイン−受容体複合体の形成の際に埋没するが、相互作用の親和性
は、結合界面の中心でエネルギー性の「ホットスポット」を形成する少数の、密接に密集
することが多いアミノ酸残基によって支配されることを示した。大きなタンパク質−タン
パク質界面の結合エネルギーを支配する残基の正体は、「機能的エピトープ」と称された
。結果的に、相互作用の親和性（したがって生物学的特異性）は、リガンドおよび受容体
の機能的エピトープの構造的相補性によって規定される。詳細な変異誘発研究により、サ
イトカインおよび受容体の機能的エピトープを構成する最も重要な残基は、トリプトファ
ンなどの非極性側鎖、非極性側鎖の脂肪族成分、またはポリペプチド主鎖のいずれかを含
む疎水性接触部分であることを示した。この非極性「コア」は、結合エネルギーにとって
それほど重要ではない極性残基の輪（ｈａｌｏ）によって囲まれている。速度論的研究に
より、機能的エピトープの主要な役割は、複合体の解離速度を減少させることによって、
タンパク質−タンパク質相互作用を安定化させることであることが示されている。サイト
カインおよび受容体の間の最初の接触は、多くの不安定な接触部分をもたらすタンパク質
表面のランダム拡散または「回転（ｒｏｌｌｉｎｇ）」によって支配されることが示唆さ
れてきた。次いで、受容体およびリガンドの機能的エピトープがかみ合うと、複合体は安
定化する。たとえばＢｒａｖｏおよびＨｅａｔｈ、前掲を参照されたい。
ＩＩＩ．ＩＬ−２３特異抗体の生成
モノクローナル抗体を生成するための任意の適切な方法が使用されてもよい。たとえば
、ＩＬ−２３ヘテロ二量体の連結形態もしくは非連結（たとえば自然発生）形態またはそ
の断片を用いてレシピエントは免疫されてもよい。免疫の任意の適切な方法を使用するこ
とができる。そのような方法は、アジュバント、他の免疫刺激剤、繰り返しの追加免疫、
および１つまたは複数の免疫経路の使用を含むことができる。

ＩＬ−２３の任意の適切な供給源は、本明細書に開示される組成物および方法の、ｐ１
９サブユニットに特異的な非ヒト抗体の生成のための免疫原として使用することができる
。そのような形態は、当技術分野で知られている組換え手段、合成手段、化学的手段、ま
たは酵素分解手段を通して生成される連結ヘテロ二量体および自然発生ヘテロ二量体を含
む全タンパク質、ペプチド（複数可）、ならびにエピトープを含むが、これらに限定され
ない。

抗原の任意の形態は、生物学的活性抗体を生成するのに十分な抗体を生成するために使
用することができる。したがって、誘発性抗原は、単独のまたは当技術分野で知られてい
る１つもしくは複数の免疫原性増強剤と組み合わせた単一のエピトープ、複数のエピトー
プ、または全タンパク質であってもよい。誘発性抗原は、単離完全長タンパク質、細胞表
面タンパク質（たとえば、抗原の少なくとも一部分をトランスフェクトした細胞を用いて
免疫する）、または可溶性タンパク質（たとえば、タンパク質の細胞外ドメイン部分のみ
を用いて免疫する）であってもよい。抗原は、遺伝的改変細胞中で産生されてもよい。抗
原をコードするＤＮＡは、ゲノムＤＮＡまたは非ゲノムＤＮＡ（たとえばｃＤＮＡ）であ
ってもよく、細胞外ドメインの少なくとも１つの一部分をコードする。本明細書に使用さ
れるように、用語「部分」は、適宜に、興味のある抗原の免疫原性エピトープを成すため
の最小数のアミノ酸または核酸を指す。アデノウイルスベクター、プラスミド、および陽
イオン性脂質などの非ウイルスベクターを含むが、これらに限定されない、興味のある細
胞の形質転換に適切な任意の遺伝子ベクターが用いられてもよい。

任意の適切な方法は、ＩＬ−２３を阻害するための所望の生物学的特性を有する抗体を
誘発するために使用することができる。マウス、げっ歯類、霊長類、ヒトなどの多様な哺
乳類宿主からモノクローナル抗体（ｍＡｂ）を調製することが望ましい。そのようなモノ
クローナル抗体を調製するための技術の説明は、たとえばＳｔｉｔｅｓら（編）ＢＡＳＩ
Ｃ ＡＮＤ ＣＬＩＮＩＣＡＬ ＩＭＭＵＮＯＬＯＧＹ（第４版）Ｌａｎｇｅ Ｍｅｄｉ
ｃａｌ Ｐｕｂｌｉｃａｔｉｏｎｓ、Ｌｏｓ Ａｌｔｏｓ、ＣＡ、およびそこに引用され
る参考文献；ＨａｒｌｏｗおよびＬａｎｅ（１９８８年）ＡＮＴＩＢＯＤＩＥＳ： Ａ
ＬＡＢＯＲＡＴＯＲＹ ＭＡＮＵＡＬ ＣＳＨ Ｐｒｅｓｓ；Ｇｏｄｉｎｇ（１９８６年
）ＭＯＮＯＣＬＯＮＡＬ ＡＮＴＩＢＯＤＩＥＳ： ＰＲＩＮＣＩＰＬＥＳ ＡＮＤ Ｐ
ＲＡＣＴＩＣＥ（第２版）Ａｃａｄｅｍｉｃ Ｐｒｅｓｓ、Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ、ＮＹ．に
見出され得る。したがって、モノクローナル抗体は、当業者によく知られている種々の技
術によって得られてもよい。典型的には、所望の抗原を用いて免疫された動物からの脾臓
細胞は、骨髄腫細胞との融合によって通例、不死化される。ＫｏｈｌｅｒおよびＭｉｌｓ
ｔｅｉｎ（１９７６年）Ｅｕｒ． Ｊ． Ｉｍｍｕｎｏｌ． ６：５１１〜５１９頁を参
照されたい。不死化の代替方法は、エプスタインバーウイルス、癌遺伝子、もしくはレト
ロウイルスを用いる形質転換または当技術分野で知られている他の方法を含む。たとえば
Ｄｏｙｌｅら（１９９４年版および定期的な増刊）ＣＥＬＬ ＡＮＤ ＴＩＳＳＵＥ Ｃ
ＵＬＴＵＲＥ： ＬＡＢＯＲＡＴＯＲＹ ＰＲＯＣＥＤＵＲＥＳ、Ｊｏｈｎ Ｗｉｌｅｙ
ａｎｄ Ｓｏｎｓ、Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ、ＮＹを参照されたい。単一の不死化細胞から生
じるコロニーは、抗原に対する所望の特異性および親和性の抗体の産生のためにスクリー
ニングされ、そのような細胞によって産生されたモノクローナル抗体の収量は、脊椎動物
宿主の腹膜腔への注射を含む多様な技術によって増強されてもよい。あるいは、たとえば
、Ｈｕｓｅら（１９８９年）Ｓｃｉｅｎｃｅ ２４６：１２７５〜１２８１頁によって概
要を述べられる一般的なプロトコルに従って、ヒトＢ細胞からのＤＮＡライブラリーをス
クリーニングすることによって、モノクローナル抗体またはその抗原結合性断片をコード
するＤＮＡ配列を単離してもよい。

他の適切な技術は、ファージまたは類似のベクター中の抗体のライブラリーの選択を含
む。たとえばＨｕｓｅら前掲；およびＷａｒｄら（１９８９年）Ｎａｔｕｒｅ ３４１：
５４４〜５４６頁を参照されたい。キメラ抗体またはヒト化抗体を含む、本発明のポリペ
プチドおよび抗体は、改変を伴ってまたは改変を伴わずに使用されてもよい。ポリペプチ
ドおよび抗体は、検出可能なシグナルを提供する物質を共有結合でまたは非共有結合のい
ずれかで結合することによって標識されることが多い。種々様々な標識およびコンジュゲ
ーション技術が知られており、科学文献および特許文献の両者で広範囲に報告されている
。適切な標識は、放射性核種、酵素、基質、補因子、阻害剤、蛍光成分、化学発光成分、
磁気粒子などを含む。そのような標識の使用を教示する特許は、米国特許第３，８１７，
８３７号；第３，８５０，７５２号；第３，９３９，３５０号；第３，９９６，３４５号
；第４，２７７，４３７号；第４，２７５，１４９号；および第４，３６６，２４１号を
含む。さらに、組換え免疫グロブリンは、産生されてもよく、Ｃａｂｉｌｌｙ 米国特許
第４，８１６，５６７号；およびＱｕｅｅｎら（１９８９年）Ｐｒｏｃ． Ｎａｔ’ｌ
Ａｃａｄ． Ｓｃｉ． ＵＳＡ ８６：１００２９〜１００３３頁を参照されたい；また
はトランスジェニックマウス中で作製されてもよく、Ｍｅｎｄｅｚら（１９９７年）Ｎａ
ｔｕｒｅ Ｇｅｎｅｔｉｃｓ １５：１４６〜１５６頁を参照されたい。Ａｂｇｅｎｉｘ
およびＭｅｄａｒｅｘの技術もまた参照されたい。

ＩＬ−２３の所定の断片に対する抗体または結合性組成物は、ポリペプチド、断片、ペ
プチド、またはエピトープと担体タンパク質とのコンジュゲートを用いる動物の免疫によ
って出現させることができる。モノクローナル抗体は、所望の抗体を分泌する細胞から調
製される。これらの抗体は、正常ＩＬ−２３または欠損ＩＬ−２３に対する結合性につい
てスクリーニングすることができる。これらのモノクローナル抗体は、一般にＥＬＩＳＡ
によって決定される、一般に少なくとも約１μＭ、より一般に少なくとも約３００ｎＭ、
３０ｎＭ、１０ｎＭ、３ｎＭ、１ｎＭ、３００ｐＭ、１００ｐＭ、３０ｐＭの、またはそ
れよりも良好なＫｄで結合する。適切な非ヒト抗体はまた、以下の実施例５および６に記
載される生物学的アッセイを使用して同定されてもよい。

抗体１３Ｂ８を発現するハイブリドーマは、アクセッション番号ＰＴＡ−７８０３下で
２００６年８月１７日にＡｍｅｒｉｃａｎ Ｔｙｐｅ Ｃｕｌｔｕｒｅ Ｃｏｌｌｅｃｔ
ｉｏｎ（ＡＴＣＣ−Ｍａｎａｓｓａｓ、Ｖｉｒｇｉｎｉａ、ＵＳＡ）にブダペスト条約に
従って寄託された。

ＩＶ．ＩＬ−２３特異抗体のヒト化
任意の適切な非ヒト抗体は、超可変領域のための供給源として使用することができる。
非ヒト抗体の供給源は、マウス、ウサギ目（ウサギを含む）、ウシ、および霊長類を含む
が、これらに限定されない。ほとんどの場合、ヒト化抗体は、レシピエントの超可変領域
残基が、所望の特異性、親和性、および能力（ｃａｐａｃｉｔｙ）を有するマウス、ラッ
ト、ウサギ、または非ヒト霊長類などの非ヒト種（ドナー抗体）からの超可変領域残基と
交換されたヒト免疫グロブリン（レシピエント抗体）である。いくつかの例では、ヒト免
疫グロブリンのＦｖフレームワーク領域（ＦＲ）残基は、対応する非ヒト残基と交換され
る。さらに、ヒト化抗体は、レシピエント抗体またはドナー抗体中に見つけられない残基
を含んでいてもよい。これらの改変は、所望の生物学的活性の抗体性能をさらに改善する
ために成される。より詳細については、Ｊｏｎｅｓら（１９８６年）Ｎａｔｕｒｅ ３２
１：５２２〜５２５頁；Ｒｅｉｃｈｍａｎｎら（１９８８年）Ｎａｔｕｒｅ ３３２：３
２３〜３２９頁；およびＰｒｅｓｔａ（１９９２年）Ｃｕｒｒ． Ｏｐ． Ｓｔｒｕｃｔ
． Ｂｉｏｌ． ２：５９３〜５９６頁を参照されたい。

抗体を組換え操作するための方法は、たとえばＢｏｓｓら（米国特許第４，８１６，３
９７号）、Ｃａｂｉｌｌｙら（米国特許第４，８１６，５６７号）、Ｌａｗら（欧州特許
出願公開第４３８３１０Ａ１号）およびＷｉｎｔｅｒ（欧州特許第２３９４００Ｂ１号）
に記載されている。

ヒト化抗ＩＬ−２３抗体のアミノ酸配列改変体は、適正なヌクレオチド変更をヒト化抗
ＩＬ−２３抗体ＤＮＡの中に導入することによってまたはペプチド合成によって調製され
る。そのような改変体は、たとえば、ヒト化抗ＩＬ−２３抗体について示されるアミノ酸
配列内の残基からの欠失および／またはそれへの挿入および／またはその置換を含む。欠
失、挿入、および置換の任意の組合せは、最終的な構築物に到達するために成されるが、
ただし、最終的な構築物が所望の特徴を持つことを条件とする。アミノ酸変化はまた、糖
鎖付加部位の数または位置の変更などの、ヒト化抗ＩＬ−２３抗体の翻訳後プロセスをも
変更し得る。

変異誘発の好ましい位置である、ヒト化抗ＩＬ−２３ｐ１９抗体ポリペプチドのある種
の残基または領域の同定のための有用な方法は、ＣｕｎｎｉｎｇｈａｍおよびＷｅｌｌｓ
（１９８９年）Ｓｃｉｅｎｃｅ ２４４：１０８１〜１０８５頁に記載されているように
「アラニンスキャニング変異誘発（ａｌａｎｉｎｅ ｓｃａｎｎｉｎｇ ｍｕｔａｇｅｎ
ｅｓｉｓ）」と呼ばれる。ここで、残基または標的残基の群は、同定され（たとえば、Ａ
ｒｇ、Ａｓｐ、Ｈｉｓ、Ｌｙｓ、およびＧｌｕなどの荷電残基）、ＩＬ−２３抗原とアミ
ノ酸との相互作用に影響するように、中性アミノ酸または負に荷電したアミノ酸と交換さ
れる（最も好ましくはアラニンまたはポリアラニン）。次いで、置換に対して機能的な感
度を示すアミノ酸残基は、置換の部位にまたはその代わりにさらなる改変体または他の改
変体を導入することによって改善される。したがって、アミノ酸配列改変を導入するため
の部位は予め決定されるが、変異の性質自体を予め決定する必要はない。たとえば、所与
の部位での変異の性能を分析するために、Ａｌａスキャニングまたはランダム変異誘発は
、標的コドンまたは標的領域で行われ、発現されたヒト化抗ＩＬ−２３ｐ１９抗体改変体
は、所望の活性についてスクリーニングされる。

アミノ酸配列の挿入は、長さが１残基から１００個以上の残基を含むポリペプチドに及
ぶアミノ末端および／またはカルボキシル末端の融合ならびに単一のアミノ酸残基または
複数のアミノ酸残基の配列内挿入が含まれる。末端挿入の例は、Ｎ末端メチオニル残基を
有するヒト化抗ＩＬ−２３抗体またはエピトープタグに融合された抗体を含む。ヒト化抗
ＩＬ−２３抗体分子の他の挿入改変体は、ヒト化抗ＩＬ−２３抗体のＮ末端またはＣ末端
と、抗体の血清半減期を増加させる酵素またはポリペプチドとの融合を含む。

他のタイプの改変体は、アミノ酸置換改変体である。これらの改変体は、ヒト化抗ＩＬ
−２３ｐ１９抗体分子中の少なくとも１つのアミノ酸残基が除去され、その位置に異なる
残基が挿入されている。置換変異誘発にとって最も興味のある部位は、超可変ループを含
むが、ＦＲ変更もまた企図される。

抗体の他のタイプのアミノ酸改変体は、抗体の元の糖鎖付加パターンを変化させる。変
化させることによって、抗体中に見つけられる１つもしくは複数の糖鎖成分を欠失させる
ことおよび／または抗体中に存在しない１つもしくは複数の糖鎖付加部位を付加すること
を意味する。抗体の糖鎖付加は、典型的には、Ｎ連結（Ｎ−ｌｉｎｋｅｄ）またはＯ連結
（Ｏ−ｌｉｎｋｅｄ）のいずれかである。Ｎ連結は、アスパラギン残基の側鎖への糖鎖成
分の付加を指す。Ｘがプロリン以外の任意のアミノ酸である、トリペプチド配列、アスパ
ラギン−Ｘ−セリンおよびアスパラギン−Ｘ−トレオニンは、糖鎖成分のアスパラギン側
鎖への酵素的付加のための認識配列である。したがって、ポリペプチド中のこれらのトリ
ペプチド配列のいずれかの存在により、潜在的な糖鎖付加部位が作り出される。Ｏ連結糖
鎖付加は、糖であるＮ−アセチルガラクトサミン、ガラクトース、またはキシロースのう
ちの１つのヒドロキシアミノ酸、最も通例ではセリンまたはトレオニンへの付加を指すが
、５−ヒドロキシプロリンまたは５−ヒドロキシリシンが使用されてもよい。

抗体への糖鎖付加部位の追加は、抗体が、１つまたは複数の上記トリペプチド配列を含
有するように（Ｎ連結糖鎖付加部位について）、アミノ酸配列を変化させることによって
好都合に達成される。変更はまた、元の抗体の配列に対する１つまたは複数のセリン残基
またはトレオニン残基の追加またはそれによる置換によって成されてもよい（Ｏ連結糖鎖
付加部位について）。

さらに他のタイプのアミノ酸改変体は、最終的なヒト化抗体のより大きな化学的安定性
をもたらすための残基の置換である。たとえば、げっ歯類ＣＤＲ内の任意のＮＧ配列でイ
ソアスパラギン酸の形成の能力を低下させるために、アスパラギン（Ｎ）残基を変更して
もよい。類似の問題は、ＤＧ配列で生じ得る。ＲｅｉｓｓｎｅｒおよびＡｓｗａｄ（２０
０３年）Ｃｅｌｌ． Ｍｏｌ． Ｌｉｆｅ Ｓｃｉ．６０：１２８１頁。イソアスパラギ
ン酸形成は、その標的抗原に対する抗体の結合を弱め得るかまたは完全に抑止し得る。Ｐ
ｒｅｓｔａ（２００５年）Ｊ． Ａｌｌｅｒｇｙ Ｃｌｉｎ． Ｉｍｍｕｎｏｌ． １１
６：７３１および７３４頁。一実施形態では、アスパラギンは、グルタミン（Ｑ）に変更
される。加えて、げっ歯類ＣＤＲ中のメチオニン残基は、抗原結合親和性を低下させ得る
および最終的な抗体調製物中の分子の不均質性の一因ともなり得る、メチオニンの硫黄が
酸化する可能性を低下させるために変更されてもよい。同上文献。一実施形態では、メチ
オニンは、アラニン（Ａ）に変更される。そのような置換を有する抗体は、置換が、許容
できないレベルまでＩＬ−２３ｐ１９結合親和性を減少させていないことを確認するため
にその後スクリーニングされる。

ヒト化ＩＬ−２３特異抗体のアミノ酸配列改変体をコードする核酸分子は、当技術分野
で知られている種々の方法によって調製される。これらの方法は、天然源からの単離（自
然発生アミノ酸配列改変体の場合）または先に調製された改変体バージョンもしくは非改
変体バージョンのヒト化抗ＩＬ−２３ｐ１９抗体のオリゴヌクレオチド媒介性の（もしく
は部位特異的な）変異誘発、ＰＣＲ変異誘発、およびカセット変異誘発による調製を含む
が、これらに限定されない。

通常、ヒト化抗ＩＬ−２３抗体のアミノ酸配列改変体は、重鎖または軽鎖のいずれかの
元のヒト化抗体アミノ酸配列と少なくとも７５％、より好ましくは、少なくとも８０％、
より好ましくは、少なくとも８５％、より好ましくは、少なくとも９０％、および最も好
ましくは、少なくとも９５、９８、または９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸
配列を有する。この配列に関しての同一性または相同性は、配列を整列させ、必要であれ
ばギャップを導入して、最大の配列同一性パーセントを達成した後に、配列同一性の一部
としてのあらゆる保存的置換も考慮に入れず、ヒト化抗ＩＬ−２３残基と同一となる、候
補配列中のアミノ酸残基のパーセンテージとして本明細書に定義される。Ｎ末端、Ｃ末端
、または内部の延長、欠失、または抗体配列中への挿入のいずれも、配列の同一性または
相同性に影響しないものと見なす。

ヒト化抗体は、ＩｇＭ、ＩｇＧ、ＩｇＤ、ＩｇＡ、およびＩｇＥを含む任意のクラスの
免疫グロブリンから選択することができる。好ましくは、抗体は、ＩｇＧ抗体である。Ｉ
ｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、およびＩｇＧ４を含む、ＩｇＧの任意のアイソタイプを使
用することができる。ＩｇＧアイソタイプの改変体もまた企図される。ヒト化抗体は、１
つを超えるクラスまたはアイソタイプからの配列を含んでいてもよい。所望の生物学的活
性を生成するのに必要な定常ドメイン配列の最適化は、下記の生物学的アッセイで抗体を
スクリーニングすることによって容易に達成される。

同様に、いずれかのクラスの軽鎖は、本明細書の組成物および方法で使用することがで
きる。具体的には、カッパ、ラムダ、またはその改変体が本発明の組成物および方法で有
用である。

非ヒト抗体からのＣＤＲ配列の任意の適切な部分を使用することができる。ＣＤＲ配列
は、ＣＤＲ配列が、用いられるヒト抗体配列および非ヒト抗体配列と別個なものとなるよ
うに、少なくとも１つの残基の置換、挿入、または欠失によって変異誘発することができ
る。そのような変異は、最小限となるように企図される。典型的には、ヒト化抗体残基の
少なくとも７５％、より多くの場合９０％、および最も好ましくは９５％超は、非ヒトＣ
ＤＲ残基のそれに対応する。

ヒト抗体からのＦＲ配列の任意の適切な部分を使用することができる。ＦＲ配列は、Ｆ
Ｒ配列が、用いられるヒト抗体配列および非ヒト抗体配列と別個なものとなるように、少
なくとも１つの残基の置換、挿入、または欠失によって変異誘発することができる。その
ような変異は、最小限となるように企図される。典型的には、ヒト化抗体残基の少なくと
も７５％、より多くの場合９０％、および最も好ましくは９５、９８、または９９％超は
、ヒトＦＲ残基のそれに対応する。

ＣＤＲ残基およびＦＲ残基は、Ｋａｂａｔの標準的な配列定義によって決定される。Ｋ
ａｂａｔら（１９８７年）Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ ｏｆ Ｐｒｏｔｅｉｎｓ ｏｆ Ｉｍｍ
ｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ Ｉｎｔｅｒｅｓｔ、Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅｓ
ｏｆ Ｈｅａｌｔｈ、Ｂｅｔｈｅｓｄａ Ｍｄ。配列番号：１〜５は、様々なマウス抗ヒ
トＩＬ−２３ｐ１９抗体の重鎖可変ドメイン配列を示し、配列番号９〜１３は、軽鎖可変
ドメイン配列を表わす。図１および２は、本発明の様々な抗体の重鎖可変ドメインおよび
軽鎖可変ドメインの配列一覧を提供する。ＣＤＲは、図に示され、個々のＣＤＲ配列は、
表７に示されるように特有の配列識別名を用いてそれぞれ提示される。

抗体１３Ｂ８のヒト化形態が提供される。ヒト化軽鎖１３Ｂ８配列（カッパ定常領域を
有する）は、配列番号１４に提供され、軽鎖可変ドメインは、その配列の残基１〜１０８
を含む。ヒト化重鎖１３Ｂ８配列（γ１定常領域を有する）の３つのバージョンは、配列
番号６〜８に提供され、重鎖可変ドメインは、それらの配列の残基１〜１１６を含む。１
３Ｂ８重鎖改変体は、太字体で示される、親配列との差異を伴って表２に示される。Ｍｅ
ｔ（Ｍ）は、残基の酸化および抗体の不活性化の可能性を回避するために、Ｌｙｓ（Ｋ）
に改変された。ＮＥＭＦＥに対するＡＱＫＬＱの置換は、抗体をヒト化するために選択さ
れるヒトフレームワークからのヒト生殖細胞系列配列とのマウスＣＤＲ配列の交換である
。

本明細書に開示される他の抗体のヒト化形態は、配列番号１４および６に提供されるヒ
ト化１３Ｂ８について軽鎖配列および重鎖配列の中にげっ歯類親抗体ＣＤＲを単純に置換
することによって作り出されてもよい。このアプローチは、抗体１３Ｂ８のＣＤＲと高い
相同性を有するＣＤＲを持った抗体鎖、たとえば重鎖上にクローン１１Ｃ１ならびに軽鎖
上にクローン１１Ｃ１および２１Ｄ１を有する抗体鎖にとって最も成功する可能性が高い
。あるいは、マウス抗体は、本明細書（たとえば実施例２）に概要が示されるアプローチ
を使用して、独立してヒト化されてもよい。

一実施形態では、ＣＤＲは、本明細書に開示される任意の単一配列ＣＤＲの改変体を含
み（配列番号１５〜４６）、その改変体は、表１のデータを使用して決定されるように、
開示される配列と比較して、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、またはそれ以
上の保存的アミノ酸置換を含む。

キメラ抗体もまた企図される。上記に示されるように、典型的なキメラ抗体は、特定の
種に由来するまたは特定の抗体のクラスもしくはサブクラスに属する抗体中の対応する配
列と同一であるまたはそれに相同性である重鎖および／または軽鎖の一部分を含むが、鎖
（複数可）の残りの部分は、他の種に由来するまたは他の抗体のクラスもしくはサブクラ
スに属する抗体中の対応する配列と同一であるまたはそれに相同性であり、ならびにキメ
ラ抗体が所望の生物学的活性を呈する限り、そのような抗体の断片を含む。米国特許第４
，８１６，５６７号およびＭｏｒｒｉｓｏｎら（１９８４年）Ｐｒｏｃ． Ｎａｔｌ．
Ａｃａｄ． Ｓｃｉ． ＵＳＡ ８１：６８５１〜６８５５頁を参照されたい。

二重特異性抗体もまた本発明の方法および組成物で有用である。本明細書に使用される
ように、用語「二重特異性抗体」は、少なくとも２つの異なる抗原エピトープ、たとえば
ＩＬ−２３ｐ１９、およびＩＬ−１７に対する結合特異性を有する抗体、典型的にはモノ
クローナル抗体を指す。一実施形態では、エピトープは、同じ抗原に由来する。他の実施
形態では、エピトープは、２つの異なる抗原に由来する。二重特異性抗体を作製するため
の方法は、当技術分野で知られている。たとえば、二重特異性抗体は、２つの免疫グロブ
リン重鎖／軽鎖対の同時発現を使用して組換えで産生することができる。たとえばＭｉｌ
ｓｔｅｉｎら（１９８３年）Ｎａｔｕｒｅ ３０５：５３７〜３９頁を参照されたい。あ
るいは、二重特異性抗体は、化学的連結を用いて調製することができる。たとえばＢｒｅ
ｎｎａｎら（１９８５年）Ｓｃｉｅｎｃｅ ２２９：８１頁を参照されたい。二重特異性
抗体は、二重特異性抗体の断片を含む。たとえばＨｏｌｌｉｇｅｒら（１９９３年）Ｐｒ
ｏｃ． Ｎａｔｌ． Ａｃａｄ． Ｓｃｉ． Ｕ．Ｓ．Ａ． ９０：６４４４〜４８頁、
Ｇｒｕｂｅｒら（１９９４年）Ｊ． Ｉｍｍｕｎｏｌ． １５２：５３６８頁を参照され
たい。

さらに他の実施形態では、異なる定常ドメインは、本明細書に提供されるヒト化ＶＬ領
域およびヒト化ＶＨ領域に付加されてもよい。たとえば、本発明の抗体（または断片）の
特定の意図される使用が、エフェクター機能の変更を求めるためのものである場合、Ｉｇ
Ｇ１以外の重鎖定常ドメインが使用されてもよい。ＩｇＧ１抗体は、長い半減期ならびに
補体活性化および抗体依存性細胞傷害などのエフェクター機能を提供するが、そのような
活性は、抗体のすべての使用には望めない。そのような例では、たとえばＩｇＧ４定常ド
メインが使用されてもよい。

Ｖ．ヒト化抗ＩＬ−２３の生物学的活性
ヒト化抗ＩＬ−２３抗体で望ましいとして本明細書で同定される特徴を有する抗体は、
インビトロでの阻害性生物学的活性または適切な結合親和性についてスクリーニングする
ことができる。興味のある抗体（たとえば、サイトカインのその受容体への結合を遮断す
るもの）が結合する、ヒトＩＬ−２３（つまりｐ１９サブユニット）上のエピトープに結
合する抗体についてスクリーニングするために、ＡＮＴＩＢＯＤＩＥＳ， Ａ ＬＡＢＯ
ＲＡＴＯＲＹ ＭＡＮＵＡＬ、Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ Ｌａｂｏｒａｔ
ｏｒｙ、ＨａｒｌｏｗおよびＤａｖｉｄ Ｌａｎｅ編（１９８８年）に記載されているも
のなどのルーチン的な交差遮断アッセイを行うことができる。同じエピトープに結合する
抗体は、そのようなアッセイで交差遮断する可能性が高いが、交差遮断が、重複するエピ
トープまたは近くの重複しないエピトープに結合する抗体による抗体結合の立体障害に起
因し得るため、すべての交差遮断抗体は、必ずしも、正確に同じエピトープに結合すると
は限らない。

あるいは、エピトープマッピングは、たとえばＣｈａｍｐｅら（１９９５年）Ｊ． Ｂ
ｉｏｌ． Ｃｈｅｍ． ２７０：１３８８〜１３９４頁に記載されているように、抗体が
、興味のあるエピトープに結合するかどうかを決定するために行うことができる。Ｃｕｎ
ｎｉｎｇｈａｍおよびＷｅｌｌｓ（１９８９年）Ｓｃｉｅｎｃｅ ２４４：１０８１〜１
０８５頁に記載されている「アラニンスキャニング変異誘発」またはヒトＩＬ−２３中の
アミノ酸残基の点変異誘発の他のある形態もまた、本発明の抗ＩＬ−２３抗体について機
能的エピトープを決定するために使用されてもよい。しかしながら、変異誘発研究はまた
、ＩＬ−２３の全体的な三次元構造にとって重大であるが、抗体−抗原接触に直接関与し
ないアミノ酸残基をも明らかにし得、したがって、他の方法は、この方法を使用して決定
される機能的エピトープを確証するために必要となり得る。

特異抗体が結合するエピトープはまた、ヒトＩＬ−２３ｐ１９（配列番号４７）の断片
を含むペプチドへの抗体の結合を評価することによって決定されてもよい。ＩＬ−１２お
よびＩＬ−２３のｐ４０サブユニットの配列は、ＧｅｎＢａｎｋアクセッション番号Ｐ２
９４６０に見つけられる。ＩＬ−２３ｐ１９の配列を包含する、一連の重複するペプチド
は、合成され、たとえば直接ＥＬＩＳＡで、競合的ＥＬＩＳＡで（ここでペプチドは、マ
イクロタイタープレートのウェルに結合されたＩＬ−２３ｐ１９への抗体の結合を妨害す
るその能力について評価される）、またはチップ上で、結合についてスクリーニングされ
てもよい。そのようなペプチドスクリーニング法は、いくつかの不連続な機能的エピトー
プ、つまり、ＩＬ−２３ｐ１９ポリペプチド鎖の一次配列に沿って隣接していないアミノ
酸残基を含む機能的エピトープを検出でき得ない。

本発明の抗体が結合するエピトープはまた、Ｘ線結晶構造決定（たとえば国際公開第２
００５／０４４８５３号）、分子モデリング、ならびに遊離している場合および興味のあ
る抗体との複合体中で結合している場合の、ＩＬ−２３中の不安定なアミド水素のＨ−Ｄ
交換速度のＮＭＲ決定を含む核磁気共鳴（ＮＭＲ）分光法などの構造的な方法によって決
定されてもよい（Ｚｉｎｎ−Ｊｕｓｔｉｎら（１９９２年）Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ
３１：１１３３５〜１１３４７頁；Ｚｉｎｎ−Ｊｕｓｔｉｎら（１９９３年）Ｂｉｏｃｈ
ｅｍｉｓｔｒｙ ３２：６８８４〜６８９１頁）。

Ｘ線結晶学に関して、結晶化は、マイクロバッチ（ｍｉｃｒｏｂａｔｃｈ）（たとえば
Ｃｈａｙｅｎ（１９９７年）Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ ５：１２６９〜１２７４頁）、懸滴蒸
気拡散（たとえばＭｃＰｈｅｒｓｏｎ（１９７６年）Ｊ． Ｂｉｏｌ． Ｃｈｅｍ． ２
５１：６３００〜６３０３頁）、シーディング（ｓｅｅｄｉｎｇ）、および透析を含む当
技術分野で知られている方法のいずれかを使用して達成されてもよい（たとえばＧｉｅｇ
ｅら（１９９４年）Ａｃｔａ Ｃｒｙｓｔａｌｌｏｇｒ． Ｄ５０：３３９〜３５０頁；
ＭｃＰｈｅｒｓｏｎ（１９９０年）Ｅｕｒ． Ｊ． Ｂｉｏｃｈｅｍ． １８９：１〜２
３頁）。少なくとも約１ｍｇ／ｍＬ、好ましくは約１０ｍｇ／ｍＬ〜約２０ｍｇ／ｍＬの
濃度を有するタンパク質調製物を使用することが望ましい。結晶化は、ポリエチレングリ
コール１０００〜２０，０００（ＰＥＧ：約１０００〜約２０，０００Ｄａに及ぶ平均分
子量）、好ましくは約５０００〜約７０００Ｄａ、より好ましくは約６０００Ｄａを、約
１０％〜約３０％（ｗ／ｖ）に及ぶ濃度で含有する沈殿剤溶液中で最も良好に達成され得
る。望ましくは、タンパク質安定化剤、たとえばグリセロールを、約０．５％〜約２０％
に及ぶ濃度で含み得る。望ましくは、塩化ナトリウム、塩化リチウム、クエン酸ナトリウ
ムなどの適切な塩もまた、好ましくは約１ｍＭ〜約１０００ｍＭに及ぶ濃度で沈殿剤溶液
中に入ってよい。沈殿剤は、好ましくは、約４．０〜約１０．０、多くの場合、約７．０
〜８．５、たとえばｐＨ８．０のｐＨに緩衝化される。沈殿剤溶液中で有用な特別の緩衝
液は変えられてもよく、当技術分野でよく知られている。Ｓｃｏｐｅｓ、Ｐｒｏｔｅｉｎ
Ｐｕｒｉｆｉｃａｔｉｏｎ： Ｐｒｉｎｃｉｐｌｅｓ ａｎｄ Ｐｒａｃｔｉｃｅ、第
３版、（１９９４年）Ｓｐｒｉｎｇｅｒ−Ｖｅｒｌａｇ、Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ。有用な緩衝
液の例は、ＨＥＰＥＳ、Ｔｒｉｓ、ＭＥＳ、および酢酸塩を含むが、これらに限定されな
い。結晶は、２℃、４℃、８℃、および２６℃を含む広範囲の温度で成長し得る。

抗体：抗原結晶は、周知のＸ線回析技術を使用して研究されてもよく、Ｘ−ＰＬＯＲ（
Ｙａｌｅ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ、１９９２、Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｓｉｍｕｌａｔｉｏ
ｎｓ，Ｉｎｃ．によって販売；たとえばＢｌｕｎｄｅｌｌ ＆ Ｊｏｈｎｓｏｎ（１９８
５年）Ｍｅｔｈ． Ｅｎｚｙｍｏｌ． １１４ ＆ １１５、Ｈ． Ｗ． Ｗｙｃｋｏｆ
ｆら編、Ａｃａｄｅｍｉｃ Ｐｒｅｓｓ；米国特許出願公開第２００４／００１４１９４
号を参照されたい）およびＢＵＳＴＥＲ（Ｂｒｉｃｏｇｎｅ（１９９３年）Ａｃｔａ Ｃ
ｒｙｓｔ． Ｄ４９：３７〜６０頁；Ｂｒｉｃｏｇｎｅ（１９９７年）Ｍｅｔｈ． Ｅｎ
ｚｙｍｏｌ． ２７６Ａ：３６１〜４２３頁、Ｃａｒｔｅｒ ＆ Ｓｗｅｅｔ編；Ｒｏｖ
ｅｒｓｉら（２０００年）Ａｃｔａ Ｃｒｙｓｔ． Ｄ５６：１３１３〜１３２３頁）な
どのコンピューターソフトウェアを使用して改善されてもよい。

本発明の抗体と同じエピトープに結合するさらなる抗体は、たとえば、エピトープへの
結合でＩＬ−２３に対して出現させた抗体をスクリーニングすることによってまたはエピ
トープ配列を含むヒトＩＬ−２３の断片を含むペプチドを用いる動物の免疫によって得ら
れてもよい。同じ機能的エピトープに結合する抗体は、受容体結合の遮断などの類似の生
物学的活性を呈することを予想し得、そのような活性は、抗体の機能アッセイによって確
証することができる。

抗体親和性（たとえばヒトＩＬ−２３に対する）は、標準的な分析を使用して決定され
てもよい。好ましいヒト化抗体は、ヒトＩＬ−２３ｐ１９に、約１×１０−７以下、好ま
しくは、約１×１０−８以下、より好ましくは、約１×１０−９以下、および最も好まし
くは、約１×１０−１０以下または１×１０−１１ＭのＫｄ値で結合する抗体である。

本発明の組成物および方法に有用な抗体およびその断片は、生物学的活性抗体および生
物学的活性断片である。本明細書に使用されるように、用語「生物学的活性」は、所望の
抗原エピトープに結合し、直接または間接的に生物学的作用を発揮することができる抗体
または抗体断片を指す。典型的には、これらの作用は、ＩＬ−２３がその受容体に結合す
ることができないことに起因する。本明細書に使用されるように、用語「特異的」は、抗
体の標的抗原エピトープへの選択的結合を指す。抗体は、所与の条件下で、ＩＬ−２３へ
の結合を、関係のない抗原または抗原混合物への結合と比較することによって、結合の特
異性について試験することができる。抗体が、関係のない抗原または抗原混合物に対する
よりも、少なくとも１０倍、および好ましくは５０倍多くＩＬ−２３に結合する場合、そ
れは特異的とみなす。ＩＬ−１２に結合する抗体は、ＩＬ−２３特異抗体ではない。ＩＬ
−２３ｐ１９に「特異的に結合する」抗体は、ＩＬ−２３ｐ１９由来の配列を含まないタ
ンパク質に結合しない、つまり、本明細書に使用されるような「特異性」は、ＩＬ−２３
ｐ１９特異性に関するものであり、問題のタンパク質中に存在し得る任意の他の配列にも
関するものではない。たとえば、本明細書に使用されるように、ＩＬ−２３ｐ１９に「特
異的に結合する」抗体は、ＩＬ−２３ｐ１９およびＦＬＡＧ（登録商標）ペプチドタグを
含む融合タンパク質であるＦＬＡＧ（登録商標）−ｈＩＬ−２３ｐ１９に典型的には結合
するが、ＦＬＡＧ（登録商標）ペプチドタグ単独のものにはまたはそれがＩＬ−２３ｐ１
９以外のタンパク質に融合している場合は結合しない。

阻害性ＩＬ−２３ｐ１９特異抗体などの本発明のＩＬ−２３特異的結合性化合物は、任
意の様式で、腹腔マクロファージによるＩＬ−１βおよびＴＮＦの産生ならびにＴＨ１７
Ｔ細胞によるＩＬ−１７の産生を含むが、これらに限定されないその生物学的活性を阻
害することができる。Ｌａｎｇｒｉｓｈら（２００４年）Ｉｍｍｕｎｏｌ． Ｒｅｖ．
２０２：９６〜１０５頁を参照されたい。抗ＩＬ−２３ｐ１９抗体はまた、ＩＬ−１７Ａ
、ＩＬ−１７Ｆ、ＣＣＬ７、ＣＣＬ１７、ＣＣＬ２０、ＣＣＬ２２、ＣＣＲ１、およびＧ
Ｍ−ＣＳＦの遺伝子発現を阻害することもできる。Ｌａｎｇｒｉｓｈら（２００５年）Ｊ
． Ｅｘｐ． Ｍｅｄ． ２０１：２３３〜２４０頁を参照されたい。抗ＩＬ−２３ｐ１
９抗体などの本発明のＩＬ−２３特異的結合性化合物はまた、ＴＨ１７細胞の増殖または
生存を増強するＩＬ−２３の能力をも遮断する。ＣｕａおよびＫａｓｔｅｌｅｉｎ（２０
０６年）Ｎａｔ． Ｉｍｍｕｎｏｌ． ７：５５７〜５５９頁。操作された抗ＩＬ−２３
ｐ１９の阻害活性は、炎症性障害、自己免疫障害、および増殖障害の処置で有用である。
そのような障害の例は、ＰＣＴ特許出願国際公開第０４／０８１１９０号；国際公開第０
４／０７１５１７号；国際公開第００／５３６３１号；および国際公開第０１／１８０５
１号に記載されている。

ＶＩ．医薬組成物
ＩＬ−２３ｐ１９抗体を含む医薬組成物または無菌組成物を調製するために、サイトカ
イン類似体もしくはムテイン、それに対する抗体、またはそれの核酸は、薬学的に許容可
能な担体または賦形剤と混合される。たとえばＲｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ Ｐｈａｒｍａｃ
ｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ ａｎｄ Ｕ．Ｓ． Ｐｈａｒｍａｃｏｐｅｉａ：
Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｆｏｒｍｕｌａｒｙ、Ｍａｃｋ Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ Ｃｏｍｐａ
ｎｙ、Ｅａｓｔｏｎ、ＰＡ（１９８４年）を参照されたい。

治療薬および診断用薬の処方物は、生理学的に許容可能な担体、賦形剤、または安定剤
と混ぜることによって、たとえば凍結乾燥粉末、スラリー、水性溶液、または懸濁液の形
態で調製されてもよい。たとえばＨａｒｄｍａｎら（２００１年）Ｇｏｏｄｍａｎ ａｎ
ｄ Ｇｉｌｍａｎ’ｓ Ｔｈｅ Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａｌ Ｂａｓｉｓ ｏｆ
Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ、ＭｃＧｒａｗ−Ｈｉｌｌ、Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ、ＮＹ；Ｇｅｎ
ｎａｒｏ（２０００年）Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ： Ｔｈｅ Ｓｃｉｅｎｃｅ ａｎｄ Ｐｒ
ａｃｔｉｃｅ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｙ、Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ， Ｗｉｌｌｉａｍｓ，
ａｎｄ Ｗｉｌｋｉｎｓ、Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ、ＮＹ；Ａｖｉｓら（編）（１９９３年）
Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｄｏｓａｇｅ Ｆｏｒｍｓ： Ｐａｒｅｎｔｅｒａｌ
Ｍｅｄｉｃａｔｉｏｎｓ、Ｍａｒｃｅｌ Ｄｅｋｋｅｒ、ＮＹ；Ｌｉｅｂｅｒｍａｎら（
編）（１９９０年）Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｄｏｓａｇｅ Ｆｏｒｍｓ： Ｔａ
ｂｌｅｔｓ、Ｍａｒｃｅｌ Ｄｅｋｋｅｒ、ＮＹ；Ｌｉｅｂｅｒｍａｎら（編）（１９９
０年）Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｄｏｓａｇｅ Ｆｏｒｍｓ： Ｄｉｓｐｅｒｓｅ
Ｓｙｓｔｅｍｓ、Ｍａｒｃｅｌ Ｄｅｋｋｅｒ、ＮＹ；ＷｅｉｎｅｒおよびＫｏｔｋｏ
ｓｋｉｅ（２０００年）Ｅｘｃｉｐｉｅｎｔ Ｔｏｘｉｃｉｔｙ ａｎｄ Ｓａｆｅｔｙ
、Ｍａｒｃｅｌ Ｄｅｋｋｅｒ， Ｉｎｃ．、Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ、ＮＹを参照されたい。

単独でまたは免疫抑制剤と組み合わせて投与される抗体組成物の毒性および治療効果は
、たとえばＬＤ５０（集団の５０％に対して致死的な用量）およびＥＤ５０（集団の５０
％で治療的に有効な用量）を決定するための、細胞培養物または実験動物での標準的な薬
学の手順によって決定することができる。毒性作用および治療的作用の間の用量比は、治
療指数であり、それは、ＥＤ５０に対するＬＤ５０の比として表現することができる。高
い治療指数を呈する抗体が好ましい。これらの細胞培養アッセイおよび動物研究から得ら
れたデータは、ヒトで使用されるある範囲の投薬量を処方する際に使用することができる
。そのような化合物の投薬量は、好ましくは、ほとんどまたは全く毒性がないＥＤ５０を
含む循環濃度の範囲内にある。投薬量は、用いられる剤形および利用される投与の経路に
依存して、この範囲内で変動してもよい。

投与のモードは、特に重要ではない。投与の適切な経路は、たとえば、経口投与、直腸
投与、経粘膜投与、または腸管投与；筋肉内注射、皮内注射、皮下注射、髄内注射、およ
び鞘内注射、直接脳室内注射、静脈内注射、腹腔内注射、鼻腔内注射、または眼内注射を
含む非経口的送達を含んでいてもよい。医薬組成物中に使用されるまたは本発明の方法を
実施するための抗体の投与は、経口摂取、吸入、局所適用または皮膚注射、皮下注射、腹
腔内注射、非経口的注射、動脈内注射、もしくは静脈内注射などの種々の従来の方法で実
行されてもよい。

あるいは、多くの場合デポー処方物または徐放性処方物で、たとえば、直接、関節炎の
関節または免疫病理によって特徴付けられる病原体誘発性の病巣の中へ、抗体の注射を介
して、全身性の様式よりもむしろ局所性の様式で、抗体を投与してもよい。さらに、標的
薬剤送達系（たとえば、たとえば関節炎の関節または免疫病理によって特徴付けられる病
原体誘発性の病巣を標的とする組織特異的抗体でコートされたリポソーム）で、抗体を投
与してもよい。リポソームは、罹患組織を標的とし、罹患組織によって選択的に取り込ま
れる。

治療剤に対する投与計画の選択は、その実体（ｅｎｔｉｔｙ）の血清代謝回転速度また
は組織代謝回転速度、症状のレベル、その実体の免疫原性、および生物学的マトリックス
中での標的細胞の到達性を含むいくつかの要因に依存する。好ましくは、投与計画は、許
容可能なレベルの副作用と調和した、患者に送達される治療剤の量を最大限にする。した
がって、送達される生物製剤の量は、部分的に、特定の実体および処置されている状態の
重症度に依存する。抗体、サイトカイン、および小分子の適正用量の選択の手引き（ｇｕ
ｉｄａｎｃｅ）が入手可能である。たとえばＷａｗｒｚｙｎｃｚａｋ（１９９６年）Ａｎ
ｔｉｂｏｄｙ Ｔｈｅｒａｐｙ、Ｂｉｏｓ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ Ｐｕｂ． Ｌｔｄ、
Ｏｘｆｏｒｄｓｈｉｒｅ、ＵＫ；Ｋｒｅｓｉｎａ（編）（１９９１年）Ｍｏｎｏｃｌｏｎ
ａｌ Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ， Ｃｙｔｏｋｉｎｅｓ ａｎｄ Ａｒｔｈｒｉｔｉｓ、Ｍ
ａｒｃｅｌ Ｄｅｋｋｅｒ、Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ、ＮＹ；Ｂａｃｈ（編）（１９９３年）Ｍ
ｏｎｏｃｌｏｎａｌ Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ ａｎｄ Ｐｅｐｔｉｄｅ Ｔｈｅｒａｐｙ
ｉｎ Ａｕｔｏｉｍｍｕｎｅ Ｄｉｓｅａｓｅｓ、Ｍａｒｃｅｌ Ｄｅｋｋｅｒ、Ｎｅ
ｗ Ｙｏｒｋ、ＮＹ；Ｂａｅｒｔら（２００３年）Ｎｅｗ Ｅｎｇｌ． Ｊ． Ｍｅｄ．
３４８：６０１〜６０８頁；Ｍｉｌｇｒｏｍら（１９９９年）Ｎｅｗ Ｅｎｇｌ． Ｊ
． Ｍｅｄ． ３４１：１９６６〜１９７３頁；Ｓｌａｍｏｎら（２００１年）Ｎｅｗ
Ｅｎｇｌ． Ｊ． Ｍｅｄ． ３４４：７８３〜７９２頁；Ｂｅｎｉａｍｉｎｏｖｉｔｚ
ら（２０００年）Ｎｅｗ Ｅｎｇｌ． Ｊ． Ｍｅｄ． ３４２：６１３〜６１９頁；Ｇ
ｈｏｓｈら（２００３年）Ｎｅｗ Ｅｎｇｌ． Ｊ． Ｍｅｄ． ３４８：２４〜３２頁
；Ｌｉｐｓｋｙら（２０００年）Ｎｅｗ Ｅｎｇｌ． Ｊ． Ｍｅｄ． ３４３：１５９
４〜１６０２頁を参照されたい。

適正用量の決定は、たとえば、処置に影響することが当技術分野で知られているもしく
は疑われるまたは処置に影響することが予測されるパラメーターまたは因子を使用して、
臨床家によって成される。一般に、用量は、やや最適用量未満の量から始まり、その後、
あらゆる負の副作用と比較して所望または最適の効果が達成されるまで少量ずつ増加させ
ることによって増加する。重要な診断尺度は、たとえば炎症の症状または産生される炎症
性サイトカインのレベルの尺度を含む。好ましくは、使用される生物製剤は、実質的に、
処置の標的とされる動物と同じ種に由来し（たとえば、ヒト被験体の処置のためのヒト化
抗体）、それによって、試薬に対するあらゆる免疫応答を最小限とする。

抗体、抗体断片、およびサイトカインは、連続注入によってまたはたとえば１日、１週
間当たり１〜７回、１週間、２週間、毎月、隔月などの間隔の用量で提供することができ
る。用量は、静脈内に、皮下に、局所に、経口的に、経鼻的に、直腸に、筋肉内に、脳内
に、髄腔内に、または吸入によって提供されてもよい。好ましい用量プロトコルは、著し
い望ましくない副作用を回避する最大用量または最大用量頻度を含むものである。毎週の
用量の合計は、一般に、少なくとも０．０５μｇ／ｋｇ体重、０．２μｇ／ｋｇ体重、０
．５μｇ／ｋｇ体重、１μｇ／ｋｇ体重、１０μｇ／ｋｇ体重、１００μｇ／ｋｇ体重、
０．２ｍｇ／ｋｇ体重、１．０ｍｇ／ｋｇ体重、２．０ｍｇ／ｋｇ体重、１０ｍｇ／ｋｇ
体重、２５ｍｇ／ｋｇ体重、５０ｍｇ／ｋｇ体重、またはそれ以上である。たとえばＹａ
ｎｇら（２００３年）Ｎｅｗ Ｅｎｇｌ． Ｊ． Ｍｅｄ． ３４９：４２７〜４３４頁
；Ｈｅｒｏｌｄら（２００２年）Ｎｅｗ Ｅｎｇｌ． Ｊ． Ｍｅｄ． ３４６：１６９
２〜１６９８頁；Ｌｉｕら（１９９９年）Ｊ． Ｎｅｕｒｏｌ． Ｎｅｕｒｏｓｕｒｇ．
Ｐｓｙｃｈ． ６７：４５１〜４５６頁；Ｐｏｒｔｉｅｌｊｉら（２０００３）Ｃａｎ
ｃｅｒ Ｉｍｍｕｎｏｌ． Ｉｍｍｕｎｏｔｈｅｒ． ５２：１３３〜１４４頁を参照さ
れたい。小分子治療剤、たとえばペプチド模倣物質、天然産物、または有機化学物質の所
望の用量は、モル／ｋｇベースで、抗体またはポリペプチドとほぼ同じである。

本明細書に使用されるように、「阻害する」または「処置する」または「処置」は、自
己免疫疾患もしくは病原体誘発性の免疫病理と関連する症状の発達の遅延および／または
発達するもしくは発達が予想されるような症状の重症度の低下を含む。用語は、既存の制
御されないまたは望まれない、自己免疫に関係するまたは病原体誘発性の免疫病理症状を
改善すること、さらなる症状を防止すること、およびそのような症状の根本的な原因を改
善することもしくは防止することをさらに含む。したがって、その用語は、有益な結果が
、自己免疫性のもしくは病原体誘発性の免疫病理疾患もしくは症状を有するまたはそのよ
うな疾患もしくは症状を発達させる可能性を有する脊椎動物被験体に与えられることを意
味する。

本明細書に使用されるように、用語、「治療有効量（ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃａｌｌｙ
ｅｆｆｅｃｔｉｖｅ ａｍｏｕｎｔ）」または「有効量」は、単独でまたはさらなる治
療薬と組み合わせて細胞、組織、または被験体に投与される場合、自己免疫疾患または病
原体誘発性の免疫病理関連性の疾患もしくは状態またはその疾患の進行を防止するまたは
改善するのに有効である、ＩＬ−２３ｐ１９特異的結合性化合物、たとえば抗体の量を指
す。治療有効用量は、症状の改善、たとえば、関係のある病状の処置、治癒、防止、もし
くは改善またはそのような状態の処置、治癒、防止、もしくは改善の速度の増加をもたら
すのに十分な、化合物のその量をさらに指す。単独で投与される個々の有効成分に適用さ
れる場合、治療有効用量はその成分を単独で指す。組合せに適用される場合、組み合わせ
て、連続的に、または同時に投与されるかどうかに関わらず、治療有効用量は、治療的作
用をもたらす、有効成分の組み合わせられた量を指す。治療剤の有効量は、典型的には少
なくとも１０％、一般に少なくとも２０％、好ましくは、少なくとも約３０％、より好ま
しくは、少なくとも４０％、および最も好ましくは、少なくとも５０％、症状を減少させ
る。

第２の治療薬、たとえばサイトカイン、抗体、ステロイド、化学療法剤、抗生物質、ま
たは放射線との同時投与または同時処置のための方法は、当技術分野でよく知られている
。たとえばＨａｒｄｍａｎら（編）（２００１年）Ｇｏｏｄｍａｎ ａｎｄ Ｇｉｌｍａ
ｎ’ｓ Ｔｈｅ Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａｌ Ｂａｓｉｓ ｏｆ Ｔｈｅｒａｐｅ
ｕｔｉｃｓ、第１０版、ＭｃＧｒａｗ−Ｈｉｌｌ、Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ、ＮＹ；Ｐｏｏｌｅ
およびＰｅｔｅｒｓｏｎ（編）（２００１年）Ｐｈａｒｍａｃｏｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ
ｓ ｆｏｒ Ａｄｖａｎｃｅｄ Ｐｒａｃｔｉｃｅ： Ａ Ｐｒａｃｔｉｃａｌ Ａｐｐ
ｒｏａｃｈ、Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ， Ｗｉｌｌｉａｍｓ ＆ Ｗｉｌｋｉｎｓ、Ｐｈｉ
ｌａ．、ＰＡ；ＣｈａｂｎｅｒおよびＬｏｎｇｏ（編）（２００１年）Ｃａｎｃｅｒ Ｃ
ｈｅｍｏｔｈｅｒａｐｙ ａｎｄ Ｂｉｏｔｈｅｒａｐｙ、Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ， Ｗ
ｉｌｌｉａｍｓ ＆ Ｗｉｌｋｉｎｓ、Ｐｈｉｌａ．、ＰＡを参照されたい。本発明の医
薬組成物はまた、他の免疫抑制剤または免疫調節剤を含有してもよい。抗炎症剤、コルチ
コステロイド、シクロスポリン、タクロリムス（つまりＦＫ−５０６）、シロリムス、イ
ンターフェロン、可溶性サイトカイン受容体（たとえばｓＴＮＲＦおよびｓＩＬ−１Ｒ）
、サイトカイン活性を中和する作用物質（たとえばインフリキシマブ（ｉｎｆｌｉｘｍａ
ｂ）、エタネルセプト）、ミコフェノール酸モフェチル、１５−デオキシスパーガリン、
サリドマイド、グラチラマー、アザチオプリン、レフルノミド、シクロホスファミド、メ
トトレキサートなどを含むが、これらに限定されない任意の適切な免疫抑制剤を用いるこ
とができる。医薬組成物はまた、光線療法および放射線などの他の治療様式と共に用いる
ことができる。

典型的な獣医学的被験体、実験被験体、または研究被験体は、サル、イヌ、ネコ、ラッ
ト、マウス、ウサギ、モルモット、ウマ、およびヒトを含む。
ＶＩＩ．抗体産生
一実施形態では、本発明の抗体の組換え産生のために、２つの鎖をコードする核酸は、
単離され、さらなるクローニング（ＤＮＡの増幅）または発現のために１つまたは複数の
複製可能なベクターの中に挿入される。モノクローナル抗体をコードするＤＮＡは、容易
に単離され、従来の手順を使用して配列決定される（たとえば、抗体の重鎖および軽鎖を
コードする遺伝子に特異的に結合することができるオリゴヌクレオチドプローブを使用す
ることによって）。多くのベクターは入手可能である。ベクター成分は、一般に、１つま
たは複数の次のものを含むが、これらに限定されない：シグナル配列、複製開始点、１つ
または複数のマーカー遺伝子、エンハンサーエレメント、プロモーター、および転写終結
配列。一実施形態では、本発明のヒト化抗ＩＬ−２３ｐ１９抗体の軽鎖および重鎖の両方
は、同じベクター、たとえばプラスミドまたはアデノウイルスベクターから発現される。

本発明の抗体は、当技術分野で知られている任意の方法によって産生されてもよい。一
実施形態では、抗体は、チャイニーズハムスター卵巣（ＣＨＯ）細胞、ヒト胎児由来腎臓
（ＨＥＫ）２９３細胞、マウス骨髄腫ＮＳＯ細胞、ベビーハムスター腎臓（ＢＨＫ）細胞
、Ｓｐｏｄｏｐｔｅｒａ ｆｒｕｇｉｐｅｒｄａ卵巣（Ｓｆ９）細胞などの、培養物中の
哺乳類細胞または昆虫細胞中で発現される。一実施形態では、ＣＨＯ細胞から分泌された
抗体は、回収され、プロテインＡクロマトグラフィー、陽イオン交換クロマトグラフィー
、陰イオン交換クロマトグラフィー、疎水的相互作用クロマトグラフィー、およびヒドロ
キシアパタイトクロマトグラフィーなどの標準的なクロマトグラフ法によって精製される
。結果として生じる抗体は、濃縮され、２０ｍＭ酢酸ナトリウム、ｐＨ５．５中に保存さ
れる。

他の実施形態では、本発明の抗体は、国際公開第２００５／０４０３９５号に記載の方
法に従って酵母中で産生される。手短かに言えば、興味のある抗体の個々の軽鎖または重
鎖をコードするベクターは、異なる酵母半数体細胞、たとえば、異なる交配型の酵母Ｐｉ
ｃｈｉａ ｐａｓｔｏｒｉｓの中に導入される。これらの酵母半数体細胞は、任意選択で
、相補的な栄養素要求株である。次いで、形質転換された半数体酵母細胞は、交配してま
たは融合して、重鎖および軽鎖の両方を産生することができる二倍体酵母細胞を生じ得る
。二倍体系統は、次いで、完全に構築された生物学的活性抗体を分泌することができる。
２つの鎖の相対的な発現レベルは、たとえば、異なるコピー数を有するベクターを使用す
ること、異なる強度の転写プロモーターを使用すること、または一方もしくは両方の鎖を
コードする遺伝子の転写を駆動する誘発性のプロモーターからの発現を誘発することによ
って最適化することができる。

一実施形態では、複数の異なる抗ＩＬ−２３ｐ１９抗体（「元の」抗体）の各重鎖およ
び軽鎖は、酵母半数体細胞の中に導入されて、複数の軽鎖を発現する一方の交配型の半数
体酵母系統のライブラリーおよび複数の重鎖を発現する異なる交配型の半数体酵母系統の
ライブラリーを作り出す。半数体系統のこれらのライブラリーは、交配して（またはスフ
ェロプラストとして融合して）、様々な可能性のある順列の軽鎖および重鎖から構成され
る抗体のコンビナトリアルライブラリーを発現する一連の二倍体酵母細胞を産生すること
ができる。次いで、抗体のコンビナトリアルライブラリーは、抗体のいずれかが、元の抗
体の特性よりも優れた特性（たとえばＩＬ−２３に対するより高い親和性）を有するかど
うか決定するためにスクリーニングすることができる。たとえば国際公開第２００５／０
４０３９５号を参照されたい。

他の実施形態では、本発明の抗体は、抗体可変ドメインの部分が、分子量約１３ｋＤａ
のポリペプチド中で連結されているヒトドメイン抗体である。たとえば、米国特許公開第
２００４／０１１０９４１号を参照されたい。そのような単一ドメイン低分子量作用物質
は、合成の容易性、安定性、および投与の経路の点から多数の利点を提供する。
ＶＩＩＩ．使用
本発明は、たとえば中枢神経系、末梢神経系、および胃腸管の炎症性障害および炎症性
状態ならびに自己免疫障害および増殖障害の処置ならびに診断のための、操作された抗Ｉ
Ｌ−２３抗体およびその断片を使用するための方法を提供する。

方法は、たとえば再発寛解型ＭＳおよび原発性進行性ＭＳを含む多発性硬化症（ＭＳ）
、アルツハイマー病、筋萎縮性側索硬化症（別名ＡＬＳ；ルー ゲーリック病）、虚血性
脳傷害、プリオン病、およびＨＩＶ関連認知症の処置のために提供される。神経障害性疼
痛、外傷後ニューロパシー、ギラン−バレー症候群（ＧＢＳ）、末梢多発性神経障害、お
よび神経再生を処置するための方法もまた提供される。

多発性硬化症または神経系の他の炎症性障害もしくは炎症性状態の１つまたは複数の以
下の特徴、症状、側面、所見、または徴候を処置するまたは改善するための方法が提供さ
れる：脳病変、ミエリン病変、脱髄、脱髄斑、視覚障害、バランスまたは協調の喪失、痙
縮、感覚障害、失禁、疼痛、脱力、疲労、麻痺、認知障害、精神緩徐、複視、視神経炎、
感覚異常、歩行失調、疲労、ウートッフ症状（Ｕｈｔｏｆｆ’ｓ ｓｙｍｐｔｏｍ）、神
経痛、失語症、失行症、痙攣、視野損失、認知症、錐体外路系の徴候、うつ病、健康感ま
たは他の情緒的症状、慢性進行性ミエロパシー、およびガドリニウム増強病変を含む、磁
気共鳴画像法（ＭＲＩ）によって検出される症状、誘発電位記録によって検出される症状
、または脳脊髄液の検査によって検出される症状。たとえばＫｅｎｅａｌｙら（２００３
年）Ｊ． Ｎｅｕｒｏｉｍｍｕｎｏｌ． １４３：７〜１２頁；Ｎｏｓｅｗｏｒｔｈｙら
（２０００年）Ｎｅｗ Ｅｎｇｌ． Ｊ． Ｍｅｄ． ３４３：９３８〜９５２頁；Ｍｉ
ｌｌｅｒら（２００３年）Ｎｅｗ Ｅｎｇｌ． Ｊ． Ｍｅｄ． ３４８：１５〜２３頁
；Ｃｈａｎｇら（２００２年）Ｎｅｗ Ｅｎｇｌ． Ｊ． Ｍｅｄ． ３４６：１６５〜
１７３頁；ＢｒｕｃｋおよびＳｔａｄｅｌｍａｎｎ（２００３年）Ｎｅｕｒｏｌ． Ｓｃ
ｉ． ２４ 増刊５：Ｓ２６５〜Ｓ２６７頁を参照されたい。

その上、本発明は、炎症性腸障害、たとえばクローン病、潰瘍性大腸炎、セリアック病
、および過敏性腸症候群を処置するおよび診断するための方法を提供する。炎症性腸障害
の１つまたは複数の以下の症状、側面、所見、または徴候を処置するまたは改善するため
の方法が提供される：食物の吸収不良、腸運動性の変化、感染症、発熱、腹痛、下痢、直
腸出血、体重減少、栄養失調の徴候、肛門周囲の疾患、腹部塊、および成長不全、ならび
に狭窄、フィステル、中毒性巨大結腸症、穿孔、および癌などの腸管合併症、ならびに脆
弱性、アフタ性潰瘍、および線状潰瘍などの内視鏡的な知見、敷石状外観、偽ポリープ、
ならびに直腸合併症、および加えて抗酵母抗体を含む。たとえばＰｏｄｏｌｓｋｙ、前掲
；Ｈａｎａｕｅｒ、前掲；ＨｏｒｗｉｔｚおよびＦｉｓｈｅｒ、前掲を参照されたい。

乾癬、アトピー性皮膚炎、関節リウマチ、骨関節炎、および乾癬性関節炎を含む関節炎
などの炎症性障害、全身性エリテマトーデスおよびＩ型糖尿病などの自己免疫障害、なら
びに癌などの増殖障害の処置もまた企図される。たとえばＰＣＴ特許出願国際公開第０４
／０８１１９０号；国際公開第０４／０７１５１７号；国際公開第００／５３６３１号；
および国際公開第０１／１８０５１号を参照されたい。

本発明のＩＬ−２３ｐ１９結合性化合物はまた、ＩＬ−１７Ａ、ＩＬ−１７Ｆ、ＩＬ−
１β、ＩＬ−６、およびＴＧＦ−βを含むが、これらに限定されない他のサイトカインの
１つまたは複数のアンタゴニスト（たとえば抗体）と組み合わせて使用することができる
。たとえばＶｅｌｄｈｏｅｎ（２００６年）Ｉｍｍｕｎｉｔｙ ２４：１７９〜１８９頁
；Ｄｏｎｇ（２００６年）Ｎａｔ． Ｒｅｖ． Ｉｍｍｕｎｏｌ． ６（４）：３２９〜
３３３頁を参照されたい。種々の実施形態では、本発明のＩＬ−２３ｐ１９結合性化合物
は、抗−ＩＬ−１７Ａ抗体などの１つまたは複数の他のアンタゴニストの投与の前に、そ
れと同時に、またはその投与の後に投与される。一実施形態では、ＩＬ−１７Ａ結合性化
合物は、有害な免疫応答（たとえばＭＳ、クローン病）の急性初期の処置で、単独でまた
は本発明のＩＬ−２３アンタゴニスト抗体と組み合わせて使用される。後者の場合では、
ＩＬ−１７Ａ結合性化合物は、徐々に減少させてもよく、ＩＬ−２３のアンタゴニストを
単独で用いる処置は、有害な応答の抑制を維持するために継続される。あるいは、ＩＬ−
１β、ＩＬ−６、および／またはＴＧＦ−βに対するアンタゴニストは、本発明のＩＬ−
２３ｐ１９結合性化合物の前にまたはその後に同時に投与されてもよい。ＣｕａおよびＫ
ａｓｔｅｌｅｉｎ（２００６年）Ｎａｔ． Ｉｍｍｕｎｏｌ． ７：５５７〜５５９頁；
ＴａｔｏおよびＯ’Ｓｈｅａ（２００６年）Ｎａｔｕｒｅ ４４１：１６６〜１６８頁；
ＩｗａｋｕｒａおよびＩｓｈｉｇａｍｅ（２００６年）Ｊ． Ｃｌｉｎ． Ｉｎｖｅｓｔ
． １１６：１２１８〜１２２２頁を参照されたい。

広範囲の本発明は、以下の実施例に関して最も理解され、これらは、本発明を特定の実
施形態に限定することを意図するものではない。本明細書に記載の特定の実施形態は、た
だ例の目的で提示され、本発明は、添付される特許請求の範囲が権利を与えられる全範囲
の等価物と共に、添付される特許請求の範囲の用語によって限定されるものとする。

（実施例１）
一般的な方法
分子生物学における標準的な方法を記載する。Ｍａｎｉａｔｉｓら、（１９８２年）Ｍ
ｏｌｅｃｕｌａｒ Ｃｌｏｎｉｎｇ、Ａ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｍａｎｕａｌ、Ｃｏｌ
ｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｐｒｅｓｓ、Ｃｏｌｄ Ｓｐ
ｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ、ＮＹ；Ｓａｍｂｒｏｏｋ ａｎｄ Ｒｕｓｓｅｌｌ（２００１
年）Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｃｌｏｎｉｎｇ、第３版、Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂ
ｏｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｐｒｅｓｓ、Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ、Ｎ
Ｙ；Ｗｕ（１９９３年）Ｒｅｃｏｍｂｉｎａｎｔ ＤＮＡ、第２１７巻、Ａｃａｄｅｍｉ
ｃ Ｐｒｅｓｓ、Ｓａｎ Ｄｉｅｇｏ、ＣＡ。標準的な方法はＡｕｓｂｅｌら、（２００
１年）Ｃｕｒｒｅｎｔ Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ ｉｎ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇ
ｙ、第１〜４巻、Ｊｏｈｎ Ｗｉｌｅｙ ａｎｄ Ｓｏｎｓ、Ｉｎｃ．Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ
、ＮＹ中にも載っており、これは細菌細胞におけるクローニングおよびＤＮＡ変異誘発（
第１巻）、哺乳動物細胞および酵母におけるクローニング（第２巻）、複合糖質およびタ
ンパク質発現（第３巻）、およびバイオインフォマティクス（第４巻）を記載している。

免疫沈降、クロマトグラフィー、電気泳動、遠心分離、および結晶化を含めたタンパク
質精製のための方法を記載する。Ｃｏｌｉｇａｎら、（２０００年）Ｃｕｒｒｅｎｔ Ｐ
ｒｏｔｏｃｏｌｓ ｉｎ Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｓｃｉｅｎｃｅ、第１巻、Ｊｏｈｎ Ｗｉｌ
ｅｙ ａｎｄ Ｓｏｎｓ、Ｉｎｃ．、Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ。化学分析、化学修飾、翻訳後修
飾、融合タンパク質の生成、タンパク質のグリコシル化を記載する。たとえば、Ｃｏｌｉ
ｇａｎら、（２０００年）Ｃｕｒｒｅｎｔ Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ ｉｎ Ｐｒｏｔｅｉｎ
Ｓｃｉｅｎｃｅ、第２巻、Ｊｏｈｎ Ｗｉｌｅｙ ａｎｄ Ｓｏｎｓ、Ｉｎｃ．、Ｎｅ
ｗ Ｙｏｒｋ；Ａｕｓｕｂｅｌら、（２００１年）Ｃｕｒｒｅｎｔ Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ
ｉｎ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ、第３巻、Ｊｏｈｎ Ｗｉｌｅｙ ａｎｄ
Ｓｏｎｓ、Ｉｎｃ．、ＮＹ、ＮＹ、１６．０．５〜１６．２２．１７頁；Ｓｉｇｍａ−
Ａｌｄｒｉｃｈ、Ｃｏ．（２００１年）Ｐｒｏｄｕｃｔｓ ｆｏｒ Ｌｉｆｅ Ｓｃｉｅ
ｎｃｅ Ｒｅｓｅａｒｃｈ、Ｓｔ．Ｌｏｕｉｓ、ＭＯ；４５〜８９頁；Ａｍｅｒｓｈａｍ
Ｐｈａｒｍａｃｉａ Ｂｉｏｔｅｃｈ（２００１年）ＢｉｏＤｉｒｅｃｔｏｒｙ、Ｐｉ
ｓｃａｔａｗａｙ、Ｎ．Ｊ．３８４〜３９１頁を参照。ポリクローナルおよびモノクロー
ナル抗体の産生、精製、および断片化を記載する。Ｃｏｌｉｇａｎら、（２００１年）Ｃ
ｕｒｒｅｎｔ Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ ｉｎ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ、第１巻、Ｊｏｈｎ
Ｗｉｌｅｙ ａｎｄ Ｓｏｎｓ、Ｉｎｃ．、Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ；Ｈａｒｌｏｗ ａｎｄ
Ｌａｎｅ（１９９９年）Ｕｓｉｎｇ Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ、Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ
Ｈａｒｂｏｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｐｒｅｓｓ、Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂ
ｏｒ、ＮＹ； Ｈａｒｌｏｗ ａｎｄ Ｌａｎｅ、上記。リガンド／受容体相互作用を特
徴付けするための標準的な技法が利用可能である。たとえば、Ｃｏｌｉｇａｎら、（２０
０１年）Ｃｕｒｒｅｎｔ Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ ｉｎ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ、第４巻、
Ｊｏｈｎ Ｗｉｌｅｙ Ｉｎｃ．、Ｎｅｗ Ｙｏｒｋを参照。

蛍光標識細胞分取（ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅ ａｃｔｉｖａｔｅｄ ｃｅｌｌ ｓｏ
ｒｔｉｎｇ）検出システム（ＦＡＣＳ（登録商標））を含めた、フローサイトメトリーの
ための方法が利用可能である。たとえば、Ｏｗｅｎｓら、（１９９４年）Ｆｌｏｗ Ｃｙ
ｔｏｍｅｔｒｙ Ｐｒｉｎｃｉｐｌｅｓ ｆｏｒ Ｃｌｉｎｉｃａｌ Ｌａｂｏｒａｔｏ
ｒｙ Ｐｒａｃｔｉｃｅ、Ｊｏｈｎ Ｗｉｌｅｙ ａｎｄ Ｓｏｎｓ、Ｈｏｂｏｋｅｎ、
ＮＪ；Ｇｉｖａｎ（２００１年）Ｆｌｏｗ Ｃｙｔｏｍｅｔｒｙ、第２版；Ｗｉｌｅｙ−
Ｌｉｓｓ、Ｈｏｂｏｋｅｎ、ＮＪ；Ｓｈａｐｉｒｏ（２００３年）Ｐｒａｃｔｉｃａｌ
Ｆｌｏｗ Ｃｙｔｏｍｅｔｒｙ、Ｊｏｈｎ Ｗｉｌｅｙ ａｎｄ Ｓｏｎｓ、Ｈｏｂｏｋ
ｅｎ、ＮＪ中を参照。たとえば診断用試薬として使用するための、核酸プライマーおよび
プローブ、ポリペプチド、および抗体を含めた核酸を改変するのに適した蛍光試薬が利用
可能である。Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｐｒｏｂｅｓ（２００３年）Ｃａｔａｌｏｇｕｅ、Ｍ
ｏｌｅｃｕｌａｒ Ｐｒｏｂｅｓ、Ｉｎｃ．、Ｅｕｇｅｎｅ、ＯＲ；Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄ
ｒｉｃｈ（２００３年）Ｃａｔａｌｏｇｕｅ、Ｓｔ．Ｌｏｕｉｓ、ＭＯ。

免疫系の組織学の標準的な方法を記載する。たとえば、Ｍｕｌｌｅｒ−Ｈａｒｍｅｌｉ
ｎｋ（ｅｄ．）（１９８６年）Ｈｕｍａｎ Ｔｈｙｍｕｓ：Ｈｉｓｔｏｐａｔｈｏｌｏｇ
ｙ ａｎｄ Ｐａｔｈｏｌｏｇｙ、Ｓｐｒｉｎｇｅｒ Ｖｅｒｌａｇ、Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ
、ＮＹ；Ｈｉａｔｔら、（２０００年）Ｃｏｌｏｒ Ａｔｌａｓ ｏｆ Ｈｉｓｔｏｌｏ
ｇｙ、Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ、Ｗｉｌｌｉａｍｓ、ａｎｄ Ｗｉｌｋｉｎｓ、Ｐｈｉｌａ
、ＰＡ；Ｌｏｕｉｓら、（２００２年）Ｂａｓｉｃ Ｈｉｓｔｏｌｏｇｙ：Ｔｅｘｔ ａ
ｎｄ Ａｔｌａｓ、ＭｃＧｒａｗ−Ｈｉｌｌ、Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ、ＮＹを参照。

たとえば抗原断片、リーダー配列、タンパク質フォールディング、機能性ドメイン、グ
リコシル化部位、および配列アラインメントを決定するための、ソフトウェアパッケージ
およびデータベースが利用可能である。たとえば、ＧｅｎＢａｎｋ、Ｖｅｃｔｏｒ ＮＴ
Ｉ（登録商標）Ｓｕｉｔｅ（Ｉｎｆｏｒｍａｘ、Ｉｎｃ、Ｂｅｔｈｅｓｄａ、ＭＤ）；Ｇ
ＣＧ Ｗｉｓｃｏｎｓｉｎ Ｐａｃｋａｇｅ（Ａｃｃｅｌｒｙｓ、Ｉｎｃ．、Ｓａｎ Ｄ
ｉｅｇｏ、ＣＡ）；ＤｅＣｙｐｈｅｒ（登録商標）（ＴｉｍｅＬｏｇｉｃＣｒｏｐ．、Ｃ
ｒｙｓｔａｌ Ｂａｙ、Ｎｅｖａｄａ）；Ｍｅｎｎｅら、（２０００年）Ｂｉｏｉｎｆｏ
ｒｍａｔｉｃｓ １６：７４１〜７４２頁；Ｍｅｎｎｅら、（２０００年）Ｂｉｏｉｎｆ
ｏｒｍａｔｉｃｓ Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ Ｎｏｔｅ １６：７４１〜７４２頁；Ｗ
ｒｅｎら、（２００２年）Ｃｏｍｐｕｔ．Ｍｅｔｈｏｄｓ Ｐｒｏｇｒａｍｓ Ｂｉｏｍ
ｅｄ． ６８：１７７〜１８１頁；ｖｏｎ Ｈｅｉｊｎｅ（１９８３年）Ｅｕｒ．Ｊ．Ｂ
ｉｏｃｈｅｍ． １３３：１７〜２１頁；ｖｏｎ Ｈｅｉｊｎｅ（１９８６年）Ｎｕｃｌ
ｅｉｃ Ａｃｉｄｓ Ｒｅｓ． １４：４６８３〜４６９０頁を参照。

（実施例２）
抗ヒトＩＬ−２３ｐ１９抗体の作製およびヒト化
抗ヒトＩＬ−２３ｐ１９抗体を、キメラＩＬ−２３（ヒトｐ１９：マウスｐ４０）でＩ
Ｌ−２３ｐ１９ノックアウトマウスを免疫処置することによって作製した。モノクローナ
ル抗体は標準的な方法によって調製した。

マウス抗体１３Ｂ８（マウスＩｇＧ１／カッパ）の可変ドメインのヒト化は、本質的に
ＰＣＴ特許出願国際公開第２００５／０４７３２４号および国際公開第２００５／０４７
３２６号中に記載されたように実施した。

簡単に言うと、抗体１３Ｂ８の非ヒトＶＨドメインのアミノ酸配列を、５つのヒトＶＨ
生殖細胞系列アミノ酸配列の群；亜群ＩＧＨＶ１およびＩＧＨＶ４由来の１つの代表的配
列、および亜群ＩＧＨＶ３由来の３つの代表的配列と比較した。ＶＨ亜群は、Ｍ．−Ｐ．
Ｌｅｆｒａｎｃ（２００１年）「Ｎｏｍｅｎｃｌａｔｕｒｅ ｏｆ ｔｈｅ Ｈｕｍａｎ
Ｉｍｍｕｎｏｇｌｏｂｕｌｉｎ Ｈｅａｖｙ（ＩＧＨ）Ｇｅｎｅｓ」、Ｅｘｐｅｒｉｍ
ｅｎｔａｌ ａｎｄ Ｃｌｉｎｉｃａｌ Ｉｍｍｕｎｏｇｅｎｅｔｉｃｓ １８：１００
〜１１６頁中に記載されている。抗体１３Ｂ８は、亜群ＶＨ１中でヒト重鎖生殖細胞系列
ＤＰ−１４に対して最高値を記録した。

抗体１３Ｂ８のＶＬ配列は、ＶＬのカッパサブクラスの配列である。非ヒトＶＬドメイ
ンのアミノ酸配列を、４つのヒトＶＬカッパ生殖細胞系列アミノ酸配列の群と比較した。
４つの群は、Ｖ．Ｂａｒｂｉｅ ａｎｄ Ｍ．−Ｐ．Ｌｅｆｒａｎｃ（１９９８年）「Ｔ
ｈｅ Ｈｕｍａｎ Ｉｍｍｕｎｏｇｌｏｂｕｌｉｎ Ｋａｐｐａ Ｖａｒｉａｂｌｅ（Ｉ
ＧＫＶ）Ｇｅｎｅｓ ａｎｄ Ｊｏｉｎｉｎｇ（ＩＧＫＪ）Ｓｅｇｍｅｎｔｓ」、Ｅｘｐ
ｅｒｉｍｅｎｔａｌ ａｎｄ Ｃｌｉｎｉｃａｌ Ｉｍｍｕｎｏｇｅｎｅｔｉｃｓ １５
：１７１〜１８３頁およびＭ．−Ｐ．Ｌｅｆｒａｎｃ（２００１年）「Ｎｏｍｅｎｃｌａ
ｔｕｒｅ ｏｆ ｔｈｅ Ｈｕｍａｎ Ｉｍｍｕｎｏｇｌｏｂｕｌｉｎ Ｋａｐｐａ（Ｉ
ＧＫ）Ｇｅｎｅｓ」、Ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ ａｎｄ Ｃｌｉｎｉｃａｌ Ｉｍｍｕ
ｎｏｇｅｎｅｔｉｃｓ １８：１６１〜１７４頁中に記載された４つの確立したヒトＶＬ
亜群の各々からの代表的な１つを構成する。４つの亜群は、Ｋａｂａｔら（１９９１年、
第５版）「Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ ｏｆ Ｐｒｏｔｅｉｎｓ ｏｆ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉ
ｃａｌ Ｉｎｔｅｒｅｓｔ」、米国保健社会福祉省、ＮＩＨ Ｐｕｂ．９１−３２４２、
１０３〜１３０頁中に記載された４つの亜群にも対応する。抗体１３Ｂ８は、亜群ＶＬｋ
Ｉ中でヒト軽鎖生殖細胞系列Ｚ−０１２に対して最高値を記録した。

追加的なアミノ酸置換を、前掲で論じ配列番号２４〜２６で開示するようにＣＤＲＨ２
に施した。ヒト化１３Ｂ８重鎖および軽鎖可変ドメインを、それぞれヒトγ１（ＩｇＧ１
）重鎖定常ドメインおよびカッパ軽鎖定常ドメインをコードするベクターにクローニング
した。生成したヒト化１３Ｂ８抗体（ＩｇＧ１／カッパ）はヒトおよびカニクイザルＩＬ
−２３と結合するが、ヒトＩＬ−１２、ヒトｐ４０またはマウスＩＬ−２３とは結合しな
い。

可変重鎖および軽鎖の標的アミノ酸配列を決定した後、完全長ヒト化抗体をコードする
プラスミドを作製することができる。プラスミド配列はＫｕｎｋｅｌ変異誘発（Ｋｕｎｋ
ｅｌ（１９８５年）Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．Ｕ．Ｓ．Ａ ８２：４８８
〜４９２頁）を使用して、ＤＮＡ配列を変更して標的ヒト化抗体配列に変えることができ
る。同時に、コドン最適化を実施して可能で最適な発現をもたらすことができる。

本明細書に開示するヒト化型の他の抗体は、ヒト化１３Ｂ８抗体に関して開示するヒト
フレームワークを置換することによって、または本実施例中に開示する方法により最良ヒ
トフレームワークを選択するための手順を反復することによって構築することができる。
ヒト化抗体１３Ｂ８の一部としての本明細書に開示するヒトフレームワークの置換は、１
３Ｂ８と同様のＣＤＲ配列を有する抗体に最も適している。

（実施例３）
ＫｉｎＥｘＡ技術を使用したヒト化抗ヒトＩＬ−２３に関する平衡解離定数（Ｋｄ）の
決定
抗ヒトＩＬ−２３抗体に関する平衡解離定数（Ｋｄ）を、ＫｉｎＥｘ３０００機器を使
用して決定する。Ｓａｐｉｄｙｎｅ Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ Ｉｎｃ．、Ｂｏｉｓｅ
Ｉｄａｈｏ、ＵＳＡ．ＫｉｎＥｘＡは、抗体、抗原および抗体−抗原複合体の混合物中で
複合体を形成していない抗体の濃度の測定に基づいた結合平衡除外（ｋｉｎｅｔｉｃ ｅ
ｘｃｌｕｓｉｏｎ）アッセイ法の原理を使用する。遊離抗体の濃度は、非常に短い時間の
間、固相固定化抗原に混合物を曝すことによって測定する。実際、溶液相の抗原−抗体混
合物をフローセル中に流し抗原コート粒子（ａｎｔｉｇｅｎ−ｃｏａｔｅｄ ｐａｒｔｉ
ｃｌｅ）を通して捕捉することによってこれを実施する。この機器によって作製したデー
タは、カスタムソフトウェアを使用して分析する。平衡定数は、以下の仮定に基づく数学
的理論を使用して計算する：
１．結合は、平衡に関する可逆的結合の等式に従う：
ｋｏｎ［Ａｂ］［Ａｇ］＝ｋｏｆｆ［ＡｂＡｇ］
２．抗体と抗原は１：１で結合し、かつ全抗体は抗原−抗体複合体および遊離抗体に等
しい
３．機器シグナルは、遊離抗体の濃度と直線的関係がある。

９８ミクロンのＰＭＭＡ粒子（Ｓａｐｉｄｙｎｅ、カタログ番号４４０１９８）を、Ｓ
ａｐｉｄｙｎｅの「Ｐｒｏｔｏｃｏｌ ｆｏｒ ｃｏａｔｉｎｇ ＰＭＭＡ ｐａｒｔｉ
ｃｌｅｓ ｗｉｔｈ ｂｉｏｔｉｎｙｌａｔｅｄ ｌｉｇａｎｄｓ ｈａｖｉｎｇ ｓｈ
ｏｒｔ ｏｒ ｎｏｎｅｘｉｓｔｅｎｔ ｌｉｎｋｅｒ ａｒｍｓ」に従って、ビオチン
化ＩＬ−２３でコートする。この実験では、ビオチン化ＩＬ−２３はマウスＩＬ−１２ｐ
４０とヒトＩＬ−２３ｐ１９の複合体を含む。ＥＺ−リンクＴＦＰ ＰＥＯ−ビオチン（
Ｐｉｅｒｃｅ、カタログ番号２１２１９）を使用して、製造者の推奨（Ｐｉｅｒｃｅ会報
０８７４）に従ってビオチン化ＩＬ−２３を作製する。すべての実験手順は、ＫｉｎＥｘ
Ａ３０００のマニュアルに従って行う。

抗ＩＬ−２３ｐ１９抗体の結合は競合結合アッセイにおいて評価し、その中で抗体は、
一連の濃度で、２つのジスルフィド結合鎖、ヒトｐ１９（配列番号４７）およびヒトｐ４
０（ＧｅｎＢａｎｋアクセッション番号Ｐ２９４６０）を含む非結合（天然）ヒトＩＬ−
２３と共にプレインキュベートする。非結合抗体とＩＬ−２３結合抗体の混合物を含む生
成したサンプルは、次いで前段落中に記載したｒｈＩＬ−２３（「ｅｌａｓｔｉｋｉｎｅ
」）ＰＭＭＡ粒子の一面に流す。次いでＰＭＭＡ粒子によって捕捉された抗体の量を、蛍
光標識した二次抗体を使用して検出する。

表３は、各抗体に関する反復測定を含めた、ＫｉｎＥｘＡ分析の結果を示す。

（実施例４）
ＢＩＡｃｏｒｅ技術を使用したヒト化抗ヒトＩＬ−２３ｐ１９抗体に関する平衡解離定
数（Ｋｄ）の決定
ＢＩＡｃｏｒｅ測定は、本質的に同一譲渡人に譲渡された米国特許出願公開第２００７
／００４８３１５号の実施例４に記載されたように実施する。簡単に言うと、リガンド（
抗ＩＬ−２３モノクローナル抗体）を、標準的なアミンカップリング手順を使用してＢＩ
ＡｃｏｒｅＣＭ５センサーチップに固定する。ＩＬ−２３をＰＢＳに希釈して様々な濃度
を生成する。様々な相互作用に関する運動定数（ｋｉｎｅｔｉｃ ｃｏｎｓｔａｎｔ）を
、ＢＩＡ評価ソフトウェア（ＢＩＡｅｖａｌｕａｔｉｏｎ ｓｏｆｔｗａｒｅ）３．１を
使用して決定する。Ｋｄは計算した解離および会合速度定数を使用して決定する。

表４は、反復測定を含めた、ＢＩＡｃｏｒｅによって決定したＫｄ値を与える。

（実施例５）
抗ＩＬ−２３抗体の中和を評価するための増殖バイオアッセイ
ＩＬ−２３を生物学的に中和するモノクローナル抗体の能力を、組換えＩＬ−２３受容
体を発現する細胞を使用する短期の増殖バイオアッセイの適用によって評価した。ＩＬ−
２３Ｒトランスフェクタント細胞系列（Ｂａ／Ｆ３−２．２ｌｏ−ｈＩＬ−２３Ｒ）はｈ
ＩＬ−２３とｈＩＬ−１２Ｒβ１の両方を発現し、ヒトＩＬ−２３とカニクイザルＩＬ−
２３の両方に対して応答性がある。トランスフェクタントＢａ／Ｆ３−２．２ｌｏ細胞は
ヒトＩＬ−２３に応答して増殖し、かつ応答は中和抗ＩＬ−２３抗体によって阻害され得
る。抗体は、用量応答曲線の直線領域内、プラトー付近およびＥＣ５０を超える選択した
ＩＬ−２３の濃度で滴定する。増殖、またはその欠如は、アラマーブルー（ａｌａｍａｒ
ｂｌｕｅ）、代謝活性の検出に基づく増殖指標色素を使用する、比色分析手段によって
測定する。ＩＬ−２３を中和する抗体の能力は、そのＩＣ５０値、またはＩＬ−２３増殖
の半最大阻害を誘導する抗体の濃度によって評価する。

Ｂａ／Ｆ３トランスフェクタントは、ＲＰＭＩ−１６４０培地、１０％ウシ胎児血清、
５０μＭの２−メルカプトエタノール、２ｍＭのＬ−グルタミン、５０μｇ／ｍＬのペニ
シリン−ストレプトマイシン、および１０ｎｇ／ｍＬのマウスＩＬ−３中に維持する。Ｂ
ａ／Ｆ３増殖バイオアッセイは、ＲＰＭＩ−１６４０培地、１０％ウシ胎児血清、５０μ
Ｍの２−メルカプトエタノール、２ｍＭのＬ−グルタミン、および５０μｇ／ｍＬのペニ
シリン−ストレプトマイシン中で実施する。

手順
ウェル当たり１５０μＬで９６ウェルの平底プレート（Ｆａｌｃｏｎ３０７２または同
様のもの）においてアッセイを実施する。抗ＩＬ−２３抗体は３０〜６０分間ＩＬ−２３
と共にプレインキュベートし、次に細胞を加え、４０〜４８時間インキュベートする。ア
ラマーブルー（Ｂｉｏｓｏｕｒｃｅカタログ番号ＤＡＬ１１００）を加え、５〜１２時間
放置して発色させる。次いで吸光度を５７０ｎｍおよび６００ｎｍで読み取り（ＶＥＲＳ
Ａｍａｘマイクロプレートリーダー、Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｐｒｏｂｅｓ、Ｅｕｇｅｎｅ
、Ｏｒｅｇｏｎ、ＵＳＡ）、かつＯＤ５７０−６００を得る。

細胞は一般に３〜８×１０５／ｍＬの密度で、健康な増殖状態で使用する。細胞を計数
し、ペレット状にし、バイオアッセイ培地中で２回洗浄し、かつ平板培養に適した密度に
懸濁する。ＩＬ−２３の用量応答は、ＩＬ−２３の連続１：３希釈（２５：５０μＬ、バ
イオアッセイ培地中）を使用して実施する。３ｎｇ／ｍｌ（５０ｐＭ）のＩＬ−２３濃度
を、抗体アッセイ中で使用するために選択する。中和抗体の用量応答も、連続１：３希釈
（２５：５０μＬ、バイオアッセイ培地中）を使用して実施する。

ＩＣ５０値はＧｒａｐｈＰａｄ Ｐｒｉｓｍ（登録商標）３．０ソフトウェア（Ｇｒａ
ｐｈＰａｄ Ｓｏｆｔｗａｒｅ Ｉｎｃ．、Ｓａｎ Ｄｉｅｇｏ、Ｃａｌｉｆｏｒｎｉａ
、ＵＳＡ）を使用して決定し、その中では吸光度をサイトカインまたは抗体濃度に対して
プロットし、かつＩＣ５０値はＳ字状（ｓｉｇｍｏｉｄａｌ）用量応答曲線の非線形回帰
（曲線の当てはめ）を使用して決定する。

表５は、抗ＩＬ−２３ｐ１９抗体によるＢａ／Ｆ３細胞増殖の遮断に関するＩＣ５０値
を示す。いくつかの抗体の多重測定の値を含む。

（実施例６）
ＩＬ−１７産生に基づくＩＬ−２３に関するマウス脾細胞アッセイ
本発明の抗ＩＬ−２３ｐ１９抗体の生物学的活性を、本質的にＡｇｇａｒｗａｌら、（
２００３年）Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２７８：１９１０頁およびＳｔｕｍｈｏｆｅｒら
、（２００６年）Ｎａｔｕｒｅ Ｉｍｍｕｎｏｌ． ７：９３７頁中に記載されたように
、脾細胞アッセイを使用して評価する。このマウス脾細胞アッセイは、マウス脾細胞によ
るＩＬ−１７産生のレベルとしてサンプル中のＩＬ−２３の活性を測定する。次いで抗Ｉ
Ｌ−２３ｐ１９抗体の阻害活性を、所与のサンプル中のＩＬ−２３の活性を５０％低下さ
せるのに必要な抗体の濃度（ＩＣ５０）を決定することによって評価する。このアッセイ
によって測定したようにＩＣ５０は平衡解離結合定数（Ｋｄ）以上である、すなわち、Ｋ
ｄはＩＣ５０以下であり得る。通常通り、より低いＩＣ５０およびＫｄ値はより高い活性
および親和性を反映する。

簡単に言うと、８〜１２週齢の雌性Ｃ５７ＢＬ／６Ｊマウス（Ｊａｃｋｓｏｎ Ｌａｂ
ｏｒａｔｏｒｉｅｓ、Ｂａｒ Ｈａｒｂｏｒ、Ｍａｉｎｅ、ＵＳＡ）から脾臓を得る。脾
臓を砕き、２回ペレット状にし、かつ細胞濾過器（７０μｍナイロン製）を通して濾過す
る。回収した細胞は、ヒトＩＬ−２３（１０ｎｇ／ｍｌ、約１７０ｐＭ）およびマウス抗
ＣＤ３ｅ抗体（１μｇ／ｍｌ）（ＢＤ Ｐｈａｒｍｉｎｇｅｎ、Ｆｒａｎｋｌｉｎ Ｌａ
ｋｅｓ、Ｎｅｗ Ｊｅｒｓｅｙ、ＵＳＡ）の存在下で、アッセイする抗ＩＬ−２３ｐ１９
抗体有りまたはなしで、９６ウェルプレート中において培養する（４×１０５個細胞／ウ
ェル）。抗ＩＬ−２３ｐ１９抗体は、１０μｇ／ｍｌおよび一連の３倍希釈で加える。細
胞は７２時間培養し、ペレット状にし、かつ上清はサンドウィッチＥＬＩＳＡによりＩＬ
−１７のレベルに関してアッセイする。

ＩＬ−１７のＥＬＩＳＡは以下のように実施する。プレートは捕捉抗ＩＬ−１７抗体（
１００ｎｇ／ウェル）で４℃において一晩コートし、洗浄およびブロッキングする。サン
プルおよび標準物を加え、振とうしながら室温で２時間インキュベートする。プレートを
洗浄し、ビオチン化抗ＩＬ−１７検出抗体（１００ｎｇ／ウェル）を加え、振とうしなが
ら室温で１時間インキュベートする。捕捉抗体と検出抗体は、いずれもマウスＩＬ−１７
と結合するが交差遮断しない異なる抗体である。プレートを洗浄し、かつ結合した検出抗
体は、ストレプトアビジン−ＨＲＰ（西洋わさびペルオキシダーゼ）およびＴＭＢ（３，
３’，５，５’−テトラメチルベンジジン）を使用して検出する。次いでプレートを４５
０−６５０ｎｍで読み取り、かつサンプル中のＩＬ−１７の濃度は、標準物との比較によ
って計算する。

いくつかの反復測定を含めた、脾細胞アッセイのＩＣ５０値を表６に与える。

（実施例７）
抗ＩＬ−２３ｐ１９抗体１３Ｂ８−ｂの調製の特徴付け
ヒト化抗ＩＬ−２３ｐ１９抗体１３Ｂ８−ｂを、それぞれ配列番号４９および５０で与
えるように１３Ｂ８−ｂの重鎖および軽鎖をコードするＤＮＡ配列を有するベクターを使
用して、哺乳動物細胞から調製する。

本質的に実施例４（上記）中に記載したようにＢＩＡｃｏｒｅ分析によりアッセイした
とき、ヒト（ｈｕｍ）１３Ｂ８−ｂはヒトＩＬ−２３に関して２９７ｐＭのＫｄを有する
。

ヒト１３Ｂ８−ｂの生物学的活性は、本質的に実施例５（上記）中に記載したようにＢ
ａ／Ｆ３増殖アッセイを使用して評価する、ただし５０ｐＭではなく３４０ｐＭのＩＬ−
２３を使用して増殖を刺激する。抗ＩＬ−２３ｐ１９抗体の阻害活性（ＩＣ５０）は、所
与のサンプル中のＩＬ−２３の活性を５０％低下させるのに必要な抗体の濃度を決定する
ことによって評価する。通常通り、より低いＩＣ５０値はより高い活性を反映する。ヒト
１３Ｂ８−ｂは、Ｂａ／Ｆ３増殖アッセイにおいて１８７ｐＭのＩＣ５０を示す。

ヒト１３Ｂ８−ｂの生物学的活性は、本質的に実施例６（上記）中に記載したようにヒ
ト脾細胞アッセイを使用しても評価する、ただし脾細胞はマウスではなくヒト脾臓から得
て、抗ＣＤ３ｅ抗体は使用せず、かつＩＬ−１７ではなくＩＦＮ−γが読み出しである。
このアッセイは、ヒト初代脾細胞によるＩＦＮ−γ産生のレベルを決定することによって
サンプル中のＩＬ−２３の活性を測定する。ヒト脾細胞は、様々な濃度の抗ＩＬ−２３ｐ
１９抗体ヒト１３Ｂ８−ｂの存在下、または抗体の不在下で、ヒトＩＬ−２３（１７０ｐ
Ｍ）に曝す。ＩＦＮ−γはサンドウィッチＥＬＩＳＡによって検出する。ヒト１３Ｂ８−
ｂは、ヒト脾細胞アッセイにおいて５９〜１４４ｐＭのＩＣ５０を示す。

ヒト１３Ｂ８−ｂの生物学的活性は、本質的にＰａｒｈａｍら、（２００２年）Ｊ．Ｉ
ｍｍｕｎｏｌ． １６８：５６９９頁中に記載されたように、ＫＩＴ２２５ＳＴＡＴ−３
リン酸化アッセイを使用してさらに評価する。ヒトＫＩＴ２２５細胞、白血病性のＴ細胞
系列は、様々な濃度の抗ＩＬ−２３ｐ１９抗体ヒト１３Ｂ８−ｂの存在下、または抗体の
不在下で、１３８ｐＭのヒトＩＬ−２３で刺激する。ＩＬ−２３活性はＳＴＡＴ３リン酸
化のレベルを検出することによって測定する。ヒト１３Ｂ８−ｂは、ＫＩＴ２２５アッセ
イにおいて１３０ｐＭのＩＣ５０を示す。

（実施例８）
ヒト化抗ＩＬ−２３ｐ１９抗体１３Ｂ８−ｂに関するエピトープ
ヒト化抗体１３Ｂ８−ｂとヒトＩＬ−２３ｐ１９（配列番号４７）の結合に関するエピ
トープを、ｘ線結晶学によって決定した。ｐ１９およびｐ４０サブユニットを含む、ヒト
化抗ＩＬ−２３ｐ１９抗体１３Ｂ８−ｂのＦａｂ断片と非結合ヒトＩＬ−２３の複合体に
関する座標を決定した。結晶構造を決定するために使用したＩＬ−２３中のｐ４０サブユ
ニットは、Ａｓｎ２２２がＧｌｎによって置換されているＮ２２２Ｑ置換を有する。ヒト
ＩＬ−２３ｐ１９の配列は配列番号４７で見られ、かつ成熟形態のヒトＩＬ−１２／ＩＬ
−２３ｐ４０の配列はＧｅｎＢａｎｋアクセッション番号Ｐ２９４６０の残基２３〜３２
８で見られる。ヒト化抗ＩＬ−２３ｐ１９抗体１３Ｂ８−ｂは、ヒト化１３Ｂ８−ｂ重鎖
（配列番号７）ヒト化１３Ｂ８−ｂ軽鎖（配列番号１４）を含む。結晶化条件は１５％ポ
リエチレングリコール４０００、６０ｍＭ酢酸ナトリウム、１００ｍＭＴＲＩＳ−ＨＣｌ
（ｐＨ８）である。結晶は他のバッファーをｐＨ８でまたはｐＨ８の周りで用いて得るこ
ともできる。

抗体１３Ｂ８−ｂ上の残基の４．０Å以内のＩＬ−２３アミノ酸残基には、Ｋ２０、Ｔ
２３、Ｗ２６、Ｓ２７、Ｐ３０、Ｅ８２、Ｓ９５、Ｌ９６、Ｌ９７、Ｐ９８、Ｄ９９、Ｐ
１０１、Ｇ１０３、Ｑ１０４、Ｈ１０６、Ａ１０７およびＬ１１０がある。更なる残基Ｌ
２４、Ｌ８５、Ｔ９１、Ｓ１００およびＶ１０２は５．０Å以内に存在する。ＩＬ−２３
ｐ１９上のアミノ酸残基は、残基の任意の原子の座標が抗体の任意の原子の座標の所与の
距離内に存在する場合、抗体の所与の距離内（たとえば、４．０Åまたは５．０Å）に存
在するとみなす。

これらの接触残基の大部分は、ＩＬ−２３ｐ１９の一次構造に沿った２つの主なクラス
ターの範疇にあり、第１のクラスターは残基２０〜３０を含み（その中で１１個の残基の
６個が抗体の５．０Å以内に存在し、かつ１１個の残基の５個が４．０Å以内に存在する
）、かつ第２のクラスターは残基８２〜１１０を含む（その中で２９個の残基の１６個が
抗体の５．０Å以内に存在し、かつ２９個の残基の１２個が４．０Å以内に存在する）。
これらのクラスターは、その中で３０％、４０％、４５％、５０％または５４％以上の残
基が抗体の４．０Åまたは５．０Å以内に存在するＩＬ−２３ｐ１９の、１１個以上の隣
接アミノ酸残基の広がりを含むエピトープを規定する。

これらのクラスターの片方または両方と結合する抗体は、抗体１３Ｂ８−ｂの結合を妨
げると予想され、かつ類似の生物学的活性を示すと予想される。

表７は、配列表中の配列の簡単な記載を与える。

Claims (1)

1. 本願明細書に記載された発明。

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