+

CZ301667B6 - Derivát indazolu a farmaceutický prípravek s jeho obsahem pro inhibici proteinkináz - Google Patents

Derivát indazolu a farmaceutický prípravek s jeho obsahem pro inhibici proteinkináz Download PDF

Info

Publication number
CZ301667B6
CZ301667B6 CZ20014634A CZ20014634A CZ301667B6 CZ 301667 B6 CZ301667 B6 CZ 301667B6 CZ 20014634 A CZ20014634 A CZ 20014634A CZ 20014634 A CZ20014634 A CZ 20014634A CZ 301667 B6 CZ301667 B6 CZ 301667B6
Authority
CZ
Czechia
Prior art keywords
group
indazole
alkyl
aryl
substituted
Prior art date
Application number
CZ20014634A
Other languages
English (en)
Other versions
CZ20014634A3 (cs
Inventor
Steven Kania@Robert
Lee Bender@Steven
J. Borchardt@Allen
F. Braganza@John
James Cripps@Stephan
Hua@Ye
David Johnson@Michael
Otto Johnson@Theodore
The Luu@Hiep
Louise Palmer@Cynthia
Heinz Reich@Siegfried
Maria Tempczyk-Russell@Anna
Teng@Min
Thomas@Christine
David Varney@Michael
Brennan Wallace@Michael
Raymond Collins@Michael
Original Assignee
Agouron Pharmaceuticals, Inc.
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Family has litigation
First worldwide family litigation filed litigation Critical https://patents.darts-ip.com/?family=22498654&utm_source=google_patent&utm_medium=platform_link&utm_campaign=public_patent_search&patent=CZ301667(B6) "Global patent litigation dataset” by Darts-ip is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 International License.
Application filed by Agouron Pharmaceuticals, Inc. filed Critical Agouron Pharmaceuticals, Inc.
Publication of CZ20014634A3 publication Critical patent/CZ20014634A3/cs
Publication of CZ301667B6 publication Critical patent/CZ301667B6/cs

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D403/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00
    • C07D403/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing two hetero rings
    • C07D403/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A61P17/06—Antipsoriatics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
    • A61P19/02—Drugs for skeletal disorders for joint disorders, e.g. arthritis, arthrosis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P27/00—Drugs for disorders of the senses
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P27/00—Drugs for disorders of the senses
    • A61P27/02—Ophthalmic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P27/00—Drugs for disorders of the senses
    • A61P27/02—Ophthalmic agents
    • A61P27/06—Antiglaucoma agents or miotics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/08—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis
    • A61P3/10—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis for hyperglycaemia, e.g. antidiabetics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/10—Drugs for disorders of the cardiovascular system for treating ischaemic or atherosclerotic diseases, e.g. antianginal drugs, coronary vasodilators, drugs for myocardial infarction, retinopathy, cerebrovascula insufficiency, renal arteriosclerosis
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D209/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings, condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom
    • C07D209/02—Heterocyclic compounds containing five-membered rings, condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom condensed with one carbocyclic ring
    • C07D209/04—Indoles; Hydrogenated indoles
    • C07D209/10—Indoles; Hydrogenated indoles with substituted hydrocarbon radicals attached to carbon atoms of the hetero ring
    • C07D209/18—Radicals substituted by carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D231/00—Heterocyclic compounds containing 1,2-diazole or hydrogenated 1,2-diazole rings
    • C07D231/54—Heterocyclic compounds containing 1,2-diazole or hydrogenated 1,2-diazole rings condensed with carbocyclic rings or ring systems
    • C07D231/56—Benzopyrazoles; Hydrogenated benzopyrazoles
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
    • C07D401/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings
    • C07D401/04—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings directly linked by a ring-member-to-ring-member bond
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
    • C07D401/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings
    • C07D401/06—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings linked by a carbon chain containing only aliphatic carbon atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
    • C07D401/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings
    • C07D401/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
    • C07D401/14—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing three or more hetero rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D403/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00
    • C07D403/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing two hetero rings
    • C07D403/04—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing two hetero rings directly linked by a ring-member-to-ring-member bond
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D405/00—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom
    • C07D405/02—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom containing two hetero rings
    • C07D405/04—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom containing two hetero rings directly linked by a ring-member-to-ring-member bond
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D405/00—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom
    • C07D405/02—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom containing two hetero rings
    • C07D405/06—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom containing two hetero rings linked by a carbon chain containing only aliphatic carbon atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D405/00—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom
    • C07D405/14—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom containing three or more hetero rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D409/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having sulfur atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D409/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having sulfur atoms as the only ring hetero atoms containing two hetero rings
    • C07D409/06—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having sulfur atoms as the only ring hetero atoms containing two hetero rings linked by a carbon chain containing only aliphatic carbon atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D409/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having sulfur atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D409/14—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having sulfur atoms as the only ring hetero atoms containing three or more hetero rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D413/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D413/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms containing two hetero rings
    • C07D413/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D417/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00
    • C07D417/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00 containing two hetero rings
    • C07D417/06—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00 containing two hetero rings linked by a carbon chain containing only aliphatic carbon atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D417/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00
    • C07D417/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00 containing two hetero rings
    • C07D417/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00 containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D417/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00
    • C07D417/14—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00 containing three or more hetero rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D471/00—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00
    • C07D471/02—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00 in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D471/04—Ortho-condensed systems
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D491/00—Heterocyclic compounds containing in the condensed ring system both one or more rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms and one or more rings having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by groups C07D451/00 - C07D459/00, C07D463/00, C07D477/00 or C07D489/00
    • C07D491/02—Heterocyclic compounds containing in the condensed ring system both one or more rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms and one or more rings having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by groups C07D451/00 - C07D459/00, C07D463/00, C07D477/00 or C07D489/00 in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D491/04—Ortho-condensed systems

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Diabetes (AREA)
  • Ophthalmology & Optometry (AREA)
  • Rheumatology (AREA)
  • Cardiology (AREA)
  • Physical Education & Sports Medicine (AREA)
  • Dermatology (AREA)
  • Heart & Thoracic Surgery (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Obesity (AREA)
  • Pain & Pain Management (AREA)
  • Endocrinology (AREA)
  • Emergency Medicine (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Vascular Medicine (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Orthopedic Medicine & Surgery (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Plural Heterocyclic Compounds (AREA)
  • Nitrogen Condensed Heterocyclic Rings (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)

Abstract

Deriváty indazolu obecného vzorce I (a), kde R.sup.1.n. je aryl nebo heteroaryl, CH=CH-R.sup.3.n. nebo CH=N-R.sup.3.n., kde R.sup.3.n. je alkyl, alkenyl, cykloalkyl, heterocykloalkyl, aryl nebo heteroaryl a R.sup.2.n. je aryl nebo Y-Ar, kde Y je O, S, C=CH.sub.2.n., C=O, S=O, SO.sub.2.n., CH.sub.2.n., CHCH.sub.3.n. nebo N-alkyl a Ar je aryl a jejich farmaceuticky prijatelné soli, jejich použití pro výrobu léciv a farmaceutické prípravky s jejich obsahem. Tyto slouceniny modulují a/nebo inhibují aktivitu urcité proteinkinázy a zprostredkovávají tyrozinkinázovou signální transdukci, a tím modulují a/nebo inhibují nežádoucí bunecnou proliferaci. Jsou vhodné pro lécení karcinomu a dalších chorobných stavu sdružených s nežádoucí angiogenezí a/nebo bunecnou proliferací, jako je napríklad diabetická retinopatie, neovaskulární glaukom, revmatoidní artritida a psoriasis.

Description

Derivát indazolu a farmaceutický přípravek 3 jeho obsahem pro ínhibici proteinkináz
Oblast techniky
Tento vynález se týká indazolových sloučenin, které zprostředkovávají a/nebo Ínhibují aktivitu určitých proteinkináz, a farmaceutických přípravků, které tyto sloučeniny obsahují. Vynález se také týká terapeutického nebo profytaktického použití těchto sloučenin a přípravků a dále se týká léčení karcinomů a také dalších chorobných stavů spojených s nežádoucí angiogenezi a/nebo io buněčnou pro li ferac í podáváním účinného množství těchto sloučenin.
Dosavadní stav techniky
Proteinkínázy jsou skupina enzymů, které katalyzují fosforylaci hydroxy lové skupiny specifických tyrozinových, serinových nebo threoninových zbytků v proteinech. Tato fosforylace typicky významně naruší funkci proteinu a proteinkínázy jsou tedy klíčovými enzymy pro regulaci celé řady buněčných procesů, včetně metabolismu, buněčné proliferace, buněčné diferenciace a přežívání buněk. Z mnoha různých buněčných funkcí, o kterých je známo, že je u nich nezbytná aktivita proteinkínázy, některé procesy představují lákavé cíle pro terapeutickou intervenci u určitých chorobných stavů. Dvěma příklady jsou angiogeneze a řízení buněčného cyklu, kde proteinkínázy hrají stěžejní úlohu, přičemž tyto procesy jsou esenciální pro růst solidních nádorů, jakož i pro další onemocnění.
Angiogeneze je mechanismus, kterým jsou vytvořeny nové kapiláry z již existujících cév. Je-li nezbytné, vaskulámí systém má potenciál k vytvoření nových kapilárních sítí, aby byla udržována řádná funkce tkání a orgánů. Ale u dospělých je angiogeneze dosti omezena, pastává pouze při procesu hojení ran a neovaskulizací endometria během menstruace. (Viz Mereninies et al„ Cell Growth & Differentiation, 8, 3-10 1997). Na druhé straně, nežádoucí angiogeneze je charakteristický znak několika onemocnění, jako jsou například retinopatie, psoriasis, revmatoídní artritida, makulámí degenerace se vztahem kvěku (AMD) a karcinomy (solidní nádory). (Folkman, Nátuře Med., 1, 27-31 1995). Proteinkínázy, u kterých bylo prokázáno, že jsou zapojeny do angiogenního procesu, zahrnují tři členy skupiny tyrozinkinázových receptorů růstového faktoru: VEGF-R2 (receptor 2 vaskulámího endotelového růstového faktoru, také známý jako
KDR (receptor s kinázovou doménou) a jako FLK-1), FGF-R (receptor fibroblastového růstového faktoru) a TEK (také znám jako Tie~2).
VEGF-R2, který je exprimován pouze na endotelových buňkách, váže silný angiogenní růstový faktor VEGF a zprostředkovává následnou signální transdukci aktivací aktivity své intracelulámí kinázy. Očekává se tedy, že přímá inhibice aktivity kináza VEGF-R2 bude mít za následek redukci angiogeneze dokonce i v přítomnosti exogenního VEGF (viz Strawn et al., Cancer Research, 56, 3540-3545, 1996), jak bylo ukázáno u mutant VEGF-R2, které nesvedou zprostředkovat signální transdukci. (Millauer et al., Cancer Research, 56, 1615-1620, 1996). Navíc se zdá, že VEGF-R2 nemá jinou funkci u dospělých kromě zprostředkování angiogenní aktivity
VEGF. Tudíž se očekává, že selektivní inhibitor aktivity kinázy VEGF-R2 by projevoval malou toxicitu.
Podobně FGF-R váže angiogenní růstové faktory aFGF a bFGF a zprostředkovává následnou intracelulámí signální transdukci. Nedávno bylo navrženo, že růstové faktory, jako je například bFGF, mohou mít klíčovou úlohu v indukci angiogeneze u solidních nádorů, které dosáhly určité velikosti. (Yoshiji et al., Cancer Research, 57,3924-3928, 1997). Ale na rozdíl od VEGF-R2 je FGF-R exprimován ve velkém počtu různých buněčných typů v celém organismu a může nebo nemusí mít důležitou úlohu v jiných normálních fyziologických procesech u dospělých. Nicméně bylo publikováno, že systémové podávání inhibitoru s matou molekulou, který inhibovat kinázo-1CZ 301667 B6 vou aktivitu FGF-R, blokovalo angiogenezi indukovanou bFGF u myší bez zjevné toxicity.
(Mohammad et al., EMBO Journal, 17, 5996-5904, 1998).
TEK (také znána jako Tie-2) je další receptorová tyrozinkináza exprimovaná pouze na endo5 tělových buňkách, o které bylo prokázáno, že má úlohu v angiogenezi. Vazba faktoru angiopoietinu-1 má za následek autofosforylaci kinázové domény TEK a má za následek signální transdukci, která pravděpodobně zprostředkovaná interakci endotelových buněk speri-endotelovymi podpůrnými buňkami, a tím usnadňuje maturaci nově vytvořených krevních cév. Na druhé straně faktor angiopoietin-2 pravděpodobně antagonizuje účinek angiopoietinu-1 na TEK io a narušuje angiogenezi. (Maisonpierre et al., Science, 277, 55-60, 1997).
Jako důsledek výše popsaného výzkumu bylo navrženo léčit angiogenezi použitím sloučenin inhibuj ících kinázovou aktivitu VEGF-R2, FGF-R a/nebo TEK. Například, WIPO mezinárodní publikace WO 97/34876 popisuje určité cinnolinové deriváty, které jsou inhibitory VEGF-R2, které mohou být použity pro léčení chorobných stavů sdružených s abnormální angiogenezi a/nebo zvýšenou vaskulámí permeabilitou, jako jsou například karcinomy, diabetes, psoriasis, revmatoidní artritida, Kaposiho sarkom, hemangiom, akutní a chronické nefropatie, aterom, arteriální restenóza, auto imunitní onemocnění, akutní záněty a oční onemocnění s proliferací retina 1ních cév.
Kináza fosforylázy aktivuje glykogenfosforylázu, tedy zvyšuje rozpad glykogenu a uvolňování glukózy játry. Regulace produkce glukózy játry je narušena u diabetes typu 2 a je primární příčina hyperglykémie nalačno, která má za následek mnoho sekundárních komplikací, které tyto pacienty postihují. Redukce uvolňování glukózy z jater by tedy snížila zvýšenou hladinu plazma25 tické glukózy. Inhibitory kinázy fosforylázy by tudíž snížily fosforylázovou aktivitu aglykogenolýzu, a tak snížily hyperglykémii u pacientů.
Další fyziologická reakce na VEGF je vaskulámí hyperpermeabilita, o které se předpokládá, že má úlohu v časných stadiích angiogeneze. V ischemických tkáních, jako jsou například ty, které se vyskytují v mozku obětí mozkové mrtvice, hypoxie spouští expresi VEGF, což vede ke zvýšené vaskulámí permeabilitě a konečnému edému sousedních tkání. V modelu mozková mrtvice na laboratorních potkanech bylo ukázáno autory van Bruggen et al. (J. Clinical invest., 104, 1613-20, 1999), že podávání monoklonální protilátky kVEGF snižuje objem infarktu. Očekává se tedy, že inhibitory VEGFR budou použitelné pro léčení mozková mrtvice.
Kromě jejich úlohy v angiogenezi mají proteinkinázy také velmi důležitou úlohu v řízení buněčného cyklu. Nekontrolovaná buněčná proliferace je hlavní znak karcinomu. Buněčná proliferace jako reakce na různé podněty se projevuje deregulaci cyklu buněčného dělení, procesu, kterým se buňky množí a dělí. Nádorové buňky mají typicky poškozeny geny, které přímo nebo nepřímo regulují postup cyklu buněčného dělení.
Kinázy závislé na cy klinu (CDKs) jsou serinthreoninové proteinkinázy, které mají rozhodující úlohu v regulaci přechodů mezi různými fázemi buněčného cyklu. (Viz např. články sebrané v Science, 274, 1643-1677, 1996), CDK komplexy jsou vytvořeny spojením regulační cyklinové podjednotky (např. cyklin A, Bl, B2, Dl, D2, D3 a E) a katalytické kinázové podjednotky (např. cdc2 (CDK1), CDK2, CDK4, CDK5 a CDK6). Jak jméno napovídá, CDK projevují absolutní závislost na cyklinové podjednotce při fosforylaci svých cílových substrátů a různé páry kináza/cyklin působí na regulaci progrese specifických fází buněčného cyklu.
Je to komplex CDK4 s cykliny D, který má rozhodující úlohu v iniciaci cyklu buněčného dělení z odpočinkového nebo klidového stadia do stadia, kdy buňky začínají podstupovat buněčné dělení. Tato progrese je podrobena celé řadě růstových regulačních mechanismů, jak negativních tak pozitivních. Odchylky v tomto kontrolním systému, konkrétně ty, které ovlivňují funkci CDK4, jsou zapojeny do dalšího vývoje buněk k vysoce proliferativnímu stavu charakteristic55 kému pro malignity, konkrétně familiární melanomy, esofageální karcinomy a pankreatické
-2CZ 301667 B6 karcinomy. (Viz např. Kamb, Trends in Genetics, 11, 136-140, 1995, Kamb et al., Science, 264,
436-440,1994).
Nesčtené publikace popisují celou řadu chemických sloučenin použitelných proti velkému množ5 ství terapeutických cílů. Například WIPO mezinárodní přihlášky WO 99/23077 a WO 99/23076 popisují sloučeniny obsahující indazol mající inhibiční aktivitu pro fosfodiesterázu typu IV, vytvořené bioisosterickým nahrazením katecholu indazolem. Patent Spojených Států US 5 760 028 popisuje heterocyklus zahrnující 3-[l-[3-(imidazolin-2-ylammo)propyl]indazol5-ylkarbonylamino]-2-(benzyloxykarbonylamÍno)propionovou kyselinu, které jsou použitelné io jako antagonisté αβ^ integrinu a příbuzných adhezivních proteinových receptorů buněčného povrchu. WIPO mezinárodní přihláška WO 98/09961 popisuje určité deriváty indazolu ajejich použití jako inhibitory fosfodiesterázy (PDE) typ IV nebo produkci faktor nekrotizuj ícího nádory (TNF) u savců. Nedávné příspěvky do virtuální knihovny známých sloučenin obsahují sloučeniny popsané jako antiproliferativní terapeutické přípravky, které inhibují CDK. Například patent
Spojených Států US 5 621 082, Xiong et al, popisuje nukleovou kyselinu kódující inhibitor CDK6 a evropská patentová přihláška EP 0 666 270 A2 popisuje peptidy a peptidomimetika, která působí jako inhibitory CDK1 a CDK2. Mezinárodní patentová přihláška WO 97/16447 popisuje určité analogy chromanů, které jsou inhibitory kináz závislých na cyklinu, obzvláště komplexů CDK/cyklin, jako je například CDK4/cyklin Dl, které mohou být použity pro inhibici nadměrné nebo abnormální buněčné proliferace, a tudíž pro léčbu karcinomu. WIPO mezinárodní přihláška WO 99/21845 popisuje deriváty 4-aminothiazolu, které jsou použitelné jako CDK inhibitory.
Ale stále trvá potřeba sloučenin s matou molekulou (tzv. malých molekul), které mohou být snad25 no syntetizovány a účinně inhibují jednu nebo více CDK nebo komplexy CDK/cyklin. Protože CDK4 může sloužit jako obecný aktivátor buněčného dělení ve většině buněk a komplexy CDK4 a cyklinů typu D řídí časnou Gj fázi buněčného cyklu, existuje potřeba účinných inhibitorů CDK4 ajejich komplexů cyklinů typu D pro léčbu jednoho nebo více typů nádorů. Také stěžejní úloha kináz komplexů cyklin E/CDK2 a cyklin B/CDK1 ve přechodech fází Gj/S a G2/M, vdaném pořadí, poskytuje další cíle pro terapeutickou intervenci pri supresi deregulované progrese buněčného cyklu u karcinomu.
Další proteinkináza, CHK1, má důležitou úlohu jako kontrolní bod v progresi buněčného cyklu. Kontrolní body jsou kontrolní systémy, které koordinují progresi buněčného cyklu ovlivněním formace, aktivace a následné inaktivace kináz závislých na cyklinu. Kontrolní body zabraňují progresi buněčného cyklu v nevhodný čas, udržují metabolickou rovnováhu buněk, když jsou buňky zdrženy v určité fázi (arest), a v některých případech mohou indukovat apoptózu (programovou buněčnou smrt), když nejsou podmínky pro kontrolní bod splněny. (Viz např. Ο'-Connor, Cancer Surveys, 29, 151-182, 1997), Nurse, Cell, 91, 865-867, 1997), Hartwell et al., Science, 266, 1821-1828 (1994), Hartwell et al., Science, 246, 629-634,1989).
Jedna řada kontrolních bodů sleduje integritu genomu a po zjištění poškození DNA, tyto „kontrolní body poškození DNA“ blokují progresi ve fázích buněčného cyklu Gi a G2 a zpomalují progresí S fáze. (0'Connor, Cancer Surveys, 29, 151-182, 1997, Hartwell et al., Science, 266,
1821-1828, 1994). Tento účinek umožňuje opravné procesy DNA, aby byla jejich práce ukončena před replikací genomu a než proběhne následná separace genetického materiálu do nových dceřinných buněk. Je důležité, že nejčastěji mutovaný gen u lidských karcinomů, nádorový supresorový gen p53, vytváří protein pro kontrolní bod poškození DNA, který blokuje progresi buněčného cyklu v Gi fázi a/nebo indukuje apoptózu (programovanou buněčnou smrt) po poškození DNA. (Hartwell et al., Science, 266, 1821-1828, 1994). Bylo prokázáno, že nádorový supresorový gen p53 také zesiluje účinek kontrolního bodu pro poškození DNA v G2 fázi buněčného cyklu. (Viz např. Bunz et al, Science, 28, 1497-1501, 1998), Winters et ak, Oncogene, 17, 673-684, 1998), Thompson, Oncogene, 15,3025-3035, 1997).
-3CZ 301667 B6
Díky stěžejní povaze dráhy nádorového supresorového genu p53 u lidských karcinomů jsou aktivně vyhledávány terapeutické intervence, které využívají zranitelnost karcinomů defektních v p53. Jeden objevená zranitelnost leží v operaci kontrolního bodu G2 u buněk karcinomu defektnťho vp53. buňky karcinomu, protože postrádají kontrolní bod Gh jsou obzvláště zranitelné při odstranění poslední zbylé bariéry chránící je před nádor likvidujícími („cancer-killing“) účinky agens poškozujících DNA: kontrolní bod G2. Kontrolní bod G2 je regulován kontrolním systémem, který je zachován od kvasinek k člověku. V tomto zachovaném systému je důležitá kináza, CHK1, která transdukuje signály od komplexu citlivého na poškození DNA na inhibici aktivace kinázy cyklin B/Cdc2, která podporuje vstup do mitotické fáze (viz io např. Peng et al., Science, 277, 1501-1505, 1997, Sanchez et al., Science, 277, 1497-1501, 1997). Bylo ukázáno, že inaktivace CHK1 ruší jak G2 arest indukovaný poškozením DNA způsobeným buď protirakovinnými agens, nebo endogenním poškozením DNA, tak i způsobuje přednostní usmrcení následných buněk defektních v kontrolních bodech (viz např, Nurse, Cell, 91, 865-867, 1997, Weinert, Science, 277, 1450-1451, 1997, Walworth et al., Nátuře, 363,
368-371, 1993, a Al-Khodairy etal., Molec. Biol. Cell, 5, 147-160, 1994).
Selektivní manipulace kontrolního bodu v karcinomových buňkách by mohla poskytnout široké využití v chemoterapeutických a radioterapeutických režimech při léčbě karcinomu a může kromě toho poskytnout obecný charakteristický znak „genomové nestability“ lidských karcinomů ke zkoumání jako selektivní základ destrukce karcinomových buněk. Celá řada faktorů má CHK.1 jako stěžejní cíl pro kontrolní bod poškození DNA. Objasnění inhibitorů této a funkčně příbuzných kináz, jako je například Cdsl/CHK2, kináza, o které bylo nedávno zjištěno, že kooperuje s HK1 při regulaci progrese Sfáze (viz Zeng et al., Nátuře, 395, 507-510, 1998, Matsuoka, Science, 282, 1893-1897, 1998), by mohlo poskytnout cennou novou terapeutickou podstatu pro léčení karcinomu.
Vazba receptoru integrinu k ECM iniciuje intraceluiámí signály zprostředkované FAK (kináza fokální adheze), které jsou zapojeny do motility buněk, buněčné proliferace a přežití. U lidských karcinomů je nadměrná exprese FAK zapojena do geneze tumoru a metastatického potenciálu díky své úloze v integrinem zprostředkovaných signálních drahách.
Tyrozinkinázy mohou být obecně receptorového typu (tj. mající extracelulámí, transmembránové a intraceluiámí domény) nebo nereceptorového typu (tj. jsou plně intraceluiámí). Má se za to, že alespoň jedna nereceptorová proteinová tyrozinkináza, jmenovitě LCK, zprostředkovává vT lymfocytech transdukci signálu z interakce proteinu buněčného povrchu (Cd4) s křížově navázanou protilátkou anti-Cd4 (detailnější diskuse o nereceptorových tyrozinkinázách je uvedena v práci autora Bolen, Oncogene, 8, 2025-2031, 1993, kteráje v tomto textu zahrnuje formou odkazu).
Kromě proteinkináz identifikovaných výše, bylo zjištěno, že mnoho dalších proteinkináz jsou terapeutické cíle a početné publikace popisují inhibitory kinázové aktivity, jako uvedeno v přehledu v následujících pracích (McMahon et al., Oncologist, 5, 3-10, 2000, Holash et al., Oncogene, 8, 5356-62, 1999, Thomas et al., J. Biol. Chem., 274, 36684-92, 1999, Cohen, Curr. Op. Chem. Biol., 3, 459-65, 1999, Klohs. et al., Curr. Op. Chem. Biol., 10, 544-49, 1999,
McMahon et al., Current Opinion in Drug Discovery & Development, 1, 131-146, 1998, Strawn et al., Exp. Opin. Invest. Drugs, 7, 553-573, 1998). Mezinárodní patentová přihláška WO 00/18761 popisuje určité substituované 3-kyanochinoliny jako inhibitory proteinkináz.
Stále ale trvá potřeba účinných inhibitorů proteinkináz. Navíc, jak je odborníkům jasné, je žádou50 cí, aby inhibitory kináz měly jak vysokou afinitu k cílové kináze nebo kinázám, tak byly také vysoce selektivní ve srovnání s dalšími proteinkinázami.
-4CZ 301667 B6
Podstata vynálezu
Cílem vynálezu je poskytnout silné inhibitory proteinkináz. Dalším cílem vynálezu je poskytnout účinné inhibitory kináz, které mají silnou a selektivní afinitu pro jednu nebo více konkrétních kináz.
Těchto a dalších cílů vynálezu, které budou jasné z následujícího popisu, bylo dosaženo objevením indazolových sloučenin, jejich farmaceuticky přijatelných prekurzorů, farmaceuticky aktivních metabolítů a farmaceuticky přijatelných solí (tyto sloučeniny, prekurzory, metabolity a soli jsou souhrnně nazývány jako „agens“ neboli „Činidla“) popsaných níže, které modulují a/nebo inhibují aktivitu proteinkináz. Farmaceutické přípravky obsahující tato činidla jsou použitelné v léčbě onemocnění zprostředkovaných kínázovou aktivitou, jako jsou například karcinomy, a také další chorobné stavy sdružené s nežádoucí angiogenezi a/nebo buněčnou proliferaci, jako je například diabetická retinopatie, neovaskulámí glaukom, revmatoidní artritida a psoriasís. Dále činidla mají výhodné vlastnosti týkající se modulace a/nebo inhibice kinázové aktivity sdružené s VEGF-R, FGF-R, komplexy CDK, CHK1, LCK, TEK, FAK a/nebo kinázou fosforylázy.
Předmětem vynálezu je především derivát indazolu, jehož strukturu v základním provedení (i) popisuje obecný vzorec I(a)
kde
R1 je substituovaná nebo nesubstituovaná arylová skupina nebo heteroarylová skupina nebo skupina vzorce CH=CH-R3 nebo CH=N-R3, kde R3 je substituovaná nebo nesubstituovaná alkylová skupina, alkenylová skupina, cykloalkylová skupina, heterocykloalkylová skupina, arylová skupina nebo heteroarylová skupina a
R2 je substituovaná nebo nesubstituovaná arylová skupina nebo skupina Y-Ar, kde Y je atom
O, S, skupina C-CH2, skupina C=O, skupina S=O, skupina SO2, skupina CH2, skupina CHCH3 nebo N-alkylová skupina obsahující 1 až 8 atomů uhlíku a Ar je substituovaná nebo nesubstituovaná arylová skupina, kde termín „alkylová skupina“ se týká alkylových skupin s přímým a rozvětveným řetězcem, které mají jeden až dvanáct uhlíkových atomů;
termín „alkenylová skupina“ se týká alkenylových skupin s přímým a rozvětveným řetězcem, které mají dva až dvanáct uhlíkových atomů;
termín „cykloalkylová skupina“ se týká nasycených nebo částečně nenasycených karbocyklů, které mají tři až dvanáct atomů uhlíku;
termín „heterocykloalkylová skupina“ znamená nasycený nebo Částečně nenasycený monocyklický zbytek obsahující atomy uhlíku a alespoň jeden heteroatom vybraný z atomů dusíku, kyslíku a síry;
-5CZ 301667 B6 termíny „arylová skupina“ a „heteroarylová skupina“ se týkají monocyklických a polycyklických aromatických kruhových struktur, přičemž termín „arylová skupina“ se týká karbocyklů a termín „heteroarylová skupina“ se týká heterocyklů a všechny tyto arylové a heteroarylové skupiny jsou popřípadě substituovány kondenzovanou kruhovou strukturou nebo můstkem.
Do rozsahu základního provedení (i) vynálezu spadá také farmaceuticky přijatelná sůl derivátu indazolu vzorce I(a).
Výhodná provedení tohoto aspektu vynálezu zahrnují zejména provedení (ii) až (xii):
(ii) Derivát indazolu podle provedení (i) obecného vzorce II
kde
R1 je substituovaná nebo nesubstituovaná arylová skupina nebo heteroarylová skupina nebo skupina vzorce CH=CH-R3 nebo CH^N-R3, kde R3 je substituovaná nebo nesubstituovaná alkylová skupina, cykloalkylová skupina, heterocy kloal kýlová skupina, arylová skupina nebo heteroarylová skupina,
R4 a R7 jsou každý nezávisle atom vodíku, skupina OH, atom halogenu, alkylová skupina obsahující 1 až 8 atomů uhlíku, alkoxyskupina obsahující 1 az 8 atomů uhlíku, alkenylová skupina obsahující 1 až 8 atomů uhlíku, aryloxyskupina, thioarylová skupina, skupina CH2-OH, CH2-Oalkylová skupina obsahující 1 až 8 atomů uhlíku v alkylové části, CH2-O-arylová skupina, CH2~
S-alkylová skupina obsahující 1 až 8 atomů uhlíku v alkylové části nebo CHj-S-arylová skupina,
R5 a R6 jsou každý nezávisle atom vodíku, skupina OH, atom halogenu, Z-alkylová skupina. Z-arylová skupina nebo skupina Z-CH2CH-CH2, kde Z je atom O, S, skupina NH nebo skupina
CH?, přičemž alkylová část, a arylová část Z-alkylové skupiny a Z-arylové skupiny je každá popřípadě substituovaná; a jeho farmaceuticky přijatelnou sůl.
(iii) Derivát indazolu nebo jeho farmaceuticky přijatelnou sůl podle provedení (ii), kde
R1 je substituovaná nebo nesubstituovaná bieyklická heteroarylová skupina nebo skupina vzorce CH=CH-R3, kde R3 je substituovaná nebo nesubstituovaná arylová skupina nebo heteroarylová skupina,
R4 a R7 jsou každý nezávisle atom vodíku nebo alkylová skupina obsahující 1 až 8 atomů uhlíku a
-6CZ 301667 B6
Rs a R6 jsou každý nezávisle atom halogenu, Z-alkylová skupina nebo skupina Z-CH2CH=CH2.
kde Zje atom O nebo S a alkylová skupina je popřípadě substituovaná.
(iv) Derivát indazolu podle provedení (i) obecného vzorce III
kde
R1 je substituovaná nebo nesubstituovaná arylová skupina nebo heteroarylová skupina nebo skupina vzorce CH=CH-R3 nebo CH=N-R3, kde R3 je substituovaná nebo nesubstituovaná io alkylová skupina, cykloalkylová skupina, heterocykloalkylová skupina, arylová skupina nebo heteroarylová skupina,
Y je atom O, S, skupina C=CH2, skupina C=O, skupina S=O, skupina SO2, skupina CH2, skupina CHCH3, skupina NH nebo N-alkylová skupina obsahující 1 až 8 atomů uhlíku,
R8 je substituovaná nebo nesubstituovaná alkylová skupina, alkenylová skupina, cykloalkylová skupina, heterocykloalkylová skupina, arylová skupina, heteroarylová skupina, alkoxyskupina nebo aryloxyskupina,
R10 je nezávisle vybrán ze skupiny, kterou tvoří atom vodíku, atom halogenu a alkylová skupina obsahující 1 až 8 atomů uhlíku, nebo jeho farmaceuticky přijatelnou sůl, (v) Derivát indazolu nebo jeho farmaceuticky přijatelnou sůl podle provedení (iv), kde
R1 je substituovaná nebo nesubstituovaná bicyklická heteroarylová skupina nebo skupina vzorce CH^CH-R3, kde R3 je substituovaná nebo nesubstituovaná arylová skupina nebo heteroarylová skupina,
Y je atom O, S, skupina C=CH2, skupina C=O, nebo N-alkylová skupina obsahující 1 až 8 atomů uhlíku,
R8 je substituovaná nebo nesubstituovaná arylová skupina nebo heteroarylová skupina, alkylová skupina a alkenylová skupina a
R10 je atom vodíku nebo atom halogenu.
-7CZ 301667 B6 (vi) Derivát indazolu podle provedení (iv) obecného vzorce III(a)
(ÍH(a)K kde
R1 je substituovaná nebo nesubstituovaná arylová skupina nebo heteroarylová skupina nebo skupina vzorce CH=CH-R3 nebo CH=N-R3, kde R3 je substituovaná nebo nesubstituovaná alkylová skupina, cykloalkylová skupina, heterocykloalkylová skupina, arylová skupina nebo heteroarylová skupina, ίο Y je atom O, S, skupina C-CH2, skupina C=O, skupina S=O, skupina SO2, skupina CH2, skupina CHCH; nebo N-alkylová skupina obsahující 1 až 8 atomů uhlíku,
R8 je substituovaná nebo nesubstituovaná alkylová skupina, alkenylová skupina, cykloalkylová skupina, heterocykloalkylová skupina, arylová skupina, heteroarylová skupina, alkoxyskupina nebo ary loxy skupina, nebo jeho farmaceuticky přijatelnou sůl.
(vii) Derivát indazolu nebo jeho farmaceuticky přijatelnou sůl podle provedení (iv), kde
R1 je substituovaná nebo nesubstituovaná bicyklická heteroarylová skupina nebo skupina vzorce CH=CH-R3, kde R3 je substituovaná nebo nesubstituovaná arylová skupina nebo heteroarylová skupina,
Y je atom O, S, skupina C=CH2, skupina C=O, nebo N-alkylová skupina obsahující 1 až 8 atomů uhlíku a
R8 je substituovaná nebo nesubstituovaná arylová skupina, heteroarylová skupina, alkylová skupina nebo alkenylová skupina.
(vin) Derivát indazolu nebo jeho farmaceuticky přijatelnou sůl podle provedení (vi), kde Rl je CH=CH-R3, kde R3 je substituovaná nebo nesubstituovaná arylová skupina,
Y je atom O nebo S a
R8 je substituovaná nebo nesubstituovaná arylová skupina nebo heteroarylová skupina.
-8CZ 301667 B6 (ix) Derivát indazolu podle provedení (i) obecného vzorce IV
(IV), kde
R1 je substituovaná nebo nesubstituovaná arylová skupina nebo heteroarylová skupina nebo skupina vzorce CH=CH-R3 nebo CH=N-R\ kde R3 je substituovaná nebo nesubstituovaná alkylová skupina, cykloalkylová skupina, heterocykloalkylová skupina, arylová skupina nebo heteroarylová skupina,
Y je atom O, S, skupina C=CH2, skupina C=O, skupina S^O, skupina SO2, skupina CH2, skupina CHCH3 nebo N-alkylová skupina obsahující 1 až 8 atomů uhlíku,
R9 je substituovaná nebo nesubstituovaná alkylová skupina, cykloalkylová skupina, heterocykloalkylová skupina, arylová skupina, heteroarylová skupina, alkoxyskupina, aryloxyskupina, cykloalkoxyskupina, NH-alkylová skupina obsahující 1 až 8 atomů uhlíku, NH-arylová skupina, NH-heteroarylová skupina, N=CH-alkylová skupina, skupina NH(C=O)RH nebo skupina NH2, kde R11 je nezávisle vybrán ze skupiny, kterou tvoří atom vodíku, substituovaná nebo nesubstituovaná alkylová skupina, cykloalkylová skupina, heterocykloalkylová skupina, arylová skupina a heteroarylová skupina a
Rl° je nezávisle vybrán ze skupiny, kterou tvoří atom vodíku, atom halogenu a alkylová skupina obsahující 1 až 8 atomů uhlíku, nebo jeho farmaceuticky přijatelnou sůl.
(x) Derivát indazolu nebo jeho farmaceuticky přijatelnou sůl podle provedení (ix), kde
R1 je skupina vzorce CH=CH-R3, kde R3 je substituovaná nebo nesubstituovaná arylová skupina nebo heteroarylová skupina,
Y je atom S a
R9 je substituovaná nebo nesubstituovaná alkylová skupina, alkoxyskupina nebo NH-heteroarylová skupina.
-9CZ 301667 B6 (xi) Derivát indazolu podle provedení (i) vybraný ze skupiny, kterou tvoří sloučeniny vzorců
- 10CZ 301667 B6
- 11 CZ 301667 B6
- 12’
ajejich farmaceuticky přijatelné soli.
(xii) Derivát indazolu podle provedení (i), kterým je sloučenina vzorce
nebo jeho farmaceuticky přijatelná sůl.
- 13CZ 301667 B6
Předmětem vynálezu je dále také farmaceutický přípravek, který obsahuje:
(a) terapeuticky účinné množství derivátu índazolu nebo jeho farmaceuticky přijatelné soli podle kteréhokoliv z provedení (i) až (xii) a (b) farmaceuticky přijatelný nosič, ředidlo nebo vehikulum pro tuto sloučeninu.
Dále je předmětem vynálezu také použití derivátu índazolu nebo jeho farmaceuticky přijatelné soli podle kteréhokoliv z provedení (i) až (xii) pro výrobu léčiva pro léčení chorobného stavu savce zprostředkovaného proteinkinázovou aktivitou podáváním tohoto léčiva savci, který to potřebuje. Chorobný stav savce je přitom zejména sdružen s růstem nádoru, buněčnou proliferaci nebo angiogenezí.
Dále je předmětem vynálezu také použití derivátu índazolu nebo jeho farmaceuticky přijatelné soli podle kteréhokoliv z provedení (i) až (xii) pro výrobu léčiva pro modulaci aktivity proteinkinázového receptorů kontaktováním kinázového receptorů s účinným množstvím tohoto léčiva. Proteinkinázovým receptorem je přitom zejména receptor VEGF.
Přestože předmětem tohoto vynálezu jsou výhradně výše uvedené aspekty, je v dalším popisu vynález někde vysvětlován v širším kontextu na sloučeninách obecného vzorce I
kde:
R1 je substituovaná nebo nesubstituovaná arylová skupina nebo heteroarylová skupina nebo skupina vzorce CH=CH-R3 nebo CH=N-R3, kde R3 je substituovaná nebo nesubstituovaná alkylová skupina, alkenylová skupina, cykloalkylová skupina, heterocykloalkylová skupina, arylová skupina nebo heteroarylová skupina a
R2 je substituovaná nebo nesubstituovaná arylová skupina, heteroarylová skupina nebo Y-X, kde Y je atom O, S, skupina C-CH2, skupina C=O, S=O, SO2, alkyliden, skupina NH nebo N-alkylová skupina obsahující 1 až 8 atomů uhlíku a X je substituovaná nebo nesubstituovaná Ar, heteroarylová skupina, NH-alkylová skupina, NH-cykloalkylová skupina, NH-heterocykloalkylová skupina, NH-aiylová skupina, NH-heteroarylová skupina, NH-alkoxy skupina nebo NH-dialkylamidoskupina, kde Ar je arylová skupina, ajejich farmaceuticky přijatelných prekurzorech, farmaceuticky aktivních metabolitech a farmaceuticky přijatelných solích.
Vynález se také v širším kontextu týká způsobu modulace a/nebo inhibice kinázové aktivity
VEGF-R, FGF-R, komplexu CDK, CHK1, LCK, TEK, FAK a/nebo kinázy fosfoiylázy podáváním sloučeniny vzorce 1, II, III nebo IV nebo jejího farmaceuticky přijatelného prekurzoru, farmaceuticky aktivního metabolitů nebo farmaceuticky přijatelné soli, Výhodné sloučeniny podle předkládaného vynálezu, které mají selektivní kinázovou aktivitu, tj. mají významnou aktivitu proti jedné nebo více specifickým kínázám, zatímco mají malou nebo minimální aktivitu proti jedné nebo více různým kinázám. V jednom výhodném provedení vynálezu jsou sloučeniny podle předkládaného vynálezu sloučeniny vzorce I, které mají v podstatě vyšší účinnost proti tyrozinkináze receptorů VEGF než proti tyrozinkináze receptorů FGF-R1. Vynález se také týká
-14CZ 301667 B6 způsobu modulace tyrozinkinázové aktivity receptoru VEGF bez významné modulace tyrozinkinázové aktivity receptoru FGF.
Sloučeniny podle vynálezu mohou být použity výhodně v kombinaci s dalšími známými terapeu5 tickými přípravky. Například sloučeniny vzorce I, II, III nebo IV, které mají antiangiogenní aktivitu, mohou být podávány společně s cytotoxickými chemoterapeutickými přípravky, jako je například taxol, taxoter, vinblastin, cis-platina, doxorubicin, adriamycin apod,, aby se dosáhlo zvýšeného protinádorového účinku. Aditivní nebo synergické zesílení terapeutického účinku může také být získáno společným podáváním, sloučenin, vzorce I, II, III nebo IV, které mají anti10 angiogenní aktivitu, s dalšími antiangiogenními přípravky, jako je například combretastatin A-4, endostatin, prinomastat, celecoxib, rofocoxib, EMD121974, IM862, anti-VEGF monoklonální protilátky a anti-KDR monoklonální protilátky.
Vynález se také týká farmaceutických přípravků obsahujících účinné množství agens vybraného ze skupiny, kterou tvoří sloučeniny vzorce I a jeho farmaceuticky přijatelných solí, farmaceuticky aktivních metabolitů a farmaceuticky přijatelných prekurzorů a farmaceuticky přijatelného nosiče nebo vehikula tohoto agens. Vynález dále poskytuje léčbu karcinomu, a také dalších chorobných stavů sdružených s nežádoucí angiogenezi a/nebo buněčnou proliferaci, obsahující podávání účinného množství takového agens pacientovi, který tuto léčbu potřebuje.
Detailní popis vynálezu a výhodných provedení
Sloučeniny podle vynálezu vzorce I, II, III a IV jsou použitelné pro zprostředkování aktivity proteinkináz. Konkrétněji jsou sloučeniny použitelné jako antiangiogenní činidla a jako činidla pro modulaci a/nebo inhibici aktivity proteinkináz, a tak jsou užitečné pri léčení karcinomu nebo jiných onemocnění sdružených s buněčnou proliferaci zprostředkovanou proteinkinázami.
Termín „alkylová skupina“, jak se používá v tomto textu, se týká alkylových skupin s přímým a rozvětveným řetězcem, které mají jeden až dvanáct uhlíkových atomů. Příklady alkylových skupin jsou: methylová skupina, (Me), ethylová skupina (Et), n-propylová skupina, isopropylová skupina, butylová skupina, isobutylová skupina, sek-butylová skupina, terc-butylová skupina (t-Bu), pentylová skupina, isopentylová skupina, terc-pentylová skupina, hexylová skupina, isohexylová skupina apod. Termín „nižší alkylová skupina“ označuje alkylovou skupinu mající
1 až 8 atomů uhlíku (alkylová skupina obsahující I až 8 atomů uhlíku). Vhodné substituované alkylové skupiny jsou: fluormethylová skupina, difluormethylová skupina, trifluormethylová skupina, 2-fluorethylová skupina, 3-fIuorpropylová skupina, hydroxymethylová skupina, 2hydroxyethylová skupina, 3-hydroxypropylová skupina apod.
Termín „alkyliden“ se týká dvojmocného radikálu, který má jeden až dvanáct atomů uhlíku. Příklady alkylidenových skupin zahrnují skupinu CH2, skupinu CHCH3, skupinu (CH3)2 apod.
Termín „alkenylová skupina“ se týká alkenylových skupin s přímým a rozvětveným řetězcem, která má dva až dvanáct atomů uhlíku. Příklady alkenylových skupin zahrnují prop-2-enylovou skupinu, but-2-enylovou skupinu, but-3-enylovou skupinu, 2-methylprop-2-enylovou skupinu, hex-2-enylovou skupinu apod.
Termín „alkynylová skupina“ se týká alkynylových skupin s přímým a rozvětveným řetězcem, které mají dva až dvanáct atomů uhlíku.
Termín „cykloalkylové skupina“ se týká saturovaných nebo částečně nesaturovaných karbocyklů, které mají tři až dvanáct atomů uhlíku, včetně bicyklických a tricyklických cykloalky lových struktur. Vhodné cykloalkylové skupiny zahrnují cyklopropylovou skupinu, cyklobutylovou skupinu, cyklopentylovou skupinu, cyklohexylovou skupinu, cykloheptylovou skupinu apod.
- 15CZ 301667 B6
Termín „heterocykloal kýlová skupina“ znamená saturovaný nebo částečně nesaturovaný monocyklický radikál obsahující atomy uhlíku, výhodně 4 nebo 5 atomů uhlíku v kruhu a alespoň jeden heteroatom vybraný z atomů dusíku, kyslíku a síry.
Termíny „arylová skupina“ a „heteroarylová skupina“ se týkají monocyklických a polycyklických nesaturovaných nebo aromatických kruhových struktur, přičemž termín „arylová skupina“ se týká karbocyklů a termín „heteroarylová skupina“ se týká heterocyklů. Příklady aromatických kruhových struktur jsou: fenylová skupina, naftylová skupina, 1,2,3,4-tetrahydronaftylová skupina, furylová skupina, thienylová skupina, pyrolylová skupina, pyridinylová skupina, pyrazolylová io skupina, imidazolylová skupina, pyrazinylová skupina, pyridazinylová skupina, 1,2,3-triazinylová skupina, 1,2,4-oxad iazoly lová skupina, 1,3,4-oxadiazoly lová skupina, l-H-tetrazol-5-yIová skupina, indolylová skupina, chinolinylová skupina, benzofuranylová skupina, benzothiofenylová skupina (thianaftenylová skupina) apod. Tyto skupiny mohou být volitelně substituovány kondenzovanými kruhovými strukturami nebo můstky, například skupinou OCHr-O.
Termín „alkoxyskupina“ znamená radikál-O-alkylovou skupinu. Příklady obsahují methoxy skupinu, ethoxy skupinu, propoxy skupinu apod.
Termín „aryloxyskupina“ představuje -O-arylovou skupinu, přičemž arylová skupina je defino20 vána výše.
Termín „cykloalkoxyskupina“ představuje -O-cykloalkylovou skupinu, přičemž cykloalkylová skupina je definována výše.
Termín „atom halogenu“ představuje atom chloru, fluoru, bromu nebo jodu. Termín „halogen“ představuje atom chloru, fluoru, bromu nebo jodu.
Obecně, různé skupiny nebo funkční skupiny proměnných ve vzorcích mohou být volitelně substituovány jedním nebo více vhodnými substituenty. Příklady substituentů jsou atom halogenu (F, Cl, Br nebo I), nižší alkylová skupina, skupina -OH, skupina-NO2, skupina -CN, skupina
-CO2H, nižší -O-alkylová skupina, -arylová skupina, -arylová-nižší alkylová skupina, skupina -CO2CH3, skupina ™CONH2, skupina -OCH2CONH2, skupina -NH2, skupina -SO2NH2, halogenalkylová skupina (např. skupina -CF3, skupina -CH2CF3), -O-halogenalkýlová skupina (např. skupina -OCF3, skupina -OCHF2) apod.
Termíny „obsahující“ a „zahrnující“ jsou použity otevřeně, v neomezujícím významu.
Rozumí se, že i když sloučenina vzorce I může mít projevy tautomerie, obrázky vzorců v tomto popisu úmyslně zobrazují pouze jednu možnou tautomemí formu. Rozumí se tedy, že ve vynálezu vzorce představují každou tautomemí formu zobrazené sloučeniny a nejsou omezeny pouze na specifickou tautomemí formu zobrazenou obrázky vzorců.
Některé ze sloučenin podle vynálezu mohou existovat jako jednoduché stereoizomery (tj. v podstatě bez dalšího stereoizomerů), racemáty a/nebo směsi enantiomerů a/nebo diastereomerů.
Všechny tyto jednotlivé stereoizomeiy, racemáty ajejich směsi jsou obsaženy v rozsahu předkládaného vynálezu. Výhodně sloučeniny podle vynálezu, které jsou opticky aktivní, jsou použity v opticky čisté formě.
Jak odborníci všeobecně vědí, opticky čistá sloučenina mající jedno chirální centrum, je slouče50 nina, která obsahuje v podstatě jeden ze dvou možných enantiomerů (tj. je enantiomemě čistá) a opticky čistá sloučenina mající více než jedno chirální centrum je sloučenina, která je Čistá diastereomericky a čistá enantioměmě. Výhodně jsou sloučeniny podle předkládaného vynálezu použity ve formě, která je alespoň z 90 % opticky čistá, tj. ve formě, která obsahuje alespoň z 90 % jeden izomer (80% enantiomemí nadbytek („e.e.“) nebo diastereomemí nadbytek („d.e.“)),
-16CZ 301667 B6 výhodněji alespoň z 95 % (90% e.e. nebo d.e.), ještě výhodněji alespoň z 97,5 % (95 % e.e. nebo
d.e.) a nejvýhodněji alespoň z 99 % (98% e.e. nebo d.e.).
Kromě toho se předpokládá, že vzorce pokrývají solvatované, jakož i nesolvatované formy ozna5 čených struktur. Například vzorec I zahrnuje sloučeniny určené struktury vhydratované i nehydratované formě. Další příklady solvátu zahrnují struktury v kombinaci s isopropanolem, ethanolem, methanolem, DMSO, ethylacetátem, octovou kyselinou nebo ethanolaminem.
Kromě sloučenin vzorce I, II, III a IV zahrnuje vynález farmaceuticky přijatelné prekurzory, i o farmaceuticky aktivní metabolity a farmaceuticky přijatelné soli těchto sloučenin.
„Farmaceuticky přijatelný prekurzor“ je sloučenina, která může být konvertována za fyziologických podmínek nebo solvolýzou na specifickou sloučeninu nebo na farmaceuticky přijatelnou sůl této sloučeniny.
„Farmaceuticky aktivní metabolit“ znamená farmakologicky aktivní produkt vytvořený tělesným metabolizmem ze specifické sloučeniny nebojejí soli. Metabolity sloučeniny mohou být identifikovány s použitím rutinních technik v oboru známých a jejich aktivity zjišťovány s použitím testů, jako jsou například testy popsané v tomto textu.
Prekurzory a aktivní metabolity sloučeniny mohou být identifikovány s použitím rutinních technik v oboru známých. (Viz např. Bertolíni, G. et al., J. Med. Chem., 40, 2011-2016, 1997, Shan, D. et al., J. Pharm. Sci., 86 (7), 765-767, Bagshawe K„ Drug Dev. Res., 34, 220-230, 1995, Bodor, N., Advances in Drug Res,, 13, 224-331, 1984, Bundgaard, H., Design of Prodrugs (Elsevier Press, 1985), a Larsen, I. K., Design and Application of Prodrugs, Drug Design and Development, Krogsgaard-Larsen et al., vyd,, Harwood Academie Publishers, 1991).
„Farmaceuticky přijatelná sůl“ znamená sůl, která si podržela biologickou účinnost volných kyselin a bází specifikovaných sloučenin a která není biologicky nebo jinak nežádoucí. Sloučenino na podle vynálezu může mít dostatečně kyselou, dostatečně bazickou nebo obě funkční skupiny a podle toho reagovat s jakýmkoliv počtem anorganických nebo organických bází a anorganických a organických kyselin, za vzniku farmaceuticky přijatelné soli. Příklady farmaceuticky přijatelných solí obsahují soli připravené reakcí sloučenin podle předkládaného vynálezu s minerální nebo organickou kyselinou nebo anorganickou bází, jako jsou například tyto soli: sulfáty, pyro35 sulfáty, bisulfáty, sulfity, bisulfíty, fosfáty, monohydrogenfosfáty, dihydrogen fosfáty, metafosfáty, pyrofosfáty, chloridy, bromidy, jodidy, acetáty, propionáty, dekanoáty, kapryláty, akiyláty, formiáty, isobutyráty, kaproáty, heptanoáty, propioláty, oxaláty, malonáty, sukcináty, suberáty, sebakáty, fumaráty, maleáty, butyn-l,4-dioáty, hexyn-1,6-dioáty, benzoáty, chlorbenzoáty, methylbenzoáty, dinitrobenzoáty, hydroxybenzoáty, methoxybenzoáty, ftaláty, sulfoná40 ty, xylensulfonáty, fenylacetáty, fenylpropionáty, fenylbutyráty, citráty, laktáty, γ-hydroxybutyráty, glykoláty, tartráty, methansulfonáty, propansulfonáty, naftalen-l-sulfonáty, naftalen2-suIfonáty a mandeláty.
Jestliže je sloučenina podle vynálezu báze, požadovaná farmaceuticky přijatelná sůl může být připravena jakýmkoliv vhodným způsobem v oboru dostupným, například ošetřením volné báze anorganickou kyselinou, jako je například chlorovodíková kyselina, bromovodíková kyselina, sírová kyselina, dusičná kyselina, fosforečná kyselina apod. Nebo organickou kyselinou, jako je například octová kyselina, maleinová kyselina, jantarová kyselina, mandlová kyselina, fumarová kyselina, malonová kyselina, pyrohroznová kyselina, oxalová kyselina, glykolová kyselina, sali50 cylová kyselina, pyranosidylová kyselina, jako je například glukuronová kyselina nebo galakturonová kyselina, alfa-hydroxykyselina, jako je například kyselina citrónová nebo kyselina vinná, aminokyselina, jako je například asparagová kyselina nebo glutamová kyselina, aromatická kyselina, jako je například benzoová kyselina nebo skořicová kyselina, sulfonová kyselina, jako je například p-toluensulfonová kyselina nebo ethansulfonová kyselina nebo podobně.
- 17CZ 301667 Bó
Jestliže je sloučenina podle vynálezu kyselina, požadovaná farmaceuticky přijatelná sůl může být připravena jakoukoliv vhodnou metodou, například ošetřením volné kyseliny anorganickou nebo organickou bází, jako je například amin (primární, sekundární nebo terciární), hydroxid alkalického kovu nebo hydroxid kovu alkalických zemin nebo podobně. Ilustrativní příklady vhodných solí zahrnují organické soli derivované z aminokyselin, jako je například glycin a arginin, čpavek, primární, sekundární a terciární aminy a cyklické aminy, jako je například piperidin, morfolin a piperazin a anorganické soli derivované ze sodíku, kalcia, draslíku, magnéza, manganu, železa, mědi, zinku, alumínia a lithia.
ίο V případě, že činidla jsou pevné látky, odborníci vědí, že sloučeniny a soli podle vynálezu mohou existovat v různých krystalických nebo póly morfii ích formách, předpokládá se tedy, že všechny jsou zahrnuty v rozsahu předkládaného vynálezu a specifikovaných vzorcích.
Terapeuticky účinná množství činidel podle vynálezu mohou být použita k léčbě onemocnění zprostředkovaných modulací nebo regulací proteinkinázy. „Účinné množství“ znamená množství činidla, které, když je podáváno savci, který toto léčení potřebuje, je postačující pro léčení nemoci zprostředkované aktivitou jedné nebo více proteinkináz, jako jsou například tyrozinkinázy. Tak např. terapeuticky účinné množství sloučeniny vzorce I, její soli, aktivního metabolitu nebo prekurzorů je množství postačující modulovat, regulovat nebo inhibovat aktivitu jedné nebo více proteinkináz tak, že chorobný stav, který je zprostředkován touto aktivitou, je redukován nebo zmírněn.
Množství daného činidla, které odpovídá tomuto množství, kolísá v závislosti na faktorech, jako je například konkrétní sloučenina, chorobný stav a jeho závažnost, identita (např. hmotnost) savce, který tuto léčbu potřebuje, ale může být přesto rutinně určeno odborníkem v oboru. Termín „léčba“ znamená alespoň zmírnění chorobného stavu savce, například Člověka, kteiý je ovlivněn, alespoň částečně, aktivitou jedné nebo více proteinkináz, jako jsou například tyrozinkinázy, a zahrnuje: prevencí výskytu chorobného stavu u savce, konkrétně když je zjištěno, že savec má predispozice k výskytu chorobného stavu, ale nemoc ještě nebyla diagnostikována, modulaci a/nebo inhibici chorobného stavu a/nebo úlevu od chorobného stavu.
Činidla podle vynálezu mohou být připravena s použitím reakcí a podle schémat syntézy, jak jsou popsána dále, s využitím technik v oboru dostupných a známých s použitím výchozích látek, které jsou snadno k dispozici.
V jednom obecném syntetickém procesu jsou sloučeniny vzorce I připraveny podle následujících reakčních schémat:
- 18CZ 301667 BÓ
Η . jn, (V)
1) modifikace
2) -Pg
6-nitroindazol (sloučenina V) byl podroben působení jodu a báze, např. NaOH, ve vodné/organické směsi, výhodně s dioxanem. Směs je acidifikována a produkt izolován filtrací. K výslednému 3-jod-6-nitroindazo!u ve směsi dichlormethanu a 50% vodného KOH při teplotě
0 °C bylo přidáno činidlo chránící skupiny („Pg“) (kde X - halogen), výhodně trimethylsilylethoxymethylchlorid (SEM-C1) a katalyzátor fázového přenosu, např. tetrabutylamoniumbromid (TBABr). Po 1 až 4 hodinách byly dvě fáze naředěný, organické vrstvy byly odděleny, usušeny nad sulfátem sodným, filtrovány a koncentrovány. Hrubý produkt byl purifikován chromatografii na silikagelu za vzniku sloučeniny vzorce VI. Ošetření sloučenin vzorce VI ve vhodném organicio kém rozpouštědle vhodným R'-organokovovým činidlem, výhodně kyselinou R-boronovou, v přítomnosti vodné báze, např. uhličitanu sodného, a vhodného katalyzátoru, výhodně Pd(PPh3)4 dalo, po extrakčním zpracování a chromatografii na silikagelu, sloučeniny vzorce VII, R1 substituent může být vyměněn se sloučeninami vzorce VII nebo pozdějšími meziprodukty uvedenými v těchto schématech oxidačním štěpením (např. ozonolýzou), pak následovala adice k výsledné aldehydové funkční skupině Wíttigovou nebo kondenzační transformací (typické příklady 42(a-e)). Ošetření sloučenin vzorce VII redukujícím činidlem, výhodně SnCl2, poskytuje, po obvyklém vodném zpracování a puri^kaci, sloučeniny vzorce VIII. Pro řadu derivátů, kde Y = NH nebo N—nižší alkylová skupina, mohou být sloučeniny vzorce VIII podrobeny
-19CZ 301667 B6 působení arylchloridy nebo heteroaryíchloridy, bromidy, jodidy nebo trifláty v přítomnosti báze, výhodně Cs2CO3 a katalyzátoru, výhodně Pd-BINAP, (a kde Y = N—nižší alkylová skupina, s následným alkylaěním krokem) za vzniku sloučenin vzorce X. Aby se vytvořily další Y vazby, byl ke sloučeninám vzorce VIII přidán dusitan sodný v chlazených standardních vodných kyselých podmínkách, pak následovalo přidání jodidu draselného a mírné zahřívání. Standardní zpracování a purifikace dalo vznik jodidovým sloučeninám vzorce IX.
Ošetření sloučenin vzorce IX organokovovým činidlem, např. butyllithiem, podporuje výměnu halogenu za lithium. Tento meziprodukt reagoval s R2 elektrofilem, např. karbonylovou skupinou io nebo triflátem, prostřednictvím možného zprostředkování dalšími kovy a katalyzátory, výhodně chloridem zinečnatým a Pd(PPh3)4 za vzniku sloučenin vzorce X. Alternativně mohou být sloučeniny vzorce IX podrobeny působení organokovového činidla, jako je například organoboronová kyselina v přítomnosti katalyzátoru, např. Pd(PPh3)4, v atmosféře oxidu uhelnatého za vzniku sloučenin vzorce X. Alternativně u derivátů, kde Y = NH nebo S, mohou být sloučeniny vzorce is IX podrobeny působení vhodných aminů nebo thiolů v přítomnosti báze, výhodně Cs2CO3 nebo
K3PO4 a katalyzátoru, výhodně Pd-BINAP nebo Pd-(bis-cykiohexyl)bifenylfosfinu za vzniku sloučenin vzorce X. Obvyklé výměny funkčních skupin, jako jsou například oxidace, redukce, alky láce, acylace, kondenzace a deprotekce, pak mohou být použity k další derivatizaci této rady za vzniku konečných sloučenin vzorce I.
Sloučeniny podle vynálezu vzorce I mohou také být připraveny podle obecného postupu ukázaného v následujícím schématu:
-20CZ 301667 B6
6-jodindazol (XI) byl podroben působení jodu a báze, např. NaOH, ve vodné/organické směsi, výhodně s dioxanem. Směs je acidifikována a produkt XII byl izolován filtrací. K výslednému
3,6-dijodindazolu ve směsi dichlormethanu a 50% vodného KOH pří teplotě 0 °C bylo přidáno činidlo chránící skupiny, výhodně SEM-Cl, a katalyzátor fázového přenosu, např. TBABr. Dvě fáze byly naředěny, organické vrstvy byly odděleny, usušeny nad sulfátem sodným, filtrovány a koncentrovány. Hrubý produkt byl purifikován chromatografii na silikagelu za vzniku sloučeniny vzorce XIII. Ošetření sloučenin vzorce XIII ve vhodném organickém rozpouštědle vhodným R2-organokovovým činidlem, např. R2-ZnCI nebo bor-R2-boronovým činidlem, a vhodného katalyzátoru, výhodně Pd(PPh3)4 dalo, po extrakčním zpracování a chromatografii na io silikagelu, sloučeniny vzorce XIV, Ošetření sloučenin vzorce XIV ve vhodném organickém rozpouštědle vhodným R‘-organokovovým činidlem (např. bor-R-boronovým činidlem nebo RZnCI), v přítomnosti vodné báze, uhličitanu sodného, a vodného katalyzátoru, výhodně Pd(PPh3)4 dalo, po extrakčním zpracování a chromatografii na silikagelu, sloučeniny vzorce XV. Obvyklé výměny funkčních skupin, jako jsou například oxidace, redukce, alkylace, acylace, kondenzace a is deprotekce, pak mohou být použity k další derivatizaci této řady za vzniku konečných sloučenin vzorce I.
Alternativně mohou být sloučeniny vzorce 1, kde R2 je substituovaná nebo nesubstituovaná skupina Y-Ar, kde Y je atom O nebo S, připraveny podle následujícího obecného schématu:
V (XV) tf
V (XVI) (XVII) katalyzátor, zahřívání nebo
DDQ modifikace /a'
Míchaný acetonový roztok 3-chlorcyklohex-2-enonu (XV), H-R2 a bezvodý uhličitan draselný byl zahříván kvaru pod zpětným chladičem po dobu 15 až 24 hodin, ochlazen a filtrován. Koncentrace a chromatografie filtrátu na silikagelu poskytla 3-R2-cyklohex-2-enon (XVI).
Ketony vzorce XVI mohou reagovat s vhodnou bází (M-B), výhodně lithiumbis(trimethyIsily 1)amidem a reagovat se skupinou R‘-CO-X (kde X = halogen), které po standardním kyselém zpracování a purifikaci poskytly sloučeniny vzorce XVII. Tento produkt, ve směsi HOAc
-21 CZ 301667 B6 a EtOH, smíchaný s monohydrátem hydrazinu, byl zahříván při vhodné teplotě po vhodnou dobu, výhodně v 60 až 80 °C po dobu 2 až 4 hodin. Po ochlazení byla směs nalita do saturovaného roztoku hydrouhličitanu sodného, extrahována organickým rozpouštědlem, koncentrována a purifikována na silikagelu za vzniku sloučeniny vzorce XVIII. Sloučeniny vzorce XVIII mohou být oxidovány s použitím velkého počtu známých metod za vzniku sloučenin vzorce I.
Další sloučeniny vzorce I mohou být připraveny analogickým způsobem k obecným postupům popsaným výše nebo detailními postupy popsanými v příkladech v tomto textu. Afinita sloučenin podle vynálezu k receptoru může být zvýšena zajištěním mnoha kopií ligandu v těsné blízkosti, io výhodně s použitím kostry poskytnuté nosičovou skupinou. Bylo ukázáno, že poskytnutí takových multivalentních sloučenin s optimálními prostory mezi skupinami dramaticky zlepšuje vazbu k receptoru. (Viz např. Lee et al., Biochem, 23, 4255, 1984). Multívalentnost a prostorové oddělení mohou být řízeny selekcí vhodných nosičových skupin nebo spojovacích jednotek.
Takové skupiny zahrnují molekulární nosiče, které obsahují velký počet funkčních skupin, které mohou reagovat s funkčními skupinami sdruženými se sloučeninami podle vynálezu. Samozřejmě může být použit velký počet nosičů, včetně proteinů, jako je například BSA nebo HAS, rozmanité peptidy včetně například pentapeptidů, dekapeptidů, pentadekapeptidů apod. Peptidy nebo proteiny mohou obsahovat požadovaný počet aminokyselinových zbytků majících volné aminoskupiny ve svých postranních řetězcích, ale mohou také být použity další funkční skupiny, jako jsou například sulfhydrylové skupiny nebo hydroxylové skupiny, za zisku stabilních vazeb.
Sloučeniny, které silně regulují, modulují nebo inhibují proteinkinázovou aktivitu sdruženou s receptory VEGF, FGF, komplexy CDK, TEK, CHK1, LCK, FAK a kinázou fosforylázy, kromě jiných, a které inhibují angiogenezi a/nebo buněčnou proliferaci jsou žádoucí a jsou jedním výhodným provedením předkládaného vynálezu. Předkládaný vynález se dále týká způsobu modulace nebo inhibice proteinkinázové aktivity, například v savčí tkáni, podáváním činidla podle vynálezu. Aktivita sloučenin podle vynálezu jako modulátorů proteinkinázové aktivity, jako je například aktivita kináz, může být měřena jakoukoliv metodou odborníkům dostupnou, včetně testů in vivo a/nebo in vitro. Příklady vhodných testů pro měření aktivity obsahují testy popsané v pracích Parast C. et al., Biochemistry, 37, 16788-16801, 1998, Jeffrey et al., Nátuře, 376, 313320, 1995, WIPO mezinárodní patentová přihláška WO 97/34876 a WIPO mezinárodní patentová přihláška WO 96/14843. Tyto vlastnosti mohou být stanoveny, například s použitím jednoho nebo několika biologických testovacích postupů uvedených v příkladech níže,
Aktivní činidla podle vynálezu mohou být formulována do farmaceutických přípravků, jak je popsáno dále. Farmaceutické přípravky podle tohoto vynálezu obsahují účinné modulační, regulační nebo inhibiční množství sloučenin vzorce I, Η, III nebo IV a inertní, farmaceuticky přijatelný nosič nebo ředidlo. V jednom provedení farmaceutických přípravků jsou poskytnuty účinné hladiny činidel podle vynálezu tak, aby bylo dosaženo terapeuticky prospěšného účinku týkají40 čího se modulace proteinkináz. „Účinnými hladinami“ jsou míněny hladiny, při kterých je účinek proteinkináz regulován na minimum. Tyto přípravky jsou připraveny v jednotkové lékové formě vhodné pro požadovaný způsob podávání, např. parenterální nebo perorální podávání.
Činidlo podle vynálezu je podáván v obvyklé lékové formě připravené kombinací terapeuticky účinného množství činidla (např. sloučeniny vzorce I) jako účinné složky s vhodnými farmaceutickými nosiči nebo ředidly podle obvyklých postupů. Tyto postupy mohou zahrnovat míchání, granulaci a lisování, nebo rozpuštění složek, jak je to třeba v závislosti na požadovaném přípravku.
so Použitý farmaceutický nosič může být buď pevný, nebo tekutý. Příklady pevných nosičů jsou laktóza, sacharóza, talek, želatina, agar, pektin, arabská guma, stearát hořečnatý, kyselina stearová apod. Příklady tekutých nosičů jsou sirup, arašídový olej, olivový olej, voda apod. Podobně nosič nebo ředidlo může zahrnovat látku umožňující časově opožděné nebo časově řízené uvolňování, která je v oboru známá, jako je například glycerylmonostearát nebo glycery ld i stearát,
-22CZ 301667 B6 a sice samotnou, nebo s voskem, ethylcelulózou, hydroxypropy Imethy lcelulózou, methylrnethakrylátem apod.
Může být použita celá řada farmaceutických forem. Tedy, jestliže byl použit pevný nosič, pří5 pravěk může být formulován do tablet, vložen do tvrdých želatinových tobolek ve formě prášku nebo pelet, nebo může být ve formě pastilek nebo zdravotních bonbónů. Množství pevného nosiče může kolísat, ale obecně je přibližně od 25 mg do přibližně 1 g. Jestliže byl použit tekutý nosič, přípravek je ve formě sirupu, emulze, měkké želatinové tobolky, sterilního roztoku pro injekci nebo suspenze v ampuli nebo lahvičce nebo nevodné tekuté suspenze.
Aby se získala stabilní ve vodě rozpustná léková forma, je farmaceuticky přijatelná sůl činidla podle vynálezu rozpuštěna ve vodném roztoku organické nebo anorganické kyseliny, jako je například 0,3M roztok jantarové kyseliny nebo kyseliny citrónové. Jestliže není dostupná forma rozpustné soli, Činidlo může být rozpuštěno ve vhodném dalším rozpouštědle nebo kombinaci dalších rozpouštědel. Příklady vhodných dalších rozpouštědel bez omezení zahrnují alkohol, propylenglykol, polyethylenglykol 300, polysorbát 80, glycerin apod. v koncentracích v rozmezí od 0 do 60% celkového objemu. V příkladném provedení byla sloučenina vzorce I rozpuštěna v DMSO a naředěna vodou. Přípravek může také být ve formě roztoku soli účinné složky ve vhodném vodném vehikulu, jako je například voda nebo isotonický fyziologický roztok nebo roztok dextrózy.
Je známo, že aktuální dávky činidel použitých v přípravcích podle tohoto vynálezu kolísají podle konkrétního použitého komplexu formulovaného konkrétního přípravku, způsobu podávání a konkrétního místa podávání, příjemce a léčené nemoci. Optimální dávky pro dané chorobné stavy může být stanoven odborníky s použitím obvyklých testů pro stanovení dávky se zřetelem k experimentálním datům pro dané činidlo. Pro perorální podávání příkladná denní dávka obecně použitá je přibližně od 0,001 přibližně do 1000 mg/kg tělesné hmotnosti, výhodněji přibližně od 0,001 přibližně do 50 mg/kg tělesné hmotnosti, s kúrami léčení opakovanými ve vhodných intervalech. Podávání prekurzorů jsou typicky dávkovány v hmotnostních hladinách, které jsou chemicky ekvivalentní k hmotnostním hladinám plně aktivní formy.
Přípravky podle vynálezu mohou být vyráběny metodami obecně známými pro přípravu farmaceutických přípravků, např. obvyklými technikami, jako je například míchání, rozpuštění, granulace, dražování, „levigating“, emulgace, enkapsulace, vychytávání nebo lyofilizace. Farmaceutic35 ké přípravky mohou být formulovány obvyklým způsobem s použitím jednoho nebo více fyziologicky přijatelných nosičů, které mohou být vybrány ze skupiny, kterou tvoří excipienty a další látky, které usnadňují zpracování účinných sloučenin do přípravků, které mohou být použity farmaceuticky.
Vlastní formulace je závislá na vybraném způsobu podávání. Pro injekce mohou být činidla podle vynálezu formulována do vodných roztoků, výhodně ve fyziologicky kompatibilních pufrech, jako je například Hanksův roztok, Ringerův roztok nebo fyziologický roztok. Pro podávání přes sliznice jsou ve formulacích použita penetrující činidla vhodná k přestoupení bariéry. Taková penetrující činidla jsou v oboru obecně známa.
Pro perorální podávání mohou být sloučeniny snadno formulovány kombinací účinných sloučenin s farmaceuticky přijatelnými nosiči v oboru známými. Takové nosiče umožňují, že sloučeniny podle vynálezu jsou formulována jako tablety, pilulky, dražé, tobolky, tekutiny, gely, sirupy, suspenze, suspenze apod. pro perorální požívání léčeným pacientem. Farmaceutické přípravky pro perorální použití mohou být získány s použitím pevného exeipientů ve směsi s účinnou složkou (činidlem), volitelně namletím výsledné směsi a zpracováním směsi granulí po přidání vhodných pomocných látek, je-li žádoucí, pro přípravu jader pro tablety nebo dražé. Vhodné excipienty obsahují: plnidla, jako jsou například sacharidy, včetně laktózy, sacharózy, mannitolu nebo sorbitolu, a celulózové přípravky, například, kukuřičný škrob, pšeničný škrob, rýžový škrob, bramborový škrob, želatina, guma, methylcelulóza, hydroxypropylmethylcelulóza,
-23CZ 301667 B6 karboxymethylcelulóza sodná nebo polyvinylpyrrolidon (PVP). Je-li to třeba, mohou být přidána rozvolňovadla, jako je například zesítěný polyvinylpyrrolidon, agar nebo kyselina alginová nebo její sůl, jako je například alginát sodný.
Jádra draze jsou opatřena vhodnými obaly. Pro tento účel mohou být použity koncentrované roztoky sacharidů, které volitelně zahrnují arabskou gumu, polyvinylpyrrolidon, gelový základ Carbopol, polyethylenglykol a/nebo oxid titaničitý, roztok laku a vhodná organická rozpouštědla nebo směsi rozpouštědel. Barviva nebo pigmenty mohou být přidány do obalů (potahů) tablet nebo dražé pro identifikaci nebo pro charakterizaci odlišných kombinací aktivních činidel.
Farmaceutický přípravky, které mohou být použity perorálně, zahrnují „push-fít“ tobolky vytvořené ze želatiny, a také mékké uzavřené tobolky vytvořené ze želatiny a změkčovadla, jako je například glycerol nebo sorbitol. „Push-fít“ tobolky mohou obsahovat účinné složky ve směsi s plnidly, jako je například laktóza, pojivý, jako jsou například škroby, a/nebo lubrikanty, jako je například talek nebo stearát hořečnatý a, volitelně, stabilizátory. V měkkých tobolkách mohou být aktivní činidla rozpuštěna nebo suspendována ve vhodných tekutinách, jako jsou například mastné oleje, tekutý parafin nebo tekuté polyethylenglykoly. Kromě toho mohou být přidány stabilizátory. Všechny formulace pro perorální podávání by měly být v dávkách vhodných pro toto podávání. Pro bukal ní podávání mohou mít přípravky formu tablety nebo pastilky formu lo20 váné obvyklým způsobem.
Pro podávání intranazálně nebo inhalací byly sloučeniny pro použití podle předkládaného vynálezu obyčejně formulovány do aerosolového spreje, který je aplikován z tlakového balení nebo rozprašovače za pomoci vhodného hnacího plynu (propelentu), např. dichlordifiuormethanu, tri25 chlorfluormethanu, dichlortetrafluorethanu, oxidu uhličitého nebo dalšího vhodného plynu. V případě tlakového aerosolového balení může být jednotková dávka určena pomocí vhodného dávkovači ho ventilu pro aplikaci odměřené dávky. Tobolky a zásobníky ze želatiny pro použití v inhalátoru nebo přístroji pro insuflaci apod. mohou být formulovány tak, že obsahují práškovou směs sloučeniny a vhodný práškovou bázi, jako je například laktóza nebo škrob.
Sloučeniny mohou být formulovány pro parenterální podávání injekcí, např. injekcí bolusu nebo kontinuální infúzí. Formulace pro injekce mohou být předloženy v jednotkové lékové formě, např. v ampulích nebo v nádobkách s více dávkami, s přidanými konzervačními činidly. Přípravky mohou mít takové formy jako suspenze, roztoky nebo emulze v olejových nebo vodných vehi35 kůlech a mohou obsahovat formulační činidla, jako jsou například suspendující činidla, stabilizátory a/nebo dispergaění činidla.
Farmaceutické formulace pro parenterální podávání zahrnují vodné roztoky účinných sloučenin ve formě rozpustné ve vodě. Kromě toho mohou být připraveny suspenze účinných činidel jako příslušné olejové injekční suspenze. Vhodná lipofilní rozpouštědla nebo vehikula obsahují mastné oleje, jako je například sezamový olej nebo syntetické estery mastných kyselin, jako je například ethyloleát nebo triglyceridy nebo lipozomy. Vodné injekční suspenze mohou obsahovat látky, které zvyšují viskozitu suspenze, jako je například karboxymethylcelulóza sodná, sorbitol nebo dextran. Volitelně suspenze mohou také obsahovat vhodné stabilizátory nebo činidla, která zvyšují rozpustnost sloučenin, aby byla umožněna příprava vysoce koncentrovaných roztoků.
Pro podávání do oka je sloučenina vzorce I, II, III nebo IV dodávána ve farmaceuticky přijatelném očním vehikulu, takže je sloučenina udržována v kontaktu s očním povrchem po dostatečně dlouhou dobu, aby se umožnilo sloučenině penetrovat rohovkovou oblast a vnitřní oblasti oka, so včetně, například, přední komory, zadní komory, sklivce, komorové vody, tekutiny sklivce, rohovky, duhovky/řasnatého tělesa, čočky, cévnatky/sítnice. Farmaceuticky přijatelné oční vehikulum může být mast, rostlinný olej nebo opouzdřovací látka. Sloučenina podle vynálezu může také být injikována přímo do sklivce a komorové vody.
-24CZ 301667 B6
Alternativně může být účinná složka v práškové formě pro rekonstituci s vhodným vehikulem, např. sterilní vodou bez pyrogenu, těsně před použitím. Sloučeniny mohou také být formulovány v rektálních přípravcích, jako jsou například čípky nebo retenční klystýry, např. obsahující obvyklé čípkové báze, jako je například kakaové máslo nebo další glycerídy.
Kromě formulací popsaných výše mohou také být sloučeniny formulovány jako depotní přípravky. Takové dlouhodobě působící formulace mohou být podávány implantací (například, subkutánně nebo intramuskulámě) nebo intramuskulámí injekcí. Tak například sloučeniny mohou být formulovány s vhodnými polymemími nebo hydrofobními látkami (například, jako emulze io v přijatelném oleji) nebo iontoměničové pryskyřice nebo jako pomalu rozpustné deriváty, například, jako pomalu rozpustná sůl.
Farmaceutickým nosičem pro hydrofobní sloučeniny je systém dalších rozpouštědel (kosolventů), obsahující benzylalkohol, nepolární surfaktant, organický polymer mísitelný s vodou a vodná fáze. Systém dalších rozpouštědel může být VPD systém dalších rozpouštědel. VPD je roztok 3% (hmotnost/objem) benzylalkoholu, 8% (hmotnost/objem) nepolárního surfaktantu polysorbátu 80 a 65% (hmotnost/objem) polyethylenglykolu 300, doplněný do objemu absolutním ethanolem. VPD systém dalších rozpouštědel (VPD:5W) obsahuje VPD naředěný 1:1 roztokem 5% dextrózy ve vodě. Tento systém dalších rozpouštědel rozpouští dobře hydrofobní sloučeniny a samotný je málo toxický po systémovém podávání. Přirozeně vzájemný poměr systému dalších rozpouštědel může být značně změněn bez porušení jeho charakteristické rozpustnosti a toxicity. Navíc může být změněna identita složek systému dalších rozpouštědel: například mohou být použity další nepolární surfaktanty s nízkou toxicitou namísto polysorbátu 80, může být změněna velikost frakce polyethylenglykolu, další biokompatibilní polymery mohou nahradit polyethylenglykol, např. polyvinylpyrrolidon a dextróza může být substituována dalšími sacharidy nebo polysacharidy.
Alternativně mohou být použity pro hydrofobní farmaceutické sloučeniny další aplikační systémy. Lipozomy a emulze jsou známé příklady aplikačních vehikul nebo nosičů pro hydrofobní léky. Mohou být také použita určitá organická rozpouštědla, jako je například dimethylsulfoxid, ačkoliv obvykle za cenu vyšší toxicity. Kromě toho mohou být sloučeniny aplikovány s použitím systému s prodlouženým uvolňováním, jako jsou například semipermeabilní matrice pevných hydrofobních polymerů obsahující terapeutické činidlo. Byly zavedeny také různé materiály umožňující prodloužené uvolňování, které jsou odborníkům známy. Tobolky s prodlouženým uvolňováním mohou, v závislosti na své chemické povaze, uvolňovat sloučeniny po několik týdnů až 100 dnů. V závislosti na chemické povaze a biologické stabilitě terapeutického činidla mohou být použity pro stabilizaci proteinu další strategie.
Farmaceutické přípravky také mohou obsahovat vhodné pevné nebo gelové nosiče nebo exci40 pienty. Příklady takových nosičů nebo excipientů obsahují uhličitan vápenatý, fosfát vápenatý, sacharidy, Škroby, deriváty celulózy, želatinu a polymery, jako jsou například polyethylenglykoly.
Některé ze sloučenin podle vynálezu mohou být poskytnuty jako soli s farmaceuticky kompati45 bilními protiionty (counterionty). Farmaceuticky kompatibilní soli mohou být vytvořeny s mnoha kyselinami, včetně chlorovodíkové, sírové, octové, mléčné, vinné, jablečné, jantarové, apod. Soli mají tendenci k tomu, že jsou rozpustnější ve vodných nebo dalších protonových rozpouštědlech než odpovídající formy s volnou bází.
Příprava výhodných sloučenin podle předkládaného vynálezu je popsána detailně v následujících příkladech, ale odborník rozpozná, které popsané chemické reakce mohou být snadno upraveny k přípravě celé řady dalších inhibitorů proteinkináz podle vynálezu. Například syntéza sloučenin podle vynálezu, které nejsou uvedeny v příkladech, může být úspěšně prováděna modifikací odborníkům známou, např. užitím vhodné ochrany pro interferující skupiny, záměnou vhodným reagencií v oboru známých nebo vytvořením rutinních modifikací reakčních podmínek. Altema-25CZ 301667 B6 tivně další reakce popsané v tomto textu nebo v oboru známé jsou považovány za použitelné pro přípravu dalších sloučenin podle vynálezu.
$ Příklady provedeni vynálezu
V příkladech popsaných dále, není-li uvedeno jinak, jsou všechny teploty udávány ve stupních Celsia a všechny části a procenta jsou hmotnostní. Reagencie byly zakoupeny od komerčních dodavatelů, jako je například firma Aldrich Chemical Company nebo firma Lancaster Synthesis io Ltd. a byly použity bez další purifikace, není-li uvedeno jinak. Tetrahydrofuran (THF), N,N-dimethylformamid (DMF), dichlormethan, toluen a dioxan byly zakoupeny od firmy Aldrich v zapečetěných lahvích a použity hned po obdržení. Všechna rozpouštědla byla puntíkována s použitím standardních metod odborníkům známých, není-li uvedeno jinak.
is Reakce uvedené níže byly obecně prováděny pod přetlakem argonu nebo dusíku nebo s vysoušením zkumavky, pří teplotě místnosti (není-li uvedeno jinak), v bezvodých rozpouštědlech, a reakční baňky byly uzavřeny gumovými zátkami pro zavádění substrátů a reagencií prostřednictvím injekční stříkačky. Chemické sklo bylo sušeno v pícce a/nebo bylo sušeno zahříváním. Analytická chromatografie na tenké vrstvě (TLC) byla prováděna na tepelně ošetřených skleněných destičkách se silikagelem 60 F 254 Analtech (0,25 mm) a pomocí eluce vhodnými poměry rozpouštědel (objem/objem) a jsou uvedeny na patřičném místě. Reakce byly testovány TLC a ukončeny poté, co bylo usouzeno, že výchozí látka je spotřebována.
Vizualizace TLC destiček byla prováděna postřikem p-anisaldehydovým činidlem nebo fosfo25 molybdenovou kyselinou (Aldrich Chemical 20 % (hmotnostních) v ethanolu) a aktivací zahříváním. Zpracování bylo typicky prováděno zdvojením reakčního objemu reakčním rozpouštědlem nebo extrakčním rozpouštědlem, a pak promytím uvedenými vodnými roztoky s použitím 25 % objemu zextrakčního objemu, není-li uvedeno jinak. Roztoky s produktem byly usušeny nad bezvodým Na2SO4 před filtrací a evaporací rozpouštědel při sníženém tlaku na rotační odpařo30 vačce, pak se uvádí, že rozpouštědla byla odstraněna ve vakuu. Velmi rychlá chromatografie (flash chromatography) na koloně (Still et al., J. Org. Chem., 43, 2923 1978) byla prováděna s použitím silikagelu pro velmi rychlou chromatografií (47-61 μιη, Baker) a silikagelu: poměr hrubé látky přibližně 20:1 až 50:1, není-li uvedeno jinak. Hydrogenolýza byla prováděna při tlaku uvedeném v příkladech nebo při tlaku okolí.
'H-NMR spektra byla zaznamenávána na Brukerově přístroji pracujícím ve 300 MHz a 13C-NMR spektra byla zaznamenávána v 75 MHz. NMR spektra byla získána jako roztoky CDCh (udáváno v ppm), s použitím chloroformu jako referenčního standardu (7,25 ppm a 77,00 ppm) nebo CDOD (3,4 a 4,8 ppm a 49,3 ppm) nebo vnitřně tetramethylsilan (0,00 ppm), kde to bylo potřebné. Další NMR rozpouštědla byla použita podle potřeby. Kde je uveden větší počet vrcholů, byly použity následující zkratky: s (singlet), d (dublet), t (triplet), m (multiplet), š (široký), dd (dublet dubletů), dt (doublet tripletů). Kde jsou uvedeny kondenzační konstanty, jsou v jednotkách Hertz (Hz).
Infračervená (IR) spektra byla zaznamenávána na spektrometru Perkin-Elmer FT-IR pro čisté oleje, jako KBr pelety nebo jako roztoky CDCh a kde jsou uvedeny, jsou udávány ve vlnočtu (cm'). Hmotnostní spektra byla získána s použitím LSIMS nebo elektrosprejové metody. Všechny teploty tání (tt) byly nekorigovány.
-26CZ 301667 B6
Příklad l(a)
*205 mg (0,461 mmol) (teoreticky) 3-[E/Z-2-(3,4-dimethoxyfenyl)vinyl]-6-[3-methoxy—4(methoxymethoxy)fenyl]“lH-indazolu bylo rozpuštěno v 10 ml tetrahydrofuranu (THF) a bylo podrobeno působení 10 ml vody a 20 ml trifluoroctové kyseliny (TFA). Reakční směs byla ponechána za míchání ve 23 °C po dobu 30 minut. Směs byla naředěna 100 ml toluenu a těkavé látky byly odstraněny při sníženém tlaku 3,99 kPa (30 mm Hg, 35 °C) za vzniku koncentrovaného objemu *5 ml. Opět bylo přidáno 100 ml toluenu a směs byla koncentrována při sníženém tlaku za vzniku surové látky, která ještě obsahovala částečně kyselinu. Látka byla rozdělena mezi ethylacetát a saturovaný hydrouhličitan sodný, organická látka byla oddělena, usušena nad sulfátem sodným, dekantována a koncentrována při sníženém tlaku. *185 mg (0,461 mmol) (teoreticky)) zbytku, směsi olefinových izomerů, bylo nabráno do 50 ml dichlormethanu ve 23 °C a bylo podrobeno působení 80 mg jodu. Směs byla ponechána za míchání ve 23 ŮC po dobu 12 hodin. Směs byla podrobena působení 10 ml saturovaného hydrouhličitanu sodného 10 ml a 5% vodného bisulfátu sodného. Směs byla naředěna 200 ml ethylacetátu a organická látka byla promyta 100 ml saturovaného hydrouhličitanu sodného, usušena nad sulfátem sodným, dekantována a koncentrována při sníženém tlaku za vzniku surového produktu. Surový produkt byl puntíkován na 40 ml silikagelu (směs ethylacetátu a hexanu 6:4 -> 7:3) a všechny frakce obsahující požadovaný produkt byly spojeny, koncentrovány a precipitovány z dvoj vrstvy dichlormethanu a hexanu (1:3) za vzniku 93 mg (spojené výtěžky) 3-[E-2-(3,4-dimethoxyfenyl)vinyl]-6-(3-methoxy-4-hydroxyfenyl)-lH-indazolu jako bílé pevné látky: Rf sm 0,42, p 0,35 (směs ethylacetátu a hexanu 7:3), FTIR (tenký film) 3324, 1600, 1514, 1463, 1422, 1264, 1137, 1024, 959, 852 cm’1, ‘HNMR (CDCh) δ 10,0 (š s, IH), 8,08 (d, IH, J = 8,4 Hz), 7,59 (s, IH), 7,49 (d, IH, J = 16,6 Hz), 7,45 (dd, IH, J = 1,4, 8,4 Hz), 7,34 (d, IH, J= 16,6 Hz), 7,20- 7,12 (m, 4H), 7,03 (d, IH, J= 8,0 Hz), 6,91 (d, IH, J= 8,2 Hz), 5,68 (š s, IH), 3,99 (s, 3H), 3,97 (s, 3H), 3,93 (s, 3H), l3C NMR (CDCh) δ 149,6, 149,5, 146,0, 144,0, 142,6, 140,8, 133,9, 131,4, 130,7, 121,7, 121,4, 120,9, 120,4, 120,2, 118,6, 115,4, 111,7, 110,8, 109,1, 108,2, 56,4, 56,3, 56,2. HRMS (ES) [M+H]/z vypočteno 403,1658, změřeno 403,1658. [M-H]/z vypočteno 401, změřeno 401.
Výchozí látka byla připravena takto:
(i)
ČQ''
NaNOs. HCI Kl. H2O,0až50*C
--->
čo
Ke 40,8 g (0,3065 mol, 1 ekv.) 6-aminoindazolu v baňce s kulatým dnem o objemu 2 litrů (2 1) obsahující velké magnetické míchadlo bylo přidáno 256 g ledu, pak následovalo 128 ml vody a reakční nádoba byla ponořena do ledové lázně. K této míchané suspenzi bylo při teplotě 0 °C přidáno 128 ml (1,53 mol, 5 ekv.) koncentrované vodné HCI. Hned poté bylo přidáno 23,3 g (0,338 mol, 1,1 ekv.) roztoku NaNO2 v 96 ml vody. Po 10 minutách míchání při teplotě 0 °C bylo přidáno 61 g (0,368 mol, 1,2 ekv.) Kl zpočátku velmi pomalu (najednou po *100 mg, protože první malé dávky Kl způsobují prudký vývin plynu), a pak rychleji (celková doba 5 minut). Chladná lázeň byla odstraněna a reakční směs byla zahřáta na 40 °C (vyvíjel se plyn). Když
-27CZ 301667 B6 klesla rychlost vývoje plynu (~30 minut), reakční směs byla zahřáta na 50 °C po dobu 30 minut.
Směs pak byla ochlazena na 23 °C a bylo přidáno 320 ml 3N NaOH pro neutralizaci, a pak následovalo 320 ml 50% saturovaného NaHCO3. Suspenze pak byla filtrována přes Buchnerovu nálevku za vzniku tmavě červenohnědé pevné látky. Pevná látka byla nabrána do 800 ml ohřátého THF a za míchání bylo přidáno 600 ml suchého silikagelu. K této suspenzi bylo přidáno 1,2 I hexanu a směs byla vakuově filtrována přes krátký sloupec 300 ml silikagelu ve velkém filtru s fritou. Silikagel byl dále promyt 2 1 40% THF v hexanu. Filtráty byly spojeny a koncentrovány při sníženém tlaku za vzniku pevné látky. Pevná látka byla dále triturována -100 ml ethylacetátu, filtrována a usušena při sníženém tlaku za vzniku 36,1 g (48% výtěžek) 6-jod-lHio indazolu jako světle hnědé pevné látky: Rf sm 0,12, p 0,48 (směs hexanu a EtOAc 1:1),1H NMR (300 MHz, CDCl·,) 7,9 (s, IH), 7,8 (s, IH), 7,42 (d, IH), 7,33 (d, IH), MS (ES) [M+H]/z vypočteno 245, změřeno 245, [M-H]/z vypočteno 243, změřeno 243.
NtO-VBu,MUCt, THF,0*C,40 mkt (ii)
K roztoku 7,35 g (30,1 mmol, 1 ekv.) 6-jod-lH-indazolu ve 100 ml THF ochlazeného na 0 °C v argonové atmosféře bylo přidáno 2,89 g (30,1 mmol, 1 ekv.) t-butoxidu sodného. Byla pozorována změna barvy z oranžové na červenou. V jedné dávce bylo přidáno 6,60 g (30,1 mmol, 1 ekv.) mesitylensulfonylchloridu a ledová lázeň byla odstraněna a reakční směs byla ponechána ohřát se na 23 °C. Po 40 minutách byla směs zastavena saturovaným chloridem amonným a rozdělena mezi vodu a ethylacetát. Vodná vrstva byla extrahována celkem 3 krát ethylacetátem. Spojené organické látky byly promyty solankou, usušeny nad sulfátem sodným a koncentrovány při sníženém tlaku za vzniku 12,8 g (100 % výtěžek, směs 2:1) 6-jod-l-(2,4,6-trimethylbenzensulfonyl)-lH-indazolu jako oranžové pevné látky. lH NMR (CDCI5) 8,51 (s, IH), 7,95 (s, 0,66H, hlavní izomer), 7,91 (s, 0,33H, vedlejší izomer), 7,47 (d, 0,33H, J = 8,4 Hz), 7,29 (d, 0,33H, J ~ 8,4 Hz), 7,26 (d, 0,66H, J = 8,9 Hz), 7,18 (d, 0,66H, 8,9 Hz), 6,84 (s, 2H), 2,51 (s, 6H), 2,15 (s, 3H).
(iii) '•rp'0 * tO'
Směs 5,78 g (13,56mmol, 1,00 ekv.) 6-jod-l-(2A6-trimethylbenzensulfonyl)-lH“indazolu a 3,45 g (16,27 mmol, 1,20 ekv.) 3-methoxy-4-(methoxymethoxy)benzenboronové kyseliny v argonové atmosféře byla rozpuštěna v 15 ml dioxanu a 2,0 ml vody. K tomuto roztoku bylo přidáno 2,83 ml (20,3 mmol, 1,5 ekv.) triethylaminu, 2,8 g (20,3 mmol, 1,5 ekv.) uhličitanu dra35 selného a 476 mg (0,678 mmol, 0,05 ekv.) dichlorbis(trifenylfosfin)palladia. Reakční směs byla zahřívána na 90 °C po dobu 2 hodin, a pak byla ochlazena na 23 °C. Směs byla oddělena mezi 250 ml ethylacetátu a 150 ml saturovaného hydrouhličitanu sodného. Organická látka byla usušena nad sulfátem sodným, dekantována a koncentrována při sníženém tlaku za vzniku surového M3-methoxy—f-methoxy methoxy fenyl H42,4,6-tr i methy lbenzensul fony l)-I H40 indazolu, který byl sušen za vysokého vakua po dobu 15 hodin a byl použit bez další purifikace.
3-methoxy-4-( methoxy methoxy )benzenboronová kyselina byla připravena takto: v baňce o objemu 100 ml byla připravena směs 50% KOH ve vod (20 g KOH, 7 ekv., 20 g ledu) v argonové atmosféře. K této rychle míchané směsi při teplotě 0 °C (udržované v ledové lázni) bylo přidáno 50 ml dichlormethanu, pak následovalo 10,1 g (50 mmol, 1,00 ekv.) 4~brom-2methoxyfenolu, 4,00 ml (42,5 mmol, 1,05 ekv.) methoxymethylchloridu M0MC1) a 322 mg
-28CZ 301667 B6 (1 mmol, 0,02) ekv.) tetrabutylamoniumbromidu. Lázeň byla odstraněna a směs byla pomalu ponechána ohřát se na 23 °C za rychlého míchání po dobu 2 hodin. Směs byla přenesena do dělicí nálevky a naředěna 350 ml dichlormethanu a 300 ml vody, které jsou použity k usnadnění přenosu. Organická látka (nyní spodní vrstva) byla oddělena, usušena nad sulfátem sodným, dekantována a koncentrována pri sníženém tlaku za vzniku 11,9 g (97 %) 4-brom-2-methoxyHmethoxymethoxy)benzenu jako žluté kapaliny, která je přečištěna 'HNMR: 'H NMR (CDCl·,) δ 7,0 (s, 3H), 5,13 (s, 2H), 3,84 (s, 3H), 3,47 (s, 3H). MS (El) [M+H]/z vypočteno 235, změřeno 235. Do baňky s kulatým dnem o objemu 50 ml bylo nabráno 4,80 g (19,4 mmol, 1,00 ekv.) 4-brom-2-methoxy-l-(methoxymethoxy)benzenu v 35 ml THF a bylo ochlazeno na -78 °C io (20 minut pro tento objem). Ktéto směsi bylo přidáno 12,75 ml 1,6M v hexanu (20,4 mmol, 1,05 ekv.) n-BuLi a směs byla ponechána za míchání v -78 °C po dobu 40 minut. Směs pak byla přidána kanylou do druhé baňky obsahující 22 ml (194 mmol, 10 ekv.) B(OMe)3 v 50 ml THF v -78 °C. Po 20 minutách byla chladná lázeň odstraněna. Po 15 minutách zahřívání (-0 °C, led na boku baňky začal tát) bylo přidáno 50 ml vody k reakční směsi, která byla míchána po dobu
45 minut. Směs byla koncentrována pří sníženém tlaku, aby se odstranila většina THF, a pak byla rozdělena mezí 300 ml ethylacetátu a 150 ml vody, která byla acidifikována přidáním malého množství, -10 ml, 20% kyseliny citrónové. Organická látka byla usušena nad sulfátem sodným a koncentrována pri sníženém tlaku za vzniku pevné látky. Triturace 10 ml ethylacetátu a 5 ml hexanu následovaná filtrací poskytla 3,15 g (77%) 3-methoxy-4-(methoxymethoxy)benzen20 boronové kyseliny jako bílé pevné látky: Rf sm 0,59, p 0,18 (směs ethylacetátu a hexanu 1:1), 1H NMR (CDCI3) δ 7,85 (d, 1H, J = 8 Hz), 7,72 (s, 1H), 7,22 (d, 1H, J = 8 Hz), 5,30 (s, 2H), 4,00 (s, 3H), 3,55 (s, 3H).
(iv)
Nepurifikovaný 6-(3-methoxy-4-methoxymethoxyfenyl)-l-(2,4,6-trimethylbenzensulfonyl)1 H-indazol (v argonové atmosféře) byl rozpuštěn ve 20 ml THF a byl podroben působení 70 ml IN NaOH v MeOH (odplyněno probubláváním přes argon po dobu 3 až 5 minut). Směs byla zahřívána na 45 °C po dobu 1 hodiny a ponechána vychladnout. Směs byla neutralizována přidáním 50 ml IN HCl, pak následovalo 200 ml saturovaného hydrouhličitanu sodného. Produkt byl extrahován 350 ml ethylacetátu, usušen nad sulfátem sodným a koncentrován při sníženém tlaku za vzniku surového 6-(3-methoxy-4-methoxymethoxyfenyl)-lH-indazolu. Purifikace chromatografií na silikagelu (500 ml silikagelu, 1,81 20% ethylacetátu v benzenu, 1,81 30% ethylacetátu v benzenu) poskytla 1,19 g (31 %) 6-(3-methoxy-4-methoxymethoxyfenyl)-lH35 indazolu: ‘H NMR (CDCIj) δ 7,80 (s, I H), 7,69 (d, 1H, J = 8,5 Hz), 7,52 (s, 1H), 7,29 (d, 1H, J = 8,5 Hz), 7,16 (s, IH), 7,13 (s, IH), 7,08 (s, IH). MS (ES) [M+Na]/z vypočteno 337, zmířeno 337, [m+Cl]/z, vypočteno 349, změřeno 349.
(v)
V baňce s kulatým dnem o objemu 100 ml v argonové atmosféře bylo rozpuštěno 1,19 g (4,18 mmol, 1 ekv.) 6-(3-methoxy-4-methoxymethoxyfenyl)-IH4ndazolu ve 25 ml dioxanu a 14 ml 3N NaOH. Tato směs byla podrobena působení 1,17 g (14,60 mmol, 1,10 ekv.) jodu, přidávaného v -5 dávkách (-10 minut). Několik dalších dávek (-4) jodu po 50 mg bylo přidává45 no, dokud nebyla reakce ukončena, jak bylo vizualizováno TLC (3:7 směs ethylacetátu
-29CZ 301667 B6 a hexanu). Směs byla acidifikována 25 ml 20% kyseliny citrónové a bylo přidáno 20 ml
5% NaHSO3.Směs byla rozdělena mezi 150 ml ethylacetátu a 100 ml vody. Organická látka byla promyta 80 ml saturovaného hydrouhličitanu sodného a 50 ml solanky a byla usušena nad sulfátem sodným a koncentrována při sníženém tlaku. Purifikace krystalizaci ze 3 ml ethyl5 acetátu, a pak 7 ml hexanu poskytla 1,33 g (78%) čistého 3-jod-6-(3-methoxy^l-methoxymethoxyfenyl)-IH-indazolu jako pevné látky: 'HNMR (CDC13) δ 10,48 (šs, IH), 7,62 (s, 1H),7,57 (d, IH, J = 8,5 Hz), 7,47 (dd, IH, J = 1,3, 8,5 Hz), 7,18 (m, 3H), 5,29 (s, 2H), 3,99 (s, 3H), 3,55 (s,3H).
io (vi)
PftM,*0uUtEM*P THF,-71*C*iO*C
...... >
V baňce s kulatým dnem o objemu 100 ml bylo rozpuštěno 921 mg (2,245 mmol, 1,00 ekv.) 3-jod-6~(3-methoxy-4-methoxymethoxyfenyl)-lH-indazolu ve 36 ml THF a ochlazeno na -78 °C (ponecháno 8 minut v tomto množství). Bylo přidáno 2,5 ml 1,8M roztoku (4,49 mmol,
2,00 ekv.) PhLi a směs byla ponechána za míchání po dobu 30 minut. Bylo přidáno 3,63 ml (4,71 mmol, 2,1 ekv.) roztoku s-BuLi a reakční směs byla ponechána za míchání po dobu 1 hodiny v -78 °C. Bylo přidáno 1,4 ml( 18 mmol, 8,0 ekv.) čistého DMF. Chladná lázeň byla odstraněna a reakce byla ponechána ohřát se pomalu na 0 °C na vzduchu. Když led roztál, bylo přidáno 20 ml saturovaného hydrouhličitanu sodného. Produkt byl extrahován 200 ml ethyl20 acetátu z dalších 75 ml saturovaného hydrouhličitanu sodného, usušen nad sulfátem sodným, dekantován a koncentrován při sníženém tlaku. Purifikace chromatografii na silikagelu (450 ml silikagelu, 4:6 směs ethylacetátu a hexanu) poskytla 498 mg (71 %) 6-(3™methoxy-4-methoxymethoxyfenyl)-lH-indazol-3-karbaldehydu: Rf sm 0,30, p 0,14 (směs ethylacetátu a hexanu 4:6), 'H NMR (CDC13) δ 10,85 (š s, IH), 10,25 (s, IH), 8,37 (d, IH, J = 8,4 Hz), 7,67 (s, IH),
7,60 (d, IH, J = 8,4 Hz), 6,26 (d, IH, J = 8,7 Hz), 7,19 (m, 2H), 5,30 (s, 2H), 3,99 (s, 3H), 3,55 (s,3H).
441 mg (1,41 mmol, 1,0 ekv.) 6-(3_methoxy^l-methoxymethoxyfenyI)-lH-indazol-3-karbaldehydu bylo nabráno jako suspenze do 15 ml dichlormethanu a bylo ochlazeno na 0 °C. Tato směs byla podrobena působení 324 mg (1,48 mmol, 1,05 ekv.) mesitylensulfonylchloridu a 181 mg (1,48 mmol, 1,05 ekv.) dimethylaminopyridinu (DMAP). Směs byla ponechána za míchání po dobu 1 hodiny při teplotě 0 °C a byla zastavena přidáním vody. Směs byla rozdělena mezi vodu a organickou vrstvu směsi ethylacetátu a hexanu 1:1. Organická látka byla usušena nad sulfátem sodným, dekantována a koncentrována při sníženém tlaku za vzniku surové látky, která byla purifikována chromatografii na silikagelu (50 ml silikagelu, 3:7 směs ethylacetátu a hexanu) za vzniku 374 mg (54 %) 6-(3-methoxy-4-methoxymethoxyfeny 1)-1-(2,4,6-trimethylbenzensulfonyl)-lH-indazol-3-karbaldehydu: Rf sm 0,17, p 0,53 (směs ethylacetátu a hexanu 4:6), 'HNMR (CDCI,) δ 10,20 (s, IH), 8,41 (s, IH), 8,37 (d, IH, J = 8,5 Hz), 7,73 (dd, 1H, J = 1,4, 8,4 Hz), 7,3 (m, 3H), 7,08 (s, 2H), 5,36 (s, 2H), 4,08 (s, 3H), 3,71 (s, 3H), 2,74 (s, 6H), 2,40 (s, 3H).
-30CZ 301667 B6
1,09 g (2,22 mmol, 4,0 ekv.) jemně mletého trifenyl(3,4-dimethoxybenzyl)fosfoniumbromidu bylo nabráno jako suspenze do 15 ml THF a bylo ochlazeno na -78 °C. K této směsi bylo přidáno
1,04 ml 1,6M (1,66 mmol, 3,0 ekv.) η-BuLi za vzniku červenooranžového roztoku. Směs byla ponechána ohřát se na 23 °C po dobu 1 hodiny. Tato směs pak byla při teplotě 0 °C přidána kanylou k roztoku 274 mg (0,554 mmol, 1,0 ekv.) 6-{3-methoxy-4-ínethoxymethoxyfenyl)-l(2,4,6-trimethylbenzensulfonyl)-lH-indazol-3-karbaldehydu v 5 ml THF. Výsledná směs byla ponechána za míchání při teplotě 0 °C po dobu 10 minut a byla zastavena saturovaným hydroío uhličitanem sodným. Výsledná směs byla rozdělena mezi saturovaný hydrouhličitan sodný a ethylacetát. Organická látka byla koncentrována při sníženém tlaku a zbytek byl purifikován chromatografii na silikagelu (50 ml silikagelu, 3:7 —> 4:6 směs ethylacetátu a hexanu) za vzniku 289 mg (83 %) 2,5:1 směsi cis/trans 3-(243,4-dimethoxyfenyl)vinyl]-6-(3-methoxy-4methoxymethoxyfenyl)-l-(2,4,6-trimethylbenzensulfonyl)-lH-indazolu: Rf srn 0,53, p0,32 (směs ethylacetátu a hexanu 4:6), 'HNMR (CDC13) δ 8,35 (s, 0,3H), 8,32 (s, 0,7H), 8,03 (d, 0,3H, J = 8,4 Hz), 6,60 - 6,85 (m, H), 6,65 (d, 0,7H, J = 8,4 Hz), 6,60 (d, 0,7H, J = 12,5 Hz), 5,30 (s, 0,6H), 5,29 (s, 1,4H), 4,00- 3,50 (8 singletů, 12H), 2,72 (s, 1,8H), 2,67 (s, 4,2H), 2,34 (s, 3H), MS (ES) [M+H]/z vypočteno 629, změřeno 629, [M-H]/z vypočteno 627, změřeno 627.
Roztok 1,0 g (17,8 mmol) 1M KOH ve směsi vody a MeOH 1:1 (18 ml celkem) byl připraven v argonové atmosféře a byl odplyněn cykly vakuum/argon (5 krát). V samostatné baňce bylo rozpuštěno 289 mg (0,461 mmol, 1,0 ekv.) 3-(2-(3,4-dimethoxyfenyl)vinyl]-6-(3-methoxy-425 methoxymethoxyfenyl)-l-(2,4,6-trimethylbenzensulfonyl)-lH-indazolu v 8 ml THF v argonové atmosféře. K tomuto roztoku bylo přidáno 10 ml výše uvedeného 1M roztoku KOH ve směsi vody a MeOH 1:1. Reakce byla zahřáta na 30 °C a byla ponechána za míchání po dobu 7 hodin. Reakční směs byla neutralizována přidáním 7 ml 20% kyseliny citrónové. Výsledná směs byla rozdělena mezi 150 ml ethylacetátu a 100 ml vody. Organická látka byla oddělena, usušena nad sulfátem sodným, děkan to vána a koncentrována při sníženém tlaku za vzniku cis a trans 3-[2-<3,4-dimethoxyfenyl)vinyl]-6-(3-methoxy-4-methoxymethoxyfenyl)-lH-indazolu (použit surový produkt): Rf srn 0,46, pl 0,17, p2 0,23 (směs ethylacetátu a hexanu 1:1), *H NMR cis izomer (CDCh) δ 7,55 (s, IH), 7,3-7,1 (m, 6H), 7,02 (dd, IH, J= 1,9, 8,3 Hz), 6,85 (d, IH, J = 12,5 Hz), 6,78 (d, IH, J = 12,5 Hz), 6,74 (d, IH, J = 8,3 Hz), 5,21 (s, 2H), 3,88 (s, 3H), 3,70 (s, 3H), 3,43 (s, 3H), 3,42 (s, 3H). MS (ES) [M+H]/z vypočteno 447, změřeno 447, [M-H]/z vypočteno 445, změřeno 445.
-31CZ 301667 B6
Příklad l(b)
3-(E-styryl)-6-(3-benzyloxy-4-hydroxyfenyl)-l H-indazol
Sloučenina z příkladu l(b) byla připravena podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu l(a) kromě toho, že 4-brom-2-benzyloxyfenol byl použit v kroku (iii) namísto 4-brom-2-methoxyfenolu. Rf srn 0,35, p 0,30 (směs ethylacetátu a hexanu 4:6), ‘HNMR (CDCh) 5 8,06 (d, IH, J = 8,6 Hz), 7,63 - 7,18 (m, 17H), 7,05 (d, 1H, J = 8,2 Hz), 5,19 (s, 2H). MS (Cn [M+H]/z vypočteno 419, změřeno 419, [M-H]/z vypočteno 417, změřeno 417, io
Příklad l(c)
3-[F-2-(3,4-dimethoxyfenyl)vinyl]-6-(3-allyloxy-4-hydroxyfenyl)-l H-indazol
Sloučenina z příkladu l(c) byla připravena podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu l(a) kromě toho, že 3-allyloxy-4-{ methoxy methoxy )benzenboronová kyselina byla použita namísto 3-methoxy-4-(methoxymethoxy)benzenboronové kyseliny v kroku (iii). MS (ESI) [M+H]/z vypočteno 429, změřeno 429, MS (ESI) [M-H]/z vypočteno 427, změřeno 427.
Příklad 2(a)
3-(naftalen-2-y l)-6-(3-methoxy-4-hydroxy feny 1)-1 H-indazol
mg (0,055 mmol) 6-(4~benzyloxy-3-methoxyfenyl)-3-naftalen-2-yl-lH-Índazolu bylo rozpuštěno ve směsi 2 ml ethylacetátu, 2 ml benzenu a 2 ml methanolu. K tomuto roztoku bylo přidáno 25 mg 10% (hmotnostních) palladia na uhlí a reakční nádoba byla odplyněna cykly vakuum/vodík (pět cyklů). Reakční směs byla ponechána za míchání po dobu 3 dnů ve 23 °C a byla filtrována přes krátký sloupec celitu. Koncentrace a purifikace chromatografií na silikagelu poskytla 8 mg (40%) 3-(naftalen-2-yl)-6-(3-methoxy-4-hydroxyfenyl)-l H-indazolu: 'H NMR (CDCh) δ 10,3 (b s, IH), 8,50 (s, IH), 8,20 (d, IH, J = 8 Hz), 7,98 (d, IH, J = 8 Hz), 7,90 (m, IH), 7,7-6,8 (m, 9H), 3,98 (s, 3H). MS (ES) [M+H]/z vypočteno 367, změřeno 367, [M-H]/z vypočteno 365, změřeno 365.
-32CZ 301667 B6
Výchozí látka byla připravena takto:
(i)
117 mg (0,564 mmol, 6,0 ekv.) 2-bromnaftalenu bylo rozpuštěno v 0,75 ml THF a ochlazeno na
-78 °C. Směs byla podrobena působení 226 μΐ 2,5M (6,0 ekv.) η-BuLi a byla ponechána za míchání v -78 °C po dobu 30 minut. Směs pak byla kanylou přidána ke 139 mg (0,80 mmol, 8,5 ekv.) čerstvě usušeného pevného ZnCb a výsledná směs byla ponechána ohřát se na 23 °C (během přidávání vymizelo žluté zbarvení). Po 30 minutách ve 23 °C byla směs přidána kanylou io ke směsi 60 mg (0,094 mmol, 1 ekv.) 6-(4-benzyloxy-3-methoxyfenyl)-3-jod-1-(2,4,6—trimethylbenzensulfonyl)-lH-ÍndazoIu a 6 mg (0,005 mmol, 0,05 ekv.) Pd(PPh3)4. Výsledný roztok byl ponechán za míchání po dobu 16 hodin. Byl přidán saturovaný hydrouhličitan sodný a směs byla rozdělena mezi 15 ml saturovaného hydrouhličitanu sodného a 15 ml ethylacetátu. Organická látka byla usušena nad sulfátem sodným, dekantována a koncentrována. Purifikace chromato15 grafií na silíkagelu (1:9-2:8 směs ethylacetátu a hexanu) poskytla 42 mg (70%) 6-(4-benzyloxy-3-methoxyfeny l)-3-naftalen-2-y 1-1 -(2,4,6-trimethy lbenzensulfony 1}-1 H-indazolu jako pevné látky: Rf sm 0,4, p 0,4 (směs ethylacetátu a hexanu 3:7), ’H NMR (CDCb) δ 8,44 (s, 1H), 8,41 (s, IH), 8,12 (d, IH, J = 8 Hz), 8,05 - 7,00 (m, 17H), 5,30 (s, 2H), 4,02 (s, 3H), 2,80 (s, 3H), 2,34 (s,3H).
6-<4-benzyloxy-3-methoxyfenyl)-3-jod-H2,4,6-trimethylbenzensulfonyl)-iH-indazol byl připraven podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 1 (a), kroky (i) až (v).
(ii)
6“{4-benzyIoxy-3-methoxyfenyl)-3-naftalen-2-yl-l-(2,4,6-trimethylbenzensulfonyl)-lHindazol byl konvertován na 6~(4-benzyloxy-3-methoxyfenyl)-3-naftalen-2-yl-lH-indazol, jak bylo popsáno v příkladu l(a), krok (ix). Rf sm 0,40, p 0,17 (směs ethylacetátu a hexanu 3:7), ‘HNMR (CDCb) δ 8,40 (s, IH), 8,12 (d, IH, J = 8,5 Hz), 8,10 (dd, IH, J = 1,6, 8,4 Hz), 7,93 (d, IH, J = 8,3 Hz), 7,88 (m, 2H), 7,61 (m, IH), 7,56 (s, IH), 7,43 (m, 5H), 7,30 (m, 3H), 7,15 (d, IH, J = 2,0 Hz), 7,08 (dd, IH, J = 2,1, 8,3 Hz), 6,91 (d, IH, J = 8,3 Hz), 5,16 (s, 2H), 3,91 (s, 3H).
-33CZ 301667 B6
Příklad 2(b)
3-fenyl-6-(3-methoxy-4-hydroxyfenyl)-l H-indazol
Sloučenina z příkladu 2(b) byla připravena podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 2(a) kromě toho, že fenyl lithium bylo použito namísto 2-nafty llithia vzniklého z 2-bromnaftylenu v kroku (i). 'H NMR (CDCI,) δ 7,87 (d, IH), 7,83 (d, 2H), 7,55 - 7,27 (m, 5H), 7,01 (m, 2H), 6,80 (d, IH), 3,83 (s,3H). MS (ES) [M+H]/z vypočteno 317, změřeno 317, [M-H]/z vypočteno 315, změřeno 315.
io
Příklad 2(c)
3-( 3,4,5-trimethoxy fenyl )-6-( 3-methoxy ^4—hydroxy fenyl )-l H-indazol
Sloučenina z příkladu 2(c) byla připravena podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 2(a) kromě toho, že 3,4,5-trimethoxyfenylbromid byl použit v kroku (i) namísto 2-bromnaftylenu. Rf srn 0,67, p 0,38 (směs ethylacetátu a hexanu 8:2), 'H NMR (CDC13) δ 7,93 (d, IH, J = 8 Hz), 7,58 (s, IH), 7,39 (d, IH, J = 8 Hz), 7,10 (m, 4H), 6,92 (d, IH, J = 8 Hz), 3,90 (s, 9H),
3,85 (s, 3H), MS (ES) [M+H]/z vypočteno 407, změřeno 407, [M-H]/z vypočteno 405, změřeno
405.
Příklad 2(d)
3-( 1 H-índol-2-yl)-6-(3-methoxy-4-hydroxyfenyl)-l H-indazol
Sloučenina z příkladu 2(d) byla připravena podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 2(a) uvedeným výše, kromě toho, že 1-fenyIsulfonylindazol byl použit namísto 2-bromnaftylenu v kroku (i). Rf sm 0,20, p 0,15 (směs ethylacetátu a hexanu 4:6), *HNMR (CDC13) δ 10,0 (š s, IH), 9,05 (š s, IH), 8,01 (d, IH, J = 8,0 Hz), 7,55 (d, IH, J = 8,0 Hz), 7,49 (s, IH), 7,37 (d, 1H, J = 8 Hz), 7,29 (d, IH, J = 8 Hz), 7,2 - 7,1 (m, 5H), 6,92 (d, IH, J = 8 Hz), 5,63 (š s, 1H), MS (ES) [M+H]/z vypočteno 356, změřeno 356, [M-H]/z vypočteno 354, změřeno 354.
-34CZ 301667 B6
Příklad 2(e)
3-(benzofuran-2-yl )-6-(3-benzyloxy-4-hydroxy feny 1)-1 H-indazol
Sloučenina z příkladu 2(e) byla připravena podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 2(a) uvedeným výše, kromě toho, že benzofuran byl použit namísto 2-bromnaftylenu v kroku (i). 'HNMR (CDCb) δ 8,21 (d, IH, J = 8,0 Hz), 7,60 (m, 3H), 7,30- 7,10 (m, 12H), 7,01 (d, 1H, J = 8 Hz), 5,82 (š s, IH), 5,15 (s, 3H).
Příklad 3
3-( 1 H-indol-2-yl)-6-(3-methoxy-4-hydroxyfenyl)-l H-indazol
3-(lH-benzimidazol-2-yl}-6-(3-methoxy^l—methoxy methoxy feny])-1 H-indazol byl konvertován na 3,5 mg (28 %) 4-[3-( 1 H-benzimidazol-2-yl)-l H-indazol-ó-yl]-2-methoxyfenolu podle postupu popsaného v příkladu l(a). HRMS (FAB) [M+H]/z vypočteno 357,1351, změřeno 357,1349.
Výchozí látka byla připravena takto:
mg (0,064 mmol, 1 ekv.) 6-{3-methoxyM-methoxy methoxy feny l)-lH-indazol-3-karbaldehydu (z příkladu l(a), krok (vi)) bylo rozpuštěno v 0,7 ml odplyněné směsi MeOH a vody 1:1 a bylo podrobeno působení 19 μΐ (5 ekv.) octové kyseliny, 8,3 mg (1,2 ekv.) 1,2-diaminobenzenu a 18 mg (1,4 ekv.) octanu měďnatého ve 23 °C. Směs byla míchána po dobu 30 minut, byla naředěna 3 ml ethanolu a 2 ml vody a byla podrobena probublávání proudem SH2 po dobu 3 minut, což poskytlo černý precipitát. Směs byla ponechána za míchání po dobu 12 hodin. Směs byla filtrována a koncentrována. Purifikace chromatografií na silikagelu (6:4 směs ethylacetátu a hexanu) poskytla 14 mg (54 %) 3-( 1 H-benzimidazol~2-yl)-6-(3-methoxy-4-methoxy30 methoxyfenyI)-lH-indazolu jako pevné látky, Rf srn 0,39, p 0,24 (směs ethylacetátu a hexanu 6:4), 'HNMR (CDCI3) δ 8,69 (d, IH, f = 8 Hz), 7,70 (š s, 2H), 7,58 (s, IH), 7,53 (d, IH, J = 8 Hz), 7,30 - 7,15 (m, 7H), 5,30 (s, 2H), 3,97 (s, 3H), 3,58 (s, 3H), MS (ES) [M+H]/z vypočteno 401, změřeno 401, [M-H]/z vypočteno 399, změřeno 399.
-35CZ 301667 B6
Příklad 4(a)
N-[3-(3-sty ry l-l H-indazo 1-6-y loxy )fenyl]benzamid
Roztok 0,09 g (0,17 mmol) N-[3-(2-benzoyl-3-styryl-lH-indazol-6-yloxy)fenyl]benzamidu ve 2 ml 6N vodné HCI a 3 ml MeOH byl zahříván v 65 °C po dobu přibližně 4 hodin. Ochlazený roztok byl nalit opatrně do saturovaného roztoku hydrouhličitanu sodného, Precipitát byl filtrován, sbírán a podroben chromatografii na silikagelu za eluce směsí hexanu a EtOAc (1:1) Bylo získáno 32 mg (50 %) N—[3—(3—styryl— 1 H-indazo 1-6-yloxy)fenyl]benzamidu jako béžové pevné látky: 'HNMR (DMSO-d6) δ 13,50 (s, IH), 10,32 (s, IH), 8,23 (d, IH, J = 8,7 Hz), 7,92 (d, 2H, J = 6,8 Hz), 7,72 (d, 2H, J = 7,3 Hz), 7,71 - 7,51 (m, 7H) 7,51 - 7,47 (m, 3H), 7,30 (t, IH, J = 7,2 Hz), 7,05 (s, IH), 7,01 (d, IH, J = 8,7 Hz), 6,86 (dd, IH, J = 8,2, 2,3 Hz). Anal. Výpočet pro C28H2IN3O2 0,3H2O: C, 76,97, H, 4,98; N, 9,62. Změřeno: C, 76,94, H, 5,13, N, 9,40.
5 Výchozí látka byla připravena takto: (0
JL O jo · c ΛΜ reflux, (
Suspenze 10,47g (38,3 mmol) 3-(benzhydrylidenamino)fenolu, 5,00 g (38,3 mmol) 3-chlor20 cyklohex-2-enonu a 5,82 g (42,1 mmol) uhličitanu draselného ve 150 ml acetonu byla přes noc zahřívána k varu pod zpětným chladičem. Ochlazená reakční směs byla filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Zbytek byl podroben chromatografii na silikagelu za eluce směsí hexanu a EtOAc (2:1). Tímto způsobem bylo získáno 8,82 g (63 %) 3-[3-(benzhydrylidenamino)fenoxyjcyklohex-2-enonu jako žluté pevné látky: *HNMR (CDC13) δ 7,78 (d, 2H, J = 7,0 Hz),
7,50 (d, IH, J = 7,1 Hz), 7,45 (d, 2H, J = 7,7 Hz), 7,34 - 7,10 (m, 6H), 6,69 (d, IH, J = 8,0 Hz),
6,61 (d, IH, J= 8,0 Hz), 6,38 (s, IH), 4,89 (s, IH), 2,55 (t, 2H, J = 6,2 Hz), 2,34 (t, 2H, J = 6,2 Hz), 2,06 (m, 2H). Anal. Výpočet pro C25H21NO2 · 0,2H2O: C, 80,92, H, 5,81, N, 3,78. Změřeno: C, 81,12, H, 5,81, N, 3,72.
3-(benzhydrylidenamino)fenol byl připraven takto: míchaný roztok 15,0 g (82,8 mmol) benzofenoniminu a 9,03 g (82,8 mmol) 3-aminofenolu ve 25 ml toluenu byl zahříván k varu pod zpětným chladičem s odstraněním H2O Dean-Starkovým jímadlem po dobu 3,5 hodiny. Krystaly, které vznikly z ochlazené reakční směsi, byly sbírány vakuovou filtrací, promyty hexanem a usušeny na vzduchu. Tímto způsobem bylo získáno 17,3 g (76%) 3-(benzhydrylidenamino)fenolu jako světle žluté pevné látky: *HNMR (CDCh) δ 7,64 (d, 2H, J = 7,1 Hz), 7,38 (d, IH, J = 7,1 Hz), 7,34 - 7,15 (m, 7H), 7,04 (d, 2H, J = 7,2 Hz), 6,88 (t, IH, J = 8,1 Hz), 6,82 (d, IH, J= 8,2 Hz), 6,23 (s, IH), 6,21 (d, IH, J= 7,8 Hz). Anal. Výpočet pro C,9H15NO: C, 83,49, H, 5,53, N, 5,12. Změřeno: C, 83,51, H, 5,65, N, 5,03.
-36CZ 301667 B6
Roztok 4,37 g (11,89 mmol) 3-[3-(benzhydrylidenamíno)fenoxy]cyklohex-2-enonu ve 20 ml THF byl přidán pomalu k 25,0 ml roztoku LiHMDS (l,0M roztok v THF) v 10 ml THF v-78 °C.
Pět minut po skončení přidávání bylo najednou přidáno 1,98 g (11,89 mmol) trans-cinnamoylchlorídu a míchání pokračovalo v -78 °C po dobu 30 minut. Reakce byla zastavena saturovaným roztokem NH4CI a extrahována EtOAc (2 x). Spojené organické vrstvy byly promyty saturovaným roztokem NaCl, usušeny (MgSO4) a koncentrovány při sníženém tlaku. Zbytek byl podroben chromatografii na silikagelu za eluce směsí hexanu a EtOAc (5:1). Tímto způsobem bylo získáno 3,34 g (56%) 3-[3-{benzhydrylidenamino)fenol}-6-(3-fenylakryloyl)cyklohex-2enonu jako žlutooranžové pevné látky: 'HNMR (CDC13) δ 15,69 (s, IH), 7,80 (d, 2H, J= 7,1 Hz), 7,63 - 7,01 (m, 15H), 6,93 (d, IH, J= 15,6 Hz), 6,75 (d, IH, J = 7,6 Hz), 6,66 (d, IH, J = 8,0 Hz), 6,46 (s, IH), 4,92 (s, IH), 2,85 (t, 2H, J = 7,2 Hz), 2,62 (t, 2H, J = 7,2 Hz). Anal. Výpočet pro C34H27NO3: C, 82,07, H, 5,47, N, 2,82. Změřeno: C, 81,88, H, 5,53, N, 2,81.
(iii)
K míchanému roztoku 1,81 g (3,64 mmol) 3-[3-(benzhydrylÍdenamino)fenol]-6-(3-fenyl“ akryloyl)cyklohex-2-enonu rozpuštěnému v 10 ml směsi HOAc/EtOH (1:1) byly přidány 2,0 ml (41,23 mmol) hydrátu hydrazinu. Roztok byl zahříván v 75 °C po dobu 25 minut. Po ochlazení byla reakční směs opatrně nalita do saturovaného roztoku hydrouhličitanu sodného a extrahována EtOAc (2 x). Spojené organické vrstvy byly promyty saturovaným roztokem NaCl, usušeny (MgSO4) a koncentrovány při sníženém tlaku. Zbytek byl podroben chromatografii na silikagelu za eluce směsí hexanu a EtOAc (1:1). Bylo získáno 539 mg (45 %) 3-(3-styiyl-4,5-dihydro25 1 H-indazol-6-yloxy)fenylaminu jako žluté pevné látky. 'HNMR (DMSO-d*) δ 7,55 (d, 2H,
J= 7,2 Hz), 7,38 (t, 2H, J= 7,2 Hz), 7,27 (t, IH, J = 7,2 Hz), 7,05 (m, 3H), 6,38 (d, IH, J = 8,0 Hz), 6,31 (s, IH), 6,23 (d, IH, J= 7,9 Hz), 5,52 (s, IH), 5,26 (s, 2H), 2,92 (t, 2H, J = 8,0 Hz), 2,58 (t, 2H, J = 8,1 Hz). Anal. Výpočet pro C2lH,9N3O 0,3H2O: C, 75,33, H, 5,90, N, 12,55. Změřeno: C, 75,46, H, 5,96, N, 12,35.
(iv)
1) benzoytchlorid DIEA, CH2CLj
2) DDQ, 1,4-dio)aan
K míchanému roztoku 50 mg (0,15 mmol) 3-(3-styiy 1-4,5-dihydro-lH-indazol-6-yloxy)fenylaminu a 54 μί (0,31 mmol) Ν,Ν-diisopropylethylaminu v 5 ml CH2C12 bylo přidáno 36 μΐ (0,31 mmol) benzoylchloridu. Po 15 minutách byla reakční směs naředěna CH2CI2 a promyta
-37CZ 301667 B6 postupně 0,5N HCI, saturovaným roztokem hydrouhlíčitanu sodného a solankou, usušena (MgSO4) a koncentrována při sníženém tlaku. K míchanému roztoku zbytku v 1,4-dioxanu bylo přidáno 35 mg (0,15 mmol) 2,3-dichlor-5,6-dikyano-l,4—benzochinonu (DDQ). Po 1 hodině byla reakční směs koncentrována při sníženém tlaku a zbytek byl podroben chromatografii na silikagelu za eluce směsí hexanu a EtOAc (2:1). Tímto způsobem bylo připraveno 90 mg (kvantitativně) N-[3-(2-benzoyl-3-styryl-lH-indazol-6-yloxy)fenyl]benzamidu jako rezavě zbarvené pevné látky: ‘HNMR (CDC13) δ 8,13 (s, IH), 8,02 (d, 2H, J= 7,0 Hz), 7,94 (d, IH, J = 8,7 Hz), 7,74 (d, 2H, J = 6,8 Hz), 7,57 - 7,19 (m, 17H), 6,84 (d, 1H, J = 8,3 Hz).
io
Příklad 4(b)
N-[3-(3-styry I-1 H-indazol-6-y loxy)feny l]acetamid
Sloučenina z příkladu 4(b) byla připravena podobným způsobem, jak bylo popsáno v přikladu 4(a) uvedeným výše, kromě toho, že acetanhydrid byl použit namísto benzoylchloridu v kroku (iv). 'HNMR (DMSO-d6) δ 13,08 (š s, IH), 10,03 (s, IH), 8,22 (d, IH, J = 8,7 Hz), 7,72 (d, 2H, J = 7,3 Hz), 7,52 (s, 2H), 7,44-7,27 (m, 6H), 7,01 (s, IH), 6,96 (dd, IH, J = 8,7, 2,1 Hz), 6,78 (d, IH, J - 6,9 Hz), 2,01 (s, 3H). Anal. výpočet pro C23H19N3O2 · 0,25 H2O: C, 73,88, H, 5,26, N,
11,24. Změřeno: C, 74,20, H, 5,57, N, 10,82.
Příklad 5(a) {3—(3—sty ryl— 1 H-indazol-6-yloxy)fenyl} amid 5-methylthiazol-2-karboxyIové kyseliny
Suspenze 57 mg (0,10 mmol) {3-[l-(5-methylthiazol-2-karbonyl)-3-styryl-lH-indazol-6-yloxyfenyl} amidu 5-methyIthiazol-2-karboxylové kyseliny a 50 mg (0,36 mmol) uhličitanu draselného v MeOH byla míchána ve 23 °C po dobu 20 minut. Roztok byl filtrován, naředěn EtOAc a promyt solankou (2 x). Organická vrstva byla usušena (MgSO4) a koncentrována při sníženém tlaku. Tímto způsobem byl připraven {3-(3-styryl-lH-indazol-6-yloxy)fenyl} amid 5-methylthiazol-2-karboxylové kyseliny jako žlutohnědá pevná látka při výtěžku 47%. 'HNMR (DMSO-de): δ 13,00 (s, IH), 10,80 (s, IH), 8,23 (d, IH, J = 8,8 Hz), 7,79 (s, 2H), 7,71 (t, 2H, J = 8,6 Hz), 7,53 (s, 2H), 7,41 - 7,27 (m, 5H), 7,04 (s, IH), 7,00 (d, IH, J = 8,7 Hz), 6,89 (d, IH, J =
8,5 Hz), 2,54 (s, 3H). Anal. výpočet pro C26H20N4O2S - 1,15 H2O: C, 65,98, H, 4,75, N, 11,84, S,
6,78, Změřeno: C, 665,99, H, 4,71, N, 11,58, S, 6,76.
-38CZ 301667 B6
Výchozí látka byla připravena takto:
(i)
343-styryM,5-dihydro-lH-indazol^6-yloxy)fenylamin byl konvertován na {3-[l—(5—methylthiazol-2-karbonyl)-3-styiyl-lH-ÍndazoI-6-yloxyfenyl}amid 5-methylthiazoI-2-karboxylové kyseliny působením 5-methylthiazol-2-karboxylové kyseliny a HATU (o-(2-azabenzotriazoll-yl)-N,N,N',N'-tetramethyluroniumhexafluorfosťát) v DMF a zpracování, působení DDQ a izolace byla analogické k příkladu 4(a), krok (iv) (50% výtěžek): *H NMR (DMSO-dĎ) 5 10,85 io (s, IH), 8,45 (d, 1H, J = 9,8 Hz), 8,24 (m, 3H), 7,99 - 7,62 (m, 6H), 7,54 - 7,34 (m, 5H), 6,96 (d, IH, J = 8,5 Hz), 2,64 (s, 3H), 2,54 (s, 3H).
Příklad 5(b)
3-methy l-N-[3-(3-styryl-1 H-indazol-6-y loxy )fenyl]benzamid
Sloučenina z příkladu 5(b) byla připravena podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 5(a) uvedeným výše, kromě toho, že m-tolylchloríd byl použit namísto 5-methylthiazol-220 karboxylové kyseliny a HATU v kroku (i). ]H NMR (DMSO-dé) δ 13,04 (s, IH), 10,28 (s, IH), 8,23 (d, IH, J= 8,8 Hz), 7,73 - 7,30 (m, 14 H), 7,05 (s, IH), 6,99 (d, IH, J = 8,5 Hz), 6,87 (d, IH, J = 7,7 Hz), 2,38 (s, 3H). Anal. výpočet pro C29H23N3O2 · 0,2 H2O 0,2 hexan: C, 77,78, H, 5,66, N, 9,01. Změřeno: C, 77,80, H, 5,84, N, 8,93.
Příklad 6(a)
N-(3-{3-[2-(4-chlorfenyl)vinyl]-l H-indazol-6-yloxy)fenyl)benzamid
Za použití N-(3-{l-benzoyl-3-[2-(4~chlorfenyl)vinyl]-lH-indazol-6-yloxy}fenyl)benzamidu byl použit obecný postup z příkladu 5(a) pro přípravu sloučeniny uvedené v názvu jako špinavě bílé pevné látky při 72% výtěžku: 'H NMR (DMSO-ds) 8 13,07 (s, IH), 10,32 (s, IH), S,24 (d, 1H, J = 8,8 Hz), 7,92 (d, 2H, J = 7,1 Hz), 7,76 (d, 2H, J = 8,5 Hz), 7,59 - 7,40 (m, 1 OH), 7,05 (s, IH), 7,00 (d, IH, J = 8,7 Hz), 6,87 (d, IH, J= 7,9 Hz). Anal. výpočet pro C28H20ClN,O2
0,4 H2O 0,15 hexan, C, 71,41, H, 4,75, N, 8,65. Změřeno: C, 71,62, H, 14,83, N, 8,45.
-39CZ 301667 B6
Výchozí látka byla připravena takto:
(0
Za použití 3-[34benzhydrylidenamino)fenoxy]cyklohex-2-enonu a 3-(4~chlorfenyl)akryloylchloridu (připraveného, jak popsáno níže) byl použit obecný postup z příkladu 4(a), krok (ii). Produkt byl použit bez purifikace při cyklizaci hydrazinů, příklad 4(a), krok (iii), za vzniku
3- {3-[2-(4-chlorfenyl)vinyl]-4,5-dihydro-lH“indazol-ó-yloxy}fenylainÍnu jako žluté pevné 10 látky při 30% výtěžku. ]H NMR (DMSO-Λ) δ 12,45 (s, IH), 7,58 (d, 2H, J = 8,5 Hz), 7,43 (d, 2H, J = 8,5 Hz), 5,52 (s, IH), 5,26 (s, 2H), 2,92 (t, 2H, J = 8,0 Hz), 2,58 (t, 2H, J = 8,0 Hz). Anal. výpočet pro C21H]8C1N3O · 0,75 H2O: C, 66,84, H, 5,21, N, 11,14, Změřeno: C, 66,73, H, 4,89, N, 11,01.
3-(4-chlorfenyl)akryloylchlorid byl připraven takto: k míchané suspenzi 2,51 g (13,77 mmol)
4- chlor-trans-skořicové kyseliny v benzenu bylo přidáno 1,1 ml (15,14 mmol) thionylchloridu a katalytické množství DMAP. Reakční směs byla zahřívána k varu pod zpětným chladičem po dobu 1,5 hodiny. Těkavé látky byly odstraněny při sníženém tlaku. Bílý zbytek byl rozpuštěn v Et2O a koncentrován opět při sníženém tlaku za vzniku 2,78 g (kvantitativně) 3-(4-chlor20 fenyl)akryloylchloridu jako bílé pevné látky: fH NMR (CDC13) δ 7,81 (d, IH, J - 15,6 Hz), 7,54 (d, 2H, J = 8,6 Hz), 7,44 (d, 2H, J = 8,6 Hz), 6,65 (d, IH, J = 15,6 Hz).
(ii)
3-{3-[2-(4—chlorfenyl )v inyl]—4,5-di hydro-lH-indazol-6-y loxy} feny lamin byl konvertován na
N-(3-{ l-benzoyl-3-[2-(4-chlorfenyl)vinyl]-l H-indazo 1-6-y loxy} feny l)benzamid postupem popsaným v příkladu 4(a), krok (iv) (85% výtěžek). Ή NMR (DMSO-d6) δ 10,37 (s, IH), 8,43 (d, 1H, J = 8,8 Hz), 8,00 - 7,39 (m, 21H), 7,34 (d, 1H, J = 8,8 Hz), 6,93 (d, 1H, J = 8,8 Hz).
Příklad 6(b)
N-{3-[3-(2-indolyl)-l H-indazol-6-y loxy] fenyl}-3-methy lbenzamid
Sloučenina z příkladu 6(b) byla připravena podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 6(a) uvedeným výše, kromě toho, že l-SEM-indazol-2-karboxylová kyselina byla použita v kroku (i) namísto 4-chlor-trans-skořicové kyseliny. *H NMR (DMSO-d6) δ 13,19 (s, IH),
-40CZ 301667 B6
11,59 (s, IH), 10,29 (s, IH), 8,23 (d, IH, J = 8,7 Hz), 7,73 - 7,38 (m, 9H), 7,12 (s, IH), 7,03 (d, 2H, J = 7,3 Hz), 6,88 (d, IH, J = 7,8 Hz), 2,38 (s, IH). HRMS [M+H]/z vypočteno: 459,1821, změřeno 459,1836.
Příklad 7
io Suspenze 75 mg (0,23 mmol) 3-(3-styryl-4,5-dihydro-lH-indazol-6-yloxy)fenylaminu a 90 mg 5% palladia na uhlí (Pd/C) byla zahřívána ve 155 °C. Po 4 hodinách bylo přidáno ještě 39 mg 5% Pd/C. Po 22 hodinách bylo přidáno ještě 30 mg 5% Pd/C. Reakční směs byla filtrována za horka po 26 hodinách. Katalyzátor byl promyt a filtrát koncentrován při sníženém tlaku. Zbytek byl podroben chromatografii na silikagelu za eluce směsí hexanu a EtOAc (1:1). Vhodné frakce byly koncentrovány a triturovány směsí CH2C12 a hexanu za vzniku 20 mg (27 %) sloučeniny uvedené v názvu jako špinavě bílé pevné látky: lH NMR (DMSO-dO δ 8,16 (d, IH, J= 8,5 Hz), 7,71 (d, 2H, J= 6,7 Hz), 7,50 (s, 2H), 7,40 (t, 2H, J= 7,0 Hz), 7,30 (d, IH, J = 6,5 Hz), 7,06- 6,92 (m, 3H), 6,35 (d, IH, J= 8,3 Hz), 6,23 (s, 2H), 5,26 (s, 2H). Anal. výpočet pro C2iH17N3O -0,15 CH2C12: C, 74,69, H, 5,13, N, 12,36. Změřeno: C, 74,64, H, 5,23,
N, 12,25.
Příklad 8(a)
3-(E-styryl)-6-fenoxy-l H-indazol
Suspenze 200 mg (0,64 mmol) 3-(E-styryl)-6-fenoxy-4,5-dihydro-lH-Índazolu a 200 mg 5% Pd/C v 10 ml tetralinu byla zahřívána v 155 °C po dobu 18 hodin. Katalyzátor byl odstraněn filtrací horkého roztoku a promyt TFA, EtOAc a MeOH. Filtrát byl koncentrován při sníženém tlaku a zbytek byl podroben chromatografii na silikagelu za eluce směsí hexanu a EtOAc (2:1) za vzniku 110 mg (55%) 3-(E-styryl)-6-fenoxy-lH-indazolu jako špinavě bílé pevné látky. ‘HNMR (DMSO-d,) δ 6,96 (s, 2H), 7,10 (d, 2H, J= 7,7 Hz), 7,20 (t, IH, J= 7,1 Hz), 7,30 (t, IH, J = 7,1 Hz), 7,44 (m, 6H), 7,71 (d, 2H, J = 7,5 Hz), 8,20 (d, 1H, J = 9,2 Hz), 12,90 (s, 1H). Anal. výpočet pro C2,H,6N2O · 0,1 H2O: C, 80,28, H, 5,20, N, 8,92. Změřeno: C, 80,20, H, 5,21,
N, 8,93.
Výchozí látka byla připravena takto:
(i) K míchanému roztoku 3,00 g (23,0 mmol) 3-chlorcyklohex-2-enonu a 2,16 g (23,0 mmol) fenolu v 25 ml acetonu bylo přidáno 3,81 g (27,6 mmol) práškového bezvodého K2CO3. Po zahřívání kvaru pod zpětným chladičem po dobu 18 hodin byla směs ochlazena a filtrována. Filtrát byl koncentrován při sníženém tlaku a podroben chromatografií na silikagelu za eluce směsí hexanu a EtOAc (4:1) za vzniku 3-fenoxycyklohex-2-enonu jako bílé pevné látky: 'HNMR (CDC13) δ 2,10 (kvintet, 2H, J= 6,3 Hz), 2,40 (t, 2H, J= 6,2 Hz), 2,68 (t, 2H,
-41 CZ 301667 B6
J= 6,3 Hz), 5,14 (s, IH), 7,05 (d, 2H, J= 7,5 Hz), 7,26 (t, IH, J= 7,3 Hz), 7,41 (t, 2H,
J = 7,6 Hz).
(ii) Roztok 301 mg (1,6 mmol) 3-fenoxycyklohex-2-enonu v 1 ml THF byl přidán k míchané5 mu roztoku l,0M roztoku lithiumbis(trimethylsilyl)amidu ve 3,2 ml THF v -78 °C. Po 15 minutách bylo najednou přidáno 266 mg (1,6 mmol) cinnamoylchloridu. Po 15 minutách byla reakční směs nalita do 0,5N HCI a extrahována EtOAc (2 x). Spojené organické vrstvy byly promyty saturovaným roztokem NaCl, usušeny (MgSO4) filtrovány a koncentrovány pri sníženém tlaku. Chromatografie zbytku směsi hexanu a ethylacetátu 4:1 jako eluentu poskytla io 220 mg (43 %) 3-fenoxy-6-(3-fenylakryloyl)cykloheX“2-enonu jako žluté pevné látky: 'HNMR (CDCh) δ (enolová forma) 2,66 (t, 2H, J = 7,2 Hz), 2,84 (t, 2H, J = 7,1 Hz), 5,11 (s, 1 H), 6,86 (d, IH, J = 15,6 Hz), 7,02 (d, 2H, J = 8,1 Hz), 7,20 (m, 2H), 7,28 - 7,38 (m, 3H).
HRMS M+H+ vypočteno 319,1334, změřeno 319,1340.
(iii) K míchanému roztoku 1,13 g (3,55 mmol) 3-fenoxy-6-(3-fenylakryloyl)cyklohex-2-enonu ve 20 ml směsi HOAc/EtOH (1:1) bylo přidáno 0,21 ml (4,3 mmol) monohydrátu hydrazinu. Reakce byla zahřívána v 70 °C po dobu 3 hodin, ochlazena a nalita opatrně do saturovaného roztoku NaHCCh a extrahována EtOAc (2 x). Spojené organické vrstvy byly promyty saturovaným roztokem NaCl, usušeny (MgSO4) a koncentrovány při sníženém tlaku. Zbytek byl podroben chromatografií na silikagelu za eluce směsí hexanu a EtOAc (2:1) za vzniku 406 mg (36%) 6-fenoxy-3-styryl-4,5-dihydro-lH-indazolu (3) jako špinavě bílé pevné látky: 'H NMR(DMSO-ch) δ 2,64 (t, 2H, J= 8,0 Hz), 2,95 (t, 2H, J= 8,0 Hz), 5,46 (s, IH), 7,04 (AB, 2H, J= 16,8 Hz), 7,15 (d, 2H, J= 8,1 Hz), 7,25 (m, 2H), 7,42 (m, 4H), 7,55 (d, 2H, J = 7,7 Hz), 12,44 (s, IH). Anal. výpočet pro C2H,8N2O · 0,2 H2O: C, 79,32, H, 5,83, N, 8,81.
Změřeno: C, 79,36, H, 5,85, N, 8,84.
Příklad 8(b)
3-(E-styryl)-6-[4-(methoxy methoxy )fenoxy]-l H-indazol
Sloučenina z příkladu 8(b) byla připravena podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 8(a) uvedeném výše, kromě toho, že 4-(methoxymethoxy)fenol byl použit namísto fenolu v kroku (i). 'H NMR (DMSO-d6) δ 12,90 (s, 1 H), 8,17 (d, IH, J = 8,8 Hz), 7,71 (d, 2H, J = 7,6
Hz), 7,50 (s, 3H), 7,41 (t, 2H, J = 7,6 Hz), 7,31 (d, IH, J = 7,4 Hz), 7,10 (s, 3H), 6,95 (dd, IH, J = 8,8, 1,9 Hz), 6,84 (s, IH), 5,20 (s, 2H), 3,42 (s, 3H). Anal. výpočet pro C23H2oN203: C, 74,17, H, 5,41, N, 7,52. Změřeno: C, 74,21, H, 5,59, N, 7,46.
Příklad 8(c)
3—(E—styryl)—6—fenylsulfanyl—1 H-indazol
Sloučenina z příkladu 8(c) byla připravena podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 45 8(a) uvedeném výše, kromě toho, že thiofenol byl použit v kroku (i) namísto fenolu. 'H NMR
-42CZ 301667 B6 (DMSO“d6) δ 7,29 (d, IH, J = 8,5 Hz), 7,45 - 7,59 (m, 9H), 7,67 (s, 2H), 7,86 (d, 2H, J = 7,2 Hz), 8,35 (d, IH, J = 8,5 Hz), 13,30 (s, IH). Anal. výpočet pro C2,H,6N2S * 0,25 H2O: C, 75,76, H, 5,00, N, 8,41, S, 9,63. Změřeno: C, 75,79, H, 4,99, N, 8,16, S, 9,63.
Příklad 8(d)
6-{3-brom-fenoxy)-3-styry 1-1 H-indazol
Sr
io Sloučenina z příkladu 8(d) byla připravena analogickým způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 8(a) uvedeném výše, kromě toho, že 3-bromfenol byl použit v kroku (i) namísto fenolu. ’H NMR (DMSO-dé) δ 13,08 (s, IH), 8,23 (d, IH, J = 8,8 Hz), 7,72 (d, 2H, J = 7,3 Hz), 7,53 (s, 2H), 7,43 - 7,35 (m, 4H), 7,30 (t, 2H, J = 7,2 Hz), 7,11 (d, IH, J = 7,2 Hz), 7,09 (s, IH), 6,98 (d, IH, J = 8,8 Hz). Anal. výpočet pro 02ΐΗυΒΓΝ2Ο: C, 64,46, H, 3,86, Br, 20,42, N, 7,16. Změřeno: C,
64,31, H, 3,99, Br, 20,52, N, 7,11.
Příklad 9(a)
3-(E-styry l)-6-[3-hydroxy fenoxy ]-l H-indazol
K míchanému roztoku 50 mg (0,13 mmol) 3--(E-styryl)“6“[3-(methoxymethoxy)fenoxy]-l Hindazolu v 5 ml CH2C12 v -25 °C bylo přidáno 75 μΐ (0,57 mmol) trimethylsilylbromidu. Po 1,5 hodině byl přidán saturovaný roztok NaHCCh a produkt byl extrahován EtOAc (2 x). Spojené organické vrstvy byly promyty saturovaným roztokem NaCl, usušeny (Mg$O4) a koncentrovány při sníženém tlaku. Zbytek byl podroben chromatografií na silikagelu za eluce směsí hexanu a EtOAc (1:1) za vzniku po trituraci směsí CH2CI2 a hexanu 22 mg (50 %) 3-(E-styryl)-6-[3hydroxyfenoxy]-IH-indazolu jako špinavě bílé pevné látky: 'H NMR (DMSO-dé) δ 6,37 (s, IH), 6,43 (d, IH, J = 8,1 Hz), 6,50 (d, 1H, J = 8,1 Hz), 6,88 (d, 1H,J = 8,8 Hz), 6,92 (s, IH),
7,12 (t, IH, J= 8,1 Hz), 7,24 (t, IH, J= 7,3 Hz), 7,31 (t, 2H, J = 7,6 Hz), 7,44 (s, 2H), 7,64 (d,2H, J = 7,5 Hz), 8,12 (d, IH, J = 8,7 Hz), 9,54 (s, IH), 12,92 (s, IH). Anal. výpočet pro C2iHi6N2O2 · 0,3H2O: C, 75,57, H, 5,01, N, 8,39. Změřeno: C, 75,74, H, 5,11, N, 8,25.
Výchozí látka, 3-(E-styryl)-6-[3-(methoxymethoxy)fenoxy]-l H-indazol, byla připravena, jak bylo popsáno v příkladu 8(b).
'H NMR (CDCI3) δ 3,42 (s, 3H), 5,10 (s, 2H), 6,64 (d, IH, J = 8,2 Hz), 6,72 (s, IH), 6,80 (d, IH, J = 8,3 Hz), 6,98 (s, IH), 7,00 (d, IH, J = 8,8 Hz), 7,19- 7,38 (m, 5H), 7,53 (m,3H), 7,92 (d, IH, J = 8,9 Hz). Anal. výpočet pro CzaH^NzO,: M+H+: 373,1552, změřeno 73,1546
-43CZ 301667 B6
OH
Příklad 9(b)
34E-styryl)-6-[4-hydroxyfenoxy]-l H-indazol
Sloučenina z příkladu 9(b) byla připravena jako v příkladu 9(a) uvedeném výše, kromě toho, že 3-CE-styrylp6-[44methoxymethoxy)fenoxy]-l H-indazol byl použit namísto 3-(E-styryl)-6[34methoxymethoxy)fenoxy]-lH-indazolu. 'H NMR (DMSO-dó) δ 12,95 (s, lH),9,58(s, 1 H), 8,33 (d, IH, J = 9,0 Hz), 7,89 (d, 2H, J = 7,1 Hz), 7,68 (s, IH), 7,58 (t, IH, J = 7,3 Hz), 7,48 (d, IH, J= 7,3 Hz), 7,24 (s, IH), 7,13 (m, 3H), 6,99 (d, 2H, J= 8,8 Hz). HRMS [M+H]/z io vypočteno: 329,1290. Změřeno: 329,1293. Anal. výpočet pro C2)Hi6N2O2 0,35H2O: C, 75,36,
H, 5,03, N, 8,37. Změřeno: C, 75,35, H, 5,22, N, 8,24.
Příklad 10 15 l-fenylvinyl)-3-styry 1-1 H-indazol
16,2 mg ((0,0358 mmol) 64l-fenylvinyl)-3-styryl-l-[24trimethylsilanyl)ethoxymethyl]-lHindazolu bylo rozpuštěno v 0,6 ml THF a bylo podrobeno působení 0,6 ml 1M tetrabutyl20 amoniumfluoridu (TBAF) v THF. Směs byla zahřívána na 60 °C v argonové atmosféře po dobu 4 hodin. Směs byla ochlazena, neutralizována nadbytkem saturovaného hydrouhličitanu sodného a organická látka byla extrahována ethylacetátem a koncentrována. Tato směs 3 sloučenin (vizualizace TLC) byla podrobena působení 4 ml směsi THF-voda-TFA (1:1:2) po dobu 30 minut. Smčs byla naředěna 20 ml toluenu, koncentrována, neutralizována nadbytkem saturovaného hydrouhličitanu sodného a organická látka byla extrahována ethylacetátem. Organická látka byla usušena nad sulfátem sodným, dekantována a koncentrována. Purifikace chromatografií na silikagelu (2:8 směs ethylacetátu a hexanu) poskytla 4,6 mg (40 %) 641-fenylvinyI)-3-styryl1H-indazolu: Rf sm 0,62, p 0,24 (směs ethylacetátu a hexanu 3:7), 'HNMR (300 MHz, CDC13) δ 7,99 (d, IH, J = 8,5 Hz), 7,60-7,25 (m, 14H), 5,58 (d, IH, J = 1,1 Hz), 5,56 (d, IH, J = 1,1 Hz),
HRMS (FAB) [M+H]/z vypočteno 323,1548, změřeno 323,1545.
Výchozí látka byla připravena takto:
(i) fe, NaOH, dloxan-voda
6-jodindazol byl konvertován na 3,6-dijodindazol (82 %) jak bylo popsáno v příkladu l(a), krok (v): 'H NMR (300 MHz, CDCI,) δ 10,3 (š s, IH), 7,90 (s, IH), 7,52 (dd, IH, J = 1,2, 8,5 Hz), 7,24 (d, lH,J = 8,5Hz).
(li)
-44CZ 301667 B6
SEMBr, TBABr 50% KOH, CK^Ct^
755 mg (2,04 mmol) 3,6-dijodindazolu bylo přidáno k 2,5 g 50% KOH v 2,5 ml vody při teplotě 0 °C a byly přidány 4 ml dichlormethanu. K této směsi bylo přidáno 6,6 mg (0,02 mmol, 0,01 ekv.) tetrabutylamoniumbromidu (TBABr) a po kapkách bylo přidáno 397 μί (2,24 mmol,
1,10 ekv.) 2-(trimethylsilanyl)ethoxymethoxychloridu (SEM-C1) po dobu 3 minut. Směs byla rychle míchána při teplotě 0 °C po dobu 1,5 hodiny. Bylo přidáno 20 ml vody a 20 ml dichlormethanu a organická látka byla oddělena, usušena nad sulfátem sodným a koncentrována. Chromatografie na silikagelu (5% ethylacetát v hexanu, 150 ml silikagelu) poskytla 2 isomemí sloučeniny (1-SEM, 763 mg, 75 % a 2-SEM, 105 mg, 10 %): Rf srn 0,08, p 0,34 a 0,27 (směs io ethylacetátu a hexanu 1:9), 'H NMR (300 MHz, CDC13) δ 8,0 (s, IH), 7,55 (d, IH, J = 8,5 Hz), 7,24 (d, IH, J= 8,5 Hz), 5,69 (s, 2H), 3,58 (t, 2H, J= 8,2 Hz), 0,90 (t, 2H, J= 8,2 Hz),
-0,l(s,9H).
(iii)
μί (0,20 mmol, 2,0 ekv.) 1-bromstyrenu bylo rozpuštěno v 0,75 ml THF, ochlazeno na -78 °C a bylo podrobeno působení 235 μί (0,40 mmol, 4,0 ekv.) l,70M t-BuLi. Směs byla ponechána ohřát se na -42 °C po dobu 10 minut a byla přidána k 34 mg (0,25 mmol, 2,5 ekv.) čerstvě usušeného chloridu zinečnatého. Výsledný roztok byl ponechán ohřát se na 23 °C za míchání po dobu 25 minut. Tato směs byla přidána ke směsi 50 mg (0,10 mmol, 1 ekv.) čistého 3,6-dijod-l[2-(trimethylsilanyl)ethoxymethyl]-l H-indazolu a Pd(PPh3)4 5 mg (0,004 mmol, 0,04 ekv.). Po 10 minutách bylo sledováním TLC zjištěno, že reakce byla ukončena a reakce byla zastavena saturovaným hydrouhličitanem sodným. Organická látka byla extrahována ethylacetátem, usušena nad síranem sodným a koncentrována při sníženém tlaku. Chromatografie na silikagelu (5:95 směs ethylacetátu a hexanu) poskytla 33,1 mg (70%) 3—jod—6—<1—fenylvinyl)—1—[2—(trimethylsilanyl)ethoxymethyl]-l H-indazolu: Rf srn 0,39, p 0,36 (směs ethylacetátu a hexanu 1:9), Ή NMR (300 MHz, CDCh) δ 7,50 (s, IH), 7,42 (d, IH, J = 8,4 Hz), 7,33 (m, 5H), 7,22 (dd, IH, J = 1,2, 8,4 Hz), 5,68 (s, 2H), 5,59 (d, IH, J = 1,0 Hz), 5,57 (d, IH, J = 1,0 Hz), 3,58 (t, 2H, J = 8,2 Hz), 0,88 (t, 2H, J = 8,2 Hz), -09 (s, 9H), HRMS (FAB) [M+H]/z vypočteno 477,0859, změřeno 477,0866, (iv)
Příprava 6-(l-feny1vinyl)-3-styryl-l-[2-(trimethyl$ilanyl)ethoxymethyl]-l H-indazolu: 23 μΙ 35 (0,174 mmol, 2,5 ekv.) E-2-bromstyrenu bylo rozpuštěno v 1,0 ml THF a bylo ochlazeno na
-78 QC. Bylo přidáno 205 μί (0,348 mmol, 5,00 ekv.) t-BuLi a směs byla zahřáta na -42 °C po dobu 7 minut za vzniku sytě červené směsi. Roztok byl kanylou přidán ke 29 mg (0,209 mmol, 3,00 ekv.) čerstvě usušeného chloridu zinečnatého a směs byla ponechána ohřát se na 23 ŮC za míchání po dobu 20 minut. Tento roztok byl kanylou přidán k čisté směsi 33,1 mg (0,0696 mmol,
1,0 ekv.) 3-jod-6-(l-fenylvinyl)-l-[2-(trimethylsilanyl)ethoxymethyl]-lH-indazolu a 4 mg
-45CZ 301667 B6 (0,0035 mmol, 0,05 ekv.) Pd(PPh3)4 ve 23 °C. Tento roztok byl ponechán za míchání po dobu minut a byl podroben působení saturovaného hydrouhličitanu sodného a extrahován ethylacetátem. Organická látka byla usušena nad sulfátem sodným, dekantována a koncentrována.
Purifikace chromatografií na silikagelu s použitím dvou kolon (5:95 směs ethylacetátu a hexanu,
12 ml silikagelu, a 1:99 směs ethylacetátu a benzenu, 12 ml silikagelu) poskytla 16,2 mg (51 %)
6-(l-fenylvinyl)-3-styryl-l-[2-(trimethylsílanyl)ethoxymethyl]-lH-indazolu: Rf sm 0,38, p 0,29 (směs ethylacetátu a hexanu 1:9), ‘H NMR (300 MHz, CDC13) δ 7,98 (d, IH, J = 8,4 Hz), 7,62 - 7,22 (m, 14H), 5,71 (s, 2H), 5,57 (s, 2H), 3,60 (t, 2H, J = 8,2 Hz), 0,90 (t, 2H, J = 8,2 Hz), -08 (s, 9H), HRMS (FAB) [M+H]/z vypočteno 453,2362, změřeno 453,2354.
io
Příklad 11
N-methy l-N-(3-styry 1-1 H-indazol-6-yl)benzen-l ,3-diamin
K 237 mg (0,5 mmol) N-methyl-N-{3-styry 1-1-[2-(trimethylsilanyl)ethoxymethy 1]-1Hindazol-6-yl}benzen- 1,3-diaminu bylo přidáno 10,1 ml (10,1 mmol) ÍM TBAF v THF, pak následovalo 0,34 ml (5,04 mmol) 10 ekv.) ethylendiaminu. Výsledná směs byla zahřívána na 70 °C po dobu 5 hodin. Reakce pak byla zastavena 10 ml saturovaného NaHCO3 a extrahována 3 x 35 ml EtOAc. Sloučené EtOAc fáze byly promyty 5 x 20 ml H2O, pak 20 ml solanky, usušeny nad Na2SO4, dekantovány a koncentrovány při sníženém tlaku do pěny. Surová látka byla purifikována chromatografií na silikagelu (9:1 směs dichlormethanu a ethylacetátu) za vzniku 120 mg (70% výtěžek) N-methyl-N-(3-styryl-lH-indazol-6-yl)benzen-l,3-diaminu jako pěny. Rf sm 0,73, Rf p 0,27 (směs dichlormethanu a ethylacetátu 7:3), 13C NMR (75 MHz,
CDC13) δ 150,3, 148,8, 147,5, 147,5, 143,9, 143,4, 137,5, 131,1, 130,3, 129,3, 128,9, 128,2, 127,9, 126,7, 121,0, 120,5, 117,0, 116,0, 112,6, 109,8, 109,0, 98,3, 40,7, LCMS (ESI) [M+H]/z vypočteno 341, změřeno 341. Anal. výpočet: C, 77,62, H, 5,92, N, 16,46. Změřeno: C, 76,16, H, 5,88, N, 15,95.
5o Výchozí látka byla připravena takto:
(i)
b. 3N NaOH dioxan, 23 °C
--
I
6-nitro-l H-indazol byl konvertován na 50,6 g (87 %) 3-jod-6-nitro-l H-indazol, jak bylo 35 popsáno v příkladu l(a), krok (v): FTIR (KBr) 3376, 3076, 2964, 2120, 1739, 1626, 1526, 1439,
1294, 1128, 954 cm-1, 'H NMR (300 MHz, CDC13) δ 8,28 (s, IH), 8,05 (s, IH), 7,66 (d, IH, J = 8,13 Hz), 7,45 (dd, IH, J= 8,33, 1,38 Hz), 7,17 (d, IH, J= 1,01 Hz), 7,14 (s, IH), 7,03 (d, IH, J= 8,04 Hz), 6,89 (s, 2H), 3,82 (s, 3H), 2,55 (s, 6H), 2,21 (s, 3H), 1,32 (s, 9H). MS (FAB) [M+H]/z vypočteno 311, změřeno 311. Anal. výpočet: C, 69,66, H, 5,85, N, 9,03.
Změřeno: C, 69,41, H, 5,98, N, 8,79.
(H)
-46CZ 301667 B6
3-jod-6-nitro-lH-indazol byl konvertován na 10,2 g (81% výtěžek) 6-nitro-3-jod-[2-(trimethylsilanyl)ethoxymethyl]-lH-indazol, jak bylo popsáno v příkladu 10, krok (ii): t.t. 58 °C.
Anal. výpočet: C, 37,24, H, 4,33, N, 10,02. Změřeno: C, 37,21, H, 4,38, N, 10,00.
(iii)
io
Ke směsi 11,0 g (26,1 mmol) 6-nitro-3-jod-[2-(trimethylsilanyl)ethoxymethyl]-lH-indazoIu, 4,64 (31,4 mmol) styiylboronové kyseliny a 1,25 g (1,08 mmol) Pd(PPh3)4 v argonové atmosféře bylo přidáno 192 ml toluenu, 4 ml MeOH a 32,6 ml (65,3 mmol) 2N vodného NaOH. Výsledná heterogenní směs byla zahřívána na 90 °C. Po 8 hodinách byla reakce naředěna 150 ml EtOAc a 50 ml vody, fáze byly odděleny a organická fáze byla extrahována 2 x 50 ml EtOAc. Sloučené organické fáze byly promyty 50 ml solanky, pak usušeny nad Na2SO4, filtrovány a koncentrovány pří sníženém tlaku. Surová reakční směs byla purifikována chromatografií na silikagelu (1:9 směs EtOAc a hexanu) za vzniku 7,65 g (74 %) 6-nitro-3-styryI-l-[2-(trimethylsilanyi)ethoxymethyl]-lH-indazolu jako žluté pevné látky: l3C NMR (75 MHz, CDC13) δ 148,3, 145,0,
141,3, 138,1, 134,2, 130,5, 129,9, 129,8, 129,5, 128,1, 127,4, 123,2, 119,8, 117,8, 108,2, 79,7, 68,5, 19,2, 0,0, MS (FAB) [M+Na]/z vypočteno 418, změřeno 418. Anal. výpočet: C, 63,77, H, 6,37, N, 10,62. Změřeno: C, 64,04, H, 6,29, N, 10,56.
(iv)
8,1 g (20,5 mmol) 6-nitro-3-styryl-l-[2-(trimethylsilanyl)ethoxymethyl]-lH-indazolu bylo rozpuštěno v 75 ml DMF ve 23 °C v argonové atmosféře. Bylo přidáno 12,9 g (67,7 mmol)
SnCl2, pak následovalo 1,7 ml (92,2 mmol) vody a výsledná směs byla zahřívána na 50 °C. Po 4 hodinách bylo přidáno 45 ml (135 mmol) 3N NaOH následováno 100 ml EtOAc, Výsledná emulze byla filtrována za horka přes celit a lože celitu bylo promyto za horka 3 x 100 ml EtOAc. Filtrát byl koncentrován při sníženém tlaku, zbytek byl rozpuštěn v EtOAc, promyt solankou, usušen nad Na2SO4, filtrován a koncentrován při sníženém tlaku za vzniku pevné látky. Surová látka byla purifikována chromatografií na silikagelu (2:8 až 7:3 směs ethylacetátu a hexanu) za vzniku 5,1 g (68% výtěžek) 3—sty ryl- l-[2-(trimethy lsilanyl)ethoxy methy I]—1 H-indazol-6-ylaminu jako žluté pevné látky, MS (FAB) [M+H]/z vypočteno 366, změřeno 366.
-47CZ 301667 B6 (v)
Ke směsi 1,1 g (3 mmol) 3-styryI-l-[2-(trimethylsilanyl)ethoxymethyl]-lH-indazol-6-ylaminu, 0,9 g (3,6 mmol) m-nitrojodbenzenu, 0,07 g (0,133 mmol) BINAP, 34 mg (0,0375 mmol)
Pd2(dba)j a 1,37 g (4,2 mmol) CS2CO3 v argonové atmosféře bylo přidáno 6 ml toluenu. Výsledná heterogenní směs byla zahřívána na 80 °C. Po 46 hodinách byla reakce ochlazena na 23 °C, naředěna 20 ml ethylacetátu (EtOAc) a filtrována. Bylo přidáno 5 ml vody, fáze byly odděleny a organická fáze byla extrahována 2 x 50 ml EtOAc. Sloučené organické látky byly promyty solankou, pak usušeny nad Na2SO4, filtrovány a koncentrovány při sníženém tlaku. Surová reakční směs byla purifikována chromatografíi na silikagelu (za eluce 9:1 směsí hexanu a EtOAc) za vzniku 7,65 g (74 %) (3-nitrofenyl)-{3-styryl-l-[2-(trimethylsilanyl)ethoxymethyl]-lHindazoI-6-yl}aminu jako žluté pevné látky: TLC (směs hexanu a EtOAc 7:3) Rf sm 0,16, Rf p 0,30 (směs ethylacetátu a hexanu 3:7), FTIR (KBr) 3391, 3059, 2952, 2894, 1614, 1530, 1483, 1346, 1248, 1076, 836, 734 cm'1, *H NMR (300 MHz, CDC13) δ 7,86 (s, IH), 7,83 (s,.lH),
7,65 (dt, IH, J = 2,21, 5J3 Hz), 7,15-7,41 (m, 5H), 6,93 (dd, IH, J- 1,87, 8,67 Hz), 5,56 (s, 2H), 3,51 (t, 2H, J = 8,17 Hz), 0,81 (t, 2H, J = 7,96 Hz), -0,15 (s, 9H), l3C NMR (75 MHz, CDCb) δ 149,6, 144,8, 143,5, 142,4, 140,9, 137,3, 131,8, 130,3, 129,0, 128,2, 126,7, 122,8,
122,6, 120,1, 119,3, 116,1, 115,6, 111,4, 98,5, 77,9, 66,7, 18,0, -1,2, MS (ESI) [M+H]/z vypočteno 487, změřeno 487. Anal. výpočet: C, 66,64, H, 6,21, N, 11,51. Změřeno: C, 66,91,
H, 6,21, N, 11,44.
(vi)
K 434 mg (0,89 mmol) (3-nitrofenyl)-{3-styryl-l-[2-(trimethylsilanyl)ethoxymethyl]-lH25 indazol-6-yl}aminu v 5 ml THF ochlazeného na -5 °C v argonové atmosféře, bylo přidáno 0,42 ml (4,5 mmol) dimethy 1 sulfátu, následováno 1,8 ml (1,8 mmol) LiHMDS (ÍM v THF). Po 20 minutách byla reakce zastavena 2 ml saturovaného vodného NH4CI, pak extrahována 3 x 20 ml EtOAc. Sloučené organické látky byly promyty 10 ml solanky, usušeny nad Na2SO4, dekantovány a koncentrovány pri sníženém tlaku. Purifikace chromatografíi na silikagelu (za eluce směsí hexanu a EtOAc 9:1) poskytla 367 mg (82 %) methyl-(3-nitrofenyl)-{3-styryl-l[2-(tr i methy lsi lany l)ethoxy methy l]-lH-indazol-6-yl} aminu jako oleje: TLC (směs hexanu a EtOAc 7:3) Rf sm 0,29, Rfp 0,39 (ethylacetát: hexan 3:7), FTIR (KBr) 2951, 2894,1611,1528, 1485, 1348, 1248, 1077 cm ', 'H NMR (300 MHz, CDClj) δ 7,99 (d, IH, J = 8,67 Hz), 7,77 (t, 1H, J = 2,25 Hz), 7,72 (dd, IH, J = 0,79, 2,09 Hz), 7,60 (d, 2H, J = 7,22 Hz), 7,26- 7,54 (m, 7H), 7,19 (dd, IH, J = 0,78, 2,41 Hz), 7,07 (dd, IH, J = 1,85, 8,69 Hz), 5,70 (s, 2H), 3,63 (t, 2H, J = 8,10 Hz), 3,48 (s, 3H), 0,92 (t, 2H, J = 8,10 Hz), -0,04 (s, 9H), l3C NMR (75 MHz, CDCl·,) δ 150,2, 149,6, 147,1, 143,5, 142,5, 137,3, 131,9, 129,8, 129,0, 128,2, 126,8, 123,1,
122,6, 120,2, 120,0, 119,7, 114,4, 111,4, 104,5, 78,0, 66,8, 41,1, 18,0, -1,2, LCMS (ESI) [M+H]/z vypočteno 501, změřeno 510.
-48CZ 301667 B6
Methyl-{3-nitrofenyl)-{3-styryl-l-[2-(trimethylsilanyl)ethoxymethyl]-lH-indazol-6-yl}amin byl konvertován na N-methyl-N-{3-styryl-l-[2-(trimethylsilanyl)ethoxymethyl]-lH-indazol6-yl}benzen-l,3-diamin, jak bylo popsáno v příkladu 11, krok (iv). Rf sm 0,55, Rf p 0,31 (směs ethylacetátu a hexanu 3:7), FTIR (tenký film) 3455, 3360, 2951, 2893, 1621, 1601, 1494, 1449, 1249, 1074 cm', 'H NMR (300 MHz, CDC13) δ 7,81 (d, IH, J= 8,8 Hz), 7,58 (d, 2H, J = 7,21 Hz), 7,26- 7,50 (m, 5H), 7,12 (t, IH, J= 7,93 Hz), 7,01 (d, IH, J= 1,73 Hz), 6,95 (dd, IH, J = 1,99, 8,85 Hz), 5,67 (s, 2H), 3,63 (t, 2H, J = 8,12 Hz), 3,38 (s, 3H), 0,93 (t, 2H, J = 8,13 Hz), -0,04 (s, 9H), l3C NMR (75 MHz, CDC13) δ 150,3, 149,0, 147,7, 143,4, 143,0,
137,6, 131,3, 130,4, 128,9, 128,0, 126,7, 121,2, 120,6, 117,3, 117,0, 113,1, 110,1, 109,3, 97,5, 77,8,66,6,41,0, 18,0, -1,2, LCMS (ESI) [M+H]/z vypočteno 471, změřeno 471.
Příklad I2(a)
N-{3-[methyl-(3-styryl-lH-indazol-ó-yl)amÍno]fenyl}acetamid
ί)ΑοΛ »‘C
.......— ......... >
34 mg (0,041 mmol) N-methyI-N-{3-styryl-l-[2-(trimethylsilanyl)ethoxymethyl]-lHindazol-6-yl}benzen-l,3-diaminu, připraveného vpříkladu 11, bylo suspendováno v 0,5 ml CH2C12 ve 23 °C v argonové atmosféře. Bylo přidáno 81 μΐ (1,0 mmol) pyridinu, 94 μΐ (1,0 mmol) Ac2O a katalytické množství DMAP. Reakce se okamžitě stala homogenní. Po 1 hodině analýza TLC (CH2CI2:EtOAc 4:1) neprokázala žádnou výchozí látku. Reakce byla zastavena 2 ml vodného saturovaného NaHCO3, pak byla naředěna 15 ml EtOAc a organické fáze byly promyty 3 ml solanky, dekantovány a koncentrovány při sníženém tlaku na olej. Olej byl suspendován ve 2 ml MeOH a bylo přidáno 83 mg (0,6 mmol) K2CO3. Výsledná směs byla míchána ve 23 °C v argonové atmosféře. Po 1 hodině byla reakce naředěna 15 ml EtOAc a organické fáze byly promyty 3 ml solanky, dekantovány a koncentrovány při sníženém tlaku.
Surová látka byla purifikována sem i preparativní HPLC za vzniku 8,4 mg (22 %) N-{3-[methyl(3-styryl-lH-indazol-6-yl)amino]fenyl}acetamidu. 'H NMR (300 MHz, CDCI,) δ 7,86 (d, IH, J = 8,68 Hz), 7,58 (d, IH, J = 7,17 Hz), 7,16- 7,45 (m, 7H), 7,15 (d, IH, J = 8,29 Hz), 6,98 (m, IH), 6,95 (d, IH, J= 1,92 Hz), 6,8 (dd, IH, J= 1,16, 8,05 Hz), 3,37 (s, 3H), 2,14 (s, 3H). LCMS (ESI) [M+H]/z vypočteno 383, změřeno 383. Anal. výpočet: C, 75,37, H, 5,80, N, 14,65.
Změřeno: C, 73,53, H, 6,01, N, 13,73.
Příklad 12(b)
N-{3-[methyl-(3-styryl-l H-indazol-6-yl)amino] fenyl} benzamid
-49CZ 301667 B6
Sloučenina z příkladu 12(b) byla připravena podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 12(a) uvedeným výše, kromě toho, že benzoyl chlorid byl použit namísto acetanhydridu, LCMS (ESI) [M+H]/z vypočteno 475, změřeno 475. Anal. výpočet: C (78,36), H (5,44), N (12,60).
Změřeno: C (76,57), H (5,50), N (12,12).
Příklad 12(c) io Benzylester {3-[methyl-(3-styryl-lH-indazol-6-yl)amino]fenyl}karbamové kyseliny
Sloučenina z příkladu 12(c) byla připravena podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 12(a) uvedeným výše, kromě toho, že karbobenzyloxychlorid byl použit namísto acetanhydridu. Rrsm 0,30, Rfp0,57 (CH2Cl2:EtOAc 8:2), LCMS (ESI+) [M+H]/z vypočteno
475 změřeno 475, Anal. výpočet: C (75,93), H (5,52), N (11,81), změřeno, C (75,60), H (5,96),
N (10,75).
Příklad 12(d) {3-[methyl-(3“StyryMH“indazol--6-yl)amino]fenyl}amíd 5-methy lth iazol-2-karboxy lové kyseliny
K roztoku 26 mg (0,075 mmol) N-methyl-N-(3-styryl-lH-indazol-6-yl)benzen-l,3-diaminu, připraveného v příkladu 11, a 64 mg (0,45 mmol) 5-methy lth i azol-2-karboxy lové kyseliny v 0,375 ml DMF ve 23 °C v argonové atmosféře bylo přidáno 171 mg (0,45 mmol) HATU. Po hodině analýza TLC (CH2Cl2:EtOAc 8:2) neprokázala výchozí látku. Reakce byla zastavena ml saturovaného vodného NaHCOj, pak byla naředěna 15 ml EtOAc a organické fáze byly promyty 3 ml solanky, dekantovány a koncentrovány pri sníženém tlaku.Olej byl suspendován ve
2 ml MeOH a bylo přidáno 62 mg (0,45 mmol) K2CO3. Výsledná směs byla míchána ve 23 °C v argonové atmosféře. Po 1 hodině analýza TLC (CH2Cl2:EtOAc 8:2) neprokázala výchozí látku. Reakce byla naředěna 15 ml EtOAc a organické fáze byly promyty 3 ml solanky, dekantovány a koncentrovány při sníženém tlaku na pevnou látku. Surová látka byla purifikována chromato-50CZ 301667 B6 grafií na silikagelu (za eluce směsí CH2Cl2:EtOAc 85:15) za vzniku 9,9 mg (28 %) sloučeniny uvedené v názvu po purifikaci semipreparativní HPLC. Rf sm 0,25, Rf p 0,39 (směs hexanu a EtOAc 8:2), LCMS (ESI+) [M+H]/z vypočteno 466, změřeno 466. Anal. výpočet: C (69,65),
H (4,98), N (15,04), S (6,89). Změřeno: C (69,24), H (5,35), N (13,97), S (5,95).
Příklad 13
N-[3-(3-styryl-1 H-indazol-6-ylamino)fenyl]benzamid
N-(3-{ 3-styryl-l-[2-(trimethyl sílaný l)ethoxymethyl]-1 H-indazol-6-y lamino} feny l)benzam i d byl konvertován na N-[3-(3-styryl-l H-indazol-6-ylamino)fenyl]benzamid, jak bylo popsáno v příkladu 11. LCMS (ESI) [M+H]/z vypočteno 431, změřeno 431. Anal. výpočet: C, 78,12, H, 5,15, N, 13,01. Změřeno: C, 77,06, H, 6,91, N, 9,88.
Výchozí látka byla připravena takto:
(3-nitrofenyl)-{3-styryI-l-[2-(trimethylsÍlanyI)ethoxymethyl]-lH-indazol-6-yI}amÍn, připravený v příkladu 11, krok (vi), byl konvertován na N-{3-styryI-l-[2-(trimethylsilanyl)ethoxymethyl]-lH-indazol-ó-yl} benzen-1,3-diamin, jak bylo popsáno v příkladu 11, krok (iv). LCMS (ESI) [M+H]/z vypočteno 457, změřeno 457.
(ii)
K roztoku 91 mg (0,2 mmol)N-{3-styryl-l-[2-(trimethylsilanyl)ethoxymethyl]-l H-indazol-6yl}benzen-l,3-diaminu a 0,081 ml (1,0 mmol) pyridinu v 0,5 ml CH2C12 ochlazenému na -5 °C v argonové atmosféře bylo přidáno 0,028 ml (0,24 mmol) benzoylchlorid. Po 0,5 hodině byla reakce zastavena saturovaným vodným NaHCO3, pak extrahována 2 x 5 ml CH2C12. Sloučené organické látky byly promyty 5 ml solanky, usušeny nad Na2SO4, dekantovány a koncentrovány při sníženém tlaku za vzniku oleje. Surová látka byla purifikována chromatografií na silikagelu (za eluce směsí hexanu a EtOAc 3:2) za vzniku 108 mg (96% výtěžek) N-(3-{3-styryl-l-[2(trimethyIsilanyl)ethoxymethyl]-lH-indazol-6-ylamino}fenyl)benzamidu. RfSm 0,35, Rfp0,44 (směs ethylacetátu a hexanu 1:1), FTIR (tenký film) 3320, 2951,2893, 1657, 1604, 1537, 1493,
-51 CZ 301667 B6
1409, 1303, 1248, 1074 cm-1, LCMS (ESI) [M+H]/z vypočteno 561, změřeno 561. Anal.
výpočet: C, 72,82, H, 6,47, N, 9,99. Změřeno: C, 72,33, H, 6,39, N, 9,81.
Příklad 14
Methy t feny I—(3—sty ry 1— 1 H-indazol-6-y l)amin
Methylfenyl-{3-styiyl-l-[2-(trimethylsilanyl)ethoxymethyl]-lH-indazol-6-yl}amin byl io konvertován na methy lfenyK3-styryl-lH-Índazol-6-yl)amin, jak bylo popsáno v příkladu 11,
MS (ESI) [M+H]/z vypočteno 326, změřeno 326.
Výchozí látka byla připravena takto:
(ί)
K roztoku 1,58 g (4 mmol) 3-styryl-l-[2-(trimethylsilanyl)ethoxymethyl]-lH-indazol-6-ylaminu ve 14 ml AcOH, 3 ml vody a 1,67 ml koncentrované HCl ochlazenému na 2 °C bylo přidáno 304 mg (4,4 mmol) roztoku NaNO2 v 0,5 ml vody po dobu 5 minut. Výsledný tmavě červený roztok byl míchán ve 2 °C po dobu 0,5 hodiny, pak bylo přidáno 797 mg (4,8 mmol) roztoku KI a 610 mg (2,4 mmol) I2 v 1 ml vody po kapkách tak, aby se udržela vnitřní teplota pod 5 °C. Po 2 hodinách ve 2 °C byla reakce ponechána za míchání ve 23 °C po dobu 17 hodin. Reakce byla zastavena 3N vodným NaOH, naředěna 50 ml EtOAc a 15 ml H2O, fáze byly odděleny a vodná fáze byla extrahována 2 x 15 ml EtOAc. Sloučené organické fáze byly promyty
3 x 20 ml 5% NaHSO3, 15 ml solanky, usušeny nad Na2SO4, dekantovány a koncentrovány při sníženém tlaku. Surová reakční směs byla purifikována chromatografii na silikagelu (za eluce 1:1 směsí hexanu a EtOAc) za vzniku 1,3 g (68% výtěžek) 6-jod-3-styryl-l-[2-(trimethylsilanyl)ethoxy methy l]-lH-indazolu jako bílé pevné látky. lH NMR (300 MHz, CDC13) δ 8,03 (s, IH), 7,79 (d, IH, J - 9,0 Hz), 7,30 - 7,60 (m, 8H), 5,73 (s, 2H), 3,63 (t, 2H, J = 6,0 Hz), 0,96 (t, 2H,
J = 6,0 Hz), 0,0 (s, 9), l3C NMR (75 MHz, CDCI·,) δ 143,6, 142,4, 137,2, 132,1, 130,8, 129,0,
128,3, 126,8, 122,5, 122,4, 119,6, 119,5, 92,9, 78,1, 66,9, 18,0, -1,2. Anal. výpočet: C, 52,94, H, 5,29, N, 5,88. Změřeno: C, 52,66, H, 5,29, N, 5,74.
-52CZ 301667 B6
6-jod-3-styryl-l-[2-(trimethylsi lany l)ethoxy methy l]-l H-indazo I byl konvertován na methylfenyl-{3-styryl-l-[2-(trimethylsilanyl)ethoxymethyl]-l H-indazol-6-yl}amin, jak bylo popsá5 no v příkladu 11, krok (v), Rf sm 0,35 Rf p 0,13 (směs EtOAc a hexanu 1:9), IR (KBr) 3031, 2951,1625,1595, 1498, 1449, 1326,1303, 1248,1212, 1076,835,694 cm'1, MS (ESI) [M+H]/z vypočteno 456, změřeno 456.
Příklad 15
N-[3-(2-benzo[ 1,3]dioxol-5-y 1 viny 1)-1 H-indazol-6-yl]-N-methy lbenzen-1,3-diamin
[3-(2-benzo[l,3]dioxol-5-ylvinyl)-lH-indazo 1-6-y I] methy i-(3-nÍtrofenyl)am i n byl konverto1$ ván na N-[3-(2-benzo[ 1,3]dioxol—5—y 1 viny 1 >— 1 H-indazol-6-yl]-N-methylbenzen-1,3-diamin, jak bylo popsáno v příkladu 11, krok (iv), LCMS (ESI) [M+H]/z vypočteno 385, změřeno 385.
Anal. výpočet: C, 71,86, H, 5,24, N, 14,57. Změřeno: C, 70,99, H, 5,60, N, 13,80.
Výchozí látka byla připravena takto:
(i)
Ke směsi 4,2 g (10 mmol) 6_nitro-3-jod-[2-(trimethylsilanyl)ethoxymethyl]-lH-Índazolu, 3,46 g (15 mmol) boronové kyseliny a 0,58 g (0,5 mmol) Pd(PPh3)4 ve 23 °C v argonové atmos25 féře bylo přidáno 38 ml 1,4-dioxanu a 12,5 ml (25 mmol) 2N vodného NaOH. Výsledná směs byla zahřívána na 90 °C. Po 2 hodinách byla reakce naředěna 100 ml EtOAc a 70 ml vody, fáze byly odděleny a organická fáze byla extrahována 2 x 100 ml EtOAc. Sloučené organické fáze byly promyty 20 ml solanky, a pak usušeny nad Na2SO4, filtrovány a koncentrovány při sníženém tlaku. Surová směs byla purifikována chromatografii na silikagelu (za eluce 9:1 směsí hexanu a EtOAc) za vzniku 4,15 g (94% výtěžek) 3-(2-benzo[l,3]dioxoI_5-ylvinyl)-6-nÍtro-l[2-(trimethylsilanyl)ethoxymethyl]-lH-indazolu jako žluté pevné látky. FTIR (tenký film) 2950, 2898, 1523, 1501, 1483, 1446, 1344, 1249, 1080, 1043,928 cm'1, 'H NMR (300 MHz, CDClj) δ 8,56 (dd, 1H, J = 0,68, 1,75 Hz), 8,14 (d, 1H, J = 1,78 Hz), 8,13 (d, 1H, J = 0,67 Hz), 7,50 (d, 1H,
-53CZ 301667 B6
16,53 Hz), 7,25 (d, 1H, 16,52 Hz), 7,18 (d, IH, J = 1,67 Hz), 7,07 (dd, 1H, J - 1,65, 8,13 Hz),
6,88 (d, IH, J = 8,0 Hz), 6,05 (s, 2H), 5,84 (s, 2H), 3,66 (t, 2H, J = 7,33 Hz), 0,97 (t, 2H,
J = 7,24 Hz), 0,0 (s, 9H), l3C NMR (75 MHz, CDC13) δ 148,5, 148,2, 147,0, 143,9, 140,1, 132,7,
131,3, 126,1, 122,3, 121,9, 116,7, 116,5, 108,7, 106,9, 105,7, 101,5, 78,4, 67,2, 17,9,
-1,3, LCMS (ESI) [M+H]/z vypočteno 531, změřeno 531.
(ii)
342-benzo[ 1,3]dioxol-5-ylvinyl)-6-nitro-I-[2-(trimethylsilanyl)ethoxymethyl]-l H-indazol io byl konvertován na 3-(2-benzo[ 1,3]díoxol-5-ylvinyl)-l-[24trimethylsilany 1 )ethoxymethy 1]1 H-indazol-6-ylamin, jak bylo popsáno v příkladu 11, krok (iv). 'H NMR (300 MHz, CDC13) δ 7,73 (d, IH, J = 8,56 Hz), 7,52 (d, IH, J = 16,57 Hz), 7,18 (d, IH, J = 16,56 Hz), 7,10 (d, IH, J= 1,49 Hz), 6,98 (dd, IH, J= 1,52, 8,06 Hz), 6,80 (d, IH, 8,01 Hz), 6,68 (d, IH, J = 1,44 Hz), 6,63 (dd, IH, J= 1,86, 8,57 Hz), 5,95 (s,2H), 5,59 (s, 2H), 3,59 (t, 2H,
J = 8,17 Hz), 0,91 (t, 2H, J = 8,33 Hz), 0,04 (s, 9H), 13C NMR (75 MHz, CDCI3) δ 148,3, 147,6,
146,4, 143,4, 143,0, 132,0, 130,8, 122,0, 121,7, 118,8, 116,5, 113,1, 108,5, 105,5, 101,3, 92,9, 77,6, 66,3, 17,9, -1,3, LCMS (ESI) [M+H]/z vypočteno 410, změřeno 410.
(iii)
3-(2-benzo[l,3]dioxol-5-ylvinyl)-l-(2-(trimethylsilanyl)ethoxymethyl]-l H-indazol-6-y lamin byl konvertován na {3-{2-benzo[l,3]dioxol~5-yIvínyl)-l-[2-(trimethyIsilanyl)ethoxymethyl]lH-indazol-6-yl}-(3-nitrofenyl)amin, jak bylo popsáno v příkladu 11, krok (v). t3CNMR (75 MHz, CDC13) δ 150,8, 149,7, 149,1, 146,0, 144,8, 143,6, 142,1, 133,1, 132,7, 131,6, 124,0, 123,8, 123,1, 120,4, 119,5, 117,2, 116,8, 112,6, 109,9, 106,9, 102,6, 99,7, 79,1, 67,9, 19,2, 0,0,
MS (FAB) [M+H]/z vypočteno 531, změřeno 531. Anal. výpočet: C, 63,38, H, 5,70, N, 10,56. Změřeno: C, 63,49, H, 5,76, N, 10,42.
-54CZ 301667 B6
{3-(2-benzo[l,3]dioxol-5-ylvinyl)-l-[2-(trimethylsÍlanyl)ethoxymethyl]-l H-indazo 1-6-y I}(3-nitrofenyl)amin byl konvertován na {3-(2-benzo[ 1,3]dioxol-5-ylvinyl)-1—[2—(trimethy 1silanyl)ethoxymethyl]-lH-indazol-6-yI}methyl-(3-nitrofenyl)amin, jak bylo popsáno v příkladu 11, krok (vi). FTIR(KBr) 2952, 2894, 1612, 1529, 1503, 1489, 1446, 1407,1348, 1306, 1251, ίο
1077, 1039 cm'1, i3C NMR (75 MHz, CDC13) δ 150,1, 149,5, 148,4, 147,8, 147,0, 143,5, 142,4, 131,8, 131,5, 129,8, 123,0, 122,49, 121,9, 120,1, 119,5, 118,2, 114,3, 11,3, 108,7, 105,7, 104,5,
101,4, 78,0, 66,8, 41,0, 17,9, -1,2, MS (FAB) [M+H]/z vypočteno 545, změřeno 545. Anal. výpočet: C, 63,95, H, 5,92, N, 10,29. Změřeno: C, 62,63, H, 5,72, N, 9,62.
(v)
{3-(2-benzo[l,3]dioxoI-5-ylvinyl)-l-[2-(triinethylsilanyl)ethoxymethyl]-lH-indazol-6-yl}’ methyl-(3-nitrofenyl)amin byl konvertován na [3-(2-ben2o[l,3]dÍoxol-5-ylvÍnyl)-lH-indazol6-yl]methyl-(3-nÍtrofenyl)amin, jak bylo popsáno v příkladu 11. LCMS (ESI) [M+H]/z vypočteno 415, změřeno 415. Anal. výpočet: C, 66,66, H, 4,38, N, 13,52. Změřeno: C, 66,56, H, 4,48, N, 13,35.
Příklad 16(a)
N-(3-{[3-(2-benzo[ 1,3]dioxol-5-ylvinyl)-l H-indazo 1-6-y l]methy lamino} feny l)benzamid
N-[3-(2-benzo[l,3]dioxoI-5-ylvinyl)-lH-indazol-6-yl]-N-methylbenzen-l,3-diamin (připravený, jak bylo popsáno v příkladu 15) byl konvertován na N_(3-{[3-(2-benzo[l,3]dioxol-5-ylvinyl)-lH-indazoI-6-yljmethylamino}-fenyl)benzamid způsobem popsaným v příkladu 12(a). LCMS (ESI) [M+H]/z vypočteno 489, změřeno 489. Anal. výpočet: C, 73,76, H, 4,95, N, 11,47. Změřeno: C, 73,19, H, 5,09, N, 11,20.
-55CZ 301667 B6
Příklad I6(b)
N-(3-{ [3-{2-benzo[ 1,3]dioxol-5-ylvtnyl)-l H-indazol-6-yl]methylamino} fenyl)-3-methyl· benzamid
Sloučenina z příkladu 16(b) byla připravena podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 16(a) uvedeném výše, kromě toho, že m-toluyIchlorid byl použit namísto benzoylchloridu. LCMS (ESI) [M+H]/z vypočteno 504, změřeno 504. Anal. výpočet: C, 74,09, H, 5,21, N, 11,15. Změřeno: C, 73,04, H, 5,84, N, 10,29.
Příklad 16(c)
N-(3-{[3-(2-benzo[l,3]dioxol-5-yl vinyl)-lH-indazol-ó-yljmethylamino) feny l)-3-dimethyl15 amino-benzamid
Sloučenina z příkladu 16(c) byla připravena podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu I6(a) kromě toho, že m-dimethylaminobenzoylchlorid byl použit namísto benzoylchloridu. LCMS (ESI) [M+H]/z vypočteno 532, změřeno 532. Anal. výpočet: C, 72,30, H, 5,50, N, 13,17.
Změřeno: C, 71,61, H, 5,80, N, 12,75.
Příklad 16(d)
N-3-{[3-(2-benzo[l ,3 Jdioxol—5—y lviny 1>— 1 H-indazol-6-yl]-methylamino}fenyl)-3-trifluormethylbenzamid
Sloučenina z příkladu 16(d) byla připravena podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu
16(a) kromě toho, že m-trifluormethylbenzoylchlorid byl použit namísto benzoylchloridu. LCMS (ESI) [M+H]/z vypočteno 557, změřeno 557. Anal. výpočet: C, 66,90, H, 4,17, N, 10,07.
Změřeno: C, 66,64, H, 4,34, N, 9,82.
Příklad 16(e)
3-acetyl-N-{3-{ [3-(2-benzo[l ,3 jdioxol-5-y 1 viny 1)-1 H-indazol-6-yl]methy lamino} feny Οι o benzamid
Sloučenina z příkladu 16(e) byla připravena podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 16(a) kromě toho, že m-acetylbenzoylchlorid byl použit namísto benzoylchloridu. LCMS (ESI) [M+Hj/z vypočteno 531, změřeno 531. Anal. výpočet: C, 72,44, H, 4,94, N, 1056.
Změřeno: C, 55,51, H, 4,21, N, 7,58.
Příklad 16(f)
6-[N-(3-(4-Zerc-butyl-3-hydroxybenzamido)fenyl)-N-methyl-amino]-3-E-[(3,4-methylendioxyfenyl)ethenyl]-l H-indazol
Sloučenina z příkladu 16(f) byla připravena podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 16(a) kromě toho, že 3-Zerc-butyM-hydroxybenzoová kyselina, HATU a TEA byly použity namísto benzoylchloridu. lH NMR (300 MHz, CD3OD) δ 7,90 (d, IH, J = 8,91 Hz), 7,83 (d, IH, J = 2,29 Hz), 7,63 (dd, IH, J = 8,36 Hz, J = 2,31 Hz), 7,54 (t, IH, J = 1,97 Hz), 7,25-7,43 (m, 4H), 7,14-7,20 (m, 2H), 7,06 (dd, IH, J = 8,11 Hz, J = 1,55 Hz), 6,96 (dd, IH, J = 8,93 Hz, 1 = 1,97 Hz), 6,90 (m, IH), 6,82 (t, 2H, J = 8,18 Hz), 6,0 (s, 2H), 3,41 (s, 3H), 1,42 (s, 9H).
Příklad 17
Fenyl-(3-styryl-lH-indazol-6-yl)methanon
-57CZ 301667 B6
Fenyl-{3-styryl-l-[2-(trimethylsiIanyl)ethoxymethyl]-lH-indazol-6-yl}methanol byl konvertován na 30 mg (78 %) fenyl-(3-styryl-lH-indazol-6-yl)methanonu, jak bylo popsáno v příkladu 11. MS (ESI) [M+H]/z vypočteno 325, změřeno 325. Anal, výpočet: C, 81,46, H, 4,97, N,
8,46. Změřeno: C, 80,36, H, 5,16, N, 8,51.
Výchozí látka byla připravena takto:
(i)
K roztoku 143 mg (0,3 mmol) 6-jod-3-styry 1-1 -[2-(trimethylsilanyl)ethoxymethyl)-l H-indazolu, připraveného v příkladu 14, krok (i), v 1 ml THF, ochlazenému na -78 °C v argonové atmosféře bylo po kapkách přidáno 0,2 ml (0,315 mmol) η-BuLi. Výsledná směs byla míchána v-78 °C po dobu 30 minut, pak bylo rychle kanylou přidáno 0,035 ml (0,33 mmol) roztoku benzaldehydu v 0,5 ml THF. Po 0,5 hodině byla reakce zastavena saturovaným vodným NH4CI a naředěna 10 ml EtOAc a 3 ml H2O. Fáze byly odděleny a vodná fáze byla extrahována 2 x 10 ml EtOAc. Sloučené EtOAc vrstvy byly promyty 5 ml solanky, usušeny nad Na2SO4, dekantovány a koncentrovány při sníženém tlaku. Surová směs byla purifikována chromatografií na silíkagelu (za eluce směsi hexanu a EtOAc 4:1) za vzniku 68 mg (50% výtěžek) fenyl-{320 styryl-l-[2-(trimethylsilanyl)ethoxy-methyl)-lH-indazol-6-yl} methanolu. Rf sm = 0,72, Rf p = 0,39 (7:3 směs hexanu a EtOAc), FTIR (tenký film) 3368, 2952, 2893, 1621, 1478, 1449, 1374, 1307, 1249, 1216, 1078, 960, 859, 835 cm’1. MS (ESI) [M+H]/z vypočteno 457, změřeno 457.
(Π)
K roztoku 68 mg (0,15 mmol) fenyl-{3-styryl-l-[2-(trimethylsilanyl)ethoxymethyl}-lH” indazol-6-yl) methanolu ve 3 ml díchlormethanu ve 23 °C v argonové atmosféře bylo přidáno 190 mg (0,45 mmol) jodistanu (Dess-Martinovo činidlo). Výsledná směs byla míchána ve 23 °C po dobu 1 hodiny. Roztok pak byl naředěn 3 ml hexanu, pak filtrován přes celit a koncentrován při sníženém tlaku na pevnou látku. Surová směs byla purifikována chromatografií na silíkagelu (za eluce směsí hexanu a EtOAc 9:1) za vzniku 54 mg (79% výtěžek) fenyl-{3-styryl-l-[2(trimethylsilanyl)ethoxymethyl}-lH-indazol-6-yl}-methanonu. Rf sm = 0,41, Rf p = 0,63 (7:3 směs hexanu a EtOAc), FTIR (tenký film) 3059, 2952, 2894, 1659, 1474, 1448, 1307, 1249,
1078, 836, 649 cm'1, MS (ESI) [M+H]/z vypočteno 455, změřeno 455.
-58CZ 301667 B6
Příklad 18 (3-aminofenyl)-(3“Styryl-lH-indazol-ó-yl)methanol
(3-aminofenyl)-{3-styryl-l-[2-(trimethylsilanyl)ethoxy-methyl]-lH-indazol-6-yl}methanol byl konvertován na (3-aminofenyl)-Q-styryl-lH-Índazol-6-yl)methanon, jak bylo popsáno v příkladu 11. >H NMR (300 MHz, CDCl,) δ 8,07 (dd, IH, J = 0,71,8,50 Hz), 7,91 (s, IH), 7,64 (dd, IH, J = 1,35, 8,48 Hz), 7,54-7,60 (m, 2H), 7,46 (d, 2H, J = 12,84 Hz), 7,35-7,40 (m, 2H), 7,22-7,31 (m, 2H), 7,16-7,13 (m, 2H), 6,91 (ddd, IH, J = 1,08, 7,89 Hz). LCMS (ESI) [M+H]/z io vypočteno 340, změřeno 340.
Výchozí látka byla připravena takto:
(i)
6-jod-3-styryl-l-[2-(trimethylsilanyl)ethoxymethyl)-l H-indazol byl konvertován na (3-nitrofenyl)-{3-styryl-l-[2-(trimethylsilanyl)ethoxymethyl)-lH-indazol-6-yl}methanol, jak bylo popsáno v příkladu 17, krok (i). Rf sm = 0,71, Rf p = 0,25 (7:3 směs hexanu a EtOAc), FTIR (tenký film) 3369, 3061, 2952, 2894, 2361, 1620, 1578, 1530, 1478, 1449, 1350, 1308, 1249, 1215, 1080, 961, 859 cm“1, ’H NMR (300 MHz, CDC13) δ 8,35 (s, IH), 8,14 (dd, IH, J = 1,34, 8,14 Hz), 7,99 (d, IH, J = 8,38 Hz), 7,76 (d, IH, J = 7,72 Hz), 7,68 (s, IH), 7,59-7,30 (m, 8H), 7,21 (d, IH, J - 8,33 Hz), 6,09 (s, IH), 5,73 (s, 2H), 3,61 (t, 2H, J = 8,30 Hz), 0,90 (t, 2H, J = 8,30 Hz), -0,06 (s, 9H). 13C NMR (75 MHz, CDC13) δ 148,5, 145,9, 143,4, 142,4, 141,3,
137,1, 132,7, 132,0, 129,5, 128,9, 128,2, 126,7, 122,6, 122,6, 121,8, 121,5, 120,8, 119,6, 107,8, 77,7, 75,4, 66,8, 17,8, -1,3. Anal. výpočet: C, 67,04, H, 6,23, N, 8,38. Změřeno: C, 66,93, H, 6,20, N, 8,41.
(ii)
(3-nitrofenyl)-{3-styryl-l-[2-(trimethylsilanyl)ethoxy-methyl]-lH“indazol-6-yl}methanol byl konvertován na (3-nitrofenyl)-{3-styryl-l-[2-<trimethylsilanyl)ethoxymethyl]-lH-indazol6-yl}methanon, jak bylo popsáno v příkladu 17, krok (ii) 129 mg 91 %). Rf sm = 0,46, Rf p = 0,23 (7:3 směs hexanu a EtOAc), FTIR (tenký film) 3082, 2952, 2894, 1665, 1613, 1532, 1476, 1349, 1298, 1250, 1080, 836, 718 cm1, LCMS (ESI) [M+H]/z vypočteno 500, změřeno
500.
-59CZ 301667 B6 (iii)
(3-nitrofenyl}-{3-styryl-l-[2-(trimethylsilanyl)ethoxy-methyl]-lH-indazol-ó-yl}methanon byl konvertován na (3-aminofenyl)-{3-styryl-l-[2-(trimethylsilanyJ)ethoxymethyl]-lH5 indazol-6-yl}methanon, jak bylo popsáno v příkladu 11, krok (iv) 102 mg (84 %). LCMS (ESI) [M+H]/z vypočteno 340, změřeno 340,
Příklad 19(a) io
N-[3-(3-sty ry 1-1 H-i ndazo 1-6-karbony 1 )feny 1 ] acetamid
(3-aminofenyl)-(3-styryl-lH-indazol-6-yl)methanon, připravený v příkladu 18, byl konvertován na 12,2 mg (78 %) N-[3-(3-styryl-lH-indazol-6-karbonyl)fenyl]acetamidu, jak bylo i5 popsáno v příkladu 12(a). Rf srn = 0,16, Rf p = 0,35 (8:2 CH2C12: EtOAc), LCMS (ESI) [M+H]/z vypočteno 382, změřeno 382. Anal. výpočet: C, 75,57, H, 5,02, N, 11,02. Změřeno: C, 74,32, H,
5,41, N, 10,54.
Příklad I9(b)
TM—[ 3—(3—sty ry I— 1 H-indazo 1-6-karbony I )feny 1 ] benzam id
Sloučenina z příkladu 19(b) byla připravena podobným způsobem, jak bylo popsáno 25 v příkladu 19(a) kromě toho, že benzoylchlorid byl použit namísto acetanhydridu. *H NMR (300 MHz, (CDCh) δ 8,40 (s, IH), 8,02 (d, IH, J = 8,49 Hz), 7,98 (d, IH, J = 1,01 Hz), 7,95 (s, IH), 7,95 (s, IH), 7,83-7,88 (m, 3H), 7,65 (dd, IH, J = 1,04, 8,48 Hz), 7,29-7,56 (m, 1 IH). MS (ESI) [M+H]/z vypočteno 444, změřeno 444. Anal. výpočet: C, 78,54, H, 4,77, N, 9,47. Změřeno: C, 78,01, H, 4,87, N, 9,32.
-60CZ 301667 B6
Příklad 19(c)
Benzylester [3-(3-styryl-lH-indazol-6-karbonyl)fenyI]karbamové kyseliny
Sloučenina uvedená v názvu byla připravena podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 19(a) kromě toho, že karboxy benzy loxychlorid byl použit namísto acetanhydridu. ’HNMR (300 MHz, DMSO-Λ) δ 8,37 (d, IH, J = 8,48 Hz), 7,98 (s, IH), 7,88 (s, IH), 7,79 (s, IH), 7,75 (d, 2H, J = 7,44 Hz), 7,61 (d, 2H, J = 1,81 Hz), 7,58 (s, IH), 7,51 (t, IH, J = 7,79 Hz), 7,42 (t, 5H, J = 6,56 Hz), 7,31-7,37 (m, 4H), 5,16 (s, 2H), LCMS (ESI) [M+H]/z vypočteno 474, změřeno 474. Anal. výpočet: C, 76,09, H, 4,90, N, 8,87. Změřeno: C, 73,82, H, 4,93, N, 8,27.
Příklad 19(d) [3—(3—styryl— 1 H-indazol-6-karbonyl)fenyl]amid 5-methyI-thiazol-2-karboxylové kyseliny
(3-aminofenyl)-(3-styryl-lH-indazol-6-yl)methanon byl konvertován na 9,9 mg 28 %) [3-(3-styryl-lH-indazol-6-karbonyl)fenyl]amidu 5-methylthiazol-2-karboxylove kyseliny, jak bylo popsáno v příkladu 12(d). 'H NMR (300 MHz, CDCIj) δ 8,15 (d, IH, J = 8,49 Hz), 8,09 (t, IH, J = 1,86 Hz), 8,04 (dd, IH, J = 1,0, 7,98 Hz), 7,99 (s, IH), 7,75 (dd, IH, J = 1,31, 8,47 Hz), 7,67 (s, IH), 7,63 (d, 2H, J = 7,30 Hz), 7,54-7,58 (tn, 3H), 7,50 (s, IH), 7,42 (t, 3H, J = 8,09 Hz), LCMS (ESI) [M+H]/z vypočteno 465, změřeno 465.
Přiklad 19(e)
6-[3-(5-methyIpyridin-3-ylkarboxamido)benzoyl]-3-E-styryI-lH-indazol
Sloučenina z příkladu 19(e) byla připravena podobným způsobem jako v příkladu 19(d) kromě toho, že 5-methyl-nikotinová kyselina byla použita namísto 5-methylthiazoI-2-karboxylové kyseliny. 'H NMR (300 MHz, CDCIj) δ 9,22 (s, IH), 8,99 (d, IH, J = 0,59 Hz), 8,67 (s, IH),
-61 CZ 301667 B6
8,24 (s, IH), 8,16 (d, IH, J = 8,32 Hz), 2,97 (dd, IH, J = 8,3 Hz, J = 0,94 Hz), 7,72 (d, IH, J = 16,65 Hz), 7,64 (d, 2H, J = 7,21 Hz), 7,19-7,47 (m, 8H), 6,95 (d, l H, J = 6,43 Hz), 2,49 (s, 3H). MS (ES1+) [M+H]/z vypočteno 459, změřeno 459. Anal. výpočet: C, 75,97. H, 4,84. N, 12,22. Změřeno: C, 75,86. H, 4,94. N, 12,10.
Příklad 19(f)
6-[3-(indol-4-ylkarboxamido)benzoyl]-3-E-styry 1-1 H-indazol
io
Sloučenina z příkladu 19(f) byla připravena podobným způsobem jako v příkladu 19(d) kromě toho, že lH-índol-4-karboxylová kyselina byla použita namísto 5-methy lthiazol-2-karboxy lové kyseliny. LCMS (ESI+) [M+H]/z vypočteno 483, změřeno 483. Anal. výpočet: C, 77,16, H, 4,60, N, 11,61. Změřeno: C, 76,15, H, 4,49, N, 11,31.
Příklad 19(g)
6-[3-(pyridin-2-ylacetamido)benzoyl]-3-E-styryl-l H-indazol
Sloučenina z příkladu 19(g) byla připravena podobným způsobem jako v příkladu 19(d) kromě toho, že pyridin-2-yloctová kyselina byla použita namísto uvedené sloučeniny. ’H NMR (300 MHz, CDCI3) δ 8,50 (dd, IH, J - 4,86 Hz, J = 0,91 Hz), 8,37 (d, IH, J = 8,51 Hz), 8,09 (s, IH), 7,94 (d, IH, J - 7,89 Hz), 7,87 (s, IH), 7,73-7,79 (m, 3H), 7,25-7,60 (m, 10H), 3,86 (s, 2H). MS (ESI) [M+H]/z vypočteno 459, změřeno 459. Anal. výpočet: C, 75,97, H, 4,84,
N, 12,22. Změřeno: C, 74,70, H, 4,83, N, 11,99.
Příklad 19(h)
6- [3-{2-methylpropionamÍdo)benzoyl]-3-E-styryl-l H-indazol
Sloučenina z příkladu 19(h) byla připravena podobným způsobem jako v příkladu 19(a). Isobutyrylchlorid byl použit namísto acetylchloridu, *H NMR (300 MHz, DMSO-dó) δ 8,38 (d, IH, J = 8,13 Hz), 8,08 (t, IH), 7,96 (s, IH, J = 7,8 Hz, J = 1,91 Hz), 7,88 (s, IH), 7,75 (d, 2H, J = 7,25 Hz), 7,61 (d, 2H, 2,05 Hz), 7,40-7,58 (m, 5H), 7,31 (m, IH), 2,60 (m, IH, J = 6,82 Hz), 1,1 (d,
-62CZ 301667 B6
6H, J = 6,82 Hz). (MS (ESI+) [M+Na]/z vypočteno 432, změřeno 432. Anal. výpočet: C, 76,26.
H, 5,66. N, 10,26. Změřeno: C, 75,14, H, 5,62, N, 10,08.
Příklad 19(i)
6-[3-(2-acetamido-2-fenylacetamido)benzoyl]“3-E-styry 1-1 H-indazol
Sloučenina z příkladu 19(i) byla připravena podobným způsobem jako v příkladu 19(d) kromě io toho, že acetylamino-2-fenyloctová kyselina byla použita namísto 5-methylthiazol-2-karboxylové kyseliny. 'H NMR (300 MHz, DMSO-φ.) δ 13,5 (s, IH), 10,6 (s, IH), 8,66 (d, IH,
J = 7,66 Hz), 8,36 (d, IH, J = 8,47 Hz), 8,07 (s, IH), 7,92 (d, IH, J = 7,63 Hz), 7,86 (s, IH), 7,75 (d, 2H, J = 7,33 Hz), 7,29-7,60 (m, 13H, 5,61 (d, IH, J = 7,6 Hz), 1,92 (s, 3H). LCMS (ES1+) [M+H]/z vypočteno 515, změřeno 515. Anal. výpočet: C, 74,69. H, 5,09. N, 10,89. Změřeno:
C, 73,01, H, 5,01, N, 10,60.
Příklad 19(j)
6-[3-(pyridin-4-ylkarboxamido)benzoyl]-3-E-styryl-l H-indazol
Sloučenina z příkladu 19(j) byla připravena podobným způsobem jako v příkladu 19(d) kromě toho, že isonikotínová kyselina byla použita namísto 5 methylthiazol-2-karboxylové kyseliny. MS (ESI+) [M+Na]/z vypočteno 467, změřeno 467. Anal. výpočet: C, 75,66, H, 4,54, N, 12,60.
Změřeno: C, 74,17, H, 4,62, N, 12,31.
Příklad 19(k)
6-[3-(pyridin-2-ylkarboxamido)benzoyl]-3-E-styryl-l H-indazol
Sloučenina z příkladu 19(k) byla připravena podobným způsobem jako v příkladu 19(d) kromě toho, že pyridin-2-karboxyIová kyselina byla použita namísto 5-methylthiazol-2-karboxylové kyseliny, MS (ESI+) [M+Na]/z vypočteno 467, změřeno 467. Anal. výpočet: C, 75,66, H, 454,
N, 12,60. Změřeno: C, 74,17, H, 4,61, N, 12,44.
-63CZ 301667 B6
Příklad 19(1)
6-[3-(isoxazol-4-y lkarboxamido)benzoy 1]—3—E—styryl— 1 H-indazol
Sloučenina z příkladu 19(1) byla připravena podobným způsobem jako v příkladu 19(d) kromě toho, že isoxazol-5-karboxylová kyselina byla použita namísto 5-methylthiazol-2-karboxylové kyseliny. MS (ESI+) [M+H]/z vypočteno 435, změřeno 435. Anal. výpočet: C, 71,88, H, 4,18, N, 12,90. Změřeno: C, 71,36, H,4,33,N, 12,47.
Příklad 19(m)
6-[3-(6-chlorpyridÍn-2-ylkarboxamido)benzoyl]-3-E-styry 1-1 H-indazol
Sloučenina z příkladu 19(m) byla připravena podobným způsobem jako v příkladu 19(d) kromě toho, že 6-ch lorpyridin-2-karboxy lová kyselina byla použita namísto 5-methylthiazol-2-karboxylové kyseliny. MS (ESI+) [M+Na]/z vypočteno 501, změřeno 501.
Příklad 19(n)
6-[3-(4-chlorpyridin-2-ylkarboxamido)benzoyl]-3-E-styryl-1 H-indazol
Sloučenina z příkladu 19(n) byla připravena podobným způsobem jako v příkladu 19(d) kromě toho, že 4-chlorpyridin-2-karboxylová kyselina byla použita namísto 5-methylthiazol-2-karboxylové kyseliny. MS (ESI+) [M+H]/z vypočteno 479, změřeno 479. Anal. výpočet: C, 70,22, H, 4,00, Ν, 11,70. Změřeno: C, 70,07, H, 4,09, Ν, 11,64.
-64CZ 301667 Bó
Příklad 19(o)
6-[3-(2-chlorpyridin-4-ylkarboxamido)benzoyl]-3-E-styryl-lH-indazol
Sloučenina z příkladu 19(o) byla připravena podobným způsobem jako v příkladu 19(d) kromě toho, že 2-chloriso-níkotinová kyselina byla použita namísto 5-methylthiazol-2-karboxylové kyseliny. MS (ESI+) [M+H]/z vypočteno 479, změřeno 479.
io Příklad 19(p)
6-[3-(2-methylamino-2-fenylacetamido)benzoyl]-3-E-styryl-lH-indazol
K roztoku 115 mg (0,2 mmol) 6-[3-(2-(N-t-butoxykarbony 1-N-methylamíno)-2-fenylacet15 amído)benzoyl]-3-E-styryl-lH-indazolu ve 2 ml CH2C12 ochlazenému na 0 °C byly přidány 2 ml TFA. Po 40 minutách byla reakční směs zastavena saturovaným vodným NaHCO3, pak extrahován 2 x 10 ml CH2CI2. Organické vrstvy byly promyty solankou, usušeny nad Na2SO4, dekantovány a koncentrovány. Purifikace chromatografií na silikagelu (1:10 směs methanolu a dichlormethanu) poskytla 38 mg (39 %) 6-[3-(2-methylamino-2-fenylacetamido)benzoyl]-320 E-styryl-lH-indazolu. MS (ESI+) [M+H]/z vypočteno 487, změřeno 487. Anal. výpočet: C, 76,52, H, 5,39, N, 11,51. Změřeno: C, 74,99, H, 5,76, N, 10,89.
Výchozí látka byla připravena, jak popsáno níže:
(i) 6-[3-(2-(N-t-butoxykarbonyl-N-methylamino)-2-fenylacet-amido)benzoyI]—3—E—styry 1—
H-índazol
6-[3-(2-(N-t-butoxykarbony 1-N-methy lam ino)-2-feny lacet-amido)benzoy 1 ]—3—E—styry 1-1Hindazol byl připraven podobným způsobem jako v příkladu 19(d) kromě toho, že (t-butoxy30 karbonyl-methylamino)fenyloctová kyselina byla použita namísto 5-methylthiazol-2-karboxyIové kyseliny, MS (ESI+) [M+H]/z vypočteno 587, změřeno 587.
-65CZ 301667 B6
Příklad 20(a)
6-{3_acetamidofenylsulfanyl)-3-styryl-l H-indazol
6-(3-acetamÍdofenyIsulfanyl)-3-styryl-l-[2-(trimethyl“SÍlanyl)ethoxymethyl]“l H-indazol byl konvertován na 6-(3-acet-amidofenylsulfanyl)-3-styryl-l H-indazol, jak bylo popsáno v příkladu 11 30 mg (81 %): Rf sm 0,65, p 0,35 (10% methanol v dichlormethanu), *H NMR (300 MHz, CDCh) δ 7,81 (d, IH, J = 8,5 Hz), 7,59 (š s, IH), 7,48-7,0 (m, 13H), 1,98 (s, 3H), HRMS (FAB) [M+Na]/z vypočteno 408,1147, změřeno 408,1156, io
Výchozí látka byla připravena takto:
K 1,4 ekv. 9-BBN adiční sloučenině 3-ftalamidothiofenolu, která byla připravena in sítu, jak popsáno níže, bylo přidáno 250 mg (0,5 mmol) 3,6-dijod-l-[2-(trimethylsiIanyl)ethoxymethyl]i s 1 H-indazolu, 87 mg (0,2 ekv.) Pd(dppf)Cl2 a 339 mg (1,6 mmol, 3,00 ekv.) fosfátu draselného ve
3,0 ml DMF. Reakční směs byla zahřívána na 90 °C po dobu 9 hodin. Směs byla ochlazena a rozdělena mezi ethylacetát a saturovaný hydrouhličitan sodný. Organická látka byla usušena nad sulfátem sodným, dekantována a koncentrována. Purifikace chromatografii na silikagelu (2:8 směs ethylacetátu a hexanu) poskytla 159 mg (50 %) 6-(3-ftalamidofenyísulfanyl)-3-jod20 1 H-indazolu jako oleje: 1H NMR (300 MHz, CDCh) δ 7,93 (m, 2H), 7,79 (m, 2H), 7,62 (s, 1H),
7,5-7,3 (m, 5H), 7,22 (d, IH), 5,68 (s, 2H), 3,55 (t, 2H, J - 8,2 Hz), 0,87 (t, 2H, J = 8,2 Hz), -,06 (s, 9H), HRMS (FAB) [M+Cs]/z vypočteno 759,9563, změřeno 759,9571.
Boronová reagencie byla připravena takto: ve Schlenkově baňce o objemu 10 ml byl usušen 25 3-ftalamidothiofenol za vysokého vakua. Byl přidán roztok 1,6 ml (1,0 ekv.) 9-BBN (0,5M v THF). Směs byla zahřívána na 55 °C po dobu 2 hodin. Těkavá látka byla odstraněna v argonové atmosféře v 70 °C po dobu 1,5 hodiny. Zbytek byl použit bez další manipulace.
6-(3-ftalamÍdofenylsulfanyl)-3-jod-l H-indazol byl konvertován na 6-(3-ftalamídofenylsulfanyl)-3-styryl-lH-indazol, jak bylo popsáno v příkladu 11, krok (iii). *H NMR (300 MHz, CDCh) δ 7,93 (m, 3H), 7,78 (m 2H), 7,7 (s, IH), 7,58 (m, 2H), 7,47-7,26 (m, 10H), 5,71 (s, 2H), 3,59 (t, 2H, J - 8,2 Hz), 0,89 (t, 2H, J = 8,2 Hz), -0,06 (s, 9H), HRMS (FAB) [M+Cs]/z vypočteno 736,1066, změřeno 736,1058.
-66CZ 301667 B6
K roztoku 121 mg (0,2 mmol) 6-<3-ftalamidofenylsulfanyl)-3-styryl-lH-indazoÍu ve 3,5 ml 5 ethanolu bylo přidáno 63 μΐ (2,0 mmol) 10 ekv.) hydrazinu. Reakční směs byla ponechána za míchání ve 23 °C po dobu 45 minut a byla naředěna saturovaným hydrouhliČitanem sodným a ethylacetátem. Organická látka byla usušena nad sulfátem sodným, dekantována a koncentrována. Purifikace chromatografíi na silikagelu (3:7 směs ethylacetátu a hexanu) poskytla 79 mg (90 %) 6-(3-aminofenylsulfanyl)-3-styryl-I H-indazolu jako oleje: ’H NMR (300 MHz, CDC13) 10 δ 7,92 (d, 1H, J = 8,5 Hz), 7,57 (m, 3H), 7,49 (d, IH, J = 16,8 Hz), 7,4^7,25 (m, 4H), 7,23 (dd,
IH, J = 1,5, 8,5 Hz), 7,11 (t, IH, J - 7,9 Hz), 6,79 (m, IH), 6,70 (t, IH, J = 1,9 Hz), 6,59 (m, IH), 5,66 (s, 2H), 3,60 (š s, 2H), 3,59 (t, 2H, J = 8,2 Hz), 0,90 (t, 2H, J = 8,2 Hz), -0,05 (s, 9H), HRMS (FAB) [M+H]/z vypočteno 474,2035, změřeno 474,2019.
'5 (iv)
K roztoku 43,7 mg (0,10 mmol) 643-aminofenylsulfanyl)-3-$tyryl-l H-indazolu v 0,5 ml dichlormethanu bylo přidáno 81 μΐ (1,0 mmol, 10 ekv.) pyridinu a 47 μΐ (0,5 mmol, 5 ekv.) acetanhydrídu. Směs byla ponechána za míchání po dobu 10 minut ve 23 °C. Směs byla naředěna vodou a produkt byl extrahován 30% hexanem v ethylacetátu. Organická látka byla promyta 5% kyselinou citrónovou a saturovaným hydrouhliČitanem sodným. Organická látka byla usušena nad sulfátem sodným, dekantována a koncentrována. Purifikace chromatografií na silikagelu (3:7 směs ethylacetátu a hexanu) poskytla 50 mg (97 %) 6-(3-acetamidofenylsulfanyl)-3-styrylΙΗ-indazolu jako oleje: Rf sm 0,33, Rf p 0,18 (směs ethylacetátu a hexanu 3:7), 'H NMR (300 MHZ, CDCI3) δ 7,94 (d, IH), 7,65-7,1 (m, 13H), 5,70 (s, 2H), 3,62 (t, 2H, J = 8,2 Hz), 2,18 (s, 3H), 0,93 (t, 2H, J = 8,2 Hz), -0,05 (s, 9H). HRMS (FAB) [M+Cs]/z vypočteno 648,1117, změřeno 648,1098.
Příklad 20(b)
6- (3-(benzoylamido)fenylsulfanyl)-3-styryl-l H-indazol
Sloučenina uvedená v názvu byla připravena jako v příkladu 20(a) kromě toho, že benzoylchlorid 35 byl použit namísto acetanhydrídu v kroku (iv). ’H NMR (300 MHz, CDCI3) δ 8,03 (s, IH), 7,73 (d, IH, J = 8,5 Hz), 7,63 (m, 2H), 7,47 (m, IH), 7,42 (ζ IH, J = 1,9 Hz), 7,37 (m, 3H), 7,31 (m, IH), 7,28-6,98 (m, 9H), HRMS (FAB) [M+H]/z vypočteno 448,1484, změřeno 448,1490.
-67CZ 301667 B6
Příklad 21
6—( l-(3-aminofenyl)vinyl)-3-styryl-l H-indazol
TBAF,
NH,
N*
6-( I-(3-aminofenyl)vinyl)-3-styryl“l-[2-{trimethyl-silanyl)ethoxymethyl]-l H-indazol byl konvertován na 85 mg (85 %) sloučeniny uvedené v názvu, jak bylo popsáno v příkladu 11: Rf srn 0,72, p 0,37 (směs ethylacetátu a hexanu 1:1), FTIR (tenký film) 3385, 3169, 2953, 1621, 1581, 1489, 1447, 1349, 1251, 1165, 1071, 959, 906, 870, 817 cm1, 'H (300 MHz, CDC13) δ 7,98 (d, IH, J - 8,5 Hz), 7,60 (m, 2H), 7,51 (s, IH), 7,48 (s, IH), 7,40 (m, 3H), 7,29 (m, 2H),
7,15 (m, IH), 6,78 (m, IH), 6,68 (m, 2H), 5,50 (s, 2H), 3,65 (š s, 2H), MS (ES) [M+H]/z vypočteno 338, změřeno 338, MS (ES) [M-H]/z vypočteno 336, změřeno 336.
Výchozí látka byla připravena takto:
K roztoku 330 mg (0,693 mmol) 6-jod-3-styryl-l-[2-(trimethylsilanyl)ethoxymethyl]-lHindazolu, připraveného v příkladu 14, krok (i), ve 3,0 ml THF bylo v -78 ŮC přidáno 0,56 ml (1,2 ekv.) 1,5M n—butyllithia. Po 20 minutách byl tento roztok pak přidán ke 170 mg bezvodého chloridu zinečnatého a směs byla zahřátá na 23 °C a míchána po dobu 15 minut K této směsi bylo přidáno 146 μΐ (1,05 ekv.) l-(3-nitrofenyl)vinyltriflátu a 40 mg (0,05 ekv.) Pd(PPh3)4. Tato směs byla míchána po dobu 30 minut, byla rozdělena mezi ethylacetát a saturovaný hydrouhličitan sodný a organická vrstva byla oddělena. Organická látka byla usušena nad sulfátem sodným, dekantována a koncentrována při sníženém tlaku. Purifikace chromatografií na silikagelu (1:9 směs ethylacetátu a hexanu) pak druhá kolona (1% směs ethylacetátu a benzenu) poskytla 180 mg (52 %) 6-(l-(3-nitrofenyl)vinyl)-3-styryl-l-[2-(trimethylsilanyl)ethoxymethyl]-lHindazolu jako oleje: FTIR (tenký film) 2951, 1616, 1530, 1477, 1448, 1348, 7305, 1248, 1217, 1077, 961, 913, 859 cm'1, *H (300 MHz, CDC13) δ 8,26 (t, IH, J = 1,9 Hz), 8,21 (m, IH), 8,00 (d,
IH, J = 8,5 Hz), 7,69 (dt, IH, J= 1,4, 7,8), 7,62-7,28 (m, 9H), 7,19 (dd, IH, J = 1,4, 8,4 Hz), 5,72 (s, 3H), 5,69 (s, IH), 3,60 (t, 2H, J = 8,2 Hz), 0,89 (t, 2H, J = 8,2 Hz), -0,05 (s, 9H), l3C NMR (75 MHz, CDC13) δ 149,9, 149,6, 144,7, 144,5, 142,8, 140,7, 138,6, 135,6,
133,1, 130,7, 130,2, 129,4, 128,0, 124,4, t24,2, 124,1, 123,8, 122,6, 121,2, 118,9, 111,0, 79,2, 68,0, 19,2, 0,0, HRMS (FAB) [M+Na]/z vypočteno 520,2031, změřeno 520,2046.
(íi)
6-(l-(3-nitrofenyl)vinyl)-3-styryl-l-[2-(trimethylsilanyl)ethoxymethyl]-lH-indazol byl konvertován na 6-(143-aminofenyl)vinyl)-3-styryl-l-[2-(trimethylsilanyl)ethoxymethyl]-l Hindazol, jak bylo popsáno v příkladu 11, krok (iv) 140 mg (95 %): Rf srn 0,59, p 0,46 (směs
-68CZ 301667 B6 ethylacetátu a hexanu 4:6), FTIR (tenký film) 3460, 3366, 3223, 3084, 3028, 2952, 2894, 2246, 1616,1601, 1581, 1489,1474, 1448, 1359,1303, 1249,1217,1076,961,909,860, 836,733,692 cm'1, 'H NMR (300 MHz, CDClj) δ 7,96 (d, IH, J = 8,5 Hz), 7,59 (m, 3H), 7,50 (s, IH), 7,46 (s, IH), 7,40 (m, 2H), 7,30 (m, IH), 7,25 (m, IH), 7,14 (m, IH), 6,77 (m, IH), 6,68 (m, 2H), l3CNMR (75 MHz, CDClj) δ 151,6, 147,7, 144,6, 143,9, 142,8, 142,4, 138,6, 132,8, 130,6,
130,2, 129,3, 128,0,124,4, 123,6, 121,9,121,5, 120,2,116,4, 116,1, 110,8,79,0,67,9, 19,2,0,0, HRMS (FAB) [M+Na]/z vypočteno 490,2291, změřeno 490,2302.
io Příklad 22(a)
6-(l-(3-{5-methylthiaxol-2-karboxoylamido)fenyl)vinyl)-3-styiyl-lH-indazol
6-(l-(3-amÍnofenyl)vinyl)-3-styryl-lH-indazol byl konvertován na 20 mg (72 °/o) sloučeniny uvedené v názvu, jak bylo popsáno v příkladu 12(d): FTIR (tenký film) 3271, 1673, 1605, 1585, 1538, 1486, 1428, 1349, 1304, 1090, 960, 907, 871 cm1, 'H NMR (300 MHz, CDClj) δ 10,7 (š s, IH), 9,09 (s, IH), 8,0 (d, IH), 7,79 (m, IH), 7,60 (m, 3H), 7,51 (m, 3H), 7,44-7,15 (m, 7H), 5,59 (s, 2H), 2,54 (s, 3H), 13C NMR (75 MHz, CDClj) δ 162,2,157,9,149,8,144,4,142,8, 142,2,
141.9, 141,5, 140,6, 137,63, 137,56, 131,6, 129,5, 129,1, 128,3, 126,9, 125,1, 122,6, 121,2,
120.9, 120,5, 120,2, 119,8, 116,1, 110,2, 12,8, HRMS (FAB) [M+H]/z vypočteno 463,1593, změřeno 463,1582.
Příklad 22(b) l-Q~(benzoylamído)fenyI)vinyl)-3-styryl-l H-indazol
Sloučenina z příkladu 22(b) byla připravena podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 22(a) kromě toho, že benzoylchlorid byl použit namísto 5-methylthiazol-2-karboxylové kyseliny a HATU. FTIR (tenký film) 3243, 1651, 1606, 1580, 1538, 1485, 1447, 1428, 1349, 1307, 1258, 1073, 959, 907 cm’1, Ή NMR (300 MHz, CDC13) δ 9,09 (s, IH), 7,99 (d, 1HJ = 8,5 Hz), 7,78 (m, IH), 7,60 (m, 3H), 7,51 (m, 3H), 7,43-7,15 (m, 10H), 5,56 (d, 2H, J = 3,2 Hz), l3C NMR (75 MHz, CDClj) δ 166,5, 149,7, 144,3, 142,7, 142,1, 140,6, 138,1, 137,6, 135,0, 132,3, 131,6, 129,4, 129,1, 128,3, 127,4, 126,9, 125,0, 122,5, 120,9, 120,8, 120,6, 120,5, 115,9, 110,2, HRMS (FAB) [M+H]/z vypočteno 442,1919, změřeno 442,1919.
Příklad 22(c)
6-<l-(3-(benzoylamido)fenyl)vinyl)-3-styryl-lH-indazol
-69CZ 301667 B6
Q Cbz-Ο. pyridin tÓ^CC^ltoOH
->
Sloučenina uvedená v názvu byla připravena podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 22(a) kromě toho, že karbobenzyloxych lorid byl použit namísto 5-methyl thi azo 1-2-karboxy lové kyseliny a HATU. FTIR (tenký film) 3305, 1712, 1606, 1586, 1537, 1487, 1445, 1348, 1216, 1059, 959, 908 cm'1, ‘H NMR (300 MHz, CDC13) δ 7,99 (d, IH, J = 8,5 Hz), 7,6-7,0 (m, 18H), 5,55 (s, 2H), 5,19 (s, 2H), l3C NMR (75 MHz, CDCl,) δ 153,9, 149,8, 144,3, 142,7, 142,1, 140,7,
138,2, 137,6, 136,3, 131,7, 129,4, 129,1, 129,0, 128,7, 128,7, 128,3, 126,9, 124,0, 122,6, 121,1, 120,8, 120,4, 115,9, 110,1,67,4, HRMS (FAB) [M+H]/z vypočteno 472,025, změřeno 472,2026.
Příklad 23
6-( l-(3-acetamidofenyl)vinyl)“3-styryl-í H-indazol
6-( l-(3-acetamidoťenyl)vÍnyl)-3“Styryl-l-[2-trimethyl-silanylethoxymethyl]-l H-indazol byl konvertován na 6-{l-(3-acetamidofenyl)vinyl)-3-styryl-l H-indazol, jak bylo popsáno v příkladu 11: FTIR (tenký film) 3252, 1667, 1606, 1557, 1486 cnf1, 'H NMR (300 MHz, CDC13) δ 10,4 (š s, IH), 7,91 (d, IH, J = 8,5 Hz), 7,5-7,0 (m, 13H), 5,47 (s, 2H), 2,10 (s, 3H), MS (ES) [M+H]/z vypočteno 380, změřeno 380, [M-H]/z vypočteno 378, změřeno 378.
Výchozí látka byla připravena takto:
Mi ACjQpyrWn
6~(l-(3“amÍnofenyl)vinyl)-3-styryl-l-[2-trimethylsilany1-ethoxymethyl]-lH-indazol byl konvertován na 6-{l-{3-acetamido-fenyI)vinyl)-3-styryl_l~[2“trimethylsilanylethoxymethyl]ΙΗ-indazoí, jak bylo popsáno v příkladu 12(a): Rf sm 0,42, p 0,26 (směs ethylacetátu a hexanu 4:6), FTIR (tenký film) 3305, 3059, 2952, 1667, 1608, 1585, 1555, 1486, 1448, 1433, 1369, 1306, 1249, 1076, 912, 859, 836, 748, 693 cm1, ]H NMR (300 MHz, CDC13) δ 7,98 (d, IH,
J = 8,5 Hz), 7,7-7,4 (m, 9H), 7,35 (m, 2H), 7,26 (dd, IH, J = 1,3, 8,4 Hz), 7,16 (bd, IH, J = 7,8 Hz), 5,75 (s, 2H), 5,62 (s, IH), 5,61 (s, IH), 3,66 (t, 2H, J - 8,2 Hz), 2,16 (s, 3H), 0,98 (t,2H, J = 8,2 Hz), 4),02 (s, 9H), t3C NMR (75 MHz, CDCb) δ 169,8, 150,9, 144,6, 143,5, 142,8, 142,0, 139,4, 138,6, 132,9, 130,3, 129,3, 127,9, 125,6, 124,2, 123,7, 122,0, 121,3, 121,0, 117,1, 110,8, 68,0, 25,8, 19,1, 0,0, HRMS (FAB) [M+Na]/z vypočteno 532,2396, změřeno 532,2410.
Příklad 24(a)
44341 -H-benzimidazol-2-yl)-1 H-indazol-6-yl]-2-methoxy-5-methylfenol
-70CZ 301667 B6
326 mg (0,43 mmol) 6-{5-methoxy-2-rnethyl-4-[2-(trimethylsilanyl)ethoxymethoxy]fenyl}1 -[2-{ trimethy lsilany l)ethoxymethyl]-3-{ 1 -[2-(trimethy Isilany l)ethoxymethy 1]-1 H-benzamidazol-2-yl}-lH-indazolu bylo mícháno ve 4,5 ml ÍM roztoku TBAF v THF, který byl koncentrován ve vakuu na 2,5 ml, a 0,6 ml (8,9 mmol) ethylendiaminu ve varu pod zpětným chladičem po dobu 40 hodin. Reakce byla naředěna 40 ml/5 ml směsi ethylacetátu a THF a promyta 20 ml H2O a 20 ml solanky. Organické vrstvy byly usušeny (MgSO4) a koncentrovány ve vakuu. Purifikace chromatografií na silikagelu (60% směs THF a hexanu) a pak precipitace z chloroformu poskytla 108 mg (68 %) 4-[3-(l-H-benzimidazoI-2-yl)-lH-indazol-6-yl]-2ío methoxy-5-methylfenolu jako bílé pevné látky. fH NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 13,62 (s, IH), 13,05 (š s, IH), 9,01 (s, IH), 8,50 (d, IH, J = 8,4 Hz), 7,62 (š s, 2H), 7,49 (s, IH), 7,28-7,20 (m, 3H), 6,85 (s, IH), 6,74 (s, IH), 3,77 (s, 3H), 2,15 (s, 3H). Anal. (C22Hl8N4O2. 1,3 H2O) C, H,
N. Vypočteno C, 67,10, H, 5,27, N, 14,23. Změřeno: C, 67,30, H, 5,27, N, 14,11.
Výchozí látky byly připraveny takto:
(0 sttt
1) oBuU.THP
Příprava 2-jod-l-[2-(trimethylsilanyl)ethoxymethyI]-lH-benzimidazolu. Roztok 5,029 g (20,25 mmol) l-[2-(trimethyl-silanyl)ethoxymethyl]-lH-benzimidazolu (viz Witten et al.,
J. Org. Chem., 51, 1891-1894 1986) v 50 ml THF byl ochlazen na-78 °C a přidáván po kapkách po dobu 12 minut kanylou do baňky obsahující 12,2 ml 2,5M n-butyllithia v hexanu, ve 30 ml THF v -78 °C v argonové atmosféře. Po míchání po dobu 25 minut v -78 °C, baňka byla zahřátá na 0°C po dobu 10 minut, pak byla opět ochlazena na -78 °C. Tento roztok pak byl přidán kanylou do druhé baňky obsahující 25,7 g (101 mmol) jodu v 50 ml THF v -78 °C. Jak bylo přidávání ukončeno (~5 minut), chladicí lázeň byla odstraněna a míchání pokračovalo po dobu 30 minut. Reakční směs byla rozdělena mezi 500 ml ethylacetátu a 100 ml vody. Organická vrstva byla promyta 2 x 100 ml saturovaného vodného metabisulfitu sodného, aby se odstranila tmavá barva jodu, usušena (MgSO4) a koncentrována ve vakuu. Purifikace velmi rychlou chro30 matografií (10 až 50% směs ethylacetátu a hexanu) poskytla 4,79 g (63 %) čistého 2—jod—l—2— (trimethylsilanyl)ethoxymethyl]-lH-benzimidazolu jako žluté pevné látky. 'HNMR(300 MHz, CDCb) δ 7,76-7,72 (m, IH), 7,54-7,51 (m, IH), 7,29-7,25 (m, 2H), 5,54 (s, 2H), 3,59 (t, 2H, J = 8,1 Hz), 0,92 (t, 2H, J = 8,1 Hz), -0,03 (s, 9H). Anal. (C13H,9IN2OS) C, H. Vypočteno C, 41,71, H, 5,12,1, 33,90, N, 7,48. Změřeno: C, 41,90, H, 5,09,1, 34,00, N, 7,37.
-71 CZ 301667 B6 (ϋ)
Příprava 6-nitro-l-[2-(trimethylsilanyl)ethoxymethyl]-3-(trimethylstannanyl)-lH-indazolu: 10,0 g (23,9 mmol) 3-jod-6-nitro-I-[2-{trÍmethylsilanyl)ethoxymethyl]-lH-Índazolu a 10,0 g (30,5 mmol) hexamethyldicínu bylo vloženo do 45 ml suchého toluenu v baňce probublávané argonem. Bylo přidáno 300 mg (0,26 mmol) tetrakis(trifenylfosfin)palladia(0) a reakce byla míchána ve varu pod zpětným chladičem v argonové atmosféře po dobu 2,5 hodiny. Reakce byla ochlazena na 23 °C a naředěna 60 ml etheru. Organické vrstvy byly promyty 20 ml 0,lN HCI a 20 ml solanky, usušeny (MgSO4) a koncentrovány. Purifikace chromatografií na silikagelu io (3 až 8% směs etheru a hexanu) poskytla 7,70 g (71 %) 6-nitro-I-[2-(trimethylsilanyl)ethoxymethyl]-3-(trimethylstannanyl)“lH-indazolu, jako světle žluté pevné látky. ’H NMR (300 MHz, CDC13) δ 8,53 (d, IH, J = 1,8 Hz), 8,03 (dd, IH, J = 8,7, 1,8 Hz), 7,81 (d, IH, J = 8,7 Hz), 5,84 (s, 2H), 3,58 (t, 2H, J = 8,1 Hz), 0,90 (t, 2H, J = 8,1 Hz), 0,50 (t, 9H, J = 28,2 Hz), -0,05 (s, 9H). Anal. (C,6H27N3O3SiSn) C, Η, N. Vypočteno C, 42,13, H, 5,97, N, 9,21. Změřeno: C, 42,39,
H, 6,01, N, 9,26.
(iii)
ΜΟ»
SEM
Příprava 6-nitro-l-[2-(trimethylsÍlanyl)ethoxymethyl]-3-{l-[2-(trimethylsilanyl)ethoxy20 methyl]--lH-benzimidazol-2-yI}-lH-indazolu: 7,50 g (16,4 mmol) 6-nitro-l-[2-(trimethylsilanyl)ethoxymethyl]-3-{trimethylstannanyl)-1H-Índazolu, 6,50 g (17,4 mmol) 3—jod—1—[2— (trimethylsilanyI)ethoxymethyl]-lH-benzimidazolu a 313 mg (1,64 mmol) jodidu měďného bylo vloženo do 150 ml suchého THF v baňce probublávané argonem. Bylo přidáno tetrakis(trifenylfosfin)palladium(O) a reakce byla míchána ve varu pod zpětným chladičem v argonové atmosféře po dobu 23 hodin. Reakce byla ochlazena a adsorbována přímo na silikagelu (~16 g). Purifikace chromatografií na silikagelu (4 až 15% směs ethylacetátu a hexanu) poskytla 7,28 g (82 %) 6-nitro-l-[2“(trimethylsÍlanyl)ethoxymethyl]-3-{I-[2“(dimethylsilanyÍ)ethoxymethyl]-lHbenzimidazol-2-yI}-lH-indazolu, jako světle žluté pevné látky, ’H NMR (300 MHz, CDCh) δ 8,91 (d, IH, J = 9,0 Hz), 8,59 (d, IH, J = 1,8 Hz), 8,22 (dd, IH, J = 8,7, 1,8 Hz), 7,92-7,89 (m, IH), 7,66-7,62 (m, IH), 7,40-7,36 (m, 2H), 6,24 (s, 2H), 5,90 (s, 2H), 3,68-3,59 (m, 4H),
0,94 (t, 2H, J - 8,1 Hz), 0,86 (t, 2H, J = 8,1 Hz), -0,04 (s, 9H), -0,15 (s, 9H). Anal. (C26H37N5O4Si2) C, Η, N. Vypočteno C, 57,85, H, 6,91, N, 12,97. Změřeno: C, 57,60, H, 6,81, N, 12,82.
-72CZ 301667 B6 (iv)
Příprava 6-amino-1—[2—(trimethylsilanyl)ethoxymethyl]-3-[2-(trimethylsilanyl)ethoxymethy 1]lH-benzimidazol-2-yl}-lH-indazolu: 12,0 g (63,3 mmol) chloridu cínatého bylo přidáno k roztoku 7,18 g (13,3 mmol) 6-nitro-l-(2-{trimethylsilanyl)-ethoxymethyl3-3-{l-[2-(trimethylsilanyl)ethoxymethyl]-lH-benzimidazol-2-yl}-lH~indazolu v 160 ml/10 ml směsi DMF/H2O a reakce byla míchána v 50 °C po dobu 2,5 hodiny. Reakce byla ochlazena na 0 °C a byl pomalu přidán saturovaný hydrouhliČitan sodný, za míchání, dokud všechna pěna ze zastavení reakce nepoklesla. Látka byla koncentrována ve vakuu a nabrána do 100 ml etheru. Nerozio pustná látka byla odstraněna filtrací a promyta 50 ml etheru. Filtrát byl promyt 50 ml solanky, usušen (Na2SO4) a koncentrován ve vakuu. Purifikace chromatografií na silikagelu (25% směs ethylacetátu a hexanu) poskytla 6,05 g (89 %) 6-arnino-l-[2-(trimethylsÍlanyl)ethoxymethyl]3-{ l-[2-(trimethylsÍlanyl)ethoxymethyl]-l H-benzimidazol-2-yl}-l H-indazolu, jako světle žluté voskové pevné látky. *H NMR (300 MHz, CDCh) δ 8,40 (d, IH, J = 9,0 Hz), 7,89-7,86 (m, is IH), 7,63-7,60 (m, IH), 7,35-7,31 (m, 2H), 6,78 (dd, IH, J - 8,7, 1,8 Hz), 6,75 (s, IH), 6,25 (s, 2H), 5,69 (s, 2H), 3,93 (š s, 2H), 3,65-355 (m, 4H), 0,93 (t, 2H, J = 8,1 Hz), 0,85 (t, 2H, J = 8,1 Hz), -0,04 (s, 9H), -0,15 (s, 9H). Anal. (C26H39N5O2Si2) C, Η, N. Vypočteno C, 61,26, H, 7,71,
N, 13,74. Změřeno: C, 61,18, H, 7,65, N, 13,82.
(V)
SOI
Příprava 6-jod-1-[2-(trimethylsilany l)ethoxymethy l]-3-{1-[2-(trimethylsilanyl)ethoxymethyl]-lH-benzimidazol-2-yl}-l H-indazolu: Roztok 500 mg (0,98 mmol) 6-amino-1 -[225 (trimethylsilanyl)ethoxymethyl]-3-{l-[2-(trimethylsilanyl)ethoxymethyl]~lH-benzimidazol-2yl}—I H-indazolu v 1,5 ml octové kyseliny byl naředěn 1,0 ml H2O a míchán při teplotě 0°C. Bylo přidáno 250 μί (~3 mmol) koncentrované HCI 250 μΐ v H2O. Bylo přidáno 90 mg (1,3 mmol) dusičnanu sodného ve 300 μί H2O a reakce byla míchána po dobu 8 minut. Bylo přidáno 10 mg jodu a roztok 250 mg (1,3 mmol) jodidu draselného ve 250 μί H2O a pěnící reakce byla míchána po dobu 30 minut ve 23 °C. Reakce byla naředěna 25 ml H2O a extrahován 2 x 20 ml ethylacetátu. Organické vrstvy byly promyty 10 ml saturovaného roztoku metabisulfitu sodného a 10 ml solanky, usušena (Na2SO4) a koncentrována ve vakuu. Purifikace chromatografií na silikagelu (8% směs ethylacetátu a hexanu) poskytla 316 mg (52 %) 6-jod-l-[2-(trimethylsilanyl)ethoxymethyl]-3-{l-[2-(trimethylsilanyl)ethoxymethyl]-lH-benzimidazol-2-yl}-lH35 indazolu, jako světle žlutého oleje, který pomalu krystalizoval na bílou pevnou látku. ’H NMR (300 MHz, CDCh) δ 8,45 (d, IH, J = 9,0 Hz), 8,05 (s, IH), 7,91-7,88 (m, 1H), 7,67-7,62 (m, 2H), 7,38-7,34 (m, 2H), 6,24 (s, 2H), 5,77 (s, 2H), 3,65-3,57 (m, 4H), 0,93 (t, 2H, J = 8,1 Hz), 0,85 (t, 2H, J = 8,1 Hz), -0,04 (s, 9H), -0,15 (s, 9H). Anal. (C26H37lN4O2Si2) C, Η, N, Vypočteno C, 50,31, H, 6,01, N, 9,03. Změřeno: C, 50,55, H, 6,08, N, 9,00.
-73CZ 301667 B6
Příprava [2-<4-brom-2-niethoxy-5-methylfenoxymethoxy)-ethyIJtrimethylsilanu: 4~brom-2methoxy-5-methylfenol (viz Chien-Hsun et al., Syn. Lett., 12, 1351-1352, 1997) byl míchán ve
100 ml suchého CH2C12 ve 23 °C. Bylo přidáno 6,05 ml (34,6 mmol) DIEA, a pak 5,6 ml (31,7 mmol) 2-(trimethylsilyl)ethoxy-methylchloridu. Po míchání po dobu 1 hodiny byl roztok promyt H2O, O,1N HCl, H2O, saturovaným NaHCO3 a solankou, po 25 ml. Organické vrstvy byly usušeny (Na2SO4) μ koncentrovány ve vakuu. Purifikace chromatografii na silikagelu (6% směs ethylacetátu a hexanu) poskytla 9,06 g (91 %) [2-(4-brom-2-methoxy-5-methylfenoxyio methoxy)ethyl]trimethylsilanu jako Čirého oleje. ’H NMR (300 MHz, CDCI3) δ 7,06 (s, IH), 7,02 (s, 1H), 5,24 (s, 2H), 3,84 (s, 3H), 3,79 (t, 2H, J = 8,4 Hz), 2,31 (s, 3H), 0,96 (t, 2H, J = 8,4 Hz),
0,01 (s, 9H).
(vii)
Příprava 5-methoxy-2-methy M-[2-(tr i methy lsi lany l)ethoxy-methoxy] feny lboronové kyseliny: 2,6 g (7,5 mmol) [2“(4-brom-2-methoxy-5-methylfenoxymethoxy)ethyl]trimethyIsilanu bylo mícháno v 10 ml suchého TFA v -78 °C v argonové atmosféře. Po kapkách bylo přidáno 3,75 ml (9,36 mmol) 2,5M n—butyllithia v hexanu, a reakce byla míchána po dobu 30 minut předtím, než byla přenesena kanylou do baňky s 8,4 ml (75 mmol) trimethylborátu v 15 ml THF, která byla také míchána v -78 °C v argonové atmosféře. Poté, co bylo přidávání ukončeno, byla reakce míchána 30 minut v -78 °C, a pak 30 minut při zahřívání na 0 °C. Reakce pak byla zastavena 20 ml H2O, acidifikována 0,lN HCl a extrahována 2 x 25 ml ethylacetátu. Organické vrstvy byly promyty 20 ml solanky, usušeny (Na2SO4) a koncentrovány ve vakuu. Purifikace chromatografii na silikagelu (20 až 50% směs ethylacetátu a hexanu) poskytla 1,11 g (47 %) 5-methoxy-2methyM-[2-(trimethylsilanyl)-ethoxymethoxy]fenylboronové kyseliny jako bílé pevné látky. 'H NMR (300 MHz, CDCIj) δ 7,78 (s, IH), 7,10 (s, IH), 5,36 (s, 2H), 3,93 (s, 3H), 3,83 (t, 2H, J = 8,4 Hz), 2,79 (s, 3H), 0,98 (t, 2H, J = 8,4 Hz), 0,01 (s, 9H). Anal. (ChHjjBOjSí-HjO) C, H. Vypočteno C, 57,15, H, 7,88. Změřeno: C, 56,89, H, 7,87.
(viii)
-74CZ 301667 Bó
Příprava 6-{ 5-methoxy-2-methyl-4-[2-(trimethy lsilanyl)-ethoxymethoxy]fenyl}-l -[2—(trimethylsilanyl)ethoxymethyl]-3-{l-[2-(trimethylsilanyl)ethoxymethyl]-lH-benzimidazol-2yl}-lH-indazolu. 350 mg (0,56 mmol) 6-jod-l-[2-(trimethylsilanyl)-ethoxymethyl]-3-{l-[2(trimethylsilanyl)ethoxymethyl]-lH-benzimidazol-2-yl}-lH-indazolu, 211 mg (0,68 mmol)
5-methoxy-2-methyl-4-[2-(trimethylsilanyl)ethoxymethoxy]fenylboronové kyseliny a 72 mg (0,68 mmol) uhličitanu sodného byly míchány ve směsi 5 ml benzenu, 330 μΐ H2O a 1 ml methanolu v baňce probublávané argonem. Bylo přidáno tetrakis(trifenyl-fosfín)palladium(0) a reakce byla míchána ve varu pod zpětným chladičem v argonové atmosféře po dobu 16 hodin. Po ochlazení na 23 °C byla reakce naředěna 20 ml etheru, promyta 10 ml H2O a 10 ml solanky, io usušena (Na2SO4) a koncentrována ve vakuu. Purifikace chromatografií na silikagelu (15% směs ethylacetátu a hexanu) poskytla 382 mg (89 %) 6-{5-methoxy-2-methyM-[2- (trimethylsilanyl)ethoxymethoxyjfenyl}-l-[2-(trimethylsilanyl)ethoxymethyl]-3-{l-[2-(trimethylsi!anyl)ethoxymethyl]-IH-benzimidazol-2-yl}-lH-indazolu, jako bílé pevné látky. ’HNMR (300 MHz, CDCb) δ 8,68 (d, IH, J = 8,4 Hz), 7,93-7,90 (m, IH), 7,67-7,63 (m, IH), 7,54 (s,
IH), 7,38-7,32 (m, 3H), 7,13 (s, IH), 6,86 (s, IH), 6,29 (s, 2H), 5,83 (s, 2H), 5,34 (s, 2H), 3,89 (s, 3H), 3,86 (t, 2H, J = 8,4 Hz), 3,69-3,58 (m, 4H), 2,22 (s, 3H), 1,01 (t, 2H, J = 8,4 Hz), 0,95-0,83 (m, 4H), 0,03 (s, 9H), -0,05 (s, 9H), -0,15 (s, 9H). Anal. (C40H60N4O5Si3) C, Η, N. Vypočteno C, 63,12, H, 7,95, N, 7,36. Změřeno: C, 63,22, H, 7,93, N, 7,46.
Příklad 24(b)
4-[3-(l-H-benzÍmidazo 1-2-y l)-lH-indazol-6-yl]-3-methylfenol
Pro přípravu sloučeniny uvedené v názvu byl následován postup popsaný v příkladu 24(a), kde
2-methyl-4-[2-(trimethyl-silanyl)ethoxymethoxy] fenylboronová kyselina (připravená, jak popsáno níže) byla použita namísto 5-methoxy-2-methy 1-4-(2-(trimethylsilanyl)ethoxymethoxyjfenylboronové kyseliny v kroku (viii). *H NMR (300 MHz, DMSO-dJ δ 13,60 (s, IH), 12,99 (Š s, IH), 9,41 (s, IH), 8,49 (d, IH, J - 8,4 Hz), 7,72 (š s, IH), 7,52 (š s, IH), 7,45 (s, IH),
7,25-7,21 (m, 3H), 7,12 (d, IH, J = 8,1 Hz), 6,73-6,67 (m, 2H), 2,20 (s, 3H). Anal. (C2lH16N4O .
0,7 H2O) C, Η, N. Vypočteno C, 71,45, H, 4,97, N, 15,87. Změřeno: C, 71,44, H, 4,96, N, 15,77. 2-methyl-4-[2-(trimethylsilanyl)ethoxymethoxy]fenyl-boronová kyselina byla připravena takto:
(i)
[2-(4-brom-3-methylfenoxymethoxy)ethyl]trimethylsilan byl připraven při 86% výtěžku z 4-brom-3-methylfenolu podle postupu pro [2-(4-brom-2-methoxy_5-methylfenoxymethoxy)ethyl]-trimethylsilan. Ή NMR (300 MHz, CDCb) δ 7,39 (d, IH, J = 8,7 Hz), 6,93
-75CZ 301667 B6 (d, 1H, J = 2,7 Hz), 6,75 (dd, IH, J = 8,7, 2,7 Hz), 5,16 (s, 2H), 3,74 (t, 2H, J = 8,4 Hz), 2,36 (s, 3H), 0,95 (t, 2H, J = 8,4 Hz), 0,01 (s, 9H). Anal. (Cl3H2,BrO2Si) C, H. Vypočteno C, 49,21, H, 6,67. Změřeno: C, 49,33, H, 6,67.
(ii)
2-methyl-4-[2-(trimethylsilanyl)ethoxymethoxy]fenyl-boronová kyselina byla připravena při
52% výtěžku z [2-(4-brom-3-methylfenoxymethoxy)ethyl]trimethylsilanu podle postupu pro
5-methoxy-2-methyl-4-[2-(trimethylsilanyl)ethoxymethoxy]-fenylboronovou kyselinu uvedeio ného výše. Ή NMR (300 MHz, CDCh) δ 8,15 (d, IH, J = 8,1 Hz), 6,98-6,92 (m, 2H), 5,29 (s,
2H), 3,78 (t, 2H, J = 8,4 Hz), 2,78 (s, 3H), 0,98 (t, 2H, J = 8,4 Hz), 0,01 (s, 9H). Anal.
(C i3H23BO4SÍ - H2O) C, H. Vypočteno C, 59,10, H, 8,01. Změřeno: C, 59,07, H, 8,08.
is Příklad 24(c)
4—[3—(1 H-benzimidazol-2-yl)-l H-indazol-6-yl]-2-chlor-5-methyl fenol
Pro přípravu sloučeniny uvedené v názvu, 5-chlor-2-methyl-4-[2-(trimethylsilanyl)ethoxy20 methoxy] feny lboronová kyselina, připravená, jak popsáno níže, byla použita namísto 5methoxy-2~methyM-[2-(trimethylsilanyl)ethoxymethoxy]fenyIboronové kyseliny z postupu popsaného v příkladu 24(a), krok (viii). *H NMR (300 MHz, DMSO-dJ δ 13,61 (s, IH), 13,00 (š s, IH), 10,22 (s, IH), 8,51 (d, IH, J = 8,4 Hz), 7,64 (š s, 2H), 7,50 (s, IH), 7,26-7,21 (m, 4H), 6,95 (s, IH), 2,19 (s, 3H).
5-chlor-2-methyl-4-[2-(trimethylsilanyl)ethoxymethoxy]fenyl-boronová kyselina byla připravena takto:
(i)
OH OH
6,68 g (46,9 mmol) 2-chlor-5-methylfenolu bylo mícháno ve 200 ml acetonitrílu. Bylo přidáno
8,5 g (47,8 mmol) N-bromsukcinimidu a reakce byla míchána po dobu 45 minut. Roztok byl koncentrován ve vakuu a opět rozpuštěn ve 100 ml chloroformu. Organické vrstvy byly promyty 50 ml saturovaného NaHCO3 a 50 ml solanky, usušeny (MgSO4) a koncentrovány ve vakuu.
-76CZ 301667 B6
Purifikace chromatografií na silikagelu (8% směs ethylacetátu a hexanu) poskytla 7,98 g (77 %) 4-brom-3-chlor-5-methylfenolu jako Čirého oleje. ’H NMR (300 MHz, CDC13) 5 7,47 (s, 1H), 6,91 (s, IH), 5,52 (š s, IH), 2,32 (s, 3H). Anal. (C^ClBrO . 0,1 H2O) C, H. Vypočteno C, 37,66, H, 2,80. Změřeno: C, 37,57, H, 2,82.
(ii)
[2-(4-brom-2-chlor-5-methylfenoxymethoxy)ethyl]trimethyl-sÍlan byl připraven při 83% výtěžku z 4-brom-3-chlor-5-methyífenolu podle postupu pro [2-(4-brom-2-methoxy-5io methylfenoxymethoxy)ethyl]trimethylsilan. ’H NMR (300 MHz, CDC13) δ 7,51 (s, IH), 7,09 (s, IH), 5,26 (s, 2H), 3,79 (t, 2H, J = 8,4 Hz), 2,35 (s, 3H), 0,95 (t, 2H, J = 8,4 Hz), 0,02 (s, 9H).
Anal. (C,3H20C1BiO2Sí) C, H. Vypočteno C, 44,39, H, 5,73. Změřeno: C, 45,08, H, 5,91.
(iii)
1) irBuUtTKF
->.
2) 0(0»·),
5-chIor-2-methyl-4-[2-(trimethylsilanyl)ethoxymethoxy]-fenylboronová kyselina byla připravena při 54% výtěžku z [2-(4-brom-2-chlor-5-methylfenoxymethoxy)ethyl]trimethylsilanu podle postupu pro 5-methoxy-2-methyi-4-[2-{trimethylsilanyl)-ethoxymethoxy]íěnylboronovou kyselinu. 'H NMR (300 MHz, CDC13) δ 8,11 (s, IH), 7,09 (s, IH), 5,37 (s, 2H), 3,84 (t, 2H, J = 8,4 Hz), 2,76 (s, 3H), 0,98 (t, 2H, J = 8,4 Hz), 0,01 (s, 9H). Anal. (CI3H22BclO4Si - H2O) C, H.
Vypočteno C, 52,28, H, 6,75. Změřeno: C, 51,98, H, 6,84.
Příklad 24(d)
3-1 H-benzimidazol-2-y 1-6-(4-hydroxy-2-methoxyťenyl)~ 1 H-indazol
Sloučenina z příkladu 24(d) byla připravena podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 24(a) kromě toho, že 4-brom-3-methoxyfenol, připravený, jak bylo popsáno autory Carreno et.
Al., Syn. Lett., 11, 1241-42, 1997, byl použit namísto 4-brom-2-methoxy-5-methylfenolu v kroku (vi). 'H NMR (300 MHz, DMSO-d«) δ 1352 (s, IH), 12,98 (s, IH), 9,63 (s, IH), 8,44 (d, 1H, J = 8,4 Hz), 7,72 (d, IH, J = 6,9 Hz), 7,61 (s, 1H), 7,50 (d, IH, J = 6,9 Hz), 7,36 (dd, 1H, J = 8,4, 1,5 Hz), 7,18-7,22 (m, 3H), 6,55 (d, IH, J = 2,1 Hz), 6,48 (dd, IH, J - 8,1, 2,1 Hz), 3,74 (s, 3H). MS (ES) [M+H]/z vypočteno 357, zméřeno 357, [M-H]/z vypočteno 355, změřeno 355.
-77CZ 301667 B6
Příklad 24(e)
3-1 H-benzimidazol-2-yl-6-(2-ethyl-4-hydroxyfenyl)-l H-indazol
Sloučenina z příkladu 24 (e) byla připravena podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 24(a) kromě toho, že 4-brom-3-ethyl-fenol, připravený při 80% výtěžku podle postupu popsaného autory Carreno et. AL, Syn. Lett., 11, 1241-42, 1997, pro syntézu 4-brom-3-methylfenolu, byl použit namísto 4-brom-2-methoxy-5-methylfenolu v kroku (vi). *H NMR (300 MHz, DMSO-dó) δ 13,66 (s, IH), 13,02 (s, IH), 9,43 (s, IH), 8,49 (d, IH, J - 8,4 Hz), 7,72 (d, io IH, J = 6,9 Hz), 7,53 (d, IH, J = 6,9 Hz), 7,44 (s, IH, 7,18-7,25 (m, 3H), 7,06 (d, IH, J = 8,1 Hz), 6,75 (d, IH, J = 2,1 Hz), 6,66 (dd, IH, J = 8,1, 2,1 Hz), 2,50 (q, 2H, J = 7,5 Hz), 1,04 (t, 3H, J = 7,5 Hz). MS (ES) [M+H]/z vypočteno 355, změřeno 355, [M-H]/z vypočteno 353, změřeno 353.
Příklad 24(0
3-1 H-benzimidazol-2-yl-6-(2,4-dihydroxyfenyl)-l H-indazol
46 mg (0,13 mmol) 642-methoxy-4-hydroxyfenyl)-3-lH-benzimidazol-2-yl-lH-indazolu, připraveného v příkladu 24(d), bylo zahříváno v 0,5 g pyridiniumchloridu ve 180°C po dobu 2 hodin. Reakce byla ponechána vychladnout a byla zastavena 15 ml saturovaného NaHCO3 a extrahována 2 x 20 ml EtOAc. Organické vrstvy byly usušeny (Na2SO4) a koncentrovány ve vakuu. Purifikace chromatografíi na silikagelu (60% směs THF a hexanu) poskytla 26 mg (59 %) sloučeniny uvedené v názvu jako bílé pevné látky. 'H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 13,49 (s, IH), I2,94(s, IH), 9,49(s, IH), 9,39 (s, IH), 8,43 (d, 1H, J = 8,4 Hz), 7,71 7,74 (m, 2H), 7,50 (d, IH, J - 6,9 Hz), 7,43 (dd, IH, J - 8,4, 1,2 Hz), 7,16-7,23 (m, 3H), 6,45 (d, IH, J = 2,1 Hz), 6,35 (dd, IH, J = 8,4, 2,1 Hz). MS (ES) [M+H]/z vypočteno 343, změřeno 343, [M-H]/z vypočteno 341, změřeno 341.
Příklad 24(g)
3-1 H-benzimidazol-2-yI-6-{2-fenoxy-4-hydroxyfenyl)-l H-indazol
-78CZ 301667 B6
Sloučenina z příkladu 24(g) byla připravena podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 24(c) kromě toho, že 3-fenoxyfenol byl použit namísto 2-chlor-5-methylfenolu v kroku (i). 1H NMR (300 MHz, DMSO-dó) δ 13,54 (s, IH), 12,95 (s, IH), 9,78 (s, IH), 8,43 (d, IH, J = 8,4
Hz), 7,67-7,72 (m, 2H), 7,49 (dd, IH, J = 6,3, 2,1 Hz), 7,43 (d, 2H, J = 8,4 Hz), 7,33 (t, 2H, J =
7,5 Hz), 7,17-7,22 (m, 2H), 6,96-7,07 (m, 3H), 6,72 (dd, IH, J = 8,4, 2,1 Hz), 6,40 (d, IH, J = 2,1 Hz). MS (ES) [M+H]/z vypočteno 419, změřeno 419, [M-H]/z vypočteno 417, změřeno 417.
io Příklad 24(h)
3-lH-benzimidazol-2-yl-6-(2-(2-methoxyethyl)“4-hydroxyfenyl)-l H-indazol
Sloučenina z příkladu 24(h) byla připravena podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu
24(a) kromě toho, že {2—[4-brom-3-(2-methoxyethyl)fenoxymethoxy]ethyl}trimethylsilan, připravený, jak popsáno níže, byl použit namísto [2-(4-brom-2-methoxy-5-methylťenoxymethoxy)ethyl]trimethylsilanu v kroku (vii). *H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 13,60 (s, IH), 13,01 (s, IH), 9,44 (s, IH), 8,49 (d, IH, J = 8,4 Hz), 7,73 (š s, IH), 7,51 (š s, IH), 7,46 (s, IH), 7,21 (přibližně d, 3H, J = 8,1 Hz), 7,09 (d, H, J - 8,1 Hz), 6,78 (d, 1H, J = 2,4Hz), 6,70 (dd, 1H, J
- 8,1, 2,4 Hz), 3,40 (t, 2H, J = 7,2 Hz), 3,12 (s, 3H), 2,75 (t, 2H, J = 7,2 Hz). MS (ES) [M+H]/z vypočteno 385, změřeno 385, [M-H]/z vypočteno 383, změřeno 383.
Výchozí látka byla připravena takto:
(i)
4-brom-3-(2~hydroxyethyl)fenol byl připraven při 88% výtěžku substitucí 3-(2-hydroxyethyl)fenolu v postupu popsaném v příkladu 24(c), krok (i). 'H NMR (300 MHz, CDC13) δ 9,56 (s, IH), 7,29 (d, IH, J = 8,7 Hz), 6,74 (d, IH, J = 3,0 Hz), 6,55 (dd, IH, J = 8,7, 3,0 Hz),
4,71(t, IH, J = 5,4 Hz), 3,52-3,59 (m, 2H), 2,73 (t, 2H, J = 7,2 Hz).
-79CZ 301667 B6 (ϋ)
Příprava 2-[2-brom-5-(2-trimethylsilanylethoxymethoxy)-fenylu]: byl připraven pri 65% 5 výtěžku substituci 4-brom-3-(2-hydroxyethyl)fenolu v postupu popsaném v příkladu 24(a), krok (vi). 'H NMR (300 MHz, CDC13) δ 7,43 (d, IH, J = 8,7 Hz), 6,97 (d, IH, J = 3,0 Hz), 6,82 (dd, IH, J = 8,7, 3,0 Hz), 5,19 (s, 2H), 3,88 (q, 2H, J = 6,6 Hz), 3,74 (t, 2H, J - 8,4 Hz), 2,99 (t, 2H, J = 6,6 Hz), 1,42 (t, IH, J = 6,6 Hz). 0,94 (t, 2H, J = 8,4 Hz), -0,01 (s, 9H).
(iii)
{2-[4-brom-3-{2-methoxyethyl)fenoxymethoxy]ethyl}trimethylsilan: 1,9 g (6,0 mmol)
2-[2-brom-5-(2-trimethyl-silanylethoxymethoxy)fenyl]ethanolu bylo přidáno k roztoku 1,35 g (24 mmol) hydroxidu draselného v 16 ml DMSO. Bylo přidáno 1,12 ml (18 mmol) jodmethanu a roztok byl míchán po dobu 16 hodin. Reakce byla naředěna 50 ml vody a extrahována 2 x 40 ml etheru. Organické vrstvy byly promyty 40 ml solanky, usušeny (Na2SO4) a koncentrovány ve vakuu. Purifikace chromatografií na silikagelu (10% směs etheru a hexanu) poskytla 1,28 g {2-[4-brom-3-(2-methoxyethyl)fenoxymethoxy]-ethyl}trimethylsilanu jako čirého oleje. ]H NMR (300 MHz, CDC13) δ 7,40 (d, IH, J = 8,7 Hz), 6,96 (d, IH, J - 3,0 Hz), 6,80 (dd, IH,
J = 8,7, 3,0 Hz), 5,18 (s, 2H), 3,74 (t, 2H, J = 8,4 Hz), 3,60 (t, 2H, J = 7,2 Hz), 3,37 (s, 3H), 2,98 (t, 2H, J = 7,2 Hz), 0,95 (t, 2H, J = 8,4 Hz), -0,01 (s, 9H).
Příklad 24(i)
3-1 H-benzi midazol-2-y 1-6-( 2-( 2-hydroxy ethy 1 )-4-hydroxyfeny 1)-1 H-indazol
mg (0,26 mmol) 3-1 H-benzimidazol-2-yl-6-(2-(2-methoxyethyl)-4-hydroxyfenyl)-l Hindazolu, z příkladu 24(i), bylo rozpuštěno ve 20 ml EtOAc a ochlazeno na -78 °C v argonové atmosféře. Po kapkách byl přidán bromid boritý a reakce byla ponechána za míchání při zahří-80CZ 301667 B6 vání na teplotu místnosti po dobu 3 hodin. Roztok byl naředěn 60 ml EtOAc a promyt saturovaným NaHCO3 a solankou, po 20 ml. Organické vrstvy byly usušeny (Na2SO4) a koncentrovány ve vakuu. Puriflkace chromatografií na silikagelu (THF) poskytla 56 mg (59 %) sloučeniny uvedené v názvu jako bílé pevné látky. ’H NMR (300 MHz, DMSO-d^) 5 13,60 (s, IH),
13,01 (s, IH), 9,41 (s, IH), 8,49 (d, IH, J = 8,4 Hz), 7,71 (š s, IH), 7,51 (š s, IH), 7,46 (s, IH),
7,21 (přibližně d, 3H, J = 8,1 Hz), 7,08 (d, IH, J -8,4 Hz), 6,77 (d, IH, J = 2,1 Hz), 6,69 (dd, IH, J = 8,1, 2,1 Hz), 4,57 (š s, IH), 3,46 (t, 2H, J - 7,2 Hz), 2,68 (t, 2H, J = 7,2 Hz). MS (ES) [M+H]/z vypočteno 371, změřeno 371, [M-H]/z vypočteno 369, změřeno 369.
io
Příklad 240)
3-1 H-benzim idazo 1-2-y 1-6-(2,6—dimethy 1-4-hydroxyfeny 1)-1 H-indazol
Sloučenina z příkladu 24(j) byla připravena podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 24(a) kromě toho, že 4-brom-3,5-dimethylfenol byl použit namísto 4-brom-2methoxy-5-methylfenoIu v kroku (vi). *H NMR (300 MHz, DMSO-d$) δ 13,57 (s, IH), 12,99 (s, IH), 9,22 (s, IH), 8,52 (d, IH, J = 8,4 Hz), 7,72 (d, IH, J = 6,6 Hz), 7,51 (d, 1H, J = 6,6 Hz), 7,31 (s, IH), 7,16-7,25 (m, 2H), 7,02 (d, IH, J = 8,4 Hz), 6,55 (s, 2H), 1,93 (s, 6H). MS (ES) [M+H]/z vypočteno 355, změřeno 355, [M-H]/z vypočteno 353, změřeno 353.
Příklad 24(k)
3-1 H-benzimidazol-2-yl-6-(2-methyl sulfanyM-hydroxyfenyl)-! H-indazol
Sloučenina z příkladu 24(k) byla připravena podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 24(c) kromě toho, že 3-methy lsulfanylfenol, připravený, jak popsáno níže, byl použit namísto 2chlor-5-methylfenolu v kroku (i). 'H NMR (300 MHz, DMSO-íL) δ 13,59 (s, IH), 12,98 (s,
IH), 9,64 (s, IH), 8,48 (d, IH, J = 8,4 Hz), 7,71 (š s, IH), 7,52 (přibližně s, 2H), 7,20-7,27 (m, 3H), 7,12 (d, IH, J = 8,4 Hz), 6,76 (d, IH, J - 2,1 Hz), 6,65 (dd, IH, J = 8,4, 2,1 Hz), 2,34 (s, 3H). MS (ES) [M+H]/z vypočteno 373, změřeno 373, [M-H]/z vypočteno 371, změřeno 371.
-81 CZ 301667 B6
Výchozí látka byla připravena takto: (i)
Příprava 3-methylsulfanylfenolu. 5,0 g (39,7 mmol) 3-hydroxythiofenolu a 6,03 g (43,6 mmol) uhličitanu draselného byly míchány v 80 ml acetonu při teplotě 0 °C. Po kapkách bylo přidáno
2,5 ml (40 mmol) jodmethanu a reakce byla míchána po dobu 45 minut. Roztok byl naředěn 150 ml H2O a extrahován 2 x 100 ml EtOAc. Organické vrstvy byly promyty 100 ml solanky, usušeny (Na2SO4) a koncentrovány ve vakuu. Puriflkace chromatografii na silikagelu (25% směs io EtOAc a hexanu) poskytla 5,08 g (91 %) 3-methylsulfanyIfenolu jako čirého oleje. *H NMR (300 MHz, CDC13) δ 7,15 (t, IH, J = 8,1 Hz), 6,82 (d, IH, J = 8,1 Hz), 6,74 (t, IH, J = 1,8 Hz),
6,60 (dd, IH, J = 8,1,1,8 Hz), 4,86 (s, IH), 2,47 (s, 3H).
is Příklad 24(1)
3-1 H“benzimidazol-2-yl-6-(2-(ethoxyiTiethyl)-5-methoxy-4-hydroxyfenyl)-1 H-indazo 1
Sloučenina z příkladu 24(1) byla připravena podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu
24(a) kromě toho, že [2~(4-brom-5-ethoxymethyl-2-methoxyfěnoxymethoxy)ethyl]trimethylsilan, připravený, jak popsáno níže, byl použit namísto [2-(4-brom-2-methoxy-5-methylfenoxymethoxy)ethyl]trimethylsÍlanu v kroku (vii). ’H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 13,63 (s, IH), 12,99 (s, IH), 9,15 (s, IH), 8,50 (d, IH, J - 8,4 Hz), 7,73 (dd, IH, J - 6,6, 2,1 Hz), 7,59 (s, IH), 7,51 (dd, IH, J = 6,6, 2,1 Hz), 7,32 (d, IH, J = 8,4 Hz), 7,19-7,24 (m, 2H), 6,94 (s, IH),
6,91 (s, IH), 4,22 (s, 2H), 3,81 (s, 3H), 3,39 (q, 2H, J = 6,9 Hz), 1,13 (t, 3H, J = 6,9 Hz). MS (ES) [M+H]/z vypočteno415, změřeno415.
Výchozí látka byla připravena takto:
(i)
-82CZ 301667 B6
2-brom-4-methoxy-5-{2-trimethylsilanylethoxymethoxy)-benzaldehyd byl připraven při 79% výtěžku substitucí 4-brom-3-formyl-2-methoxyfenolu (Hazlet et. AL, J. Org. Chem., 27,325355, 1962) v postupu popsaném v příkladu 24(a), krok (vi). 'H NMR (300 MHZ, CDClj) δ 10,16 (s, IH), 7,68 (s, IH), 7,07 (s, IH), 5,28 (s, 2H), 3,94 (s, 3H), 3,77 (t, 2H, J = 8,4 Hz), 0,94 (t, 2H,
J = 8,4 Hz), -0,03 (s, 9H).
Příprava [2-(4-brom-5”ethoxymethyl-2-methoxyfenoxy-methoxy)ethyl]trimethyI$iIanu: io 275 mg (7,2 mmol) borohydridu sodného bylo přidáno v dávkách po dobu 10 minut k roztoku
1,3 g (3,6 mmol) 2-brom-4-methoxy-5-(2-trimethylsilanylethoxy-methoxy}benzaldehydu ve 20 ml MeOH při teplotě 0 °C. Po 30 minutách byla reakce naředěna 40 ml H2O a extrahována 2 x 30 ml EtOAc. Organické vrstvy byly promyty 30 ml solanky, usušeny (Na2SO4) a koncentrovány ve vakuu za vzniku 1,31 g [2-brom-4-methoxy-5-(2-trimethylsilanylethoxymethoxy)fenyl]15 methanolu jako čirého oleje. 'H NMR (300 MHz, CDC13) δ 7,29 (s, IH), 7,05 (s, IH), 5,27 (s, 2H), 4,66 (d, 2H, J = 6,6 Hz), 3,87 (s, 3H), 3,79 (t, 2H, J = 8,4 Hz), 1,92 (t, IH, J - 6,6 Hz), 0,96 (t, 2H, J = 8,4 Hz), 0,01 (s, 9H).
Surový benzylalkohol byl míchán s roztokem 800 mg (14,4 mmol) hydroxidu draselného v 8 ml 20 DMSO. Bylo přidáno 580 ml (7,2 mmol) jodethanu a reakce byla míchána po dobu 16 hodin předtím, než byla naředěna 30 ml H2O a extrahována 2 x 30 ml etheru. Organické vrstvy byly promyty 20 ml solanky, usušeny (Na2SO4) a koncentrovány ve vakuu. Purifikace chromatografíi na silikagelu (15% směs EtOAc a hexanu) poskytla 1,30 g (92 %) sloučeniny uvedené v názvu jako čirého oleje. *H NMR (300 MHz, CDC13) δ 7,29 (s, IH), 7,03 (s, IH), 5,26 (s, 2H), 4,48 (s, 2H), 3,85 (s, 3H), 3,79 (t, 2H, J = 8,4 Hz), 3,58 (q, 2H, J = 6,9 Hz), 1,26 (t, 3H, J - 6,9 Hz),
0,95 (t, 2H, J = 8,4 Hz), - 0,01 (s, 9H).
Příklad 24(m)
3-1 H-benzimidazol-2-y l-6-(2-(hydroxymethy l)-4-ethoxy-5-methoxy feny I)-1 H-indazol
Sloučenina z příkladu 24(m) byla připravena podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 24(a) kromě toho, že [2-(2-brom-5-ethoxy-4-methoxybenzyloxymethoxy)ethyl]trimethylsilan, připravený, jak popsáno níže, byl použit namísto [2-(4-brom-2-methoxy-5-methyIfenoxymethoxy)ethyl]trimethylsilanu v kroku (vii). *H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 13,64 (s, IH), 13,00 (s, IH), 8,50 (d, IH, J = 8,4 Hz), 7,73 (d, IH, J = 8,4 Hz), 7,62 (s, IH), 7,52 (dd, IH, J = 6,0,1,8 Hz), 7,32 (dd, 1H,J = 8,4,1,2 Hz), 7,19-7,24 (m, 2H), 7,15 (s, IH), 6,91 (s, IH), 5,11 (t, IH, J - 5,1 Hz), 4,37 (d, 2H, J = 5,1 Hz), 4,08 (q, 2H, J = 6,9 Hz), 3,80 (s, 3H), 1,37 (t, 3H, J =
6,9 Hz). MS (ES) [M+H]/z vypočteno 415, změřeno 415.
-83CZ 301667 B6
Výchozí látka byla připravena takto:
(i)
Příprava 4-brom-2-methoxy-5-(2-trimethylsilanylethoxy-methyl)fenolu: [2-brom-4methoxy-5-(2-trimethylsÍlanylethoxy-methoxy)fenyl]methanol, po jednom týdnu stání, kdy probíhala SEM-migrace z fenolického na benzylový alkohol za vzniku sloučeniny uvedené vnázvu. 'HNMR (300 MHz, CDCh) δ 7,04 (s, IH), 7,01 (s, IH), 5,54 (s, IH), 4,77 (s,2H),4,57 io (s, 2H), 3,88 (s, 3H), 3,68 (t, 2H, J = 8,4 Hz), 0,97 (t, 2H, J = 8,4 Hz), 0,02 (s, 9H).
(ii)
Příprava [2-(2-brom-5-ethoxy-4-methoxybenzyloxymethoxy)-ethyl]trimethylsiIanu: 1,28 g (3,53 mmol)4-brom-2-methoxy-5-(2-trimethylsilanylethoxymethyl)fenolu bylo mícháno s roztokem 790 mg (14,1 mmol) hydroxidu draselného v 8 ml DMSO. Bylo přidáno 565 ml (7,1 mmol) jodethanu a reakce byla míchána po dobu 16 hodin předtím, než byla naředěna 30 ml H2O a extrahována 2 x 30 ml etheru. Organické vrstvy byly promyty 20 ml solanky, usušeny (Na2SO4) a koncentrovány ve vakuu. Purifikace chromatografii na silikagelu (15% směs EtOAc a hexanu) poskytla 1,26 g (91 %) sloučeniny uvedené v názvu jako Čirého oleje. lH NMR (300 MHz, CDCh) δ 7,02 (s, IH), 6,98 (s, IH), 4,78 (s, 2H), 4,60 (s, 2H), 4,09 (q, 2H, J = 6,6 Hz), 3,86 (s, 3H), 3,69 (t, 2H, J = 8,4 Hz), 1,46 (t, 3H, J = 6,6 Hz), 0,97 (t, 2H, J = 8,4 Hz), 0,04 (s, 9H).
Příklad 24(n)
3-1 H-benzimidazol-2-yl-6-(2-(hydroxymethy l)-5-methoxy-4-hydroxy fenyl)-1 H-indazol
Sloučenina z příkladu 24(n) byla připravena podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 24(a) kromě toho, že 6-[5-methoxy-2-hydroxymethyl-4-(2-trimethylsilanylethoxymethoxy)fenyl]-l-(2-trimethylsilanylethoxymethyl)-3-[l-(2-trimethylsilanylethoxymethyl)lH-benzimtdazol-2-yl]-l H-indazol, připravený, jak popsáno níže, byl použit namísto 6-[5-methoxy-2-methyM-(2-trimethylsilanylethoxymethoxy)fenyl]-l-{2-trimethylsi!anyl-84CZ 301667 B6 ethoxymethyl)-3-[ l-(2-trimethylsilanyl-ethoxymethyl)-l H-benzimidazol-2-yl]-l H-indazolu.
'H NMR (300 MHz, DMSO-dó) δ 13,59 (s, IH), 12,95 (s, IH), 9,05 (s, IH), 8,49 (d, IH,
J = 8,4 Hz), 7,72 (dd, IH, J = 6,3, 2,1 Hz), 7,60 (s, IH), 7,51 (dd, IH, J = 6,3, 2,1 Hz), 7,31 (d, IH, J - 8,4 Hz), 7,20-7,24 (m, 2H), 7,02 (s, IH), 6,87 (s, IH), 5,02 (t, IH, J = 5,4 Hz), 4,32 (d, 2H, J = 5,4 Hz), 3,80 ($, 3H). MS (ES) [M+H]/z vypočteno 387, změřeno 387, [M-H]/z vypočteno 385, změřeno 385.
Výchozí látka byla připravena takto:
Příprava 4-methoxy-5-(2-trimethylsilanylethoxymethoxy)-2-trimethyl stannany lbenzaldehydu: 3,36 g (9,3 mmol) 2-brom-4-methoxy-5-(2-trimethylsilanylethoxymethoxy)benzaldehydu a 5,0 g (15,3 mmol) hexamethyldicínu bylo mícháno v 60 ml suchého toluenu v baňce probublá15 váné argonem. Bylo přidáno 500 mg (0,45 mmol) tetrakis(trifenylfosfin)palladia(0) a reakce byla míchána ve 100 °C po dobu 23 hodin. Reakce byla ochlazena a koncentrována ve vakuu. Purifikace chromatografií na silikagelu (5% směs EtOAc a hexanu) poskytla 2,77 g (67 %) 4-methoxy-542-trimethylsilanylethoxymethoxy)-2-trimethyl-stannanylbenzaldehydu jako čirého oleje. 'H NMR (300 MHz, CDCh) δ 9,81 (dd, IH, J = 3,0, 0,9 Hz), 7,66 (t, IH,
J = 6,6 Hz), 7,21 (t, IH, J = 9,0 Hz), 5,35 (s, 2H), 3,99 (s, 3H), 3,82 (t, 2H, J = 8,4 Hz), 0,25 (t, 9H, J = 26,7 Hz), 0,98 (t, 2H, J = 8,4 Hz), -0,01 (s, 9H).
Příprava [4-methoxy-5-(2-trimethylsilany!ethoxymethoxy)-2-trimethylstannanyIfenyI]methanolu: 2,36 g (5,3 mmol) 4-methoxy—5~(2-trimethyisÍlanylethoxymethoxy)-2“trimethylstannanyl-benzaldehydu bylo mícháno ve 30 ml MeOH při teplotě 0 °C. Bylo přidáno 400 mg (10,6 mmol) borohydridu sodného a reakce byla míchána po dobu 1 hodiny. Roztok byl naředěn 60 ml H2O a extrahován 2 x 50 ml EtOAc. Organické vrstvy byly promyty 50 ml solanky, usušeny (Na2SO4) a koncentrovány ve vakuu za vzniku 2,16 g (91 %) [4-methoxy-5-(2-trimethylsilanylethoxymethoxy)-2-trimethylstannanyIfenyl]methanolu jako čirého oleje. *H NMR (300 MHz, CDC13) δ 7,18 (t, IH, J = 6,9 Hz), 7,03 (t, IH, J = 9,3 Hz), 5,27 (s, 2H), 4,58-4,63 (m, 2H), 3,89 (s, 3H), 3,80 (t, 2H, J = 8,4 Hz), 1,53 (t, IH, J = 6,0 Hz), 0,96 (t, 2H, J = 8,4 Hz), 0,31 (t, 9H, J = 27,3 Hz), 0,01 (s, 9H).
-85CZ 301667 B6 (iii)
Příprava 6-[5-methoxy-2-hydroxymethy 1—4—(2—trimethyl—s i lanylethoxymethoxy)feny 1]-1 -(2trimethyIsilanylethoxymethyl)“3-[l-(2-trimethylsilanylethoxymethyl)-lH“benzimidazol-2“ yl]-lH“indazolu: 300 mg (0,48 mmol) 6-jod-l-[2-(trimethyl-silanyl)ethoxymethyl]-3-{l-[2(trimethylsilanyl)ethoxymethyl]-lH-benzimidazol-2-yl}-lH-indazolu [příklad 24(a), krok (v)] a 282 mg (0,63 mmol) [4-methoxy-5-(2-trimethylsílanýlethoxymethoxy)-2-trimethylstannanylfenyljmethanolu byly míchány v 8 ml dioxanu v argonové atmosféře v 98 °C po dobu 16 hodin. Reakce byla ponechána vychladnout a byla naředěna EtOAc. Organické vrstvy byly promyty io saturovaným NaHCO; a solankou, usušeny (Na2SO4) a koncentrovány ve vakuu. Purifikace chromatografií na silikagelu (20% směs EtOAc a hexanu) poskytla 224 mg (60 %)
6-[5-methoxy-2-hydroxymethyM-(2-trimethylsilanyIethoxymethúxy)fenyl]-l-(2-trimethylsi lany l-ethoxymethyl}-3-[l-(2-trimethylsi lany lethoxymethyl)-lH-benzimÍdazol-2-yl]-lHindazolu, jako světle žlutého oleje. *H NMR (300 MHz, CDCh) δ 8,70 (d, IH, J = 8,4 Hz),
7,89-7,92 (m, IH), 7,63-7,66 (m, 2H), 7,34-7,41 (m, 4H), 6,91 (s, IH), 6,29 (s, 2H), 5,83 (s, 2H), 5,36 (s, 2H), 4,55 (s, 2H), 3,78-3,92 (m, 5H), 3,59-3,70 (m, 4H), 0,83-1,04 (m, 6H), 0,03 (s, 9H), -0,04 (s, 9H), -0,13 (s, 9 Hz).
Příklad 24(o)
3-1 H-benzimidazol-2-y l-6-(3-hydroxyfenyl}-l H-indazol
Sloučenina z příkladu 24(o) byla připravena podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 24(f) kromě toho, že 6-(3-methoxyfenyl)-3-lH-benzimidazol-2-yl-l H-indazol, připravený podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 24(a) kromě toho, že 3-methoxyfenylboronová kyselina byla použita namísto 5-methoxy-2~methyl-4-[2-(trimethylsilanyl)ethoxymethoxyjfenylboronové kyseliny v kroku (viií), byl použit namísto 6-(2-methoxy-4_ hydroxyfenyl)-3-lH-benzimidazol-2-yl-lH-Índazolu. *H NMR (300 MHz, DMSO-d^) δ 13,67 (s, IH), 13,00 (s, IH), 9,58 (s, IH), 8,55 (d, IH, J = 8,4 Hz), 7,71-7,75 (m, 2H), 7,49-7,57 (m, 2H), 7,30 (t, IH, J - 7,8 Hz), 7,12-7,24 (m, 4H), 6,80 (dd, IH, J = 8,1, 1,5 Hz). MS (ES) [M+H]/z vypočteno 327, změřeno 327, [M-H]/z vypočteno 325, změřeno 325.
-86CZ 301667 B6
Příklad 24(p)
3-1 H-benzimidazol-2-yl-6-(2-methoxy-3-hydroxyfeny 1)-1 H-indazol
Sloučenina z příkladu 24(p) byla připravena podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 24(a) kromě toho, že 3-brom-2-methoxyfenol, připravený, jak bylo popsáno autory Aristoff et al., Tet Lett., 25, 3955-58, 1984 byl použit namísto 4-brom-2-methoxy-5-methylfenolu v kroku (vi). *H NMR (300 MHz, DMSO-Λ) δ 13,60 (s, IH), 12,97 (s, IH), 9,37 (s, IH), io 8,52 (d, IH, J - 8,4 Hz), 7,69-7,74 (m, 2H), 7,51 (dd, IH, J = 7,8, 1,8 Hz), 7,43 (dd, IH,
J = 8,4, 1,2 Hz), 7,19 - 7,24 (m, 2H), 7,02 (t, IH, J = 7,8 Hz), 6,85-6,93 (m, 2H), 3,50 (s, 3H).
MS (ES) [M+H]/z vypočteno 357, změřeno 355, [M-H]/z vypočteno 357, změřeno 355.
is Příklad 25(a)
3-(3 H-imidazol[4,5-c]pyridin-2-y 1)-6-( 4-hydroxy-2-methoxy- fenyl)-1 H-indazol
Roztok 68 mg (0,11 mmol) 6-[5-methoxy-2-methy 1-4-(2- trimethy Isilany lethoxymethoxy)20 fenyl]-l-(2-trimethylsilanyl-ethoxymethyl)-3-[3-(2-trimethylsilanylethoxymethyl)-3Himidazo[4,5-c]pyridin-2-yl]-lH-indazolu v 1,2 ml (1,2 mmol) TBAF (ÍM v THF) se 150 ml (2,2 mmol) ethylendiaminu byl míchán v 68 °C po dobu 48 hodin. Roztok byl koncentrován ve vakuu a puntíkován chromatografií na silikagelu (2.Ί směs EtOH a EtOAc). Precipitace z acetonitrilu poskytla 21 mg (53%) 3-(3H-imidazo[4,5-c]pyridin-2-y 1)-6-(4-hydroxy-2-methoxy25 fenyl)-lH-indazolu, jako bílé pevné látky. *H NMR (300 MHz, DMSO-dJ δ 13,70 (s, IH), 13,49 (š s, IH), 9,62 (s, IH), 9,01 (š s, IH), 8,43 (d, IH, J = 8,7 Hz), 8,34 (d, IH, J = 5,7 Hz), 7,64 (s, IH), 7,57 (š s, IH), 7,39 (dd, IH, J = 8,7, 1,5 Hz), 7,21 (d, IH, J = 8,1 Hz), 6,55 (d, IH, J = 2,1 Hz), 6,49 (dd, IH, J = 8,1, 2,1 Hz), 3,74 (s, 3H). MS (ES) [m+H]/z vypočteno 358, změřeno 358, [M-H]/z vypočteno 356, změřeno 356.
Meziprodukty byly připraveny takto:
(i)
-87CZ 301667 B6
1, l-dimethoxymethyl)-6-jod-142-trimethylsilanylethoxy-methyl41 H4ndazol. Roztok
1,28 g (2,69 mmol) 6-jod-3-styryl-l-[24trimethylsilanyl)ethoxymethyl]-lH-indazolu [příklad
14, krok (i)] ve 40 ml CH2CI2/4O ml MeOH byl míchán v -78 °C. Reakce byla podrobena působení ozonu, dokud trvalo modré zbarvení, a pak byla probublána argonem. Byly přidány 4 ml methylsulfidu a reakce byla míchána 4 hodiny při zahřívání na teplotu místností. Koncentrace ve vakuu poskytla surovou směs acetalu a aldehydu, která byla konvertována kompletně na acetal mícháním v 10 ml trimethylorthoformíátu s 0,8 g kyselé iontoměničové pryskyřice Amberlyst 15 (vlhké) po dobu 1 hodiny. Pryskyřice byla odstraněna filtrací a roztok byl koncentrován ve vakuu. Purifikace chromatografií na silikagelu poskytla 1,11 g (92%) 341,1-dimethoxy10 methyl)-6-jod-142“trimethylsÍlanylethoxymethyI)HlH4ndazolu jako čirého oleje. ‘H NMR (300 MHz, CDC13) δ 7,98 (s, IH), 7,68 (d, IH, J = 8,4 Hz), 7,48 (dd, IH, J = 8,4, 1,2 Hz), 5,77 (s, IH), 5,69 (s, 2H), 3,53 (t, 2H, J = 8,4 Hz), 3,43 (s, 6H), 0,88 (t, 2H, J = 8,4 Hz),-0,06 (s, 9H).
(ii)
U -dimethoxymethy l)-6-[2-methoxy-442-trimethy 1-silany lethoxymethoxy)fenyl]-142trimethylsilanylethoxy-methyl)-lH4ndazol. 1,06 g (2,37 mmol) 34U-dimethoxy-methyl)-6jod-142-trimethylsilanylethoxymethyI)-lH4ndazolu, 0,99 g (3,32 mmol) 2-methoxy-44trimethylsilanylethoxy-methoxy)fenylboronové kyseliny a 352 mg (1,4 mmol) uhličitanu sodného byly míchány ve směsi 15 ml benzenu, 3 ml MeOH a 1 ml vody v baňce probublávané argonem. Bylo přidáno 220 mg (0,19 mmol) tetrakis(trifenylfosfin)palladia(0) a reakce byla míchána ve varu pod zpětným chladičem po dobu 16 hodin. Reakce byla ponechána vychladnout a byla naředěna 70 ml etheru. Organické vrstvy byly promyty 30 ml H2O a 30 ml solanky, usušeny (Na2SO4) a koncentrovány ve vakuu. Purifikace chromatografií na silikagelu (15% směs EtOAc a hexanu) poskytla 1,12 g (82%) 34U-dimethoxymethyl)-642-methoxy-^l42-trimethylsilanylethoxymethoxy)feny 1]-142-trimethylsilany 1-ethoxymethy 1)-1 H-indazolu, jako světle žlutého oleje. 'HNMR (300 MHz, CDCh) δ 7,91 (d, IH, J = 8,4 Hz), 7,64 (s, IH), 7,37 (dd, IH, J = 8,4, 1,2 Hz), 7,29 (d, IH, J = 8,4 Hz), 6,71-6,77 (m, 2H), 5,82 (s, IH), 5,75 (s, 211), 5,28 (s, 2H), 3,77-3,83 (m, 5H), 3,57 (t, 2H, J - 8,4 Hz), 3,46 (s, 6H), 1,00 (t, 2H, J = 8,4 Hz), 0,88 (t, 2H, J = 8,4 Hz), 0,03 (s, 9H), -0,05 (s, 9H).
(iii)
642-methoxy-442-trimethylsi lany lethoxymethoxy)feny Ij-142-trimethylsi lany lethoxy35 methyl)-1 H-indazol-3-karbaldehyd. 1,1 g (1,92 mmol) 341 > 1-dimethoxymethy l)-6-f 2methoxy442-trimethylsilanylethoxymethoxy)fenyl]-142-trimethylsilanyl-ethoxymethyl)lH4ndazolu bylo mícháno v 20 ml 1% směsi TFA a CH2C12 po dobu 1 hodiny při teplotě místnosti. Koncentrace ve vakuu poskytla 1,01 g (100%) 6-[2-methoxy-442-trimethyl-sÍlanyl-88CZ 301667 B6 ethoxymethoxy)fenyl]- 142-trimethylsilanylethoxy-methy 1)-1 H-indazol-3-karbaldehydu jako čirého oleje, ]H NMR (3 MHz, CDCb) δ 10,27 (s, IH), 8,28 (d, IH, J = 8,4 Hz), 7,73 (s, IH),
7,55 (dd, IH, J = 8,4, 1,2 Hz), 7,29 (d, IH, J = 8,4 Hz), 6,72-6,79 (m, 2H), 5,82 (s, 2H), 5,28 (s,2H), 3,78-3,84 (m, 5H), 3,61 (t, 2H, J = 8,1 Hz), 0,89-1,03 (m, 4H), 0,03 (s, 9H), -0,05 5 (s, 9H).
(iv)
6-[5-methoxy-2-methyl-4-{2-trimethylsilanylethoxymethoxy)—fenyl]—1—(2—trimethylsilanylio ethoxymethyl}-3-[3-(2-trimethyl-silanylethoxymethyl)-3H-imidazo[4,5-c]pyridin-2-yl]-l Hindazol. 320 mg (0,61 mmol) 6-[2-methoxy-4-(2-trimethyl- silanylethoxymethoxy)fenyl]-l(2-trimethylsilanylethoxymethyl)-lH-indazol-3-karbaldehydu, 68 mg (0,62 mmol) 3,4-diaminopyridinu a 23 mg (0,73 mmol) síry bylo vloženo do 2 ml suchého DMF a mícháno v 90 °C po dobu 16 hodin v argonové atmosféře. Reakce byla ponechána vychladnout a byla naředěna is 20 ml EtOAc. Organické vrstvy byly promyty saturovaným NaHCO3 a solankou, po 15 ml, usušeny (Na?SO4) a koncentrovány ve vakuu. Purifikace chromatografií na silikagelu (75 až
100% směs EtOAc a hexanu) poskytla 78 mg (21 %) 6-[5-methoxy-2-methyl-4-(2-trimethylsilanylethoxymethoxy)fenyl]-l-(2-trimethylsÍlanylethoxymethyl)-3-[3-(2-trÍmethylsilanylethoxymethyl)-3H-ímidazo[4,5-c]pyridin-2-yl]-lH-indazolu, jako bílé pevné látky, 'HNMR (3 00 MHz, CDC13) δ 10,69 (š s, 1H), 9,21 (s, 1H), 8,63 (dd, IH, J = 8,4, 0,3 Hz), 8,50 (d, IH, J =
5,4 Hz), 7,73 (s, IH), 7,47 (š s, IH), 7,57 (dd, IH, J = 8,7,1,2 Hz), 7,33 (d, IH, J = 8,4 Hz), 6,74-6,80 (tn, 2H), 5,80 (s, 2H), 5,29 (s, 2H), 3,78-3,85 (m, 5H), 3,63 (t, 2H, J = 8,1 Hz), 0,89-1,04 (m, 4H), 0,04 (s, 9H), 4),06 (s, 9H),
Přiklad 25(b)
3-[6-(2-morfolin-4-ylethylkarbamoyl)-lH-benzimidazol-2-yl]-6-(2-methoxy-4-hydroxy-
Sloučenina z příkladu 25(b) byla připravena podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 25(a) kromě toho, že 3,4-diamino-N-(2-morfolin-4-ylethyl)benzamÍd připravený, jak popsáno níže, byl použit namísto 3,f-diaminopyridinu v kroku (iv). ’H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 13,61 (s, 0,5H), 13,59 (s, 0,5H), 13,22 (s, 0,5H), 13,18 (s, 0,5H), 9,59 (s, IH), 8,35-8,46 (m, 2H),
8,27 (s, 0,5H), 8,02 (s, 0,5H), 7,71-7,79 (m, 1,5H), 7,63 (s, IH), 7,53 (d, 0,5H, J - 8,7 Hz), 7,38 (d, IH, J = 8,7 Hz), 7,21 (d, IH, J = 8,7 Hz), 6,55 (d, IH, J = 2,1 Hz), 6,49 (dd, IH, J = 8,4, 2,1 Hz), 3,75 (s, 3H), 3,58 (t, 4H, J = 4,5 Hz), 3,42 (q, 2H, J = 6,0 Hz), 2,43-2,51 (m, 6H). MS (ES) [M+H]/z vypočteno 513, změřeno 513, [M-H]/z vypočteno 511, změřeno 511.
-89CZ 301667 B6
3.4- diamino-N-(2-morfolin-4-ylethyl)benzamid byl připraven takto:
3.4- diamino-N-(2-morfolirM—ylethyl)benzamíd. 5 g (32,9 mmol) 3,4-diaminobenzoové kyseliny, 5,2 ml (39,4 mmol) 4-(2-aminoethyl)morfolinu, 9,2 ml (66 mmol) triethylaminu a DMAP
0,40 g (3,3 mmol) bylo vloženo do 80 ml suchého DMF při teplotě 0 °C. Bylo přidáno 9,45 g (49,3 mmol) EDC a reakce byla míchána po dobu 24 hodin při teplotě místnosti. Koncentrace ve vakuu a purifikace chromatografií na silíkagelu (10% směs MeOH a CH2C12 s0,2% NH4OH) poskytla 2,6 g (31 %) 3,4-diamino-N-(2-morfolin-4-y1ethyl)benzamidu jako světle hnědé pevné látky. 'H NMR (300 MHz, DMSO-dJ δ 7,72 (t, IH, J = 5,4 Hz), 7,02 (d, IH, to J = 1,8 Hz), 6,92 (dd, IH, J = 8,1, 1,8 Hz), 6,46 (d, IH, J = 8,1 Hz), 4,89 (š s, 2H), 4,51 (š s, 2H),
3,55 (t, 4H, J = 4,8 Hz), 3,29 (q, 2H, J = 7,2 Hz), 2,36-2,43 (m, 6H).
Příklad 25(c)
3-[6~(4-methylpiperazin-l-yl)-lH-benzimidazol-2-yl]-6-(2-methoxy^t-hydroxyfenyl)-lHindazol
Sloučenina z příkladu 25(c) byla připravena podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu
25(a), kromě toho, že 4—(4-methylpiperazin-l-yl)benzen-l,2-diamin (Harapanhalli et al., J.
Med. Chem., 39, 4804-09, 1996) byl použit namísto 3,4-diaminopyridinu v kroku (iv). *H NMR (300 MHz, DMSO-Λ) δ 13,51 (s, 0,33H), 13,38 (s, 0,67H), 12,66 (s, 0,33H), 12,59 (s, 0,67H), 9,58 (s, IH), 8,42 (d, 0,33H, J = 8,4 Hz), 8,41 (d, 0,67H, J = 8,4 Hz), 7,59 (s, IH), 7,55 (d, 0,67H, J = 8,7 Hz), 7,31-7,37 (m, 1,33H), 7,20 (přibližně d, 1,33H, J = 8,4 Hz), 6,92-7,01 (m, 1,67H),
6,55 (d, IH, J = 1,5 Hz), 6,48 (dd, IH, J = 8,4,2,1 Hz), 3,74 (s, 3H), 3,12 (š s, 4H), 2,50 (š s, 4H),
2,22 (s, 3H). MS (ES) [M+H]/z vypočteno 455, změřeno 455, [M-H]/z vypočteno 453, změřeno 453.
Příklad 25(d)
3-[4-(4-methylpÍperazÍn-1 -yl)-1 H-benzimidazol-2-y l]-ó-(2-methoxy^-hydroxyfeny lý-1 Hindazol
-90CZ 301667 B6
Sloučenina z příkladu 25(d) byla připravena podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu
25(a), kromě toho, že 3-(4-methylpíperazin_l-yl)benzen-l,2-diamin (Harapanhalli et al, J.
Med. Chem., 39, 4804-09, 1996), analogický k 4-isomeru, byl použit namísto 3,4-diaminopyridinu v kroku (iv). 'H NMR (300 MHZ, DMSO-dJ δ 13,41 (š s, IH), 12,79 (š s, IH), 9,60 (š s, IH), 8,37 (d, IH, J = 8,4 Hz), 7,60 (s, IH), 7,36 (dd, IH, J = 8,4,1,2 Hz), 7,22 (d, IH, J = 8,4 Hz), 7,03-7,07 (m, 2H), 6,46-6,56 (m, 3H), 3,75 (s, 3H), 3,62 (š s, 4H), 2,62 (š s, 4H), 2,28 (s, 3H). MS (ES) [M+H]/z vypočteno 455, změřeno 455, [M-HJ/z vypočteno 453, změřeno 453.
io Příklad 25(e)
3-imidazol-2-yl-6-(2-methoxy-4-hydroxyfenyl)-l H-indazol
Sloučenina z příkladu 25(e) byla připravena podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 25(a), kromě toho, že 6-[5-methoxy-2-methyl-4—(2-trimethylsilanylethoxymethoxy)-fenyl]-l-(2-trimethylsilanylethoxymethyl)-3-imidazol-2-yl-l H-indazol byl použit namísto 6-[5-methoxy-2-methyM-(2-trimethylsilanylethoxymethoxy)fenyl]-l-(2-trimethyl$ilanylethoxymethyl)-3-[3-(2-trimethylsilanylethoxymethyl)-3H-imidazo[4,5-c]pyridin-2-yl]ΙΗ-indazolu. 'H NMR (300 MHz, DMSO-d.) δ 13,10 (s, IH), 12,59 (s, IH), 9,56 (s, IH), 8,27 (d, 1H, J = 8,4 Hz), 7,53 (s, 1H), 7,25 (dd, 1H, J = 8,4, 1,2 Hz), 7,13-7,20 (m, 3H), 6,54 (d, 1H,
J= 2,1 Hz), 6,47 (dd, IH, J = 8,4, 2,1 Hz), 3,73 (s, 3H). MS (ES) [M+H]/z vypočteno 307, změřeno 307.
0,4 ml (3,5 mmol) 40% (hmotnostních) glyoxalu v H2O bylo přidáno po kapkách k roztoku 420 mg (0,8 mmol) 6-[2-methoxy-4-(2-trimethylsilanylethoxymethoxy)fenyl]-l-(2-trimethylsilanylethoxymethyl)-lH-Índazol-3-karbaldehydu, z příkladu 25(a) krok (iii) a 0,6 ml 28% vodného čpavku v 8 ml THF/8 ml MeOH a roztok byl míchán při teplotě místnosti po dobu 16 hodin. Reakce byla koncentrována ve vakuu a rozpuštěna v 50 ml CHC13. Organické vrstvy byly promyty H2O a solankou, po 25 ml, usušeny (Na2SO4) a koncentrovány ve vakuu. Purifikace chromatografií na silikagelu (40% směs EtOAc a hexanu) poskytla 120 mg (27 %) 6-[5-methoxy-2methyM-(2-trimethylsilanylethoxymethoxy)fenyl]-l-(2-trÍmethylsilanylethoxymethyl)-3-Ímidazol-2-yl-lH-indazolu, jako čirého oleje. ’H NMR (300 MHz, CDC13) δ 10,03 (s, IH), 8,48 (d, IH, J = 8,4 Hz), 7,65 (s, IH), 7,46 (dd, IH, J = 8,4, 1,5 Hz), 7,29-7,48 (m, 2H), 7,13 (d, IH, J = 1,5 Hz), 6,73-6,78 (m, 2H), 5,73 (s, 2H), 5,28 (s, 2H), 3,78-3,86 (m, 5H), 3,60 (t, 2H, J = 8,4 Hz), 0,88-1,03 (m, 4H), 0,03 (s, 9H), -0,05 (s, 9H).
-91 CZ 301667 B6
Příklad 25(0
3-[4-(2-hydroxyethyIsulfanyl)-lH-benzimidazol-2-yl]-6-(2-methoxy^-hydroxyfenyl)-lH5 índazol
Sloučenina z příkladu 25(0 byla připravena podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu
25(a) kromě toho, že 2-(2,3-diaminofenylsulfanyl)ethanol byl použit namísto 3,4-diaminopyridinu v kroku (iv). *H NMR (300 MHz, DMSO-dó) δ 13,51 (s, IH), 13,02 (s, IH), 9,59 io (s, IH), 8,45 (d, IH, J = 8,4 Hz), 7,61 (s, IH), 7,32-7,40 (m, 2H), 7,11-7,23 (m, 3H), 6,55 (d,
IH, J = 2,4 Hz), 6,48 (dd, IH, J = 8,1, 2,4 Hz), 4,96 (š s, IH), 3,75 (s, 3H), 3,65 (š s, 2H), 3,33 (t,
2H, J = 6,9 Hz). MS (ES) [m+Na]/z vypočteno 455, změřeno 455, [M-H]/z vypočteno 431, změřeno 431.
Výchozí látka byla připravena takto:
1^,10% WC lyXk.OMF Η0Λ
2-(3-amino-2-nitrofenylsulfanyl)ethanol. 1,12 g (6,5 mmol) 3-chlor-2-nitroanilinu, 0,60 ml (8,6 mmol) 2-merkaptoethanolu a 0,99 g (7,1 mmol) uhličitanu draselného bylo vloženo do 15 ml suchého DMF a mícháno ve 130 °C po dobu 4 hodin. Roztok byl ponechán vychladnout a byl koncentrován ve vakuu. Purifikace chromatografii na silikagelu (70% směs EtOAc a hexanu) poskytla 1,29 g (93 %) 2-(3-amino-2-nitrofenylsulfanyl)-ethanolu jako jasně červené pevné látky. ‘H NMR (300 MHz, DMSO-4,) δ 7,20 (t, IH, J = 8,1 Hz), 6,80 (s, 2H), 6,73 (dd, IH, J = 8,4, 0,9 Hz), 6,63 (dd, IH, J = 7,8, 1,2 Hz), 4,92 (t, IH, J = 6,0 Hz), 3,58 (q, 2H, J = 6,0 Hz), 2,98 (t, 2H, J = 6,0 Hz).
2-(2,3-diaminofenylsulfanyl)ethanol. 1,02 g (4,8 mmol) 2-(3-amino-2-n itrofeny 1 sulfanyl)ethanolu bylo redukováno hydrogenací s použitím 310.26 kPa (45 psi) H2 se 180 mg 10% Pd/C ve 25 ml EtOAc po dobu 6 hodin. Po filtraci přes celit bylo rozpouštědlo odstraněno ve vakuu. Purifikace chromatografii na silikagelu (EtOAc) poskytla 762 mg (87 %) 242,3-diaminofenyl30 sulfanyl)ethanolu jako světle žluté pevné látky. *H NMR (300 MHz, CDCIj) δ 6,98 (dd, IH, J = 7,5, 1,5 Hz), 6,60-6,72 (m, 2H), 3,65 (t, 2H, J = 5,7 Hz), 3,55 (š s, 5H), 2,91 (t, 2H, J = 5,7 Hz).
Příklad 25(g)
345-methylkarbamoyl-lH-benzimidazol-2-yl)-6_(2-methoxy-4-hydroxyfenyl)-lH-indazol
-92CZ 301667 B6
Sloučenina z příkladu 25(g) byla připravena podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 25(a), kromě toho, že 3,4-diamino-N-methylbenzamid (Kumar, et. Al. J. Med. Chem., 27, 1083-89 1984) byl použit namísto 3,4-diaminopyridinu v krok,u (iv). ’H NMR (300 MHz,
DMSO-d$) δ 13,59 (s, 0,5H), 13,55 (s, 0,5H), 13,21 (s, 0,5H), 13,14 (s, 0,5H), 9,60 (s, IH), 8,389,46 (m, 2H), 8,26 (s, 0,5H), 8,03 (s, 0,5H), 7,71-7,79 (m, 1,5H), 7,63 (s, IH), 7,52 (d, 0,5H, J = 8,4 Hz), 7,35-7,40 (m, IH), 7,21 (d, IH, J = 2,1 Hz), 6,55 (d, IH, J = 2,4 Hz), 6,49 (dd, IH, J = 8,4, 2,4 Hz), 3,75 (s, 3H), 2,82 (d, 1,5H, J = 0,5 Hz), 2,81 (d, l,5H, J = 1,5 Hz). MS (ES) [M+H]/z vypočteno 414, změřeno 414, [M-H]/z vypočteno 412, změřeno 412.
io
Příklad 25(h)
3-(5-d imethy lam ino-1 H-benzim idazol-2-yl)-6“(2-m ethoxy—Φ-hydroxy feny 1)-1 H-indazol
Sloučenina z příkladu 25(h) byla připravena podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 25(a), kromě toho, že 3,4-d tam ino-N,N-di methy lani lin (Cazaux, et. AL, Can. J. Chem., 71, 1236-46 1993) byl použit namísto 3,4-diaminopyridinu v kroku (iv). *H NMR (300 MHz, DMSO-40 δ 13,36 (s, IH), 12,51 (š s, 1, 9,58 (s, IH), 8,42 (d, IH, J = 8,4 Hz), 7,59 (s, IH), 7,49 (š s, IH), 7,33 (dd, IH, J - 8,4, 1,2 Hz), 7,20 (d, IH, J = 8,1 Hz), 6,87 (br d, 2H, J = 8,1 Hz), 6,55 (d, IH, J = 2,1 Hz), 6,48 (dd, IH, J = 8,1, 2,1 Hz), 3,73 (s, 3H), 2,92 (s, 6H). MS (ES) [M+H]/z vypočteno 400, změřeno 400, [M-H]/z vypočteno 398, změřeno 398.
Příklad 25(i)
3-(5-aminosulfonyl-lH-benzimidazol-2-yl)-6-(2-methoxy-4-hydroxyfenyl)-l H-indazol
Sloučenina z příkladu 25(i) byla připravena podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 30 25(a), kromě toho, že 3,4-diaminobenzensulfonamid byl použit namísto 3,4-diamíno-pyridinu v kroku (iv). 'H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 13,67 (s, 0,5H), 13,64 (s, 0,5H), 13,39 (s, 0,5H),
13,35 (s, 0,5H), 9,60 (s, IH), 8,43 (d, IH, J = 8,1 Hz), 8,18 (d, 0,5H, J = 1,5 Hz), 7,99 (d, 0,5H, J = 1,5 Hz), 7,86 (d, 0,5H, J = 8,4 Hz), 7,62-7,72 (m, 2,5 Hz), 7,29 (d, IH, J = 8,4 Hz), 7,20-7,28
-93CZ 301667 B6 (m, 3H), 6,55 (d, IH, J = 2,1 Hz), 6,49 (dd, IH, J = 8,4, 2,1 Hz), 3,75 (s, 3H). MS (ES) [M+H]/z vypočteno 436, změřeno 436, [M-H]/z vypočteno 434, změřeno 434.
Příklad 25(j)
344-methy Ikarbamoy I-1 H-benzímidazol-2-y l)-6-(2-methoxy-4-hydroxy feny 1)-1 H-indazol
Sloučenina z příkladu 25(í) byla připravena podobným způsobem, jak bylo popsáno 10 v příkladu 25(a), 2,3-diamino-N-methylbenzamid byl použit namísto 3,4-diaminopyridinu v kroku (iv). 'H NMR (300 MHz, DMSO-d«) δ 13,71 (s, IH), 13,46 (s, IH), 9,85 (br d, IH,
J = 4,8 Hz), 9,61 (s, IH), 8,38 (d, IH, J = 8,4 Hz), 7,89 (dd, IH, J = 7,5, 1,2 Hz), 7,66-7,72 (tn, 2H), 7,47 (dd, IH, J = 8,4, 1,2 Hz), 7,36 (t, IH, J = 7,8 Hz), 7,23 (d, IH, J = 8,1 Hz), 6,56 (d, IH, J = 2,4 Hz), 6,50 (dd, IH, J = 8,4,2,4 Hz), 3,76 (s, 3H), 3,10 (d, 3H, J = 1,8 Hz). MS (ES) [m+H]/z vypočteno 414, změřeno 414, [M-H]/z vypočteno 412, změřeno 412.
2,3-diamíno-N-methylbenzamíd byl připraven takto:
2-amino-N-methyl-3-nitro-benzamid. 1,8 g (9,9 mmol) 2-amino-3-nitrobenzoové kyseliny a 1,33 g (19,8 mmol) methylaminu hydrochloridu bylo mícháno ve 30 ml suchého CH2Cl2/5 ml DMF při teplotě 0 °C. Bylo přidáno 2,83 g (14,8 mmol) EDC a 4,92 ml (27,7 mmol) DIEA a roztok byl míchán 3 hodiny při zahřívání na teplotu místnosti. Reakce byla koncentrována ve vakuu a purifikována chromatografii na silikagelu (8% směs MeOH a CHC13) za vzniku 1,42 g (74 %) 2-amino-N-methyl-3-nitrobenzamidu jako žluté pevné látky. ’H NMR (300 MHz,
DMSO-dó) δ 8,58 (š s, 1F, 8,23 (š s, 2H), 8,15 (dd, IH, J = 8,1, 1,8 Hz), 7,82 (dd, IH, J = 8,1,
1,8 Hz), 6,68 (t, IH, J = 8,1 Hz), 2,76 (d, 3H, J = 4,5 Hz).
2,3-diamino-N-methylbenzamÍd. 1,4 g (7,2 mmol) 2-ammo-N-methyl-3-nitrobenzamidu bylo redukováno hydrogenaci s použitím 344.74 kPa (50 psi) H2 s 250 mg 10% Pd-C ve 25 ml EtOAc po dobu 5 hodin. Po filtraci přes celit bylo rozpouštědlo odstraněno ve vakuu. Puriflkace chromatografii na silikagelu (10% směs MeOH a CHCI3) poskytla 1,08 mg (91 %) 2,3-diamÍno-Nmethylbenzamid jako světle žluté pevné látky. lH NMR (300 MHz, CDC13) 6 6,87 (dd, IH, J = 7,8, 1,5 Hz), 6,76 (dd, IH, J = 7,8, 1,5 Hz), 6,59 (t, IH, J = 7,8 Hz), 6,14 (S s, IH), 4,28 (š s, 4H), 2,95 (d, 3H, J = 5,1 Hz).
Příklad 26
6~(4-hydroxy-3-methoxyfenyl)-3-[E-2-(4-glycylaminofenyl)ethenyl]-lH-indazol
-94CZ 301667 B6
Sloučenina z příkladu 26 byla připravena z výchozí látky popsané níže podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu l(a): *H NMR (300 MHz, CDCh) δ 8,29 (d, IH), 7,80 (m, 5H), 7,58 (m, 3H), 7,38 (s, H), 7,27 (d, 1H), 7,01 (d, IH), 4,00 (s, 3H), 3,42 (s, 2H), LCMS (100% oblast)
Rt = 3,44 minuty (poz) [M+H]/z vypočteno 415,1* změřeno 415,2.
Výchozí látka byla připravena takto:
(i)
3-jod-ó-{3-methoxy^4-methoxymethoxyfenyl)-l-(2-(trimethylsilanyl)etlioxymethyl]-lHindazol byl připraven ze sloučeniny připravené v příkladu l(a), krok (v), podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 10, krok (ii): Rf sm 0,11, p 0,43 (směs ethylacetátu a hexanu 3:7), 'HNMR (300 MHz, CDCh) δ 7,71 (s, IH), 7,55 (m, 2H), 7,33 (m, IH), 7,20 (m, 2H), 5,82 (s, 2H), 5,33 (s, 2H), 4,02 (s, 3H), 3,64 (t, 2H), 3,59 (s, 3H), 0,95 (t, 2H), -03 (s, 9H).
(ii)
3-styry l-6-(3-methoxy-4-methoxyinethoxyfenyl)-1 -[2-(trimethylsilanyI)ethoxymethy tj-1H20 indazol byl připraven podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 11, krok (iii):
Rf sm 0,41, p 0,35 (smčs ethylacetátu a hexanu 2:8), *H NMR (300 MHz, CDCh) δ 8,12 (d, IH), 7,73 (s, IH), 7,62 (m, 2H), 7,51 (m, 2 hodin), 7,46 (m, 2H), 7,38 (m, IH), 7,30 (m, 4H), 5,85 (s, 2H), 5,38 (s, 2H), 4,03 (s, 3H), 3,70 (t, 2H), 3,62 (s, 3H), 0,98 (t, 2H), -0,02 (s, 9H).
(iii)
3-karboxaIdehyd-6-(3-methoxy-4-methoxymethoxyfenyl>-l“[2-(trimethylsilanyl)ethoxymethylj-1 H-indazol byl připraven podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 33(a), krok (i): 'H NMR (300 MHz, CDCh) δ 10,33 ($, IH), 8,34 (d, IH), 7,82 (s, IH), 7,65 (d, IH), 7,25 (m,3H), 5,90 (s, 2H), 5,36 (s, 2H), 4,02 (s, 3H), 3,67 (t, 2H), 3,51 (s, 3H), 0,98 (t, 2H),
-0,02 (s, 9H).
-95CZ 301667 Bó (iv)
3-(4-nitrostyryl)-6-(3“methoxy-4-methoxymethoxyfenyl)-l-[2-(trimethylsilanyl)ethoxymethy 1]—1 H-indazol byl připraven podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 33(a), krok (ii), kromě toho, že 4-nitrobenzyltrifenylfosfoniumbromid a lithiumhexamethyldisilazid byly použity namísto 2-pikolyltrifenylfosfoniumchloridu/hydridu draselného: LCMS (100% oblast) Rt = 6,89 minuty (poz) [M+H]/z vypočteno 562,4, změřeno 562,4.
(v)
3-( 4-n itro sty ryl )-6-(3-methoxy-4-methoxy methoxy feny lý-1 H-indazol byl připraven podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 11: FTIR (tenký film) 3335, 3178, 2954, 1592, 1512, 1338, 1257, 1136, 1257, 1136, 987 cm1, 'HNMR (300 MHz, CDC13) δ 8,22 (d, 2H, J =
8,8 Hz), 8,02 (d, IH, J = 8,5 Hz), 7,70 (d, 2H, J = 8,8 Hz), 7,58 (m, 3H), 7,45 (dd, IH, J = 1,3,
8,5 Hz), 7,20 (m, 4H), 7,26 (s, 2H), 3,95 (s, 3H), 3,53 (s, 3H), LCMS (100% oblast)
Rt ~ 5,13 minuty (poz) [M+H]/z vypočteno 432,1, změřeno 432,1.
(vi)
3 -ý4-aminostyry 1)-6-( 3-methoxy -4-methoxy methoxy feny 1)-1 H-indazol byl připraven podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 11, krok (iv): Rf sm 0,39, p 0,26 (směs ethylacetátu a hexanu 6:4), FTIR (tenký film) 3366, 3210, 2954, 1608, 1517, 1465, 1412, 1259, 1157, 1077, 989, 912 cm'1, 'HNMR (300 MHz,CDCl,)δ 8,11 (d, IH), 7,63 (s, IH), 7,50-7,15 (m, 8H), 6,71 (d, 2H), 5,36 (s, 2H), 3,97 (s, 3H), 3,61 (s, 3H), LCMS (100% oblast) Rt = 4,40 minuty (poz) [M+H]/z vypočteno 402,2, změřeno 402,2.
(vii)
96CZ 301667 B6 mg (0,224 mmol) 3-(4-aminostyryl)-6-(3-methoxy-4-methoxymethoxyfenyl)-l H-indazolu bylo rozpuštěno ve 2 ml dichlormethanu a bylo podrobeno působení 196 mg (1,12 mmol, 5 ekv.)
Boc-glycinu, 82 mg (3 ekv.) DMAP a 426 mg (5 ekv.) HATU. Směs byla ponechána za míchání po dobu 30 minut. Směs byla rozdělena mezi ethylacetát a vodu. Organická látka byla koncentro5 vána, nabrána do 5 ml methanolu a byla podrobena působení 100 mg uhličitanu draselného. Směs byla zahřívána na 50 °C po dobu 3 dnů. Výsledná směs byla opět rozdělena mezi ethylacetát a vodu. Organická látka byla koncentrována a purifikována na silikagelu, 109 mg (66 %): Rfsm0,32, p 0,46 (směs ethylacetátu a hexanu 6:4), ’H NMR (300 MHz, CDC13) δ 8,18 (š s, IH), 8,03 (d, IH, J = 8,1 Hz), 7,56 (m, 5H), 7,40 (m, 3H), 7,20 (m, 3H), 5,29 (s, 2H), 5,20 io (š s, IH), 3,98 (s, 3H), 3,96 (d, 2H), 3,54 (s, 3H), 1,48 (s, 9H).
Příklad 27(a)
6 -fenyl-3-E-styryl-l H-indazol
345 mg (0,81 mmol) 6-fenyl-3-styryl-l-[2-(trimethyl-silanyl)ethoxymethyl]-l H-indazolu bylo podrobeno působení 16 ml (16 mmol) roztok TBAF, ÍM roztok v THF, a 0,53 ml (8,1 mmol) ethylendiaminu a zahříváno v 70 °C po dobu 2 hodin. Roztok byl pak nalit do 200 ml solanky a extrahován 3 x 30 ml ethylacetátu. Organická vrstva byla usušena nad MgSO4 a koncentrována při sníženém tlaku. Purifikace chromatografíi na silikagelu poskytla 80 mg (34%) 6-fenyl-3-E-styry 1-1 H-indazolu jako bílé pevné látky: 'H NMR (300 MHz, CDC13) δ 8,10 (d, IH, J = 8,5 Hz), HRMS (FAB) [M+H]/z vypočteno 297,1392, změřeno 297,1393. Anal. výpočet: C (85,10), H (5,44), N (9,45). Změřeno: C (85,10), H (5,46), N (9,43).
Výchozí látka byla připravena takto:
Roztok 476 mg (1,0 mmol) 6—jod—3—styry 1— 1 -[2-(trimethylsilanyl)ethoxymethyl]-l H-indazolu, z příkladu 14 krok (i), ve 3 ml dioxanu (odplyněného sonikací a probubláváním argonem), 23 mg (0,05 mmol) Pd(PPh3)4, 302 mg (2,5 mmol) fenylboronové kyseliny a 1,25 ml 2M vodného roztoku Na2CO3 (odplyněného jak uvedeno výše) byl zahříván v 90 °C po dobu 2 hodin. Roztok pak byl naředěn 100 ml ethylacetátu a promyt 2 x 20 ml solanky. Organická vrstva byla usušena nad MgSO4 a koncentrována při sníženém tlaku. Purifikace chromatografíi na silikagelu poskytla 345 mg (81 %) 6-feny l-3-styryl-l-[2-(trimethy lsi lany l)ethoxy methy 1]-1 H-indazolu jako hnědého oleje. 'H NMR (300 MHZ, CDC13) δ 8,09 (dd, IH, J = 8,5, 0,7 Hz), 7,75 (s, IH), 7,70 (d, IH, J = 7,0 Hz), 7,64-7,58 (m, 2H), 7,56-7,51 (m, 2H), 7,50-7,45 (m, 2H), 7,45-7,36 (m, 4H), 7,34-7,27 (m, IH), 5,80 (s, 2H), 3,73 (t, 2H, J = 8,3 Hz), 1,12 (t, 2H, J = 8,3 Hz).
-97CZ 301667 B6
Příklad 27(b)
6-(3-niethoxyfeny I)—3—E—styryl— I H-indazol
Sloučenina z příkladu 27(b) byla připravena podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 27(a) kromě toho, že 3-methoxy fenylboronová kyselina byla použita namísto fenylboronové kyseliny v kroku (i). 'H NMR (300 MHz, MeOH-ndJ δ 8,16 (d, IH, J = 8,4 Hz), 7,70 (s, IH), 7,67-7,61 (m, 2H), 7,60-7,43 (m, 3H), 7,43-7,33 (m, 3H), 7,32-7,21 (m, 3H), 6,99-6,92 (m, IH), 3,88 (s, 3H). HRMS (FAB) [M+Na]/z vypočteno 349,1317, změřeno 349,1342. Analyzováio no s 0,1 H2O, vypočteno: C (80,50), H (5,59), N (8,55). Změřeno: C (80,44.), H (5,49), N (8,55).
Příklad 27(c)
6-(4 methoxyfenyl)-3-E-styry 1-1 H-indazol
Sloučenina z příkladu 27(b) byla připravena podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 27(a) kromě toho, že 4-methoxyfenylboronová kyselina byla použita namísto fenylboronové kyseliny v kroku (i). 'H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 13,20 (s, IH), 8,23 (d, IH, J = 8,4 Hz),
7,76-7,64 (m, 5H), 7,54 (s, IH), 7,50-7,37 (m, 3H), 7,33-7,25 (m, IH), 7,07 (d, 2H, J = 8,8 Hz),
3,82 (s, 3H). HRMS (FAB) [M+H]/z vypočteno 327,1497, změřeno 327,1502. Anal. výpočet: C (80,96), H (5,56), N (8,58). Změřeno: C (80,71), H (5,42), N (8,47).
Příklad 27(d)
6-naft-1 y 1-3—E—sty ry 1-1 H-indazol
Sloučenina z příkladu 27(d) byla připravena podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 30 27(a) kromě toho, že 1-naftalenboronová kyselina byla použita namísto fenylboronové kyseliny v kroku (i). *H NMR (300 MHz, DMSO-dJ δ 10,11 (s, IH), 8,45 (d, IH, J = 8,41), 7,97-7,87 (m, 3H), 7,66-7,37 (m, 13H), 7,35-7,28 (m, IH). HRMS (FAB) [M+Na]/z vypočteno 369,1368, změřeno 369,1359. Anal. výpočet: C (86,68), H (5,32), N (8,19). Změřeno: C (86,52), H (5,32), N (8,19).
-98CZ 301667 B6
Příklad 27(e)
6—pyridin—3—y 1—3—E—styryl— 1 H-indazol
Sloučenina z příkladu 27(e) byla připravena podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 27(a) kromě toho, že 3-pyridinboronová kyselina byla použita namísto fenylboronové kyseliny v kroku (i). 'H NMR (300 MHz, MeOH-d,) δ 8,97 (s, IH), 8,63 (d, IH, J = 4,8 Hz), 8,30 (d, IH, H = 8,5 Hz), 8,27 (d, IH, J = 8,1 Hz), 7,86 (s, IH), 7,72 (d, 2H, J = 7,5 Hz), 7,69-7,56 (m, 4H), 754-7,42 (m, 2H), 7,40-7,32 (m, IH). HRMS (FAB) [M+H]/z vypočteno 298,1344, změřeno io 298,1356. Analyzováno s 0,25 H2O, vypočteno: C (79,58), H (5,18), N (13,92). Změřeno: C (79,53), H (5,16), N (13,80).
Příklad 27(f)
6-pyridin-4-y 1-3-E-styryl-1 H-indazol
Sloučenina z příkladu 27(f) byla připravena podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 27(a) kromě toho, že 4-pyridinboronová kyselina byla použita namísto fenylboronové kyseliny v kroku (i). ‘H NMR (300 MHz, MeOH-d„) δ 8,69 (š s, 2H), 8,30 (d, 1H, J = 8,5 Hz), 7,96 (s, 1H), 7,87 (d, 2H, H = 5,6 Hz), 7,75-7,68 (m, 3H), 7,68-7,50 (tn, 2H), 7,50-7,42 (m, 2H), 7,40-7,31 (m, IH). HRMS (FAB) [M+H]/z vypočteno 298,1344, změřeno 298,1357. Analyzováno s 0,3 H2O, vypočteno: C (79,34), H (5,19), N (13,88). Změřeno: C (79,14), H (5,08), N (13,84).
Příklad 27(g) ó-índol-4-y I—3—E—styryl— 1 H-indazol
Sloučenina z příkladu 27(g) byla připravena podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 27(a) kromě toho, že 4-indolboronová kyselina byla použita namísto fenylboronové kyseliny v kroku (i). 'H NMR (300 MHz, MeOH-d,) δ 8,25 (d, IH, J = 8,5 Hz), 7,85 (s, IH, 7,75-7,67 (m, 3H), 7,67-7,52 (m, 2H), 7,52-7,42 (m, 3H), 7,39-7,22 (m, 4H), 6,72 (d, IH, J = 3,2 Hz). HRMS (FAB) [M+H]/z vypočteno 336,1501, změřeno 336,1506. Analyzováno s 0,3 H2O, vypočteno: C (78,97), H (5,36), N (12,01). Změřeno: C (78,95), H (5,20), N (12,03).
-99CZ 301667 B6
Příklad 27(h)
6-[3-ethoxy—4-hydroxy feny I j-3-E-styry 1-1 H-indazol
Sloučenina z příkladu 27(h) byla připravena podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 27(a) kromě toho, že 3-ethoxy—4-(2“trimethylsilanylethoxymethoxy)benzenboronová kyselina byla použita namísto fenylboronové kyseliny v kroku (i). 'H NMR (300 MHz, CDCh) 5 8,10 (d, 1H, J = 8,7 Hz), 7,74 (s, 1H), 7,74-7,16 (m, 1 OH), 7,07 (d, 1H, J = 8,15 Hz), 4,27 (q, 2H, J = 14,0 Hz), 1,54 (t, 3H, J = 14,0 Hz). HRMS (FAB) [M+H]/z vypočteno 357,1603, změřeno 357,1611. io Analyzováno s 0,2 H2O, vypočteno: C (76,73), H (5,71), N (7,78). Změřeno: C (76,72), H (5,91),
N (7,63).
Výchozí látka byla připravena takto:
(i)
ÓH
4-brom-2-ethoxy-fenoI (Smith et al., Soc. Pl, 1877-78, 1992) byl konvertován na 3-ethoxy-4(2—tri methyl si lany lethoxymethoxy)benzenboronovou kyselinu podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 24(a) kroky (vi)-(vii). 'H NMR (300 MHz,(CDC13) δ 7,82 (d, IH, J = 8,0
Hz), 7,72 (s, IH), 7,31 (d, 1H,J = 8,1 Hz), 5,37 (s, 2H), 4,29 (q, 2H, J = 14,0 Hz), 3,87 (t, 2H, J =
16,8 Hz), 1,54 (t, 2H, J = 14,0 Hz), 0,99 (t, 2H, J = 16,8 Hz), 0,03 (s, 9H).
Příklad 27(i)
6-[3-(2-hydroxyethoxy)-4-hydroxyfeny 1 ]—3—E—sty ry 1-1 H-indazol
Sloučenina z příkladu 27(i) byla připravena podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 27(a) kromě toho, že 3-[2-(trimethylsilanylethoxymethoxy)ethoxy)-4-(2-trimethyl30 silanylethoxymethoxy)benzenboronová kyselina, připravená z 2-(2-hydroxyethoxy)fenolu (Yamaguchi et al., Bull. Chem. Soc. Jpn., 61, 2047-54, 1988) podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 24(c), kroky (i)—(iii), byla použita namísto fenylboronové kyseliny v kroku (i). 'H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 8,17 (d, 111, J = 8,7 Hz), 7,73-7,17 (m, 1 IH), 6,92 (d, IH, J = 8,2 Hz), 4,13 (t, 2H, J = 9,7 Hz), 3,8 (t, 2H, J = 9,7 Hz). HRMS (FAB) [M+H]Zz vypočteno
373,1552, změřeno 373,1563. Analyzováno s 0,05 trifluoroctovou kyselinou, vypočteno:
C (73,37), H (5,35), N (7,41). Změřeno: C (73,11), H (5,33), N (7,39).
- 100CZ 301667 B6
Příklad 27<j)
6-(3,4-dimethoxyfenyl)-3-E-styry l-l H-indazol
Sloučenina z příkladu 27(j) byla připravena podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 27(a) kromě toho, že 3,4-dimethoxyfenylboronová kyselina byla použita namísto fenylboronové kyseliny v kroku (i). *H NMR (300 MHz, DMSO-dé) δ 8,01 (d, IH, J = 8,1 Hz), 7,51-7,05 (m, 11H), 6,86 (d, IH, J = 8,0 Hz), 3,58 (s, 3H), 3,65 (s, 3H). HRMS (FAB) [M+H]/z vypočteno 357,1598, změřeno 357,1508. Analyzováno s 0,2 H2O, vypočteno: C (76,73), H (5,71), N (7,78).
io Změřeno: C (76,45), H (5,70), N (7, 68).
Příklad 27(k)
6-(2-methoxypyridin-5-y l)-3-E-styryl-l H-indazol
6-(2-inethoxypyridin“5-yl}-3“((E)styryI)-l-(2-trimethylsilanylethoxymethyl)-l H-indazol byl konvertován na 6-(2-methoxypyridin-5-yl)“3-E-styryl-l H-indazol podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 27(a). Ή NMR (300 MHz, CDC13) δ 8,53 (d, IH, J - 2,1 Hz), 8,15 (d, IH, J = 9,2 Hz), 7,97 (dd, IH, J = 2,6, 8,6 Hz), 7,79 (s, IH), 7,74-7,34 (m, 8H), 6,94 (d, IH,
J = 8,6 Hz). HRMS (FAB) [M+H]/z vypočteno 328,1450, změřeno 328,1462. Anal. výpočet: C (77,04), H (5,23), N (12,83). Změřeno: C (77,00), H (5,28), N (12,65).
Výchozí látka byla připravena takto:
(0
Roztok 2,00 g (6,10 mmol) 5-brom-2-methoxypyridinu, 1,15 g (6,10 mmol) hexamethyldicínu a 0,28 g (0,24 mmol) Pd(PPh3)4 v 10 ml odplyněného dioxanu byl zahříván k varu pod zpětným chladičem po dobu 16 hodin. 2,90 g (6,10 mmol) 6-jod-3-((E)styryl)-l-(2-trimethytsilanvlethoxymethyl)-lH-indazolu bylo přidáno k výše uvedené směsí, následováno 0,35 g (0,31 mmol) Pd(PPh3)4. Reakční směs byla zahřívána k varu pod zpětným chladičem po dobu 16 hodin. Směs pak byla naředěna 150 ml ethylacetátu a promyta 30 ml solanky. Organické vrstvy byly usušeny nad MgSO4, a pak koncentrovány při sníženém tlaku. Purifikace chromato- 101 CZ 301667 B6 grafíí na silikagelu poskytla 1,12 g (40 %) 6-{2-methoxypyridin-5-yl)-3-((E)styryl)-l-(2-trimethylsilanylethoxymethyl)-lH-indazolu jako žluté pevné látky. *H NMR (300 MHz, CDCh) δ 8,51 (d, IH, J = 2,5 Hz), 8,50 (d, IH, J = 9,1 Hz), 7,93 (dd, IH, J = 2,5, 8,6 Hz), 7,69 (s, IH),
7,69-7,28 (m, 8H), 6,89 (d, 1H, J = 8,6 Hz), 5,83 (s, 2H), 4,03 (s, 3H), 3,64 (t, 2H, J = 8,3 Hz),
0,93 (t, 2H, J = 8,3 Hz), -0,03 (s, 9H).
Příklad 28(a) o 6-(3-hydroxy feny l)—3—E—sty ry 1-1 H-indazol
Roztok 100 mg (,3 mmol) 6-/3-methoxyfenyl)-3-E-styryl-lH-indazolu, z příkladu 27(b), byl ochlazen na-78 °C a podroben působení 1,8 ml (1,8 mmol) BBr3 (1M roztok v CH2C12). Výsledný roztok byl udržován v -78 °C po dobu 15 minut, pak byl zahřát na 0 °C a udržován 3 hodiny. Pak bylo přidáno 10 ml roztoku saturovaného vodného hydrouhličitanu sodného, následováno 50 ml ethylacetátu. Organická vrstva byla promyta 20 ml solanky, a pak koncentrována při sníženém tlaku. Purifikace chromatografií na silikagelu poskytla 55 mg (59 %) 6-(3-hydroxyfenyl)3-E-styryl-lH-indazolu jako bílé pevné látky. 'H NMR (300 MHz, MeOH-^) δ 8,16 (d, IH, J = 8,5 Hz), 7,71-7,62 (m, 3H), 7,61-7,44 (m, 3H), 7,43-7,35 (m, 2H), 7,33-7,25 (m, 2H), 7,207,10 (m, 2H), 6,85-6,79 (m, IH), δ 13,14 (s, IH), 9,60 (s, IH), 8,20 (d, IH, J = 8,4 Hz), 7,73 (d, 2H, J = 7,3), 7,64-7,52 (m, 5H), 7,47-7,37 (m, 3H), 7,33-7,25 (m, IH), 6,89 (d, 2H, J = 8,6 Hz).
Příklad 28(b) ó-(4-hydroxyfenyl)-3-E-styryl-l H-indazol
6-(4-methoxyfeny|)-3-E-styryl-l H-indazol, z příkladu 27(c), byl konvertován na 6-(4hydroxyfenyl)-3-E-styryl-l H-indazol podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 28(a).
'H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 13,14 (s, IH), 9,60 (s, IH), 8,20 (d, IH, J = 8,4 Hz), 7,73 (d, 2H, J = 7,3 Hz), 7,64-7,52 (m, 5H), 7,47-7,37 (m, 3H), 7,33-7,25 (m, IH), 6,89 (d, 2H, J = 8,6 Hz). HRMS (FAB) [M+Na]/z vypočteno 313,1341, změřeno 313,1347. Analyzováno s 0,5 H2O, vypočteno: C (78,48), H (5,33), N (8,72). Změřeno: C (78,35), H (5,26), N (8,49).
Příklad 28(c)
6-(2-hydroxypyridin-5-yl)-3-E-styry 1-1 H-indazol
-102CZ 301667 B6
6-{2-methoxypyridin“5-yl)-3-E-styryl-l H-indazol, z příkladu 27(k), byl konvertován na 6-(2-hydroxypyridin-5-yl)-3-E-styryl-lH-índazol podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 28(a). *H NMR (300 MHz, DMSO-d*) δ 8,22 (d, IH, J = 8,4 Hz), 7,96 (dd, IH,
J - 2,6, 9,65 Hz), 7,81(d, IH, J = 2,0 Hz), 7,74-7,30 (m, 9H), 6,50 (d, 2H, J = 9,4 Hz). HRMS (FAB) [M+H]/z vypočteno 314,1293, změřeno 314,1280. Analyzováno s 0,1 trifluoroctovou kyselinou, vypočteno: C (72,69), H (4,86), N (12,59). Změřeno: C (72,77), H(4,81), N (12,65).
io
Příklad 28(d)
6-(3,4-d ihydroxyfenyl)-3-E-styryl-l H-indazol
6-(3,4-dimethoxyfenyl)-3-E-styryl-lH-indazol, z příkladu 27(j), byl konvertován na 6-(3,4dihydroxyfenyl)-3-E-styryl-lH-indazol podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 28(a). Ή NMR (300 MHz, DMSO-d6) 6 9,09 (š s, IH), 9,07 (š s, IH), 8,20 (d, IH, J = 8,5), 7,73 (d, 2H, J = 7,5 Hz), 7,56 (d, 2H, J = 10,1 Hz), 7,53 (s, IH), 7,43-7,29 (m, 4H), 7,11 (s, IH), 7,04 (d, IH, J = 8,2 Hz), 6,86 (d, IH, J = 8,2 Hz). HRMS (FAB) [M+Hj/z vypočteno
329,1290, změřeno 329,1274. Analyzováno s 1,0 H3O, vypočteno: C (66,79), H (4,73), N (7,15).
Změřeno: C (66,54), H (4,56), N (7,36).
Příklad 29(a)
6-pyrid-4-yl-3-E-[2-(2,6-dichIorfenyl)ethenyl]-1 H-indazol
6-pyrid-4-yl-3-E-[2-(2,6-dichlorfenyl)ethenyl]-l-(2-tri-methylsilanylethoxymethyl)-lHindazol byl konvertován na 6-pyrid-4-yl-3-E-[2-(2,6-dichlorfenyl)ethenyl]-I H-indazol podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 27(a). ’H NMR (300 MHz, CDC13) δ 13,55 (s, IH), 8,68 (dd, 2H, J = 4,6, 1,6 Hz), 8,21 (d, IH, J = 8,5 Hz), 7,96 (s, IH), 7,81 (dd, 2H, J = 4,5, 1,6 Hz), 7,66 (dd, IH, JI = 8,5, 1,4 Hz), 7,58 (d, 2H, J = 8,0 Hz), 7,51 (s, 2H), 7,39-7,32 (m, IH). MS (FAB) [M+H]/z vypočteno 366, změřeno 366. Analyzováno s 0,7 H2O, vypočteno: C (63,40), H (3,83), N (11,09). Změřeno: C (63,63), H (3,75), N (10,83).
- 103CZ 301667 B6
Výchozí látka byla připravena takto:
(i) ,8
1,20 g (5 mmol) 2,6-dichlorbenzylbromidu bylo smícháno s 1,66 g (10 mmol) triethylfosfitu a zahříváno v 150 °C po dobu 2 hodin. Výsledná směs pak byla destilována ve 160 °C při sníženém tlaku 1,33 kPa (10 mm Hg), aby se odstranil nadbytek triethylfosforitanu. Bylo získáno 1,46 g (100 %) diethylesteru (2,6-dichlorbenzyl)fosfonové kyseliny jako bezbarvé kapaliny. Ή NMR (300 MHz, CDCl,) δ 7,33-7,28 (rn, 2H), 7,15-7,07 (m, IH), 4,14—4,02 (m, 4H), 3,60 (d, 2H, J = 22,4 Hz), 1,27 (t, 6H, J = 7,0 Hz).
(ii)
Ozon byl probubláván přes roztok 2,13 g (5,0 mmol) 6-pyrid-4-yl-3-E~styryl-l-(2“trimethyl15 si lany lethoxy methy 1)-1 H-indazolu ve 25 ml THF a 25 ml MeOH v -78 °C po dobu 15 minut.
Přes roztok pak byl probubláván argon po dobu 10 minut v -78 ŮC, pak bylo přidáno 1,46 ml (20 mmol) dimethylsulfídu. Roztok byl ponechán ohřát se na teplotu místnosti a udržován po dobu 2 hodin. Roztok byl nalit do 300 ml solanky, a pak extrahován 3 x 100 ml ethylacetátu. Organické vrstvy byly usušeny nad MgSO4, a pak evaporovány při sníženém tlaku. Puriflkace chromatografií na silikagelu poskytla 2,2 g (75 %) 6-pyridin—4-yl-l-(2-trimethylsilanyIethoxymethyl)-lH-indazol-3-karbaldehydu jako bílé pevné látky. lH NMR (300 MHz, CDC13) δ 10,39 (s, IH), 8,75 (d, 2H, J = 1,6 Hz), 8,45 (d, IH, J = 2,8 Hz), 7,91 (s, IH), 7,75-7,66 (m, 3H), 5,90 (s, 2H), 3,63 (t, 2H, J = 2,7 Hz), 0,93 (t, 2H, J = 2,8 Hz), 0,00 (s, 9H), (iii)
Roztok 582 mg (2,0 mmol) diethylesteru (2,6-dichIorbenzyl) fosfinové kyseliny v 15 ml DMF byl ochlazen na 0 °C a podroben působení 160 mg (4,0 mmol) NaH (60% v minerálním oleji). Výsledný roztok byl udržován při teplotě 0 °C po dobu 30 minut, a pak byl podroben působení
353 mg (1,0 mmol) 6-pyridin-4-yl-l-(2-trimethylsilanylethoxymethyl)-lH-indazol-3-karbaldehydu. Výsledný roztok byl ponechán ohřát se na teplotu místnosti po dobu 1 hodiny, a pak byl udržován při teplotě místnosti 2 hodiny. Roztok byl nalit do 250 ml solanky, a pak extrahován 3 x 80 ml ethylacetátu. Organické vrstvy byly usušeny nad MgSO4, a pak koncentrovány pri sníženém tlaku. Puriflkace chromatografií na silikagelu poskytla 330 mg (67 %) 6—pyrid-4—yl—
3-E-[2-(2,6-dichlorfenyl)ethenyl]-l-(2-trimethylsilanyÍethoxymethyl-lH-indazolu jako žlutého oleje. 'H NMR (300 MHz, CDCl,) δ 7,72 (dd, 2H, J = 4,6, 1,5 Hz), 8,16 (d, IH, J = 8,5 Hz),
-104CZ 301667 B6
7,84 (s, IH), 7,62 ($ s, 2H, J = 4,5,1,6 Hz), 7,60 (s, 2H), 7,56 (dd, IH, J = 8,5, 1,5 Hz), 7,39 (d,
IH, J = 8,1 Hz), 7,18-7,12 (m, IH), 3,64 (t, 2H, J = 8,3 Hz), 0,92 (t, 2H,
J = 8,3Hz), 0,00 (s,9H).
Příklad 29(b)
6-pyr id-4-yl-3-E-[2-( 3-methy Ifenyl )ethenyl]-l H-indazol
6-pyridin-4-yl-l-(2-trimethyÍsilanylethoxymethyl)-lH-indazol-3-kaťbaIdehyd byl konvertován na požadovaný produkt podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 29(a). lH NMR (300 MHz, MeOH-Λ) δ 8,88 (d, IH, J = 6,7 Hz), 8,41-8,35 (m, 3H), 8,16 (s, IH), 7,80 (dd, IH, J - 8,6, 1,6 Hz), 7,67-7,48 (m, 4H), 7,35 (t, IH, J = 7,6 Hz), 7,22-7,17 (m, IH), 4,88 (s, 3H). MS (FAB) [M+H]/z vypočteno 312, změřeno 312. Analyzováno s 0,2 H2O, 1,1 trifluoroctovou kyselinou, vypočteno C (63,27), H (4,23), N (9,54). Změřeno: C (63,08), H (4,18), N (9,80).
Příklad 29 (c)
6-pyrid-4-yl-3-E-[2-(4—ch lorfeny l)ethenyl]-l H-indazol
6-pyridin4-yl-l-(2-trimethylsilanylethoxymethyl)-l H-indazol-3-karbaldehyd byl konvertován na požadovaný produkt podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 29(a). 'H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 13,40 (s, IH), 8,67 (dd, 2H, J - 4,6, 1,6 Hz), 8,33 (d, IH, J = 8,5 Hz),
7,92 (s, IH), 7,81 (dd, 2H, J = 4,6, 1,6 Hz), 7,78 (d, 2H, J = 8,5 Hz), 7,67-7,56 (m, 3H), 7,46 (d,2H, J = 8,5 Hz). Analyzováno s 0,15 H2O, vypočteno: C (71,81), H (4,31), N (12,56). Změřeno: C (71,85), H (4,26), N (12,48).
Příklad 29(d)
6-pyrid-4-yl-3-E-[2-(bÍfenyM-yÍ)ethenyl]“l H-indazol
- 105CZ 301667 B6
6-py ridin^t-y l-l-(2-trimethylsi lany lethoxymethy 1)-1 H-indazol-3-karbaldehyd byl konvertován na sloučeninu z příkladu 29(d) podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 29(a).
'H NMR (300 MHz, DMSO-d«) δ 13,40 (s, IH), 8,68 (d, 2H, J = 4,6, 1,5 Hz), 8,35 (d, IH,
J = 8,5 Hz), 7,93 (s, IH), 7,87-7,79 (m, 4H), 7,73 (d, 4H, J = 8,1 Hz), 7,66-7,60 (m, 3H), 7,45 (m, 2H), 7,41-7,34 (m, IH). MS (FAB) [M+H]/z vypočteno 374, změřeno 374. Analyzováno s 0,20 HA vypočteno: C (82,82), H (5,19), N (11,15). Změřeno: C (82,82), H (5,19), N (11,16).
Příklad 29(e) io
6-pyrid-4-yl-3-E-[2-(3-methoxyfenyl)ethenyl]-lH-indazol
6-pyridin^4-yl-l-(2-trimethylsiIanylethoxymethyl}-l H-indazo 1-3-karbaldehyd byl konvertován na sloučeninu z příkladu 29(e) podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 29(a). is 'HNMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 13,39 (s, IH), 8,67 (d, 2H, J = 5,3 Hz), 8,33 (d, 2H,
J = 8,5 Hz), 7,92 (s, IH), 7,81 (dd, 2H, J = 4,6, 1,5 Hz), 7,65-7,54 (m, 3H), 7,35-7,28 (m, 3H),
3,83 (s, 3H). MS (FAB) [M+H]/z vypočteno 328, změřeno 328. Analyzováno s 0,20 H2O, vypočteno: C (76,20), H (5,30), N (12,70). Změřeno: C (76,17), H (5,34), N (12,65).
Příklad 29(f)
6-pyrid~4~yl-3-E-[2-(pyrid-2-yl)ethenyI]-lH-mdazoI
6-pyridin~4-yl-l-(2-trimethylsilanylethoxymethyl)-lH-indazo 1-3-karbaldehyd byl konvertován na sloučeninu z příkladu 29(f) podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 29(a). 'H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 8,68 (dd, 2H, J = 4,5, 1,6 Hz), 8,62 (d, IH, J = 3,8 Hz), 8,33 (d, IH, J = 8,5 Hz), 7,99 (d, IH, J = 16,4 Hz), 7,94 (s, IH), 7,86-7,78 (m, 3H), 7,73-7,57 (m, 3H), 7,32-7,26 (m, IH). Analyzováno s 0,05 H2O, vypočteno: C (76,26), H (4,75), N (18,72).
Změřeno: C (76,22), H (4,79), N (18,76).
Příklad 29(g)
6-pyrid~4-yl-3-E-[2-(3-fluorfenyl)ethenyl]-lH-indazol
- 106CZ 301667 B6
6-pyridin~4-y 1-142-trimethylsilanylethoxymethy 1)-1 H-indazol-3-karbaldehyd byl konvertován na sloučeninu z příkladu 29(g) podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 29(a).
'HNMR (300 MHz, DMSO-d«) δ 13,40 (s, IH), 8,68 (dd, 2H, J = 4,5, 1,6 Hz), 8,34 (d, IH,
J = 8,4 Hz), 7,92 (s, IH), 7,81 (dd, 2H, Jl = 4,5,1,6 Hz), 7,74-7,52 (m, 5H), 7,49-7,40 (m, 1H),
7,16-7,07 (m, 1H). MS (FAB) [M+H]/z vypočteno 316, změřeno 316. Anal. výpočet: C (76,17),
H (4,48), N (13,33). Změřeno: C (76,07), H (4,53), N (13,36).
Příklad 29(h) io
6-pyrid-4-yl-3-E-[2-(2-fluorfenyl)ethenyl]-l H-indazol
6-pyridin-4-y 1-1 -{2-trimethyIsilanylethoxymethyl)-1 H-indazol-3-karbaldehyd byl konvertován na sloučeninu z příkladu 29(h) podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 29(a).
'HNMR (300 MHz, DMSO-d«) δ 13,43 (s, IH), 8,66 (dd, 2H, J = 4,5, 1,6 Hz), 8,23 (d, IH, J = 8,2 Hz), 7,98-7,90 (m, 2H), 7,80 (dd, 2H, J - 4,5, 1,7 Hz), 7,73-7,54 (m, 3H), 7,40-7,31 (m, IH), 7,30-7,21 (m, 2H). MS (FAB) [M+H]/z vypočteno 316, změřeno 316. Anal. výpočet: C (76,17), H (4,48), N (13,33). Změřeno: C (76,12), H (4,51), N (13,29).
Příklad 29(i)
6-pyrid-4-y l-3-E-[2-(3-chlorfenyl)ethenyl]-1 H-indazol
6-pyridin-4-yl-l-(2-trimethylsilanylethoxymethyl)-lH-Índazol-3-karbaIdehyd byl konvertován na sloučeninu z příkladu 29(i) podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 29(a). 'HNMR (300 MHz, DMSO-ds) δ 13,42 (s, IH), 8,68 (dd, 2H, J = 4,5, 1,6 Hz), 8,35 (d, IH, J = 8,1 Hz), 7,92 ($, IH), 7,86 (s, IH), 7,82 (dd, 2H, J = 4,5, 1,7 Hz), 7,74-7,51 (m, 4H), 7,43 (t, IH, J = 7,8 Hz), 7,37-7,21 (m, IH). MS (FAB) [M+H]/z vypočteno 332, změřeno 332. Anal.
výpočet: C (72,40), H (4,25), N (12,67). Změřeno: C (72,52), H (4,28), N (12,57).
Příklad 290)
6-pyrid-4-yl-3-E-[2-(2-methyIthiazoM-yl)ethenyl]-l H-indazol
-107CZ 301667 B6
6-pyridin-4-yl-l-(2-trimethylsilanylethoxymethyl)-l H-indazol-3-karbaldehyd byl konvertován na sloučeninu z příkladu 29(j) podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 29(a).
'HNMR (300 MHz, DMSO-d,) δ 13,38 (s, IH), 8,67 (dd, 2H, J = 4,5, 1,6 Hz), 8,25 (d, IH,
J = 8,5 Hz), 7,92 (s, IH), 7,81 (dd, 2H, J = 4,5, 1,6 Hz), 7,70-7,50 (m, 4H), 2,72 (s, 3H).
MS (FAB) [M+H]/z vypočteno 319, změřeno 319. Analyzováno s 0,15 trifluoroctovou kyselinou, vypočteno: C (65,51), H (4,25), Ν (16,70). Změřeno: C (65,56), H (4,37), Ν 16,53).
Příklad 29(k) io ó-pyri(M-yl-3-E-[2-(naftalen-2-yl)ethenyl]-l H-indazol
6-py rid i n^4-y 1-1-(2-trimethy lsi lany lethoxymethyl)-lH-indazol-3-karbaldehyd byl konvertován na sloučeninu z příkladu 29(k) podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 29(a).
'HNMR (300 MHz, DMSO-dj) δ 13,40 (s, IH), 8,68 (dd, 2H, J = 4,6, 1,4 Hz), 8,39 (d, IH, J = 8,5 Hz), 8,17 (s, IH), 8,09-7,89 (m, 8H), 7,83 (dd, 2H, J = 4,6, 1,6 Hz), 7,74 (s, 2H), 7,65 (dd, IH, J = 8,5, 1,4 Hz), 7,60-7,46 (m, 4H). MS (FAB) [M+H]/z vypočteno 348, změřeno 348. Analyzováno s 1,05 trifluoroctovou kyselinou, vypočteno: C (67,10), H (3,89), N (9,00). Změřeno: C (67,20), H (3,93), N (9,05).
Příklad 29(1)
6-pyrid-4-y|-3-E-[2~(2,3-difluorfenyl)ethenyl]-l H-indazol
6-pyridin-4-y 1-1 -(2-trimethylsilanylethoxymethy 1)-1 H-indazol-3-karbaldehyd byl konvertován na sloučeninu z příkladu 29(1) podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 29(a). !H NMR (300 MHz, CDC13 + MeOH-d4) δ 8,68 (d, 2H, J - 5,6 Hz,), 8,02 (d, IH, J - 8,5 Hz), 7,70 (s, IH), 7,58 (dd, 2H, J = 4,8, 1,5 Hz), 7,57-7,39 (m, 3H), 7,38-7,31 (m, IH), 7,06-6,96
J0 (m, 2H). MS (FAB) [M+H]/z vypočteno 334, změřeno 334. Analyzováno s 0,80 H2O, vypočteno: C (69,08), H (4,23), N (12,08). Změřeno: C (68,77), H (3,93), N (11,85).
Příklad 29(m)
6-pyrid-4-yl-3“E-[2-(3,5-difIuorfenyl)etheny]]-l H-indazol
-108CZ 301667 B6
6-pyridin^Ey 1-1-(2-trimethylsilanylethoxymethy 1)-1 H-indazol-3-karbaldehyd byl konvertován na sloučeninu z příkladu 29(m) podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 29(a).
Ή NMR (300 MHz, MeOH-d4) δ 8,69 (d, 2H, J = 6,3 Hz), 8,34 (d, IH, J = 8,5 Hz), 7,97 (s, 1H),
7,97 (d, 2H, J = 6,3 Hz), 7,71 (d, IH, J = 10,0 Hz), 7,62 (s IH), 7,60 (s, IH), 7,36 (d, IH,
J = 11,11), 6,95-6,89 (m, IH). MS (ES) [M+H]/z vypočteno 334, změřeno 334. Anal. výpočet: C (72,06), H (3,93), N (12,61). Změřeno: C (72,20), H (4,01),N (12,58).
Příklad 29(n) io
6-pyrid-4-y l—3—E—[2—(b ifeny 1—3—y l)etheny 1]-1 H-indazol
6-pyridm-4-yI-l-(2-trimethylsilanylethoxymethyl)-l H-indazol-3-karbaldehyd byl konvertován na sloučeninu z příkladu 29(n) podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 29(x).
’H NMR (300 MHz, DMSO-dJ δ 8,68 (d, 2H, J = 6,1 Hz), 8,39 (d, IH, J = 8,5), 8,04 (s, IH), 7,92 (s, IH), 7,82 (d, 2H, J = 6,2 Hz), 7,79-7,37 (m, I1H). MS (ES) [M+H]/z vypočteno 374, změřeno 374. Anal. výpočet: C (83,62), H (5,13), N (11,25). Změřeno: C (83,47), H (5,08), N (11,32).
Příklad 29(o)
6-pyrid^t-yl-3-E-[2-(2,6-difluorfenyl)ethenyl]-l H-indazol
6-pyridin-4-yl-l-(2-trimethylsilanylethoxymethyl)-l H-indazol-3-karbaldehyd byl konvertován na sloučeninu z příkladu 29(o) podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 29(a). ]H NMR (300 MHz, MeOH-d4) δ 8,69 (d, 2H, J = 6,3 Hz), 8,21 (d, IH, J = 8,6 Hz), 7,97 (s, IH), 7,88 (d, 2H, J - 6,3 Hz), 7,83 (d, IH, J = 17,1 Hz), 7,71 (IH, J = 8,6 Hz), 7,65 (d, IH, J = 17,1 Hz), 7,40-7,35 (m, IH), 7,13-7,08 (m, 2H). MS (ES) [M+HJ/z vypočteno 334, změřeno
334. Analyzováno s 0,1 H2O, vypočteno: C (71,67), H (3,97), N (12,54). Změřeno: C (71,37),
H (3,90), N (12,31).
Příklad 29(p)
6-pyrid-4-yl-3-E-[2-(3-trifluormethoxyfenyl)ethenyl]-l H-indazol
-109CZ 301667 B6
6-pyridin-4-yI-l-(2-trimethylsilanylethoxymethyl)-lH-indazol-3-karbaldehyd byl konvertován na sloučeninu z příkladu 29(p) podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 29(a).
'H NMR (300 MHz, DMSO-do) δ 8,84 (d, 2H, J = 6,4 Hz), 8,43 (d, IH, J = 8,5 Hz), 8,19 (d, 2H,
J = 6,4 Hz), 8,07 (s, IH), 7,81-7,27 (m, 5H), 7,78 (s, IH). MS (ES) [M+H]/z vypočteno 382, změřeno 382. Analyzováno s 1,0 trifluoroctovou kyselinou, vypočteno: C (55,76), H (3,05), N (8,48). Změřeno: C (55,84), H (3,09), N (8,45).
Příklad 29(q) io
6-pyrid-4-y l-3-E-[2-(benzim idazol-2-y l)ethenyl]-1 H-indazol
6-pyridin^-yl-l-(2-trimethylsílanylethoxymethyl)-lH-indazol-3-karbaldehyd byl konvertován na sloučeninu z příkladu 29(q) podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 29(a).
'HNMR (300 MHz, DMSO-άή) δ 8,69 (d, 2H, J= 6,1 Hz), 8,25 (d, IH, J= 8,5 Hz), 8,03 (d, IH, J = 16,7 Hz), 7,97 (s, IH), 7,84 (d, 2H, J = 6,2), 7,72 (d, IH, J = 8,5 Hz), 7,60 - 7,57 (m,2H), 7,53 (d, IH, J= 16,7 Hz), 7,22- 7,19 (m, 2H). MS (ES) [M+H]/z vypočteno 338, změřeno 338. Analyzováno s 2,0 trifluoroctovou kyselinou, 0,2 H2O, vypočteno: C (52,77), H (3,08), N (12,31). Změřeno: C (52,59), H (3,17), N (12,18).
Příklad 29(r)
6-pyrid-4-yI-3-E-[2-(3,4-methylendioxyfenyl)ethenyl]-l H-indazol
6-pyridin^l-yl-l -(2-trimethylsilanylethoxymethyl)-l H-indazol-3-karbaldehyd byl konvertován na sloučeninu z příkladu 29(r) podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 29(a). 'HNMR(300 MHz, DMSO-d6)δ 8,67 (d, 2H, J = 6,1 Hz), 8,30(d, IH, J- 8,5 Hz), 7,89(s, IH), 7,81 (d, 2H, J = 6,1 Hz), 7,61 (d, IH, J = 9,9 Hz), 7,46 - 7,42 (m, 3H), 7,18 (d, IH, J = 9,6 Hz),
6,95 (d, IH, 8,0 Hz), 6,05 (s, 2H). MS (ES) [M+H]/z vypočteno 342, změřeno 342. Anal.
výpočet: C (73,89), H (4,43), N (12,31). Změřeno: C (73,74), H (4,52), N (12,40).
Příklad 29(s)
6—py rid—4—y I—3—E—[2—(2,5—d i fluorfeny I jetheny 1 ]—1 H-indazol
- 110CZ 301667 B6
6-pyridÍn-4-yl-l-(2-trimethylsilanylethoxymethy 1)-1 H-indazol-3-karbaldehyd byl konvertován na sloučeninu z příkladu 29(s) podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 29(a). 'H NMR (300 MHz, MeOH-dJ δ 8,53 (d, 2H, J = 6,0 Hz), 8,03 (d, 1H, J - 8,5 Hz), 7,60 (d, 2H,
J,2 Hz), 7,56- 7,35 (m, 3H), 7,34 - 7,26 (m, IH), 7,03 - 6,93 (m, IH), 6,90-6,81 (m, IH).
MS (ES) [M+H]/z vypočteno 334, změřeno 334. Analyzováno s 0,30 H2O, vypočteno: C (70,91), H (4,05), N (12,37). Změřeno: C (70,97), H (4,17), N (12,37).
Příklad 29(t)
6-pyrid-4-y 1—3—E—[2—(1 H-pyrol-2-yl)ethenyl]-l H-indazol
6—pyridin—4—yl—1—(2—trimethylsílanylethoxymethyl>lH-indazol-3-karbaldehyd byl konverto15 ván na sloučeninu z příkladu 29(t) podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 29(a). 'HNMR(300 MHz, MeOH-d4) δ 8,60 (d, 2H, J = 6,3 Hz), 8,13 (d, IH, J = 8,5 Hz), 7,86 (s, 1H), 7,79 (d, 2H, J = 6,2 Hz), 7,57 (dd, IH, JI = 8,5 Hz, J2 = 1,5 Hz), 7,40 (d, IH, J = 16,8 Hz), 7,09 (d, IH, J = 16,7 Hz), 6,87 - 6,82 (m, IH), 6,40 - 6,35 (m, IH), 6,16 (t, IH, J = 2,9 Hz). MS (ES) [M+H]/z vypočteno 287, změřeno 287. Analyzováno s 0,5 ethylacetátem, 0,3 tetrahydrofuranem,
0,1 hexanem, 0,1 ethylendiaminem, vypočteno: C (72,07), H (6,21), N (16,05). Změřeno:
C (71,95), H (6,20), N (15,76).
Výchozí látka byla připravena takto:
(i) Roztok 9,5 (100 mmol) tH-pyrol-2-karbaldehydu a 500 ml THF byl ochlazen v ledové lázni. Bylo přidáno 19,2 g (200 mmol) Bu’ONa a reakční směs byla míchána pri teplotě 0 °C po dobu 1 hodiny. Pak bylo přidáno 32,7 g (150 mmol) MtsCl. Reakční směs byla ponechána ohřát se na teplotu místnosti a udržována po dobu 2 hodin při teplotě místnosti. Roztok pak byl podroben působení 100 ml saturovaného vodného NH4C1 a směs byla nalita do 2 1 solanky. Směs byla extrahována 3 x 300 ml EtOAc. Spojené organické vrstvy byly usušeny nad MgSO4 a koncentrovány při sníženém tlaku. Výsledný olej byl puntíkován chromatografií na silíkagelu za vzniku 15,7 g (57%) l-(2,4,6-trÍmethylbenzensuÍfonyl>-lH-pyrol-2-karbaldehydu jako světle žlutého oleje. 'H NMR (CDC13) δ 9,50 (s, IH), 7,79 - 7,74 (m, IH), 7,12 (dd, 1H, J = 3,7, 1,8 Hz), 6,95 (s, 2H), 6,38 (t, IH, J = 3,4 Hz), 2,50 (s, 6H), 2,30 (s, 3H).
-Jíl CZ 301667 B6
(ii) 2,77 g (10 mmol) 1 -(2,4,6—tri methyl benzen sul fony l)-l H-pyroi-2-karbaldehydu ve 100 ml THF bylo podrobeno působení 0,44 g (20 mmol) LiBH4 při teplotě místnosti. Výsledný roztok byl udržován při teplotě místnosti po dobu 1 hodiny. Pak bylo přidáno 10 ml MeOH a výsledná směs byla nalita do 600 ml solanky a extrahována 3 x 200 ml EtOAc. Spojené organické vrstvy byly usušeny nad MgSO4 a koncentrovány při sníženém tlaku. Výsledný olej pak byl purifikován na koloně se silikagelem za vzniku 2,43 g (870) [l-(2,4,6-trimethylbenzensulfonyl>-lH-pyrol2-yl]methanolu jako světle hnědého oleje. 'H NMR (CDCI3) δ 7,17 (dd, IH, J = 3,3, 1,8 Hz), 6,99 (s, 2H), 6,28 - 6,23 (m, 1H), 6,18 (t, 1H, J = 3,3 Hz), 4,42 (s, 2H), 2,50 (s, 6H, 2,30 (s, 3H).
(iii) Roztok 1,4 g (5,0 mmol) [1-(2,4,6-trimethy lbenzensulfonyl)-lH-pyrol-2-yl)methanolu ve 25 ml CHCb byl ochlazen v ledové lázni. Bylo pomalu přidáno 1,1 ml (15 mmol) SOC12. Roztok byl ponechán ohřát se na teplotu místnosti a udržován dalších 45 minut. Roztok pak byl koncentrován při sníženém tlaku. Bylo získáno 1,5 g (100 %) 2-chlormethyl-l-(2,4,6-trimethylis benzensulfonylj-lH-pyrolu jako hnědé pevné látky. 'H NMR (CDCl, δ 7,28 (dd, 1H, J = 3,3, 1,7 Hz), 6,98 (s, 2H), 6,38 - 6,34 (m, IH), 6,19 (t, IH, J = 3,4 Hz), 4,58 (s, 2H), 2,50 (s, 6H), 2,30 (s, 3H).
Příklad 29(u)
6-pyrid-4-yl-3-E-[2-(3-methylkarbamoylmethoxyfenyl)ethenyl]-l H-indazol
6-pyridin-4-yl-l-(2-trimethylsilanylethoxymethyI)-l H-indazol-3-karbaidehyd byl konvertor 25 ván na sloučeninu z příkladu 29(u) podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 29(a).
'HNMR (300 MHz, MeOH-d4) δ 8,68 (d, 2H, J = 5,9 Hz), 8,51 (š s, IH), 8,37 (d, IH, J = 8,5 Hz), 8,19 (s, IH), 7,93 (s, IH), 7,87 (d, IH, J = 7,7 Hz), 7,85 (d, 2H, J = 6,1 Hz), 7,62 (d, IH, J = 8,1 Hz), 7,65 - 7,63 (m, 3H), 7,51 (t, IH, J = 7,6 Hz). MS (ES) [M+H]/z vypočteno 355, změřeno 355. Analyzováno s 0,4 trifluoroctovou kyselinou, 0,50 H2O, vypočteno: C (69,67),
H (4,98), N (14,26). Změřeno: C (69,78), H (5,18), N (14,08).
Příklad 30(a)
6-[3-benzamidofenoxy]-3-E-[2-(thien-2-yl)ethenyl]-l H-indazol
H
-112
Sloučenina z příkladu 30(a) byla připravena podobným způsobem jako v příkladu 6(a) kromě toho, že (E)-3-thiofen-2-ylakryloylchlorid byl použit namísto 3-(4—ch lorfeny l)akryloy [chloridu v kroku (i). ‘HNMR (DMSCRU) δ 13,05 (s, IH), 10,33 (s, IH), 8,19 (d, IH, J - 8,8 Hz), 7,92 (d, 2H, J = 6,9 Hz), 7,70 (d, IH, J = 16,5 Hz), 7,65 - 7,49 (m, 6H), 7,40 (t, 1H, J = 8,1 Hz), 7,35 (s, IH, sjemným dělením), 7,20 (d, IH, J - 16,5 Hz), 7,10 (m, IH), 7,04 (s, IH), 6,98 (d, IH,
J = 8,8 Hz), 6,86 (s, IH, J= 9,8 Hz). Anal. výpočet pro C20H19N3O2S 0,6 H2O: C, 69,65, H, 4,54, N, 9,37, S, 7,15. Změřeno: C, 69,77, H, 4,45, N, 9,52, S, 7,02.
Příklad 30(b)
6-[3-( 1-acety lpi per idin-4-ylkarboxamido)fenoxy]-3-E-[2-(4—ch lorfeny l)ethenyl]-l H-indazol
Sloučenina z příkladu 30(b) byla připravena podobným způsobem, jako byl popsán pro příklad 15 6(a) kromě toho, že 1 -acety lpiperid in—4—karboxylová kyselina a HATU byly použity namísto benzoylchíoridu v kroku (ii). ‘HNMR (DMSO-Λ) (J= 8,6 Hz) δ 7,76 (d, J = 8,6 Hz), 7,53 (d, J = 6,2 Hz), 7,46 (d, J= 8,4 Hz), 7,37 (m, 3H), 7,01 (s, IH, s jemným dělením), 6,97 (d,J = 8,8Hz), 6,78 (d, J= 7,7 Hz), 4,38 (m, IH), 3,85 (m, IH), 3,09- 2,96 (m, IH), 2,58 (m,2H), 1,99 (s, 3H), 1,77 (m, 2H), 1,55 (m, IH), 1,37 (m, IH). Anal. výpočet pro
C29H27C1N4O3 * 1,3 H2O: C, 64,69, H, 5,54, N, 10,41. Změřeno: C, 64,64, H, 5,51,N, 10,23.
Příklad 30(c)
6-[3-benzamidofenoxy]-3-E-[2-(fur-2-yl)ethenyl]-lH-indazol
Sloučenina z příkladu 30(c) byla připravena podobným způsobem jako v příkladu 6(a) kromě toho, že (E)-3-furan-2-ylakry1oylchlorid, připravený podle Collect, Czech. Chem. Comm., 52, 409-24, 1987), byl použit namísto 3-(4-chíorfenyl)akryloylchloridu v kroku (i). 'HNMR (DMSO-d<;) δ 13,00 (s, IH), 10,32 (s, IH), 8,14 (d, IH, J = 8,8 Hz), 7,91 (d, 2H, J = 7,0 Hz), 7,73 (s, IH), 7,70- 7,51 (m, 5H), 7,40 (t, IH, J = 8,4 Hz), 7,30 (AB, 2H, J = 16,7 Hz), 7,04 (s, IH), 6,98 (d, IH, J = 8,7 Hz), 6,86 (d, IH, J = 8,0 Hz), 6,65 (s, IH, s jemným dělením), 6,60 (s, IH, s jemným dělením). Anal. výpočet pro C^Hi^C^ · 0,7 H2O: C, 71,94, H, 4,74, N, 9,68. Změřeno: C, 72,17, H, 4,83, N, 9,44.
Příklad 30(d)
6-[3-(indoM-ylkarboxamido)fenoxy]-3-E-styrylindazol
-113Q1 301667 B6
Sloučenina z příkladu 30(d) byla připravena podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 30(a) s použitím 3—(styryl—1 H-indazol-6-y loxy )feny lam inu a 1 H-indol—4-karboxylové kyseliny namísto benzoové kyseliny v kroku (ii). 'HNMR (DMSO-d6) δ 12,99 (s, IH), 11,33 (s, IH),
10,24 (s, IH), 8,22 (d, IH, J = 8,7 Hz), 7,72 - 7,38 (m, 10H), 7,30 (d, IH, J = 7,1 Hz), 7,19 (m, 2H), 7,04 (m, 3H), 6,82 (m, 2H). Anal výpočet pro C30H22N4O2 · 0,6 H2O: C, 74,86, H, 4,86, N, 11,64. Změřeno: C, 74,90, H, 5,01, N, 11,33.
Příklad 30(e)
6-[3-((l-ethyl-3-methyl™lH-pyrazol-5-yl)karboxamido)fenoxy]-3-E-styrylindazol
Sloučenina z příkladu 30(e) byla připravena podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 15 30(a) s použitím 3-(styryl-lH-indazol-6-yloxy)fenylaminu namísto 3-(3-styryl-4,5-dihydro1 H-Índazol-6-yloxy)fenylaminu a 1 -ethy l-3-methyl-lH-pyrazol-5-karboxy lové kyseliny namísto benzoové kyseliny v kroku (ii).
Příklad 31 (a)
6-[3-benzamidofenoxy]-3-E-[2-(pyridin-2-yl)ethenyl]-l H-indazol
K míchanému roztoku 492 mg (1,13 mmol) 6-[3-benzamidofenoxy]-3-E-[2-(pyridin-2-yl)25 ethenyl ]-4,5-dihydro-l H-indazolu v 15 ml 1,4-dioxanu bylo přidáno 386 mg (1,7 mmol)
2,3-dichlor-5,6-dikyano-l,4-benzochinonu (DDQ). Reakční směs byla míchána po dobu 30 minut při teplotě místnosti, pak byla nalita do saturovaného roztoku NaHCO3 a EtOAc, Vrstvy byly odděleny a vodná vrstva byla opět extrahována EtOAc. Spojené organické vrstvy byly promyty postupně saturovaným roztokem NaHCO3 a saturovaným roztokem NaCI, usušeny nad
MgSO4 a koncentrovány při sníženém tlaku. Zbytek byl podroben velmi rychlé chromatografíi na silikagelu za eluce směsí CH2Cl2/EtOAc:MeOH (1:1:0,1). Získaný olej byl triturován ze směsi EtOAc a hexanu za vzniku 420 mg (86 %) sloučeniny uvedené v názvu jako žlutohnědé pevné látky. 'HNMR(DMSO-d«)ó 13,12(s, IH), 10,30(s, IH), 8,60(d, IH, J = 3.8 Hz), 8,22(d, IH, J = 8,8 Hz), 7,93 (m, 3H), 7,82 (t, IH, J = 7,7 Hz), 7,68- 7,49 (m, 7H), 7,40 (t, IH, J = 8,1 Hz),
7,27 (m, IH), 7,08 (s, IH), 7,03 (s, IH), 7,03 (d, IH, J= 8,7 Hz), 6,87 (d, IH, J = 8,1 Hz,
-114CZ 301667 B6 s jemným dělením). Anal. výpočet pro C27H20N4O2 · 0,65 EtOAc: C, 72,59, H, 5,19, N, 11,44.
Změřeno: C, 72,34, H, 5,1 ϊ, N, 11,82.
Výchozí látka byla připravena takto:
2) hydrochtorkt (E)-3-pyridin-2· ylakroytchtortdu
3) ΝΛ·Η,Ρ
Roztok 4,00 g (10,9 mmol) 3-[3-(benzhydrylidenamino)fenoxy)cyklohex-2-enomu ve 20 ml THF byl přidán pomalu k roztoku 36 ml LiHMDS (l,0M roztok v THF) pri teplotě -78 °C.
15 minut poté, co bylo přidávání ukončeno, byl přidán hydrochlorid (E)-3-pyridin-2-ylakryloylchloridu a míchání pokračovalo v 78 °C po dobu 30 minut. Reakce byla zastavena saturovaným roztokem NH4CI a extrahována 3 x EtOAc. Spojené organické vrstvy byly promyty saturovaným roztokem NaCl, usušeny nad MgSO4 a koncentrovány při sníženém tlaku. Zbytek byl podroben velmi rychlé chromatografii na silikagelu za eluce směsí hexanu a EtOAc (2:1). Vhodné frakce byly koncentrovány při sníženém tlaku a rozpuštěny v 8 ml směsi EtOH a HOAc (1:1). K tomuto roztoku bylo v 80 °C přidáno 3,4 ml (70,0 mmol) hydrátu hydrazinu. Po 15 minutách byla veškerá výchozí látka zpracována a reakční směs byla opatrně nalita do saturovaného NaHCO3 a extrahována 2 x EtOAc. Spojené organické vrstvy byly promyty saturovaným roztokem NaCl, usušeny nad MgSO4 a koncentrovány při sníženém tlaku. Zbytek byl podroben velmi rychlé chromatografii na silikagelu za eluce směsí CH2CÍ2/MeOH (9:1) za vzniku 676 mg (19 %) 6-(3-aminofenoxy)-3-E-[2-(pyridin-2-yl)ethenyl)-4,5-dihydro-l H-indazolu. lH NMR (DMSCRk) δ 12,51 (s, IH), 8,57 (d, IH, J = 3,8 Hz), 7,78 (t, IH, J = 7,8 Hz), 7,51 (m, 2H), 7,25 (m, IH), 7,05 (m, 2H), 6,35 (d, IH, J = 7,9 Hz, s jemným dělením), 6,32 (t, IH, J = 2,1 Hz), 6,23 (d, IH, J = 7,9 Hz), 5,54 (s, IH), 5,23 (s, 2H), 2,95 (t, 2H, J = 8,2 Hz), 2,60 (t, 2H, J = 8,2 Hz),
MS [M+H]/z vypočteno 331. Změřeno: 331. Anal. výpočet pro C20H,8N4O 0,15 H2O: C, 72,12, H, 5,54, N, 16,82. Změřeno: C, 72,11, H, 5,55, N, 16,61.
Krok(ii)
NH
SN
K míchanému roztoku 350 mg (1,06 mmol) dihydroanilinu a 776 mg (6,36 mmol) benzoové kyseliny v 15 ml DMF bylo přidáno 2,42 g (6,36 mmol) HATU a 1,8 ml (12,71 mmol) NEt3. Reakční směs byla zahřívána v 50 °C po dobu 1,5 hodiny, ochlazena a nalita do směsi ledu a saturovaného roztoku NaCl. PPt byl sbírán vakuovou filtrací, promyt H2O a usušen na vzduchu. K tomuto filtračnímu koláči rozpuštěnému v 10 ml směsi MeOH a THF (1:1) bylo přidáno
650 mg K2CO3 a 1 ml H2O. Po 1 hodině byla reakční směs nalita do saturovaného roztoku NaCl a extrahována 2 x EtOAc. Spojené organické vrstvy byly promyty saturovaným roztokem NaCl, usušeny nad MgSO4 a koncentrovány pri sníženém tlaku. Zbytek byl podroben velmi rychlé chromatografii na silikagelu za eluce směsí CH2Cl2/EtOAc/MeOH (1:1:0,1) za vzniku 333 mg (72 %) 6-[3-benzamidofenoxy]-3-E-[2-(pyridin-2-yl)ethenylpl,5-<tihydro-l H-indazolu.
'HNMR (DMSO-dé) δ 12,58 (š s, IH), 10,34 (s, IH), 8,57 (d, IH, J = 3,8 Hz), 7,95 (d, 2H, J = 6,8 Hz), 7,81 - 7,70 (m, 2H), 7,63 - 7,50 (m, 6H), 7,40 (t, IH, J = 8,1 Hz), 7,25 (m, IH), 7,09
-115CZ 301667 B6 (d, 1H, J = 16,3 Hz), 6,89 (d, 1H, J = 8,0 Hz), 5,64 (s, 1H), 2,99 (t, 2H, J = 8,1 Hz), 2,66 (t, 2H, J = 8,1 Hz). Anal. výpočet pro C27H22N4O2 ’ 0,1 CH2C12: C, 73,48, H, 5,05, N, 12,65. Změřeno: C, 73,48, H, 5,05, N, 12,48.
Příklad 31 (b)
6-(3-(( 1,5-dímethyl-l H-pyrazol-3-yl)karboxamido)fenoxy]-3-E-[2-(pyridin-2-yl)ethenyl]1 H-indazol
io
Sloučenina z příkladu 31 (b) byla připravena podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 31 (a) kromě toho, že l,5-dimethyl-lH-pyrazol-3-karboxylová kyselina byla použita namísto benzoové kyseliny v krou (ii). 'HNMR (DMSO-dJ δ 13,13 (s, IH), 10,07 (s, IH), 8,60 (d, IH, J = 4,3 Hz), 8,21 (d, IH, J = 8,7 Hz), 7,93 (d, IH, J - 16,3 Hz), 7,82 (t, IH, J = 7,4 Hz), 7,69 (m, 3H), 7,56 (d, IH, J = 16,3 Hz), 7,32 (m, 2H), 7,05 (s, IH), 7,01 (d, IH, J = 8,7 Hz), 6,80 (m, IH), 6,52 (s, IH), 3,81 (s, 3H), 2,29 (s, 3H). Anal. výpočet pro C26H22N6O2 0,1 CH2CI2/0,l hexan: C, 68,58, H, 5,09, N, 17,97. Změřeno: C, 68,26, H, 5,25, N, 17,61.
Příklad 31 (c)
6-[3-((5-methylsulfonylthien-2-yl)karboxamido)fenoxy]-3-E-[2-(pyridin-2-yl)ethenyl]-lHindazol
Sloučenina z příkladu 3 l(c) byla připravena podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 31 (a) kromě toho, že 5-methansulfonyl-thÍofen-2-karboxylová kyselina byla použita namísto benzoové kyseliny v krou (ii). ‘HNMR (DMSO-d6) δ 13,17 (s, IH), 10,58 (s, IH), 8,61 (d, IH, J - 4,0 Hz), 8,24 (d, IH, J = 8,8 Hz), 8,05 (d, IH, J = 4,1 Hz), 7,97- 7,79 (m, 3H), 7,68 (d, IH, J = 7,8 Hz), 7,60- 7,48 (m, 3H), 7,43 (t, IH, J = 8,2 Hz), 7,28 (m, IH), 7,10 (s, IH, sjemným dělením), 7,00 (d, IH, J = 8,7 Hz), 6,92 (d, IH, J = 8,1 Hz, sjemným dělením), 3,41 (s, 3H). Anal. výpočet pro C26H20N4O4S2 - 0,4 EtOAc: C, 60,07, H, 4,24, N, 10,15, S, 11,62. Změřeno: C, 60,22, H, 4,48, N, 10,05, S, 11,49.
Příklad 3 l(d)
6-(3-(( 1 -ethyl-3-methyl-1 H-pyrazol-5-y l)karboxamido)fenoxy]-3-E-[2-(pyridin-2-y 1)ethenyl]—1 H-indazol
-116CZ 301667 B6
Sloučenina z příkladu 3 l(d) byla připravena podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 31(a) kromě toho, že 1 -ethy 1-3-methyl-lH-pyrazol-5-karboxylová kyselina byla použita namísto benzoové kyseliny v krou (ii). 'H NMR (DMSO-dJ δ 13,15 (s, IH), 10,18 (s, IH), 8,61 (d, IH, J = 3,7 Hz), 8,22 (d, IH, J = 8,8 Hz), 7,94 (d, IH, J = 16,3 Hz), 7,82 (t, IH, J = 7,5 Hz),
7,67 (d, IH, J = 7,7 Hz), 7,55 (m, 3H), 7,40 (t, IH, J = 8,1 Hz), 7,28 (m, 1H), 7,06 (s, IH), 7,01 (d, IH, J = 8,8 Hz), 6,89 (d, IH, J = 7,9 Hz), 6,78 (s, IH), 4,38 (q, 2H, J = 7,1 Hz), 2,19 (s, 3H), 1,29 (t, 3H, J = 7,1 Hz). Anal. výpočet pro C27H24N6O2 * 0,6 EtOAc: C, 68,25, H, 5,61, N, 16,24. Změřeno: C, 68,28, H, 5,88, N, 16,01.
io
Příklad 31(e)
6-[3-(( l-methy Hmidazol-2-y l)karboxamido)fenoxy ]-3-E-[2-(pyrid in-2-yl)etheny 1J-1H15 indazol
Sloučenina z příkladu 31 (e) byla připravena podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 31 (a) kromě toho, že l-methyl-lH-imidazol-2-karboxylová kyselina byla použita namísto benzoové kyseliny v krou (ii). 'HNMR (DMSO-dó) δ 13,13 (s, IH), 10,47 (s, IH), 8,60 (d, IH,
J = 3,9 Hz), 8,21 (d, IH, J = 8,7 Hz), 7,93 (d, IH, J = 16,3 Hz), 7,82 (t, IH, J = 7,6 Hz), 7,65 (m,3H), 7,56 (d, IH, J= 16,3 Hz), 7,43 (s, IH), 7,37 (t, IH, J= 8,1 Hz), 7,28 (m, IH), 7,04 (m,3H), 6,84 (d, IH, J= 7,7 Hz), 3,95 (s, 3H). Anal. výpočet pro C25H20N6O2 * 0,4 H2O: C, 67,49, H, 4,80, N, 18,65. Změřeno: C, 67,68, H, 4,73, N, 18,94.
Příklad 3 l(f)
6-(3-(( l-ethyl-3-methyl-l H-pyrazol-5-yl)karboxamido)fenoxy]-3-E-[2-( 1,2-dimethyl-l Himidazol-4-yl)ethenyl]-l H-indazol
Sloučenina z příkladu 3 l(f) byla připravena podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 31 (a) kromě toho, že hydrochlorid (E)-3-(l,2-d imethy I-1 H-imidazol—4-y l)akry loy Ichlorid byl použit namísto hydrochloridu (E)-3-pyridin-2-ylakryloylchloridu v kroku (i) a l-ethyl-3methyl-lH-pyrazol-5-karboxylová kyselina byla použita namísto benzoové kyseliny v kroku
-117CZ 301667 B6 (ii). 'H NMR (DMSO-dí) δ 12,82 (s, IH), 10,17 (s, IH), 8,05 (d, IH, J = 8,8 Hz), 7,58 (d, IH,
J = 8,4 Hz), 7,48 (s, 1H), 7,38 (t, IH, J = 8,1 Hz), 7,25 (s, 2H), 7,20 (s, IH), 7,01 (s, IH), 6,92 (d, 1H, J = 8,7 Hz), 6,85 (d, 1H, J = 8,7 Hz), 6,78 (s, 1H), 4,37 (q, 2H, J = 7,0 Hz), 3,56 (s, 3H),
2,31 (s, 3H), 2,19 (s, 3H), 1,29 (t, 3H, J = 7,0 Hz). Anal. výpočet pro C27H2,N,O2 · 1,0 H2O · 0,3
EtOAc: C, 64,39, H, 6,02, N, 18,64. Změřeno: C, 64,52, H, 5,98, N, 18,52.
Příklad 32(a) io 6-[3-benzamidofenoxy)-3-E-[2-( 1 H-imidazol-4-yl)ethenyl]-l H-indazol
K míchanému roztoku 213 mg (0,39 mmol) 6-(3-benzamidofenoxy)“3-E-[2-(l-(2-trimethylsilanylethoxy)methyl-imidazol-4-yl)ethenyl]-l H-indazol u v 5 ml THF bylo přidáno 6,0 ml (6,0 mmol) í,0M TBAF v THF a 0,26 ml (3,86 mmol) ethylendiaminu. Po zahřívání v 70 °C po dobu 18 hodin byla reakční směs ochlazena, naředěna EtOAc a promyta opakovaně saturovaným roztokem NaHCO3. Organická vrstva byla usušena nad MgSO4 a koncentrována při sníženém tlaku. Zbytek byl podroben velmi rychlé chromatografii na silikagelu za eluce směsí CH2Cl2:EtOAc: MeOH (1:1:0,2). Získaný olej byl triturován ze směsi EtOAc a hexanu za vzniku 65 mg(40 %) AG 13853. *H NMR(DMSO-d6) δ 12,90 (s, IH), 12,35 (s, IH), 10,32(s, IH), 8,08 (d, IH, J- 8,7 Hz), 7,91 (d, 2H, J= 6,8 Hz), 7,81 (s, IH), 7,64 - 7,49 (m, 5H), 7,42-7,31 (m,4H), 7,03 (s, IH), 6,96 (d, IH, J = 8,7 Hz), 6,85 (d, IH, J= 8,1 Hz). Anal. výpočet pro C25Hl9NsO2 0,7 H2O 4,4 EtOAc: C, 68,07, H, 5,07, N, 14,92. Změřeno: C, 67,93, H, 4,89, N, 15,06.
Výchozí látka byla připraven podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 31 (a) kromě toho, že hydrochlorid (E)-[l-(2-trimethylsÍlanyl)ethoxymethyl)-lH-ÍmidazoI-4-yl]akryloylchlorid byl použit namísto hydrochloridu (E)-3-pyridin-2-yl akry loy leh loridu v kroku (i).
Příklad 32(b)
6-[3-((I-ethy|-3-methyÍ-lH-pyrazoi-5-yI)karb0xamido)fenoxyJ-3-E-[2-(lH“imidazoMyl)ethenyl]-l H-indazol
Sloučenina z příkladu 31 (b) byla připravena podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 32(a) kromě toho, že l-ethyl-3-methyl-lH-pyrazol-5-karboxylová kyselina byla použita namísto benzoové kyseliny v kroku (ii). *HNMR (DMSO-d6) δ 12,89 (s, IH), 12,37 (s, IH), 10,18 (s, IH), 8,07 (d, IH, J = 8,9 Hz), 7,74 (s, IH), 7,58 (d, IH, J= 8,3 Hz), 7,49 (s, IH), 7,44-7,32 (m,3H), 7,28 (s, IH), 7,01 (s, IH), 6,95 (d, 1H, J = 8,9 Hz), 6,86 (d, lH,J = 8,6Hz),
-118CZ 301667 B6
6,78 (s, IH), 4,38 (q, 2H, J = 7,1 Hz), 2,19 (s, 3H), 1,29 (t, 3H, J = 7,1 Hz). Anal. výpočet pro
C25H23N7O2 · 0,8 H2O 0,1 EtOAc: C, 63,99, H, 5,37, N, 20,57. Změřeno: C, 63,72, H, 5,12,
N, 20,25.
Příklad 32(c)
6-[34(l^thyl-3-methyl-lH-pyrazol-5-yl)karboxamido)fenoxy]-3“E-[2-(2-methylimidazol4-yl)ethenyl]-l H-indazol
io
Sloučenina z příkladu 32(c) byla připravena podobným způsobem, jak byl popsán pro příklad 32(b) kromě toho, že hydrochlorid (E)-3-[2-methyl-l-(2-trimethylsilanyI)ethoxymethyl)-lHimidazol-4-yl]akryloylchlorid byl použit namísto hydrochloridu (E)-3-[l-(2-trimethy Isilanyl)ethoxymethyl)-lH-irnidazoM-yl]akryloylchloridu v kroku (i). ’H NMR (DMSQ-d6) δ 12,85 (š s, IH), i 1,80 (š s, IH), 10,18 (s, IH), 8,05 (d, IH, J - 8,7 Hz), 7,58 (d, IH, J = 8,4 Hz), 7,48 (s, IH), 7,39 (t, IH, J = 8,2 Hz), 7,33 - 7,05 (m, 3H), 7,00 (s, IH), 6,93 (d, IH, J = 8,7 Hz), 6,86 (d, IH, J = 8,2 Hz), 6,78 (s, IH), 4,38 (q, 2H, J = 7,1 Hz), 2,31 (s, 3H), 2,19 (s, 3H), 1,29 (t, 3H, J 7,1 Hz). Anal. výpočet pro C26H25N7O2 0,9 H2O 0,4 EtOAc: C, 63,87, H, 5,83, N, 18,89. Změřeno: C, 63,64, H, 5,76, N, 18,85.
Příklad 33(a)
6-[2-{methylkarbamoyl)fenylsulfanyl]-3-E-[2-(pyridin-2-yl)ethenyl]-l H-indazol
Sloučenina z příkladu 33(a) byla připravena z 6-[2-(methyIkarbamoyl)fenylsulfanyI]—3—E—[2— (pyridin-2-yl)ethenyl]-l-[2-(trimethylsi lany l)ethoxy methy 1 ]-1 H-indazolu podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 11. Rf sm 0,8, p 0,15 (ethylacetát), HNMR (300 MHz, DMSO-d$) δ 13,45 (s, IH), 8,72 (d, IH, J = 3,9 Hz), 8,47 (m, IH), 8,31 (d, IH, J - 8,5 Hz), 8,06 (d, IH, J = 16,4 Hz), 7,92 (dt, IH, J = 1,7, 7,6 Hz), 7,78 (d, IH, J = 7,8 Hz), 7,71 (s, IH), 7,68 (d, IH, J = 16,5 Hz), 7,61 (dd, IH, J = 1,7, 7,2 Hz), 7,45 -7,36 (m, 3H), 7,31 (d, IH, J = 8,5 Hz), 7,17 (m, IH), 2,89 (d, 3H, J = 4,6 Hz), 13C NMR (75 MHz, DMSO-d6) δ 167,8, 154,8, 149,5,
141,9, 141,8, 137,0, 136,8, 135,4, 132,5, 130,2, 130,0, 129,2, 127,7, 126,1, 125,4, 123,5, 122,5, 122,4, 121,6, 120,2, 114,5, LCMS (100% oblast Rt = 3,5 minut (poz) [M+H]/z vypočteno 387, změřeno 387. Analyzováno s 0,1 H2O, 0,1 EtOAc vypočteno: C (67,78), H (4,82), N (14,11), S (8,08). Změřeno: C (67,78), H (4,77), N (14,06), S (8,08).
Výchozí látka byla připravena takto:
-119CZ 301667 B6 (i)
V argonové atmosféře bylo 30,0 g (62,9 mmol) 6-jod-3-styryl-l-[2-(trimethylsilanyl)ethoxymethyl]—1 H-indazolu, připraveného v příkladu 14, krok (i), rozpuštěno ve 375 ml dichlor5 methanu a bylo ochlazeno na -42 °C v lázni s aceton itrilem a suchým ledem. Směsí pak byl probubláván ozón (1 1/min, 60 V, 1,8 A) po dobu 45 minut. Standardní indikátory neudávaly jasnou změnu barvy kvůli barvě pozadí roztoků, Aby se zabránilo nadměrné oxidaci, byl postup reakce monitorován TLC (1:9 směs EtOAc a hexanu). Přidávání ozónu bylo zastaveno a baňka byla naplněna argonem. Pak bylo přidáno 30 ml dimethylsulfidu a směs byla ponechána ohřát se na io 23 °C. Tato směs byla míchána po dobu 4 hodin a byla koncentrována při sníženém tlaku. Olej byl vložen do vysokého vakua po dobu 16 hodin. Zbytek byl rozpuštěn v 15 ml dichlormethanu a byl naředěn 100 ml hexanu za vzniku několika krystalů (nebyl požadovaný produkt). Směs byla filtrována a filtrát byl koncentrován. Zbytek byl rozpuštěn v 250 ml směsi 8:2 hexanu a EtOAc, podroben působení 50 ml silikagelu, filtrován a koncentrován. Po 72 hodinách za vysokého vakua vzniklo 24,17 g (-95% čisté dle NMR, 91% výtěžek) 6-jod-3-karboxaldehyd-l-[2-(trimethylsilanyl)ethoxymethyl]-l H-indazolu jako žluté pevné látky: Rf sm 0,34, p 0,29 (směs ethylacetátu a hexanu 1:9), 'HNMR (300 MHz, CDCh) δ 10,25 (s, IH), 8,09 (s, IH), 8,05 (d, IH), 7,80 (d, IH), 5,88 (s, 2H), 3,71 (t, 2H), 0,93 (t, 2H), 0,0 (s, 9H).
(li)
24,0 g (59,7 mmol) 6-jod-3-karboxaldehyd-l-[2-(trimethylsilanyl)ethoxymethyl]-l H-indazolu bylo rozpuštěno ve 350 ml THF a bylo ochlazeno na 5 °C. K této směsi bylo přidáno 45,7 g (100 mmol, 1,68 ekv,) pevného 2-pikolyltrifenylfosfoniumchloridu/hydridu draselného. Reakční směs byla ponechána za míchání po dobu 45 minut. Ke směsi bylo přidáno 20 ml 3N HCI, následováno 50 ml saturovaného vodného hydrouhlíčitanu sodného za dosažení pH 6. Nadbytek THF byl odstraněn při sníženém tlaku a zbytek byl rozdělen mezi ethylacetát a vodu. Organické vrstvy byly promyty saturovaným vodným hydrouhličitanem sodným, vodou a organická vrstva byla oddělena, usušena nad sulfátem sodným, dekantována a koncentrována při sníženém tlaku.
Zbytek byl nabrán do směsi ethylacetátu a hexanu 1:9 a byl filtrován. Filtrát byl purifikován chromatografií na silikagelu (2 1 silikagelu, 20 až 30 až 50% směs ethylacetátu a hexanu) za vzniku 18,9 (66% výtěžek) 6-jod-3-E-[2-(pyridÍn-2-yl)ethenyl-l-[2-(trimethylsilanyl)ethoxymethyl]-! H-indazolu: Rf sm 0,52, p 0,25 (směs ethylacetátu a hexanu 2:8), *H NMR (300 MHz, CDCh) δ 8,64 (m, IH), 8,00 (d, IH, J= 0,7 Hz), 7,87 (d, IH, J = 16,4 Hz), 7,80 (d, IH,
J = 8,5 Hz), 7,69 (td, IH, J = 7,7, 1,8 Hz), 7,55 (d, IH, J = 16,4 Hz), 7,55 (dd, IH, J = 8,5, 1,3 Hz), 7,47 (d, IH, J = 7,9 Hz), 7,18 (dd, IH, J= l,h 4,8 Hz), 5,70 (s,2H), 3,59 (t, 2H, J = 8,2 Hz), 0,90 (t, 2H, J = 8,2 Hz), -0,04 (s, 9H), BC NMR (75 MHz, CDCh) δ 156,8, 151,2, 144,2, 143,6, 138,0, 132,3, 132,2, 124,4, 124,0, 123,8, 123,7, 123,5, 120,7, 94,1, 79,4, 68,1, 19,17, 0,0.
- 12010
CL JU100/ DO (iii)
V baňce s kulatým dnem o objemu 200 ml bylo odváženo 13,7 g (41,9 mmol, 2,5 ekv.) uhličitanu česného a tato sůl byla usušena za vysokého vakua a zahřívání horkovzdušnou pistolí. Pak bylo přidáno 1,37 g (1,68 mmol, 0,1 ekv.) katalyzátoru [Pd(dppf)Cl2-CH2CÍ2] a 8,0 g (16,76 mmol) 6-jod-3-E-[2-(pyridin-2-yl)ethenyl-l-[2-(trÍmethylsilanyI)ethoxymethyl]-lH-indazolu a směs byla nabrána do 71 ml DMF. K této směsi bylo přidáno 4,62 ml (33,5 mmol, 2,0 ekv.) methylthiosalícylátu a nádoba byla zahřívána na 85 °C po dobu 4,5 hodiny. Tato směs byla ochlazena na 23 CC, byla rozdělena mezi 350 mí ethylacetátu a 300 mi 50% saturovaného vodného hydrouhličitanu sodného. Organické vrstvy byly promyty 200 ml 10% bisulfitu sodného, solankou a organická vrstva byla oddělena. Organická látka byla usušena nad sulfátem sodným, dekantována a koncentrována při sníženém tlaku. Purifikace chromatografií na silikagelu (500 ml silikagelu, 30 až 40 až 50% směs ethylacetátu a hexanu) poskytla 6,44 g (74 %) 6-[(2-methoxykarbonylfenyl)sulfanyl]-3-E-[2-(pyridin-2-yl)ethenyl]-l-[2-(trimethylsiIanyl)ethoxymethyl]lH-indazolu: R< sm 0,52, p 0,19 (směs ethylacetátu a hexanu 3:7), FTIR (tenký film) 2950, 2887, 2356, 1713, 1585, 1464, 1433, 1250, 1076, 837cm1. 'HNMR(300MHz, CDCIj) δ 8,70 (d, IH), 8,12 (d, IH), 8,04 (d, IH), 7,99 (d, IH, J = 16,4 Hz), 7,90 (s, IH), 7,88 (t, IH), 7,76 (d, IH, J = 16,4 Hz), 7,62 (d, IH), 7,55 (d, IH), 7,30 - 7,15 (m, 3H), 6,92 (d, IH), 5,80 (s, 2H), 4,01 (s,
3H), 3,78 (t, 2H), 0,96 (t, 2H), -0,03 (s, 9H), nC NMR (75 MHz, CDCl·,) 6 168,3, 156,8, 151,2, 144,3, 144,2, 143,2, 138,0, 133,8, 133,6, 132,5, 132,4, 129,9, 129,3, 128,5, 126,0, 124,7, 124,6, 123,8, 123,5, 118,3, 79,4, 68,2, 53,7, 19,2, 0,0, LCMS (100% oblast) Rt = 4,4 minutách (poz) [M+H]/z vypočteno 518,2, změřeno 518,2.
(iv)
K 8,50 g (16,4 mmol) 6-[(2-methoxykarbonyÍfenyl)sulfanyl]-3-E-[2-(pyridin-2-yl)ethenyÍ]1 -[2-(tri methy isi lany l)ethoxymethyl]-l H-indazo lu bylo přidáno 120 ml THF, 120 ml methanolu, 120 ml vody a i 5,9 g (115 mmol, 7,0 ekv.) uhličitanu draselného. Tato směs byla zahřívána na 67 °C a byla míchána po dobu 22 hodin. Směs byla ochlazena a nadbytek rozpouštědla byl odstraněn. Zbytek byl rozdělen mezi 300 ml ethylacetátu a 250 ml vody. Vodná vrstva byla acidifikována 20% kyselinou citrónovou na pH 5 (—70 ml) a vodná vrstva byla odčerpána. Organická vrstva byla promyta 50 ml vody a bylo přidáno 100 ml hexanu, aby se pomohlo precipitaci krystalů, které byly vytvořeny v ethylacetátové vrstvě. Pevná látka byla filtrována a usušena za vzniku 7,56 g (91%) 6-[(2-karboxyfenvl)sulfanyl]-3-E-[2-(pyndín-2-yl)ethenylJ-l-[235 (trimethylsilanyl)ethoxymethyl]-lH-indazolu: Rf sm 0,67, p 0,41 (směs ethylacetátu a hexanu 8:2), 'HNMR (300 MHz, CDCI3) δ 8,60 (m, IH), 8,10 (d, IH, J = 8,4 Hz), 8,04 (dd, IH, J = 1,7, 7,7 Hz), 7,85 (d, IH, J = 16,5 Hz), 7,83 (s, IH), 7,70 (dt, IH, J = 1,7, 7,7 Hz), 7,59 (d, IH, J = 16,5 Hz), 7,52 (d, IH, J = 7,9 Hz), 7,38 (dd, IH, J = 1,3, 8,4 Hz), 7,22 - 7,10 (m, 3H), 6,80 (dd, IH, J= 1,0, 8,0 Hz), 3,59 (t, 2H, J = 8,1 Hz), 0,85 (t, 2H, J= 8,81 Hz),
-0,1 (s,9H).
- 121 CZ 301667 B6 (v)
820 mg (1,63 mmol) 6-[(2-karboxyfenyl)sulfanyI]-3-E-[2-(pyridin-2-yl)ethenyl]-l-[2-(trimethylsilanyl)ethoxymethyl]-l H-indazolu bylo rozpuštěno v 5 ml DMF a bylo podrobeno působení 4,1 mt (8,13 mmol, 50 ekv.) methylaminu (2M v THF a 929 mg (2,44 mmol, 1,5 ekv.) HATU. Tato směs byla míchána po dobu 30 minut, byla rozdělena mezi ethylacetát a saturovaný vodný hydrouhličitan sodný a organická vrstva byla oddělena. Organická látka byla usušena nad sulfátem sodným, dekantována a koncentrována při sníženém tlaku. Purifikace chromatografii na silikagelu (50 ml silikagelu, 60 až 70% směs ethylacetátu a hexanu) poskytla 795 mg (94 %) 6-[2-(methylkarbamoyl)fenylsulfanyl]-3“E-[2-(pyridin-2-yl)ethenyl]-l-[2-(trimethylsilanyl)ethoxymethyl]-l H-indazolu jako pevné látky: Rf sm 0,35, p 0,23 (směs ethylacetátu a hexanu 6:4), FTIR (tenký film) 3306, 2951, 1643, 1606, 1587, 1563, 1469, 1433, 1410, 1303, 1249, 1217, 1075,836 em ', 'H NMR (300 MHz, CDCI,) o 8,70 (m, 1H), 8,06 (d, 1H, J = 8,4 Hz), 7,94 (d, IH, J = 16,3 Hz), 7,74(dt, IH, J = 1,8,7,7 Hz), 7,70-7,60(m,3H),7,52(d, IH, J-7,9 Hz), 7,35 - 7,20 (m, 5H), 6,45 (šs, IH), 5,80 (s, 2H), 3,62 (t, 2H), 3,00 (d, 3H), 0,93 (t, 2H), -0,05 (s,9H), l3C NMR (75 MHz, CDCI,) δ 179,7, 169,9, 156,8, 151,1, 144,2, 143,0, 138,1, 136,1, 135,4, 133,2, 132,2, 132,1, 130,2, 128,5, 127,2, 124,7, 124,1, 123,8, 123,5, 123,3, 114,9, 68,1, 28,2, 19,2, 0,00, LCMS (100% oblast) Rt - 4,15 minuty (poz) [M+H]/z vypočteno 517,2, změřeno 517,2.
Příklad 33(b)
6-[2-(2-methylchinol-6-yIkarbamoyl)fenylsulfanyl]-3-E-[2-(pyridin-2-yl)ethenyl]-lH25 indazol
Sloučenina z příkladu 33(b) byla připravena podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 33(a) kromě toho, že v kroku (v), 6-amino~2-methylchinolin byl použit namísto methylaminu: 1 HNMR (300 MHz, CDCh) δ 10,2 (š s, IH), 8,64 (m, IH), 8,40 (s, IH), 8,23 (s, IH), 7,98-7,80 so (m, 4H), 7,69 (dt, IH, J= 1,7, 7,7 Hz), 7,55 - 7,40 (m, 7H), 7,25 - 7,16 (m, 3H), 2,71 (s, 3H).
Příklad 33(c)
6-[2-(fenylkarbamoyl)fenylsulfanyl]-3-E-[2-(pyrídin-2-yl)ethenyl]-l H-indazol
- 122*
VZj JU1OO ! DO
Sloučenina z příkladu 33(c) byla připravena podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 33(a) kromě toho, že v kroku (v), anilin byl použit namísto methylaminu: 'HNMR (300 MHz, DMSO-db) δ 13,35 (s, IH), 10,53 (s, IH), 8,67 (m, IH), 8,22 (d, IH, J = 7,5 Hz), 7,99 (d, IH,
J = 16,4 Hz), 7,85 (dt, IH, J- 1,8, 7,6 Hz), 7,80- 7,55 (m, 5H), 7,45-7,10 (m,9H), LCMS (100% oblast) Rt = 3,86, (poz) [M+H]/z vypočteno 449,1, změřeno 449,1. Analyzováno s 0,41 H2O, vypočteno: C (71,13), H (4,60), N (12,29), S (7,03). Změřeno: C (71,04), H (4,62), N (12,31), S (7,01).
to
Příklad 33(d)
6-[2-(3-chlorfenylkarbamoyl)fenyisulfányl]-3-E-[2-(pyridin-2-yl)ethenyl]-l H-indazol
Sloučenina z příkladu 33(d) byla připravena podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 33(a) kromě toho, že v kroku (v), 3-chloranilin byl použit namísto methylaminu: 'HNMR (300 MHz, CDCh) δ 8,53 (m, IH), 7,92 (d, IH, J= 8,4 Hz), 7,77 (d, IH, J= 16,4 Hz), 7,68 (dt, IH, J= 1,7, 7,7 Hz), 7,64- 7,56 (m, 2H), 7,51 - 7,43 (m, 3H), 7,35- 7,28 (m, 4H), 7,19-7,12 (m, 3H), 7,02 (m, IH), LCMS (100% oblast) Rt 3,98 minuty (poz) [M+H]/z vypočteno 483,1, změřeno 483,1, Analyzováno s 0,3 H2O, vypočteno: C (66,40), H(4,05), Ν (11,47), S (6,57). Změřeno: C (66,36), H (4,08), Ν (l 1,49), S (6,55).
Příklad 33(e)
6-[2~(cyklopropylkarbamoyl)fenylsulfanyl]-3-E-[2-{pyTÍdÍn-2-yl)ethenyl]-l H-indazol
Sloučenina z příkladu 33(e) byla připravena podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 33(a) kromě toho, že v kroku (v), cyklopropy lamin byl použit namísto methylaminu: 'HNMR (300 MHz, DMSO-dé) δ 13,45 (s, IH), 8,73 (d, IH, J = 3,9 Hz), 8,56 (d, IH, J = 4,3 Hz), 8,31 (d, IH, J= 8,5 Hz), 8,08 (d, IH, J= 16,4 Hz), 7,92 (dt, IH, J= 1,7, 7,7 Hz), 7,78 (d, IH, J = 7,8Hz), 7,70 (m,2H), 7,57 (m, IH), 7,40 (m, 3H), 7,30 (d, IH, J= 8,4 Hz), 7,20 (d, IH, J = 7,8Hz), 2,94 (m, IH), 0,80 (m, 2H), 0,65 (m, 2H), LCMS (100% oblast) Rt 3,51 minuty (poz) [M+H]/z vypočteno 413,1, změřeno 413,1.
-123 CZ 301667 B6
Příklad 33(0
6-[2-(2,2,2-trifluorethylkarbamoyl)fenylsulfanyl]-3-E-[2-(pyridin-2-yl)ethenyl]-l H-indazol
Sloučenina z příkladu 33(0 byla připravena podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 33(a) kromě toho, že v kroku (v), 2,2,2-trifluorethylamin byl použit namísto methylaminu: ‘HNMR (300MHz, DMSO-dé) δ 13,5 (s, IH), 9,29 (t, IH, J= 6,3 Hz), 8,74 (m, IH), 8,37 (d, IH, J= 8,3 Hz), 8,10 (d, IH, J = 16,4 Hz), 7,94 (dt, IH, J = 1,8, 7,6 Hz), 7,80 (d, IH, J = 7,9 Hz), 7,75 - 7,65 (m, 3H), 7,55 - 7,40 (m, 3H), 7,33 (d, IH), 7,22 (d, IH), 4,22 (m, 2H), io LCMS (100% oblast) Rt = 3,70 minuty (poz) [M+H]/z vypočteno 455,1, změřeno 455,1.
Příklad 33(g)
Tetrabutylamonium-6-[2-(karboxy)fenylsulfanyl]-3-E-[2-{pyridin-2-yl)ethenyl]-l H-indazolu
Sloučenina z příkladu 33(g) byla připravena podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 33(a) kromě toho, že byl vynechán krok (v), Rf sm 0,41, p 0,0 (směs ethylacetátu a hexanu 8:2), ‘HNMR (300 MHz, DMSO-dé) δ 8,75 (m, IH), 8,25 (d, IH, J = 8,6 Hz), 8,05 (d, 1H, 16,4 Hz),
7,88 (df IH, J = 1,8, 7,8 Hz), 7,83 - 7,60 (m, 4H), 7,33 (m, 2H), 7,16 (m, 2H), 6,70 (m, IH),
3,30 (m, 8H), 1,70 (m, 8H), 1,42 (m, 8H), 1,05 (t, 12H), LCMS (100% oblast) Rt 3,24 (poz) [M+H (kyselá složka pouze)]/z vypočteno 374,1, změřeno 374,1. Analyzováno s 0,1 H2O, vypočteno: C (72,07), H (8,21), N (9,09), S (5,20). Změřeno: C (72,04), H (8,29), N (9,06), S (5,12).
Příklad 33(h)
6-[2--{3-chlorfenylkarbamoyl)fenylsulfanyl'|-3-Z-[2-(pyridin-2-yl)ethenyl]-l H-indazol
Sloučenina z příkladu 33(h) byla připravena stejnou reakcí jako sloučenina z příkladu 33(d). Je nutné poznamenat, že ačkoliv tato sloučenina byla izolována a charakterizována jako čistá, bylo zjištěno, že vytvářela izomer k příkladu 33(d) v podmínkách testu. ‘HNMR (300 MHz, CDC13) δ 8,82 (m, IH), 8,31 (s, IH), 7,86 (m, 2H), 7,77 (m, 2H), 7,61 (t, IH, J = 2,0 Hz), 7,46 (d, IH, J = 8,0 Hz), 7,33 (m, 5H), 7,21 (t, IH, J = 8,0 Hz), 7,13 (dd, IH, J = 1,5, 8,1 Hz), 7,08 (m, IH),
6,988 (d, IH, J = 13,0 Hz), 6,66 (d, 1H,J= 13,1 Hz), LCMS (100% oblast) Rt 4,40 minuty (poz)
- 124CL JU100/ BO (M+H)]/z vypočteno 483,1, změřeno 483,1. Analyzováno s 0,3 H2O, vypočteno: C (66,40), H (4,05), N (11,47), S (6,57). Změřeno: C (66,36), H (4,08), N (11,49), S (6,55).
Příklad 34
6-[2-((RS-(trans-2-fenylcyklopropyl)karbamoyl)fenylsulfanyl]-3-E-[24pyridin-2-yl)-
io Sloučenina z příkladu 33(g) byla konvertována na sloučeninu z příkladu 34 podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 33(a), krok (v), kromě toho, že trans-2-fenylcyklopropylamin byl použit namísto methylaminu: FTIR (tenký film) 1704, 1638, 1584, 1559, 1530, 1497, 1460, 1430, 1339, 1306, 1269, 1223, 1152, 1086, 1061, 966, 844cm1, 'HNMR (300 MHz, CDCI,) δ 13,3 (s, IH), 8,71 (d, IH, J = 4,4 Hz), 8,61 (d, IH, J = 3,9 Hz), 8,20 (d, IH, J= 8,5 Hz), 7,96 (d,
IH, J= 16,4 Hz), 7,59-7,50 (m, 3H), 7,37- 7,25 (m, 5H), 7,21-7,08 (m, 5H), 3,01 (m, IH), 2,03 (m, IH), 1,25 (m, 2H), LCMS (100% oblast) Rt = 3,72 minuty (poz) [M+H]/z vypočteno 489,2, změřeno 489,2. Analyzováno s 0,6 MeOH, 0,16 CH2C12 vypočteno: C (70,86), H (5,17), N (10,75), S (6,15). Změřeno: C (70,87), H (5,18), N (10,75), S (5,96).
Příklad 35(a)
6-[2-(n-propylkarbamoyl)fenylsulfanyl]-3-E-[2-{pyridin“2-yl)ethenyl]-l H-indazol
60 mg (0,1112 mmol) 6-[2-(pentafluorfenoxykarbonyl)fenylsulfanyl]-3-E-[24pyridin-2-yl)ethenyl]—1 H-indazolu bylo rozpuštěno v 0,88 ml DMF, podrobeno působení 11 μΙ (0,1335 mmol) n-propylaminu a mícháno pri teplotě místnosti. HPLC analýza po 15 minutách prokázala, že všechna výchozí látka byla spotřebována.Reakční směs byla koncentrována na rotační odparce za vysokého vakua, za vzniku pevné látky. Pevná látka byla son i kována s CH2C12 za vzniku jemné suspenze, která byla filtrována a promyta CH2C12 za vzniku 40 mg (87% výtěžek) sloučeniny uvedené v názvu. 'HNMR (DMSO-dj δ 13,31 (s, IH), 8,60 (d, J = 4,0 Hz, IH), 8,41 (t, J = 6,2 Hz, IH), 8,19 (d, J = 8,5 Hz, IH), 7,94 (m, 3H), 7,81 (dt, J = 1,7, 7,5 Hz, IH), 7,66 (t, J = 8,7 Hz, IH), 7,56 (m, 2H), 7,47 (m, IH), 7,30 (m, 3H), 7,18 (d, T = 8,3 Hz, IH), 3,20 (q, J = 6,0 Hz, 2H), 1,55 (septet, J = 5,9 Hz, 2H), 0,92 (t, J = 6,0 Hz, 3H). Anal. výpočet pro
C24H22N4OS (1,5 H2O, 0,8 DMF): C, 63,41, H, 6,17, N, 13,45, S, 6,41. Změřeno: C, 63,37, H, 5,68, N, 13,44, S, 6,32.
Výchozí látka byla připravena takto:
- 125CZ 301667 B6
Roztok 615 mg (1,0 mmol) tetrabuty lamon i um-6-(2-karboxy feny Isulfany 1)—3—E—[2—(pyridin-2yl)ethenyl]-l H-indazolu rozpuštěné v 10,0 ml suchého DMF byl podroben působení 89 μί (1,1 mmol) pyridinu a 206 μί (1,2 ekv.) pentafl uorfeny Itrifluoracetátu, při teplotě místnosti, v argonové atmosféře. HPLC analýza po 45 minutách prokázala hlavně nezreagovanou karboxylovou kyselinu, takže bylo přidáno dalších 89 μΐ (1,1 mmol) pyridinu a 206 μί (1,2 ekv.) pentafluorfenyltrifluoracetátu. HPLC analýza 15 minut později ukázala, že výchozí kyselina byla zcela spotřebována. Reakční směs byla koncentrována za vysokého vakua na rotační odparce, pak triturována CH2CI2 (~l ml), což způsobilo vytvoření krystalů, které byly sbírány filtrací, promyty io dalším CH2C12 a usušeny. Hmotnost jasně žlutých krystalů byla 336 mg. Zbylý filtrát byl koncentrován a purifikován velmi rychlou chromatografií (10% směs acetonitrilu a CH2C12 až 80% směs acetonitrilu a CH2C12), poskytující dalších 70 mg pevné látky. Celkový výtěžek
6-[2-(pentafluorfenoxykarbonyl)fenylsulfanyI]-3-E-[2-(pyridin-2-yl)ethenyl]-l H-indazolu bylo 406mg neboli 89%. 'HNMR (CDC13) δ 10,22 (IH, bs), 8,66 (IH, d, J= 4,5 Hz), 8,28 (2H, dd, J= 7,7, 1,5 Hz), 8,15 (IH, d, J= 8,5 Hz), 7,97 (IH, d, J= 16,2 Hz), 7,79 (lH,s),
7,15 - 7,75 (7H, m), 6,92 (1H, d, J = 8,1 Hz).
Příklad 35(b)
6-[2-(i-propylkarbamoyl)fenylsulfanyl]“3-E-[2-(pyridin-2-yl)ethenyl]-l H-indazol
Sloučenina z příkladu 35(b) byla připravena podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 35(a) kromě toho, že isopropylamin byl použit namísto n-propylaminu. 'HNMR (DMSO-d6) δ 13,30 (s, IH), 8,60 (d, J = 4,5 Hz, IH), 8,26 (d, J = 7,34 Hz, IH), 8,19 (d, J = 8,3 Hz, IH), 7,94 (d, J = 16,4 Hz, IH), 7,80 (dt, J = 1,7, 7,5 Hz, IH), 7,66 (d, J = 7,7 Hz, IH), 7,56 (m, 2H), 7,45 (m, IH), 7,30 (m, 3H), 7,18 (d, J = 8,5 Hz, IH), 7,08 (m, IH), 4,04 (septet, J = 7,4 Hz, IH), 1,15 (d, J= 6,6 Hz, 6H). Anal. výpočet pro C24H22N4OS · 1,7 H2O: C, 64,75, H, 5,75, N, 12,59,
S, 7,20. Změřeno: C, 64,79, H, 5,36, N, 12,74, S, 7,08.
Příklad 35(c)
6-[2-(cyklobutylkarbamoyl)fenylsulfanyl]-3-E™[24pyridin-2-yl)ethenyI]-! H-indazol
- 126JU100/ »0
Sloučenina z příkladu 35(c) byla připravena podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 35(a) kromě toho, že i cyklobutylamin byí použit namísto n-propylaminu. 'H NMR (DMSO-d6) δ 13,31 (s, IH), 8,62 (m, 2H), 8,19 (d, J = 8,5 Hz, IH), 7,94 (m, 2H), 7,80 (dt = 1,7, 7,5 Hz, 1H),
7,65 (t, J = 8,1 Hz, IH), 7,56 (s, IH), 7,47 (m, IH), 7,30 (m, 3H), 7,17 (d, J = 8,3 Hz, IH), 4,36 (septet, J = 8,1 Hz, IH), 2,22 (m, 2H), 2,03 (m, 2H), 1,67 (m, 2H). Anal. výpočet pro C25H22N4OS (0,5 H2O, 0,9 DMF): C, 66,36, H, 5,89, N, 13,69, S, 6,40. Změřeno: C, 66,21, H, 5,78, N, 13,82, S, 6,36.
Příklad 35(d)
6-{2-karbamoylfenylsulfanyl}-3-E-[2-{pyridin-2-yl)ethenyl]-I H-indazol
Sloučenina z příkladu 35(d) byla připravena podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 35(a) kromě toho, že čpavek byl použit namísto n-propylaminu. ’HNMR (DMSO-dé) δ 8,60 (d, J = 4,9 Hz, IH), 8,21 (d, J = 8,3 Hz, IH), 7,94 (m, 3H), 7,81 (dt, J = 1,7, 7,5 Hz, IH), 7,60 (m,4H), 7,48 (šs, IH), 7,25 (m, 4H), 7,0 (m, IH). Anal. výpočet pro C21Hi6N4OS · 0,25 H2O: C, 66,91, H, 4,41, N, 14,86, S, 8,51. Změřeno: C, 66,99, H, 4,40, N, 15,10, S, 8,49.
Příklad 35(e)
6~[2-((l-methylpyrol-2“ylhydrazido)karbonyl)ťenylsulťanyl]-3-E-[2-(pyridin-2-yi)ethenyl]25 1 H-indazol
Sloučenina z příkladu 35(e) byla připravena podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 35(a) kromě toho, že l-methylpyrol-2-ylhydrazid byl použít namísto n-propylaminu. ’HNMR (DMSO-d6) δ 13,34 (s, IH), 10,25 (s, IH), 10,45 (s, IH), 8,60 (d, J= 4,5 Hz, IH), 8,22 (d,J = 8,7Hz, 1H), 7,95 (d, J = 16,2 Hz, IH), 7,81 (dt, J = 1,7,7,5 Hz, IH), 7,66 (m, 3H), 7,57 (d, J = 16,0 Hz, IH), 7,43 - 7,18 (m, 4H), 7,07 (d, J = 7,9 Hz, IH), 7,00 (d, J = 3,4 Hz, 2H), 6,07 (t, J = 3,2 Hz, IH), 3,88 (s, 3H). Anal. výpočet pro C27H22N6O2S * 0,6 H2O: C, 64,17, H, 4,63, N, 16,63, S, 6,34. Změřeno: C, 64,24, H, 4,48, N, 16,56, S, 6,28.
- 127CZ 301667 B6
Příklad 35(f)
6^[2-((2-fluorbenzyl)methylkarbamoyl)fenylsulfanyl]“3-E-[2-(pyridin-2-yl)ethenyl]-lHindazol
Sloučenina z příkladu 35(0 byla připravena podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 35(a) kromě toho, že 2-fluorbenzylamin byl použit namísto n-propylaminu. lHNMR (DMSO-dé) δ 13,31 (s, 1H), 8,99 (t, J = 5,8 Hz, 1H), 8,61 (d, J = 4,5 Hz, 1H), 8,19 (d, J = 8,5 Hz, IH), 7,94 (d, J= 16,2 Hz, IH), 7,81 (dt, J = 1,7, 7,5 Hz, IH), 7,66 (d, J = 8,1 Hz, IH), 7,56 io (m, 3H), 7,47 (t, J = 7,9 Hz, IH), 7,31 (m, 4H), 7,15 (m,4H), 4,51 (d, J = 5,7 Hz, 2H). Anal. výpočet pro C28H2iFN4OS - 0,25 H2O: C, 69,33, H, 4,47, N, 11,55, S, 6,61. Změřeno: C, 69,32,
H, 4,41, N, 11,58, S, 6,59.
Příklad 35(g)
6-[2-{(4-methoxybenzyl)methylkarbamoyl)fenyÍsulfanyl]-3-E-[2-(pyridin-2-yl)ethenyl]-lHindazol
Sloučenina z příkladu 35(g) byla připravena podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 35(a) kromě toho, že 4-methoxybenzylamin byl použit namísto n-propylaminu. 'HNMR (DMSO-d6) δ 13,31 (s, IH), 8,90 (t, J - 5,5 Hz, IH), 8,60 (d, J = 4,2 Hz, IH), 8,19 (d, J = 83 Hz, IH), 7,95 (d, J = 16,3 Hz, IH), 7,81 (dt, J - 1,7, 7,5 Hz, IH), 7,66 (d, J = 7,9 Hz, IH), 7,55 (m, 3H), 7,30 (m, 5H), 7,18 (d, J = 8,5 Hz, IH), 7,10 (d, J - 8,3 Hz, IH), 4,39 (d, J = 6,0 Hz, 2H),
3,72 (s, 3H). Anal. výpočet pro C2$H24N4O2S 0,6 H2O: C, 69,19, H, 5,05, N, 11,13, S, 6,37.
Změřeno: C, 69,12, H, 4,85, N, 11,24, S, 6,35.
Příklad 35(h) ó-[2-((5-methylfur-2-yl)methylkarbamoyl)fenylsulfanyl]-3-E-[2-(pyridin-2-yl)ethenyl]-ÍHindazol
- 128Sloučenina z příkladu 35(h) byla připravena podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu
35(a) kromě toho, že 5-methy lfur-2-y lamin byl použit namísto n-propylaminu. lHNMR (DMSO-dé) δ 13,31 (s, IH), 8,88 (t, J = 5,3 Hz, IH), 8,60(d, J = 4,3 Hz, IH), 8,19 (d, J = 8,3 Hz,
IH), 7,95 (d, J= 16,3 Hz, IH), 7,81 (dt, J- 1,7, 7,5 Hz, IH), 7,66 (d, J= 8,1 Hz, IH), 7,54 (m, 3H), 7,30 (m, 4H), 7,18 (d, J = 8,3 Hz, IH), 7,06 (d, J = 8,1 Hz, 3H). Anal. výpočet pro
C27H22N4O2S 0,4 H2O: C, 68,45, H, 4,85, N, 11,83, S, 6,77. Změřeno: C, 68,35, H, 4,80, N, 11,85, S, 6,68.
CL JIH 00/ DO io Příklad 35(i)
6-[2-(benzyloxykarbamoyl)fenylsulfanyl]-3-E-[2-(pyridin-2-yl)ethenyl]-l H-indazol
Sloučenina z příkladu 35(i) byla připravena podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 15 35(a) kromě toho, že O-benzylhydroxylamin byl použit namísto n-propylaminu. *HNMR (DMSO-Λ) δ 13,31 (s, IH), 11,64 (s, IH), 8,90 (t, J = 5,5 Hz, IH), 8,60 (d, J = 4,1 Hz, 1H), 8,19 (d, J = 8,3 Hz, IH), 7,95 (d, J = 16,3 Hz, IH), 7,81 (dt, J = 1,7, 7,5 Hz, IH), 7,66 (d, J = 7,9 Hz, 1H), 7,56 (m, 2H), 7,50 - 7,24 (m, 9H), 7,17 (t, J = 8,5 Hz, 2H), 4,94 (s, 2H). Anal. výpočet pro C28H22N4O2S ’ 0,8 H2O: C, 68,22, H, 4,83, N, 11,37, S, 6,50. Změřeno: C, 68,08, H, 4,65,
N, 11,41, S, 6,47.
Příklad 35(j)
6-[2-(allyloxykarbamoyl)fenylsuIfanyl]-3-E-[2-(pyridin-2-yl)ethenyl]-l H-indazol
Sloučenina z příkladu 35(j) byla připravena podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 35(a) kromě toho, že O-allylhydroxylamin byl použit namísto n-propylaminu. lH\MR (DMSO-dó) δ 13,32 (s, IH), 11,56 (s, IH), 8,60 (d, J = 4,1 Hz, IH), 8,19 (d, J = 8,3 Hz, IH),
7,95 (d, J = 16,5 Hz, IH), 7,81 (dt, J = 1,7, 7,5 Hz, IH), 7,66 (d, J = 7,9 Hz, IH), 7,56 (m, 2H),
7,48 - 7,24 (m, 5H), 7,16 (m, 2H), 6,00 (m, IH), 5,37 (d, J = 18,3 Hz, IH), 5,27 (d, J = 11,3 Hz, IH), 4,42 (d, J = 6,0 Hz, IH). Anal. výpočet pro C24H20N4O2S (0,2 H2O, 0,2 CH2CI2: C, 65,35, H, 4,96, N, 12,10, S, 6,92. Změřeno: C, 65,24, H, 4,50, N, 12,56, S, 7,17.
Příklad 35(k)
6-[2-(isopropoxykarbamoyl)fenylsulfanyl]-3-E-[2-(pyridin-2-yl)ethenyl]-l H-indazol
- 129CZ 301667 B6
Sloučenina z příkladu 35(k) byla připravena podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 35(a) kromě toho, že O-isopropylhydroxylamin byl použit namísto n-propylaminu. 'HNMR (DMSO-dé) δ 13,30 (s, IH), 11,33 (s, IH), 8,60 (d, J= 4,1 Hz, IH), 8,19 (d, J = 8,3 Hz, IH),
7,95 (d, J= 16,5 Hz, IH), 7,81 (dt, J = 1,7, 7,5 Hz, 1H), 7,66 (d, J = 7,9 Hz, IH), 7,55 (m, 2H),
7,48 - 7,24 (m, 4H), 7,17 (d, J = 8,3 Hz, 2H), 4,12 (septet, J = 5,7 Hz, IH), 1,21 (d, J = 6,2 Hz, 6H. Anal. výpočet pro C24H22N4O2S (0,4 H2O, 0,7 CH2C12): C, 59,67, H, 4,91, N, 11,27, S, 6,45. Změřeno: C, 59,61, H, 4,81, N, 11,42, S, 6,45.
Příklad 35(1)
6-[2-((4-aminobenzyl)methylkarbamoyI)fenylsulfanyl]-3-E-[2-(pyridin-2-yl)ethenyl]-lHíndazol
Příklad 35(1) byl připraven podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 35(a) kromě toho, že 4-aminobenzylamin byl použit namísto n-propylaminu. 'H NMR (DMSO-d<,) δ 13,31 (s, IH), 8,78 (t, J = 6,0 Hz, IH), 8,60 (d, J = 4,3 Hz, IH), 8,19 (d, J = 8,1 Hz, IH), 7,95 (d, J = 16,3 Hz, IH), 7,85 (š s, IH), 7,81 (dt, J = 1,7, 7,5 Hz, IH), 7,66 (d, J = 7,9 Hz, IH), 7,59 (s, IH), 7,51 (m, 2H), 7,30 (m, 3H), 7,19 (d, J = 8,7 Hz, IH), 7,05 (m, 3H), 6,56 (d, J = 8,7 Hz, IH), 6,51 (d, J - 8,5 Hz, 2H), 4,29 (d, J = 6,0 Hz, 2H). Anal. výpočet pro C28H23N5OS · 0,6 H2O: C, 68,86, H, 4,99, N, 14,34, S, 6,57. Změřeno: C, 68,83, H, 4,80, N, 14,16, S, 6,52.
Příklad 35(m)
6-[2-((thien-2-ylhydrazido)karbonyl)fenylsulfanyl]-3-E-[2-(pyridin-2-yl)ethenyl]-lHindazol
Sloučenina z příkladu 35(m) byla připravena podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 35(a) kromě toho, že thien-2-ylhydrazid byl použit namísto n-propylaminu. ]H NMR (DMSO- 130CZ 3U100/ Bt>
dó) δ 13,49 (š s, IH), 10,64 (s, IH), 10,47 (s, IH), 8,66 (d, J = 4,0 Hz, IH), 8,22 (d, J = 85 Hz,
5H), 7,66 (m 3H), 7,39 (m, 3H), 7,24 (m, 2H), 7,09 (d, J = 8,1 Hz, IH), 7,00 (d,
J = 3,4 Hz, 2H), 6,07 (t, J = 3,2 Hz, IH), 3,88 ($, 3H). Anal. výpočet pro C26H19N5O2S2 · 1,5 H2O:
C, 59,52, H, 4,23, N, 13,35, S, 12,22, Změřeno: C, 59,56, H, 4,42, N, 13,33, S, 11,75.
Příklad 35(n)
6-[2-{N2-(pyrid-2-ylhydrazino)karbonyl)fenylsulfanylJ_3-E-[2-(pyridin-2-yl)etheny]]-l Hto indazol
Sloučenina z příkladu 35(n) byla připravena podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 35(a) kromé toho, že 2-hydrazinopyridin byl použit namísto n-propylaminu. 'HNMR (DMSOdó) δ 13,31 (s, IH), 10,30 (s, IH), 8,60 (d, J = 4,4 Hz, IH), 8,48 (s, IH), 8,21 (d, J = 8,5 Hz, IH),
8,09 (d, J = 4,9 Hz, IH), 7,94 (d, J = 16,4 Hz, IH), 7,81 (dt, J = 1,7, 7,5 Hz, IH), 7,67 (m, IH),
7,62- 7,47 (m, 3H), 7,40 (m, 2H), 7,31, 7,12 (m, 3H), 6,73 (m, 2H). Anal. výpočet pro C26H2ŮN6OS· 0,3 H2O: C, 66,45, H,4,42, N, 17,88, S, 6,82. Změřeno: C, 66,33, H,4,50, N, 17,78, S, 6,60.
Příklad 35(o)
6-[2-(N-hydroxy-N-methylkarbamoyl)fenylsulfanyl]-3“E-[2-(pyridin-2-yl)ethenyl]-l Hindazol
Sloučenina z příkladu 35(o) byla připravena podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 35(a) kromě toho, že N-methy 1 hydroxy lamin byl použit namísto n-propy laminu. 'HNMR (DMSO-d6) δ 13,24 (s, IH), 9,94 (s, IH), 8,60 (d, J - 4,0 Hz, IH), 8,14 (d, J = 8,3 Hz, IH), 7,92 (d, J = 16,2 Hz, IH), 7,80 (dt, J = 1,7, 7,5 Hz, IH), 7,65 (t, J = 8,5 Hz, IH), 7,54 (d, J = 16,5 Hz,
IH), 7,47- 7,24 (m, 6H), 7,16 (d, J= 8,5 Hz, IH), 3,24 (š s, IH). Anal. výpočet pro C22H18N4O2S · (0,5 H2O, 0,3 CH2C12): C, 61,29, H, 4,52, N, 12,82, S, 7,34. Změřeno: C, 61,24, H, 4,33, N, 12,67, S, 7,34.
-131 CZ 301667 B6
Příklad 35(p)
6-[2-((pyrid-4-yl)methylkarbamoyl)fenylsulfanyl]-3-E-[2-(pyridin-2-yl)ethenyl]-l H-indazol
Sloučenina z příkladu 35(p) byla připravena podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 35(a) kromě toho, že 4-aminomethylpyridin byl použit namísto n-propylaminu. 'HNMR (DMSO-dó) δ 13,31 (š s, IH), 9,07 (t, J= 6,8 Hz, IH), 8,60 (d, J= 4,2 Hz, IH), 8,48 (d, J = 5,0 Hz, IH), 8,19 (d, J = 8,7 Hz, IH), 7,95 (d, J = 16,4 Hz, IH), 7,80 (dt, J = 1,7, 7,5 Hz, IH), 7,68-7,52 (m, 3H), 7,42 (m, 2H), 7,39 - 7,31 (m, 3H), 7,27 (m, IH), 7,20 7,10 (m, 2H), ío 4,48 (d, J = 6,2 Hz, 2H).
Příklad 35(q)
6-[2-((2-methylfenylhydrazido)karbonyl)fenylsulfanyl]-3-E-[2-(pyndin-2-yl)ethenyl]-lHindazol
Sloučenina z příkladu 35(q) byla připravena podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 35(a) kromě toho, že 2-methylfenylhydrazid byl použit namísto n-propylaminu. 'HNMR (DMSO-d6) δ 13,43 (š s, IH), 10,45 (s, IH), 10,28 (s, IH), 8,64 (d, J= 4,0Hz, IH), 8,22 (d, J = 8,2 Hz, IH), 8,01 (d, J = 16,6 Hz, IH), 7,92 (m, IH), 7,81 (m, IH), 7,69 (m, IH), 7,60 (d, J = 16,4 Hz, 1H), 7,50 - 7,22 (m, 8H), 7,07 (d, J = 7,7 Hz, 1H), 2,45 (s, 3H).
Příklad 35(r)
6-[2-(methoxykarbamoyl)fenylsulfanyl]-3-E-[2-(pyridin“2~yl)ethenyl]-l H-indazol
Sloučenina z příkladu 35(r) byla připravena podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 30 35(a) kromě toho, že O-methylhydroxylamÍn byl použit namísto n-propylaminu, 'HNMR (DMSO-d6) δ 13,32 (s, IH), 11,60 (s, IH), 8,60 (d, J = 3,6 Hz, IH), 8,19 (d, J = 8,4 Hz, IH), 7,95 (d, J - 16,2 Hz, IH), 7,81 (dt, J = 1,7, 7,5 Hz, IH), 7,66 (d, J = 7,9 Hz, IH), 7,56 (m, 2H), 7,47 (dd, J = 7,4, 1,7 Hz, IH), 7,43 - 7,24 (m, 3H), 7,17 (m, 2H), 3,72 (s, 3H). Anal. výpočet pro
-132CL JU1007 BO
C22H18N4O2S O,6CH2C12: C, 59,86, H, 4,27, N, 12,36, S, 7,07. Změřeno: C, 59,94, H, 4,40,
N, 12,00, S, 6,80.
Příklad 35(s)
6-[2-((cyklopropyl)methoxykarbamoyl)fenylsulfanyl]-3-E-[2-(pyridin-2-yl)ethenyl]-lHindazol
io Sloučenina z příkladu 35(s) byla připravena podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 35(a) kromě toho, že O-cyklopropylhydroxy lamin byl použit namísto n-propylaminu, 'HNMR (DMSOA) δ 13,38 (s, IH), 11,51 (s, IH), 8,64 (d, J = 3,8 Hz, IH), 8,18 (d, J = 8,4 Hz, IH), 8,00 (d, J = 16,4 Hz, IH), 7,86 (m, 2H), 7,63 - 7,52 (m, 2H), 7,49 - 7,29 (m,4H), 7,17 (m, 2H), 3,70 (d, J= 7,2 Hz, IH), 1,10 (m, IH), 0,53 (m, 2H), 0,27 (m, 2H). Anal, výpočet pro
C25H22N4O2S · 1,6 H2O: C, 63,70, H, 5,39, N, 11,89, S, 6,80. Změřeno: C, 63,58, H, 4,95,
Ν, 11,71, S, 6,66.
Příklad 35(t)
6-[2-(n-propoxykarbamoyl)fenylsulfanyl]-3-E-[2-(pyridin-2-yl)ethenyl]-l H-indazol
Sloučenina z příkladu 35(t) byla připravena podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 35(a) kromě toho, že O-n-propyl hydroxy lamin byl použit namísto n-propyl aminu. ‘HNMR (DMSCMUjÓ 13,31 (s, IH), 11,48 (s, IH), 8,60 (d, J = 3,8 Hz, IH), 8,19 (d, J = 8,4 Hz, IH), 7,95 (d, J= 16,2 Hz, IH), 7,81 (dt, J = 1,7, 7,5 Hz, IH), 7,66 (d, J = 7,9 Hz, IH), 7,60-7,52 (m, 2H), 7,49 - 7,24 (m, 4H), 7,17 (m, 2H), 3,84 (t, J = 6,6 Hz, 2H), 1,62 (septet, J = 6,4 Hz, 2H), 0,92 (t, J = 6,1 Hz, 3H). Anal. výpočet pro C24H22N4O2S · (0,5 H2O, 0,25 CH2C12): C, 63,21, H, 5,14, N, 12,16, S, 6,96. Změřeno: C, 63,15, H, 5,13, N, 12,17, S, 6,99.
Příklad 35(u)
6-[2-(allylkarbamoyl)fenylsulfanyl]-3~E-[2-(pyridin-2-yl)ethenyl]-l H-indazol
- 133CZ 301667 B6
Sloučenina z příkladu 35(u) byla připravena podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu
35(a) kromě toho, že allylamin byl použit namísto n-propyl aminu. 'HNMR (DMSO-d6) δ 13,31 (s, IH), 8,60 (m, 2H), 8,19 (d, J - 8,5 Hz, IH), 7,93 (d, J = 16,3 Hz, 3H), 7,79 (dt, J = 1,7,
7,5 Hz, IH), 7,64 (m, IH), 7,60- 7,48 (m, 3H), 7,37 - 7,23 (m, 3H), 7,17 (d, J = 8,5 Hz, IH),
7,07 (m, 1H), 5,87 (m, 1H), 5,25 (dq, J = 17,33, 1,9 Hz, 1H), 5,09 (dq, J = 10,2, 1,9 Hz, 1H), 3,87 (m, 2H). Anal. výpočet pro C24H20N4OS · 0,8 CH2CI2: C, 62,00, H, 4,53, N, 11,66, S, 6,67. Změřeno: C, 62,08, H, 4,73, N, 11,99, S, 6,66. MALDI FTMS (MH+) vypočteno: 413,1431, změřeno: 413,1449.
io
Příklad 35(v)
6-[2-(cyklopropy Imethy Ikarbamoy l)feny Isulfany l]-3-E-[2-(pyridin-2-yl)ethenyl]-l H-indazol
Sloučenina z příkladu 35(v) byla připravena podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 35(a) kromě toho, že cyklopropy Imethy lamin byl použit namísto n-propy laminu. 'HNMR (DMSO-dó)δ 13,30 (s, IH), 8,60 (d, J = 4,0 Hz, IH), 8,48 (t, J = 5,3 Hz, IH), 8,17 (d, J = 8,7 Hz, IH), 7,90 (d, J = 16,4 Hz, IH), 7,80 (dt, J = 1,7, 7,5 Hz, IH), 7,67 - 7,45 (m, 4H), 7,33 - 7,23 (m, 3H), 7,18 (d, J = 83 Hz, IH), 7,06 (m, IH), 3,13 (t, J = 6,2 Hz, 2H), 1,00 (m, IH), 0,41 (m, IH), 0,24 (m, IH). Anal. výpočet pro C25H22N4OS · 0,5 CH2C12: C, 65,30, H, 4,94, Ν, 11,95,
S, 6,84. Změřeno: C, 65,10, H, 4,93, N, 12,04, S, 6,82. MALDI FTMS (MH+) vypočteno 427,1587, změřeno 427,1605.
Příklad 35(w)
6-[2-(kyanomethylkarbamoyl)fenylsulfanyl]-3-E-[2-(pyridin-2-yl)ethenyl]-l H-indazol
Sloučenina z příkladu 35(w) byla připravena podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 30 35(a) kromě toho, že aminoacetonitril byl použit namísto n-propyl aminu. 'HNMR (DMSO~d6) δ 13,35 (s, IH), 9,19 (t, J = 5,3 Hz, IH), 8,60 (d, J = 4,8 Hz, IH), 8,20 (d, J = 8,7 Hz, IH), 7,94 (d, J = 16,4 Hz, 3H), 7,79 (dt, J = 1,7, 7,5 Hz, IH), 7,70- 7,50 (m, 4H), 7,41 -7,23 (m, 3H), 7,18 (d, J - 8,5 Hz, IH), 7,06 (d, J = 6,6 Hz, IH), 4,32 (d, J - 5,5 Hz, 2H). MALDI FTMS (MH+) vypočteno 412,1227, změřeno 412,1215.
Příklad 35(x)
6-[2-(ethylkarbamoyl)fenyIsulfanyl]-3-E-[2-(pyridin-2-yl)ethenyl]-lH-Índazol
-134CL JUIOO/ BO
Sloučenina z příkladu 35(x) byla připravena podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 35(a) kromě toho, že ethylamín byl použit namísto n-propylaminu. ’H NMR (DMSO-dJ δ 8,60 (d, J = 4,0 Hz, IH), 8,40 (t, J = 6,2 Hz, IH), 8,18 (d, J - 8,5Hz, IH), 7,94 (m, 3H), 7,81 (dt,
J = 1,7, 7,5 Hz, IH), 7,68 - 7,44 (m, 3H), 7,56 (m, 2H), 7,30 (m, 3H), 7,17 (dd, J - 8,1, 1,8 Hz, IH), 7,06 (m, IH), 3,24 (m, 2H), 1,11 (t, J = 7,0 Hz, 3H). Anal. výpočet pro C23H20N4OS (1,75 H2O, 1,0 DMF): C, 61,82, H, 6,09, N, 13,87, S, 6,35. Změřeno: C, 61,58, H, 5,66, N, 13,96, S, 5,93. MALDI FTMS (MFT) vypočteno 401,1431, změřeno 401,1417.
Příklad 35(y)
6-[2-(thiazol-2-ylkarbamoyl)fenylsulfanyl]-3-E-[2-(pyridin-2-yl)ethenyl]-l H-indazol
Sloučenina z příkladu 35(y) byla připravena podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 35(a) kromě toho, že 2-aminothiazol byl použit namísto n-propylaminu. 'HNMR (DMSO-d$) δ 13,32 (s, IH), 12,67 (s, IH), 8,60 (d, J= 4,1 Hz, IH), 8,18 (d, J = 8,5 Hz, IH), 7,93 (d, J = 16,3 Hz, IH), 7,80 (dt, J = 1,7, 7,5 Hz, 1H), 7,65 (d, J = 7,9 Hz, 1H), 7,65 (d, J = 8,3 Hz, IH), 7,60-7,51 (m, 3H), 7,49 - 7,34 (m, 2H), 7,26 (m, 2H), 7,18 (m, 2H). Anal. výpočet pro
C24H17NsOS2 0,75 H2O: C, 61,45, H, 3,98, N, 14,93, S, 13,67. Změřeno: C, 61,35, H, 4,10, Ν, 14,96, S, 13,68.
Příklad 35(z)
6-[2-{2-(ethoxy)ethylkarbamoyl)fenylsulfanyl]-3-E-[2-(pyridin-2-yl)ethenyI]-l H-indazol
Sloučenina z příkladu 35(z) byla připravena podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 35(a) kromě toho, že 2-ethoxyethylamin byl použit namísto n-propylaminu. ’H NMR (DMSO30 d6) δ 13,30 (s, 1H), 8,60 (d, J = 4,0 Hz, 1H), 8,45 (t, J = 6,2 Hz, IH), 8,18 (d, J - 8,5 Hz, IH),
7,93 (m, 2H), 7,80 (dt, J = 1,7, 7,5 Hz, IH), 7,65 (d, J = 7,7 Hz, IH), 7,60 - 7,45 (m, 3H), 7,36 7,23 (m, 3H), 7,17 (d, J - 8,3 Hz, IH), 7,07 (m, IH), 3,50 (m, 6H), 1,10 (d, J = 7,0 Hz, 3H).
- 135CZ 301667 B6
Anal. výpočet pro CH2N4O2S0,5 CH2C12: C, 62,89, H,5,17, N, 11,50, S, 6,58. Změřeno:
C, 62,45, H, 5,33, N, 11,25, S, 6,55.
Příklad 35(aa)
6-[2-((3-methoxybenzyl)methylkarbamoyl)fenylsulfanyl]-3-E-[2-(pyridin-2-yl)etheny[]-lHindazol
Sloučenina z příkladu 35(aa) byla připravena podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 35(a) kromě toho, že 3-methoxybenzylamin byl použit namísto n-propylaminu. 'HNMR (DMSO-d6) δ 13,30 (s, 1H), 8,97 (t, J = 5,5 Hz, 1H), 8,60 (d, J = 4,2 Hz, 1H), 8,18 (d, J = 8,7 Hz, 1H), 7,93 (d, J = 16,3 Hz, 1H), 7,80 (dt, J = 1,7, 7,5 Hz, t H), 7,65 (d, J = 7,9 Hz, 1H), 7,60 - 7,51 (m, 3H), 7,38-7,15 (m, 5H), 7,08 (m, IH), 6,94 (m, 2H), 6,80 (dd, J= 8,1, 1,5 Hz, IH), 4,44 is (d, J = 6,6 Hz, 2H), 3,71 (s, 3H) Anal, výpočet pro C29H24N4O2S ’ 0,4 H2O: C, 60,25, H, 4,50,
N, 17,57, S, 8,04. Změřeno: C, 60,14, H,4,47,N, 17,42, S, 8,00.
Příklad 35(bb)
6-[2-((fur-2-yl)methylkarbamoyl)fenylsulfanyl]-3-E-[2-(pyridin-2-yl)ethenyl]-l H-indazol
Sloučenina z příkladu 35(bb) byla připravena podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 35(a) kromě toho, že 2-aminomethyIfuran byl použit namísto n-propylaminu. 'HNMR (DMSO-d6) δ 13,31 (s, 1H), 8,93 (t, J - 5,7 Hz, IH), 8,60 (d, J - 4,3 Hz, IH), 8,19 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,93 (d, J = 16,5 Hz, 1H), 7,80 (dt, J = 1,9, 7,4 Hz, 1H), 7,66 (d, J = 7,7 Hz, 1H), 7,59 - 7,48 (m, 4H), 7,30 (m, 4H), 7,37- 7,24 (m, 3H), 7,18 (d, J = 9,2 Hz, IH), 7,06 (d, J = 8,1 Hz, IH), 6,40 (m, IH), 6,31 (m, IH), 4,44 (d, J - 5,3 Hz, 2H). Anal. výpočet. Nebo C2óH20N4O2S (0,1 H2O, 0,75 CH2C12): C, 62,02, H, 4,22, N, 10,82, S, 6,19. Změřeno: C, 61,58, H, 4,30, ao N, 10,55, S, 6,12.
Příklad 35(cc)
6~[2~(2-propynylkarbamoyl)fenylsulfanyl]-3-E-[2-(pyridin-2-yl)ethenyl]-l H-indazol
-136CL JV100/ Bt>
Sloučenina z příkladu 35(cc) byla připravena podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 35(a) kromě toho, že propargylamin byl použit namísto propylaminu (76 %): 'HNMR (300 MHz, CDCh) δ 8,56 (m, IH), 7,96 (d, IH, J = 8,6 Hz), 7,81 (d, IH, 16,4 Hz), 7,68 (dt, IH,
J = 1,8, 7,8 Hz), 7,6 (m, IH), 7,52 - 7,45 (m, 3H), 7,3 - 7,23 (m, 3H), 7,16 (m, 2H), 4,10 (m, 2), 2,20 (t, IH, J = 2,6 Hz). LCMS (100% oblast) Rt = 3,36 minuty (poz) [M+H]/z vypočteno 411,1, změřeno 411,1. Analyzováno s 0,2 H2O, 0,17 DMF, 1,2 dichlormethan, vypočteno: C (58,44), H (4,19), N (11,05), S (6,07). Změřeno: C (58,18), H (4,11), N (10,98), S (6,05).
io
Příklad 35(dd)
6-[2-(ethoxykarbamoyl)fenylsuIfanyl]-3-E-[24pyridin-2-yl)ethenyt]-l H-indazol
Sloučenina z příkladu 35(dd) byla připravena podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 35(a) kromě toho, že ethoxyamin byl použit namísto propylaminu: *HNMR (300 MHz, CDCh) δ 11,60 (s, IH), 8,71 (d, IH, J = 7,9 Hz), 8,30 (d, IH, J = 8,5 Hz), 8,05 (d, IH, J = 16,4 Hz), 7,91 (dt, IH, J = 1,7, 7,7 Hz), 7,76 (d, IH, J = 7,8 Hz), 7,67 (m, 2H), 7,56 (dd, IH, J = 1,8, 7,3 Hz), 7,52 - 7,36 (m, 3H), 7,28 (m, 2H), 4,06 (q, 2H, J = 7,0 Hz), 1,31 (t, 2H, J = 7,0 Hz), LCMS (100% oblast) Rt = 3,28 minuty (poz) [M+H]/z vypočteno 417,1, změřeno 417,1. Analyzováno s0,2 H2O, vypočteno: C (65,53), H (4,98), N (13,05), S (7,48). Změřeno: C (65,66), H (4,91), N (12,75), S (7,44).
Příklad 35(ee)
6-[2-(2-methyl-2-propenylkarbamoyl)fenylsulfanyl]-3-E-[24pyridin-2-yl)ethenyl]-lHindazol
Sloučenina z příkladu 35(ee) byla připravena podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 35(a) kromě toho, že 2-methy lal ly lamin byl použit namísto propylaminu: 'HNMR (300 MHz, CDCh) δ 8,56 (m, IH), 7,98 (d, IH, J= 8,5 Hz), 7,81 (d, IH, J= 16,4 Hz), 7,69 (dt, IH, J = 1,7, 7,7 Hz), 7,60 (m, IH), 7,53 - 7,42 (m, 3H), 7,32- 7,24 (m, 3H), 7,16 (m, 2H), 6,72
- 137CZ 301667 B6 (m, IH), 4,89 (s, IH), 4,81 (s, IH), 3,90 (d, 2H, J = 5,5 Hz), 1,71 (s, 3H). LCMS (100% oblast)
Rt = 3,37 minuty (poz) [M+H]/z vypočteno 427,1, změřeno 427,1. Analyzováno s 0,7 H2O, 0,1 dichlormethan, vypočteno C (67,35), H (5,31), N (12,52), S (7,16). Změřeno: C (67,55), H (5,39),
N (12,35), S (7,15).
Příklad 35(ff)
6-[2-((3-fluorbenzyl)methylkarbamoyl)fenylsulfanyl]-3-E-[2-(pyridin-2-yl)ethenyl]-lHio indazol
Sloučenina z příkladu 35(ff) byla připravena podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 35(a) kromě toho, že 3-fluorbenzy lamin byl použit namísto propylaminu: 'HNMR (300 MHz, CDCb) δ 8,60 (m, IH), 7,9? (d, IH, J = 8,5 Hz), 7,86 (d, IH, J = 16,4 Hz), 7,70 (m, 2H), 7,51 (m, 2H),7,33 (m, 4H), 7,18 (m, 2H), 7,11 (dd, IH, J = 1,6, 8,5 Hz), 6,95 (m, 3H), 4,51 (d, 2H,
J = 5,7 Hz), LCMS (100% oblast) Rt = 3,55 minuty (poz) [M+H]/z vypočteno 481,1, změřeno
481,1. Analyzováno s 0,7 H2O, 0,5 dichlormethan, vypočteno: C (63,91), H (4,40), N (10,46), S (5,99). Změřeno: C (63,80), H (4,34), N (10,34), S (5,98).
Příklad 35(gg)
6-[2~(2-(methylamino)ethylkarbamoyl)fenylsulfanyl]-3-E-[2-(pyridin-2-yl)ethenyl]-lHindazol
Sloučenina z příkladu 35(gg) byla připravena podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 35(a) kromě toho, že N-methylethylendiamin byl použit namísto propylaminu: ‘HNMR (300 MHz, CDCb) δ 8,60 (m, IH), 7,98 (d, IH, J = 8,5 Hz), 7,81 (d, IH, J = 16,4 Hz), 7,69 (dt, IH, J - 1,7, 7,7 Hz), 7,52 (m, IH), 7,50 - 7,40 (m, 3H), 7,30 - 7,20 (m, 3H), 7,16 (m, 2H),
3,45 (t, 2H), 2,69 (t, 2H), 2,15 (š s, 3H), LCMS (100% oblast) Rt = 3,16 minuty (poz) [M+H]/z vypočteno 430,1, změřeno 430,1. Analyzováno s 0,2 H2O, 0,6 dichlormethan, 0,06 hexan, vypočteno: C (61,28), H (5,24), N (14,31), S (6,55). Změřeno: C (61,26), H (5,14), N (14,22), S (6,56).
Příklad 35(hh)
6-[2-(2-(thienyl-2-Yl)ethylkarbamoyl)fenylsulfanyl]-3-E-[2-(pyrídm~2-yl)ethenyl]-lHindazol
- 138CZ JUIOO/ BO
Sloučenina z příkladu 35(hh) byla připravena podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 35(a) kromě toho, že 2-{2-aminoethyl)thiofen byl použit namísto propylaminu: 'HNMR (300 MHz, CDCb) δ 8,56 (m, IH), 7,98 (d, IH, J = 8,5 Hz), 7,81 (d, IH, J= 16,4 Hz), 7,69 (dt, IH, J = 1,7, 7,7 Hz), 7,60 (m, IH), 7,53 - 7,42 (m, 3H), 7,32 - 7,24 (m, 3H), 7,16 (m, 2H), 6,72 (m, IH), 6,63 (m, IH), 6,52 (m, IH), 3,45 (q, 2H), 3,00 (t, 2H). Analyzováno s 0,5 H2O, 0,07 dichlormethan, vypočteno: C (65,35), H (4,69), N (11,26), S (12,82). Změřeno: C (65,49), H (4,80), N (11,21), S (12,77).
io
Příklad 35(ii)
6-[2-(aminokarbamoyl)fenylsulfanyl]-3-E-[2-(pyridin-2-yl)ethenyl]-l H-indazol
Sloučenina z příkladu 35(ii) byla připravena podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 35(a) kromě toho, že hydrazin byl použit namísto propylaminu: *H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 13,3 (s, IH), 9,57 (s, IH), 8,54 (d, J= 3,9 Hz), 8,14 (d, IH, J= 8,5 Hz), 7,89 (d, IH, J = 16,4 Hz), 7,73 (dt, IH, J - 1,7, 7,6 Hz), 7,60 (d, IH, J = 7,9 Hz), 7,73 (dt, IH, J = 1,7, 7,6 Hz), 7,60 (d, J - 7,9 Hz), 7,50 (m, 2H), 7,40 (dd, IH, J = 1,8, 7,1 Hz), 7,3 - 7,1 (m, 4H), 7,0 (m, IH). LCMS (100% oblast) Rt = 0,55 minuty (poz) [M+H]/z vypočteno 388,1, změřeno 388,1.
Analyzováno s 0,1 DMF, 0,55 EtOAc, 0,12 toluen (NMR) a 0,15 H2O, vypočteno: C (63,98), H (5,15), N (15,63), S (7,02). Změřeno: C (63,99), H (5,07), N (15,75), S (6,89).
Příklady 35(jj)-35(nn) mohou být připraveny podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 35(a).
Příklad 35(jj)
- 139
Příklad 35(kk)
Příklad 35(11)
Příklad 35(mm)
H 'θ''
Příklad 35(nn)
Příklad 36(a)
6-[2-(N^l-methylimidazol-2-y]methyliden)hydrazino)karbonyl)fenylsulfanyl]-3-E-[2 (pyridin-2-yl)ethenyl]-lH-indazol
-140CZ ΜΗ 00 / B6 mg (0,103 mmol) sloučeniny připravené v příkladu 35(ii) bylo podrobeno působení 29 mg (0,258 mmol, 2,5 ekv.) l-methyl-2-imidazolkarboxaldehydu v ethanolu za vzniku sloučeniny z příkladu 36(a): 'H NMR (300 MHz, DMSO-d«) δ 8,60 (m, 2H), 8,31 (s, IH), 8,18 (d, IH), 8,02 (d, IH), 7,98 (d, IH), 7,80 (m, 2H), 7,63 (m, 2H), 7,40 (m, 3H), 7,30 (m, IH), 7,20 (m, IH), 7,02 (m, 2H), 6,93 (s, IH), 4,00 (s, 3H), LCMS (100% oblast) Rt = 4,0 minuty (poz) [M+H]/z vypočteno 480,2, změřeno 480,2. Analyzováno s 1,45 H2O, vypočteno: C (61,76), H (4,76), N (19,39), S (6,34). Změřeno: C (61,78), H (4,67), N (19,34), S (6,39).
to Příklad 36(b)
6-[2-(N2-(pyrid-2-ylmethyliden)hydrazino)karbonyl)fenyl$ulfanyl]-3-E-[2~(pyridin-2-Yl)ethenyl]-! H-indazol
Sloučenina z příkladu 36(b) byla připravena podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 36(a) kromě toho, že 2-pyridylkarboxaldehyd byl použit namísto 1 -methy 1-2-imidazoIkarboxaldehydu: ‘H NMR (300 MHz, CDCl,) δ 8,57 (m, 2H), 8,45 (m, 2H), 8,22 (d, IH), 8,10 (s, IH), 7,93 (d, IH), 7,83 (d, IH), 7,8- 7,1 (m, UH), LCMS (100% oblast) Rt = 4,0 minuty (poz) [M+H]/z vypočteno 477,1, změřeno 477,1. Analyzováno s 0,85 H2O, vypočteno: C (65,93),
H (4,45), N (17,09), S (6,52). Změřeno: C (66,02), H (4,42), N (16,95), S (6,38).
Příklad 36(c)
6-[2-(N2-(2,2,2-trifluoroethyliden)hydrazino)karbonyl)fenylsulfanyl]-3-E-[2~(pyridin-2-yl)-
Sloučenina z příkladu 36(c) byla připravena podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 36(a) kromě toho, že trifluoracetaldehyd byl použit namísto l-methyl-2-imidazolkarbox30 aldehydu: 'H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 8,70 (m, IH), 8,25 (m, IH), 8,02 (d, IH), 7,90 (dt, IH), 7,80 - 7,20 (m, 10H). LCMS (100% oblast) Rt = 5,64 minuty (poz) [M+H]/z vypočteno
468,1, změřeno 468,0. Analyzováno s 0,75 H2O, vypočteno: C (57,39), H (3,67), N (14,56), S (6,67). Změřeno: C (57,44), H (3,67), N (14,56), S (6,67).
Příklad 37(a)
6-[6-fluor-2-(ethoxykarbamoyl)fenylsulfanyl]-3-E-[2-(pyridÍn-2-yl)ethenyl]-l H-indazol
-141 CZ 301667 B6
Sloučenina z příkladu 37(a) byla připravena podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 35(a) kromě toho, že byla použita výchozí látka popsaná níže a že ethoxyamín byl použit namísto propylaminu: ]H NMR (300 MHz, CDCb) δ 8,59 (m, IH), 8,08 (d, IH), 7,88 (d, IH,
J = 16,4 Hz), 7,79 (t, IH), 7,65 (d, IH), 7,60 (m, IH), 7,50 (d, IH, J = 16,4 Hz), 7,40 (t, IH), 7,36 (d, IH), 7,28 (s, IH), 7,23 (m, IH), 7,10 (d, IH), 3,90 (q, 2H), 1,19 (t, 3H). LCMS (100% oblast) Rt = 4,85 minuty (poz) [M+H]/z vypočteno 435,1, změřeno 435,1, (neg) [M-H]/z vypočteno
433,1, změřeno 433,1. Analyzováno s 0,35 H2O, 0,07 EtOAc vypočteno: C (62,56), H (4,57), N (12,54), S (7,17). Změřeno: C (62,61), H (4,55), N (12,49), S (7,11).
io
Výchozí látka byla připravena takto:
(i)
Roztok 1,07 g (5,75 mmol) ethy 1-2,3-difluorbenzoátu v 10 ml DMF byl podroben působení 896 mg (11,5 mmol, 2,0 ekv.) sulfidu sodného ve 23 °C. Směs byla míchána v argonové atmosféře po dobu 10 hodin. Roztok byl naředěn 50 ml ethylacetátu a 50 ml vody a 5 ml 10% kyseliny citrónové. Organická vrstva byla promyta saturovaným vodným hydrouhličitanem sodným, usušena nad sulfátem sodným, dekantována a koncentrována při sníženém tlaku za vzniku ethylesteru 3-fluor-2-merkaptobenzoové kyseliny: ’H NMR (300 MHz, CDCb) δ 7,71 (t, IH), 7,38 (m, H), 7,12 (m, IH), 4,41 (q, 2H), 1,40 (t, 3H), LCMS (100% oblast) Rt = 4,53 minuty (poz) [M+H]/z vypočteno 201,0, změřeno 200,9.
(ίί)
320 mg (39 %) výše uvedeného thioetheru bylo připraveno podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 33(a), krok (iii), kromě toho, že ethylester 3-fluor-2-merkaptobenzoové kyseliny byl použit namísto thiosalicylátu: FTIR (tenký film) 2952, 1727, 1607, 1586, 1564, 1469, 1433, 1366, 1292, 1249, 182, 1141, 1074, 836 cm’1, 'HNMR (300 MHz, CDCl,) δ 8,62
JO (tn, IH), 7,90 (d, IH, J = 8,6 Hz), 7,85 (d, IH, J= 16,4 Hz), 7,67 (dt, IH, J= 1,8, 7,7 Hz), 7,57- 7,38 (m, 5H), 7,23 - 7,10 (m, 3H), 5,65 (s, 2H), 4,34 (q, 2H, J = 7,1 Hz), 3,56 (t, 2H, J = 8,2 Hz), 1,30 (t, 3H, J = 7,1 Hz), 0,88 (t, 2H, J = 8,2 Hz), -0,06 (s, 9H), LCMS (100% oblast) Rt = 4,44 minuty (poz) [M+H]/z vypočteno 549,2, změřeno 549,2.
-142CZ 4(11607 B6 (iii)
303 mg (99 %) karboxyiové kyseliny uvedené výše bylo připraveno podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 33(a), krok (iv): FTIR (tenký film) 2953, 2496, 1715, 1643, 1607, 1567,
1470, 1434, 1300, 1250, 1221, 1075, 967, 932, 836 cm’1, 'H NMR (300 MHz, CDCb) δ 8,81 (m, IH), 7,87 (m, 2H), 7,79 (m, 3H), 7,65 (m, 2H), 7,56 (m, IH), 4,40 (m, IH), 7,30 (m, IH), 7,00 (dd, IH, J = 1,4, 8,5 Hz), 5,58 (s, 2H), 3,59 (t, 2H, J = 8,2 Hz), 0,93 (t, 2H, J = 8,2 Hz), -0,01 (s, 9H). LCMS (100% oblast) Rt = 10,47 minutách (poz) [M+H]/z vypočteno 522,2, změřeno 522,2.
o (iv)
Výše uvedená sůl byla připravena podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 33(g): 'HNMR (300 MHz, DMSO-cL) δ 13,2 (s, IH), 8,68 (m, IH), 8,12 (d, IH, J- 8,5 Hz), 7,98 (d, IH, J= 16,4 Hz), 7,88 (dt, IH, J= 1,8, 7,6 Hz), 7,73 (d, IH, J= 7,9 Hz), 7,61 (d, IH,
J = 16,4 Hz), 7,43 - 7,32 (m, 3H), 7,20 (m, 2H), 7,07 (t, IH), 3,23 (m, 8H), 1,68 (m, 8H), 1,41 (m, 8H), 1,04 (t, 12H).
(v)
Výše uvedený pentafluorfenylester byl připraven podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 35(a), krok (i): LCMS (100% oblast) Rt = 10,53 minuty (poz) [M+H]/z vypočteno
558,1, změřeno 558,1.
Příklad 37(b)
6-[6-fluor-2-(cyklopropylkarbamoyl)fenylsulfanylj-3™E-[2-(pyridin-2-yl)ethenyl]-] Hindazol
-143CZ 301667 B6
Sloučenina z příkladu 37(b) byla připravena podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 37(a) kromě toho, že cyklopropyl amin byl použit namísto ethoxyaminu: 'H NMR (300 MHz, DMSO-dó) δ 8,42 (m, 1H), 8,28 (d, 1H), 7,83 (d, 1H), 7,75 (m, 2H), 7,60 (m, 1H), 7,31 (m, 2H),
7,15 (m, 4H), 6,86 (d, IH), 2,58 (m, IH), 0,42 (m, 2H), 0,23 (m, 2H). LCMS (100% oblast) Rt =
4,91 minuty (poz) [M+H]/z vypočteno 431,1, změřeno 431,1, (neg) [M-H]/z vypočteno 429,1, změřeno 429,2. Analyzováno s 0,55 H2O, vypočteno: C (65,46), H (4,60), N (12,72), S (7,28). Změřeno: C (65,52), H (4,58), N (12,64), S (7,06).
Příklad 37(c)
6-[6-fluor-2-(isopropoxykarbamoyl)fenylsulfanyl]-3-E-[2-{pyridin“2-yl)ethenyl]-l H-indazol
is Sloučenina z příkladu 37(c) byla připravena podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 37(a) kromě toho, že isopropoxyamin byl použit namísto ethoxyaminu: 'HNMR (300MHz, CDC13) δ 9,50 (š s, IH), 8,47 (m, IH), 7,72 (d, IH), 7,68 (d, IH, J = 16,4 Hz), 7,54 (dt, IH), 7,35 (m, 4H), 7,20 (m, 4H), 4,03 (m, IH), 1,07 (d, ÓH), LCMS (100% oblast) Rt = 4,90 minuty (poz) [M+H]/z vypočteno 449,1, změřeno 449,1. Analyzováno s 0,1 DMF, 0,3 H2O, vypočteno: C (63,28), H (4,87), N (12,45), S (6,95). Změřeno: C (63,22), H (4,84), N (12,37), S (6,91)
Příklad 37(d)
6-[6-fluor-2-(methylkarbamoyl)fenylsulfanyl]-3-E-[2-(pyridín-2-yl)ethenyl]-l H-indazol
Sloučenina z příkladu 37(d) byla připravena podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 37(a) kromě toho, že methy lamin byl použit namísto ethoxyaminu; 'H NMR (300 MHz, DMSO d6) δ 8,37 (m, IH), 8,18 (m, IH), 7,87 (d, IH), 7,67 (d, IH, J = 16,4 Hz), 7,59 (dt, IH), 7,40 (d,
IH), 7,30 (m, 2H), 7,20 (m, 4H), 6,85 (d, IH), 2,49 (d, 3H), LCMS (100% oblast) Rt - 4,63 minuty (poz) [M+H]/z vypočteno 405,1, změřeno 405,2, (neg) [M-H]/z vypočteno 403,1, změřeno 403,1. Analyzováno s 0,2 DMF, 0,3 CH2C12 (nmr), 0,3 H2O, vypočteno: C (61,13), H (4,39), N (13,08), S (7,13). Změřeno: C (61,08), H (4,35), N (13,14), S (7,22).
- 144CZ JUIOOV BO
Příklad 38(a)
6-[6-(2-methylchinol-6-ylkarbamoyl)fenylsulfanyl]-3-E-(2-styryl)-l H-indazol
Sloučenina z příkladu 38(a) byla připravena podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 33(b) kromě toho, že kroky (i) a (ii) byly vynechány: *H NMR (300 MHz, CDCh) δ 8,58 (s, 1H), 8,13 (s, IH), 7,80 (m, 3H), 7,67 (t, IH), 7,43 (m, 2H), 7,34-7,16 (m, 9H), 7,13 (d, IH), 7,07 (d, IH), 2,60 (s, 3H). LCMS (100% oblast) Rt = 3,87 minuty (poz) [M+H]/z vypočteno 513,1, změřeno 513,2.
Příklad 38(b)
6-[2~((4-piperazm-l-yl-3-trÍf1uonnethylfenyl)karbamoyl)fenylsulfanyl]-3-E-(2-styryl)-lHindazol
Sloučenina z příkladu 38(b) byla připravena podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 38(a) kromě toho, že 3-trifluormethyM-piperazin-l-yl-fenylamin byl použit namísto 620 amino-2-methylchinolinu: lHNMR (300 MHz, CDClj) δ 8,75 (s, IH), 7,95 (d, IH), 7,77 (m, 2H), 7,69 (s, IH), 7,55 (m, 3H), 7,40- 7,25 (m, 9H), 7,20 (d, IH), 3,00 (m, 4H), 2,83 (m, 4H). LCMS (100% oblast) Rt = 3,94 minuty (poz) [M+H]/z vypočteno 600,2, změřeno 600,2, Analyzováno s 0,1 hexan (nmr), 1,4 H2O, vypočteno: C (63,71), H (5,12), N (11,06), S (5,06). Změřeno: C (63,67), H (5,06), N (10,98), S (5,00).
Příklad 39(a)
6-[6-{methylkarbamoyl)fenylamÍno]-3-E-[2-(pyridin-2-yl)ethenyl]-l H-indazol
Roztok 39 mg (0,07820 mmol) N_methyl-2-[3^((E)--2-pyridin-2-ylvinyl)-l-(2’trimethylsílanylethoxymethyl)-lH-indazoI-6-ylamino]benzamidu (syntéza popsaná níže), 21 μ| (0,3128 mmol) ethy lend i aminu a 0,63 ml (0,6256 mmol) ÍM TBAF v THF byl míchán v olejové
- 145CZ 301667 B6 lázni v 90 °C po dobu 2 hodin. Surová reakční směs byla naředěna 50 ml ethylacetátu, extrahována 2 x 20 ml IM roztoku hydrouhličitanu sodného 5 x 20 ml solanky, usušena nad sulfátem horečnatým, filtrována a koncentrována na pevnou látku. Pevná látka byla rozpuštěna v THF, koncentrována na olej, pak triturována směsí CH2C12 a Et2O, což způsobilo precipitaci prášku.
Prášek byl sbírán filtrací, promyt Et2O a usušen za vysokého vakua. Hmotnost sebrané pevné látky byla 20mg (70% výtěžek). ‘HNMR (DMSO-d6) δ 12,91 (šs, IH), 9,86 (s, IH), 8,60 (d,J= 4,0 Hz, IH), 8,52 (m, IH), 8,08 (d, J = 8,5 Hz, IH), 7,90 (d, J = 16,4 Hz, IH), 7,80 (dt, J = 1,7, 7,5 Hz, IH), 7,65 (d, J - 7,9 Hz, IH), 7,51 (d, J = 16,1 Hz, IH), 7,47-7,34 (m, 2H), 7,25 (m, 2H), 7,00 (d, J = 9,6 Hz, IH), 6,89 (t, J = 7,0 Hz, IH), 2,79 (d, J = 4,7 Hz, 3H). Anal. io výpočet pro C22HI9N5O · 0,5 CH2C12: C, 65,61, H, 4,89, N, 17,00. Změřeno: C, 65,52, H, 5,08,
N, 16,78.
Výchozí látka byla připravena takto:
(i)
Roztok 191 mg (0,4 mmol) 6-jod-3-karboxaldehyd-l-[2-(trimethylsilanyl)ethoxymethyl]-lHindazolu (z příkladu 33(a), krok (ii)), 120,1 mg (0,8 mmol) methy lantranilátu, 28 mg (0,08 mmol) 2-(dicyklohexylfosfino)bifenylu, 18,4 mg (0,02 mmol) Pd2(dba)3, 212,3 mg (1,0 mmol) K3PO4, rozpuštěný v 1,0 ml suchého DME, byl ve vakuu 3 x probublán argonem, pak míchán v argonové atmosféře po dobu 3 dnů v olejové lázni v 80 °C. Surová směs byla filtrována přes krátký sloupec SiO2 za eluce ethyíacetátem, a pak purifikována chromatografii na chromatotronu s kruhovou deskou za eluce směsí 25% CH3CN a CH2C12. Hmotnost čistých frakcí byla 42 mg. Bylo také sebráno dalších 120 mg produktu, který byl čistý ~90 %. Celkový výtěžek N-methyl-2-[34(E)25 2-pyridin-2-ylvinyl)-l-(2-trimethyl$ilanylethoxymethyl)-lH-Índazol-6-ylamino]benzamidu bylo 162 mg neboli -81 %.
Příklad 39(b)
6-[6-(prop-2-ynylkarbamoyl)fenylamino]-3-E-[2-(pyridin-2-yl)ethenyl]~l H-indazol
Sloučenina z příkladu 39(b) byla připravena podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 39(a) kromě toho, že propargy lamin byl použit namísto methy laminu. ]H NMR (CDC13) δ 9,50 (s, 1H), 8,64 (d, J = 4,5 Hz, 1H), 7,98 (d, J = 8,9 Hz, 1H), 7,90 (d, J = 16,4 Hz, 1H), 7,70 (dt, J =
1,7, 7,5 Hz, IH), 7,57 (d, J = 16,3 Hz, IH), 7,52 - 7,43 (m, 3H), 7,34 (dt, J = 1,5, 7,2 Hz, IH), 7,26 (m, 3H), 7,34 (ddd, J = 1,0, 4,9, 7,5 Hz, IH), 7,09 (dd, J = 1,7, 9,0 Hz, IH), 6,85 (dt, J = 1,0, 7,0 Hz, IH), 6,33 (š s, IH), 4,24 (dd, J = 2,6, 5,3 Hz, 2H), 2,30 (t, J = 5,5 Hz, IH). Anal. výpočet pro C24H19N5O ‘ 0,25 CH2CI2: C, 70,24, H, 4,74, N, 16,89. Změřeno: C, 70,72, H, 4,96, N, 16,55.
- 146CZ JUI007 Bb
Příklad 40(a)
6-(3-aminobenzoyl)-3-E-[2-(pyrÍdin-2-yl)ethenyl-l H-indazol
Sloučenina z příkladu 40(a) byla připravena podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 11. “H NMR (300 MHz, DMSCHh) δ 13,5 (s, IH), 8,62 (d, IH, J = 3,86 Hz), 8,34 (d, IH, J = 8,5 Hz), 8,01 (d, IH, J - 16,36 Hz), 7,87 (s, IH), 7,83 (td, IH, J = 7,69 Hz, J = 1,81 Hz), 7,58 - 7,71 (m, 3H), 7,29 (qd, IH, J = 7,39 Hz, J = 0,98 Hz), 7,21 (t, IH, J = 7,77), 7,00 (t, IH, J = 1,86 Hz), io 6,90 (dt, IH, J = 6,15 Hz, J= 1,40 Hz), 6,86 (m, IH), 5,40 (šs, 2H). MS (ESI+) [M+H]/z vypočteno 446, změřeno 446, Vypočteno: C, 74,10, H, 4,74, N, 16,46. Změřeno: C, 72,72, H,
4,87, N, 16,02.
Výchozí látka byla připravena takto:
(·)
K 8,22 g (60 mmol) m-aminofenylboronové kyseliny v 60 ml dimethylformamidu ve 23 °C v argonové atmosféře bylo přidáno 10 ml (72 mmol) triethylaminu a 0,366 g (3 mmol) 4-<di20 methylamino)pyridinu. Výsledný roztok byl zahříván na 50 °C. Bylo přidáno 20,4 g (72 mmol) 4-nitrofenylester-2-trÍmethylsilanylethylesteru kyseliny uhličité v 5 dávkách po 4 g po dobu 18 hodin. Po 44 hodinách bylo přidáno 3,4 g (12 mmol) 4-nitrofenylester-2-trimethylsilanylethylesteru uhličité kyseliny následováno 1,7 ml (12 mmol) triethylaminu. Po 63 hodinách reakění směs byla koncentrována na olej. Puriflkace chromatografii na silikagelu za eluce směsí ethyl· acetátu a hexanu 3:7až 7:3 poskytla 8,12 g (48 %) 2-trimethylsilanylethylesteru (3-boronfenyl)karbamové kyseliny: Rf sm 0,067, p 0,33 (směs ethylacetátu a hexanu 1:1), 'HNMR (300 MHz, CD3OD) δ 7,64 (s, IH), 7,49 (d, IH, J = 8,94 Hz), 7,26 (m, 2H), 4,23 (t, 2H, J = 8,28 Hz), 1,06 (t, 2H, J = 8,21 Hz), 0,72 (s, 9H). MS (ESI) [M+Na]/z vypočteno 304, změřeno 304.
(ÍÍ)
Směs 7,1 g (14,8 mmol) 6-jod-3-((E)-2-pyridin-2-ylvinyl)-l-(2-trÍmethylsilanylethoxymethyl)-lH-indazolu, 8,32 g (29,6 mmol) 2—tri methy lsilanylethy lesteru (3-boronová kyselinafenyl)karbamové kyseliny, 312 mg (0,44 mmol) dichlorbis(trifenylfosfin)palladia(n), 6,13 g (44,4 mmol) uhličitanu draselného a 2,1 ml (14,8) triethylaminu v 60 ml anisolu byla zahřívána na 80 °C v atmosféře oxidu uhelnatého. Po 24 hodinách bylo přidáno dalších 2,1 ml (14,8 mmol)
-147CZ 301667 B6 triethylaminu. Po 33 hodinách bylo zjištěno analýzou TLC, že reakce byla ukončena (směs ethylacetátu a hexanu 7:3). Reakční směs byla ochlazena na 23 °C, a pak naředěna 40 ml saturovaného vodného NaHCO3 a 300 ml ethylacetátu. Fáze byly odděleny a vodná fáze byla extrahována 2 x 100 ml ethylacetátu. Sloučené ethylacetátové vrstvy byly promyty 100 ml solan5 ky, a usušeny nad Na2SOd, filtrovány a koncentrovány. Purifikace chromatografií na silikagelu poskytla 7,22 g (79 %) 2-trimethyl sílaný Iethy lesteru (3-{l—[3-(2—pyridin—2—ylethyl)—l—(2—trimethylsilanylethoxymethyl)-lH-indazol-6-yl]methanoyl}fenyl)karbamové kyseliny jako žlutého skla. 'HNMR (300 MHz, CDC13) δ 8,65 (d, IH, J = 3,93 Hz), 8,10 (d, IH, J = 8,54 Hz), 8,04 (s, 1H), 7,94 (d, IH, J = 16,33 Hz), 7,82 ($, IH), 7,66 - 7,77 (m, 3H), 7,61 (d, IH, J = 16,35 Hz), io 7,40-7,51 (m, 3H), 7,19 (m, IH), 7,00 (s, IH), 5,77 (s, 2H), 4,25 (t, 2H, J = 6,93 Hz), 3,60 (t, 2H, J - 8,10 Hz), 1,04 (t, 2H, J - 6,79 Hz), 1,00 (t, 2H, J = 8,13 Hz), 0,04 (s, 9H), 0,0 (s, 9H).
MS (ESI+) [M+H]/z vypočteno 615, změřeno 615.
Příklad 40(b)
6-{3-amino-4-niethylbenzoyl)-3-E-[2-(pyridin-2-yl)ethenyl]-l H-indazol
Sloučenina z příkladu 40(b) byla připravena podobným způsobem jako v příkladu 40(a) kromě toho, že v kroku (i) 4-methyl-3-aminofenylboronová kyselina, připravená jak popsáno níže, byla použita namísto m-aminofenylboronové kyseliny. 'HNMR (DMSO-dó) δ 13,6 (s, IH), 8,62 (d, IH, J = 3,81 Hz), 8,33 (d, IH, J = 8,47 Hz), 8,01 (d, IH, J = 16,36 Hz), 7,85 (s, IH), 7,82 (dd, IH, J = 7,60 Hz, J = 1,80 Hz), 7,70 (d, IH, J = 7,81 Hz), 7,63 (d, IH, J = 16,36 Hz), 7,57 (dd, IH, J = 8,47 Hz, J = 1,2 Hz), 7,29 (m, IH), 7,12 (d, IH, J= 7,82 Hz), 7,09 (d, IH,
J = 1,64 Hz), 6,90 (dd, IH, J = 7,59 Hz, J = 1,65 Hz), 5,16 (š s, IH), 2,16 (s, IH). MS (ESI+) [M+H]/z vypočteno 355, Anal. výpočet C, 74,56, H, 5,12, N, 15,81. Změřeno: C, 73,86, H, 5,25, N, 15,34.
Výchozí látka byla připravena takto:
(i)
Směs 3,34 g (18,45 mmol) 4-methyl-3-nitrofenylboronové kyseliny a 334 mg 10% Pd/C ve 30 ml MeOH byla hydrogenována 101.325 kPa (1 atm) ve 23 °C. Po 22 hodinách byla reakční směs filtrována přes celit a koncentrována za vzniku 2,53 g (91 %) 3-amino-4-methylfenylboronové kyseliny. 'H NMR(300 MHz, DMSO-d6) δ 7,21 (s, IH), 7,08 (d, 1H,J = 7,5 Hz), 6,92 (d, IH, J= 7,46 Hz), 4,81 (š s, 2H), 2,09 (s, 3H). MS (ESI) [M+H]/z vypočteno 152, změřeno 152.
-148CZ JU1667 B6
Příklad 40(c)
645-amino-2,4-dimethylbenzoyl)-3-E-[2-(pyridin-2-yl)ethenyl]-l H-indazol
Sloučenina z příkladu 40(c) byla připravena podobným způsobem jako v příkladu 40(a) kromě toho, že v kroku (i) 2,4-dimethyl-3-aminofenylboronová kyselina (připravená jak popsáno níže) byla použita namísto m-aminofenylboronové kyseliny: *HNMR (DMSO-d6) δ 8,62 (d, IH, J = 3,78 Hz), 8,32 (d, IH, J = 8,48 Hz), 7,99 (d, IH, J = 16,35 Hz), 7,83 (td, IH, J = 7,68 Hz, J = 1,8 Hz), 7,80 (s,lH), 7,69 (d, IH, J = 7,80 Hz), 7,64 (dd, IH, J - 8,47 Hz, J = 1,27 Hz), 7,62 io (d, IH, J = 16,36 Hz), 7,29 (m, IH), 6,94 (s, IH), 6,64 (s, IH), 4,87 (š s, 2H), 2,12 (s, 3H), 2,10 (s, 3H). LCMS (ESI+) [M+H]/z vypočteno 369, změřeno 369. Anal. výpočet: C, 74,98, H, 5,47,
N, 15,21. Změřeno: C, 73,85, H, 5,56, N, 14,49.
Výchozí látka byla připravena takto:
(O
WOHJj
2,4-dimethylfenylboronová kyselina byla vytvořena podobným způsobem, jako v příkladu 24(a), krok (vii), kromě toho, že 2,4-d imethy Ibrom benzen byt použit jako výchozí látka. ’HNMR (CD3OD) δ 7,13 (d, IH, J = 7,43 Hz), 7,00 (s, IH), 6,97 (d, IH, J = 7,49 Hz), 2,28 (s, 3H), 2,28 (s,3H). LCMS(ESR) [M+H]/z vypočteno 151, změřeno 151.
(ii)
K 1 ml dýmavé kyselině dusičné ochlazené na -40 °C byl přidán 1 ml TFA. Výsledná směs byla ponechána ohřát se trochu na -35 °C a v jedné dávce bylo přidáno 150 mg (1 mmol) 2,4—dimethy lfeny lboronové kyseliny. Po 1 hodině byl přidán led a heterogenní směs byla filtrována. Výsledná pevná látka byla suspendována v Et2O a extrahována 1 ml 3N vodného NaOH, pak 2 ml vody. Vodná fáze byla acidifikována 1 ml 3N vodné HCI a opět extrahována 3 x 5 ml
EtOAc. Sloučené organické vrstvy byly promyty solankou, usušeny nad Na2SO4, dekantovány a koncentrovány za vzniku 93 mg (47 %) 2,4-d imethy 1-5-nitrofeny lboronové kyseliny. LCMS (ESI+) [M+H]/z vypočteno 196, změřeno 196.
-149CZ 301667 Bó (iii)
3-amino-4,6-dimethylfenylboronová kyselina byla připravena podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 40(b), krok (i). 'H NMR (CD3OD) δ 6,83 (s, 2H), 6,64 (s, 1H), 2,17 (s, 3H),
2,13 (s,3H).
Příklad 41 (a) to 6—[3—((l —ethy 1—3—methy 1—1 H-pyrazol-5-yl)karboxamido)benzoyl]-3-E-[2-(pyridin-2-yl)-
K roztoku 323 mg (2,1 mmol, 2,1 ekv.) 2-ethyl-5-methyl-2H-pyrazol-3-karboxylové kyseliny v 5 ml DMF ve 23 °C v argonové atmosféře bylo přidáno 365 μΐ (2,1 mmol, 2,1 ekv.) diiso15 propy lethy lam inu, 798 mg (2,1 mmol, 2,1 ekv.) HATU a katalytické množství DMAP. K výslednému roztoku bylo přidáno 340 mg (1 mmol, 1 ekv,) 6-(3-aminobenzoyI)-3-E-(2-pyridin-2yl)ethenyl)-lH-indazolu (příklad 40(a)). Reakce pak byla sledována HPLC, dokud nebyl všechen výchozí analin spotřebován, ~2 hodiny (což poskytlo směs mono a bis acylovaných sloučenin). Reakční směs byla zastavena saturovaným NaHCO3, pak naředěná vodou a extrahována ethylacetátem. Sloučené EtOAc vrstvy byly promyty vodou, solankou, usušeny nad Na2SO4, filtrovány a koncentrovány na olej. Olej byl rozpuštěn v 10 ml methanolu, bylo přidáno 290 mg (2,1 mmol, 2,1 ekv.) K2CO3 a výsledná směs byla míchána ve 23 °C, dokud nebyla spotřebována bis-acylovaná sloučenina (~30 minut). Reakční směs byla koncentrována na olej, pak rozdělena mezi vodu a EtOAc. Organické fáze byly promyty solankou, usušeny nad Na2SO4, filtrovány a koncentrovány. Purifikace chromatografií na silikagelu (1:1-8:2 ethylacetát-dichlormethan) poskytla sloučeninu z příkladu 41(a). 'H NMR (300 MHz, DMSO-dé) δ 13,6 (s, IH), 10,3 (s, IH), 8,62 (d, IH, J = 3,88 Hz), 8,38 (d, 1H, J = 8,51 Hz), 8,20 (s, IH), 8,12 (td, 1H,J = 7,58 Hz, J - 1,78 Hz), 8,02 (d, 1HJ = 16,36 Hz), 7,93 (s, IH), 7,83 (td, IH, J = 7,61 Hz, J - 1,7 Hz), 7,70 (d, IH, J = 7,78 Hz), 7,65 (d, IH, J = 16,23 Hz), 7,65 - 7,53 (m, 3H), 7,30 (m, IH), 4,43 (q, 2H,
J= 7,07 Hz), 2,21 (s, 3H), 1,31 (t, 3H, J= 7,07 Hz). MS (ESI+) [M+H]/z vypočteno 477, změřeno 477. Anal, výpočet: C, 70,57, H, 5,08, N, 7,64. Změřeno: C, 70,46, H 5,11, N, 17,61.
Příklad 4 l(b)
6-[3-(pyridin-4-ylkarboxamido)benzoyl]-3-E-[2-(pyridin-2-yl)ethenyl]-l H-indazol
-150CZ JU1007 Bb
Sloučenina z příkladu 41 (b) byla připravena podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu
41(a) kromě toho, že isonikotinová kyselina byla použita namísto 2-ethyl™5-methyl-2Hpyrazol-3-karboxylové kyseliny. lH NMR (300 MHz, CD3OD) δ 8,74 (d, 2H, J = 6,04 Hz), 8,56 (d, IH, J = 4,14 Hz), 8,27 (m, 2H), 8,05 (dt, IH, J = 7,97 Hz, J = 1,64 Hz), 8,02 (s, IH), 7,95 (d, IH, J = 16,55 Hz), 7,83 - 7,91 (m, 3H), 7,73 (m, 2H), 7,56-7,67 (m, 3H), 7,32 (m, IH).
MS (ESI+) [M+H]/z vypočteno 446, změřeno 446. Anal. výpočet: C, 72,80, H, 4,30, N, 15,72. Změřeno: C, 71,59, H, 4,43, Ν, 15,33.
io Příklad 41(c)
6-(3-krotonylamidobenzoyl)-3-E-[2-(pyrÍdin-2-yl)ethertyl]-lH-indazol
H
Sloučenina z příkladu 41 (c) byla připravena podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 15 41 (a) kromě toho, že krotonová kyselina byla použita namísto 2-ethyl-5-methyl-2H-pvrazol-3karboxylové kyseliny. 'H NMR (300 MHz, DMSO-dó) δ 13,6 (s, IH), 10,2 (s, IH), 8,63 (d, IH,
J = 3,81 Hz), 8,37 (d, IH, J = 8,49 Hz), 8,12 (s, IH), 8,02 (d, IH, J = 16,34 Hz), 7,99 (d, IH, J =
7.88 Hz), 7,83 (td, IH, J = 7,67 Hz, J = 1,78 Hz), 7,70 (d, IH, J = 7,85 Hz), 7,65 (d, IH, J = 16,40 Hz), 7,63 (dd, IH, J= 8,43 Hz, J= 1,23 Hz), 7,47- 7,56 (m, 2H), 7,29 (qd, IH, J = 7,39
Hz, J = 0,99 Hz), 6,82 (m, IH, J = 6,9 Hz), 6,11 (dd, J = 15,21 Hz, J = 1,68 Hz), 1,87 (d, 3H, J =
6.89 Hz). MS (ESI+) [M+H]/z vypočteno 409, změřeno 409. Anal. výpočet: C, 73,51, H, 4,94, N, 13,72. Změřeno: C, 72,15, H, 4,97, N, 13,39.
Příklad 41(d)
6“[3—(indoM-y lkarboxamido)benzoy 1]—3—E—[2—(pyridin—2—y l)ethenyl]-1 H-indazol
Sloučenina z příkladu 4 l(d) byla připravena podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 30 41 (a) kromě toho, že 1H—indol-4-karboxylová kyselina byla použita namísto 2-ethyl-5-methyl2H-pyrazol-3-karboxylové kyseliny. LCMS (ESI+) [M+H]/z vypočteno 484, změřeno 484.
Příklad 4 l(e)
6-[3-((5-acetylthien-2-yl)karboxamido)benzoyl]-3-E-[24pyridin-2-yl)ethenyl]-l H-indazol
Sloučenina z příkladu 41(e) byla připravena podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu (a) kromě toho, že 5-acetylthiofen-2-karboxylová kyselina byla použita namísto 2-ethyl-5methyl-2H pyrazol-3-karboxylové kyseliny. 'HNMR (300 MHz, DMSO-tb) δ 13,6 (s, IH),
10,6 (s, IH), 8,63 (d, 1H, J = 3,83 Hz), 8,39 (d, IH, J = 8,51 Hz), 8,20 (s, IH), 8,14 (dt, IH, J =
7,25 Hz, J = 2,05 Hz), 8,00 (d, IH, J = 4,01 Hz), 7,94 (s, IH), 7,83 (td, IH, J = 7,69 Hz, J = 1,78
Hz), 7,59 7,65 (m, 5H), 7,30 (qd, IH, J= 7,40 Hz, J = 0,96 Hz), 2,58 (s, 3H). MS (ESI+) [M+H]/z vypočteno 493, změřeno 493. Anal. výpočet: C, 68,278, H, 4,09, N, 11,37, S, 6,51. Změřeno: C, 66,07, H, 4,34, N, 10,91, S, 6,14.
io
Příklad 41 (f)
6-(3-(3,5-difluorfenylacetamido)benzoyl]-3-E-[2-(pyridin-2-yl)ethenyl]-l H-indazol
is Sloučenina z příkladu 41 (f) byla připravena podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 41 (a) kromě toho, že (3,5-difluorfenyl)octová kyselina byla použita namísto 2-ethyl-5-methyl2H-pyrazol-3-karboxylové kyseliny. *HNMR (300 MHz, DMSO-d$) δ 13,6 (Š s, IH), 10,5 (s, IH), 8?62 (d, IH, J = 4,02 Hz), 8,36 (d, IH, J = 8,51 Hz), 8,05 (s, IH), 8,01 (d, IH, J- 16,38 Hz), 7,93 (d, IH, J = 7,88 Hz), 7,90 (s, IH), 7,83 (td, IH, J= 7,61 Hz,
J = 1,77 Hz), 7,70 (d, IH, J = 7,85 Hz), 7,64 (d, IH, J = 16,33 Hz), 7,61 (dd, IH, J = 8,45 Hz, J= 1,15 Hz), 7,48- 7,57 (m, 2H), 7,15- 7,31 (m, 5H), 3,77 (s, 2H). MS (ESI+) [M+H]/z vypočteno 495, změřeno 495.
Příklad 4 l(g)
6-(3-(( 5-methy I-lH-pyrazol-3-yl)karboxamido)benzoyl]-3-E-[2-(pyridin-2-yl)ethenyl]-lHindazol
Sloučenina z příkladu 4 l(g) byla připravena podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 41 (a) kromě toho, že 5-methy 1-2H-pyrazol-3-karboxylové kyselina byla použita namísto 2-ethyl-5-methyl-2H-pyrazol-3-karboxylové kyseliny. 'HNMR (300 MHz, DMSO-d6)5 13,6 (š s, IH), 13,0 (šs, IH), 10,3 (š s, IH), 8,63 (d, IH, J = 3,95 Hz), 8,37 (d, IH, J = 8,66 Hz), 8,36 (s, IH), 8,16 (d, IH, J = 7,55 Hz), 8,02 (d, IH, J = 16,37 Hz), 7,93 (s, IH),
7,83 (dt, 1H, J = 7,61 Hz, J = 1,73 Hz), 7,70 (d, 1H, J = 7,82 Hz), 7,65 (d, 1H, J - 16,36 Hz), 7,65 (dd, IH, J = 8,55 Hz, J= 1,12 Hz), 7,52 (m, 2H), 7,29 (m, IH), 6,50 (s, IH), 2,29 (s, 3H). MS (ESI+) [M+H]/z vypočteno 449, změřeno 449. Anal. výpočet: C, 69,63, H, 4,49, N, 18,74. Změřeno: C, 68,53, H, 4,95, N, 17,47.
- 152 CZ JU1007 B6
Příklad 4 l(h)
6-[3-((2-RS-trans-methylcyklopropyl)karboxamido)benzoyl]-3-E-[2-(pyridin-2-yl)ethenyl]1 H-indazol
Sloučenina z příkladu 4 l(h) byla připravena podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu (a) kromě toho, že 2-methyl-cyklopropankarboxylová kyselina byla použita namísto 2-ethyl5-methyl-2H-pyrazol-3-karboxylové kyseliny. Rf sm 0,32, Rf p 0,42 (směs ethylacetátu a dichlormethanu 8:2), lHNMR (300 MHz, DMSO-dó) δ 13,6 (s, 1H), 10,4 (s, IH), 8,62 (dd, IH, io J = 4,75 Hz, J = 0,96), 8,36 (d, IH, J = 8,47 Hz), 8,06 (t, IH, J = 1,67 Hz), 8,01 (d, IH, J = 16,37
Hz), 7,90 (m, 2H), 7,83 (td, IH J = 7,68 Hz, J - 1,79 Hz), 7,70 (d, IH, J = 7,84 Hz), 7,64 (d, IH,
J = 16,35 Hz), 7,61 (dd, IH, J = 8,47 Hz, J = 1,32 Hz), 7,51 (t, IH, J =7,69 Hz), 7,45 (dt, IH, J =
7,8 Hz, J = 1,50 Hz), 7,29 (dq, IH, J = 7,41 Hz, J = 1,04 Hz), 1,51 (m, IH), 1,23 (m, IH), 1,09 (d,
3H, J = 5,93 Hz), 1,01 (m, IH), 0,65 (m, IH). MS (ESI+) [M+H]/z vypočteno 423, změřeno 423. 15 Anal. výpočet: C, 73,92, H, 5,25, N, 13,26. Změřeno: C, 71,41, H, 5,56, N, 13,27.
Příklad 41 (i)
6-[3-(( 1,5-d imethy 1-1 H-pyrazol-3-y í)karboxamido)benzoy 1]—3—E—[2—(pyrid in-2-yl)etheny I]1 H-indazol
Sloučenina z příkladu 41 (i) byla připravena podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 41(a) kromě toho, že l,5-dimethyl-lH-pyrazol-3-karboxylová kyselina byla použita namísto 225 ethyl-5-methyl-2H-pyrazol-3-karboxylové kyseliny. 'H NMR (300 MHz, DMSO-dó) 5 13,6 (s, IH), 10,2 (s, IH), 8,63 (d, IH, J = 3,87 Hz), 8,37 (d, IH, J = 8,49 Hz), 8,34 (d, IH, J = 1,63 Hz), 8,16 (td, IH, J = 7,43 Hz, J = 1,96 Hz), 8,02 (d, IH, J = 16,35 Hz), 7,92 (s, IH), 7,83 (dt, IH, J = 7,68 Hz, J = 1,79 Hz), 7,70 (d, IH, J = 7,84 Hz), 7,65 (d, IH, J = 16,35 Hz), 7,65 (dd, IH, J = 8,52 Hz, J= 1,2 Hz), 7,52 (m, 2H), 7,29 (m, IH), 6,55 (s, IH), 3,83 (s, 3H), 2,30 (s, 3H). MS (ESI+) [M+H]/z vypočteno 463, změřeno 463. Anal. výpočet: C, 70,12, H, 4,79, N, 18,17. Změřeno: C, 69,59, H, 4,88, N, 17,86.
Příklad 41(j)
6-[3-((3-methylpyridin)karboxamido)benzoyl]-3-E-[2-(pyridin-2-yl)ethenyl]-l H-indazol
153
Sloučenina z příkladu 4l(j) byla připravena podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu (a) kromě toho, že 3-methylisonikotinová kyselina byla použita namísto 2-ethyl-5-methyl2H-pyrazol-3-karboxylové kyseliny. 'HNMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 13,6 (s, IH), 10,7 (s,
IH), 10,7 (s, IH), 8,62 (dd, 1H, J = 4,72 Hz, J = 0,86 Hz), 8,57 (s, IH), 8,55 (d, IH, J = 4,91 Hz),
8,37 (d, 1H, J = 8,46 Hz), 8,20 (s, ÍH), 8,07 (dt, IH, J = 7,27 Hz, J = 1,99 Hz), 8,02 (d, 1H,J =
16,37 Hz), 7,93 (s, IH), 7,83 (td, IH, J = 7,69 Hz, J = 1,79 Hz), 7,70 (d, IH, J = 7,84 Hz), 7,64 (d, IH, J = 16,27 Hz), 7,55 - 7,65 (m, 3H), 7,48 (d, IH, J = 4,89 Hz), 7,30 (qd, IH, J = 7,39 Hz, 3 = 1,02 Hz), 2,38 (s, 3H). MS (ESI+) [M+H]/z vypočteno 460, změřeno 460.
io
Příklad 41 (k)
6-[3-(cyklopropylkarboxamido)benzQyl]-3-E-[2-(pyridin_2-yl)ethenyl]-1 H-indazol
Sloučenina z příkladu 41 (k) byla připravena podobným způsobem, jako v příkladu 41 (a) kromě toho, že cyklopropankarboxylová kyselina byla použita namísto 2-ethyl-5-methyl-2H-pyrazol3-karboxylové kyseliny. 'HNMR (CDCh/MeOD) δ 8,52 (d, IH, J= 3,9 Hz), 8,09 (d, IH, J = 8,5 Hz), 7,93 (s, IH), 7,85 - 7,80 (m, 3H), 7,71 - 7,63 (m, 2H), 7,55 - 7,48 (m, 3H), 7,39 (IH, t, J= 7,8 Hz), 7,16 (IH, qd, J = 6,3, 1,5 Hz), 1,62- 1,57 (m, IH), 1,25 - 1,84 (m, 2H),
0,87 - 0,81 (m, 2H). HRMS (MALDI) C25H20N4O2 [M+H]/z vypočteno 409,1659, změřeno
409,1660.
Příklad 41(1)
6-[3-((2-RS-trans-fenylcy klopropy l)karboxamido)benzoyl]-3-E-[2-(pyrid i n-2-yl)ethenyl ]1 H-indazol
Sloučenina z příkladu 41(1) byla připravena podobným způsobem, jako v příkladu 4 l(a) kromě 30 toho, že (lS,2S)-2-fenylcyklopropankarboxylová kyselina byla použita namísto 2-ethyl-5methyl-2H-pyrazol-3-karboxylové kyseliny. 'HNMR (CDCl3/MeOD) δ 8,60 (d, 1H,
J = 4,2 Hz), 8,17 (d, 1H, J = 8,4 Hz), 8,02 (s, IH), 7,91 (t, 3H, J - 8,1 Hz), 7,78 - 7,71 (m, 2H), 7,63 - 7,56 (m, 3H), 7,47 (t, 1H), 7,32 - 7,12 (m, 5H), 2,60 - 2,54 (m, 1 Η), 1,94 - 1,90 (m, 1H), 1,69(q, IH, J = 4,8 Hz), 1,37- 1,32 (m, IH). HRMS C31H24N4O2 vypočteno (M+H+)/z 485,1993, změřeno 485,1995.
Příklad 41(m)
6-[3-{(3-methylisoxazol-5-yl)karboxamido)benzoyl]-3-E-[2-(pyridin-2-yl)ethenyl]-1Hindazol
- 154CZ, JU100/ OO
Sloučenina z příkladu 41(m) byla připravena podobným způsobem, jako v příkladu 4l(a) kromě toho, že 3_methylisoxazol-5-karboxylová kyselina byla použita namísto 2-ethyl-5-methyl-2Hpyrazol-3-karboxylové kyseliny. ’H NMR (DMSO-de) δ 10,95 (IH, s), 8,68 (IH, d, J = 4,2 Hz),
8,44 (d, IH, J = 8,7 Hz), 8,35 (s, IH), 8,21-8,18 (m, IH), 8,08 (d, IH, J = 16,2 Hz), 7,98 (s, IH), 7,87(td, IH, J = 7,5,1,8 Hz), 7,76-7,64(m,6H),7,37-7,33 (m, lH),6,72(s, 1H),3,36 (s, 3H). HRMS (MALDI) C26Hi9N5O3 [M+H]/z; vypočteno 450,1561, změřeno 450,1570.
io Příklad 4 l(n)
6—[3—((3—t—butyl—1—methyl—1 H-pyrazol-5-yl)karboxamido)benzoyl]-3-E-[2-{pyridin-2-yl)-
Sloučenina z příkladu 41(n) byla připravena podobným způsobem, jako v příkladu 41 (a) kromě toho, že 5-terc-butyl-2-methyl-2H-pyrazol-3-karboxylová kyselina byla použita namísto 2-ethyl-5-methyl-2H-pyrazol-3-karboxylové kyseliny. ’Η NMR (CDCI3/MeOD) δ 8,59 (d, 1Η, J= 4,8 Hz), 8,14 (d, IH, J= 8,4 Hz), 8,08- 8,04 (m, IH), 7,98- 7,92 (m, 3H), 7,75 (td, IH, J = 7,8, 1,8 Hz), 7,68 (dd, IH, J= 8,4 Hz), 7,61-7,56 (m, 3H), 7,52 (t, IH, J= 8,70 Hz),
7,25 - 7,21 (m, IH), 6,75 (s, IH), 4,12 (s, 3H), 1,30 (s, 9H). HRMS (MALDI) C30H28N6O2 [M+říj/z: vypočteno 505,2347, změřeno 505,2353.
Příklad 41(o)
6-[3-((5-chIorthien-2-yl)karboxamido)benzoyl]-3-E-[2-(pyridin-2-yl)ethenyl]-1 H-indazol
Sloučenina z příkladu 41 (o) byla připravena podobným způsobem, jako v příkladu 41 (a) kromě toho, že 5-chlorthiofen-2-karboxylová kyselina byla použita namísto 2-ethyl-5-methyl-2H30 pyrazol-3-karboxylové kyseliny. ’H NMR (DMSO-d6) δ 10,58 (s, 1H), 8,68 (d, 1H, J = 4,2 Hz), 8,43 (d, IH, J = 8,5 Hz), 8,22 (s, IH), 8,15 (dt, IH, J = 7,5, 2,0 Hz), 8,08 (d, IH, J = 16,4 Hz), 8,00 - 7,98 (m, 3H), 7,88 (td, 1H, J = 7,7, 1,9 Hz), 7,78 - 7,62 (m, 4H), 7,33 (d, 2H, J = 4,1 Hz). HRMS (MALDI) C2óHi7N4O2CÍS [M+H+]/z: vypočteno 485,0843, změřeno 485,0853.
- 155CZ 301667 B6
Příklad 4 l(p)
6—[3—((1,3-dimethyl-l H-pyrazol-5-yl)karboxamido)benzoyl]-3-E-[2-(pyridin-2-yl)ethenyl]1 H-indazol
Sloučenina z příkladu 41(p) byla připravena podobným způsobem, jako v příkladu 41 (a) kromě toho, že 2,5-dimethyl-2H-pyrazol-3-karboxylová kyselina byla použita namísto 2—ethyl—5— methyl-2H-pyrazol-3-karboxylové kyseliny. HPLC: Rt 3,90 minut (100% oblast). 'HNMR (CDCh) δ 8,52 (d, IH, J = 4,8 Hz), 8,10 (d, IH, J = 8,4 Hz), 7,98 (d, IH, J = 8,1 Hz), 7,93 (s, ίο IH), 7,88- 7,80 (m, 3H), 7,71 -7,62 (m, 2H), 7,56- 7,49 (m, 4H), 7,44 (t, IH,
J = 7,8 Hz), 7,16 (dd, IH, J = 7,1, 4,8 Hz). HRMS (MALDI) C27H22N6O2. [M+H+]/z: vypočteno
463,1877, změřeno 465,1889.
Příklad 4 l(q)
6-[3-((2-chlor-6-methylpyridin-4-yl)karboxamido)benzoyl]-3-E-[2-(pyridin-2-yl)ethenyl]1 H-indazol
Sloučenina z příkladu 41 (q) byla připravena podobným způsobem, jako v příkladu 41 (a) kromě toho, že 2-chlor-6-methyl isonikotinová kyselina byla použita namísto 2-ethyl-5-methyl-2lípy razo 1-3-karboxy lové kyseliny. HPLC: Rt 4,11 minut (100% oblast), 'HNMR (DMSO-d6) 510,77 (s, IH), 8,68 (d, IH, J = 3,9 Hz), 8,44 (d, IH, J= 8,4 Hz), 8,28 (s, IH), 8,21 (dt, 1H,J = 6,9, 2,1 Hz, 8,08 (d, IH, J= 16,2 Hz), 7,98 (s, IH), 7,92 - 7,64 (m, 9H), 7,35 (dd, IH, J = 6,6, 4,8 Hz), 2,61 (s, 3H).
Příklad 4 l(r)
6-[3-((n-propyI-3-methyHH-pyrazol-5-yl)karboxamido)benzoyl]-3-E-[2-(pyridin-2-yl)ethenyl]-! H-indazol
- 156CZ JU100/ BO
Sloučenina z příkladu 41(r) byla připravena podobným způsobem, jako v příkladu 41 (a) kromě toho, že 5-methyl-2-propyl-2H-pyrazol-3-karboxylová kyselina byla použita namísto 2-ethyl5-methyl-2H-pyrazol-3-karboxylové kyseliny. 'HNMR (DMSO-dó) δ 10,29 (s, IH), 8,58 (d, IH, J = 3,9 Hz), 8,33 (d, IH, J = 8,4 Hz), 8,13 (s, IH), 8,10 (dt, IH, J = 5,4, 2,1 Hz), 7,96 s (d, IH, J= 16,5 Hz), 7,87 (s, IH), 7,78 (td, IH, J = 7,5, 1,5 Hz), 7,61 - 7,49 (m, 6H), 7,24 (dd, IH, J = 6,9, 1,8 Hz), 4,32 (t, 2H, J = 6,90 Hz), 1,69 (q, 2H, J = 7,2 Hz), 0,77 (t, 3H, 7,5 Hz).
HRMS (MALDI) C28H2oClN502. [M+řTj/z: vypočteno 491,2190, změřeno 491,2203.
io Příklad 4 l(s)
6-[3-(4-t-butylbenzamido)benzoyl]-3_E-[2-(pyridin-2-yl)ethenyl]-l H-indazol
Sloučenina z příkladu 4l(s) byla připravena podobným způsobem, jako v příkladu 41(a) kromě 15 toho, že 4-terc-butylbenzoová kyselina byla použita namísto 2-ethy 1-5-methy 1-2H-pyrazol-3karboxylové kyseliny. HPLC: Rt 4,67 minut (100% oblast). ‘HNMR (DMSO) δ 10,45 (s, IH),
8,44 (d, IH, J= 8,4 Hz), 8,32 (s, IH), 8,22 (d, IH, J- 7,5 Hz), 8,07 (d, IH, J- 16,5 Hz), 7,99-7,95 (m, 3H), 7,88 (td, IH, J= 7,7, 1,5 Hz), 7,69- 7,59 (m, 7H), 7,38 (dd, IH, 13,5, 5,1 Hz), 1,36 (s,9H).
Příklad 41(t)
6-[3-((l-allyI-3-methyI-lH-pyrazol-5-yl)karboxamido)benzoyl]-3-E-[2-(pyridin-2-yl)25 ethenyl]-! H-indazol
Sloučenina z příkladu 41(t) byla připravena podobným způsobem, jako v příkladu 41(a) kromě toho, že 2-ally 1-5-methy 1-2H-pyrazol-3-karboxylová kyselina byla použita namísto 2-ethy 1-5methy 1-2 H-pyrazol-3-karboxy lové kyseliny. HPLC: Rt 4,11 minut (100% oblast), 'HNMR (DMSO) δ 10,46 (s, IH), 8,74 (t, IH, J = 5,1 Hz), 8,48 (d, IH, J = 8,4 Hz), 8,28 (s, IH), 8,22 (t, IH, J - 5,4, 2,1 Hz), 8,15-8,01 (m, 3H), 7,39 (td, IH, J = 7,8, 1,8 Hz), 7,82 - 7,63 (m, 6H), 7,39 (td, IH, J=7,7, 1,5 Hz), 6,14-6,02 (m, IH), 5,22- 5,03 (m, 4H), 2,38 (s, 3H). HRMS (MALDI) C29H24N6O2 (M+H+)/z: vypočteno 489,2034, změřeno 489,2035.
Příklad 41(u)
6-[3-((2-ch I or-6-methoxypy rid in^l—y l)karboxam ido)benzoy t]-3-E-[2-(pyri d in-2-y I)ethenyl]-! H-indazol
- 157 CZ 301667 B6
Sloučenina z příkladu 41(u) byla připravena podobným způsobem, jako v příkladu 41 (a) kromě toho, že 2-chlor-6-methoxyisonikotinová kyselina byla použita namísto 2-ethyl-5-methyl-2Hpyrazol-3-karboxylové kyseliny. HPLC: Rt 4,37minut (100% oblast). 'HNMR (DMSO-tU) 5 δ 10,74 (s, IH), 8,68 (d, IH, J = 3,6 Hz), 8,44 (d, IH, J = 8,4 Hz), 8,28 (s, IH), 8,20 (td, IH,
J = 6,6,2,4 Hz), 8,07 (d, IH, J = 16,2 Hz), 7,98 (s, IH), 7,89 (td, 1H, J = 7,7, 1,8 Hz), 7,77 - 7,62 (m, 6H), 7,38 (s, IH), 7,35 (dd, IH, J = 6,9,1,8 Hz), 3,98 (s, 3H).
io Příklad 41 (v)
6-[3-((3-ethyl-l-methyl-lH-pyrazol-5-yl)karboxamido]benzoyl]-3-E-[2-(pyridin-2-yl)-
Sloučenina z příkladu 41(v) byla připravena podobným způsobem, jako v příkladu 41(a) kromě toho, že 5-ethyl-2-methyl-2H-pyrazol-3-karboxylová kyselina byla použita namísto 2-ethyl5-methyl-2H-pyrazol-3-karboxylové kyseliny. HPLC: Rt 4,16 minut (100% oblast). ’HNMR (DMSO-d6) δ 10,44 (s, IH), 8,73 (d, IH, J= 3,0 Hz), 8,78 (d, IH, 8,7 Hz), 8,30 (s, IH), 8,23 (d, IH, J = 6,9 Hz), 8,14-8,03 (m, 2H), 7,93 (t, IH, 6,9 Hz), 7,82-7,63 (m, 6H), 7,40 (t, IH,
J = 6,3 Hz), 7,01 (s, IH), 4,12 (s, IH), 2,68 (q, 2H, 7,8 Hz), 1,30 (t, 3H, J - 7,5 Hz). HRMS (MALD1) C28H24N6O2 [M+H+]/z: vypočteno 477,2034, změřeno 477,2054.
Příklad 41(w)
6-[3-((2-chlorpyridin-4-yl)karboxamido)benzoyl]-3-E-[2-(pyridin-2-yl)ethenyl]-l H-indazol
Sloučenina z příkladu 41(w) byla připravena podobným způsobem, jako v příkladu 41 (a) kromě toho, že 2-chlorisonikotinová kyselina byla použita namísto 2-ethyl-5-methyl-2H-pyrazol-330 karboxylové kyseliny. HPLC: Rt 3,99minut (100% oblast). lH NMR (DMSO-dó) δ 10,88 (s, IH),
7,33 (d, 2H, J = 4,8 Hz), 8,49 (d, IH, J = 8,4 Hz), 8,33 (s, IH), 8,26 (td, IH, J = 6,9, 3,0 Hz),
8,12 - 7,91 (m, 5H), 7,82 - 7,63 (m, 5H), 7,40 (t, 1H, J - 4,8 Hz).
-158cz Jinoo / bď
Příklad 4 l(x)
6- [3-((1 -isopropy 1-3-methyl-1 H-pyrazol-5-yl)karboxamido)benzoyl]-3-E-[2-{pyridin-2-y 1 )-
Sloučenina z příkladu 41(x) byla připravena podobným způsobem, jako v příkladu 41 (a) kromě toho, že 2-isopropyl-5-methyl-2H-pyrazol-3-karboxylová kyselina byla použita namísto 2-ethyl-5-methyl-2H-pyrazol-3-karboxyíové kyseliny. HPLC: Rt 4,19 minut (100% oblast). 'HNMR (DMSO) S 10,46 (s, IH), 8,72 (t, IH, J= 4,80 Hz), 8,48 (d, IH, J= 9,0 Hz), 8,31 lú (s, IH), 8,21 (td, IH, J= 9,6, 2,1 Hz), 8,15-7,98 (m, 2H), 7,96- 7,84 (m, IH), 7,82-7,65 (m,5H), 7,42-7,38 (m, IH), 6,88 (s, IH), 5,64 -5,38 (m, IH), 2,32 (s, 3H), 1,48 (d, IH,
J = 6,6 Hz). HRMS (MALDI) C29H20N6O2 [M+Ffj/z, vypočteno 491,2190, změřeno 491,2194.
Příklad 4 l(y)
6-[3-(isopropoxykarbonylamino)benzoyl)benzoyl]-3-E“[2-(pyridin-2-yl)ethenyl]-l H-indazol
Sloučenina z příkladu 4l(y) byla připravena podobným způsobem, jako v příkladu 41 (a) kromě 20 toho, že isopropylchloroformiát byl použít namísto 2-ethy 1-5-methy 1-2H-pyrazo 1-3-karboxylové kyseliny. 'HNMR (DMSO-cU) δ 9,97 (s, IH), 8,72 (t, 2H, J= 4,8 Hz), 8,47 (d, IH,
J= 8,7 Hz), 8,34- 7,96 (m, 3H), 8,01 - 7,87 (m, 2H), 7,82 -7,69 (m, 2H), 7,52 (dt, IH, J= 7,5, 1,2 Hz), 7,42- 7,36 (m, 2H), 3,68 (d, 2H, J= 6,6 Hz), 2,02 (m, IH), 1,02 (d, 6H, J = 6,6 Hz). HRMS (MALDI) C26H24N4O3 [M+H]+/z: vypočteno 441,1921, změřeno 441,1937.
Příklad 41 (z)
6-[3-((4-chlorpyridin-2-yl)karboxamido)benzoyl]-3-E-[2-(pyrÍdin-2-yl)ethenyl]-l H-indazol
Sloučenina z příkladu 41 (z) byla připravena podobným způsobem, jako v příkladu 41 (a) kromě toho, že 4-chlorpyridin-2-karboxylová kyselina byla použita namísto 2-ethy 1-5-methy 1-2 Hpyrazol-3-karboxyIové kyseliny. HPLC: Rt 4,40 minut (100% oblast). 'HNMR (DMSO-d6) δ 10,99 (s, IH), 8,72 (d, IH, J = 5,4 Hz), 8,63 (d, IH, J= 3,9 Hz), 8,44 (s, IH), 8,38 (d, IH,
-159CZ 301667 B6
J = 8,4 Hz), 8,25 (dt, IH, J = 6,6, 2,4 Hz), 8,16 (d, IH, J = 1,8 Hz), 8,02 (d, IH, J = 16,2 Hz),
7,94 (s, 1H), 7,86 - 7,80 (m, 2H), 7,72 - 7,58 (m, 5H), 7,92 (dd, 1H, J = 6,9, 6,0 Hz).
Příklad 4 l(aa)
6-[3-(pyridin-2-ylkarboxamido)benzoyl]-3-E-[2-(pyridin-2-yl)ethenyl]-l H-indazol
Sloučenina z příkladu 41(aa) byla připravena podobným způsobem, jako v příkladu 41(a) kromě io toho, že pyridin-2-karboxylová kyselina byla použita namísto 2-ethy 1-5-methy 1-2H-pyrazol3-karboxylové kyseliny. *HNMR (300 MHz, DMF-d6) δ 10,9 (s, IH), 8,74 (m, IH), 8,63 (dd, 1H, J = 4,78 Hz, 0,94 Hz), 8,46 (s, IH), 8,38 (d, IH, J = 8,48 Hz), 8,25 (dt, IH, J = 7,17 Hz, J = 2,05 Hz), 8,16 (dt, IH, J = 7,73 Hz, J = 1,04 Hz), 8,07 (td, IH, J = 7,56 Hz, J = 1,67 Hz), 8,02 (d, IH, J = 16,28 Hz), 7,95 (s, IH), 7,83 (td, IH, J = 7,65 Hz, J = 1,81 Hz), 7,22 - 7,66 (m, 4H),
7,30 (qd, 1 H,J = 7,40 Hz, J- 1,02 Hz). MS (ESI+) [M+H]/z vypočteno 446, změřeno 446.
Příklad 4 l(bb)
6-[3-{3-methoxybenzamÍdo)benzoyI]-3-E-[2~{pyridin-2-yl)ethenyl]-l H-indazol
Sloučenina z příkladu 41(bb) byla připravena podobným způsobem, jako v příkladu 41(a) kromě toho, že 3-methoxybenzoová kyselina byla použita namísto 2-ethyl-5-methy 1-2H-pyrazol-3karboxylové kyseliny. 'HNMR (DMSO-d.) δ 10,50 (s, IH), 8,67 (d, IH, J = 3,9 Hz), 8,46 (d, IH, J = 8,7 Hz), 8,33 (s, IH), 8,22 (dt, IH, J = 7,8, 1,8), 8,08 (d, IH, J = 15,0 Hz), 8,00 (s, IH), 7,78-7,54 (m, 8H), 7,51 (t, IH, 7,8 Hz), 7,38 - 7,33 (m, IH), 7,23 (dd, IH, J- 7,5, 1,5 Hz), 3,90 (s, 3H). HRMS (MALDI) C2,H22N4O3. [Mt )Γ]/ζ: vypočteno 475,1765, změřeno 475,1763,
Příklad 41(cc)
6-[3-(fenoxyamido)benzoyl]-3-E-[2-(pyridin-2-yl)ethenyl]-l H-indazol
Sloučenina z příkladu 41(cc) byla připravena podobným způsobem, jako v příkladu 41 (a) kromě toho, že feny leh loroformiát byl použit namísto 2-ethy 1-5-methy 1-2 H-pyrazol-3-karboxy love
-160CZ JUlbb/ Bb kyseliny. Tt 212-217 °C, *HNMR (300 MHz, DMSO-dó) δ 13,63 (s, IH), 10,51 (s, IH), 8,62 (d, IH, J = 4,3 Hz), 8,36 (d, IH, J- 8,6 Hz), 8,04- 7,81 (m, 5H), 7,71- 7,40 (m, 7H), 7,31-7,22 (m, 4H). ESIMS m/z 461 [M+H]+. Anal. vypočteno pro C28H2oN403 * 0,3 H2O 465,9 g mol’1): C, 72,18, H, 4,46, N, 11,33. Změřeno: C, 72,41, H, 4,63, N, 11,57.
Příklad 41 (dd)
6—[3—(3,3, -dimethylakrylamido)benzoyl]-3-E-[2-(pyridin-2-yl)ethenyl]-l H-indazol
Sloučenina z příkladu 4t(dd) byla připravena podobným způsobem, jako v příkladu 41(a) kromě toho, že 3,3-dimethylakrylová kyselina byla použita namísto 2-ethyl-5-methyl-2H-pyrazol-3karboxylové kyseliny. 'HNMR (300 MHz, DMSO-dó) δ 13,6 (s, IH), 10,2 (s, IH), 8,63 (d, IH, J = 3,81 Hz), 8,37 (d, IH, J = 8,49 Hz), 8,12 (s, IH), 8,02 (d, IH, J = 16,34 Hz), 7,99 (d, IH,
J = 7,88 Hz), 7,83 (td, IH, J = 7,67 Hz, J = 1,78 Hz), 7,70 (d, IH, J = 7,85 Hz), 7,63 (dd, IH, J - 8,43 Hz, J = 1,23 Hz), 7,47 - 7,56 (m, 2H), 7,29 (qd, IH, J = 7,39 Hz, J = 0,99 Hz), 6,82 (m, IH, J = 6,9 Hz), 5,85 (s, IH), 2,12 (s, 3H), 1,85 (s, 3H). MS (ESI+) [M+H]/z vypočteno 409, změřeno 409. Anal. vypočteno pro C26H22N4O2 0,33 TBME: C, 73,54, H, 5,80, N, 12,41. Změřeno: C, 73,26, H, 5,76, N, 12,36.
Příklad 41(ee)
6-[3-(( 1 -ethy 1-3-d i methy I-1 H-pyrazol-5-yl )karboxamido)-4-methyl benzoyl ]—3—E—[2— (pyridin-2-yl)ethenyl]-l H-indazol
Sloučenina z příkladu 41(ee) byla připravena podobným způsobem, jako v příkladu 41(a) kromě toho, že z příkladu 40(b) byla použita namísto sloučeniny z příkladu 40(a). 'H NMR (300 MHz, DMSO-dó) δ 13,6 (s, IH), 9,94 (s, IH), 8,62 (d, IH, J = 3,8 Hz), 8,36 (d, IH, J = 8,51 Hz), 8,01 (d, IH, J - 16,36 Hz), 7,91 (s, IH), 7,84 (dd, IH, J = 7,66 Hz, J = 1,74 Hz), 7,81 (s, IH), 7,70 (d, IH, J = 7,9 Hz), 7,64 (d, IH, J = 16,45 Hz), 7,62 (m,2H), 7,50 (d, IH, J= 7,83 Hz), 7,29 (m, IH), 6,82 (s, IH), 4,42 (q, 2H, J = 7,06 Hz), 2,36 (s, 3H), 2,21 (s, 3H), 1,30 (t, 3H, J= 7,09 Hz). MS (ESI+) [M+H]/z vypočteno 491, změřeno 491. Anal. výpočet: C, 71,00, H, 5,34, N, 17,13. Změřeno: C, 70,80, H, 5,38, N, 17,00.
Příklad 41 (Tf)
6-[3-(l-allyI-3-methyl-lH-pyrazol-5-yl)karboxamido)-4-methylbenzoylj-3-E-[2-(pyrÍdin40 2-yl)etheny]]-l H-indazol
- 161 CZ 301667 Bó
Sloučenina z příkladu 41(ff) byla připravena podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 41 (ee) kromě toho, že 2-allyl-5-methyl-2H-pyrazol-3-karboxvlová kyselina byla použita namísto 2-ethyl-5-methyl-2H-pyrazol-3-karboxylové kyseliny. H NMR (300 MHz, DMSO5 d6) δ 13,6 (s, IH), 9,98 (s, IH), 8,62 (d, IH, J = 4,60 Hz), 8,36 (d, IH, J = 8,46 Hz), 8,01 (d, IH,
J = 16,37 Hz), 7,91 (s, IH), 7,83 (td, IH, J = 7,69 Hz, J = 1,77 Hz), 7,78 (d, IH, J = 1,73), 7,70 (d, IH, J = 7,78 Hz), 7,59-7,70 (m, 3H), 7,50 (d, IH, J- 8,01 Hz), 7,29 (qd, IH, J = 7,46 Hz, J = 1,02 Hz), 6,86 (s, IH), 5,95 (m, IH), 4,93 - 5,10 (m, 4H), 2,34 (s, 3H), 2,22 (s, 3H). LCMS (ESI+) [M+H]/z vypočteno 503, změřeno 503. Anal. výpočet: C, 71,70, H, 5,21, io N, 16,72. Změřeno: C, 70,98, H, 5,42, N, 15,94.
Příklad 41 (gg)
6-(3-acetamido-4—methylbenzoyl]-3-E-[2-(pyrídin-2-yl)ethenyl]-l H-indazol
Sloučenina z příkladu 41(gg) byla připravena podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 41(ee) kromě toho, že acety leh lorid byl použit namísto 2-ethyl-5-methyl-2H-pyrazol-3-karboxylové kyseliny. 'H NMR (CD3OD) δ 8,57 (d, IH, J = 4,90 Hz), 8,13 (d, IH, J = 8,49 Hz), 7,99 (s, IH), 7,95 (d, IH, J= 16,53 Hz), 7,89 (d, IH, J= 1,46 Hz), 7,86 (td, IH, J= 7,64 Hz,
J = 1,73 Hz), 7,73 (d, IH, J = 7,05 Hz), 7,62 - 7,69 (m, 2H), 7,65 (d, IH, J = 16,48 Hz), 7,44 (d, IH, J = 7,97 Hz), 7,32 (qd, IH, J = 7,44 Hz, J = 1,03 Hz), 2,38 (s, 3H), 2,18 (s, 3H). LCMS (ESI+) [M+H]/z vypočteno 397, změřeno 397. Anal. výpočet: C, 72,71, H, 5,08, N, 14,13. Změřeno: C, 72,29, H, 5,09, N, 13,98.
Příklad 41 (hh)
6-[3-(( 1,3-dimethyl-l H-pyrazo l-5-yl)karboxam i do)-4-methyl benzoyl ]-3-E-[2-(pyridi n-230 y I )etheny 1 ]— 1 H-indazol
Sloučenina z příkladu 41 (hh) byla připravena podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu (ee) kromě toho, že 2,5-dimethy 1-2H-pyrazol-3-karboxylová kyselina byla použita namísto
2~ethyl-5-methyl-2H-pyrazoI-3-karboxylové kyseliny. HPLC: Rt = 3,92 minut (100% oblast).
-162CZ JW1067 B6
Ή NMR (DMSO) δ 10,02 (s, IH), 8,74 (d, IH, J = 3,6 Hz), 8,49 (d, IH, J = 8,4 Hz), 8,13 (d, 1H, J = 16,3 Hz), 8,03 (s, IH), 7,96 - 7,93 (m, 2H), 7,84 - 7,72 (ra, 4H), 7,63 (d, IH, 8,1 Hz), 7,42 (dd, IH, J = 6,8,1,5 Hz), 6,95 (s, IH),4,11 (s, IH), 2,48(s, IH),2,32 (s, IH).
Příklad 41(ii)
6—[3-((1 -n-propy l-3-methyl-lH-pyrazol-5-yI)karboxamido)-^-methylbenzoyl]-3-E-[2(pyridin—2—y l)etheny 1]— 1 H-indazol
Sloučenina z příkladu 41(ii) byla připravena podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu
41(ee) kromě toho, že 5-methyl-2H-pyrazol-3-karboxylová kyselina byla použita namísto
2-ethyl-5-methyl-2H-pyrazol-3-karboxylové kyseliny. HPLC: Rt 4,16 minut (100% oblast).
'H NMR(DMSO-d,) δ 10,29 (s, IH), 8,58 (d, IH, 3,9 Hz), 8,33 (d, IH, J = 8,4 Hz), 8,13 (s, 1H), υ 8,10 (dt, IH, J = 5,4, 2,1 Hz), 7,96 (d, IH, J = 16,5 Hz), 7,87 (s, IH), 7,78 (td, IH, J = 7,5,
1,5 Hz), 7,61-7,49 (m, 6H), 7,24 (dd, IH, J = 6,9, 1,8 Hz), 4,32 (t, 2H, J= 6,90 Hz), 2,58 (s, 3H), 2,22 (s, 3H), 1,69 (q, 2H, J = 7,2 Hz), 0,77 (t, 3H, 7,5 Hz). HRMS (MALD1) C»H26N6O2 [M+H]+/z: vypočteno 505,2347, změřeno 505,2343.
Příklad 41 (jj)
6-[3-((3-ethyl-l-methyl-lH-pyrazol-5-yl)karboxamido}-4-methylbenzoyl]-3-E-[2-{pyridin2—y l)etheny 1]—1 H-indazol
Sloučenina z příkladu 41 (jj) byla připravena podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 4t(ee) kromě toho, že 5-ethyl-2-methyl-2H-pyrazol-3-karboxylová kyselina byla použita namísto 2-ethyl-5-methyl-2H-pyrazol-3-karboxylové kyseliny. 'HNMR (DMSO-^dň) δ 10,78
HRMS (MALDI) C29H26N6O2 (M+H+) m/z: vypočteno 491,2190, změřeno 491,2211.
Příklad 4 l(kk)
6-[3-(( l-*sopropyl-3-methyl-1 H-pyrazol-5-yl)karboxamÍdop4-methylbenzoyl]-3-E-[2(pyridin—2—yl)etheny 1]— 1 H-indazol
- 163CZ 301667 B6
Sloučenina z příkladu 41 (kk) byla připravena podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 41(ee) kromě toho, že 2-isop ropy 1-5-methy 1-2H-pyrazol-3-karboxylová kyselina byla použita namísto 2-ethyl-5-methyl-2H-pyrazol-3-karboxylové kyseliny. HPLC: Rt 4,11 minut (100% oblast). lHNMR (DMSO-Λ) δ 9,99 (s, IH), 8,68 (d, IH, J= 3,6 Hz), 8,42 (d, IH, J = 8,7 Hz), 8,07 (d, IH, J = 16,4 Hz), 7,98 (s, IH), 7,67 - 7,86 (m, 2H), 7,77 - 7,65 (m, 4H), 7,56 (d, IH, J = 7,8 Hz), 7,37 - 7,33 (m, IH), 6,82 (s, 2H), 5,44- 5,36 (m, IH), 2,42 (s, 3H), 2,28 (s, 3H), 1,42 (d, 6H, J = 6,6 Hz). Anal. (C30H28N6O2 · 0,2H2O) vypočteno: C, 5,63, N, 16,54, změřeno C, 70,57, H, 5,70, N, 16,35.
Příklad 41(11)
6-[2,4-dimethyl-5-((l-ethyl-3-methyl-lH-pyrazol-5-yl)karboxamido)benzoyl]-3-E-[215 (pyridin—2—y1)ethenyl]— 1 H-indazol
Sloučenina z příkladu 41(11) byla připravena podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 41 (a) kromě toho, že sloučenina z příkladu 40(c) byla použita namísto sloučeniny z příkladu 40(a). 'HNMR (DMSO-dó) δ 13,6 (s, IH), 9,82 (s, IH), 8,63 (d, IH, J = 3,84 Hz), 8,35 (d, IH,
J = 8,54 Hz), 8,00 (d, IH, J = 16,37 Hz), 7,83 (s, IH), 7,83 (td, IH, J = 7,65 Hz, J = 1,82 Hz), 7,69 (d, IH, J = 7,89 Hz), 7,65 (dd, IH, J = 8,52 Hz, J = 1,36 Hz), 7,62 (d, IH, J = 16,34 Hz), 7,35 (s, IH), 7,32 (s, IH), 7,29 (qd., IH, J = 7,42 Hz, J = 1,09 Hz), 6,78 (s, IH), 4,39 (q, 2H, J = 7,15 Hz), 2,30 (s, 3H), 2,25 (s, 3H), 2,19 (s, 3H), 1,27 (t, 3H, J = 7,15 Hz). LCMS (ESI+) [M+H]/z vypočteno 505, změřeno 505.
Příklad 41 (mm)
6-[2,4-di methy 1-5-(( 1,3-dimethy 1-1 H-pyrazol-5-yl)karboxamido)benzoyl]-3-E-[2-(pyridin30 2-y l)etheny 1]-1 H-indazol
Sloučenina z příkladu 41(mm) byla připravena podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 41(11) kromě toho, že 2,5-dimethyl-2H-pyrazol-3-karboxylová kyselina byla použita namísto 2-ethyl-5-methyl-2H-pyrazol-3-karboxylové kyseliny. 'HNMR (DMSO-dó) δ 13,6
- 164CZ JU1W»7 Bó (s, IH), 9,81 (s, IH), 8,62 (d, IH, J= 3,81 Hz), 8,35 (d, IH, J= 8,6 Hz), 8,00 (d, IH,
J = 16,36 Hz), 7,83 (dt, IH, J = 7,65 Hz, J = 1,8 Hz), 7,8 (s, IH), 7,69 (d, IH, J = 7,88 Hz), 7,65 (dd, IH, J = 8,53 Hz, J = 1,36 Hz), 7,62 (d, IH, J = 16,35 Hz), 7,36 (s, IH), 7,32 (s, IH), 7,29 (qd, IH, J = 7,41 Hz, J - 1,03 Hz), 6,79 (s, IH), 3,96 (s, 3H), 2,30 (s, 3H), 2,25 (s, 3H), 2,18 (s, 3H). LCMS (ESI+) [M+H]/z vypočteno 491, změřeno 491. Anal. výpočet: C, 71,00, H, 5,34,
N, 17,13. Změřeno: C, 70,69, H, 5,57, N, 16,26.
Příklad 4 l(nn) io
6-(5-acetamido-2,4-dimethylbenzoyl]-3-E-[2-(pyridin-2-yI)ethenyl]-l H-indazol
Sloučenina z příkladu 41(nn) byla připravena podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 41(11) kromě toho, že acetylchlorid byl použit namísto 2-ethyl-5-methyl-2H-pyrazol-3-karbo15 xylové kyseliny, *HNMR (DMSO-dó) δ 13,6 (šs, IH), 9,34 (s, IH), 8,62 (d, IH, J = 4,15 Hz), 8,33 (d, IH, J = 8,6 Hz), 7,86 (d, IH, J = 16,36 Hz), 7,83 (td, IH, J = 7,71 Hz, J = 1,82 Hz), 7,81 (s, IH), 7,69 (d, IH, J = 7,84 Hz), 7,64 (dd, IH, J = 1,38 Hz), 7,62 (d, IH, J = 16,46 Hz), 7,48 (s, H), 7,29 (qd, IH, J = 7,44 Hz, J - 1,02 Hz), 7,24 (s, IH), 2,27 (s, 3H), 2,23 (s, 3H), 2,02 (s, 3H). LCMS (ESI+) [M+H]/z vypočteno 411, změřeno 411.
Příklady 41(oo)-41(lll) mohou být připraveny podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 41(a).
Příklad 41(oo)
Příklad 41 (pp)
- 165CZ 301667 B6
Příklad 41(qq)
Příklad 41 (rr)
Příklad 4 l(ss) io Příklad 4 l(tt)
Příklad 41(uu)
- 166CL OUIOO/ BO
Příklad 4 l(vv)
Příklad 41(ww)
Příklad 4 l(xx)
io Příklad 41 (yy)
Příklad 41 (zz)
- 167CZ 301667 B6
Příklad 41(aaa)
Příklad 41 (bbb)
Příklad 41 (ccc)
io Příklad 41 (ddd)
Příklad 41(eee)
- 168CZ JU100/ BO
Příklad 4 l(fff)
Příklad 4 l(ggg)
Příklad 4l(hhh)
io Příklad 41 (iii)
Příklad 41(jjj)
-169
Příklad 4 l(kkk)
Příklad 41(111)
Příklad 42(a) ío 6-(3-benzamidobenzoyl)-3-E-[2-(pyridin-2-yl)ethenyl]-l H-indazol
0,58 g (80,6%) sloučeniny z příkladu 42(a) bylo připraveno z 6-(3-benzamidobenzoyl)-3-E-[2(pyridin-2-yl)ethenyl]-l-(2-trimethyIsilanylethoxymethyl)-l H-indazolu podobným způsobem, jako v příkladu 12. HPLC 4,13 minut (98% oblast). ]H NMR (CDCI3) δ 8,66 (d, IH, J = 4,1 Hz),
8,24 (d, IH, J = 8,5 Hz), 8,11 - 8,10 (m, 3H), 8,01 - 7,98 (m, 4H), 7,83 (t, 2H, J = 7,1 Hz),
7,72- 7,53 (m, 7H), 7,30 (qd, IH, 52, 1,1 Hz). HRMS (MALDI) C28H20N4O2. [M+H]/z: vypočteno 445,1664, změřeno 445,1659. Anal. (026Η|$Ν302 0,2 EtOAc): C, 75,87, H, 4,78, N, 12,39.
Výchozí látka byla připravena takto:
(>)
170CZ, ΜΗ 00/ BO
K míchanému roztoku 4,00 g (8,40 mmol) 6—jod—3—((E)styryl)— 1 —<2—trimethylsilany tethoxymethyl)-lH-indazolu z příkladu 14, krok (i), v 48 ml anisolu v argonové atmosféře bylo 176 mg (0,25 mmol) přidáno bis(trifenylfosfín)palladiumdichloridu, 288 mg (1,0 mmol) TBACI, 1,54 ml (16,8 mmol) 2-butanolu a 3,48 g (25,2 mmol) uhličitanu draselného. Výsledná směs byla míchána v atmosféře oxidu uhelnatého v 80 °C po dobu 100 hodin. Po odstranění rozpouštědla koncentrací ve vakuu byl získaný zbytek naředěn 400 ml EtOAc a extrahován 2x 150 ml saturovaného NaCl, 2 x 50 ml saturovaného NaHCO3 a 2 x 50 ml vody, pak byla organická vrstva filtrována přes 20 ml silikagelu. Organický filtrát pak byl koncentrován ve vakuu za vzniku jantarového oleje. Purifikace velmi rychlou chromatografií se směsí hexanu a EtOAc io (7:3) poskytla po koncentraci 2,38 g (61 % výtěžek) 6-(3-aminobenzoyl)-3-((E)styryl)-l-(2trimethylsilanylethoxymethyl)-lH-indazolu jako jantarového oleje. 'HNMR (CDCh) δ 8,84 (dd, IH, J = 8,70, 0,90 Hz), 8,02 (s, IH), 7,77 (dd, IH, J = 8,40, 1,50 Hz), 7,62- 7,59 (m, 2H), 7,40 (t, 2H, J= 7,20 Hz), 7,38- 7,24 (m, 4H), 7,22- 7,19 (m, 3H), 6,98 (dq, IH, J= 8,30,
0,90 Hz), 3,83 (š s, 2H), 3,61 (t, 2H, J = 8,10 Hz), 0,91 (t, 2H, J = 7,20 Hz), -0,17 (s, 9H).
(ii)
K míchanému roztoku 3,22g (6,87 mmol) 6-(3-aminobenzyl-3-((E)styryl)-l-(2-trimethylsilanylethoxymethyl)-lH-indazolu v 10 ml methylenchloridu v argonové atmosféře bylo přidáno
0,95 ml (8,37 mmol) benzoylchloridu a 0,67 ml (3,22 mmol) pyridinu. Po 2 hodinách byl roztok naředěn 100 ml EtOAc a promyt 1 x 50 ml saturovaného NaCl, 2 x 50 ml kyseliny citrónové (1M, pH 2,5) a 2 x 50 ml směsi NaHCO3 a vody (50:50). Organická vrstva byla usušena nad Na2SO4 a filtrována přes 20 ml silikagelu. Organická vrstva byla koncentrována ve vakuu, za vzniku produktu jako žluté pevné látky. Purifikace s použitím velmi rychlé chromatografie na silikagelu za eluce směsí hexanu a EtOAc (7:3) poskytla 3,22 g (85,1% výtěžek) 6-(3-benzamidobenzoyI)-3-((E)styryl)-l-{2-trimethylsilanylethoxymethyl)-lH-indazolu jako žluté pěny. 'H NMR (CDCh) δ 8,19 (d, IH, J = 8,7 Hz), 8,16 (s, IH), 8,11 - 8,10 (m, 2H), 8,03 - 7,93 (m, 3H), 7,82 (dd, IH, J = 8,4, 1,2 Hz), 7,70 - 7,67 (m, 3H), 7,64 - 7,54 (m, 5H), 7,48 (t, 2H, J = 14,1 Hz), 7,39 (IH, d, J = 7,2 Hz).
(iii)
Míchaný roztok 2,35 g (4,07 mmol) 6-{3-benzamidobenzoy 1)-3-((E)styryl)_l -(2-trimethylsilanylethoxymethyl)-lH“indazolu v 45,6 ml methylenchloridu byl ochlazen na -45 °C s použi35 tím lázně se směsí acetonitrilu a pevného oxidu uhličitého. Roztokem pak byl probubláván ozón rychlostí 1,5 1/m, 60 A po dobu 15 minut. Reakční směs byla zastavena přidáním 2,5 ml sirovodíku a zahřáta na 25 °C. Odstranění methylenchloridu bylo uskutečněno pomocí koncentrace ve vakuu. Zbytek byl purifikován na silikagelu za eluce směsí hexanu a EtOAc (7:3) za vzniku 1,74 g (85% výtěžek) 6-(3-benzamidobenzoyl)-l-(2-trimethylsilanylethoxymethyl>40 1 H-indazol-3-karboxaldehydu jako špinavě bílé pěny. HPLC 3,78 minut (100% oblast), 'HNMR (DMSO-d6) δ 10,77 (s, IH), 10,42 (s, IH), 8,46- 8,39 (m, 2H), 8,31 (dt, IH, J = 6,0,
- 171 CZ 301667 B6
1,8 Hz), 8,19 (s, IH), 8,11-8,07 (m,2H), 7,91 (dd, 1H,J = 6,O, 1,2 Hz), 7,70-7,64 (m, 5H),
5,81 (s, 2H), 3,68 (t, 2H, J = 6,9 Hz), 0,98 (t, 2H, J = 6,7 Hz), 0,02 (s, 9H).
(iv)
K míchanému roztoku 2,23 g (4,91 mmol) 2-pikolyItri fenyl fosfon i umchloridu/hydridu sodného ochlazenému na -78 °C bylo přidáno 1,26 g (2,46 mmol) 6-(3-benzamidobenzoyl)-(2-trimethylsÍlanylethoxymethyl)-lH-indazol-3-karboxaldehydu v 5 ml bezvodého THF v argonové atmosféře a roztok byl míchán po dobu 1 hodiny pri teplotě 0 °C a zastaven směsí CH3COOH a MeOH io (1:1,1 ml). Reakční směs byla naředěna 100 ml EtOAc a rozdělena mezi lx 50 ml saturovaného
NaCl a 2 x 50 ml saturovaného NaHCO3, pak byla organická vrstva usušena nad Na2SO4 a filtrována přes krátký sloupec 20 ml silikagelu (směs trans/cis 3:1). Purifikace na kruhové desce se 4 mm silikagelu za eluce směsí hexanu a EtOAc (1:1) poskytla po koncentraci 1,05 g (62 %) 6-(3-benzam idobenzoy 1)—3—E—[2—(pyridin—2—y 1 )etheny 1]-1 -(2-trimethy 1 si lany lethoxymethy 1)15 1 H-indazolu jako žluté pevné látky. 'HNMR(CDCl3)5 8,62(d, IH, J = 4,1 Hz),8,22(d, 1H,J =
8,5 Hz), 8,11 - 8,10 (m, 3H), 8,01 - 7,98 (m, 4H), 7,83 (t, 2H, J = 7,1 Hz), 7,72 - 7,53 (m, 7H),
7,30 (qd, IH, J = 5,2, 1,1 Hz), 5,81 (s, 2H), 3,68 (t, 2H, J = 6,9 Hz), 0,98 (t, 2H, J = 6,7 Hz), 0,02 (s, 9H).
Příklad 42(b)
6-(3-benzamidobenzoyl-3-( 1 H-benzim idazo 1-2-y 1)-1 H-indazol
Sloučenina z příkladu 42(b) byla připravena podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 42(a) kromě toho, že krok (iv) byl nahrazen následujícím: k aldehydu připravenému v příkladu 42(a), krok (iii), bylo přidáno 0,011 g (0,11 mmol) 1,2-diaminobenzenu, 0,4 g (0,1201 mmol) elementární síry, (čistota dle lékopisu USA), 2 ml bezvodého DMF a směs byla zahřáta na 90 °C po dobu 18 hodin a ochlazena na 25 °C. Reakční směs byla naředěna 10 ml ethylacetátu a byla promyta 1 x 10 ml saturovaného NaCl, 1 x 10 ml NaHCO3 a 10 ml vody, usušena nad NaSO4 a filtrována přes teflonový filtr 0,22 μΜ a koncentrována za vzniku jantarového oleje. Purifikace chromatografíi s kruhovou deskou následovaná precipitaci ze 2 ml methylenchloridu a 2 ml hexanu poskytla meziprodukt jako bílý precipitát. 'H NMR (aceton-d6) 5 8,81 (d, IH, J = 8,6), 8,30 - 8,25 (m, 2H), 8,11 (s, IH), 8,02 - 7,99 (m, 2H), 7,79 (td, 2H, J = 12,2, 1,2 Hz), 7,63 - 7,47 (m, 7H), 7,28 - 7,40 (m, 2H). HRMS (MALDI) m/z C28H19N5O2 vypočteno (M+H+): 458,1617, změřeno 458,1632.
Příklad 42(c)
6-(3-benzamidobenzoyl)-3-E-[2-(2-methylthiazol-4-yl)ethenyl]-l H-indazol
-172LZ JU100/ BO
Sloučenina z příkladu 42(c) byla připravena podobným způsobem, jako v příkladu 42(a) kromě toho, že 4-(2-methylthiazyl)methyltrifenylfosfoniumchlorid byl použit namísto 2—pikolytrifeny 1fosfoniumchloridu v kroku (iv). ’H NMR (DMSO) δ 8,11- 8,01 (m, 4H), 7,92 (d, 2H,
J = 6,9 Hz), 7,76- 7,71 (m, 2H), 7,65 - 7,62 (m, IH), 7,56- 7,48 (m, 5H), 7,15 (s, IH), 2,81 (s,3H). HRMS (MALDI) C27H20N4O2S [M+H+]/z: vypočteno (M+H+) 465,1380, změřeno 465,1373.
io Příklad 42(d)
6-(3-benzamidobenzoyl)-3-(3H-imidazo[4,5-b]pyridin-2-yl)-lH-indazol
Sloučenina z příkladu 42(d) byla připravena podobným způsobem, jako v příkladu 42(b) kromě 15 toho, že t,2-diamin-2-pyridin byl použit namísto 1,2-diaminbenzenu. HPLC: 3,88 minut (95% oblast), 'H NMR (DMSO-dé) δ 10,62 (s, IH), 8,83 (d, lH, J = 8,4 Hz), 8,53 (s, IH), 8,43 (s, IH),
8,32 (dt, IH, J = 6,9, 1,8 Hz), 8,15 (d, IH, J = 12,9 Hz), 8,11 - 8,10 (m, 2H), 7,91 (d, IH, J = 9,0 Hz), 7,72- 7,65 (m, 6H), 7,43 (dd, IH, J= 6,3, 4,5 Hz). HRMS (MALDI) m/z C27H18N6O2 vypočteno (M+H+): 459,1564, změřeno 459,1558. Anal. (C27H|8N6O2 0,4 CH2C12): vypočteno
C, 66,83, H, 3,85, N, 17,07. Změřeno: C, 66,93, H, 4,04, N, 16,68.
Příklad 42(e)
6-(3-benzamidobenzoyl)-3-E-(4H-l,2,4-triazoM-yl)iminomethyl]-lH-indazol
Sloučenina z příkladu 42(e) byla připravena podobným způsobem, jako v příkladu 42(a) kromě toho, že 4-amino-l,2,4-triazol a PPTS byly použity v 80 °C namísto 2-pikolytrifenyfosfoniumchloridu/hydridu draselného ve 23 °C. HPLC: Rt= 4,05 minut (96%oblast), 'HNMR (DMSO-dé) δ 10,58 (s, IH), 9,53 (s, IH), 9,40 (s, 2H), 8,56 (d, 1H, J = 8,4 Hz), 8,38 (s, IH),
8,26 (dt, IH, J= 7,2, 2,1 Hz), 8,13 (s, IH), 8,08- 8,05 (m, 2H), 7,73- 7,67 (m, 5H).
HRMS (MALDI) C24H17N7O2 [M+H+]/z. Vypočteno 436,1516, změřeno 436,1510. Anal.
(C24Hi7N7O2 · 0,4 hexan) vypočteno C, 66,18, H, 4,67, N, 20,47. Změřeno: C, 65,78, H, 4,87,
N, 20,47.
-173CZ 301667 B6
Příklad 43
6—(3-benzamidobenzoyl)-3-E-[2-(2-formamidofenyl)ethenyl]-l H-indazol
18 mg (36 %) sloučeniny z příkladu 43 bylo připraveno z 6-(3-benzamidobenzoyl)-3-E-(2formamidofenyl)ethenyl-l-(2-trimethylsilanylethoxymethyl)-l H-indazolu podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 11. HPLC: Rt = 4,19 minut *H NMR (CDCh) δ 8,43 - 7,92 (m, 6H), 7,68 - 7,49 (m, 4H), 7,39 - 7,36 (m, 3H), 7,32 - 7,21 (m, 2H), 7,09 - 7,00 (m, 2H), 6,91-6,84 (m, IH). HRMS (MALDI) C30H22N4O3 [M+Na]/z: vypočteno 509,1590, změřeno 509,1580. Anal. (C30H22N4O3 · 0,3H2O) vypočteno: C, 73,25, H, 4,63, N, 11,39. Změřeno: C, 73,10, H, 4,58, Ν, 11,28.
Výchozí látka byla připravena takto:
0)
6—(3-benzam idobenzoy 1)-1-( 2-trimethyl silany lethoxymethylý-l H-indazol-3-karboxaldehyd (připravený v příkladu 42(a), krok (iii)) byl konvertován na 6-(3-benzamidobenzoyl)-3-E-(2nitrofenyl)ethenyl-l-(2-trimethylsÍlanyIethoxymethyI)-l H-indazol podobným způsobem jako v příkladu 42(a), krok (iv), kromě toho, že monohydrát (2-nitrobenzyl)trifenylfosfoniumbromidu byl použit namísto 2-pikoIyltrifenylfosfoniumchloridu (0,19g, 79%). fHNMR (CDCh δ 8,15 - 7,93 (m, 5H), 7,89-7,86 (m, 3H), 7,54 - 7,41 (m, 6H), 7,36-7,35 (m, 2H), 7,21-7,18 (m, 2H), 7,03 - 6,91 (m, 1H), 3,64 - 3,46 (m, 2H), 0,96 - 0,79 (m, 2H), -0,06 (s, 9H).
(ii)
0,19 g (0,32 mmol) 6-(3-benzamÍdobenzoyl)-3-E-(2-nitrofenyl)ethenyl-l-(2-trimethylsilanylethoxymethyl)-lH-indazol bylo rozpuštěno ve 3 ml DMF, podrobeno působení 0,26 g (1,40 mmol) SnCl2 a 0,037 ml (1,87 mmol) vody a bylo mícháno po dobu 3 hodin v 50 °C.
Reakce byla zastavena v 25 °C s 0,5 ml 3N NaOH a precipitát byl odstraněn filtrací přes celit.
Roztok pak byl rozdělen mezi 2 x 30 ml směsi saturovaného NaHCO3 a vody (50/50) a organická vrstva byla filtrována přes krátký sloupec silikagelu za vzniku 0,17 g (92 %) 6-(3~benzamido-174CZ JUIOO/ BO benzoyl)-3-E-(2-aminofenyl)ethenyl-l-(2-trimethylsilanylethoxymethyl)-lH-indazolu, jako jantarového oleje. Produkt byl použit bez další purifikace.
(iii)
0,17 g (0,28 mmol) 6-(3-benzamidobenzoyl)-3-E-(2-aminofenyl)ethenyl-l“(2-trimethylsilanylethoxymethyl)-lH-indazolu bylo rozpuštěno ve 3 ml methylenchloridu. K tomuto roztoku bylo po kapkách přidáno 0,12 g (0,56 mmol) pentafluorfenylesteru kyseliny mravenčí. Po 3 hodinách byla reakční směs naředěna 40 ml EtOAc a byla promyta 2 x 30 ml 50/50 ml io NaHCO3 a organická vrstva byla filtrována přes krátký sloupec silikagelu. Zbytek byl purifikován chromatografií s kruhovou deskou na silikagelu za eluce směsí hexanu a EtOAc a CH2C12 (1:1:1), která poskytla 63 mg (40 %) 6-(3-benzamidobenzoyl)-3-E-(2-formamidofenyl)ethenyl-l-(2-trimethylsilanylethoxymethyl)-lH-indazolu jako čirého oleje. 'HNMR (CDCb δ 8,48 - 8,36 (m, IH), 8,20 - 7,84 (m, 4H), 7,61 - 7,52 (m, 5H), 7,41 - 7,32 (m, 4H), 7,26 - 7,01 (m, 4H), 6,82 (t, IH, J = 14,2 Hz), 3,48 -3,23 (m, 2H), 0,95 - 0,87 (m, 2H), -0,05 (s, 9H).
Příklad 44
6-(3-aminobenzoyl)-3-E-[N-(pyrol-l-yl)iminomethyl]-l H-indazol
Sloučenina z příkladu 44 byla připravena z výchozí látky popsané níže podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 12. Rf sm 0,6, p 0,5 (ethylacetát): 'H NMR (300 MHz, CDC13) δ 8,8 (s, IH), 8,5 (d, IH), 7,95 (s, IH), 7,75 (d, IH), 7,45 - 7,3 (m, 7H), 7,2 (m, IH), 6,40 (s, 2H).
Výchozí látka byla připravena takto:
(i)
204 mg (0,507 mmol) aldehydu připraveného v příkladu 33(a), krok (i), a 67 μΐ (0,66 mmol,
1,3 ekv.) 1-aminopyrolu bylo mícháno společně ve 2 ml toluenu. K této směsi byl přidán 1 mg
PPTS a roztok byl zahříván na 80 °C po dobu 1 hodiny. Směs byla ochlazena a byla rozdělena mezi 2:8 směs ethylacetátu a hexanu a vodu. Organická látka byla usušena nad sulfátem sodným,
-175CZ 301667 B6 dekantována a koncentrována při sníženém tlaku. 215,7 mg (91 %) produktu bylo krystalizováno z 0,5 ml dichlormethanu a 2 ml methanolu: 'H NMR (300 MHz, C6D6) δ 8,71 (s, IH), 8,25 (d, IH, J = 8,5 Hz), 8,08 (s, IH), 7,75 (d, IH, J = 8,5 Hz), 6,35 (s, 2H), 5,85 (s, 2H).
(ϋ)
Směs 535 mg (1,15 mmol, 1 ekv.) výše uvedeného jodidu, 236 mg (1,72 mmol, 1,5 ekv,) 3-aminofenylboronové kyseliny, 24mg (0,034 mmol, 0,03 ekv.) PdCl2(PPh3)2 a uhličitanu draselného byla nabrána do 6,7 ml anisolu v atmosféře oxidu uhelnatého, 101.325 kPa (1 atm). io Směs byla zahřívána na 80 °C po dobu 14 hodin. Směs byla ochlazena, rozdělena mezi ethylacetát a vodu. Organické vrstvy byly promyty saturovaným vodným hydrouhličitanem sodným, vodou a solankou a organická vrstva byla oddělena. Organická látka byla usušena nad sulfátem sodným, dekantována a koncentrována při sníženém tlaku. Purifikace chromatografií na silikagelu (50 ml silikagelu, 2:8 až 3:7 směs ethylacetátu a hexanu) poskytla 331 mg (63 %) anilinu jako pevné látky: Rf sm 0,60, p 0,21 (směs ethylacetátu a hexanu 3:7), 'HNMR (300 MHz, CDCh) δ 8,75 (s, IH), 8,51 (d, IH, J = 8,4 Hz), 8,06 (s, IH), 7,76 (dd, IH, J = 1,3, 8,4 Hz), 7,26 (m, 3H), 7,17 (m, 2H), 6,92 (m, IH), 6,31 (t, IH, J = 2,3 Hz), 5,79 (s, 2H), 3,84 (š s, 2H), 3,60 (t, 2H, J - 8,2 Hz), 0,91 (t, 2H, J = 8,2 Hz), -0,08 (s, 9H). LCMS 4,98 minut (poz) [M+H]/z vypočteno 460, změřeno 460.
Příklad 45(a)
6-[3-(indol-4-ylkarboxamido) benzoyl ]-3-E-[N-(pyrol-l~yl)iminomethyl]-l H-indazol
Sloučenina z příkladu 45(a) byla připravena podle příkladu 44 podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 12(d) kromě toho, že indol-4-kar boxy lová kyselina byla použita namísto 5-methylthiazol-2-karboxylové kyseliny: Rf sm 0,0, p 0,2 (směs ethylacetátu a benzenu 1:3), 'HNMR (300MHz, DMSO-d6) δ 9,84 (s, IH), 8,92 (s, IH), 8,66 (s, IH), 8,39 (d, IH,
J - 8,5 Hz), 8,02 (s, 1H), 7,86 (m, 2H), 7,66 (d, 1H, J = 8,5 Hz), 7,52 - 7,40 (m, 4H), 7,27 - 7,07 (m,5H), 6,83 (s, IH), 6,21 (s,2H).
Příklad 45(b)
6—(3-benzamitlobenzoyl)-3-E-[N-(py rol-1-yl) iminomethyl]-! H-indazol
-176LL OU1OO/ DO
Sloučenina z příkladu 45(b) byla připravena podle příkladu 44 podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 12(d) kromě toho, že benzoylchlorid byl použit namísto 5-methylthiazol-2karboxylové kyseliny a HATU: Ή NMR (300 MHz, CDC13) δ 11,9 (š s, IH), 8,70 (s, IH), 8,43 (s, IH), 8,39 (d, IH, J = 8,4 Hz), 7,99 (s, IH), 7,9- 7,8 (m, 4H), 7,65 (d, IH, J = 8,4 Hz), 7,48 (t, 2H, J = 7,8 Hz), 7,42 - 7,35 (m, 3H), 7,20 (t, 2H, 2,2 Hz), 6,28 (t, 2H, J = 2,2 Hz).
Příklad 46 io
6-[N-{3-aminofeny l)amino]-3-E-styryl-1 H-indazol
Sloučenina z příkladu 46 byla připravena z výchozí látky popsané níže podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 13(i). 'H NMR (300 MHz, DMSO-dé) δ 12,6 (s, IH), 8,07 (s, IH), 7,97 (d, IH, J = 8,73 Hz), 7,69 (d, IH, J = 8,49 Hz), 7,40 (m, 4H), 7,28 (m, IH), 7,06 (d, IH,
J = 1,49 Hz), 6,44 (t, IH, J = 1,98 Hz), 6,34 (m, IH), 6,14 (dd, IH, J - 7,88 Hz, J = 1,26 Hz), 5,01 (š s, 2H).
(i)
Sloučenina připravená v příkladu 11, krok (v), byla konvertována na 6-[N-(3-nÍtrofěnyl)arnino]3-E-styryl-lH-indazol podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 12. 'HNMR (300 MHz, CDC13) δ 8,0 (m, 2H), 7,77 (m, IH), 7,64 (d, 2H, J = 7,86 Hz), 7,41 - 7,56 (tn, 6H), 7,33 (m, 2H), 7,08 (d, IH, J= 8,67 Hz). MS (ESU-) [M+H]/z vypočteno 357, změřeno 357.
Vypočteno: C, 70,77, H, 4,53, N, 15,72. Změřeno: C, 69,18, H, 4,51,N, 15,30.
Příklad 47
6-[N-(3-benzamido-4-fluorfenyI)amino]-3-E-styryl-l H-indazol
177CZ 301667 B6
6-[N-(3-benzamido-4-fluorfenyl)amino]- l-(2-trimethylsilany lethoxymethy Ι-3-E-styry I-1Hindazol byl konvertován na sloučeninu z příkladu 47 podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 11. 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 12,6 (s, IH), 10,0 (s, IH), 8,38 (š s,lH), 8,02 (d, IH, J = 8,78), 7,98 (d, 2H, J = 6,87 Hz), 7,69 (d, 2H, J = 7,27 Hz), 7,48 - 7,61 (m, 4H), 7,45 (s, 2H), 7,40 (t, 2H, J = 7,28 Hz), 7,53 - 7,30 (t, 2H, J = 7,28 Hz), 7,53 - 7,30 (m, 2H), 7,07 (d, IH, J = 1,55 Hz), 7,03 (m, IH), 6,95 (dd, IH, J = 8,79 Hz, J = 1,85 Hz). MS (ESI+) [M+H]/z vypočteno 449, změřeno 449. Anal. výpočet: C, 74,98. H, 4,72. N, 12,49. Změřeno: C, 74,29. H, 4,76. N, 12,12.
i o Výchozí látka byla připravena takto:
(i)
K. roztoku 3,12 g (20 mmol) 2-fluor-5-nitrofenylaminu ve 20 ml dichlormethanu ve 23 °C 15 v argonové atmosféře bylo přidáno 1,94 ml (24 mmol) pyridinu a 2,8 ml (24 mmol) benzoylchloridu. Po 45 minutách byl vytvořen bílý precipitát. Reakční směs byla koncentrována ve vakuu, pak byla naředěna vodou a filtrována za vzniku bílé pevné látky, která byla resuspendována v MeOH a opět filtrována za vzniku 4,86 g (93 %) N-(2-fluor-5-nitrofenyl)benzamidu.
'HNMR (300 MHz, CDC13) δ 9,48 (dd, IH, J= 6,8 Hz, J= 2,81 Hz), 8,17 (š s, IH), 8,03 20 (m, IH), 7,92 (m, 2H), 7,52-7,65 (m, 3H), 7,31 (d, lH,J = 9,2Hz).
(ii)
Směs 4,86 g (18,7 mmol) N-(2-fluor-5-nitrofenyl)benzamidu a 486 mg 10% Pd/C v 80 ml 25 směsi 1:1 THF a MeOH byla sycena vodíkem ve 23 °C. Po 2,5 hodinách byla reakční směs filtrována přes celit a koncentrována za vzniku 3,92 g (91 %) N-(5-amino-2-fluorfenyl)benzamidu. MS (ESI+) [M+H]/z vypočteno 231, změřeno 231.
(iii)
6-[N-(3-benzamido-^-fluorfenyl)amino]-l-(2-trimethylsilanylethoxymethyl-3-E-styryl-lHindazol byl připraven podobným způsobem, jako v příkladu 48(a), krok (iii), kromě toho, že N-(5-amíno-2-fluorfenyl)benzamÍd a sloučenina připravená v příkladu 14, krok (i), byly použity jako výchozí látky. ‘H NMR (300 MHz, CDClj) δ 8,38 (dd, IH, J = 6,84 Hz, J = 2,73 Hz), 8,09 (d, 1H, J = 3,08 Hz), 7,86 - 7,91 (m, 3H), 7,48 - 7,61 (m, 5H), 7,28 - 7,45 (m, 4H), 7,19 (d, 1H,
J = 1,7 Hz), 7,08 (dd, IH, J = 10,48 Hz), 6,90- 6,96 (m, 2H), 6,03 (š s, IH), 5,66 (s, 2H), 3,62
-178CZ 301607 Bb (t, 2H, J = 8,14 Hz), 0,91 (t, 2H, J = 8,32 Hz), 0,0 (s, 9H). MS (ESI+) [M+H]/z vypočteno 579, změřeno 579. Anal. výpočet: C, 70,56. H, 6,10, N, 9,68. Změřeno: C, 20,26. H, 6,08. N, 9,16.
Příklad 48(a)
6-[N-{5-(( 1 -ethy 1-3-methy 1-1 H-pyrazol-5-yl)karboxamido)-2-fIuor-4-methy Ifenyl )amino]3—E—[2—(pyridin—2—yl)ethenyl]—l H-indazol
ío Sloučenina z příkladu 48(a) byla připravena podobným způsobem, jako v příkladu 41(a), z výchozí látky popsané níže. Ή NMR (300 MHz, CD3OD) δ 8,54 (d, IH, J = 4,8 Hz), 7,95 (d, IH, J = 9,49 Hz), 7,84 (td, IH, J = 7,71 Hz, J = 1,78 Hz), 7,70 (d, IH, J = 7,95 Hz), 7,53 (d, IH, J = 16,59 Hz), 7,40 (d, IH, J = 7,92 Hz), 7,29 (qd, IH, J = 7,45 Hz, J - 1,07 Hz), 7,11 (d, IH, J - 11,8), 7,03 - 7,06 (m, 2H), 6,71 (s, IH), 4,50 (q, 2H, J = 7,16 Hz), 2,27 (s, 3H), 2,26 (s,3H), 1,38 (t, 3H, J= 7,11 Hz). MS (ESI+) [M+H]/z vypočteno 496, změřeno 496. Anal.
výpočet: C, 67,86, H, 5,29, N, 19,79. Změřeno: C, 66,24, H, 5,50, N, 18,61.
Výchozí látka byla připravena takto;
(í)
Směs 1,0 g (5 mmol) l-fluor-5-methyl-2,4-dinitrobenzenu a 200 mg 10% Pd/C ve 20 ml MeOH byla sycena vodíkem ve 23 °C po dobu 24 hodin. Reakční směs byla filtrována přes celit a koncentrována. Purifikace chromatografií na silikagelu (1:1 směs ethylacetátu a hexanu) poskytla 613 mg (87 %) 4-fluor-6-methylbenzen-l,3-diamtnu.
(ii)
K roztoku 566 mg (2 mmol) 4-nitrofenylester-2-tri methy Isi lany lethy lester uhličité kyseliny ve 30 4 ml DMF ve 23 °C v argonové atmosféře bylo přidáno 12 mg (0,1 mmol) DMAP, 0,35 ml (2 mmol) DIEA a 4-fluor-6-methylbenzen-l,3-diamin, Výsledný roztok byl zahříván na 50 °C po dobu 48 hodin. Reakční směs byla zastavena saturovaným vodným NaHCOi, a extrahována x 20 ml EtOAc. EtOAc byl odstraněn ve vakuu a zbytek byl opět rozpuštěn v Et2O pak promyt
3N vodným NaOH, vodou, solankou, usušen nad Na2SO4, filtrován a koncentrován. Purifikace chromatografií na silikagelu (2:8 až 7:3 směs ethylacetátu a hexanu) poskytla 160 mg (28 %)
- 179CZ 301667 B6
2-trimethylsilanylethylesteru (5-amino-4-fluor-2-methyIfenyI)karbamové kyseliny. MS (ESI+) [M+H]/z vypočteno 634, změřeno 634.
Ke směsi 224 mg (0,47 mmol) 6-jod-3-{(E)-2-pyrÍdÍn-2-ylvinyl)-l-(2-trimethylsÍlanylethoxymethyl)-l H-indazolu, 160 mg (0,56 mmol) 2-trimethylsilanylethylesteru 5-amino-4-fluor-2methylfenyl)karbamové kyseliny, 214 mg (0,66 mmol) Cs2CO3, 5,4 mg, (0,0059 mmol) PdCl2(PPh3)2 a 10 mg (0,0176 mmol) BINAP v argonové atmosféře ve 23 °C bylo přidáno 0,5 ml toluenu. Výsledná směs byla zahřívána na 80 °C po dobu 16 hodin. Reakční směs byla ochlazena na 23 °C, a pak naředěna 20 ml vody a extrahována 3 x 50 ml EtOAc. Organické vrstvy byly promyty 30 ml vody, 30 ml solanky, usušeny nad Na2SO4, filtrovány a koncentrovány na pěnu. Chromatografíe na koloně se silikagelem (3:7 směs ethylacetátu a hexanu) poskytla 98 mg (33 %) 2-trimethylsilanylethylester {4-fluor-2-methyl-5-[3-((E)-2-pyridin-2-ylvinyl)-l-{2trimethylsilanylethoxymethyl)-lH-indazol-6-ylammo]fenyl}karbamové kyseliny. TLC (7:3 směs hexanu a ethylacetátu) Rf sm 0,42, Rf p 0,23. *H NMR (CDC13) δ 8,64 (dd, IH, J = 4,79 Hz, J = 0,86 Hz), 7,94 (d, IH, J = 8,71 Hz), 7,91 (š s, IH), 7,86 (d, IH, J = 16,41 Hz), 7,69 (td, IH, J = 7,72 Hz, J = 1,8 Hz), 7,55 (d, IH, J = 16,44 Hz), 7,49 (d, IH, J = 7,91 Hz), 7,17 (qd, IH, J = 7,44 Hz, J= 0,98 Hz), 6,99 (dd, IH, J= 8,67Hz, J- 1,89 Hz), 6,93 (d, IH, J = 11,2 Hz), 6,25 (š s, IH), 5,95 (d, IH, J = 1,97 Hz), 5,70 (s, 2H), 4,25 (t, 2H, J = 8,53 Hz), 3,60 (t, 2H, J = 8,24 Hz), 2,22 (s, 3H), 1,04 (t, 2H, J = 8,54 Hz), 0,9 (t, 2H, J = 8,25 Hz), 0,05 (s,9H), 0,0 (s, 9H). I3C NMR (CDC13, 75 MHz) δ 156,0, 154,4, 149,8, 142,9, 142,8, 142,5, 136,6, 132,1, 130,1, 130,5, 128,7, 128,5, 124,3, 122,2, 122,0, 121,8, 118,2, 117,3, 117,0, 115,1, 95,2, 77,6, 77,4, 66,5, 63,7, 17,9, 17,2, -1,3. FTIR cm’1: 3326, 2947, 1716, 1617, 1534, 1514, 1244, 1057. MS (ESI+) [M+H]/z vypočteno 634, změřeno 634.
(iv)
Výše uvedený anilin byl připraven podobným způsobem, jako v příkladu IL 'HNMR 30 (3 00 MHz, CD3OD) δ 8,54 (m, IH), 7,91 (dd, IH, J= 8,74 Hz, J= 0,58 Hz), 7,83 (td, IH,
J = 7,72 Hz, J = 1,79 Hz), 7,80 (d, IH, J = 16,52 Hz), 7,69 (d, IH, J = 7,98 Hz), 7,52 (d, IH, J = 16,58 Hz), 7,29 (qd, IH, J = 7,43 Hz, J- 1,07 Hz), 6,94- 6,99 (m, 2H), 6,83 (d, IH, J = 11,98 Hz), 6,82 (d, IH, J-7,49 Hz), 2,15 (s, 3H). MS (ESI+) [M+H]/z vypočteno 360, změřeno 360.
Příklad 48(b)
6-[N-(5-(( 1,3-dimethy 1-1 H-pyrazol-5-y l)karboxamido)-2-fluor-A-methyÍfenyl)amino]-3-E40 [2—(pyridin—2—y l)etheny I]—1 H-indazol
- 180CZ JU1007 Bó
Η-“
Sloučenina z příkladu 48(b) byla připravena podobným způsobem, jako v příkladu 48(a) kromě toho, že 2,5-dimethyl-2H-pyrazol-3-karboxylová kyselina byla použita namísto 2—ethyl—5— methyl-2H-pyrazol-3-karboxylové kyseliny. 'H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 12,8 (s, IH),
9,71 (s, IH), 8,59 (m, IH), 8,11 (s, IH), 8,00 (d, IH, J = 8,75 Hz), 7,87 (d, IH, J = 16,37 Hz),
7,80 (td, IH, J = 7,66 Hz, J = 1,81 Hz), 7,64 (d, IH, J = 7,88 Hz), 7,49 (d, 1H, J = 16,38 Hz), 7,34 (d, IH, J = 8,16 Hz), 7,26 (m, IH), 7,21 (d, IH, J = 12,14 Hz), 6,97 (dd, IH, J = 8,76 Hz), 6,88 (s, IH), 6,79 (s, IH), 3,98 (s, 3H), 2,20 (s, 3H), 2,19 (s, 3H). MS (ESI+) [M+H]/z vypočteno 482, změřeno 482. Anal. výpočet: C, 67,35, H, 5,02, N, 20,36. Změřeno: C, 66,83, H, 5,25, N, 19,68.
io
Příklad 49(a)
6-[N-(3-(( 1,3-dimethyl-l H-pyrazol-5-yl)karboxamido)-4-fluorfenyl)amino]-3-E-[215 (pyridin—2—y 1 )etheny 1 ]—1 H-indazol
Sloučenina z příkladu 49(a) byla připravena podobným způsobem, jako v příkladu 48(a) kromě následujícího: 2,5-dimethyl-2H-pyrazol-3-karboxylová kyselina byla použita namísto 2-ethyl5-methyl-2H-pyrazol-3-karboxylové kyseliny, v kroku (iii), 2-trimethylsilanylethylester (5-amino-2-fluorfenyl)karbamové kyseliny, připravený jak popsáno níže, byl použit namísto 2-trimethylsilanylethylesteru (5-amino-4-fluor-2-methylfenyl)karbamové kyseliny, rozpouštědlo bylo DME a jako ligand byl použit bifenyl-2-yldicyklohexylfosfan. ’H NMR (300 MHz, CD3OD) δ 12,7 (s, IH), 9,94 (s, IH), 8,48 (m, IH), 8,40 (s, IH), 8,02 (d, IH, J = 6,77 Hz), 7,87 (d, IH, J = 16,37 Hz), 7,80 (d, IH, J = 7,63 Hz, J = 1,81 Hz), 7,64 (d, IH, J = 7,88 Hz), 7,49 (d, IH, J= 16,39 Hz), 7,42 (dd, IH, J = 6,65 Hz, J = 2,68 Hz), 7,24 (m, 2H), 7,06 (m, 2H), 6,96 (dd, IH, J = 8,81 Hz, J - 1,82 Hz), 6,85 (s, IH), 4,0 (s, 3H), 2,20 (s, 3H). MS (ESI+) (M+H]/z vypočteno 468, změřeno 468. Anal. výpočet: C, 66,80, H, 4,74, N, 20,97. Změřeno: C, 66,01, H, 4,72, N, 20,81.
(i)
K roztoku 9,82 g (54 mmol) t-fluor-2-isokyanato-4-nitrobenzenu ve 40 ml THF ve 23 °C v argonové atmosféře bylo přidáno 7,72 ml (54 mmol) 2-trimethylsilanylethanolu. Výsledná směs byla míchána po dobu 11 hodin, a pak zahřívána na 50 °C po dobu 2 hodin. Reakční směs byla ponechána vychladnout na 23 °C, zastavena saturovaným vodným NaHCO3 a extrahována x 100 ml EtOAc. Sloučené ethylacetátové vrstvy byly promyty 2 x 90 ml IN vodné HCI, 90 ml
-181CZ 301667 B6 vody a 90 ml solanky, usušeny nad NajSO^ filtrovány a koncentrovány na žlutou pevnou látku.
Chromatografie na silikagelu (2:8 směs ethylacetátu a hexanu) poskytla 12,3 g (77%) 2-trimethylsilanylethylesteru (2-fluor-5-nitrofenyl)karbamové kyseliny. ’H NMR (300 MHz, CDCh) δ 9,06 (dd, IH, J = 6,89 Hz, J = 2,63 Hz), 7,89 (m, IH), 7,20 (m, IH), 6,91 Hz (š s, IH), 4,31 (t, 2H, J = 8,67 Hz), 1,06 (t, 2H, J = 8,67 Hz), 0,05 (s, 9H). LCMS (ESI-) [M+H]/z vypočteno
299, změřeno 299.
(ii)
io Směs 3,00 g (10 mmol) 2-trimethylsilanylethylesteru (2-fluor-5-nitrofenyl)karbamové kyseliny a 300 mg 10% Pd/C ve 30 ml methanolu byla sycena vodíkem ve 23 °C. Výsledná směs byla míchána po dobu 24 hodin. Reakční směs byla filtrována přes celit a koncentrována za vzniku 2,62 g (97 %) 2-trimethylsilanylethylesteru (5-amino-2-fluorfenyl)karbamové kyseliny. ‘HNMR (300 MHz, CDCh) δ 7,52 (m, IH), 6,85 (dd, IH, J= 10,8 Hz, 1 = 8,69 Hz), 6,73 is (š s, IH), 6,28 (m, IH), 4,27 (t, 2H, J = 8,57 Hz), 3,0-4,4 (š s, 2H), 1,06 (t, 2H, J = 8,58 Hz),
0,07 (s, 9H).
Příklad 49(b)
6-[N-(3-(( 1,3-dimethyl-l H-pyrazol-5-yl)karboxamido}-4~methylfenyl)aniino]-3-E-[2(pyridin-2-yl)ethenyl]-1 H-indazol
Sloučenina z příkladu 49(b) byla připravena podobným způsobem jako v příkladu 49(a) kromě 25 toho, že l-methyl-2-isokyanato-4-nítrobenzen byl použit namísto I-fluor-2-isokyanato-4nitrobenzenu v kroku (i). 'H NMR (300 MHz, CDCh) δ 8,59 (m, IH), 8,35 (s, IH), 8,00 (d, IH,
J = 8,73 Hz), 7,87 (d, IH, J = 16,38 Hz), 7,80 (td, IH, J = 7,66 Hz, J = 1,85 Hz), 7,64 (d, IH, J = 7,85 Hz), 7,49 (d, IH, J = 16,35 Hz), 7,26 (m, IH), 7,19 (m, 2H), 7,09 (d, IH, J = 1,48 Hz), 7,02 (dd, IH, J = 8,17 Hz, J = 2,24 Hz), 6,97 (dd, IH, J = 8,79 Hz, J = 1,80 Hz), 6,81 (š s, IH),
4,00 (s, 3H), 2,20 (s, 3H), 2,18 (s, 3H). LCMS (ESI+) [M+H]/z vypočteno 474, změřeno 464.
Příklad 49(c)
6-[N-(3-(3-acetamido-4-fluorfenyl)amino]-3-E-[2-(pyridin~2-yl)ethertyl]-l H-indazol
-182Sloučenina z příkladu 49(c) byla připravena podobným způsobem jako v příkladu 49(a) kromě toho, že acetanhydrid byl použit namísto 2,5-dimethyl-2H-pyrazol-3_karboxylové kyseliny:
'HNMR (300 MHz, CD3OD) δ 8,44 (m, IH), 7,82 (d, IH), 7,70 (m, 3H), 7,55 (d, lH), 7,41 (d, IH, J = 16,4 Hz), 7,19 (m, IH), 7,03 (s, IH), 6,94 (m, IH), 6,87 (m, 2H), 2,11 (s, 3H). LCMS (100% oblast) Rt = 4,53 minuty (poz) [M+H]/z vypočteno 388,4, změřeno 3 88,4.
CL JU1W»/ BO
Příklady 49(d)-49(x) mohou být připraveny podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 49(a).
Příklad 49(d) is Příklad 49(e)
Příklad 49(0
Příklad 49(g)
183CZ 301667 B6
Příklad 49(h)
Příklad 49(i)
Příklad 49(j)
184Příklad 49(m)
Příklad 49(n)
Příklad 49(o)
Příklad 49(p)
Příklad 49(q)
CL ,3(,1007 Bó
- 185CZ 301667 B6
Příklad 49(r)
Příklad 49(t)
io Příklad 49(u)
Příklad 49(v)
186CZ .51,1007 ΒΟ
Příklad 49( w)
Příklad 49(x)
Příklad 50
6-[345-amino-2-fluorfenyl)karbamoyl-5-methyl-2-ethyI-2H-pyrazol-4-yl]-3-E-[210 (pyridin-2-yl)ethenyl]-1 H-indazol
Sloučenina z příkladu 50 byla připravena z výchozí látky popsané níže podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 11. MS (ESI+) [M+H]/z vypočteno 482, změřeno 482. Vypočteno: C, 67,35, H, 5,02, N, 20,36. Změřeno: C, 66,70, H, 5,09, N, 19,95.
(0
(2-fluor-5-nitrofenyl)amid 2-ethy 1-5-methyl-2H-pyrazo 1-3-karboxylové kyseliny byl připraven podobným způsobem, jako v příkladu 47, krok (i), kromě toho, že 2-ethy 1-5-methy 1-2 H20 pyrazol-3-karboxylová kyselina a HATU byly použity namísto benzoylchloridu. MS (ESI+) [M+H]/z vypočteno 293, změřeno 293.
- 187CZ 301667 B6 (ίί)
(2-fluor-5-nitrofenyl)amid 2-ethyl-5-methyl-2H-pyrazol-3-karboxylové kyseliny byl připraven podobným způsobem, jako v příkladu 40(b), krok (i). MS (ESI+) [M+H]/z vypočteno 263, změřeno 263.
(iii)
6-[3-(5-amino-2-fluorfenyl)karbamoyl-5-methyl-2-ethyl-2H-pyrazoM-yl]-3-E-[2io (pyridin-2-yl)ethenyl)-l-(2-trimethylsilanylethoxymethyl)-lH-indazol byl připraven podobným způsobem, jako v příkladu 48(a), krok (iii), kromě toho, že (5-amino-2-fluorfenyl)amid 2ethyl-5-methyl-2H-pyrazol-3-karboxylové kyseliny byl použit jako výchozí látka. MS (ESI+) [M+H]/z vypočteno 612, změřeno 612.
Příklad 51
6-pyrid-4-y l-3-E-(N-(pyrol-1 -yl)im inomethy 1)-1 H-indazol
6-pyrid-4-yl-3-E-(N-<pyrol-l-yl)iminomethyI)-l-(2-trÍmethylsiIanylethoxymethyl-lHindazol byl konvertován na 6-pyrÍd-4-yl-3~E-(N-(pyrol-l-yl)iminomethyl)-l H-indazol podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 29(a). 'HNMR (300 MHz, CDCh) δ 8,76 (s, 1H), 8,67 (d, 2H, J = 6,1 Hz), 8,53 (d, IH, J - 8,4 Hz), 7,74 (s, IH), 7,61 (d, 2H, J = 6,2 Hz), 7,54 (d, 1H, J = 8,5 Hz), 7,27 - 7,25 (m, 2H), 6,31 - 6,29 (m, 2H). MS (ES) [M+H]/z vypočteno
288, změřeno 288. Anal. výpočet: C (71,07), H (456), N (24,37). Změřeno: C (70,81), H (4,57),
N (24,14).
-188CZ 3U1667 Bó
Výchozí látka byla připravena takto:
Roztok 208 mg (0,59 mmol) 6-pyridin-4-yl-l-(2-trimethylsilanytethoxymethyl)-lH-indazol3-karbaldehydu, 145 mg (1,76 mmol) N-aminopyrolu a 5,8 μί octové kyseliny v 1 ml ethanolu byl udržován v 95 °C po dobu 16 hodin. Roztok pak byl evaporován při sníženém tlaku a purifikován chromatografií na silikagelu za vzniku 140 mg (57 %) 6—pyrid—4—yl—3—E~(N—(pyrol—1— yl)iminomethyl)-l“(2-trimethylsilanylethoxymethyl)-lH-indazolu jako oleje. 'HNMR (300 MHz, CDCb) δ 9,08 (s, 1H), 8,71 (d, 2H, J = 6,1 Hz), 8,46 (d, IH, J = 8,5 Hz), 8,34 (s, 1H), 7,85 (d, 2H, J = 6,2 Hz), 7,80 (d, IH, J = 8,5 Hz), 7,56 (t, 2H, J = 2,3 Hz), 6,25 (t, 2H, J = 2,3 Hz), iú 5,93 (s, IH), 5,74 (s, 2H), 3,64 (t, 2H, J = 7,9 Hz), 0,86 (t, 2H, J = 7,9 Hz), 0,00 (s, 9H).
Příklad 52(a)
6-(7-azaindazoM~yl)-3-E-styryl-1 H-indazol
SEM-sloučenina z příkladu 52(a) byla konvertována na sloučeninu z příkladu 52(a) podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 27(a). 'HNMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 8,63 (d, IH, J = 4,8 Hz), 8,41 (d, IH, J = 85 Hz), 8,37 (s, IH), 7,99 (s, IH), 7,76 (d, 2H, J = 7,3 Hz), 7,70 (d, IH, J = 8,5 Hz), 7,60- 7,85 (m, 6H). HRMS (FAB) [M+H]/z vypočteno 338,1400, změřeno
338,1389. Analyzováno s 1,1 trifluoroctovou kyselinou, vypočteno: C (60,21), H (3,51), N (15,13). Změřeno: C (59,93), H (3,59), N (14,86).
Výchozí látka byla připravena takto:
(i)
Roztok 1,0 g (1,90 mmol) 3-styryl-l-(2-trimethylsÍlanylethoxymethyl>-6-trimethylstannyllH-indazolu, 0,56 g (1,90 mmol) l-(4-jodpyrazolo[3,4-b]pyrídin-l-yl)ethanonu, 116 mg (0,38 mmol) AsPh3 a 87 mg (0,09 mmol) Pd2dba3 v 10 ml odplyněného dioxanu byl zahříván ve
110 °C po dobu 3 hodin. Roztok pak byl naředěn 50 ml ethylacetátu, promyt 2 x 10 ml solanky, usušen nad MgSO4 a koncentrován při sníženém tlaku. Purifikace chromatografií na silikagelu poskytla 412 mg (46 %) sloučeniny z příkladu 52(a) jako bílé pevné látky. 'H NMR (300 MHz,
- 189CZ 301667 Bó
CDCb) δ 8,82 (d, 1H, J = 5,8 Hz), 8,52 (s, 1H), 8,29 (d, 1H, J = 8,2 Hz), 8,05 (s, 1H), 7,73 - 7,32 (m, 10H), 5,86 (s, 2H), 3,69 (t, 2H, J = 8,2 Hz), 0,97 (t, 2H, J = 8,2 Hz), -0,03 (s, 9H).
(ii)
Roztok 2,90 g (6,10 mmol) 6-jod-3-styryl-l-(2-trimethylsilanylethoxymethyl)-lH-indazolu,
2,00 g (6,12 mmol) hexamethyldicínu a 282 mg (0,24 mmol) Pd(PPh3)4 v 10 ml odplyněného dioxanu byl zahříván ve 110 °C po dobu 3 hodin. Roztok pak byl naředěn 200 ml ethylacetátu, promyt 2 x 20 ml solanky, usušen nad MgSO4 a evaporován při sníženém tlaku. Purifikace io chromatografií na silikagelu poskytla 3 g (96 %) 3-styry i-l-(2-trÍmethylsÍ lany lethoxy methy I)6-trimethylstannyl-lH-indazolu jako žlutého oleje. ‘HNMR (300 MHz, CDC13)5 8,02 (d, IH,
J = 7,4 Hz), 7,17 (s, IH), 7,71 - 7,29 (m, 8H), 5,77 (s, 2H), 3,65 (t, 2H, J = 16,3 Hz), 0,95 (t, 2H,
Směs 820 mg (5,30 mmol) 4-chlor-lH-pyrazolo[3,4-b]pyridinu, 2,4 mg (16,0 mmol) jodidu sodného a 0,8 ml acetylchloridu v 6 ml acetonitrilu byla zahřívána k varu pod zpětným chladičem 8 hodin. Směs pak byla podrobena působení 10 ml 10% vodného roztoku NaCO3 a 10 ml 10% vodného roztoku NaHSO3 a udržována 10 minut. Směs byla extrahována 50 ml ethylacetátu a organické vrstvy byly promyty 10 ml solanky, usušeny nad MgSO4 a evaporovány při sníženém tlaku. Purifikace chromatografií na silikagelu poskytla 650 mg (42 %) l-(4-jodpyrazolo[3,4-b]pyridin-l-yl)ethanonu jako hnědé pevné látky, 'HNMR (300 MHz, CDC13) δ 8,39 (d, IH, J = 5,0 Hz), 8,04 (s, IH), 7,76 (d, IH, J - 5,0 Hz), 2,88 (s, 3H).
(<v)
1,2 g (8,8 mmol) l,7-dihydropyrazoÍo[3,4-b]pyridin-4-onu, (Dom, H. Et ak, Prakt. Chem., 324, 557-62, 1982) v 15 ml POC13 při teplotě 0°C bylo podrobeno působení 2,5 mg (0,01 mmol)
PC15. Roztok byl ponechán ohřát se na teplotu místnosti po dobu 1 hodiny, pak byl zahříván na °C a udržován 3 hodiny. Roztok byl koncentrován pri sníženém tlaku, pak podroben působení 50 ml ledu a vody. Výsledná směs byla extrahována 100 ml ethylacetátu a organická vrstva byla promyta 30 ml saturovaného vodného roztoku hydrouhličitanu sodného. Organická vrstva byla usušena nad MgSO4, pak evaporována pri sníženém tlaku za vzniku 820 mg (60 %) 4-chlor-lH35 pyrazolo[3,4-b]pyridinu jako žluté pevné látky. ‘H NMR (300 MHz, CDC13) δ 8,57 (d, IH,
J = 5,2 Hz), 8,25 (s, IH), 7,28 (d, IH, J = 5,2 Hz).
-190CZ dU1667 B6
Příklad 52(b)
6-(7-azaindoM-yl)-3-E-styryl-l H-indazol
SEM-jodindazol byl konvertován na sloučeninu z příkladu 52(b) podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 27(a). ' H NMR (300 MHz, MeOH,) δ 8,40 (d, 1H, J = 5,3 Hz), 8,53 (d, 1H, J = 6 Hz), 7,74- 7,35 (m, 10H), 6,90 (s, IH). HRMS (FAB) [M+H]/z vypočteno 337,1448, změřeno 337,1457. Analyzováno s 0,3 H2O, vypočteno: C (77,31), H(4,90), N( 16,39), Změřeno: C (77,51), H (4,88), N (16,27).
io
Výchozí látka byla připravena takto:
(i)
4-chlor-lH-pyrolo[2,3-b]pyridin (Clark, B. A, Et al., J. Chem. Soc. Pl, 2270-74, 1974) byl konvertován na 4-jod“lH-pyrolo[2,3-b]pyridin podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 52(a). 'H NMR (300 MHz, MeOH-d4) δ 8,10 (m, IH), 7,89 (d, IH, J= 5,0 Hz), 7,58 (m, IH), 7,50 (d, IH, J = 5,0 Hz), 6,26 (š s, IH).
Příklad 53(a)
3-( 1 H-benzi midazol-2-yl)-N-( 4—hydroxy fenyl)-1 H-indazol-6-karboxamid
K roztoku 208 mg (0,7 mmol) 3-(lH-benzimidazol-2-yl}-lH-indazol-6-karboxylové kyseliny v 6 ml suchého dimethylformamidu bylo přidáno 82 mg (0,7 mmol) 4-aminofenolu, následováno 312 mg (0,8 mmol) HATU, a pak bylo přidáno 20 kapek triethylaminu. Reakce byla míchána přes noc při teplotě místnosti. LC/MS prokázala požadovaný produkt jako hlavní složku. Rozpouštědlo bylo odstraněno ve vakuu. Zbylý zbytek byl nabrán do vody a ethylacetátu. Vrstvy byly odděleny a organická vrstva byla koncentrována ve vakuu. Zbytek byl rozpuštěn v 10 ml methanolu a polovina tohoto roztoku byla purifikována HPLC s použitím gradientu 5% acetonitril/voda až 55% acetonitril/voda po dobu 60 minut s 0,1% trifluoroctovou kyselinou ve vodě.
Sloučenina uvedená v názvu byla izolována jako 20 mg pevné látky. ’H NMR (methanol-d4) δ
- 191 CZ 301667 B6
6,87 (2H, d, 8,8 Hz), 7,55 (2H, d, 8,7 Hz), 7,61 (2H, m), 7,87 (2H, br s), 8,00 (IH, d, 8,4 Hz),
8,35 (1H, s), 8,52 (IH, d, 8,6 Hz). MS (APCI poz) 370,1.
Výchozí látka byla připravena takto:
(i)
K 2,0 g (12,42 mmol) 1 H-indol-ó-karboxylové kyseliny ve lOOml vody bylo přidáno 8,56 g (124,2 mmol) NaNO2. Ktéto suspenzi pak bylo pomalu po kapkách přidáváno adiční nálevkou io 16 ml 6N HCI. Výsledná suspenze byla ponechána za míchání při teplotě místnosti pres noc.
Pevný precipitát byl filtrován a promyt 50 ml vody za vzniku 2,35 g (100%) 3-formyl-lHindazol-6-karboxylové kyseliny. ’HNMR(DMSO-d6)8 14,46 (IH, s), 10,21 (lH,s), 8,26 (IH, s), 8,20 (IH, d, J = 8,5 Hz), 7,90 (IH, d, J = 8,3 Hz). MS (APCI pozitivní) 205 (methylester), (ii)
K 2,35 g (12,42 mmol) 3-formyl-lH“indazol-6-karboxylové kyseliny v 60 ml DMF bylo přidáno 1,34 g (12,42 mmol) 1,2-fenylendiaminu a 13,66 mmol (1,1 ekv.) práškové síry. Tato směs pak byla zahřívána k varu pod zpětným chladičem po dobu 6 hodin. Reakce byla sledována TLC a LC-MS. Po ochlazení bylo přidáno 50 ml vody do reakce a hnědý precipitát, který byl vytvořen, byl filtrován a sbírán za vzniku 3,1 g (90 %) 341H-benzimidazol-2-yl)-lH-indazol6-karboxylové kyseliny. *H NMR(DMSO-Λ) δ 14,01 (lH,s), 8,58 (lH,d, J = 8,5 Hz), 8,24 (IH, s), 7,87 (IH, d, J = 8,7 Hz), 7,64 (2H, m), 7,25 (2H, m). MS (APCI pozitivní) 279.
Příklad 53(b)
3-( 1 H-benzimidazol-2-y l)-N-cyklopropy 1-1 H-indazol-6-karboxamid
Ke 200 mg (0,719 mmol) 3-(lH-benzimidazol-2-yl)-lH-indazol-6-karboxylové kyseliny ve ml DMF bylo přidáno 98 mg (0,719 mmol) cyklopropyl aminu, 273 mg (0,719 mmol) HATU a 0,1 ml (0,726 mmol) triethylaminu. Tento roztok byl ponechán za míchání pri teplotě místnosti přes noc. Reakce byla zpracována promytím vodou a extrakcí 3 x 50 ml ethylacetátu. Organická vrstva pak byla usušena nad MgSO4, filtrována a koncentrována za vzniku tmavého oleje. Velmi
- 192CZ JIHOO/ DO rychlá chromatografie na koloně (30-70% ethylacetát/petrolether) poskytla 0,130 g (57%)
3-(lH-benzimidazol-2-yl)-N-cyklopropyl-lH-indazol-6-karb0xamidu jako žluté pevné látky.
'H NMR (DMSO-dé) δ 13,88 (1H, s), 8,63 (IH, m), 8,51 (IH, d, J = 8,5 Hz), 8,09 (IH, s), 7,75 (IH, d, J = 8,7 Hz), 7,63 (2H, br s), 7,21 (2H, m), 2,89 (IH, m), 0,72 (2H, m), 0,63 (2H, m).
MS (APC1 pozitivní) 318,1.
Příklad 53(c) ίο 3-( 1 H-benzimidazol-2-y l)-N-(4-hydroxy-3-methylfenyl)-l H-indazol-6-karboxamid
Sloučenina z příkladu 53(c) byla připravena podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 53(a), kromě toho, že 3-methy 1-4-am i nofenol byl použit namísto 4-aminofenolu. ’HNMR (DMSCM6) δ 8,59 (IH, d, J = 8,3 Hz), 8,25 (IH, s), 7,89 (IH, dd, J = 1,3, 8,5 Hz), 7,68 is (2H, brs), 7,28 (2H, m), 7,14 (IH, d, J = 8,5 Hz), 6,74 (IH, s), 6,68 (2H, d, J = 3,0, 8,3 Hz).
MS (APCI pozitivní) 384,1.
Příklad 53(d)
3-( 1 H-benzim idazol-2-yl)-N44-hydroxy-2,3-dimethy lfeny 1)-1 H-indazot-6-karboxamid
Sloučenina z příkladu 53(d) byla připravena podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 53(a), kromě toho, že 2,3-dimethyf4-aminofenol byl použit namísto 4-aminofenolu. 'HNMR (DMSO-d6) δ 9,93 (IH, s), 9,22 (IH, s), 8,56 (IH, d, J = 5,5 Hz), 8,25 (IH, s), 7,90 (IH, d, J = 8,5 Hz), 7,73 (IH, br s), 7,53 (IH, br s), 7,23 (2H, br s), 6,92 (IH, d, J = 8,3 Hz), 6,68 (IH, d, J = 8,5 Hz), 2,09 (6H, br s). MS (APCI pozitivní) 398,4.
Příklad 53(e)
3~( 1 H-benzimidazol-2-yl)-l H-indazol-6-karboxamid
- 193CZ 301667 B6
Sloučenina z příkladu 53(e) byla připravena podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu
53(a), kromě toho, že 1,1,1,3,3,3-hexamethyldisilazan byl použit namísto 4-amin o fenolu.
'H NMR(DMSO-d6) δ 13,91 (1H, s), 13,04 (1 H,s), 8,52 (IH, d, J = 8,3 Hz), 8,20 (IH, br s), 8,15 (IH, s), 7,81 (IH, d, J = 7,7 Hz), 7,75 (IH, d, J = 6,6 Hz), 7,51 (2H, m), 7,21 (2H, m). MS (APCI pozitivní) 278,1.
Příklad 53(f)
3—(1 H-benzimidazol-2-yI)-N-benzyloxy-l H-indazol-6-karboxamid
Sloučenina z příkladu 53(f) byla připravena podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 53(a) kromě toho, že O-benzyl hydroxy lamin byl použit namísto 4-aminofenolu. 'HNMR (DMSO-dó) δ 13,94 (IH, s), 13,06 (IH, s), 11,97 (IH, s), 8,55 (IH, d, J = 8,8 Hz), 8,02 (IH, s),
7,78 (IH, d, J = 8,3 Hz), 7,52 (IH, d, J = 8,3 Hz), 7,50 (3H, m), 7,40 (3H, m), 7,22 (2H, m), 4,97 (2H, s). MS (APCI pozitivní) 384,2.
Příklad 53(g)
3-( 1 H-benzimidazol-2-yl)-N43-f1uor-4-hydroxyfenyl)-l H-indazol-6-karboxamid
Sloučenina z příkladu 53(g) byla připravena podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 53(a) kromě toho, že 3-fluor-4-aminofenol byl použit namísto 4-aminofenolu. 'HNMR (CH.OD) δ 8,58 (IH, d, J - 8,5 Hz), 8,20 (IH, s), 7,84 (IH, d, J = 8,7 Hz), 7,68 (2H, br s), 7,63 (IH, dd, J = 2,4, 13 Hz), 7,29 (3H, m), 6,92 (IH, t, J - 9,2 Hz). MS (APCI pozitivní) 388,3.
Příklad 54(a)
3-(5,6-(.1ί fluor-1 H-benzimidazo l-2-yl)-N-(4-hydroxy fenyl )-l H-indazol-6-karboxamid
-194 CZ 3U1667 B6
S použitím stejného postupu jako pro syntézu 34 lH-benzimidazol-2-yl)-l H-indazo 1-6karboxylové kyseliny v příkladu 53(a), krok (ii), N-(4-hydroxyfenyl)-3-fbrmy 1-1 H-indazo 1-6karboxamid a 4,5—difluor—1,2-fenylendiamin poskytly 345,6-difluor-lH-benzimidazol-2-yl)5 N-(4—hydroxyfenyl)-lH-indazol-6-karboxamid jako žlutohnědou pevnou látku, 'HNMR (DMSO-4,)ó 13,99 (lH,s), 13,27 (lH,s), 10,21 (IH, s), 9,25 (IH, s), 8,52 (IH, d, J = 8,7 Hz), 8,21 (IH, s), 7,85 (IH, d, J = 9,0 Hz), 7,80 (IH, t, J = 9,8 Hz), 7,55 (2H, d, J - 8,7 Hz), 7,47 (IH, t, J = 9,8 Hz), 6,75 (2H, d, J = 8,7 Hz). MS (APCI pozitivní) 406.
io Výchozí látka byla připravena takto:
(')
K roztoku 1,6 g (8,4 mmol) 3-formyl-lH-indazol-ó-karboxylové kyseliny a 1,8 g (16,8 mmol)
4-aminofenolu v 35 ml suchého dimethylformamidu bylo přidáno 3,8 g (16,8 mmol) HATU následováno 1,4 ml (10,1 mmol) triethylaminu. Reakce byla míchána při teplotě místnosti a monitorována TLC a LC/MS. Po dvou hodinách byla reakce kompletní. Rozpouštědlo bylo odstraněno ve vakuu a produkt byl purifikován velmi rychlou chromatografií na koloně s použitím směsi ethylacetátu a petroletheru 1:1 až čistého ethylacetátu. N44-hydroxyfenyl)-320 formy 1-1 H-indazo46-karboxamid byl izolován jako žlutohnědě zbarvená pevná látka.
'HNMR(DMSO-d6) δ 6,79 (2H, d, 8,9 Hz), 7,59 (2H, d, 8,9 Hz), 7,94 (lH,d, 9,8 Hz), 8,24 (IH, d, 8,2 Hz), 8,31 (IH, s), 9,31 (2H, brs), 10,27 (2H, s), MS (APCI poz) 282,1.
Příklad 54(b)
3-(5,6-dichlor-1 H-benzimidazol-2-y l)-N44-hydroxyfenyl)-1 H-Índazo l-6-karboxatnid
Sloučenina z příkladu 54(b) byla připravena podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu
54(a) kromě toho, že 4,5-dichlor-l,2-fenylendiamin byl použit namísto 4,5-difluor-l,2feny lendiam inu. 'HNMRřDMSO-dJ δ 14,08 (IH, s), 13,38 (IH, s), 10,22 (IH, s), 9,27 (IH, s),
8,52 (IH, d, J = 8,7 Hz), 8,23 (IH, s), 8,02 (IH, s), 7,86 (IH, d, J = 8,7 Hz), 7,70 (IH, s), 7,55 (2H, d, J = 8,7 Hz), 6,75 (2H, d, J = 8,7 Hz). MS (APCI pozitivní) 438.
- 195CZ 301667 B6
Příklad 54(c)
3-(5-methoxy-1 H-benzimidazoI-2-yl)-N-(4—hydroxyfenyl)-1 H-indazol-6-karboxamid
Sloučenina z příkladu 54(c) byla připravena podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 54(a) kromě toho, že 4-methoxy-l,2-fenylendiamin byl použit namísto 4,5-difluor-l,2-fenylendiaminu. 1H NMR (DMSO-d6) δ 13,76 (lH,s), 12,77 (IH, s), 10,13 (lH,s), 9,17 (lH,s), 8,45 (1 H,d, J = 8,3 Hz), 8,11 (IH, s), 7,75 (IH, d, J = 8,6 Hz), 7,46 (2H, d, J = 8,7 Hz), 7,32 (IH, d, J= 8,3 Hz), 6,91. (lH,s), 6,77 (lH,m), 6,67 (2H, d, J = 8,7 Hz), 3,72 (3H, s). MS (APCI io pozitivní) 400.
Příklad 54(d)
3-[ 1 H-nafto(2,3-d)imidazol-2-yl]-N-(4—hydroxyfenyl)-! H-indazo 1-6-karboxamid
Sloučenina z příkladu 54(d) byla připravena podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 54(a) kromě toho, že 2,3-naftalendiamin byl použit namísto 4,5-difluor-l, 2-feny lendiaminu. 'HNMR (DMSO-d6) δ 14,11 (IH, s), 13,10 (IH, s), 10,24 (lH,s), 9,27 (IH, s), 8,64 (IH, d, J- 8,7 Hz), 8,28 (IH, s), 8,25 (IH, s), 7,97 (2H, m), 7,73 (lH,brs), 7,89 (1H, d, J = 8,6 Hz), 7,56 (2H,d, J= 8,7 Hz), 7,38 (2H, b), 6,76 (2H, d, J= 8,7 Hz). MS (APCI pozitivní) 420.
Příklad 54(e)
3-[l H-nafto( 1,2-d)imidazol-2-yl]-N-(4-hydroxyfenyl)-l H-indazol-6-karboxamid
Sloučenina z příkladu 54(e) byla připravena podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu
54(a) kromě toho, že 1,2-naftalendiamin byl použit namísto 4,5-difluor-l,2-fenylendiaminu.
'HNMR(DMSO-d6)b 13,93 (IH, s), 13,38 (lH,s), 10,23 (lH,s), 9,27 (lH,s), 8,70 (2H, m),
-196CZ JIH 00/ BO
8,22 (1H, s), 8,00 (IH, d, J = 8,0 Hz), 7,87 (IH, m), 7,72 (3H, m), 7,57 (2H, d, J = 8,7 Hz), 6,76 (2H, d, J = 8,6 Hz): MS (APCI pozitivní) 420.
Příklad 54(f)
3-(4,5-dimethyl-lH-benzimidazol-2-yl)-N-(4-hydroxyfenyl)-lH-indazol-6-karboxamid
Sloučenina z příkladu 54(f) byla připravena podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu io 54(a) kromě toho, že 3,4-dimethyl-l,2-fenylendiamin byl použit namísto 4,5-difluor-l,2fenylendiaminu. *H NMR (DMSO-dó) δ 13,77 (IH, d, tautomery), 12,70 (IH, d, tautomery),
10,11 (IH, s), 9,16 (IH, s), 8,48 (IH, d, J = 8,3 Hz), 8,09 (IH, s), 7,73 (IH, d, J = 8,6 Hz), 7,47 (2H, d, J = 8,7 Hz), 7,10 (IH, d, J = 8,3 Hz), 6,93 (IH, d, J = 8,3 Hz), 6,65 (2H, d, J = 8,7 Hz), 2,49 (3H, s), 2,24 (3H, s). MS (APQ pozitivní) 398,4.
Příklad 54(g)
3-(5“terc-butyl-lH-benzimidazol-2-yl)-N-(4-hydroxyťenyl)-l H-indazol-6-karboxamid
Sloučenina z příkladu 54(g) byla připravena podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 54(a) kromě toho, že 4-terc-butyl-l,2-fenylendiamin byl použit namísto 4,5-difluor-l,2fenylendiamínu. ]H NMR (aceton^) δ 12,88 (IH, s), 9,47 (IH, s), 8,63 (IH, d, J = 8,7 Hz), 8,18 (IH, s), 7,82 (IH, d, J = 8,3 Hz), 7,57 (4H, m), 7,26 (IH, d, J = 8,4 Hz), 6,74 (IH, d, J = 8,3 Hz),
1,31 (9H, s). MS (APCI pozitivní) 426.
Příklad 54(h)
3-(5-trífluormethyl-l H-benzimidazo l-2-yl)-N-( 4-hydroxy fenyl)-1 H-indazol-6-karboxamid
-197CZ 301667 B6
Sloučenina z příkladu 54(h) byla připravena podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu
54(a) kromě toho, že 4-trifluormethyl-l,2-fenylendiamin byl použit namísto 4,5-difluor-l,2fenylendiaminu. 'H NMR (methanol-d4) δ 6,86 (2H, d, 8,9 Hz), 7,54 (2H, d, 8,9 Hz), 7,6 (IH, dd, 8,5 Hz), 7,83 (IH, d, 83 Hz), 7,89 (IH, dd, 8,6 Hz), 8,04 (IH, br s), 8,25 (IH, s), 8,61 (IH, d,
8,6 Hz). MS (APCI poz) 438,1.
Příklad 54(i) i o 3-(5-fl nor-1 H-benzimidazol-2-yl)-N-(4—hydroxyfenv I)-1 H-indazol-6-karboxamid
Sloučenina z příkladu 54(i) byla připravena podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 54(a) kromě toho, že 4-ťluor-l,2-fenylendiamin byl použit namísto 4,5-difluor-l,2-fenylendiaminu. *H NMR (aceton^) δ 13,40 (IH, b), 12,47 (IH, b), 9,74 (IH, s), 8,67 (IH, d, J = 8,6
Hz), 8,66 (IH, s), 8,29 (IH, s), 7,94 (IH, d, J = 8,5 Hz), 7,67 (2H, J = 8,4 Hz), 7,64 (IH, m), 7,40 (IH, m), 7,05 (IH, t, J = 8,5 Hz), 6,83 (2H, d, J = 8,4 Hz). MS (APCI poz) 388.
Příklad 54(j)
3-(5H-[ 1,3]dioxolo[4,5-f]benzimidazol-6-yl)-N-(4-hydroxyfenyl)-l H-indazoI-6-karboxamid
Sloučenina z příkladu 54(j) byla připravena podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 54(a) kromě toho, že 4,5-methylendioxy-l,2-fenylendiamin byl použit namísto 4,5-difluor— 1,225 fenylendiaminu. 'll NMR (methanoi-d4) δ 6,85 (2H, d, 8,9 Hz), 7,15 (2H, s), 7,54 (2H, d, 8,9 Hz), 7,86 (IH, dd, 8,6 Hz), 8,23 (IH, s), 8,55 (IH, dd, 8,5 Hz). MS (APCI poz) 414,1.
Příklad 54(k)
-(5,6-d imethoxy-1 H-benzimidazol-2-yl)-N(4-hydroxyfenyl)-1 H-indazol-6-karboxamid
- 198CZ JU100/ BO
Sloučenina z příkladu 54(k) byla připravena podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu
54(a) kromě toho, že 4,5-dimethoxy-l,2-fenylendiamin byl použit namísto 4,5-difluor-l,2fenylendiaminu. ‘HNMR(methanol^)δ 3,98 (6H, s), 6,85 (2H, d, 8,78 Hz), 7,29 (2H, brs),
7,54 (2H, d, 8,73 Hz), 7,86 (IH, d, 8,57 Hz), 8,24 (IH, s), 8,57 (IH, d, 8,58 Hz). MS (APCI poz)
430,1.
Příklad 54(1) io 3-(5-chlor-lH-benzimidazol-2-yl)-N-(4-hydroxyfenyl)-lH-indazol-6-karboxamid
Sloučenina z příkladu 54(1) byla připravena podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 54(a) kromě toho, že 4-chlor-l,2-fenylendiamin byl použit namísto 4,5-difluor-l,2-fenylendiaminu. ‘HNMR(methanoRL,)δ 8,62 (lH,d, J= 8,6 Hz), 8,30 (IH, s), 7,90 (IH, dd, JI =
8,6 Hz, J2 = 1,3 Hz), 7,69 (b, 2H), 7,56 (2H,d, J = 6,89 Hz), 7,33 (IH, dd, JI =8,59,
J2 = 1,97 Hz), 6,88 (2H, d, J = 6,89 Hz). MS (APCI poz) 404,1.
Příklad 55
3-1 H-benzimidazol-2-yl-6-py ridin—t-y 1-1 H-indazol
SEM-sloučenina z příkladu 55 byla konvertována na sloučeninu z příkladu 55 podobným způsobem, jak bylo popsáno v příkladu 27(a). 'H NMR (300 MHz, CDCIj + MeOH-d4 + DMSO-d6) δ
8,71 - 8,64 (m, 3H), 8,03 (s, IH), 7,86 (dd, 2H, J - 4,7, 1,6 Hz), 7,77- 7,72 (m, 3H), 7,32 (dd,
2H, J = 6,0, 3,1 Hz), HRMS (FAB) [M+H]/z vypočteno 312,1244, změřeno 312,1253. Analyzováno s 1,40 H2O, vypočteno: C (67,80), H (4,73), N (20,81). Změřeno: C (68,06), H (4,45), N (20,68).
Výchozí látka byla připravena takto:
Roztok 0,70 g (2,0 mmol) 6-pyridin-4-yl-l-(2-trimethylsilanylethoxymethyI)-lH-indazol-3karbaldehydu, 0,26 g (2,4 mmol) benzen-l,2-diaminu a 77 mg (2,4 mmol) síry v 10 ml DMF byl
-199CZ 301667 B6 zahříván v olejové lázni v 90 ŮC přes noc. Výsledná směs byla nalita do 200 ml solanky, a pak extrahována 3 x 60 ml EtOAc. Spojené organické vrstvy byly usušeny nad MgSO4 a koncentrovány při sníženém tlaku. Výsledný olej byl purifikován chromatografií na silikagelu za vzniku
0,75 g (65 %) ó-pyridin-4—yl-l-(2-trimethylsilanylethoxymethyl)-3-[I-(2-trimethylsilanyl5 ethoxymethyl)-lH-benzimidazol-2-yl]-l H-indazolu jako světle hnědého oleje. 'HNMR (CDCb) δ 8,82 (d, IH, J = 8,5 Hz), 8,73 (d, IH, J = 5,8 Hz), 7,94 - 7,89 (m, 2H), 7,87 (s, IH), 7,69- 7,62 (m, 4H), 7,40- 7,34 (m, 2H), 3,70- 3,49 (m,4H), 0,94 (t, 2H, J = 8,3 Hz), 0,67 (t, 2H, J = 8,2 Hz), -0,03 (s, 9H), -0,13 (s, 9H).
io
Příklad 56
3-[3-(propyn-3-ylkarbamoyl)benzoyl])-3-E-[2-(pyridin-2-y1)ethenyl]-l H-indazol
Roztok 55,4 mg (0,15 mmol, syntéza popsaná níže) 2—{I—[3—((E)—2—pyridin—2—ylvinyl>-lH— indazol-6-yl]methanoyl}benzoové kyseliny, 15,4 μί (0,225 mmol) propargylaminu a 41,8 μΐ (0,30 mmol) triethylaminu, rozpuštěný v 1,5 ml DMF, byl podroben působení 62,7 mg (0,165 mmol) 0-(7-azabenzotriazol-l-yl)-N,N,N',N'-tetramethyluroniumhexafluorfosfátu. Po míchání po dobu jedné hodiny byla směs koncentrována za vysokého vakua a purifikována preparativní chromatografií s převráceným poměrem fází na koloně C18. Výsledných 40 mg produktu bylo dále purifikováno chromatografií na chromatotronu s kruhovou deskou za eluce směsí 25% CH3CN a CH2Cl2í za vzniku 16,5 mg produktu jako bílé pevné látky (27% výtěžek). 'HNMR(DMSO-<b) δ 13,30 (s, IH), 8,58 (d, J = 5,00 Hz, IH), 8,05 (d, J = 8,29 Hz, IH), 7,92 (d, J = 16,2 Hz, IH), 7,79 (m, 3H), 7,63 (d, J = 8,25 Hz, IH), 7,53 (m, 3H), 7,32 (s, IH), 7,27 (m, 2H), 6,89 (d, J = 8,48 Hz, IH). Anal. výpočet pro C25H,8N4O2 · 0,5 H2O: C, 72,27, H, 4,61,
N, 13,49. Změřeno: C, 72,39, H, 4,62, N, 13,69.
(i)
Syntéza 2-{l-[3-((E)-2-pyridin-2-ylvinyl)-IH-indazol-6-yl]methanoyl}benzoové kyseliny. Roztok 402 mg (0,805 mmol, syntéza popsaná níže) 2-{l—[3—((E)—2—pyridin—2—ylvinyl)—l-(2— trimethylsilanylethoxymethyl)-l H-indazol-6-yl]methanoyl} benzoové kyseliny, 215 μΐ (3,22 mmol) ethylendiaminu a 6,44 ml (6,44 mmol) ÍM TBAF v THF byl míchán v 90 °C v olejové lázni po dobu 4 hodin. Surová reakční směs byla zastavena 386 μί (6,44 mmol) octové kyseliny, naředěna 100 ml ethylacetátu, extrahována 2 x 20 ml ÍM roztoku hydrouhličitanu sodného, 5 x 20 ml solanky, usušena nad sulfátem hořečnatým, filtrována a koncentrována na objem 3 ml. Výsledná surová látka byla purifikována preparativní chromatografií s převráceným poměrem fází na koloně C18 za vzniku 211 mg sloučeniny uvedené v názvu jako žluté pevné látky (71 % výtěžek). *H NMR (DMSO-dé) δ 13,50 (š s, IH), 8,68 (d, J = 5,27 Hz, IH), 8,29 (d, J = 8,86 Hz, IH), 8,13 - 7,90 (m, 4H), 7,81 - 7,43 (m, 7H).
-200LL JU100/ BO (ii)
Syntéza 2-{ 1 -[3-((E)-2-pyridin-2-ylvinyl)-l-(2-trimethylsiIanylethoxymethyl)-l H-indazol6-yljmethanoyf} benzoové kyseliny. Roztok 477 mg (1,0 mmol) 6-jodindazolu, rozpuštěno v 10 ml THF, v -100 °C byl po kapkách podroben působení 440 μί (1,10 mmol) 2,5M n-butyllithia v hexanu, mícháno po dobu 5 minuty v této teplotě, a pak byl podroben působení roztoku 222 mg (1,5 mmol) anhydridu kyseliny fialové v 1,0 ml THF. Výsledná směs byla ponechána ohřát se pomalu na teplotu místnosti, kde byla zbavena THF, naředěna ethylacetátem, extrahována IN kyselinou citrónovou, extrahována solankou, usušena nad sulfátem hořečnatým a koncen10 trována na olej. Olej byl triturován methylenchloridem a diethyletherem za vzniku 484 mg (81% výtěžek) sloučeniny uvedené v názvu jako bílé pevné látky. 'H NMR (DMSO-dó) δ 8,67 (d, J = 5,09 Hz, IH), 8,31 (d, J = 8,85 Hz, IH), 8,08 - 7,55 (m, 4H), 7,50 - 7,37 (m, 2H), 5,81 (s, 2H),
3,53 (t, J = 8,10 Hz, 2H), 0,78 (t, J = 8,15 Hz, 2H), -0,12 (s, 9H).
Příklad 57
3-(3-(( 1,3-dimethyl-l H-pyrazol-5-yl)karboxamido)fenoxy]-3-E-[2-(pyridÍn-2-yl)etheny I]1 H-indazol
Sloučenina z příkladu 57 byla připravena podobným způsobem jako v příkladu 58. 'HNMR (300 MHz, DMSO-dó)δ 13,15 (s, IH), 10,17 (s, IH), 8,60 (d, IH, J = 4,2 Hz), 8,22 (d, IH, J = 8,7 Hz), 7,94 (d, IH, J = 16,4 Hz), 7,84 - 7,79 (m, IH), 7,68-7,50 (m, 4H), 7,40 (t, IH, J = 8,1 Hz), 7,30 - 7,26 (m, IH), 7,06 (s, IH), 7,00 (dd, IH, J = 8,8, 1,9 Hz), 6,87 (dd, IH, J = 8,0, 1,9
Hz), 6,79 (s, IH), 3,96 (s, 3H), 2,17 (s, 3H), ESIMS m/z 451 [M+H]+. Anal. vypočteno pro C2ďH22NóO2 x 0,5 H2O x 0,4 hexan (494,0 g/mol): C, 69,05, H, 5,84, N, 17,01. Změřeno: C, 68,78, H, 5,55, N, 17,05.
Příklad 58
3-(3-(( 1-ethy 1-3-methy 1-1 H-pyrazol-5-yl)karboxamido)fenoxy]-3-E-[2-( 1 H-imidazol-2-
-201
Roztok 7,5 ml (7,5 mmol, 15,0 ekv.) l,0M tetrabutylamoniumfluoridu v THF a 0,33 ml (5,0 mmol, 10 ekv.) 1,2-diaminoethanu bylo přidáno k 360 mg (0,5 mmol, 1,0 ekv.) [2-methyl5-(l-(2-trimethylsilanyIethoxymethyl)-3-{(E)-2-[H2-trimethylsilanylethoxymethyl)-lHimidazol-2-yl] viny l}-lH-indazol-6-y loxy )fenyl]amidu 2-ethy 1-5-methy l-2H-pyrazol-35 karboxylové kyseliny v 5 ml 1,4-dioxanu a reakční směs byla zahřívána na 90 °C po dobu 18 hodin. Na konci této doby byla reakce koncentrována při sníženém tlaku a výsledný oranžový olej byl naředěn 50 ml ethylacetátu. Organická vrstva byla důkladně promyta 5 x 50 ml saturovaného hydrouhličitanu sodného, solankou, usušena nad sulfátem hořečnatým a koncentrována při sníženém tlaku za vzniku 287 mg žluté pevné látky. Surový produkt byl purifikován io chromatografií s kruhovou deskou na silikagelu s použitím směsi 5% methanolu a chloroformu s 0,1% hydroxidem amonným (Rf 0,1) jako eluentu za vzniku 140 mg (61 %) (5—{3—[(E)—2—(lH— imidazoI-2-yl)vinyl]-lH-indazol-6-yloxy}2-methylfenyl)amidu 2-ethy 1-5-methy 1-2 Hpyrazol-3-karboxylové kyseliny jako světle žluté pevné látky: HPLC Rt = 11,8 minut, TLC Rf = 0,8 (10% směs methanolu a chloroformu s 0,1% hydroxidem amonným), 'HNMR (300 MHz,
DMSO-d6) δ 13,03 (s, IH), 12,30 (š s, IH), 9,78 (s, IH), 8,00 (d, IH, J = 8,6 Hz), 7,54 (d, IH, J = 16,8 Hz), 7,32 (d, IH, J = 8,5 Hz), 7,27 (d, IH, J = 16,9 Hz), 7,13 - 7,12 (m, 3H), 7,00-6,94 (m, 3H), 6,78 (s, IH), 4,39 (q, 2H, J = 7,1 Hz), 2,23 (s, 3H), 2,19 (s, 3H), 1,28 (t, 3H, J = 7,1 Hz). Anal. vypočteno pro C26H25N7O2 - 0,5 H2O · 0,4 hexan (511,0 g/mol): C, 66,75, H, 6,23, N, 19,19. Změřeno: C, 66,95, H, 6,25, N, 18,83.
Výchozí látky byly připraveny takto:
(i) Příprava l-(2-trimethylsilanyIethoxymethyl)-IH-imidazolu
2,0 g (29,4 mmol, 1,0 ekv.) 1 H-imidazolu v 70 ml THF byly přidány při teplotě 0 °C k suspenzí
1,5 g (38,2 mmol, 1,3 ekv.) hydridu sodného (60% v minerálním oleji) ve 30 ml THF. Poté, co ustal vývoj plynu, byla směs zahřáta na teplotu místnosti po dobu 45 minut, a pak opět ochlazena na 0°C. Bylo přidáno 5,4 ml (30,2 mmol, 1,0 ekv.) [2-(trimethylsilyI)ethoxy]methylchloridu a směs byla zahřáta přes noc na teplotu místnosti. Reakce byla zastavena saturovaným hydro30 uhličitanem sodným, THF bylo odstraněno při sníženém tlaku a výsledná béžová suspenze byla extrahována ethylacetátem. Extrakty byly spojeny, promyty solankou, usušeny nad sulfátem hořečnatým, filtrovány a koncentrovány za vzniku 6,9 g jantarového oleje. Olej byl purifikován velmi rychlou chromatografií na silikagelu s použitím 2% směsi methanolu a chloroformu jako eluentu za vzniku 4,7 g (81 %) l-(2-trimethylsilanylethoxymethyl)-lH-ÍmÍdazolu jako světle jantarového oleje: TLC Rf = 0,3 (5% směs methanolu a chloroformu), 'H NMR (300 MHz, DMSO-dó) δ 7,77 (s, IH), 7,26 (d, IH, J= 1,2 Hz), 6,93 (s, IH), 5,32 (s, 2H), 3,45 (t, 2H, J = 8,0 Hz), 0,83 (t, 2H, J = 8,0 Hz), -0,05 (s, 9H), i3C NMR (75 MHz, DMSO-d6) δ 137,9, 128,8, 119,6, 74,8, 65,1, 17,1,-1,4.
(ii) Příprava (l-(2-trimethylsilanylethoxymethyl)-lH-imidazol-2-yl]methanolu
3,0 g (15,4 mmol, 1,0 ekv.) 1 —(2—tri methy lsilanylethoxymethyl)-l H-imidazolu bylo rozpuštěno ve 150 ml THF a ochlazeno na -78 9C. Bylo přidáno 10,6 ml (16,9 mmol, 1,1 ekv.) n-BuLi,
1,6M v hexanu, a teplota byla ponechána zvýšit se na -40 °C po dobu 15 minut. Světle žlutý roztok byl míchán dalších 30 minut v -40 °C, pak byl anion zastaven 1,3 ml (16,9 mmol,
1,1 ekv.) DMF. Reakční směs byla přes noc zahřáta na teplotu místnosti, a pak zastavena vodou.
-202cl ου 100/ bó
Rozpouštědlo bylo odstraněno a směs byla extrahována dichlormethanem. Organická vrstva byla promyta vodou, usušena nad solankou a sulfátem hořečnatým, filtrována a koncentrována za vzniku 3,5 g surového produktu, TLC Rf = 0,5 (5% směs methanolu a chloroformu). Podle protonového NMR spektra je aldehydový proton přítomen v 9,73 ppm (300 MHz, DMSO-dó)· Surový produkt byl rozpuštěn v 15 ml methanolu, ochlazen na 0°C a podroben působení 1,2 g (30,8 mmol, 2,0 ekv.) borohydridu sodného. Reakční směs byla přes noc zahřáta na teplotu místnosti. Rozpouštědlo bylo odstraněno a surový produkt byl naředěn chloroformem, promyt vodou, usušen nad solankou a sulfátem hořečnatým, filtrován a koncentrován za vzniku 3,6 g čirého oleje. Olej byl purifikován velmi rychlou chromatografií na silíkagelu s použitím 3 až 6% io směsi methanolu a chloroformu s 0,1% hydroxidem amonným jako eluentu za vzniku 1,4 g (41%, 2 kroky) [l-(2-trimethyIsilanylethoxymethyl>-lH-imidazol-2-yl]methanolu jako bílé pevné látky: TLC Rf = 0,4 (8% směs methanolu a chloroformu), H NMR (300 MHz, DMSO-Λ) δ 7,22 (d, IH, J= 1,1 Hz), 6,81 (d, IH, J = 1,0 Hz), 5,36 (s, 2H), 5,31 (brt, IH, J = 5,2 Hz), 4,50 (d, 2H, J = 4,8 Hz), 3,48 (t, 2H, J = 8,0 Hz), 0,83 (t, 2H, J = 8,0 Hz), -0,05 (s, 9H), l3C NMR is (75 MHz, DMSO-dí) δ 148,9, 127,8, 122,5, 75,5, 66,5, 56,9, 18,5,0,0.
(iii) Příprava hydrochloridu 2-chlormethyl-l-(2-trimethylsilanylethoxymethyl)-lH-Ímidazolu
Roztok 0,87 ml (12,0 mmol, 3,0 ekv.) thionylchloridu v 8 ml chloroformu byl ochlazen na 0 °C a podroben působení roztoku 0,92 g (4,0 mmol, 1,0 ekv.) [ 1-(2-tr i methyl si lany lethoxy methy 1)1 H-imidazol-2-yl]methanolu ve 2 ml chloroformu. Čirý roztok byl míchán pri teplotě 0 °C po dobu 30 minut, a pak při teplotě místnosti po dobu 2 hodin. Rozpouštědlo bylo odstraněno a produkt byl postupně suspendován a koncentrován s použitím chloroformu, toluenu a cyklohexanu za vzniku 1,1 g (97%) hydrochloridu 2-chlormethyl-l-(2-trimethylsilanylethoxy25 methyl)-1 H-imidazolu jako béžové pevné látky: *H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 7,85 (d, 1H,
J = 1,9 Hz), 7,70 (d, IH, J= 1,9 Hz), 5,62 (s, 2H), 5,14 (s, 2H), 3,57 (t, 2H, J = 8,3 Hz), 0,90 (t, 2H, J = 8,3 Hz), -0,02 (s, 9H), l3C NMR (75 MHz, DMSO-d6) δ 142,1, 123,2, 120,2, 76,5, 66,8,31,7, 17,3,-1,4.
(iv) Příprava 3-amÍno-4-methylfenolu
Černá pevná látka (95 %), HPLC Rt = 4,4 minut, 'H NMR (300 MHz, DMSO-dó) δ 8,61 (s, 1H), 6,64 (d, IH, J = 8,1 Hz), 6,05 (d, IH, J = 2,4 Hz), 5,8 8 (dd, IH, J = 8,0, 2,4 Hz), 4,64 (š s, 2H), 1,92 (s, 3H), ,3CNMR(75 MHz, DMSO-Λ) δ 156,1, 147,2, 130,2, 111,7, 103,3, 101,1, 16,6.
(v) Příprava 3-(benzhydrylidenamino)-4-methylfenolu
Žlutá pevná látka (49 %), tt. 106 až 108 °C, HPLC Rt = 15,3 minut, TLC Rf = 0,2 (10% směs ethylacetátu a cyklohexanu), ]H NMR (300 MHz, DMSO-Λ) δ 8,91 (s, 1H), 7,67 - 7,56 (m, 2H),
-203 CZ 301667 B6
7,53 - 7,43 (m, 3H), 7,35 -7,31 (m, 3H), 7,13 -7,10 (m, 2H), 6,82 (d, IH, J = 8,3 Hz), 6,22 (dd, IH, J = 8,1, 2,5 Hz), 5,88 (d, IH, J = 2,5 Hz), 1,97 (s, 3H), ”C NMR (75 MHz, DMSO-ds) δ 165,4, 155,2, 150,6, 138,9, 136,0, 130,8, 130,2, 128,7, 128,4, 128,2, 128,0, 117,3, 109,9, 106,2 17,0.
(vi) Příprava benzhydryliden-{2-methyl-5-[3-((E)styryI)-1 -(2-trimethylsilanylethoxymethyl)1H-indazol-6-y loxyjfeny 1} aminu
Do baňky s kulatým dnem bylo vloženo 5,5 g (26,0 mmol, 2,0 ekv.) fosfátu draselného, 3,9 g io (13,6 mmol, 1,1 ekv.) 3-(benzhydrylidenamino)~4-methylfenolu, 6,2 g (13,0 mmol, 1,0 ekv.)
6-jod“3-((E)styiyÍ)-l-(2-trimethylsÍlanylethoxymethyl)-lH-mdazolu a 130 ml o-xylenu. Výsledná suspenze byla odplyněna, probublána argonem a podrobena působení 916 mg (1,1 mmol, 8 mol%) směsi tris(dibenzylídenaceton)dipalladia(0) a 656 mg (2,2 mmol, 16 mol%) bifeny 1-2-y 1-di-terc-butylfosfátu. Baňka byla ponořena do olejové lázně a míchána v 100 °C po dobu 18 hodin. Černá suspenze byla ochlazena na teplotu místnosti, filtrována přes celit a koncentrována. Černý olej byl rozpuštěn v chloroformu, promyt vodou, solankou, usušen nad sulfátem hořečnatým, filtrován a koncentrován za vzniku 12,1 g černého oleje. Surový produkt byl purifikován velmi rychlou chromatografií na silikagelu s použitím 10 až 15% směsi etheru a cyklohexanu jako eluentu za vzniku 1,4 g (16 %) benzhydryliden-{2-methyl-5-[3-((E)styryl)20 l-(2-trimethylsilanylethoxymethyl)-l H-indazol-6-yloxyjfenyl} aminu jako žluté pěny z etheru:
HPLC Rt - 24,3 minut, TLC Rf = 0,5 (20% směs etheru a cyklohexanu), *H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 8,10 (d, IH, J = 8,8 Hz), 7,75 - 7,66 (m, 4H), 7,53 - 7,31 (m, 1 IH), 7,14 - 7,08 (m, 4H), 6,62 (dd, IH, J = 8,8, 2,0 Hz), 6,55 (dd, IH, J - 8,2, 2,5 Hz), 6,20 (d, IH, J = 2,4 Hz), 5,64 (s, 2H), 3,51 (t, 2H, J = 7,8 Hz), 2,12 (s, 3H), 0,78 (t, 2H, J = 7,7 Hz), -0,14 (s, 9H).
(vii) Příprava 2-methyl-5-[3-((E)styryl)-l-(2-trimethylsilanylethoxymethyl-l H-indazol-6-yloxy]fenylaminu
Jantarový olej (80 %), HPLC Rt = 21,0 minut, TLC Rf - 0,4 (20% směs ethylacetátu a cyklo30 hexanu), ]H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 8,18 (d, IH, J = 8,8 Hz), 7,74 - 7,71 (m, 2H), 7,52 (s, 2H), 7,43 - 7,38 (m, 2H), 7,33 - 7,28 (m, IH), 7,20 (d, IH, J = 2,0 Hz), 6,97-6,90 (m, 2H), 6,33 (d, IH, J = 2,4 Hz), 6,16 (dd, IH, J = 8,0, 2,5 Hz), 5,66 (s, 2H), 5,01 (š s, 2H), 3,52 (t, 2H, J = 8,0 Hz), 2,03 (s, 3H), 0,80 (t, 2H, J = 8,0 Hz), -0,11 (s, 9H).
(viii) Příprava (2-methyl-5-[3-((E)styryl)-l-(2-trimethylsilanylethoxymethyl)-l H-indazoI-6yloxyjfeny 1} amidu 2-ethyl-5-methyl-2H-pyrazol-3-karboxylové kyseliny
-204CL JU1OO/ HO
Bílá pěna (85 %), HPLC Rt = 21,5 minut, TLC Rf = 0,2 (20% směs ethylacetátu a cyklohexanu), *H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,75 (s, IH), 8,24 (d, IH, J = 8,8 Hz), 7,74 - 7,72 (m, 2H),
7.53 (s, 2H), 7,43 - 7,38 (m, 2H), 7,34- 7,28 (m, 3H), 7,12 (d, IH, J = 2,6 Hz), 7,00 (dd, IH, 5 J = 8,8, 2,0 Hz), 6,92 (dd, 1H, J = 8,3,25 Hz), 6,78 (s, l H), 5,69 (s, 2H), 4,40 (q, 2H, J = 7,1 Hz),
3.53 (t, 2H, J= 7,9 Hz), 2,22 (s, 3H), 2,19 (s, 3H), 1,27 (t, 3H, J= 7,1 Hz), 0,78 (t, 2H, J = 7,9 Hz),-0,15 (s, 9H).
(ix) Příprava {5-[3-formyl-l-(2-trimethylsilanylethoxymethyl)-l H-indazol-6-yloxy]-2io methylfenyl}amidu2-ethyl-5-methyl-2H-pyrazol-3-karboxylové kyseliny
Roztok 774 mg (1,28 mmol, 1,0 ekv.) {2-methyl-5-[3-((E)styrylH2~trimethylsilanylethoxymethyl}-lH-indazol-6-yloxy]fenyl}amidu 2-ethyl-5-methy 1-2H-pyrazol-3-karboxylově kyseliny v 8 ml 1,4-dioxanu a 2 ml vody byl podroben působení 7 mg (0,03 mmol, 0,02 ekv.) oxidu osmičelého. Roztok byl míchán po dobu 5 minut, a pak byl podroben působení 822 mg (3,84 mmol, 3,0 ekv.) jodistanu sodného. Výsledná hustá žlutohnědá suspenze byla míchána přes noc při teplotě místnosti, nalita do 100 ml 15% Na2S2O3 a extrahována ethylacetátem. Organická vrstva byla promyta saturovaným hydrouhličitanem sodným, solankou, usušena nad sulfátem hořečnatým, filtrována a koncentrována za vzniku 902 mg jantarového oleje. Surový produkt byl purifikován chromatografií s kruhovou deskou na silikagelu s použitím 10 až 50% směsi ethylacetátu a cyklohexanu jako eluentu za vzniku 590 mg (86%) {5-[3-formyl-l-(2-trimethylsilanylethoxymethyiy-lH-indazol-6-yloxy]-2-methylfenyl}amidu 2-ethyl-5-methyl-2Hpyrazol-3-karboxylové kyseliny jako béžové pevné látky z etheru: HPLC Rt = 18,9 minut, TLC Rf = 0,2 (40% směs ethylacetátu a cyklohexanu), 'H NMR (300 MHz, DMSO-dó) δ 10,16 (s, IH, 9,75 (s, IH), 8,14 (d, IH, J = 8,8 Hz), 7,48 (d, IH, J - 1,8 Hz), 7,32 (d, IH, J = 8,5 Hz),
7,16- 7,13 (m, 2H), 6,93 (dd, IH, J= 8,3, 2,6 Hz), 6,78 (s, IH), 5,84 (s, 2H), 4,39 (q, 2H, J = 7,1 Hz), 3,55 (t, 2H, J = 7,8 Hz), 2,23 (s, 3H), 2,19 (s, 3H), 1,27 (t, 3H, J = 7,2 Hz), 0,79 (t, 2H, J = 7,8 Hz),-0,15 (s, 9H).
(x) Příprava 2-methyl-5-(H2-trimethylsilanylethoxymethyl)-3-((E)-2-[l-<2-trimethylsilanylethoxymethyl)-l H-imidazol-2-yl]vinyl}-l H-indazol-6-yIoxy)fenyl]amidu 2-ethyl-5methyl-2H-pyrazol-3-karboxylové kyseliny
-205 CZ 301667 B6
Roztok 344 mg (1,22 mmol, 2,0 ekv.) hydrochloridu 2-chlormethyl-l-(2-trimethylsilanylethoxymethyl)-]H-iniidazolu ve 20 ml chloroformu byl převeden na formu volné báze saturovaným hydrouhličitanem sodným. Organická vrstva byla usušena nad solankou a sulfátem hořečnatým, filtrována a koncentrována za vzniku 301 mg (100 %) jantarového oleje. Výsledný olej byl rozpuštěn ve 12 ml acetonitrilu, byl podroben působení 304 mg (1,16 mmol, 1,9 ekv.) trifenylfosflnu a zahříván na 70 °C po dobu 18 hodin. Rozpouštědlo bylo odstraněno a surový 1 -(2-trimethylsilany lethoxymethy l)-2-[(trifeny l-k5-ťosťanyl)methyl]-1 H-imidazolchlorid byl rozpuštěn ve 12 ml THF, ochlazeného na -78 °C a podroben působení 1,2 ml (1,22 mmol, io 2,0 ekv.) terc-butoxidu draselného, 1,OM v THF. Po 15 minutách bylo přidáno 325 mg (0,61 mmol, 1,0 ekv.) {5-[3-formyl-l-(2-trimethylsilanylethoxymethyl)-lH-indazol-6-yloxy]-2-methylfenyl}amidu 2-ethyl-5-methyl-2H-pyrazol 3-karboxylové kyseliny v 1 ml THF k ytidu v -78 °C. Čirý žlutý roztok byl přes noc zahřát na teplotu místnosti, zastaven vodou a extrahován ethylacetátem. Organická vrstva byla promyta solankou, usušena nad sulfátem hořečnatým, filtrována a koncentrována za vzniku 1,0 g surového produktu jako jantarového oleje. Surový produkt byl purifikován další chromatografíi s kruhovou deskou na silikagelu s použitím 0 až 5 % směsi methanolu a chloroformu jako eluentu za vzniku 390 mg (88 %) [2-methyl-5-(l“(2-trimethylsilanylethoxymethyl)-3-{(E)-2-[l-(2-trimethylsilanylethoxymethyl)-lH-imidazol-2-yl]vinyl}-lH-indazol-6-yloxy)fenyl]amidu 2-ethyl-5-methyl-2H20 pyrazol-3-karboxylové kyseliny jako žlutohnědé pevné látky po stání přes noc: HPLC Rt = 20,6 minut, TLC Rf = 0,4 (4% směs methanolu a dichlormethanu), ‘H NMR (300 MHz, DMSO-d6)5 9,75 (s, IH), 8,14 (d, IH, J= 8,8 Hz), 7,64 (d, IH, J= 16,2 Hz), 7,42 (d, IH, J = 16,3 Hz), 7,39 - 7,35 (m, 3H), 7,30 (d, IH, J = 8,5 Hz), 7,12 (d, IH, J = 2,5 Hz), 7,03 (s, IH), 6,99 (dd, IH, J = 8,8, 1,9 Hz), 6,78 (s, IH), 5,70 (s, 2H), 5,55 (s, 2H), 4,40 (q, 2H, J = 7,1 Hz),
3,55 - 3,48 (m, 4H), 2,22 (s, 3H), 2,19 (s, 3H), 1,27 (t, 3H, J = 7,1 Hz), 0,84 (t, 2H, J = 7,9 Hz),
0,77 (t, 2H, J - 7,9 Hz), -0,11 (s, 9H), -0,15 (s, 9H).
Příklad 59(a)
Hydrochiorid 6 [3 -((1 ethyl-3-methyl-lH-pyrazol-5-yl)karboxamido)benzoyl]-3-E-[2(pyridin-2-yl)ethenyI]-l H-indazolu
4,57 g (9,59 mmol, 1 ekv.) sloučeniny z příkladu 4t(a) bylo nabráno do 96 ml methanolu 35 a chráněno před světlem aluminiovou fólií. Druhá baňka s 20 ml methanolu byla podrobena působení 684 μΙ (1,00 ekv.) acetylchloridu po dobu 5 minut. Roztok kyseliny pak byl přidán k první směsi a směs byla několikrát promyta ~20 ml methanolu. Těkavá látka byla odstraněna při sníženém tlaku a zbytek byl triturován 1: l směsí ethylacetátu a hexanu za vzniku 4,82 g (98%) žlutého prášku po filtraci a usušení: analyzováno s 1,0 H2O, vypočteno: C (61,85),
H (5,07), N (15,46). Změřeno: C (61,15), H (5,15), N (15,38).
-206CL JUIOOZ DO
Příklad 59(b)
Hydrochlorid 6-(3-((1,3-dimethyl-lH-pyrazol-5-yl)karboxamido)benzoyl]-3-E-[2-(pyridin-
Sloučenina z příkladu 59(b) byla připravena podobným způsobem, jako v příkladu 59(a) kromě toho, že sloučenina z příkladu 41(p) byla použita namísto sloučeniny z příkladu 41 (a). HPLC: 3,92 minut (100% oblast), Ή NMR (DMSO-d*) δ 10,45 (s, IH), 8,85 (d, IH, J = 4,8 Hz), 8,49 (d, IH, J= 8,7 Hz), 8,38- 8,30 (m, 4H), 8,21 (dt, IH, J= 7,5, 2,1 Hz), 8,01 (s, IH), io 7,90- 7,79 (m,2H), 7,72 - 7,64 (m, 3H), 6,70 (s, IH), 4,30 (s, 3H), 2,33 (s, 3H). Anal.
(C27H20N4O2S · 1,3 H2O 0,2 EtOAc): vypočteno C, 62,15, H, 5,18, N, 15,64, změřeno C, 61,81,
H, 5,01, N, 15,64.
Příklad 59(c)
Hydrochlorid 6-[N-(5-(( 1 -ethyí-3-methyI-1 H-pyrazoI-5-yl)karboxamido)-2-fluor-4-methyIfenyl)amino]-3-E-[2-(pyridin-2-yl)ethenyl]“lH-indazolu
Sloučenina z příkladu 59(c) byla připravena podobným způsobem, jako v příkladu 59(a) kromě toho, že sloučenina z příkladu 48(a) byla použita namísto sloučeniny z příkladu 41 (a). Anal. výpočet: C, 63,21, H, 5,12, N, 38,43, Cl, 6,66. Změřeno: C, 60,86, H, 5,38, N, 17,28, Cl, 6,52.
Příklad 59(d)
Hydrochlorid 6_[N-(3-(( 1,3-dimethyl-lH-pyrazol-5-yl)karboxamÍdo)-4-fluorfenyl)amino]-3E-[2-(pyridm-2-yl)ethenyl]-l H-indazolu
Sloučenina z příkladu 59(d) byla připravena podobným způsobem, jako v příkladu 59(a) kromě toho, že sloučenina z příkladu 49(a) byla použita namísto sloučeniny z příkladu 41 (a). 'H NMR (300 MHz, DMSO-dé) δ 13,2 (b, IH), 9,97 (s, IH), 8,75 (d, IH, J = 5,44 Hz), 8,51 (š s, IH), 8,35 (m, 2H), 8,20 (d, IH, J = 16,59 Hz), 8,51 (š s, IH), 8,35 (m, 2H), 8,20 (d, IH, J = 16,59 Hz), 8,06 (d, IH, J= 8,81 Hz), 7,71 (d, IH, J= 16,59 Hz), 7,70 (m, IH), 7,44 (dd, IH, J= 6,65 Hz,
J = 2,67 Hz), 7,24 (t, IH, J = 9,54 Hz), 7,12 (d, IH, J = 1,46 Hz), 7,05 (m, 2H), 6,86 (s, IH), 4,0 (s, 3H), 3,84 (š s, IH), 2,20 (s, 3H).
-207CZ 301667 B6
Příklad 59(e)
Hydrochlorid 6—[3-((1 -ethy 1-3-methy 1-1 H-pyrazol-5-yl )karboxam ido)fenoxy ]-3-E-[2(pyridin—2—yl)ethenyl]—1 H-indazolu
Sloučenina z příkladu 59(e) byla připravena podobným způsobem, jako v příkladu 59(a) kromě toho, že sloučenina z příkladu 31 (d) byla použita namísto sloučeniny z příkladu 41 (a). *H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 13,53 (s, IH), 10,23 (s, IH), 8,78 (d, IH, J = 5,5 Hz), 8,30 (m, 4H), 7,80 (m, 2H), 7,59 (d, IH, J = 7,7 Hz), 7,55 (s, IH), 7,41 (t, IH, J = 8,1 Hz), 7,11 (s, 2H), 6,88 (d, IH, io J = 6,7 Hz), 6,81 (s, IH), 4,38 (q, 2H, J= 7,0 Hz), 3,75 (š s, IH), 2,19 (s, 3H), 1,29 (t, 3H,
J = 7,0 Hz). Anal. výpočet pro C27H25C1N6O2 * 1,7 H2O - 0,1 EtPAc: C, 60,89, H, 5,45, N, 15,55.
Změřeno: C, 60,88, H, 5,51,N, 15,27.
Příklad 59(f)
Hydrochlorid 6-[2-(methylkarbamoyl)fenylsulfanyl]-3-E-[2-(pyridin-2-yl)ethenyl]indazolu
Sloučenina z příkladu 59(f) byla připravena podobným způsobem, jako v příkladu 59(a) kromě 20 toho, že sloučenina z příkladu 33(a) byla použita namísto sloučeniny z příkladu 41 (a). Analyzováno s 2,0 H2O, vypočteno C, 57,58, H, 5,05, N, 12,21, Cl, 6,99. Změřeno: C, 57,24, H, 5,048,
N, 11,91: Cl, 6,63.
Příklady sloučenin popsaných výše mohou být testovány na aktivitu s použitím testů popsaných 25 níže.
Biologické testování: enzymové testy
Stimulace buněčné proliferace růstovými faktory, jako je například VFFG, FGF a další, závisí na 30 jejich indukci autofos fóry láce každého z jejich příslušných receptorů tyrozinkináz. Tudíž schopnost inhibitoru proteinkinázy blokovat autofosforylaci může být měřena inhibici peptidových substrátů. Pro měření proteinkinázové inhibiční aktivity sloučenin byly navrženy následující konstrukty.
Konstrukt VEGF-R2 pro test:
Tento konstrukt zjišťuje schopnost testované sloučeniny inhibovat aktivitu tyrozinkinázy. Konstrukt (VEGF-R2A50) cytosolové domény receptoru 2 humánního vaskulámího endotelového růstového faktoru (VEGF-R2) s chybějícími 50 centrálními zbytky ze 68 zbytků inzerční kinázo40 vé domény byl exprimován v systému bakulovirus/hmyzí buňky. Ze 1356 zbytků kompletního
-208CZ .501007 BĎ
VEGF-R2 obsahuje VEGF-R2A50 zbytky 806 až 939 a 990 až 1171» a také jednu budovou mutaci (E990V) v inzerční kinázové doméně relativně k VEGF-R2 divokého typu. Autofosforylace puntíkovaného konstruktu byla prováděna inkubací enzymu v koncentraci 4 μΜ v přítomnosti 3 mM ATP a 40mM MgClj ve lOOmM HEPES, pH 7,5, obsahujícím 5% glycerol a 5mM
DTT, ve 4 °C po dobu 2 hodin. Po autofosforylaci bylo ukázáno, že tento konstrukt má katalytickou aktivitu v podstatě totožnou s konstruktem obsahujícím autofosforylovanou kinázovou doménou divokého typu. (viz Parast et al., Biochemistry, 37,16788-16801, 1998).
Konstrukt FGF-R 1 pro test: io
Intracelulámí kinázová doména humánního FGF-R1 byla exprimována s použitím bakulovirového vektorového expresního systému počínaje endogenním methioninovým zbytek 456 ke glutamátu 766, podle systému číslování zbytků podle autorů Mohammadi et al. (Mol. Cell. Biol., 16, 977-989, 1996). Kromě toho konstrukt také má následující substituce 3 aminokyselin:
L457V, C488A a C584S.
Konstrukt LCK pro test:
LCK tyrozinkináza byla exprimována v hmyzích buňkách jako N-koncová delece počínaje aminokyselinovým zbytkem 223 ke konci proteinu ve zbytku 509, s následujícími substitucemi dvou aminokyselin v N-koncové Části: P233M a C224D.
Konstrukt CHK1 protest:
Kompletní humánní CHK1 (FL-CHK1) se značkou His na C-koncové části byl exprimován s použitím systému bakulovirus/hmyzí buňky. Obsahuje 6 histidinových zbytků (6 x značka His) v C-koncové části 476 aminokyselin humánního CHK1. Protein byl purifikován obvyklými chromatografickými technikami.
Konstrukt CDK2/cyklin A pro test:
CDK2 byl purifikován s použitím publikované metody (Rosenblatt et al„ J. Mol. Biol., 230, 1317-1319, 1993) z hmyzích buněk, které byly infikovány bakulovirovým expresním vektorem. Cyklin A byl purifikován z buněk E. Coli exprimuj ících kompletní rekombinantní cyklin A a zkrácený konstrukt s cyklinem A byl vytvořen limitovanou proteolýzou a purifikován, jak bylo popsáno dříve (Jeffrey et al., Nátuře, 376, 313-320,1995).
Konstrukt CDK4/cyklin D pro test:
Komplex humánního CDK4 a cyklinu D3 nebo komplex cyklinu Dl a fuzního proteinu humánního CDK4 a glutathion-S-transferázy (GST-CDK4), byl purifikován s použitím tradičních biochemických chromatografických technik z hmyzích buněk, které byly současně infikovány (koinfikovány) odpovídajícími bakulovirovými expresního vektory.
Konstrukt FAK pro test:
Katalytická doména humánního FAK (FAKcd409) byla exprimována s použitím bakulovirového vektorového expresního systému. Exprimovaná doména s 280 aminokyselinami obsahuje zbytky methionin 409 až glutamát 689. Existuje jedna aminokyselinová substituce (P410T) relativně k přístupovému číslu sekvence LI3616, publikováno autory Whithey, G. S. Et al. (DNA Cell Biol, 9, 823-30, 1993). Protein byl purifikován s použitím techniky klasické chromatografie.
-209CZ 301667 B6
Konstrukt TIE-2 (TEK) pro test:
Doména tyrozinkinázy TIE-2 byla exprimována v hmyzích buňkách jako N-koncová delece počínaje aminokyselinovým zbytkem 774 ke konci proteinu ve zbytku 1124. Tento konstrukt také nese mutaci R774M, která slouží jako iniciační methioninový zbytek při translaci.
TestVEGF-R2
Spřažený spektrofotometrický (FLVK-P) test
Produkce ADP z ATP, která doprovází transfer fosfátu byla spřažena s oxidací NADH využitím fosfoenolpyruvátu (PEP) a systému s pyruvátkinázou (PK) a laktátdehydrogenázou (LDH). Oxidace NADH byla monitorována poklesem absorbance při 340 nm (e340 = 6,22 cm-1 mM-1) s použitím spektrofotometru Beckman DO 650. Podmínky testu pro fosfory lovaný VEGF-R2A50 (označen jako FLVK-P v tabulkách uvedených níže) byly následující: lmM PEP, 250μΜ NADH, 50 jednotek LDH/ml, 20 jednotek PK/ml, 5mM DTT, 5,lmM poly(E4Y,), lmM ATP a 25 mM MgCl2 v 200 mM HEPES, pH 7,5. Podmínky testu pro nefosforylovaný VEGF-R2A50 (označen jako FLVK v tabulkách) byly následující: lmM PEP, 250μΜ NADH, 50 jednotek LDH/ml, 20 jednotek PK/ml, 5mM DTT, 20mM poly(E4Yi), 3mM ATP a 60mM MgCl2 a 2mM
MnCl2 ve 200mM HEPES, pH 7,5. Testy byly iniciovány s 5 až 40 nM enzymu. Hodnoty K, byly zjišťovány měřením enzymové aktivity v přítomnosti měnící se koncentrace testované sloučeniny. Data byla analyzována s použitím software Enzyme Kinetic a Kaleidagraph.
Test ELISA
Tvorba fosfogastrínu byla monitorována s použitím biotinylovaného peptidu gastrinu (1-17) jako substrátu, Biotinylovaný fosfogastrin byl imobilizován s použitím streptavidinem potažených 96 jamkových mikrotitračních destiček, pak následovala detekce s použitím protilátky antifosfotyrozin konjugované s křenovou peroxidázou. Aktivita křenové peroxidázy byla monitoro30 vána s použitím diamonné soli 2,2 -azinodi[3-ethylbenzathíazolinsulfonátu(6)] (ABTS). Typické roztoky testu obsahovaly: 2μΜ biotinylovaný peptid gastrin, 5mM DTT, 20μΜ ATP, 26mM MgCl2 a 2mM MnCl2 ve 200mM HEPES, pH 7,5. Test byl iniciován s 0,8 nM fosforylovaného VEGF-R2A50. Aktivita křenové peroxidázy byla testována s použitím lOmM ABTS. Reakce křenové peroxidázy byla zastavena přidáním kyseliny (H2SO4), pak následovalo odečítání absor35 bance ve 405 nm. Hodnoty Ki byly zjišťovány měřením enzymové aktivity v přítomnosti měnící se koncentrace testované sloučeniny. Data byla analyzována s použitím software Enzyme Kinetic a Kaleidagraph.
Test FGF-R
Spektrofotometrický test byl prováděn, jak bylo popsáno výše pro VEGF-R2, kromě následujících změn koncentrace: FGF-R = 50 nM, ATP = 2 mM a poly(E4Yl) = 15 mM.
Test LCK
Spektrofotometrický test byl prováděn, jak bylo popsáno výše pro VEGF-R2, kromě následujících změn koncentrace: LCK = 60 nM, MgCl2 = 0 mM, poly(E4Yl) = 20 mM.
TestCHKl
Produkce ADP z ATP, která doprovází přenos fosfátu na syntetický substrátový peptid Syntide-2 (PLARTLSVAGLPGKK) byla spřažena s oxidací NADH s použitím fosfoenolpyruvátu (PEP) prostřednictvím působení pyruvátkinázy (PK) a laktátdehydrogenázy (LDH). Oxidace NADH byla monitorována poklesem absorbance v 340 nm (e340 = 6,22 cm”1 mM-1) s použitím spektro55 fotometru HP8452. Typické roztoky testu obsahovaly: 4mM PEP, 0,15mM NADH, 28 jednotek
-210CZ JV1Ó07 BO
LDH/ml, 16 jednotek PK/ml, 3mM DTT, 0,125 mM Syntide-2, 0,15mM ATP, 25mM MgCl2 v 50mM TRIS, pH 7,5 a 400mM NaCl. Testy byly iniciovány s lOnM FL-CHK1. Hodnoty K, byly zjišťovány měřením počáteční enzymové aktivity v přítomnosti měnících se koncentrací testovaných sloučenin. Data byla analyzována s použitím software Enzyme Kinetic a Kaleidagraph.
Testy CDK2/cyklinu A a CDK4/cyklinu D
Kinázová aktivita závislá na cyklinu byla měřená kvantifikací enzymem katalyzované, na čase io závislé inkorporace radioaktivního fosfátu z [32P]ATP do rekombinantního fragmentu retinoblastomového proteinu. Není-li uvedeno jinak, byly testy prováděny na 96 jamkových destičkách v celkovém objemu 50 μί, v přítomnosti 10 mM HEPES (N-[2-hydroxyethyl]piperazin-N '—[2— ethansulfonová kyselina]) (pH7,4), lOmM MgCl2, 25μΜ adenosintrifosfátu (ATP), 1 mg/ml ovalbuminu, 5 μg/ml leupeptinu, ImM dithiothreitolu, lOmM β-glycerofosfátu, 0,1 mM vanadič15 nanu sodného, ImM fluoridu sodného, 2,5mM ethyienglykol-bis((3-aminoethylether)_N,N,N',N-tetraoctové kyseliny (EGTA), 2% (objem/objem) dimethylsulfoxidu a 0,03 až 0,2pCi [32P]ATP. Substrát (0,3-0,5 pg) byl purifikovaný fragment rekombinantního retinoblastomového proteinu (Rb) (zbytky 386-928 nativního retinoblastomového proteinu, 62,3 kD, obsahující většinu fosforylačních míst zjištěných v nativním proteinu o velikosti 106 kD, a také značku šesti histidinových zbytků pro snadnou purifikaci). Reakce byly iniciovány sCDK2 (150 nM komplexu CDK2/cyklin A) nebo CDK4 (50 nM komplexu CDK4/cyklin D3), inkubovány ve 30 °C a ukončeny po 20 minutách přidáním ethylendiamintetraoctové kyseliny (EDTA) do koncentrace 250 mM. Fosforylovaný substrát pak byl zachycen na nitrocelulózové membráně s použitím filtračního zařízení pro 96jamkové destičky a neinkorporovaná radioaktivita byla odstraněna opakovaným promytím 0,85% kyselinou fosforečnou. Radioaktivita byla kvantifikována expozicí suché nitrocelulózové membrány pomocí zobrazovacího zařízení Phosphoimager. Zjevné hodnoty Kj byly měřeny testováním enzymové aktivity v přítomností různých koncentrací sloučeniny a odečtením radioaktivity pozadí měřené bez enzymu. Kinetické parametry (kcat, Km pro ATP) byly měřeny pro každý enzym v obvyklých testovacích podmínkách určením závislosti počátečních rychlostí na koncentraci ATP. Data byla proložena závislostí pro kompetitivní inhibicí s použitím software Kaleidagraph (Synergy Software) nebo byla proložena závislostí pro kompetitivní inhibicí $ těsnou vazbou použitím software KíneTic (BioKin, Ltd.). Změřené hodnoty Kj pro známé inhibitory CDK4 a CDK2 souhlasily s publikovanými hodnotami IC50. Specifická aktivita CDK4 byla stejná, ať v komplexu s konstruktem kompletního cyklinu D3 nebo zkráceného cyklinu D3, oba komplexy také poskytly velmi podobné hodnoty Kj pro vybrané inhibitory.
Test FAK
Pro FAK HTS byl použit test fluorescenční polarizace poskytnutý firmou LJL Biosystems. Kinázová reakce obsahovala: lOOmM Hepes pH 7,5, lOmM MgCl2, ImM DTT, ImM ATP a 1 mg/ml póly Glu-Tyr (4:1). Reakce byla iniciována přidáním 5nM FAKcd409. Reakce byla ukončena přidáním EDTA, pak následovalo přidání peptidů značeného fluorem a anti-fosfotyrozinové protilátky, poskytnuto firmou LJL Biosystémy. Výsledky inhíbice byly odečítány na detektoru Analyst (LJL).
Spektrofotometrický test TIE-2
Kinázou katalyzovaná produkce ADP z ATP, která doprovází přenos fosfátu na náhodný so kopolymer poly(Glu4Tyr) byla spřažena s oxidací NADH s použitím aktivity pyruvátkinázy (PK) a laktátdehydrogenázy (LDH). NADH konverze na NAD+ byla monitorována poklesem v absorbance ve 340 nm (ε = 6,22 cm“ mM'1) s použitím spektrofotometru Beckman DU650. Typické reakční roztoky obsahovaly ImM fosfoenolpyruvát, 0,24mM NADH, 40mMM MgCL, 5mM
DTT, 2,9 mg/ml polyíGhuTyr), 0,5mM ATP, 15 jednotek/ml PK, 15 jednotek/ml LDH ve
-211 CZ 301667 B6 lOOmM HEPES, pH 7,5. Testy byly iniciovány přidáním 4 až 12 nM fosforylované Tie-2 (aa 775 až 1122). Procento inhibice bylo zjišťováno v trojím opakováním pri 1,M hladině inhibitoru.
Test TIE-2 DELFIA
Tvorba fosfotyrozinu byla monitorována s použitím biotinylovaného p34cdc2 (aa 6 až 20 = KVEKIGEGTYGVVYK) peptidů jako substrátu. Biotinylovaný peptid byl imobilizován s použitím NeutrAvidinem™ potažených 96 jamkových mikrotitračních destiček, pak následovala io detekce s použitím protilátky anti-fosfotyrozin (PY20) konjugované seuropium Nl chelátem.
Typické roztoky pro test obsahovaly: ΙμΜ biotinylovaný peptid p34cdc2, 150μΜ ATP, 5mM
MgCl2, ImM DTT, 0,01% BSA, 5% glycerol, 2% DMSO, 25mM HEPES, pH 7,5. Test byl iniciován na destičce NeutrAvidin s 50nM intracelulámí domény TIE2. Kinázová reakce byla ukončena 50mM EDTA. Destičky pak byly promyty a byla přidána protilátka s europiem. Po ís inkubaci byly destičky opět promyty a byl přidán zesilovací roztok DELFIA™. Destičky byly odečítány ve standardním nastavení pro detekci europia (ex 340 nm, em 615 nm, zpoždění
400 μβεο, okno 400 psec). Procento inhibice bylo vypočteno s použitím referenčních jamek na destičce, do kterých bylo přidáno DMSO a ne sloučenina v DMSO, a pozadí bylo odečteno od experimentálních i kontrolních jamek se vztahem k referenčním jamkám na destičce, do kterých byla přidána EDTA před přidáním enzymu.
Test proliferace buněk HUVEC
Tento test určoval schopnost testované sloučeniny inhibovat růstovými faktory stimulovanou 25 proliferací endotelových buněk lidské umbilikální žíly („HUVEC“). HUVEC buňky (pasáž 3-4,
Clonetics, Corp.) byly rozmraženy do kultivačního média EGM2 (Clonetics Corp) v lahvích T75.
O 24 hodin později bylo do lahví přidáno čerstvé médium EGM2. Čtyři nebo pět dnů později byly buňky vystaveny dalšímu kultivačnímu médiu (médium FI2K doplněné 10% fetálním bovinním sérem (FBS), 60 pg/ml růstovým doplňkem pro endotelové buňky (ECGS) a 0,1 mg/ml heparínu). Exponenciálně narůstající buňky HUVEC potom byly použity v experimentech. Deset až dvanáct tisíc buněk HUVEC bylo naneseno na 96 jamkové destičky ve 100 μΐ bohatého kultivačního média (popsaného výše). Buňky byly ponechány přichytit se po dobu 24 hodin v tomto médiu. Médium pak bylo odstraněno odsátím a do každé jamky bylo přidáno 105 μΐ deficitního („hladovění“) média (F12K+1% FBS), Po 24 hodinách bylo přidáno 15 μΐ testovaného činidla rozpuštěného v 1% DMSO v deficitním médiu nebo v tomto vehikulu samotném ke každé ošetřené jamce, konečná DMSO koncentrace byla 0,1 %. Jednu hodinu později bylo přidáno 30 μΐ VEGF (30 ng/ml) v deficitním médiu do všech jamek, kromě těch, co obsahovaly neošetřené kontroly, konečná VEGF koncentrace byla 6 ng/ml. Buněčná proliferace byla kvantifikována 72 hodin později redukcí barviva MTT, v tomto okamžiku byly buňky exponovány po dobu
4 hodin MTT (Promega Corp.). Redukce barviva byla zastavena přidáním zastavovacího roztoku (Promega Corp.) a byla zjišťována absorbance v 595 λ na spektrofotometrickém čtecím zařízení pro 96 jamkové destičky.
Hodnoty IC;o byly vypočteny prokládáním křivky reakce A595 na různé koncentrace testovaného činidla, typicky bylo použito sedm koncentrací odstupňovaných po 0,5 log, s trojím opakováním jamek v každé koncentraci. Pro screening destiček s knihovnou sloučenin byla použita jedna nebo dvě koncentrace (jedna jamka na koncentraci) a % inhibice bylo vypočteno z následujícího vzorce:
% inhibice = (kontrola - test) = (kontrola - hladovění) kde
Kontrola = A595, když je VEGF přítomný bez testovaného činidla
-212LZ JU100/ BO
Test = A595, když je VEGF přítomný s testovaným činidlem
Hladovění = A595, když chybí VEGF i testované činidlo.
Test proliferace buněk karcinomu (MV522)
Protokol pro stanovení buněčné proliferace v karcínomových buňkách je podobný testu použitému pro hodnocení HUVEC buněk. Dva tisíce buněk plicního karcinomu (linie MV522, získaná od American Tissue Cultural Collection) bylo nasazeno do růstového média (médium RPMÍ 1640 doplněné 2mM glutaminem a 10% FBS), Buňky byly ponechány přichytit se po dobu 1 dne před přidáním testovaných činidel a/nebo vehikul. Buňky byly ošetřeny současně stejnými testovanými činidly použitými v HUVEC testu. Buněčná proliferace byla kvantifikována redukčním testem barviva MTT 72 hodin po expozici testovaným činidlům. Celková délka testu je 4 dny proti 5 dnům pro buňky HUVEC, protože MV522 buňky nebyly vystaveny deficitnímu médiu (hladovění).
Test PK na myších
Farmakokinetika (např. absorpce a eliminace) léků v myších byla analyzována s použitím následujícího experimentu. Testované sloučeniny byly formulovány jako roztok nebo suspenze v 30:70 (PEG 400: acidifikován H2O) vehikulu nebo jako suspenze v 0,5% CMC. Toto bylo podáváno perorálně (p.o.) a intraperitoneálně (i.p.) ve variabilních dávkách dvěma různým skupinám (n = 4) samic myší B6. Krevní vzorky byly odebírány z orbitální vény v časových bodech: 0 hodin (před dávkou), 0,5 hodiny, 1,0 hodina, 2,0 hodiny a 4,0 hodiny a 7,0 hodin po dávce. Plazma byla získána z každého vzorku centrifugací v 2500 rpm po dobu 5 minut. Testovaná sloučenina byla extrahována z plazmy metodou organické precipítace proteinu. Pro každý časový odběr bylo 50 μΐ plazmy smícháno s 1,0 ml acetonítrilu, vortexováno (prudce třepáno na mikrotřepačce) po dobu 2 minut, a pak stočeno ve 4000 rpm po dobu 15 minut, aby se protein precipítoval a extrahoval od testované sloučeniny. Potom byl acetonitrilový supernatant (extrakt obsahující testovanou sloučeninu) nalit do nových testovacích zkumavek a evaporován na horké destičce (25 °C) ve výparech plynu N2. Do každé zkumavky obsahující usušený extrakt testované sloučeniny bylo přidáno 125 μΐ mobilní fáze (60:40, 0,025M NH4H2PO4 + 2,5 ml/1 TEA:acetonitril). Testovaná sloučenina byla resuspendována v mobilní fázi vortexováním a další protein byl odstraněn centrifugací ve 4000 rpm po dobu 5 minut.Každý vzorek byl nalit do HPLC lahvičky pro analýzu testované sloučeniny na přístroji „Hewlett Packard 1100 series HPLC“ s UV detekcí. Z každého vzorku bylo 95 μΐ injikováno na kolonu Fenomenex-Prodigy s reverzní fází C-18, 150 x 3,2 mm, a bylo eluováno gradientem 45 až 50% acetonítrilu po dobu 10 minut. Plazmatické koncentrace testované sloučeniny (pg/ml) byly zjišťovány ve srovnání se standardní křivkou (oblast vrcholu proti koncentraci v pg/ml) s použitím známých koncentrací testované sloučeniny extrahované z plazmatických vzorků způsobem popsaným výše. Spolu se standardy a neznámými byly testovány tři skupiny (n = 4) kontroly kvality (0,25 pg/ml, 1,5 pg/ml, a 7,5 pg/ml), aby se zajistila konzistentnost analýz. Standardní křivka měla R2>0,99 a kontroly kvality byly všechny v 10 % očekávaných hodnot. Kvantifikované testované vzorky byly vynese45 ny do grafu pro vizální zobrazení s použitím software Kalidagraph a jejich farmakokinetické parametry byly zjišťovány s použitím software WIN NONLIN. Příklad l(a) poskytl následující výsledky: 0,69 (myší pK, AUC, íp, pg-h/ml), 0,33 (myší pK, AUC, po, pg-h/ml.
Test mikrozómů lidských játrech (HLM)
Metabolismus sloučenin v mikrozómech lidských jater byl měřen postupy analytického testu
LC-MS následovně. Nejdříve mikrozómy lidských jater (HLM) byly rozmraženy a naředěný na mg/ml chladným pufrem, lOOmM fosfátem draselným (KPO4), Vhodná množství KPO4 pufru,
NADPH regeneračního roztoku (obsahujícího B-NADP, glukózo-6-fosfát, glukózo-6-fosfát-213CZ 301667 B6 dehydrogenázu a MgCl2) a HLM byla preinkubována ve skleněných zkumavkách 13 x 100 mm ve 37 °C po dobu 10 minut (3 zkumavky na testovanou sloučeninu - trojí opakování). Testovaná sloučenina (konečná koncentrace 5 μΜ) byla přidána do každé zkumavky, aby se zahájila reakce a byla míchána mírným vortexováním, následovala inkubace ve 37 °C. V časových bodech t = 0,2 hodiny, byl z každé inkubační zkumavky odstraněn vzorek 250 μί do samostatné skleněné zkumavky 12 x 75 mm obsahující 1 ml ledově chladného acetonitrilu s 0,05μΜ reserpinem. Vzorky byly stočeny ve 4000 rpm po dobu 20 minut, aby se precipítovaly proteiny a sůl (Beckman Allegra 6KR, S/N ALK98D06, #634). Supematant byl přenesen do nových skleněných zkumavek 12 x 75 mm a evaporován na centrifugační vakuové odparce Speed-Vac. Vzorky io byly rekonstituovány ve 200 μί směsi 0,1% mravenčí kyseliny a acetonitrilu (90/10) a vortexovány důkladně do rozpuštění. Vzorky byly pak přeneseny do samostatných polypropylenových mikrocentrifugačních zkumavek a stočeny ve 14000 x g po dobu 10 minut (Fisher Micro 14, S/N M0017580). Pro každý replikát (Č. 1 až 3) v každém časovém bodu (0 a 2 hodiny) byl alikvot vzorku každé testované sloučeniny spojen do jedné HPLC viálky (6 celkových vzorků) pro t5 analýzu LC-MS, kteráje popsána níže.
Vzorky spojených sloučenin byly injikovány do systému LC-MS, složeného z HPLC Hewlett-Packard HP 1100 s diodovým čidlem a hmotnostního spektrometru Micromass Quattro Π triple quadruple pracujícího v modu pozitivního elektrospreje SIR (programovaného tak, aby skenoval specificky molekulární ion každé testované sloučeniny). Vrchol křivky pro každou testovanou sloučeninu byl integrován v každém časovém bodě. Pro každou sloučeninu byla oblast vrcholu v každém časovém bodě (n = 3) zprůměrována a tato průměrná hodnota plochy vrcholu ve 2 hodinách byla dělena průměrnou plochou vrcholu v čase 0 hodin, aby se získalo procento testované sloučeniny zůstávající ve 2 hodinách,
Výsledky testování sloučenin s použitím různých testů jsou shrnuty v tabulce níže, kde označení „% ukazuje procento inhibice v uvedené koncentraci, hodnoty představují Ki (nM) nebo % inhibice při koncentraci sloučeniny 1 μΜ pro * nebo 50 nM pro **, není-li uvedeno jinak. „NI“ označuje nevýznamnou inhibici.
-214CL bVlWt DD
Tabulka 1
př.č. FLVK w FLVK -P** Lek- P* CHK -1* FGF- P* CDK2 a CDK4 i * HUVEC l eso <nM) ; HUVEC l + album! nICSG (nM) MV522 1C50 i (UM) i % zbytku HUVt íhod)
2(b) 300 425 549 228 μΜ 2 200 8 000
50 μΜ 26 μΜ
i(a) 0,3 2 88 52 27 19 13 54 0.35 98
3 6,6 65 37% 4Í 112 16 23 930 2^
8<a) 3,2 23 43% 530 42 >100 μΜ >100 μΜ >1000 >10
8(b) 72 12% eso UM
2(d) 3.7 43% 91 68 53 53 450 0.18
1fc) M 4,7 46% 78 560 670 >1000 >10
2(a) 40 61% 020 μΜ 610 1600 >1000 0,58
1(b) 22 4000 1300 >1000 >10
8(c) 2,6 16 34% >10 000 >100 μΜ >100 μΜ 280 >10
•W 2,4 16 162 400 1700 870 >10
9{b) 24 448
2{a) 40 5% a 20 μΜ
10 9 9100 >700 >10
20« 29 12,7 200 9,4 52
20(b) 11® 8 23% 28% 8,2 Ca.10
14 15 12% 0 25 μΜ
7 18 1300
17 11 532
8(d) 11 82000
4{a) 0.65 1,4 , NI 15.4 NI 19% 3 30 6.3 35
23 1,5 2,1 12% NI 14% NI 17% 9,5 106 5,7 74
21 4,6 >700
11 12 34.000
22(b) 0,63 1,2 21.5 4,8 8,5
22(a) 0r22 Oí 12 >10
22fc) 0,64 38
4<b) 2,7 1,9 13% ® 1 μΜ 4.9 25 205 3,2 63
12(a) 1,8 6£ 17% 19 6 87 .2J 59
-215CZ 301667 B6
12(b) 0,48 1,9 32% 31 4,8 44 >10 29
18 12,5
19(b) 0,49 6,6 58% NI 60% NI 11% 2,9 27 4,3 137
19(a) 13,8 6,8 15% 01 μΜ 92% 44
5,9 50% 68% 17
12(C) 1.6
19{d) 0,72 33% 39% 6.8 34 >10 36 ,
5{a) 0ř03 28% 10,4 12 9,6
12(6) 039 31% 61% 8,1 >10 51
13 1.3 61% 74% 3,9 28 >10 69
15 15
SES1EE3 28% NI 65% NI NI 4,5 112 8 r
(6(a) 0,74 33% 67% 8,5 50 3,5 69’
|5íb) 0,9 78% 14 V 33 8,5
ΙΕΕ01ΕΞ1 22% 73% 4,7 140 >10 50
W 1,1 100- 1000 >10
16(6) 0,43 11 >10
1φ) 1,3 8% 59% 106 >10 40
6(b) 0,15 81% 95% 8 60 4 128
16(0 2,8 >30 >10
19(a) 20 >300
30(a) LL 45% 94% 1,6 22 5,7 64
19(f) 0,18 52% 58% 2,3 16 3,9 98
46 3,5
19(3)
30ffiL 90
19(0) 0,86 19% 59% 13 1920 90
30(c) 0,83 44% 82% 2,5 21 54
19(h) 5,9 600 7,9
44 >700
38(a) 0,22 77% 74% 4,5- 20 10,7 72
lEoiEsa 79% 1,9 11,5 4,4 97
lEESIEEa 3,1 ca. 15 3^ 97
19(1) 4,7 >300
42(a)| 0,046 79% 53 65 0.8 8 5,5 92
ΙΕ2Θ] 72% 79
1?ffl 0,33 23% 44% 2,2 50 >10 66
42(6) 0,35 75% 27% JLL 29 2,1 81
4ML 100% 37% 41% 2,6 28 4 58
33ffil 0,66 76% 63% 77% 0,3 11,5 15 45
25 u 6,6
IM. 0,72 36% 88% 1&8 100 3,8
-216LZ, JU1OO7 BO
0,68 35% 23% 94 >10 61
33(a) 3,8 42% 9% 0 56 2% 7% 2£. 2,7 >10 29
18(n) 0,54 48% 3,4 23 2.9
33(c) 0,28 76% 6,6 >10 16
33{<J) 0,14 55% 24 >300 8 22
40(a) 17,9
4i(ai) 0,11 49% 37% 1 >10 100
0,26 24% 31% 2 9,8 >10 80
42(e) 1,1 95
42{<l) 1,7 44 >10
43 2,8 56% 24 2
19(o) 89% 20
UlfflltJWílEESESI 77% 0,4 5,3 68
ItilfilliLil MH 0,9 8,4
0 20 0 6% 0,48 4,4 >10 96
lEuraina
41(e) 0,22 21% 31% 0,15 Μ. 6>1 22
41(1) 0,11 64% 65% 0,45 20 59
CHHIEDI 36% 95% 0,9 >10 52
EM&llÍSa 3,8
EZOlEEa 63% 92% 29
33(«) 1,7 70% 2% 68% 0,48 5 >10 54
33(1, β 17 31
41(h) 90% 2 25 8
47 025
IEIG1E2] |77%*| 0,7 10 58
ΕΠΰΙΕΕΣΙ 76% 0,25 3,3 48
K&fflNnXS 2,8 27
32(8) <0,1 86%* 0,16 4,5 2
41{k) 2,95 20% |49% 48
41(1) 0,24 63%* 386
41(m) 0,75 40% 67% 23 0
41(n) 0,2 66%· 87% 28 70
66% 97% 5,8 2
41{o) 0,05 77% 74% 10 94
31{c) <0,1 81% 98% 87
3X9S) 23% >100
33(g) 15%
34 97% 78% 95% 15 28
50
35{V) 72% 11% 59% 22 i?d
-217CZ 301667 B6
35(w) 59% 35
35(X) 75% 2 37
35{a) 76% 12% 59% 2,1 33_
35(b) 49% 12% 59% 35
35{C) 76% 11% 42% 6,3 17
41(p) 0,06 49% 0 90 6% 3% 0,27 2,6 >10 62
42(C) 95% 1 to3
4,(<W) 98% 50% 69% 5,8 7
41(fcb) 99% 76% 88% 1ito 3 110
35(y) 99% 29% 82% 1to3 7
35<d) 76% >100
31 (d) 96% 52% 0 14 5% 9% ca. 13 5,2 110
41(q) 100% 53% 91% qf
35(e) 99% 56% 69% 4,8 >10 34
35(f) 100% 8 15
35(g) 100% ca. 15 53
35(h) 100% 3,6 9
35(1} 100% V
1,5 5
35(1() 85% 6% 0 34% 8% 7% 2,2 >10 14
41(M) 0;13 13% 0 94% 0 2% 0,24 4,3. 2,7 9,4 47
35® 95% 7,1 2
5 15
41(r) 100 % 55% 0 92% 0 5% 11 83
41(ee) 97% 41% 95% >100
35(1) 90% 12
35{«e) 89% 1S% 0 74% 5% 6% 0,05 1,6 31
35(«) 82% 3 13
3500 0,11 25% 75% 5,8 31
35(dd) 0,0 17% 0 75 7% 8% 0,1B 2,9 >10 26
350Λ) 87% 4,1 8
32(b) 0,08 70% 95% 21 >10
35(hh) 100% 34% 73% 7
35(m) 0,04 61% 82% 35
48(a) 0,37 13% 0 14 0 0 8,3 55
39(a) 53% ca. 50 70
35(n) 0,83 ώ% 23% 92 4% 10% 0,11 11 5,1 47
41(s) 0,23 53% 86%
-218CL JUIOO/ BO
35(0) 39% 17% 44% >100
41(t) 0,06 51% 0 85% 1% 2% 3,8 87
32(C) 0,27 52% 96% >30
36(b) 85% 22% 43% >30
37(d) 26% 10% 38% >100
37(C) 83% 12% 39% 12 21
37(b) 48% 8% 36% 30- 100
59{a)
41(u) 0,08 54% 74%
41(hři) 98% 13% 74% 3,9 72
36(c) 89% 28% 60% >30
EM011&3 19% 38% 19 58
5% 11% >30
ΕΞέϊΙΕΞΕί 42% 51% 18
CMúit^a 92%
nroicsa 15% 12 5,6 68
fchOlLziJ 6% 35% 15 21
41(V) 68% * 52% 68% 12
41(11) 57% 11 13 85
3S(r) 0,11 16% 20 0,36 2,3 >10 51
35{S) 60% • 18% 64% 4,8 16
35(t) 59% 12% 63% 4 7
41(11) 95% 14% 91% 23
41(w) 97% 49% 67% ca. 10
41« 98% M 4,6 100
4i(n«n) 93% 6% 46% 1,3 14,4 94
41(11) 87% 19% 81% 21
4i(y) 98% 61% 86% 30' 100
31« 0,02 43% 62% 6,2 8,6 49
40(c) 24% 28% 59%
41(M) 84% 27% 3,5 9,5 50
4i(nn) 57% 7% 91% >100
GB51EÍS 16% 41% 7,7
Iesieei 6% 77% ca. 8
41(2) 100% 54% 74% 7,5
41(W0 100% 26% 97% 16 63
39(b) 10% 50% >10 67
31(1} 97% 62% 99% >10
-219CZ 301667 B6
49(a) 0.04 11% 79 ca. 4 8,4
159ÍC1
9% 80% ca, 10
5$ 5%
35(11) 44%
59(d)
57 100% 30% 89%
[«Ξ 98% 19% 98% I
Tabulka 2
Pfíkt. č. CDK2* CĎK4* CHK1* FLVK-P* Lek* FGF* HCT-116 IC50 (UM)
24(a) 0,017 0,0051 0,028 0,0983 67% 72% 0,23
24<b) 0,021 0,0032 0,02 0,0331 96% 88% 0,37
24(C) 0,0034 0,0015 0,044 0,0142 93% 89% 0,44
24(m) 17% 16% NI © 20 μΜ
240) 0,086 0,071 62% β 20 μΜ 3,8
24(d) 0,083 0,017 0,056 0,125 51% 66% 0,023
24(6) 0,03 0,0044 75% 52% 0,15
24(f) 0,0072 0,0074 97% 89% 1,5
24(g) 0,13 0,029 1,87 1 0,194 > 5
24(0) 0,029 0,2 2,2
24(h) 0,054 0,053 3,6
240) 0,055 0,013 1,7
24ffl 2,1 0,32
24(k) 0,056 0,0072 81% 89% 0,16 0,2
25(a) 0,08 0,021 49% 44% 62% 0,051
24(n) 0,035 0,019 1,5
25(0 0,112 0,048 83% 87% 87% 2,1
25(c) 0,233 0,0155 90% 96% 0,25
25(0 0,16 0,098 87% 60% 80%
25(e) 0,477 0,181 16% 13% 26%
25(f) 0,39 1 Ňl 58% 56% 0,098
25(g) 0,08 0,021 21% 76% 82% 2
25(0 i 0,17 0,024 86% I 87 91 0,32
-220VZ, JU1UV f DO
25(1) 0,021 0,02 >5
24<p) 0,089 0,092 0,44
25® 0,079 0,016 70 0,0083
* hodnoty představují Ki (μΜΪ nebo % inhibice při koncentraci sloučeniny 1 μΜ, neni-li uvedeno jinak. NI označuje nevýznamnou inhibici
Tabulka 3
Přiklad č. CHK-1* CDK1* CDK2’ CDK4* FLVK*
28<d) 0,018 93% 66% 87%
27® 15% β 50uM
27(a) 0,198 NI 9 1 μΜ NI O 100 μΜ 28%O5 μΜ 71%
27®) 28% O 50 μΜ
28(a) 0,108 77% 75% 79% 84%
27{c) 11% O 5 μΜ
28{b) 0,0143 97% 98% 96%
27(0) 14% O 10 μΜ
27(e) 0,757 34%
27(0 0,227 85% 73% 92%
27(0 0,35 0,223 3,3 0,78 49%
27(h) 0,311 84%
27(k) 24
28(0 1,14 34%
27(9) 0,85
S2(b) 0,08 0,041 0,241 0,117 94%
-221 CZ 301667 B6
55 10
52<a) 0,263 39% 60%
53(a) 0,301 24 13% © 5 μΜ 28% θ 5 μΜ
29(b) 0,138 °A 3 3,9
29(a) NI © 25μΜ
29(c) 0,174 56% 2
29(d) 10
29<e) 0,074 0,593 1,4 2 33%
29(0 0,418
51 0,007 0,146 64% 79%
29(0 0,072 0,066 1,3 .. 1,1..
29(9) 0,068 0,39 1,4 . ι«1.
29{h) 0,14 1,3 3 22
54(d) 0,68 NI © 1μΜ
54<b) 3,1
29(0 0,104 26% 3,1 5
53(<J) NI © 100 μΜ
54(e) 0,342 ΝΙΟΙμΜ
54(a) 0,396 1%
53(c) 1,1
29® 0,533 31%
29(9) ίΐ 11%
29(p) 0,232 6%
53(b) Μ
29flt) 1,3
54® 2,9
54(C) 0,125 ΝΙ
S4{gj 0,195 3%
29(o) 46
53(e) 0,886 13%
29(0 1,4 7%
29(n) 16
-222VA JU1UU/ uu
29(m) 1 54%
53(0 7,3
54{h) 1
29(S) 11
54© 0,424
54© 0,461
29(0 0,072
29(u) 0,151
53(0) 1,5 l
54(0 0,99
54(k)
* hodnoty představují Ki (μΜ) nebo % inhibice pri koncentraci sloučeniny 1 μΜ, není-li uvedenojinak. NI označuje nevýznamnou inhibici
Příklad knihovny I
Xi v tabulce 1 lť—«yt -►
Tri stavební bloky knihovny („aminové templáty“) 6-(3-aminofenoxy)-3-E-styryl-l H-indazol (Y=O), 6-{3-aminobenzoyl)-3-E-styryl-l H-indazol (Y = CO) a 6-(3-aminofenyl)amino-3-Eio styry 1-1 H-indazol (Y = NH) byly připraveny, jak bylo popsáno v příkladu 7, příkladu 18 a příkladu 46, vdaném pořadí. O,1M roztoky kyselin, aminového tempiátu, o-(7-azabenzotriazol-l-yl)-N,Ν,Ν\N'-tetra-rnethyluroňiumhexafluorfosfátu a triethylaminu byly připraveny odděleně v bezvodém DMF. Do každé zkumavky v seskupení 8x11 kultivačních zkumavek (10x75 mm) bylo přidáno 105 pL (0,0105 mmol) odlišné kyseliny. Ktomu bylo přidáno 100 μΙ 15 (0,01 mmol) roztoku aminu, 105 μΐ (0,0105 mmol) roztoku triethylaminu, následováno 105 μΐ (0,0105 mmol) roztoku o-(7-azabenzotriazol-l-yl)-N,N,N',N'~tetra-methyluroniumhexafluorfosfátu. Reakce byly míchány ve vyhřívaném bloku v 50 °C po dobu 3 hodin. Reakční směsi byly přeneseny na 1 ml 96 jamkové destičky s použitím multipipety. Rozpouštědla byla odstraněna s použitím přístroje SpeedVac™ a hrubé reakční směsi byly opět rozpuštěny v DMSO za vzniku konečné teoretické koncentrace í 0 mM.
Sloučeniny v tabulce byly testovány na inhibici proliferace HUVEC v nominální koncentraci 10 nM a výsledky jsou uvedeny v tabulce I níže, vypočtené ze vzorce:
% inhibice = (kontrola - ošetřeno)/(kontrola - hladovění) x 100
V těchto testovacích podmínkách je >50% inhibice povazována za významnou.
-223 CZ 301667 B6
Tabulka knihovny I
R*
Υ» Υ·Ο Y. CO NH
134 127 135
124 145 118
Hfi-. H,C 128 94 115
R* Y= YsOYb CO NH
134 138 112
3 56 111
30 91 109
cr 101 157 105
-224Ví- *rviwr >-·«
/X' -62 5 105
H G«. 108 115 104
H,c<*s“-’x' 124 147 103
125 124 103
158 131 101
CH, 142 101 98
A 137 137 95
131 68 94
4- 58 68 94
75 78 87
w-Λ* n-Ν H 113 150 86
72 87 85
Gs^x, 128 92 81
Ou h3c'° 113 30 80
(? 51 35 79
w 125 122 78
87 80 77
H.C 26 52 76
99 52 75
-225
ά 54 85 71
F 80 91 64
71 52 60
>ζΧ-Λ 21 76 43
CC F 81 93 40
HA^Os^X, 87 86 34
PV 25 70 32
2 52 30
24 96 30
Hjr°>Qz%xX 35 64 30
-, 37 48 30
v<r 57 70 29
CH, 52 42 27
VyyX, CH, OH 47 69 25
51 71 25
«.ty, CH, 35 57 24
σ 18 51 23*
ΟγΧ. 45 57 23
19 22 20
H w 32 32 20
-226CZ 301667 B6
10 24 20
HS 24 45 19
-13 13 17
γ· <36 -3 17
Η,Ο***---*^*1 -2 25 17
Xx, Η,<τγ 3 24 16
T 5 25 16
-1 30 15
•ť' 33 42 13
3 36 13
X 0 14 90 12
crf -37 25 11
81 64 11
«Ao X 47 17 10
XA ’ OH 27 30 10
AS 4r 5 23 7
H 21 40 7
HjC-ťY*1 O-N 50 112 6
-227CZ 301667 B6
96 134 6
42 13 6
Η0Χ -20 25 6
$5^ 44 82 5
ÓH 33 32 3
0 4 2
20 43 0
φπ. CT 8 23 0
Η,οΑ/Ογ*1 CH, 28 80 Ί
ČT 10 19 -2
σ' 12 40 -3
3 46 •3
& 39 *4
ογ*, <r 37 20 -5
-11 52 -7
10 59 -7
0 27 48 -8
γ 64 83 -8
°γ”Λ CRjC 35 42 -9
Η 27 52 -9
228
31 20 -17
56 17 -17
JL -20 18 -18
η,ο'0
64 38 -20
Příklad knihovny II
FENU
DMF,BaN24h
6-[2-(pentafluorfenoxykarbonyl)fenylsulfanyI]-3-E-[2-(pyridin-2-yl)ethenyl]-lH-indazol (Y - S) byl připraven, jak bylo popsáno v příkladu 35(a), 1,5μιηο1 roztoky 261 aminů a 0,1393 μΐ (1,0 μηιοί) Et3N, rozpuštěné v 15 μΐ DMF, byly rozděleny do jamek 96 jamkové destičky. V případech, kde byl amin použit jako hydrochlorid, bylo přidáno dalších 0,4179 μΐ (3,0 μηιοί) Et3N k uvolnění volné báze. Každá jamka byla podrobena působení roztoku 0,5395 mg (Ι,ΟμπιοΙ) pentafluorfenylesteru (rozpuštěného ve 30 μΐ DMF, a pak byla destička třepána po dobu 24 hodin při teplotě místnosti. Surové reakční směsi byly koncentrovány s použitím přístroje GeneVac™, a pak naředěny DMSO na konečnou koncentraci 10 mM,
(b) když Y = NH ve vzorci I
R-NH
DMF.EtoN.
HA7U24ft
2,0μπιο1 roztoků 263 aminů a 0,4181 μΐ (3,0 μπιοΙ) Et3N bylo rozpuštěno ve 20 μΐ DMF a rozděleno do jamek 96 jamkové destičky. V případech, kde byl amin použit jako hydrochlorid, bylo přidáno dalších 0,5575 μΐ (4,0 μηιοί) Et3N k uvolnění volné báze. Každá jamka byla podro20 bena působení roztoku 0,447 mg (0,75 μηιοί) 6-[2-karboxyfenylamino]-3-E-[2-(pyridin-2-yl)ethenyl]—1 H-indazolu rozpuštěného ve 20 μΐ DMF, následováno 0,570 mg (1,5 μηιοί) roztoku
HATU rozpuštěného v 10 ul DMF, a pak byla destička třepána po dobu 72 hodin při teplotě míst-229CZ 301667 B6 nosti. Hrubé reakční směsi byly koncentrovány s použitím přístroje GeneVac™, a pak nareděny
DMSO na konečnou koncentraci 10 mM.
Sloučeniny v tabulce byly testovány na inhibicí proliferace HUVEC v nominální koncentraci 0,5 5 a 2 nM pro Y = S a výsledky jsou uvedeny níže, jak byly vypočteny ze vzorce:
% inhíbice = (kontrola-ošetřeno)/(kontrola-hladovění) x 100 V těchto testovacích podmínkách je >50% inhíbice považována za významnou.
Tabulka knihovny II
R1 0.5 nM 2nM
19 89
Z 38 2
37 16
<> 39 15
h^-^ch, 35 10
k 32 31
7° 5 14
14 55
23 44
230
CZ 301667 Bó
%-OH xf 4 20
p-CH, X? 21 60
34 61
z° 23 23
HA? xf 1 26 37
^,7' / 2 6
32 24
9 r-r° xf OH 32 6
HO-N xf 46 8
45 88
p Htr\4 xT^ 17 4
CH, xf 8 21
Xí 15 27
H<rV\ O* 22 I 24
22 23
16 20
y^OH / 10 24
z° 28 22
37 12
49 91
40 31
-231 CZ 301667 B6
Vyj0·“1 18 32
j-Q 6 43
30 78
34 58
22 20
*L·. 19 28
PH. 7^ CH, xf 6 1
·%«. / 20 10
f-fk X, CH, 31 3
32 10
Z-C”. 31 -1
r· *r° 6 4
d CH> 4 29
? *c 23 61
*í 18 24
21 15
B-ch, Λ •1 26
V>0 *í -6 0
^CH, N~> ,r<> A1 18 5
H.C η,Λ-ch, xf 23 17
232
rO xí 20 2
37 15
0 4
5 1
S-NH. xj 8 18
5> *r 3 15
HA)-CH, 23 16
x! 42 22
XpCH, -9 1
z° 25 -5
x,' 16 7
cř° Xí 27 2
X Xf 49 -9
r** *! 18 40
N-OH x( 5 9
„X 8 23
0 <M-oh xf 16 21
y-CH, Λ 13 23
Xf CH, 8 22
,Ν'Ν^ΟΗ, Xí 2 -19
233
17 1
N”, XpNH 7 -1
χτδ· X! 5 -6
,í> 26 -19
x( 23 -32
,<-F 2 -3
Q H.C-N. Xf 18 25
v 1 13
z Z”^ 4 4
At 18 22
H-X1 9 30
•s 7 25
H,í<> 16 17
ίΛ 13 31
95 106
lx*, 59 97
30 86
JÍ 22 43
33 64
28 29
£ h£%; 31 20
<z 42 80
<Γ* 25 53
«(i 65 1W
234
-Λ 29 58
H,C~> 52 107
X 31 36
X 4 10
8 23
13 20
HO^^S, 33 18
X 20 25
ty/%, 62 99
σ 6 16
X 17 13
19 22
α, 39 18
44 5
X * 43 96
19 55
29 92
49 109
25 14
24 84
χ «I 19 24
X, 47 107
35 40
-----χ 26 31
53 75
8 21
CP 70 112
72 109
X ΧΓ^Χ, 26 31
235
x, 28 14
u -6 41
G. 12 76
Cs 33 94
Os 27 17
44 28
λ 55 50
21 90
o, 12 53
<λχ 21 64
čn 35 63
n/yCH, | “A 21 -5
Γ 1 65
h,c--------- 28 103
CH. 51 105
44 97
-7 44 40
«.CyCH, 47 -4
Η,Λ^ %H, 47 89
fH. 12 29
44 100
Cx^x, 35 69
16 2
as 32 92
92 103
236
9 1
56 96
26 2
39 13
*ys 19 5
24 31
X* 35 106
4; 15 36
δ,, 69 59
-11 42
16 42
15 95
20 92
'•Υί 19 •1
4' 31 30
-1 14
*-, 9 34
χ^ζ CH, 3 44
Α 1 52
*χ<*. X 18 •2
Η, 9 -9
40 94
237
CU 38 68
25 40
34 99
30 94
24 99
'XT' 19 101
2Q 92
cu 15 99
r· cr< 16 37
U 17 23
CU 70 111
OyS 60 99
(½ 75 114
81 95
cu, 24 86
-3 64
26 71
Ch 14 60
51 108
X 8 37
x 15 23
20 32
35 63
238
28 47
26 16
Qs 18 11
ς\ 13 7
28 69
i t 18 43
v 11 47
(A 19 86
26 83
50 111
0 45 103
v* 53 95
31 108
69 104
A 36 106
58 100
63 104
12 55
16 73
239
Η,σ'^χ; 18 -3
16 17
32 35
36 66
?TS 68 49
ys 26 39
15 4
A 25 31
<γ, 65 90
a HjhT^O 21 39
10 29
?A 16 2
AzCxzx, 22 36
as 18 29
25 25
27 60
30 70
10 23
cA 50 40
Ou^, 51 67
Ά 23 51
240
στ' 31 66
86 107
X 46 103
cc 26 59
Ύ) 30 61
41 16
A 15 8
OUs, 74 101
Ην>χ 78 60
Q> ^OH 58 37
34 90
a' 34 69
CC' 19 35
15 -1
11 15
Ř» 15 -9
VA 12
X 8
J-J 38
241
G, 48
Příklad knihovny III
R-Nhfe
DMF.EbN,
HA7U24h
O,1M roztoků aminů, triethylaminu a 4-dimethylaminopyridinu byly připraveny odděleně v bezvodném DMF a přeneseny do bezpečnostního boxu. 0,1M roztok 6-[2-(karboxy)fenylsulfanyl]3~E—[2—(pyridin—2—yl)ethenyl]—1 H-indazolu, příklad 33(g), tetrabutylamonná sůl a o-(7-azabenzotriazol-l-yl)-N,N,N',N'-tetra-methyluroniumhexafluorfosfát byly připraveny v bezpečnostním boxu. Do každé zkumavky v seskupení 8x11 kultivačních zkumavek (10x75 mm) v bez10 pečnostním boxu bylo přidáno 100 μΐ (0,01 mmol) odlišných roztoků aminu, následováno přidáním roztoku 100 μΐ (0,01 mmol) tetrabutylamonium-2-{3-[(E)-2-(2-pyridinyl)ethylyl]lH-indazol-6-yl}sulfanyl)benzovátu, roztoku 100 μΐ (0,01 mmol) triethylaminu, roztoku 100 μΐ (0,01 mmol) 4-dimethylaminopyridinu a roztoku 100 μΐ (0,01 mmol) o-(7-azabenzotriazol-lyl)-N,N,N',N'-tetra-methyluroniumhexafluorfostátu. Reakce byly míchány ve vyhřívaném bloku v50°C po dobu 1 hodiny. Reakce reakční směsi byly přeneseny na 1 ml 96 jamkové destičky s použitím multipipety. Rozpouštědla byla odstraněna s použitím přístroje SpedVac™ a hrubé reakční směsi byly opět rozpouštěny v DMSO za vzniku konečné teoretické koncentrace 10 mM.
Sloučeniny v tabulce byly testovány na inhibici proliferace HUVEC v nominální koncentraci
0,5 mM a výsledky jsou uvedeny v tabulce III níže, jak byly vypočteny ze vzorce:
% inhice = (kontrola - ošetřeno)/(kontrola - hladovění) x 100
V těchto testovacích podmínkách je > 30% inhibice považována za významnou.
-242 CZ 301667 Bó
R % inhibice
Tabulka knihovny III
R % inhibice
í> -1
Λ -17
4
ύ Ϊ7
-4 6
ύ, 22
όΗ, -19
«4 9
f Jl CHg 2
'Ϋγ», 5
243
15
“Op X, -22
X. -19
-9
rf H.C'™ -11
9= -17
-6
0 f, -11
rf. -1
rf. 12
rf 9
rf £ 7
H,Cyd) OH -32
rf F -22
-15
244
ó -22
7
Λ -4
A 4
Ψ H^ť°
7 cAch, -29
X9 X, -6
/o -8
Μ,Ογώ 8
,=i i
F -38
Λ -36
©Hj -11
-14
-20
*1 -5 _
245
Z -43
HAh, -5
A F 0
ηΑΦ 6
Λ 0
í
X HNZ? N N -28
Zy r -13
A vJ-a h,Zch, -21
-15
cAhXci 0
°Ϋχ HO N—OH -18
i v on* b* -15
-1
A •11
246
0? X, 3
X HjC^CH, 1
i -27
&· -47
OH 33
ji 17
20
?
A -29
*17
ik -7
ά H,C H 0
é H,0 -1
H 4
<0, Xn^oh *43
-247Cl 301667 B6
-42
CH, 22
í CH, 13
í Ach, čh, 81
,νδ N-N -23
248
ί5 2
“Λ Cl 4
Ny** 20
2
90 X, -3
-9
l· Η£γ -9
< -1
δ? 4
n*0^ 12
Η,Ο'^Τ H,cr0 9
£ -8
ř |Γγ Cr NH, -2
H,CyÓ 0 5
249
ί oXh, 6
χο 18
20
-23
-12
ÓH 22
4 °“CH, 9
·°·ΛΑ 7
-4
OH 4
OH 7
9 i4 7
18
f, 11
0 -31
250
*}<&· -22
A. -5
-1
«.C-j-CH, A -7
-22
CH, -3
“Ů“' 11
X, 4
OH 20
“A. 15
°ΰτ° -45
<37
-20
-4
$4CH’ hAh, 0
251
i H3C4-CH, -29
Ý -26
3
H,c'a^CH’ 8
A 12
Η,Ο-4-CH, oAo HjC-J-CH, CH, 6
-57
l· HjC-t-CH, -25
-¾ -41
h,c^nAn ϋ -21
Λ h>c'2=n Η,σΟΗ, -28
Λ w H.C -20
A Z' -20
ď 3
°ύ 11
252
rf Η,ΟνλΛ 1
rf CH, -5
λ -60
X, Vyk oS> bn, -46
& -22
xA -20
rf -7
Λ CH, -28 -10
$ OH
X, -13
13
rf -7
rf5 -13
Λ -45
253
X -40
-2
J HA^QyJ £ -11
-31
-¾ -30
Λ CH, -11
H,C—I—CHj B<y -2
J 18
/ CHj 7
Λ 1
A 0
ř H,C'° 0
v F 24
254
A V 14
61
1* HO^L „CH, A 9
,XÚ 1
1
4
CQ x. 1
Cl 6
3 •15
α -12
OH 52
O§-CH, 0 19
ΰ 13
•7
OH -26
255
F 5
1
f^-F -3
-13
h»°Ach, -1
256
4 -1
X, £ 16
OO 4
X,
-23
A -20
Ύ,
i -15
10
-18
-9
ί 29
C0 χ, 1
X, CŽ 10
Ť «Aq-Os H.Ó 0
cA- 9
257
oA •3 1
-1Ϊ
/ N*NH 22
cA 9
“A -5
X. CH, OH -19
oA -6
lA' -12
X, ΥΊ 0” -1
é -7
HO^' 2
-34
uXj -13
H3°«OX^2 CH, 13
258
«qA 48
36
-8
-11
O <í X 1
4
Ť 1 ^·° 10
A -1
cp X, -33
OH -19
CH. -6
A ^CH, 2
-21
Cl -16
259
260
v-θ'1 CH, -6
CH, 13
CH, -1
Ť Η,Ο^ -11
XÍ 11
xd 15
ΧγΟΟ CH, 8 |
1
xaJCO CH,
3
F
X 9
χΑ 2
rf β
15
261
JA 14
f, HAJ 3
ό -31
ó -2
ό 11
A HJí'CH, 13
?, A 10
Λ 3
ό 6
2
Ji φ% CH, -1
Άύ 3
CÁ 18
A -17
-8
3
262
i) 0
φ ϊβ
7
-β
f. 2
Cr^NH,
ó 3
č OH 14
ř řti OH 10
Φ H,C'° -20
ó N -10
H/lyÓ 4
10
h°x^ch* 9
263
Λ5 -7
J, -3
Η,αθΛ rf
4
8
Ip ď 10
τ H,C'° s CH,
7 7
«rf r aCH,
od rf -9
cd. 46
2
rf 23
A 11
CH, -10
Η,α^,ΝΗ -4
264
OÍ 7
7 9
X) 10
15
-18
μ -3
7 -2
£9 5
i '-G -13
i -9
H,C
A 47». CH, -2
Λ X H,C CH, -6
i s ) H,C 17
265
έ H,C 19
x, 9 OH 18
δ O-^O ty/ -24
a 0
A -6
A HqAn^OH 3
i-- Λ hXY* CH, -20
f- 1. *16
-19
1
hcMl o 3
6
18
266
JS Η-CH, HO L OH -18
vír“' -9
oA 2
14
W) -10
I’ H,<, -7
4
CH, 11
7 11
4 8
Vj-CH, CH, 23
00 HAX, 1
co Xf^cH, -20
0
267
57
X Cl 24
?· ί” 1
v CH, -10
^0 -8
-2
5
268
Tabulka 4
0 ν
R CHk-1* 20 μΜ
O* 30,6
σ 28,3
ΗΟχ/χ,Λ ... 2¥
«0^ 21,7
& 40
NH, 27,8
0Λ^· 20,2
”TX 57,7
35,5
-269CZ 301667 B6
>Cť 24,2
”Ό 31,1
13,7
23,9
Ti 48,6
19,5
-ar 32,3
24,9
25,8
.xr 94,9
«ar 38,7
ν'* 72
-270CL 301667 B6
α 21,1
31,4
«“-O 28,3
A 28,5
cr 28,1
25,7
23,9
(Y r*r 36,3
o 45,4
3^7
24,7
-271 CZ 301667 B6
J/’ Hp* S2,7
38,ó
23,6
39,β
28,1
“~τι 33
52,4
“Xf 38,6
32,3
42,9
cy 24,1
X- 31,6
-272CZ 301667 B6
Tabulka 5
% inhibice @ 1 μ,Μ
Příklad č. Tie2-P FAK
41(a) 50 5
41(ee) 4j 7
41(0 49 9
41(r) 56 5
41(0 51 9
48« 52 11
31« 46 6
33« 35 12
35« 55 7
35(dd) 48 4
35« 82 1
35(CC) 47 7
-273 CZ 301667 B6
l(a) 95* 69*
3 NI* 26*
8(a) 55* 3*
2(d) 90* NI*
8(c) 3Í* 15*
Xb) 88* NI*
10 20* NI*
17 50
4(a) 69
11 40
4(b) 29
Xc) NI
22fa) 8
23 5
-274CZ 301667 B6
22(b) NI
21 27
12(a) NI
19(a) 18
19(c) NI
12(c) 17
19(6) 15
5(a) 44
16(a) 10
16(b) 52
24(a) 91*
2*5») 92*
24(c) 94
30(a) 19
8(d) 10
* sloučenina testovaná v koncentraci 10 μΜ
Hodnoty uvedené tučným písmem se týkají výsledků spektrofotometrických testů, hodnoty uvedené netučným písmem byly získány v testu DELFIA
-275 CZ 301667 B6
Stanovení koncentrace inhibitoru v myší plazmě po intraperitoneálním a perorálním podávání dávky
Dávkovači roztok se skládal z inhibitoru rozpouštěného v jednom z následujících vehikul: buď 30, nebo 60% vodný roztok polypropylenglykolu s molámím ekvivalentem HCI ve vodě nebo 0,5% karboxymethylcelulóza ve vodě. Konečná koncentrace byla normálně 5 mg/ml s dávkovacím objemem 5 nebo lOml/kg. Samicím myší do firmy Taconic (Germantown, NY) byla podávána dávka jako funkce hmotnosti sloučeniny k tělesné hmotnosti, obvykle 50 nebo io 25 mg/kg. Krevní odběry byly prováděny z oční žíly v 0,5, 1, 4 hodinách s konečným časovým bodem 7 hodin, kdy byla krev odebírána intrakardiální punkcí. Krev byla stočena, aby se sebrala plazma, která pak byla uložena v -80 °C do prováděcí analýzy. Vzorky byly připraveny pro analýzu s použitím vnitřního standardu a hydroxidu sodného. Po vortexování byl přidán ethylacetát a míchán po dobu 15 až 20 minut při teplotě místnosti. Po centrifugaci byla výsledná organická vrstva evaporována a pak rekonstituována v acetonitrilu a pufru. Vzorky pak byly analyzovány prostřednictvím HPLC nebo LC-MS.
Hladina sloučeniny byly kvantifikovány pomocí standardní křivky známé koncentrace sloučeniny v myší plazmě. Hladiny sloučeniny byly vyneseny do grafu jako funkce času a analyzovány určením plochy pod křivkou koncentrace (AUC ng*hr/ml), maximální koncentrace (Cmax ng/ml), minimální koncentrace (Cmin nebo za 7 hodin ng/ml) a konečný biologický poločas (Tl/2 hodin). Výsledky jsou ukázány v tabulce 6.
-276CZ 301667 B6
Tabulka 6
Piíklad Č. Způsob Dávka mg/kg ADCjrtUtdni (ng*hr/ml) Cmax (ng/ml) Cmiň (7 h konc.) (ng/ml) tl/2 8 (h) Vehikulum PEG400:HíO PH 2,3
1{a) IP 50 691 283 30:70
19») PO 50 NA 30 β 60:40
19» IP 25 23205 5784 456 60:40
19» PO 50 5889 1937 63 1.2 60:40
19»).. IP 25 428 149 15 2,2 60:40
19») PO 50 19 8 4 2,2 60:40
31 (a) IP 25 47538 13018 1906 2,4 30:70
31j[aL PO 50 40863 14499 834 1,8 30:70
31») IP 25 >7037 >2000 177 1.7 30:70
31 <b) PO 50 2071 1100 15 1,0 30:70
31M) IP 25 237784 64184 15073 5,3 30:70
.31W PO 10 49120 9740 2022 3,1 30:70
31 (<J), PO 2S 203860 50810 3801 1,9 30:70
31 (d) PO 50 430683 76915 42478 3β3 30:70
JM.fi» J PO 25 >30339 >8000 2952 13,1 30:70
31 W PO 25 >244545 >50000 9521 2,8 30:70
32 ta) IP 25 >20554 >40001 1273 3,7 30:70
32 (a). PO 50 4190 1746 40 1,1 30:70
32 »1 PO 25 490 179 18 2,1 30:70
32»L PO 25 388 161 10 2,4 30:70
33 (a) IP 25 13813 13794 54 1,1 30:70
33 (a) PO 100 3556 90 0.5% CMC
33 (a) PO 25 721 66 0.5% CMC
33ía) PO 50 19087 23562 25 0,8 30:70
33») IP 25 11245 1990 902 3,0 60:40
33») PO 50 3925 1498 76 3.0 60:40
33 (C) IP 25 697 505 7 1,2 30:70
33 (C) PO 50 183 94 5 3,0 30:70
33»L IP 25 5080 1738 113 1,6 60:40
33 (dl PO 50 4744 1614 8 0,9 60:40
33(6) IP 25 14323 9938 94 1,0 30:70
33(6) PO 50 13290 9987 12 0,7 30:70
33JL IP 25 1887 1699 L-í— .24. 30:70
-277CZ 301667 B6
33 (f) PO 50 1436 1186 3 07 30:70
35 (a) IP 25 2032 2138 24 JA. 30:70
35 (a) PO 50 2445 1780 10 0,9 30:70
35 (aa) PO 25 4036 4168 106 2.1 . 30:70
35 (b) IP 25 2840 1509 12 °A. 30:70
35 (b) PO 50 4046 5595 13 0,8 30:70
35(e) IP 25 9408 1976 465 JA. 30:70
35(0 PO 50 4744 909 321 4,9 30:70
35 (cc) IP 25 2223 3183 6 JA 30:70
35 (cc) PO 50 1718 1439 5 0,9 30:70
35 (dd) IP 25 >23046 >4000 1364 4.1 30:70
35 (dd) PO 25 1360 444 58 JA 0,5% CMC
35 {dd) PO 25 >6521 >4000 114 JA 30:70
35(0 IP 25 2409 1272 65 JA 30:70
35(0 PO 50 1503 1043 6 0,9 30:70
35 (ee) !P 25 546 579 2 JA 30:70
35 (ee) PO 25 157 77 9 Mt8 30:70
35 IP 25 397 131 25 JA 30:70
35(0 PO 50 356 93 27 3,8 30:70
35 (ff) IP 25 >6301 >4000 72 1,7 30:70
35 (ff) PO 25 . «o. Blq «q blq 30:70
35(gL PO 25 231 61 28 ie>i 30:70
35 ®L IP 25 59 46 1 1,5 30:70
35 (h) PO 50 26 7 2 * 30:70
35.(Ml) PO 25 292 221 5 1,7 30:70
35(1) PO 25 30:70
35 0) IP 25 9531 8606 52 1,3 30:70
350) PO 50 1328 2176 5 4,5 30:70
35 (kL IP 25 2640 2189 35 1,< 30:70
35(kL PO 50 5529 4524 33 1,4 30:70
35 (m) IP 25 226 58 17 4,0 30:70
3S(mL PO 25 10 7 0 « 30:70
35(nL PO 25 4818 3545 55 1,4 30:70
35(o) PO 25 683 486 3 1,0 30:70
35 (p) PO 25 1435 1958 5 1,3 30:70
35 (r) PO 25 4261 2601 67 1,3 30:70
35 (a) PO 25 7425 3371 86 2,2 30:70
35 (t) PO 25 3199 2801 41 1,1 30:70
35(0 PO 25 30:70
35(0 IP 25 4865 2215 16 0,9 30:70
35(yL PO 50 >2948 >2000 26 1,0 30:70
35 (x) IP 25 951 781 48 3,2 30:70
35 (X) PO 50 3516 2313 16 0,9 30:70
35 M IP 25 159 135 2 1,2 30:70
35 (y) PO 50 58 45 1 .JA 30:70
-278CZ 301667 B6
35(2) IP 25 837 556 22 1,8 30:70
35 (z) PO 50 1001 806 14 1,6 30:70
36 (a) PO 25 605 445 17 1,5 30:70
37 (a) PO 25 30:70
37(0 PO 25 2419 2338 9 lž. 30:70
39 (a) PO 25 >14848 >4000 219 1,4 30:70
39 (b) PO 25 >30972 >5000 3148 11,8 30:70
4 (a) PO 50 NA 50 NA 60:40
4íía} IP 25 92823 32202 3856 | 30:70
41 (a) PO 50 48998 18433 2462 3^ 30:70
41 (aa) iP 25 6659 2427 124 2,1 80:40
41 (aa) PO 50 289 259 5 0£ 60:40
41(0 IP 25 >5868 >1000 412 V 60:40
41 (b) PO 50 759 532 S 1,1 60:40
4l(bb) PÓ 50 2178 596 75 2,0 30:70
41(0 IP 25 3397 2068 57 1,7 60:40
41 (0 ’ PO 50 3182 1296 104 2,6 60:40
41(0 IP 25 10324 2787 573 60:40
41 (d) PO 50 7072 2954 150 V 60:40
41 (dd) PÓ 25 354 542 1 0,8 30:70
.41 (aL ip 25 4900 1154 301 1,6 60:40
41.® PO 50 302 113 7 1,6 60:40
4i(ee) »P 25 >28434 >5000 1670 4,0 30:70
41 (eej PO 50 >25294 >5000 1214 3,4 30:70
4100 PO 25 9176 2784 4-10 30:70
41(9) IP 25 1925 1583 0 0,3 60:40
41 (g) PO 50 508 842 1 0,7 60:40
41 (gg) PO 25 2692 2079 29 1,1 30:70
41 ¢1 IP 25 26911 16005 300 ,1.2 30:70
41 (0 PO 50 4677 4080 7 0,7 30:70
41 (hh) PO 25 5601 1526 405 7,9 30:70
41(1) IP 25 1854 623 102 3,1 30:70
41 (1) PO 50 212 104 0 0,5 30:70
41 (ii) PO 25 7094 1826 346 2,3 30:70
41(1) PO 25 1476 1008 17 1,3 30:70
41 (Mt) PO 25 11612 3709 415 2,0 30:70
41 (m) IP 25 1864 501. 54 30:70
41 (m) PO 50 9 5 0 blq 30:70
41 (mm) PO 25 2261 852 127 2,5 30:70
41 (n) IP 25 9408 1976 465 t^2 F 30:70
4U0L PO 50 9066 2245 253 1,9 30:70
41(o), IP 25 >33750 >5000 >5000 V 3070 '
41 (o) PO 50 14717 4776 427 .1,7 30:70
41 (p) ÍP 25 4150 866 380 5,5 30:70
41 (q) IP 25 >27000 >4006 >4000 30:70
-279CZ 301667 B6
41 (q) PO 25 8572 1901 457 5,2 30:70
41 (i) IP 25 >23752 >5000 >5000 * 30:70
41 (r) PO 50 >17789 >5000 >5000 30:70
41«) PO 25 >22498 >4000 1350 4,0 30:70
41 (u) PO 25 875 224 , 51 5,6 30:70
41 (v) PO 25 10949 2336 749 30:70
41 (x) PO 25 24174 4567 1268 V 30:70
41LM PO 25 Blq Blq blq Wq 30:70
42 (a) IP 25 19699 4027 1639 5.0 60:40
42 (a) PO 50 8384 3264Π 341 2,0 60:40
42 (b) IP 25 3207 953 211 3,0 60:40
42 (b) PO 50 4747 2589 46 3.0 60:40
42 (d) IP 25 1774 886 . 31 1,4 60:40
42 (d) PO 50 48 28 18 BLQ 60:40
45 (b) ΪΡ 25 11361 2636 1123 60:40
45 (b) PO 50 1636 427 1 102 S£ 60:40
47 IP 25 236 39 29 19-9 i- 30:70
47 1 PO 50 327 84 25 30:70
59(a) PO 25 50780 15878 1205 1,6 0,5% CMC
48 (a) IP 25 27000 4000 4000 « 30:70
46 (a) PO 25 28636 4000 3657 * 30:70
48 (b) PO 25 2191 476 136 4 30:70
49 (a) ?O 25 712 342 15 30:70
49®) PO 25 33750 5000 5000 30:70
5{b) PO 10 61 12 3,1 60:40
59 (a) PO 8 7707 2489 122 1,5 0.5% CMC
59 (a) PO 40 57240 13796 1879 Μ 0,5% CMC
59 (a) PO 200 156153 29975 12117 JA 0,5% CMC
59 (b) PO 50 276467 50000 26880 CMC
59(0 PO 25 327135 50000 43090 CMC
59 (d) PO β >24696 >5000 1902 0,5% CMC
59 (d) PO 40 >32297 >5000 4135 0,5% CMC
59 (d) PO 200 >123206 >20000 12743 0,5% CMC
59(6) PO 25 12510 28634 2135 21 0,5% CMC
In vivo test rozvoje retinální vaskularizace u neonatálních laboratorních potkanů
Rozvoj retinální vaskularizace u neonatálních laboratorních potkanů se děje od 1. Postnatálního dne do 14. Postnatálního dne (PI-P14). Tento proces je závislý na aktivitě VEGF (I Stone, et al., J. Neurosci, 15, 4738, 1995). Dřívější práce prokázaly, že VEGF také působí jako faktor přežití pro cévy retiny během časného rozvoje vaskularizace (Alon, et. al, Nat. Med., 1,1024, 1995). Pro stanovení schopnosti specifických sloučenin inhibovat aktivitu VEGF in vivo byly sloučeniny formulovány ve vhodném vehikulu, obvykle 50% póly ethylenglykolu, průměrně molekulové io hmotnosti 400 daltonů, a 50% roztoku 300 mM sacharózy v deionizované vodě. Typicky byly injikovány dva mikrolitry (2 μΐ) roztoku léčiva na středu sklivce oba mláďat laboratorního potkana 8. Nebo 9. Postnatální den. Šest dnů po injekci do sklivce byla zvířata utracena a retiny byly řezem uvolněny od ostatní oční tkáně. Izolované retiny pak byly podrobeny protokolu histochemického značení, které barví specificky endotelové buňky (Lutty a McLeod, Arch.
Ophthalmol. 110, 267, 1992) a pak byly fixovány na podložních sklíčkách a vyšetřeny, aby se určil rozsah vaskularizace. Účinné sloučeniny inhibovaly další rozvoj retinální vaskularizace a indukovaly regresi všech cév, kromě těch největších, v retině. Stupeň cévní regrese byl použit ke stanovení relativní účinnosti sloučenin po in vivo podávání. Cévní regrese je odstupňovaná podle subjektivní stupnice jedním až třemi křížky, přičemž jeden křížek znamená detekovatelnou
-280CZ 301667 B6 regresi usuzovanou na přibližně 25 procent nebo méně, dva křížky jsou přisouzeny přibližně až 75% regresi a tří křížky jsou podávány retinám s téměř celkovou regresí (přibližně 75% nebo větší).
Pro přesnější kvantitativní analýzu regrese byly obrazy ADPázou značených fixovaných retin nasnímány digitální kamerou připojenou k mikroskopu. Obrazy retiny pak byly importovány do softwaru pro analýzu obrazu (Image Pro Plus 4,0, Media Cybemetics, Silver Spring, MD). Software byl použit k určení procenta oblasti retiny, která obsahovala obarvené cévy. Tato hodnota pro experimentální oko byla srovnávána s hodnotou změřenou pro injikované vehikulum kontalaio terálního oka téhož zvířete. Redukce vaskulámí oblasti pozorovaná v oku, které dostalo sloučeninu ve srovnání s okem injikovaným vehikulem pak byla exprimována jako „procento regrese“ pro daný vzorek. Hodnoty procent regrese byly zprůměměny pro skupiny 5 až 8 zvířat.
Ve vzorcích, ve kterých pozorování mikroskopem ukázalo téměř úplnou regresi, byla rutinně měřena hodnota procenta regrese 65 až 70 %, To bylo způsobeno barvením deposit v záhybech retiny, záhyby byly indukovány vehikulem použitých pro injekce léčiva. Software pro analýzu obrazu interpretovalo tyto záhyby obsahující barvivo jako cévy. Nebyl učiněn žádný pokus korekce těchto záhybů, protože se měnily od oka k oku. Je tedy nutné poznamenat, že hodnoty procenta regrese se týkají výsledku konzervativního měření, které sice přesně určuje pořadí sloučenin, ale podceňuje jejich absolutní účinnost.
In vivo test rozvoje retinální vaskularizace v modelu retinopatir nedonošených neonatálních laboratorních potkanů
Druhý model na VEGF závisle retinální neovaskularizace byl použit k vyhodnocení aktivit této řady sloučenin. V tomto modelu (Penn et al., Invest. Ophthalmol. Vis. Sci., 36, 2063, 1995) jsou mláďata laboratorního potkana (n = 16) se svými matkami vložena do počítačem řízené komory, která reguluje koncentraci kyslíku. Zvířata jsou exponována po dobu 24 hodin koncentraci 50 % kyslík, pak následuje 24 hodin v koncentraci 10% kyslíku. Tento střídavý cyklus hyperoxie následované hypoxií je opakován 7 krát, a pak jsou zvířata přenesena do vzduchu místnosti (P14). Sloučeniny jsou podávány injekcí do sklivce po přenesení do vzduchu místnosti a zvířata byla usmrcena 6 dnů později (P20). Izolované retiny pak byly izolovány, obarvené na sklíčku a analyzovány, jak uvedeno v detailu výše v modelu rozvoje, Účinnost byla také hodnocena tak, jak je popsáno pro model rozvoje.
-281 CZ 301667 B6
Tabulka 7
Přiklad 2. Model Počáteční hodnocení % inhibice Konc. (mg/ml) Vehikulum PEG/voda
16« ROP ++ 36% 5 70:30
16(e) ROP H-h 54% 10 70:30
19(6) ROP ++ 37% 5 7030
16(β) ROP -μ- 18% 1 70:30
19Φ) ROP ++ 10 7030
19(0 P8 +Z++ 5 50:50
19© ROP 10 70:30
19© ROP - 1 70:30
19(k) ROP v- 10 70:30
1900 ROP - 1 70:30
30(a) ROP ++ 10 70:30
30(8) ROP ++ 48% 10 7030
31(a) P8 48% 5 70:30
31(b) PS 32% 5 50:50
-282CZ 301667 B6
31« P8 +/++var. 5 50:50
31« P8 12% 5 50:50
31« P8 24% 5 50:50
32« P9 20% 5 50:50
33« ROP -H- 55% 10 70:30
33« ROP V- 14% 1 70:30
33« P6-P10 37% ΪΡ* 70:30
33« P8 22% 5 70:30
33(f) P8 20% 5 50:50
35« P8 4% 5 50:50
35(aa) P8 • 5 50:50
35(C) PB 0% 5 50:50
35(CC) P8 +/++ 5 50:50
35(dd) P8 -H/+++ var. 5 50:50
35{ee) pa +/++ 5 50:50
35« P8 5 50:50
350) P8 +/++ 5 50:50
35© P8 7% 5 50:50
35« P8 - 5 50:50
35« P8 ++ 5 50:50
35(V) P8 20% 5 50:50
38« ROP +++ 55% 10 70:30
38« ROP + 16% 1 70:30
39« P8 9% 5 50:50
-283 CZ 301667 B6
4(a) ROP 4-+ 10 70:30
41 (a) ROP -H-+ 64% 10 70:30
41(a) P8 0% 0.5 50*50
41(a) P8 4% 1 50:50
41(a) P8 ++Z+++ 5 50:50
41 (C) ROP •f-H- 54% 10 70:30
41(c) ROP 16% 1 70:30
41 (c) pa ++ 5 50:50
41(d) ROP 59% 10 70:30
41«0 ROP -ř/- 0% 1 70:30
41(e) P8 8% 5 50:50
41{ee) P8 +/++var. 5 50:50
4i(g) P8 37% 5 50:50
41(h) P8 0% 5 70:30
41(i) P8 +/++ 5 50:50
4Kk) P8 1% 5 50:50
41(1) P8 28% as 70:30
41 (m) P8 10% 5 50:50
41 (mm) P8 + 5 50:50
41 (n) P8 2% 5 50:50
41(o) P8 2% 5 50:50
41(P) P8 36% 5 50:50
41{r) P8 +/++ var. 5 50:50
42(A> ROP -w· 23% 10 70:30
-284CZ 301667 Bó
42(a) ROP 1% 1 70:30
42(a) ROP 10 70:30
42(a) P9 55% 10 70:30
42<a) P6-P10 61% IP* 70:30
42(a) P8 +/++ 5 50:50
42{b) P9 40% 10 70:30
42(c) P8 36% 5 50:50
45(b) ROP 60% 10 70:30
45(b) ROP 25% 1 7030
49(a) P8 54% 5 5030
48(b) PS 5% 5 50:50
5(b) ROP ++ 45% 5 70:30
59(a) ROP 41% 10 05%CMC
S9(a) ROP 19% 1 0.5%CMC
6(a) ROP ♦+ 5 65:35
6(b) ROP ++ 10 70:30 I
Kináza fosforylázy
Konstrukt kinázy fosforylázy pro test
Zkrácená katalytická podjednotka (podjednotka gama) kinázy fosforylázy (aminokyseliny 1 až 298) byla exprimována v E.Coli a izolována z inkluzních tělísek. Kináza fosforyláza pak byla znovu složena a uložena v glycerolu v -20 °C.
io Test kinázy fosforylázy.
V testu byla použita purifikované katalytická podjednotka k fosforylaci fosforylá2y b s použitím radioaktivně značeného ATP. Stručně, 1,5 mg/ml fosforylázy b bylo inkubováno s lOmM kinázy fosforylázy v 1 OmM MgCl2,50mM Hepes, pH 7,4 ve 37 °C. Reakce byla spuštěna přidáním ATP do 100 μΜ a inkubována po dobu 15 minut v 25 nebo 37 °C. Reakce byla ukončena a proteiny byly precipitovány přidáním TCA do 10% konečné koncentrace. Precipitované proteiny byly izolovány na 96 jamkových filtračních destičkách Millipore MADP NOB. Filtrační destičky pak byly důkladně promyty 20% TCA a usušeny. Pak byla na destičky přidána scintilační tekutina a inkorporovaná radioaktivní značka byla počítána na Wallacově mikropočítači beta impulzů.
% inhibice transferu fosfátu z ATp na fosforylázu b v přítomnosti 10 μΜ sloučeniny je ukázáno v tabulce 8 níže.
-285 CZ 301667 B6
Tabulka 8
Přiklad č. % inhibice @ 10 μΜ
52 (b) 92
27 (f) 90
27 (a) 37
Příklady sloučenin popsaných výše mohou být formulovány do farmaceutických přípravků podle následujících obecných příkladů.
Příklad 1
Parenterální přípravek io
Aby se připravil parenterální farmaceutický přípravek vhodný pro podávání injekcí, bylo rozpuštěno 100 mg ve vodě rozpustné soli sloučeniny vzorce I v DMSO, a pak smícháno s 10 ml 0,9% sterilního fyziologického roztoku. Směs je formulována do jednotkové dávkové formy vhodné pro podávání injekcí.
Příklad 2
Perorální přípravek
Aby se připravil farmaceutický přípravek pro perorální podávání, bylo smícháno 100 mg sloučeniny vzorce I se 750 mg laktózy. Směs byla formulována do perorální dávkové jednotky, jako je například tvrdá želatinová tobolka, která je vhodná pro perorální podávání.
Příklad 3
Intraoční přípravek
Aby se připravil farmaceutický přípravek s prodlouženým uvolňováním pro intraoční podávání, byla sloučenina vzorce I suspendována v neutrálním, isotonickém roztoku hyaluronové kyseliny (1,5% konc.) ve fosfátovém pufru (pH 7,4) za vzniku 1% suspenze.
Je třeba rozumět, že předchozí popis je uveden jako příklad a vysvětlení výhodných provedení vysvětlující povahy aje zamýšlen pro ilustraci vynálezu a jeho výhodných provedení. Na základě rutinních experimentů odborník snadno najde modifikace a variace, které mohou být vytvořeny bez odchýlení se od vynálezecké myšlenky. Předpokládá se tedy, že rozsah vynálezu není definován výše uvedeným popisem, ale připojenými patentovými nároky a jejich ekvivalenty.

Claims (11)

1. Derivát indazolu obecného vzorce 1 (a) kde io R1 je substituovaná nebo nesubstituovaná arylová skupina nebo heteroarylová skupina nebo skupina vzorce CH-CH-R3 nebo CH=N-R3, kde R3 je substituovaná nebo nesubstituovaná alkylová skupina, alkenylová skupina, cykloalkylová skupina, heterocykloalkylová skupina, arylová skupina nebo heteroarylová skupina a
15 R2 je substituovaná nebo nesubstituovaná arylová skupina nebo skupina Y-Ar, kde Y je atom O, S, skupina C=CH2, skupina C=O, skupina S=O, skupina SO2, skupina CH2, skupina CHCH3 nebo N-alkylová skupina obsahující 1 až 8 atomů uhlíku a Ar je substituovaná nebo nesubstituovaná arylová skupina,
2o kde termín „alkylová skupina“ se týká alkylových skupin s přímým a rozvětveným řetězcem, které mají jeden až dvanáct uhlíkových atomů;
25 termín „alkenylová skupina“ se týká alkenylových skupin s přímým a rozvětveným řetězcem, které mají dva až dvanáct atomů uhlíku;
termín „cykloalkylová skupina“ se týká nasycených nebo částečně nenasycených karbocyklů, které mají tři až dvanáct atomů uhlíku;
termín „heterocykloalkylová skupina“ znamená nasycený nebo částečně nenasycený monocyklický zbytek obsahující atomy uhlíku a alespoň jeden heteroatom vybraný z atomů dusíku, kyslíku a síry;
35 termíny „aiylová skupina“ a „heteroarylová skupina“ se týkají monocyklických a polycyklických aromatických kruhových struktur, přičemž termín „arylová skupina“ se týká karbocyklů a termín „heteroarylová skupina“ se týká heterocyklů a všechny tyto arylové a heteroarylové skupiny jsou popřípadě substituovány kondenzovanou kruhovou strukturou nebo můstkem;
40 ajeho farmaceuticky přijatelná sůl.
-287CZ 301667 Bó
2. Derivát indazolu podle nároku 1 obecného vzorce II kde
5 R1 je substituovaná nebo nesubstituovaná arylová skupina nebo heteroarylová skupina nebo skupina vzorce CH=CH-R3 nebo CH=N-R3, kde R3 je substituovaná nebo nesubstituovaná alkylová skupina, alkenylová skupina, cykloalkylová skupina, heterocykloalkylová skupina, arylová skupina nebo heteroarylová skupina a io R4 a R7 jsou každý nezávisle atom vodíku, skupina OH, atom halogenu, alkylová skupina obsahující 1 až 8 atomů uhlíku, alkoxyskupina obsahující l až 8 atomů uhlíku, alkenylová skupina obsahující 1 až 8 atomů uhlíku, ary loxy skupina, thioarylová skupina, skupina CH2-OH, CHrO-alkylová skupina obsahující 1 až 8 atomů uhlíku v alkylové části, CH2-0-arylová skupina, CH2-S-alkylová skupina obsahující 1 až 8 atomů uhlíku v alkylové části nebo CHz-S-arylová is skupina,
R5 a R6 jsou každý nezávisle atom vodíku, skupina OH, atom halogenu, Z-alkylová skupina, Z-arylová skupina nebo skupina Z-CH2CH=CH2, kde Z je atom O, S, skupina NH nebo skupina CH2, přičemž alkylová část, a arylová část Z-alkylové skupiny a Z-arylové skupiny je každá
20 popřípadě substituovaná;
a jeho farmaceuticky přijatelná sůl.
3. Derivát indazolu nebo jeho farmaceuticky přijatelná sůl podle nároku 2, kde
R1 je substituovaná nebo nesubstituovaná bicyklická heteroarylová skupina nebo skupina vzorce CH=CH-R3 kde R3 je substituovaná nebo nesubstituovaná alkylová skupina nebo heteroarylová skupina a
30 R4 a R7 jsou každý nezávisle atom vodíku nebo alkylová skupina obsahující 1 až 8 atomů uhlíku a
R3 a R6 jsou každý nezávisle atom halogenu, Z-alkylová skupina nebo skupina Z-CH2CH=CH2, kde Z je atom O nebo S a alkylová skupina je popřípadě substituovaná.
-288CZ 301667 B6
4. Derivát índazolu podle nároku 1 obecného vzorce III
5 R1 je substituovaná nebo nesubstituovaná arylová skupina nebo heteroarylová skupina nebo skupina vzorce CH-CH-R3 nebo CH-N-R3, kde R3 je substituovaná nebo nesubstituovaná alkylová skupina, cykloalkylová skupina, heterocykloalkylová skupina, arylová skupina nebo heteroarylová skupina a ίο Y je atom O, S, skupina C=CH2, skupina C=O, skupina S=O, skupina SO2, skupina CH2, skupina CHCH3, skupina NH nebo N-alkylová skupina obsahující 1 až 8 atomů uhlíku,
R8 je substituovaná nebo nesubstituovaná alkylová skupina, alkenylová skupina, cykloalkylová skupina, heterocykloalkylová skupina, arylová skupina, heteroarylová skupina, alkoxyskupina
15 nebo aryloxyskupina,
R10 je nezávisle vybrán ze skupiny, kterou tvoří atom vodíku, atom halogenu a alkylová skupina obsahující 1 až 8 atomů uhlíku,
20 nebo jeho farmaceuticky přijatelná sůl.
5. Derivát Índazolu nebo jeho farmaceuticky přijatelná sůl podle nároku 4, kde
R1 je substituovaná nebo nesubstituovaná bicyklická heteroarylová skupina nebo skupina
25 vzorce CH=CH-R3, kde R3 je substituovaná nebo nesubstituovaná arylová skupina nebo heteroarylová skupina,
Y je atom O, S, skupina C=CH2, skupina C=O, nebo N-alkylová skupina obsahující 1 až 8 atomů uhlíku,
R8 je substituovaná nebo nesubstituovaná arylová skupina nebo heteroarylová skupina, alkylová skupina a alkenylová skupina a
R10 je atom vodíku nebo atom halogenu.
6. Derivát índazolu podle nároku 4 obecného vzorce III (a) kde
-289CZ 301667 B6
R1 je substituovaná nebo nesubstituovaná arylová skupina nebo heteroarylová skupina nebo skupina vzorce CH=CH-R3 nebo CH=N-R3, kde R3 je substituovaná nebo nesubstituovaná alkylová skupina, cykloalkylová skupina, heterocykloalkylová skupina, arylová skupina nebo
5 heteroarylová skupina,
Y je atom O, S, skupina C=CH2, skupina C=O, skupina S=O, skupina SO2, skupina CH2, skupina CHCH3 nebo N-alkylová skupina obsahující 1 až 8 atomů uhlíku, io R8 je substituovaná nebo nesubstituovaná alkylová skupina, alkenylová skupina, cykloalkylová skupina, heterocykloalkylová skupina, arylová skupina, heteroarylová skupina, alkoxyskupina nebo aryloxyskupina, nebo jeho farmaceuticky přijatelná sůl.
7. Derivát indazolu nebo jeho farmaceuticky přijatelná sůl podle nároku 6, kde
R1 je substituovaná nebo nesubstituovaná bicyklická heteroarylová skupina nebo skupina vzorce CH=CH-R3, kde R3 je substituovaná nebo nesubstituovaná arylová skupina nebo hetero20 arylová skupina,
Y je atom O, S, skupina C=CH2, skupina C-0 nebo N-alkylová skupina obsahující 1 až 8 atomů uhlíku a
25 R8 je substituovaná nebo nesubstituovaná arylová skupina, heteroarylová skupina, alkylová skupina nebo alkenylová skupina.
8. Derivát indazolu nebo jeho farmaceuticky přijatelná sůl podle nároku 6, kde
30 R1 je CH=CH-R3, kde R3 je substituovaná nebo nesubstituovaná arylová skupina,
Y je atom O nebo S a
R8 je substituovaná nebo nesubstituovaná arylová skupina nebo heteroarylová skupina.
9. Derivát indazolu podle nároku 1, obecného vzorce IV kde
40 R1 je substituovaná nebo nesubstituovaná arylová skupina nebo heteroarylová skupina nebo skupina vzorce CH=CH-R3 nebo CH=N-R3, kde R3 je substituovaná nebo nesubstituovaná alkylová skupina, cykloalkylová skupina, heterocykloalkylová skupina, arylová skupina nebo heteroarylová skupina,
-290CZ 301667 B6
Y je atom O, S, skupina C=CH2) skupina OO, skupina SK), skupina SO2, skupina CH2, skupina CHCH3 nebo Ν-alkylová skupina obsahující 1 az 8 atomů uhlíku,
R9 je substituovaná nebo nesubstituovaná alkylová skupina, cykloalkylová skupina, hetero5 cykloalkylová skupina, arylová skupina, heteroarylová skupina, alkoxyskupina, aryloxyskupina, cykloalkoxyskupina, NH-alkylová skupina obsahující 1 až 8 atomů uhlíku, NH-aryl ová skupina,
NH-heteroarylová skupina, N=CH-alkylová skupina, skupina NH(C=O)Rn nebo skupina NH2, kde Ru je nezávisle vybrán ze skupiny, kterou tvoří atom vodíku, substituovaná nebo nesubstituovaná alkylová skupina, cykloalkylová skupina, heterocykloalkylová skupina, arylová skupina io a heteroarylová skupina a
R10 je nezávisle vybrán ze skupiny, kterou tvoří atom vodíku, atom halogenu a alkylová skupina obsahující 1 až 8 atomů uhlíku,
15 nebo jeho farmaceuticky přijatelná sůl.
10. Derivát indazolu nebo jeho farmaceuticky přijatelná sůl podle nároku 9, kde
R1 je skupina vzorce CH-CH-R3, kde R3 je substituovaná nebo nesubstituovaná arylová 20 skupina nebo heteroarylová skupina,
Y jeSa
R9 je substituovaná nebo nesubstituovaná alkylová skupina, alkoxyskupina nebo NH-hetero25 arylová skupina.
11. Derivát indazolu podle nároku 1 vybraný ze skupiny, kterou tvoří sloučeniny vzorců
CZ20014634A 1999-07-02 2000-06-30 Derivát indazolu a farmaceutický prípravek s jeho obsahem pro inhibici proteinkináz CZ301667B6 (cs)

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US14213099P 1999-07-02 1999-07-02

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CZ20014634A3 CZ20014634A3 (cs) 2002-09-11
CZ301667B6 true CZ301667B6 (cs) 2010-05-19

Family

ID=22498654

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CZ20014634A CZ301667B6 (cs) 1999-07-02 2000-06-30 Derivát indazolu a farmaceutický prípravek s jeho obsahem pro inhibici proteinkináz

Country Status (52)

Country Link
EP (2) EP1218348B1 (cs)
JP (2) JP3878849B2 (cs)
KR (1) KR100529639B1 (cs)
CN (2) CN1234693C (cs)
AP (1) AP1486A (cs)
AR (2) AR035554A1 (cs)
AT (1) ATE376543T1 (cs)
AU (1) AU777701B2 (cs)
BE (1) BE2013C015I2 (cs)
BG (1) BG66070B1 (cs)
BR (1) BRPI0012352B8 (cs)
CA (1) CA2383630C (cs)
CO (1) CO5190686A1 (cs)
CR (2) CR6517A (cs)
CY (3) CY1107147T1 (cs)
CZ (1) CZ301667B6 (cs)
DE (2) DE60037211T2 (cs)
DK (2) DK1218348T3 (cs)
DZ (1) DZ3191A1 (cs)
EA (1) EA004460B1 (cs)
EE (1) EE05585B1 (cs)
ES (2) ES2293906T3 (cs)
FR (1) FR13C0010I2 (cs)
GE (1) GEP20063885B (cs)
GT (1) GT200000107A (cs)
HK (3) HK1065037A1 (cs)
HR (1) HRP20020109B1 (cs)
HU (1) HU228502B1 (cs)
IL (1) IL146710A0 (cs)
IS (1) IS2791B (cs)
JO (1) JO2319B1 (cs)
LU (1) LU92154I2 (cs)
MA (1) MA26803A1 (cs)
ME (1) MEP45108A (cs)
MX (1) MXPA01012795A (cs)
MY (2) MY137622A (cs)
NO (3) NO322507B1 (cs)
NZ (1) NZ516676A (cs)
OA (1) OA11980A (cs)
PA (1) PA8498001A1 (cs)
PE (1) PE20010306A1 (cs)
PL (1) PL212108B1 (cs)
PT (2) PT1614683E (cs)
RS (1) RS50339B (cs)
SI (2) SI1218348T1 (cs)
SK (1) SK286936B6 (cs)
SV (1) SV2002000121A (cs)
TN (1) TNSN00146A1 (cs)
UA (1) UA66933C2 (cs)
UY (1) UY26231A1 (cs)
WO (1) WO2001002369A2 (cs)
ZA (1) ZA200110061B (cs)

Families Citing this family (351)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
SI1154774T1 (en) 1999-02-10 2005-10-31 Astrazeneca Ab Quinazoline derivatives as angiogenesis inhibitors
PE20010306A1 (es) * 1999-07-02 2001-03-29 Agouron Pharma Compuestos de indazol y composiciones farmaceuticas que los contienen utiles para la inhibicion de proteina kinasa
CZ301751B6 (cs) 1999-12-24 2010-06-09 Aventis Pharma Limited Bicyklický pyrrolový derivát, farmaceutická kompozice obsahující tento derivát, tato kompozice pro použití pri lécení a použití uvedeného derivátu pri výrobe léciva
ATE279410T1 (de) 2000-02-07 2004-10-15 Bristol Myers Squibb Co 3-aminopyrazole als inhibitoren von cyclinabhängigen kinasen
EP1264820A4 (en) * 2000-03-14 2004-09-15 Fujisawa Pharmaceutical Co amide compounds
JP2004507455A (ja) 2000-04-25 2004-03-11 ブリストル−マイヤーズ　スクイブ　カンパニー サイクリン依存性キナーゼ阻害剤としての、５−チオ−、スルフィニル−およびスルホニルピラゾロ［３，４−ｂ］−ピリジンの用途
NZ523358A (en) 2000-08-09 2004-09-24 Astrazeneca Ab Quinoline derivatives having VEGF inhibiting activity
ES2317923T3 (es) 2000-08-09 2009-05-01 Astrazeneca Ab Compuestos de cinolina.
AU2001293233A1 (en) 2000-09-01 2002-03-13 Chiron Corporation Aza heterocyclic derivatives and their therapeutic use
JP4361727B2 (ja) 2000-09-11 2009-11-11 ノバルティス バクシンズ アンド ダイアグノスティックス，インコーポレーテッド チロシンキナーゼインヒビターとしてのキノリノン誘導体
JP3712393B2 (ja) 2000-10-20 2005-11-02 エーザイ株式会社 含窒素芳香環誘導体
TWI243164B (en) 2001-02-13 2005-11-11 Aventis Pharma Gmbh Acylated indanyl amines and their use as pharmaceuticals
GB0115109D0 (en) 2001-06-21 2001-08-15 Aventis Pharma Ltd Chemical compounds
EP1401831A1 (en) * 2001-07-03 2004-03-31 Chiron Corporation Indazole benzimidazole compounds as tyrosine and serine/threonine kinase inhibitors
US7642278B2 (en) 2001-07-03 2010-01-05 Novartis Vaccines And Diagnostics, Inc. Indazole benzimidazole compounds
WO2003024969A1 (en) 2001-09-14 2003-03-27 Merck & Co., Inc. Tyrosine kinase inhibitors
FR2831537B1 (fr) * 2001-10-26 2008-02-29 Aventis Pharma Sa Nouveaux derives de benzimidazoles, leur procede de preparation, leur application a titre de medicament, compositions pharmaceutiques et nouvelle utilisation
US6897208B2 (en) * 2001-10-26 2005-05-24 Aventis Pharmaceuticals Inc. Benzimidazoles
FR2831536A1 (fr) * 2001-10-26 2003-05-02 Aventis Pharma Sa Nouveaux derives de benzimidazoles, leur procede de preparation, leur application a titre de medicament, compositions pharmaceutiques et nouvelle utilisation notamment comme inhibiteurs de kdr
IL161576A0 (en) * 2001-10-26 2004-09-27 Aventis Pharma Inc Benzimidazoles and analogues and their use as protein kinases inhibitors
JP4608215B2 (ja) 2002-02-01 2011-01-12 アストラゼネカ アクチボラグ キナゾリン化合物
US7166293B2 (en) 2002-03-29 2007-01-23 Carlsbad Technology, Inc. Angiogenesis inhibitors
US20050119278A1 (en) * 2002-05-16 2005-06-02 Che-Ming Teng Anti-angiogenesis methods
MXPA05001688A (es) 2002-08-12 2005-04-19 Sugen Inc 3-pirrolil-piridopirazoles y 3-pirrolil-indazoles como inhibidores de cinasa novedosos.
JP4613130B2 (ja) 2002-08-23 2011-01-12 ノバルティス バクシンズ アンド ダイアグノスティックス，インコーポレーテッド ベンゾイミダゾールキノリノンおよびそれらの使用
AU2003289287A1 (en) * 2002-12-03 2004-06-23 Kyowa Hakko Kogyo Co., Ltd. Jnk inhibitor
BR0317548A (pt) * 2002-12-19 2005-11-22 Pfizer Compostos de indazole e composições farmacêuticas para a inibição de proteìnas-cinases e métodos para o seu uso
US7192976B2 (en) 2002-12-21 2007-03-20 Angion Biomedica Corporation Small molecule modulators of hepatocyte growth factor (scatter factor) activity
US7135575B2 (en) 2003-03-03 2006-11-14 Array Biopharma, Inc. P38 inhibitors and methods of use thereof
PL214032B1 (pl) 2003-03-03 2013-06-28 Array Biopharma Zwiazki bedace inhibitorami kinazy p38, kompozycja farmaceutyczna je zawierajaca oraz ich zastosowanie do wytwarzania leku do leczenia stanu, w którym posredniczy kinaza p38
BRPI0409230A (pt) * 2003-04-03 2006-03-28 Pfizer formas de dosagem compreendendo ag013736
EP1618133A1 (en) * 2003-04-17 2006-01-25 Pfizer Inc. Crystal structure of vegfrkd: ligand complexes and methods of use thereof
FR2854159B1 (fr) * 2003-04-25 2008-01-11 Aventis Pharma Sa Nouveaux derives de l'indole, leur preparation a titre de medicaments, compositions pharmaceutiques et notamment comme inhibiteurs de kdr
TWI372050B (en) 2003-07-03 2012-09-11 Astex Therapeutics Ltd (morpholin-4-ylmethyl-1h-benzimidazol-2-yl)-1h-pyrazoles
NZ544756A (en) 2003-07-22 2009-09-25 Astex Therapeutics Ltd 3,4-Disubstituted 1H-pyrazole compounds and their use as cyclin dependent kinases (CDK) and glycogen synthase kinase-3 (GSK-3) modulators
AU2004259012C1 (en) * 2003-07-23 2012-08-02 Exelixis, Inc. Anaplastic lymphoma kinase modulators and methods of use
MXPA05011420A (es) 2003-07-30 2005-12-12 Kyowa Hakko Kogyo Kk Derivados de indazol.
US20060281789A1 (en) * 2003-07-30 2006-12-14 Kyowa Hakko Kogyo Co., Ltd Protein kinase inhibitors
US7494983B2 (en) * 2003-09-04 2009-02-24 Merck & Co. Inc. Ophthalmic compositions for treating ocular hypertension
WO2005028624A2 (en) * 2003-09-15 2005-03-31 Plexxikon, Inc. Molecular scaffolds for kinase ligand development
US20050182061A1 (en) * 2003-10-02 2005-08-18 Jeremy Green Phthalimide compounds useful as protein kinase inhibitors
CN102225926A (zh) 2003-11-07 2011-10-26 诺华疫苗和诊断公司 具有改进药物特性的喹啉酮类化合物的药学上可接受的盐
WO2005044788A1 (ja) 2003-11-11 2005-05-19 Eisai Co., Ltd. ウレア誘導体およびその製造方法
NZ547689A (en) * 2003-11-19 2009-05-31 Signal Pharm Llc Indazole compounds and methods of use thereof as protein kinase inhibitors
GB0330002D0 (en) 2003-12-24 2004-01-28 Astrazeneca Ab Quinazoline derivatives
JP2007523937A (ja) 2004-02-27 2007-08-23 エフ．ホフマン−ラ　ロシュ　アーゲー インダゾール誘導体およびそれを含む医薬組成物
JP2007526324A (ja) * 2004-03-02 2007-09-13 スミスクライン・ビーチャム・コーポレイション Ａｋｔ活性のある阻害剤
WO2005094823A1 (ja) * 2004-03-30 2005-10-13 Kyowa Hakko Kogyo Co., Ltd. Ｆｌｔ－３阻害剤
WO2005108370A1 (ja) * 2004-04-16 2005-11-17 Ajinomoto Co., Inc. ベンゼン化合物
CN101031293A (zh) 2004-05-06 2007-09-05 普莱希科公司 Pde4b抑制剂及其应用
BRPI0512261A (pt) * 2004-06-17 2008-02-26 Wyeth Corp antagonistas de receptor de hormÈnio liberador de gonadotropina
CN1968948A (zh) * 2004-06-17 2007-05-23 惠氏公司 用于制备促性腺激素释放激素受体拮抗剂的方法
BRPI0514687A (pt) * 2004-08-26 2008-06-17 Pfizer compostos amino heteroarila como inibidores de proteìna tirosina cinase
EP1786813A2 (en) 2004-09-03 2007-05-23 Plexxikon, Inc. Bicyclic heteroaryl pde4b inhibitors
KR20070053205A (ko) 2004-09-17 2007-05-23 에자이 알앤드디 매니지먼트 가부시키가이샤 의약 조성물
EP1647549A1 (en) * 2004-10-14 2006-04-19 Laboratoire Theramex Indazoles, benzisoxazoles and benzisothiazoles as estrogenic agents
AU2005300241A1 (en) * 2004-11-02 2006-05-11 Pfizer Inc. Methods for preparing indazole compounds
BRPI0517924A (pt) * 2004-11-02 2008-10-21 Pfizer formas polimórficas de 6-[2(metilcarbamoil) fenilsufanil]-3-e-[2-(piridin-2-il)etenil] indazol
EP1809625A1 (en) * 2004-11-02 2007-07-25 Pfizer, Inc. Methods for preparing indazole compounds
WO2006068760A2 (en) 2004-11-19 2006-06-29 The Regents Of The University Of California Anti-inflammatory pyrazolopyrimidines
FR2878442B1 (fr) * 2004-11-29 2008-10-24 Aventis Pharma Sa THIENO(2,3-c)PYRAZOLES SUBSTITUES, PROCEDE DE PREPARATION, COMPOSITIONS LES CONTENANT ET UTILISATION
US20060142247A1 (en) * 2004-12-17 2006-06-29 Guy Georges Tricyclic heterocycles
WO2006070195A1 (en) 2004-12-30 2006-07-06 Astex Therapeutics Limited Pyrazole compounds that modulate the activity of cdk, gsk and aurora kinases
US7622583B2 (en) 2005-01-14 2009-11-24 Chemocentryx, Inc. Heteroaryl sulfonamides and CCR2
US8404718B2 (en) 2005-01-21 2013-03-26 Astex Therapeutics Limited Combinations of pyrazole kinase inhibitors
AR054425A1 (es) 2005-01-21 2007-06-27 Astex Therapeutics Ltd Sales de adicion de piperidin 4-il- amida de acido 4-(2,6-dicloro-benzoilamino) 1h-pirazol-3-carboxilico.
MX2007008810A (es) 2005-01-21 2007-11-21 Astex Therapeutics Ltd Compuestos farmaceuticos.
ES2552338T3 (es) 2005-01-21 2015-11-27 Astex Therapeutics Limited Compuestos farmacéuticos
JP4804480B2 (ja) * 2005-01-26 2011-11-02 シェーリング コーポレイション 癌の処置のためのプロテインキナーゼインヒビターとしての、３−（インダゾール−５−イル）−（１，２，４）トリアジン誘導体、および関連する化合物
WO2006080450A1 (ja) * 2005-01-27 2006-08-03 Kyowa Hakko Kogyo Co., Ltd. Igf-1r阻害剤
US7582634B2 (en) 2005-02-18 2009-09-01 Wyeth 7-substituted imidazo[4,5-c]pyridine antagonists of gonadotropin releasing hormone receptor
US7538113B2 (en) 2005-02-18 2009-05-26 Wyeth 4-substituted imidazo[4,5-c]pyridine antagonists of gonadotropin releasing hormone receptor
US7534796B2 (en) 2005-02-18 2009-05-19 Wyeth Imidazo[4,5-b]pyridine antagonists of gonadotropin releasing hormone receptor
JP5545925B2 (ja) 2005-05-17 2014-07-09 ノバルティス アーゲー ヘテロ環化合物の合成方法
US7531542B2 (en) 2005-05-18 2009-05-12 Wyeth Benzooxazole and benzothiazole antagonists of gonadotropin releasing hormone receptor
EP1885338A1 (en) * 2005-05-19 2008-02-13 Pfizer, Inc. Pharmaceutical compostions comprising an amorphous form of a vegf-r inhibitor
CN101228161B (zh) * 2005-05-20 2012-10-10 沃泰克斯药物股份有限公司 适用作蛋白激酶抑制剂的吡咯并吡啶类
US7582636B2 (en) 2005-05-26 2009-09-01 Wyeth Piperazinylimidazopyridine and piperazinyltriazolopyridine antagonists of Gonadotropin Releasing Hormone receptor
WO2006130673A1 (en) 2005-05-31 2006-12-07 Janssen Pharmaceutica, N.V. 3-benzoimidazolyl-pyrazolopyridines useful in treating kinase disorders
US7888381B2 (en) 2005-06-14 2011-02-15 Bristol-Myers Squibb Company Modulators of glucocorticoid receptor, AP-1, and/or NF-κB activity, and use thereof
EP1925676A4 (en) 2005-08-02 2010-11-10 Eisai R&D Man Co Ltd TEST METHOD FOR THE EFFECT OF A VASCULARIZATION INHIBITOR
PL1957074T3 (pl) 2005-11-29 2014-08-29 Novartis Ag Preparaty chinolinonów
TW200732305A (en) * 2005-12-23 2007-09-01 Yung Shin Pharmaceutical Ind Cancer chemotherapy
DK1981851T3 (da) 2006-01-31 2012-03-19 Array Biopharma Inc Kinaseinhibitorer og fremgangsmåder til anvendelse deraf
WO2007107346A1 (en) * 2006-03-23 2007-09-27 F. Hoffmann-La Roche Ag Substituted indazole derivatives, their manufacture and use as pharmaceutical agents
KR20130087054A (ko) 2006-04-04 2013-08-05 더 리젠트스 오브 더 유니이버시티 오브 캘리포니아 키나제 길항물질
CN101443009A (zh) 2006-05-18 2009-05-27 卫材R&D管理有限公司 针对甲状腺癌的抗肿瘤剂
WO2008001886A1 (fr) 2006-06-30 2008-01-03 Kyowa Hakko Kirin Co., Ltd. Inhibiteur d'aurora
CN101484427A (zh) 2006-06-30 2009-07-15 协和发酵麒麟株式会社 Abl激酶抑制剂
US8519135B2 (en) 2006-07-14 2013-08-27 Chemocentryx, Inc. Heteroaryl sulfonamides and CCR2/CCR9
JPWO2008020606A1 (ja) * 2006-08-16 2010-01-07 協和発酵キリン株式会社 血管新生阻害剤
CN101511793B (zh) * 2006-08-28 2011-08-03 卫材R&D管理有限公司 针对未分化型胃癌的抗肿瘤剂
CL2007002617A1 (es) 2006-09-11 2008-05-16 Sanofi Aventis Compuestos derivados de pirrolo[2,3-b]pirazin-6-ilo; composicion farmaceutica que comprende a dichos compuestos; y su uso para tratar inflamacion de las articulaciones, artritis reumatoide, tumores, linfoma de las celulas del manto.
AU2008211952B2 (en) 2007-01-29 2012-07-19 Eisai R & D Management Co., Ltd. Composition for treatment of undifferentiated-type of gastric cancer
US20100104567A1 (en) 2007-03-05 2010-04-29 Kyowa Hakko Kirin Co., Ltd. Pharmaceutical composition
CN103087043A (zh) * 2007-03-16 2013-05-08 中国人民解放军军事医学科学院放射与辐射医学研究所 具有抗增殖活性的苯甲酰胺类衍生物及其药用制剂
US8791140B2 (en) * 2007-04-05 2014-07-29 Pfizer Inc. Crystalline forms of 6-[2-(methylcarbamoyl)phenylsulfanyl]-3-E-[2-(pyridin-2-yl)ethenyondazole suitable for the treatment of abnormal cell growth in mammals
DE602008003055D1 (de) 2007-05-31 2010-12-02 Nerviano Medical Sciences Srl Zyklokondensierte Azaindole, die als Kinase-Hemmer wirken
WO2009009740A1 (en) 2007-07-12 2009-01-15 Chemocentryx, Inc. Fused heteroaryl pyridyl and phenyl benzenesuflonamides as ccr2 modulators for the treament of inflammation
WO2009046448A1 (en) 2007-10-04 2009-04-09 Intellikine, Inc. Chemical entities and therapeutic uses thereof
JP5562859B2 (ja) * 2007-10-11 2014-07-30 バーテックス ファーマシューティカルズ インコーポレイテッド 電位開口型ナトリウムチャネルの阻害剤として有用なアリールアミド
CA2704266A1 (en) 2007-11-02 2009-06-11 Vertex Pharmaceuticals Incorporated [1h- pyrazolo [3, 4-b] pyridine-4-yl] -phenyle or -pyridin-2-yle derivatives as protein kinase c-theta
WO2009060945A1 (ja) 2007-11-09 2009-05-14 Eisai R & D Management Co., Ltd. 血管新生阻害物質と抗腫瘍性白金錯体との併用
MY172151A (en) 2008-01-04 2019-11-14 Intellikine Llc Certain chemical entities, compositions and methods
US8193182B2 (en) 2008-01-04 2012-06-05 Intellikine, Inc. Substituted isoquinolin-1(2H)-ones, and methods of use thereof
WO2009114874A2 (en) 2008-03-14 2009-09-17 Intellikine, Inc. Benzothiazole kinase inhibitors and methods of use
WO2009114870A2 (en) 2008-03-14 2009-09-17 Intellikine, Inc. Kinase inhibitors and methods of use
CN102015656A (zh) 2008-04-28 2011-04-13 旭化成制药株式会社 苯丙酸衍生物及其用途
JP5788316B2 (ja) 2008-07-08 2015-09-30 インテリカイン， エルエルシー キナーゼインヒビターおよび使用方法
US20110224223A1 (en) 2008-07-08 2011-09-15 The Regents Of The University Of California, A California Corporation MTOR Modulators and Uses Thereof
WO2010005580A2 (en) 2008-07-10 2010-01-14 Angion Biomedica Corp. Methods and compositions of small molecule modulators of hepatocyte growth factor (scatter factor) activity
JP5731978B2 (ja) 2008-09-26 2015-06-10 インテリカイン， エルエルシー 複素環キナーゼ阻害剤
CA2740885C (en) 2008-10-16 2018-04-03 The Regents Of The University Of California Fused ring heteroaryl kinase inhibitors
US8476431B2 (en) 2008-11-03 2013-07-02 Itellikine LLC Benzoxazole kinase inhibitors and methods of use
MY159575A (en) * 2009-04-02 2017-01-13 Merck Serono Sa Dihydroorotate dehydrogenase inhibitors
WO2010129816A2 (en) 2009-05-07 2010-11-11 Intellikine, Inc. Heterocyclic compounds and uses thereof
ES2835553T3 (es) 2009-08-10 2021-06-22 Biosplice Therapeutics Inc Inhibidores de indazol de la vía de señalización de Wnt y sus usos terapéuticos
WO2011047384A2 (en) 2009-10-16 2011-04-21 The Regents Of The University Of California Methods of inhibiting ire1
WO2011073521A1 (en) 2009-12-15 2011-06-23 Petri Salven Methods for enriching adult-derived endothelial progenitor cells and uses thereof
EP3305073B1 (en) 2009-12-21 2019-05-15 Samumed, LLC 1h-pyrazolo[3,4-b]pyridines and therapeutic uses thereof
US9180127B2 (en) 2009-12-29 2015-11-10 Dana-Farber Cancer Institute, Inc. Type II Raf kinase inhibitors
UY33236A (es) 2010-02-25 2011-09-30 Novartis Ag Inhibidores dimericos de las iap
KR20130006664A (ko) * 2010-03-16 2013-01-17 다나-파버 캔서 인스티튜트 인크. 인다졸 화합물 및 그의 용도
JP5951600B2 (ja) 2010-05-21 2016-07-13 インフィニティー ファーマシューティカルズ， インコーポレイテッド キナーゼ調節のための、化合物、組成物および方法
CN102958523B (zh) 2010-06-25 2014-11-19 卫材R&D管理有限公司 使用具有激酶抑制作用的组合的抗肿瘤剂
CN103261225A (zh) 2010-07-23 2013-08-21 波士顿大学董事会 作为用于抑制病理性血管生成和肿瘤细胞侵袭力的治疗剂以及用于分子成像和靶向递送的抗DEspR抑制剂
CA2817577A1 (en) 2010-11-10 2012-05-18 Infinity Pharmaceuticals, Inc. Heterocyclic compounds and uses thereof
UY33794A (es) 2010-12-13 2012-07-31 Novartis Ag Inhibidores diméricos de las iap
US20130266590A1 (en) 2010-12-13 2013-10-10 Novartis Ag Dimeric iap inhibitors
US8754114B2 (en) 2010-12-22 2014-06-17 Incyte Corporation Substituted imidazopyridazines and benzimidazoles as inhibitors of FGFR3
CA2824197C (en) 2011-01-10 2020-02-25 Michael Martin Processes for preparing isoquinolinones and solid forms of isoquinolinones
CN103491962B (zh) 2011-02-23 2016-10-12 因特利凯有限责任公司 激酶抑制剂的组合及其用途
BR112013025142A2 (pt) * 2011-04-01 2019-09-24 Univ Utah Res Found análogos de 3-(1h-benzo{d}imidazol-2-il)-1h-indazol substituído como inibidores da cinase pdk1
MX2013009931A (es) 2011-04-18 2013-10-01 Eisai R&D Man Co Ltd Agentes terapeuticos contra tumores.
JP6038128B2 (ja) 2011-06-03 2016-12-07 エーザイ・アール・アンド・ディー・マネジメント株式会社 レンバチニブ化合物に対する甲状腺癌対象及び腎臓癌対象の反応性を予測及び評価するためのバイオマーカー
AU2012284091B2 (en) 2011-07-19 2015-11-12 Infinity Pharmaceuticals Inc. Heterocyclic compounds and uses thereof
AU2012284088B2 (en) 2011-07-19 2015-10-08 Infinity Pharmaceuticals Inc. Heterocyclic compounds and uses thereof
US8575336B2 (en) * 2011-07-27 2013-11-05 Pfizer Limited Indazoles
AU2012302197B2 (en) 2011-08-29 2016-01-07 Infinity Pharmaceuticals Inc. Heterocyclic compounds and uses thereof
AU2012341028C1 (en) 2011-09-02 2017-10-19 Mount Sinai School Of Medicine Substituted pyrazolo[3,4-D]pyrimidines and uses thereof
CN102432595B (zh) * 2011-09-14 2013-09-25 湖南有色凯铂生物药业有限公司 N-吲哚-1-酰胺类化合物及作为抗癌药物的应用
MX390742B (es) 2011-09-14 2025-03-21 Samumed Llc Indazol-3-carboxamidas y su uso como inhibidores de la trayectoria de señalizacion de wnt/b-catenina.
JP6026544B2 (ja) 2011-09-27 2016-11-16 ノバルティス アーゲー 変異体ｉｄｈの阻害剤としての３−ピリミジン−４−イル−オキサゾリジン−２−オン類
EP2822935B1 (en) 2011-11-17 2019-05-15 Dana-Farber Cancer Institute, Inc. Inhibitors of c-jun-n-terminal kinase (jnk)
WO2013084138A1 (en) 2011-12-05 2013-06-13 Novartis Ag Cyclic urea derivatives as androgen receptor antagonists
FR2985257B1 (fr) * 2011-12-28 2014-02-14 Sanofi Sa Composes dimeres agonistes des recepteurs des fgfs (fgfrs), leur procede de preparation et leur application en therapeutique
US10023862B2 (en) 2012-01-09 2018-07-17 Arrowhead Pharmaceuticals, Inc. Organic compositions to treat beta-catenin-related diseases
JO3357B1 (ar) 2012-01-26 2019-03-13 Novartis Ag مركبات إيميدازوبيروليدينون
PH12017500997A1 (en) 2012-04-04 2018-02-19 Samumed Llc Indazole inhibitors of the wnt signal pathway and therapeutic uses thereof
US8940742B2 (en) 2012-04-10 2015-01-27 Infinity Pharmaceuticals, Inc. Heterocyclic compounds and uses thereof
SG10201710585UA (en) 2012-05-04 2018-02-27 Samumed Llc 1h-pyrazolo[3,4-b]pyridines and therapeutic uses thereof
DK3176170T3 (en) 2012-06-13 2019-01-28 Incyte Holdings Corp SUBSTITUTED TRICYCLIC RELATIONS AS FGFR INHIBITORS
JP6231262B2 (ja) * 2012-06-20 2017-11-15 大日本印刷株式会社 ピタバスタチンカルシウムの前駆体の製造法
US8828998B2 (en) 2012-06-25 2014-09-09 Infinity Pharmaceuticals, Inc. Treatment of lupus, fibrotic conditions, and inflammatory myopathies and other disorders using PI3 kinase inhibitors
US9388185B2 (en) 2012-08-10 2016-07-12 Incyte Holdings Corporation Substituted pyrrolo[2,3-b]pyrazines as FGFR inhibitors
MX2015003874A (es) 2012-09-26 2015-12-16 Univ California Modulacion de ire1.
WO2014063068A1 (en) 2012-10-18 2014-04-24 Dana-Farber Cancer Institute, Inc. Inhibitors of cyclin-dependent kinase 7 (cdk7)
US10000483B2 (en) 2012-10-19 2018-06-19 Dana-Farber Cancer Institute, Inc. Bone marrow on X chromosome kinase (BMX) inhibitors and uses thereof
US9758522B2 (en) 2012-10-19 2017-09-12 Dana-Farber Cancer Institute, Inc. Hydrophobically tagged small molecules as inducers of protein degradation
AU2013337717B2 (en) 2012-11-01 2018-10-25 Infinity Pharmaceuticals, Inc. Treatment of cancers using PI3 kinase isoform modulators
CN103804349A (zh) * 2012-11-01 2014-05-21 杨子娇 一类治疗青光眼的化合物及其用途
US9266892B2 (en) 2012-12-19 2016-02-23 Incyte Holdings Corporation Fused pyrazoles as FGFR inhibitors
US9334239B2 (en) 2012-12-21 2016-05-10 Eisai R&D Management Co., Ltd. Amorphous form of quinoline derivative, and method for producing same
JP6355648B2 (ja) 2013-01-08 2018-07-11 サミュメッド リミテッド ライアビリティ カンパニー Ｗｎｔシグナル伝達経路の３−（ベンゾイミダゾール−２−イル）−インダゾール阻害剤およびそれらの治療的使用
CN104370889A (zh) * 2013-01-24 2015-02-25 韩冰 一类降低眼压的化合物及其制备方法和用途
EP2952510B1 (en) * 2013-02-02 2018-12-26 Chia Tai Tianqing Pharmaceutical Group Co.,Ltd Substituted 2-aminopyridine protein kinase inhibitor
EP2958907B1 (en) 2013-02-19 2018-02-28 Novartis AG Benzothiophene derivatives and compositions thereof as selective estrogen receptor degraders
WO2014141153A1 (en) 2013-03-14 2014-09-18 Novartis Ag 3-pyrimidin-4-yl-oxazolidin-2-ones as inhibitors of mutant idh
ES2665619T3 (es) 2013-03-14 2018-04-26 Novartis Ag 3-Pirimidin-4-il-oxazolidin-2-onas como inhibidores de IDH mutante
US9481667B2 (en) 2013-03-15 2016-11-01 Infinity Pharmaceuticals, Inc. Salts and solid forms of isoquinolinones and composition comprising and methods of using the same
WO2014147586A1 (en) 2013-03-22 2014-09-25 Novartis Ag 1-(2-(ethylamino)pyrimidin-4-yl)pyrrolidin-2-ones as inhibitors of mutant idh
CA3130452C (en) 2013-04-19 2023-10-31 Incyte Holdings Corporation Bicyclic heterocycles as fgfr inhibitors
WO2014185540A1 (en) 2013-05-14 2014-11-20 Eisai R&D Management Co., Ltd. Biomarkers for predicting and assessing responsiveness of endometrial cancer subjects to lenvatinib compounds
US20150018376A1 (en) 2013-05-17 2015-01-15 Novartis Ag Pyrimidin-4-yl)oxy)-1h-indole-1-carboxamide derivatives and use thereof
CN103387565B (zh) * 2013-07-29 2014-10-29 苏州明锐医药科技有限公司 阿西替尼的制备方法
EP3052485B1 (en) 2013-10-04 2021-07-28 Infinity Pharmaceuticals, Inc. Heterocyclic compounds and uses thereof
WO2015051241A1 (en) 2013-10-04 2015-04-09 Infinity Pharmaceuticals, Inc. Heterocyclic compounds and uses thereof
AU2014337044A1 (en) 2013-10-18 2016-05-05 Dana-Farber Cancer Institute, Inc. Polycyclic inhibitors of cyclin-dependent kinase 7 (CDK7)
EP3057955B1 (en) 2013-10-18 2018-04-11 Syros Pharmaceuticals, Inc. Heteroaromatic compounds useful for the treatment of prolferative diseases
CN103570696B (zh) * 2013-11-06 2016-02-24 湖南欧亚生物有限公司 一种阿西替尼中间体的制备方法以及在制备阿西替尼中的应用
WO2015067224A1 (en) 2013-11-08 2015-05-14 Zentiva, K.S. Salts of 6-[2-(methylcarbamoyl)phenylsulfanyl]-3-e-[2-(pyridin-2-yl)ethanyl] indazole
WO2015092634A1 (en) 2013-12-16 2015-06-25 Novartis Ag 1,2,3,4-tetrahydroisoquinoline compounds and compositions as selective estrogen receptor antagonists and degraders
JP6523303B2 (ja) 2014-01-17 2019-05-29 ノバルティス アーゲー Ｓｈｐ２の活性を阻害するための１−ピリダジン／トリアジン−３−イル−ピペラジン／ピペリジン／ピロリジン誘導体およびその組成物
JO3517B1 (ar) 2014-01-17 2020-07-05 Novartis Ag ان-ازاسبيرو الكان حلقي كبديل مركبات اريل-ان مغايرة وتركيبات لتثبيط نشاط shp2
CN105899493B (zh) 2014-01-17 2019-03-29 诺华股份有限公司 用于抑制shp2活性的1-(三嗪-3-基/哒嗪-3-基)-哌(-嗪)啶衍生物及其组合物
EA201691872A1 (ru) 2014-03-19 2017-04-28 Инфинити Фармасьютикалз, Инк. Гетероциклические соединения для применения в лечении pi3k-гамма-опосредованных расстройств
EP3127900B1 (en) * 2014-03-31 2017-10-18 Senju Pharmaceutical Co., Ltd. Alkynyl indazole derivative and use thereof
US20150320755A1 (en) 2014-04-16 2015-11-12 Infinity Pharmaceuticals, Inc. Combination therapies
WO2015164614A1 (en) 2014-04-23 2015-10-29 Dana-Farber Cancer Institute, Inc. Janus kinase inhibitors and uses thereof
US9862688B2 (en) 2014-04-23 2018-01-09 Dana-Farber Cancer Institute, Inc. Hydrophobically tagged janus kinase inhibitors and uses thereof
CA2947939A1 (en) 2014-05-28 2015-12-03 Idenix Pharmaceuticals Llc Nucleoside derivatives for the treatment of cancer
CN104072484B (zh) * 2014-07-07 2016-07-06 渤海大学 氮-(4-(芳巯基)-1氢-吲唑-3-基)-1-(芳杂环取代)甲基亚胺类化合物及其药学上可接受的盐及其制备方法和应用
AR101196A1 (es) 2014-07-16 2016-11-30 Gruenenthal Gmbh Compuestos de pirimidina sustituidos
AR101198A1 (es) 2014-07-16 2016-11-30 Gruenenthal Gmbh Pirimidinas 2,5-sustituidas como inhibidores de pde4b
SG10202100272RA (en) 2014-08-28 2021-02-25 Eisai R&D Man Co Ltd High-purity quinoline derivative and method for manufacturing same
WO2016040184A1 (en) 2014-09-08 2016-03-17 Samumed, Llc 3-(3h-imidazo[4,5-b]pyridin-2-yl)-1h-pyrazolo[3,4-c]pyridine and therapeutic uses thereof
WO2016040190A1 (en) 2014-09-08 2016-03-17 Samumed, Llc 3-(3h-imidazo[4,5-b]pyridin-2-yl)-1h-pyrazolo[3,4-b]pyridine and therapeutic uses thereof
WO2016040182A1 (en) 2014-09-08 2016-03-17 Samumed, Llc 2-(1h-indazol-3-yl)-1h-imidazo[4,5-c]pyridine and therapeutic uses thereof
WO2016040180A1 (en) 2014-09-08 2016-03-17 Samumed, Llc 3-(1h-benzo[d]imidazol-2-yl)-1h-pyrazolo[3,4-c]pyridine and therapeutic uses thereof
WO2016040188A1 (en) 2014-09-08 2016-03-17 Samumed, Llc 3-(3h-imidazo[4,5-c]pyridin-2-yl)-1h-pyrazolo[3,4-c]pyridine and therapeutic uses thereof
WO2016040185A1 (en) 2014-09-08 2016-03-17 Samumed, Llc 2-(1h-indazol-3-yl)-3h-imidazo[4,5-b]pyridine and therapeutic uses thereof
WO2016040193A1 (en) 2014-09-08 2016-03-17 Samumed, Llc 3-(1h-imidazo[4,5-c]pyridin-2-yl)-1h-pyrazolo[3,4-b]pyridine and therapeutic uses thereof
WO2016040181A1 (en) 2014-09-08 2016-03-17 Samumed, Llc 3-(1h-imidazo[4,5-c]pyridin-2-yl)-1h-pyrazolo[3,4-c]pyridine and therapeutic uses thereof
AU2015318111A1 (en) 2014-09-17 2017-04-13 Celgene Quanticel Research, Inc. Histone demethylase inhibitors
WO2016054491A1 (en) 2014-10-03 2016-04-07 Infinity Pharmaceuticals, Inc. Heterocyclic compounds and uses thereof
US10851105B2 (en) 2014-10-22 2020-12-01 Incyte Corporation Bicyclic heterocycles as FGFR4 inhibitors
WO2016089797A1 (en) 2014-12-05 2016-06-09 Merck Sharp & Dohme Corp. Novel tricyclic compounds as inhibitors of mutant idh enzymes
US10086000B2 (en) 2014-12-05 2018-10-02 Merck Sharp & Dohme Corp. Tricyclic compounds as inhibitors of mutant IDH enzymes
US10508108B2 (en) 2014-12-05 2019-12-17 Merck Sharp & Dohme Corp. Tricyclic compounds as inhibitors of mutant IDH enzymes
MA41140A (fr) 2014-12-12 2017-10-17 Cancer Research Tech Ltd Dérivés de 2,4-dioxo-quinazoline-6-sulfonamide en tant qu'inhibiteurs de la parg
MA41179A (fr) 2014-12-19 2017-10-24 Cancer Research Tech Ltd Composés inhibiteurs de parg
CA2972239A1 (en) 2014-12-23 2016-06-30 Dana-Farber Cancer Institute, Inc. Inhibitors of cyclin-dependent kinase 7 (cdk7)
SG11201705767PA (en) 2015-01-13 2017-08-30 Univ Kyoto Agent for preventing and/or treating amyotrophic lateral sclerosis
MX373169B (es) 2015-02-20 2020-04-24 Incyte Holdings Corp Heterociclos bicíclicos como inhibidores de receptores del factor de crecimiento fibroblástico (fgfr).
US9580423B2 (en) 2015-02-20 2017-02-28 Incyte Corporation Bicyclic heterocycles as FGFR4 inhibitors
MA41551A (fr) 2015-02-20 2017-12-26 Incyte Corp Hétérocycles bicycliques utilisés en tant qu'inhibiteurs de fgfr4
MX385403B (es) 2015-02-25 2025-03-18 Eisai R&D Man Co Ltd Método para suprimir el amargor de un derivado de quinoleína.
WO2016140717A1 (en) 2015-03-04 2016-09-09 Merck Sharp & Dohme Corp. Combination of a pd-1 antagonist and a vegfr/fgfr/ret tyrosine kinase inhibitor for treating cancer
WO2016160617A2 (en) 2015-03-27 2016-10-06 Dana-Farber Cancer Institute, Inc. Inhibitors of cyclin-dependent kinases
US9580406B2 (en) 2015-04-28 2017-02-28 Signa S.A. De C.V. Processes for the preparation of axitinib
WO2016189055A1 (en) 2015-05-27 2016-12-01 Idenix Pharmaceuticals Llc Nucleotides for the treatment of cancer
EP4335418A3 (en) 2015-06-06 2024-05-22 Cloudbreak Therapeutics, LLC Compositions and methods for treating pterygium
US10702527B2 (en) 2015-06-12 2020-07-07 Dana-Farber Cancer Institute, Inc. Combination therapy of transcription inhibitors and kinase inhibitors
US11369623B2 (en) 2015-06-16 2022-06-28 Prism Pharma Co., Ltd. Anticancer combination of a CBP/catenin inhibitor and an immune checkpoint inhibitor
JP6718889B2 (ja) 2015-06-19 2020-07-08 ノバルティス アーゲー Ｓｈｐ２の活性を阻害するための化合物および組成物
ES2741746T3 (es) 2015-06-19 2020-02-12 Novartis Ag Compuestos y composiciones para inhibir la actividad de SHP2
EP3310771B1 (en) 2015-06-19 2020-07-22 Novartis AG Compounds and compositions for inhibiting the activity of shp2
GB201511382D0 (en) 2015-06-29 2015-08-12 Imp Innovations Ltd Novel compounds and their use in therapy
GB201511790D0 (en) 2015-07-06 2015-08-19 Iomet Pharma Ltd Pharmaceutical compound
US10519169B2 (en) 2015-08-03 2019-12-31 Samumed, Llc 3-(1H-pyrrolo[2,3-C]pyridin-2-yl)-1 H-pyrazolo[4,3-B]pyridines and therapeutic uses thereof
WO2017023972A1 (en) 2015-08-03 2017-02-09 Samumed, Llc. 3-(1h-imidazo[4,5-c]pyridin-2-yl)-1h-pyrazolo[4,3-b]pyridines and therapeutic uses thereof
WO2017023980A1 (en) 2015-08-03 2017-02-09 Samumed, Llc. 3-(1h-pyrrolo[2,3-b]pyridin-2-yl)-1h-pyrazolo[3,4-c]pyridines and therapeutic uses thereof
US10188634B2 (en) 2015-08-03 2019-01-29 Samumed, Llc 3-(3H-imidazo[4,5-C]pyridin-2-yl)-1 H-pyrazolo[4,3-B]pyridines and therapeutic uses thereof
WO2017023986A1 (en) 2015-08-03 2017-02-09 Samumed, Llc 3-(1h-indol-2-yl)-1h-indazoles and therapeutic uses thereof
US10329309B2 (en) 2015-08-03 2019-06-25 Samumed, Llc 3-(3H-imidazo[4,5-B]pyridin-2-yl)-1H-pyrazolo[4,3-B]pyridines and therapeutic uses thereof
WO2017024004A1 (en) 2015-08-03 2017-02-09 Samumed, Llc. 3-(1h-pyrrolo[2,3-b]pyridin-2-yl)-1h-pyrazolo[4,3-b]pyridines and therapeutic uses thereof
US10206908B2 (en) 2015-08-03 2019-02-19 Samumed, Llc 3-(1H-pyrrolo[3,2-C]pyridin-2-YL)-1H-pyrazolo[3,4-C]pyridines and therapeutic uses thereof
WO2017023996A1 (en) 2015-08-03 2017-02-09 Samumed, Llc. 3-(1h-pyrrolo[2,3-b]pyridin-2-yl)-1h-pyrazolo[3,4-b]pyridines and therapeutic uses thereof
US10226453B2 (en) 2015-08-03 2019-03-12 Samumed, Llc 3-(1H-indol-2-yl)-1H-pyrazolo[4,3-B]pyridines and therapeutic uses thereof
US10463651B2 (en) 2015-08-03 2019-11-05 Samumed, Llc 3-(1H-pyrrolo[3,2-C]pyridin-2-YL)-1H-indazoles and therapeutic uses thereof
US10166218B2 (en) 2015-08-03 2019-01-01 Samumed, Llc 3-(1H-indol-2-yl)-1H-pyrazolo[3,4-C]pyridines and therapeutic uses thereof
WO2017023975A1 (en) 2015-08-03 2017-02-09 Samumed, Llc. 3-(1h-pyrrolo[2,3-c]pyridin-2-yl)-1h-pyrazolo[3,4-c]pyridines and therapeutic uses thereof
WO2017023989A1 (en) 2015-08-03 2017-02-09 Samumed, Llc. 3-(1h-benzo[d]imidazol-2-yl)-1h-pyrazolo[4,3-b]pyridines and therapeutic uses thereof
WO2017024021A1 (en) 2015-08-03 2017-02-09 Samumed, Llc 3-(1h-pyrrolo[2,3-b]pyridin-2-yl)-1h-indazoles and therapeutic uses thereof
US10231956B2 (en) 2015-08-03 2019-03-19 Samumed, Llc 3-(1H-pyrrolo[3,2-C]pyridin-2-YL)-1 H-pyrazolo[4,3-B]pyridines and therapeutic uses thereof
US10226448B2 (en) 2015-08-03 2019-03-12 Samumed, Llc 3-(1H-pyrrolo[3,2-C]pyridin-2-yl)-1H-pyrazolo[3,4-B]pyridines and therapeutic uses thereof
US11453697B1 (en) 2015-08-13 2022-09-27 Merck Sharp & Dohme Llc Cyclic di-nucleotide compounds as sting agonists
EP3334745B1 (en) 2015-08-13 2024-05-15 Merck Sharp & Dohme LLC Cyclic di-nucleotide compounds as sting agonists
KR102587702B1 (ko) 2015-08-20 2023-10-12 에자이 알앤드디 매니지먼트 가부시키가이샤 종양 치료제
JP7028766B2 (ja) 2015-09-09 2022-03-02 ダナ－ファーバー キャンサー インスティテュート， インコーポレイテッド サイクリン依存性キナーゼの阻害剤
WO2017048702A1 (en) 2015-09-14 2017-03-23 Infinity Pharmaceuticals, Inc. Solid forms of isoquinolinone derivatives, process of making, compositions comprising, and methods of using the same
US10736885B2 (en) * 2015-10-07 2020-08-11 Aiviva Biopharma, Inc. Compositions and methods of treating dermal fibrotic disorders
EP3365337A1 (en) * 2015-10-22 2018-08-29 Selvita S.A. Pyridone derivatives and their use as kinase inhibitors
NZ742200A (en) 2015-11-06 2023-01-27 Samumed Llc Treatment of osteoarthritis
EP3389783B1 (en) 2015-12-15 2024-07-03 Merck Sharp & Dohme LLC Novel compounds as indoleamine 2,3-dioxygenase inhibitors
WO2017161116A1 (en) 2016-03-17 2017-09-21 Infinity Pharmaceuticals, Inc. Isotopologues of isoquinolinone and quinazolinone compounds and uses thereof as pi3k kinase inhibitors
WO2017191599A1 (en) 2016-05-04 2017-11-09 Genoscience Pharma Substituted 2, 4-diamino-quinoline derivatives for use in the treatment of proliferative diseases
US10072004B2 (en) 2016-06-01 2018-09-11 Samumed, Llc Process for preparing N-(5-(3-(7-(3-fluorophenyl)-3H-imidazo [4,5-C]pyridin-2-yl)-1H-indazol-5-yl)pyridin-3-yl)-3-methylbutanamide
WO2017214269A1 (en) 2016-06-08 2017-12-14 Infinity Pharmaceuticals, Inc. Heterocyclic compounds and uses thereof
KR102457146B1 (ko) 2016-06-14 2022-10-19 노파르티스 아게 Shp2의 활성을 억제하기 위한 화합물 및 조성물
CN109640999A (zh) 2016-06-24 2019-04-16 无限药品股份有限公司 组合疗法
JOP20190070B1 (ar) 2016-10-04 2023-09-17 Merck Sharp And Dohme Llc مركبات بنزو[b] ثيوفين كناهضات محفزة لبروتين جينات الإنترفيرون
AU2017345699A1 (en) 2016-10-21 2019-05-16 Samumed, Llc Methods of using indazole-3-carboxamides and their use as Wnt/B-catenin signaling pathway inhibitors
US10758523B2 (en) 2016-11-07 2020-09-01 Samumed, Llc Single-dose, ready-to-use injectable formulations
EP3541825A1 (en) 2016-11-21 2019-09-25 Idenix Pharmaceuticals LLC. Cyclic phosphate substituted nucleoside derivatives for the treatment of liver diseases
RU2022102328A (ru) 2016-11-23 2022-04-01 Хемоцентрикс, Инк. Способ лечения фокально-сегментарного гломерулосклероза
JP7213188B2 (ja) 2017-01-27 2023-01-26 ヤンセン バイオテツク，インコーポレーテツド Ｓｔｉｎｇアゴニストとしての環状ジヌクレオチド
AU2018212788A1 (en) 2017-01-27 2019-07-25 Janssen Biotech, Inc. Cyclic dinucleotides as STING agonists
US20190388407A1 (en) 2017-02-12 2019-12-26 Aiviva Biopharma, Inc. Multikinase inhibitors of vegf and tfg beta and uses thereof
JP6803410B2 (ja) * 2017-02-14 2020-12-23 富士フイルム株式会社 インダゾール化合物の製造方法およびインダゾール化合物
WO2018208667A1 (en) 2017-05-12 2018-11-15 Merck Sharp & Dohme Corp. Cyclic di-nucleotide compounds as sting agonists
MX2019013014A (es) 2017-05-16 2020-08-06 Eisai R&D Man Co Ltd Tratamiento de carcinoma hepatocelular.
CN108947970B (zh) * 2017-05-18 2022-04-05 四川大学 吲唑类衍生物及其制备方法和用途
AR111960A1 (es) 2017-05-26 2019-09-04 Incyte Corp Formas cristalinas de un inhibidor de fgfr y procesos para su preparación
US11312772B2 (en) 2017-08-04 2022-04-26 Merck Sharp & Dohme Corp. Combinations of PD-1 antagonists and benzo [b] thiophene STING agonists for cancer treatment
EP3661498A4 (en) 2017-08-04 2021-04-21 Merck Sharp & Dohme Corp. STING THIOPHENE BENZO [B] AGONISTS FOR CANCER TREATMENT
ES2976496T3 (es) 2017-08-24 2024-08-02 Novo Nordisk As Composiciones de GLP-1 y usos de las mismas
CN118684652A (zh) 2017-09-11 2024-09-24 克鲁松制药公司 SHP2的八氢环戊二烯并[c]吡咯别构抑制剂
WO2019067332A1 (en) 2017-09-27 2019-04-04 Merck Sharp & Dohme Corp. COMPOSITIONS AND METHODS FOR TREATING CANCER THROUGH A COMBINATION OF PROGRAMMED DEATH ANTIBODY ANTIBODIES (PD-1) AND A CXCR2 ANTAGONIST
MX386699B (es) 2017-10-11 2025-03-19 Chemocentryx Inc Tratamiento de glomerulosclerosis segmentaria focal con antagonistas ccr2
WO2019089412A1 (en) 2017-11-01 2019-05-09 Merck Sharp & Dohme Corp. Novel substituted tetrahydroquinolin compounds as indoleamine 2,3-dioxygenase (ido) inhibitors
US11498904B2 (en) 2017-11-14 2022-11-15 Merck Sharp & Dohme Llc Substituted biaryl compounds as indoleamine 2,3-dioxygenase (IDO) inhibitors
EP3710444B1 (en) 2017-11-14 2023-04-12 Merck Sharp & Dohme LLC Novel substituted biaryl compounds as indoleamine 2,3-dioxygenase (ido) inhibitors
EP3724205B1 (en) 2017-12-15 2022-06-22 Janssen Biotech, Inc. Cyclic dinucleotides as sting agonists
EP3727401A4 (en) 2017-12-20 2022-04-06 Merck Sharp & Dohme Corp. CYCLIC DI-NUCLEOTIDE COMPOUNDS AS STING AGONISTS
WO2019195063A1 (en) 2018-04-03 2019-10-10 Merck Sharp & Dohme Corp. Aza-benzothiophene compounds as sting agonists
EP3774764A1 (en) 2018-04-03 2021-02-17 Merck Sharp&Dohme Corp. Benzothiophenes and related compounds as sting agonists
CN112867716B (zh) 2018-05-04 2024-09-13 因赛特公司 Fgfr抑制剂的固体形式和其制备方法
AU2019262579B2 (en) 2018-05-04 2024-09-12 Incyte Corporation Salts of an FGFR inhibitor
CN110452176A (zh) * 2018-05-07 2019-11-15 四川大学 吲唑类衍生物及其制备方法和用途
US11352320B2 (en) 2018-05-31 2022-06-07 Merck Sharp & Dohme Corp. Substituted [1.1.1] bicyclo compounds as indoleamine 2,3-dioxygenase inhibitors
WO2019245890A1 (en) 2018-06-20 2019-12-26 Merck Sharp & Dohme Corp. Arginase inhibitors and methods of use
EP3810132A4 (en) 2018-06-25 2022-06-22 Dana-Farber Cancer Institute, Inc. TAIRE FAMILY KINASE INHIBITORS AND RELATED USES
KR20210060556A (ko) 2018-09-18 2021-05-26 니캉 테라퓨틱스 인코포레이티드 Src 호몰로지-2 포스파타아제 억제제로서의 3-치환된 헤테로아릴 유도체
CN113382986A (zh) 2018-09-25 2021-09-10 黑钻治疗公司 酪氨酸激酶抑制剂组合物、其制备方法和使用方法
US20220041613A1 (en) 2018-09-25 2022-02-10 Black Diamond Therapeutics, Inc. Tyrosine kinase inhibitor compositions, methods of making and methods of use
IL305106B1 (en) 2018-09-29 2025-04-01 Novartis Ag Process for producing a compound for inhibiting the activity of SHP2
US12091405B2 (en) 2018-11-01 2024-09-17 Merck Sharp & Dohme Llc Substituted pyrazole compounds as indoleamine 2,3-dioxygenase inhibitors
EP3877366A4 (en) 2018-11-06 2022-08-24 Merck Sharp & Dohme Corp. NOVEL SUBSTITUTED TRICYCLIC COMPOUNDS AS INDOLAMINE-2,3-DIOXYGENASE INHIBITORS
CN111205227A (zh) * 2018-11-22 2020-05-29 四川大学 3-乙烯基吲唑类衍生物及其制备方法和用途
WO2020112581A1 (en) 2018-11-28 2020-06-04 Merck Sharp & Dohme Corp. Novel substituted piperazine amide compounds as indoleamine 2, 3-dioxygenase (ido) inhibitors
EP3917911A1 (en) * 2019-01-31 2021-12-08 Kyorin Pharmaceutical Co., Ltd. 15-pgdh inhibitors
US11628162B2 (en) 2019-03-08 2023-04-18 Incyte Corporation Methods of treating cancer with an FGFR inhibitor
US20220177465A1 (en) 2019-04-04 2022-06-09 Merck Sharp & Dohme Corp. Inhibitors of histone deacetylase-3 useful for the treatment of cancer, inflammation, neurodegeneration diseases and diabetes
SG11202110406SA (en) 2019-04-11 2021-10-28 Angion Biomedica Corp Solid forms of (e)-3-[2-(2-thienyl)vinyl]-1h-pyrazole
EP3956321B1 (en) 2019-04-18 2024-03-20 Synthon B.V. Process for preparing axitinib, process for purifying the intermediate 2-((3-iodo-1h-indazol-6-yl)thio)-n-methylbenzamide, process for purifying axitinib via the axitinib hcl salt, solid form of the axitinib hcl salt
EP3965743A1 (en) 2019-05-09 2022-03-16 Synthon B.V. Pharmaceutical composition comprising axitinib
EP3990635A1 (en) 2019-06-27 2022-05-04 Rigontec GmbH Design method for optimized rig-i ligands
WO2021007269A1 (en) 2019-07-09 2021-01-14 Incyte Corporation Bicyclic heterocycles as fgfr inhibitors
MX2022001407A (es) 2019-08-02 2022-04-27 Mersana Therapeutics Inc Compuestos derivados y relacionados de bis-[n-((5-carbamoil)-1h be nzo[d]imidazol-2-yl)-pyrazol-5-carboxamida] como agonistas de sting (estimulador de genes de interferón) para el tratamiento de cáncer.
KR20220047810A (ko) 2019-08-15 2022-04-19 블랙 다이아몬드 테라퓨틱스, 인코포레이티드 알키닐 퀴나졸린 화합물
CN112442011B (zh) * 2019-08-30 2023-11-14 润佳（苏州）医药科技有限公司 一种前药化合物及其在治疗癌症方面的应用
WO2021035360A1 (en) * 2019-08-30 2021-03-04 Risen (Suzhou) Pharma Tech Co., Ltd. Prodrugs of the tyrosine kinase inhibitor for treating cancer
CN112442010B (zh) * 2019-08-30 2023-10-03 润佳（苏州）医药科技有限公司 一类前药化合物及其在治疗癌症方面的应用
US12122767B2 (en) 2019-10-01 2024-10-22 Incyte Corporation Bicyclic heterocycles as FGFR inhibitors
PH12022550892A1 (en) 2019-10-14 2023-05-03 Incyte Corp Bicyclic heterocycles as fgfr inhibitors
US11566028B2 (en) 2019-10-16 2023-01-31 Incyte Corporation Bicyclic heterocycles as FGFR inhibitors
CN112694474B (zh) * 2019-10-23 2022-03-18 四川大学 吲唑类衍生物及其制备方法和用途
CA3163875A1 (en) 2019-12-04 2021-06-10 Incyte Corporation Tricyclic heterocycles as fgfr inhibitors
CA3162010A1 (en) 2019-12-04 2021-06-10 Incyte Corporation Derivatives of an fgfr inhibitor
WO2021113679A1 (en) 2019-12-06 2021-06-10 Mersana Therapeutics, Inc. Dimeric compounds as sting agonists
WO2021126725A1 (en) 2019-12-17 2021-06-24 Merck Sharp & Dohme Corp. Novel substituted 1,3,8-triazaspiro[4,5]decane-2,4-dione compounds as indoleamine 2,3-dioxygenase (ido) and/or tryptophan 2,3-dioxygenase (tdo) inhibitors
WO2021146424A1 (en) 2020-01-15 2021-07-22 Incyte Corporation Bicyclic heterocycles as fgfr inhibitors
CN111829859B (zh) * 2020-01-20 2024-01-05 北京林业大学 一种高效杨树种子透明染色及其三维成像的方法
CN115335374A (zh) 2020-01-29 2022-11-11 吉利德科学公司 Glp-1r调节化合物
US20230082544A1 (en) 2020-02-18 2023-03-16 Novo Nordisk A/S Pharmaceutical formulations
BR102020005423A2 (pt) * 2020-03-18 2021-09-28 Faculdades Catolicas Compostos n-acil-hidrazônicos, uso no tratamento de agregopatias degenerativas amiloides e não-amiloides, e composição farmacêutica
WO2021195206A1 (en) 2020-03-24 2021-09-30 Black Diamond Therapeutics, Inc. Polymorphic forms and related uses
MX2022012304A (es) 2020-04-02 2022-11-30 Mersana Therapeutics Inc Conjugados de anticuerpo-farmaco que comprenden agonistas de sting.
CN115836054B (zh) 2020-05-06 2024-12-10 默沙东有限责任公司 Il4i1抑制剂和使用方法
WO2021232367A1 (zh) * 2020-05-21 2021-11-25 四川大学 3-乙烯基吲唑类衍生物及其制备方法和用途
CN113943271B (zh) * 2020-07-15 2023-11-14 鲁南制药集团股份有限公司 一种阿昔替尼晶型及其制备方法
CN112028831A (zh) * 2020-09-24 2020-12-04 山东大学 一种苯并吡唑类化合物、其制备方法及作为抗肿瘤药物的应用
WO2022140472A1 (en) 2020-12-22 2022-06-30 Nikang Therapeutics, Inc. Compounds for degrading cyclin-dependent kinase 2 via ubiquitin proteosome pathway
AU2022207648A1 (en) 2021-01-13 2023-07-27 Monte Rosa Therapeutics Ag Isoindolinone compounds
WO2022170052A1 (en) 2021-02-05 2022-08-11 Black Diamond Therapeutics, Inc. Quinazoline derivatives, pyridopyrimidine derivatives, pyrimidopyrimidine derivatives, and uses thereof
JP2024513575A (ja) 2021-04-12 2024-03-26 インサイト・コーポレイション Ｆｇｆｒ阻害剤及びネクチン－４標的化剤を含む併用療法
EP4323350A1 (en) 2021-04-14 2024-02-21 Monte Rosa Therapeutics AG Isoindolinone compounds
EP4323349A1 (en) 2021-04-14 2024-02-21 Monte Rosa Therapeutics AG Isoindolinone amide compounds useful to treat diseases associated with gspt1
WO2022227015A1 (en) 2021-04-30 2022-11-03 Merck Sharp & Dohme Corp. Il4i1 inhibitors and methods of use
AR126102A1 (es) 2021-06-09 2023-09-13 Incyte Corp Heterociclos tricíclicos como inhibidores de fgfr
EP4370522A1 (en) 2021-07-14 2024-05-22 Nikang Therapeutics, Inc. Alkylidene derivatives as kras inhibitors
CN115701423B (zh) * 2021-08-02 2025-03-25 沈阳化工大学 三氟乙基硫醚（亚砜）取代苯类化合物的制备方法及其中间体
IL315722A (en) 2022-03-23 2024-11-01 Ideaya Biosciences Inc Piperazine-substituted indazole compounds as PARG inhibitors
IL315603A (en) 2022-03-28 2024-11-01 Nikang Therapeutics Inc Sulfonamido derivatives as cycle-dependent KINASE 2 inhibitors
EP4282415A1 (en) 2022-05-26 2023-11-29 Genepharm S.A. A stable tablet composition of axitinib
EP4536363A1 (en) 2022-06-08 2025-04-16 Nikang Therapeutics, Inc. Sulfamide derivatives as cyclin-dependent kinase 2 inhibitors
WO2024032584A1 (zh) * 2022-08-08 2024-02-15 苏州必扬医药科技有限公司 一种蛋白酪氨酸激酶抑制剂及其医疗用途
TW202434563A (zh) 2022-11-11 2024-09-01 美商尼坎醫療公司 用於經由泛素蛋白酶體途徑降解週期蛋白依賴性激酶２的含有２，５－取代的嘧啶衍生物之雙功能化合物
TW202502311A (zh) 2023-03-29 2025-01-16 美商默沙東有限責任公司 Il4i1抑制劑及其使用方法
WO2025072462A1 (en) 2023-09-27 2025-04-03 Nikang Therapeutics, Inc. Sulfonamide derivatives as cyclin-dependent kinase 2 inhibitors

Citations (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO1996014843A2 (en) * 1994-11-10 1996-05-23 Cor Therapeutics, Inc. Pharmaceutical pyrazole compositions useful as inhibitors of protein kinases
WO1997034876A1 (en) * 1996-03-15 1997-09-25 Zeneca Limited Cinnoline derivatives and use as medicine
WO1997048697A1 (en) * 1996-06-19 1997-12-24 Rhone-Poulenc Rorer Limited Substituted azabicylic compounds and their use as inhibitors of the production of tnf and cyclic amp phosphodiesterase
US5760028A (en) * 1995-12-22 1998-06-02 The Dupont Merck Pharmaceutical Company Integrin receptor antagonists
WO1999023077A1 (en) * 1997-11-04 1999-05-14 Pfizer Products Inc. Indazole bioisostere replacement of catechol in therapeutically active compounds
WO1999023076A1 (en) * 1997-11-04 1999-05-14 Pfizer Products Inc. Therapeutically active compounds based on indazole bioisostere replacement of catechol in pde4 inhibitors

Family Cites Families (8)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5625031A (en) * 1994-02-08 1997-04-29 Bristol-Myers Squibb Company Peptide inhibitors of the p33cdk2 and p34cdc2 cell cycle regulatory kinases and human papillomavirus E7 oncoprotein
US5631156A (en) * 1994-06-21 1997-05-20 The University Of Michigan DNA encoding and 18 KD CDK6 inhibiting protein
ZA951822B (en) * 1994-12-23 1996-09-26 Glaxo Group Ltd Chemical compounds
US5710173A (en) * 1995-06-07 1998-01-20 Sugen, Inc. Thienyl compounds for inhibition of cell proliferative disorders
US5733920A (en) * 1995-10-31 1998-03-31 Mitotix, Inc. Inhibitors of cyclin dependent kinases
KR100338610B1 (ko) * 1996-09-04 2002-05-27 디. 제이. 우드, 스피겔 알렌 제이 인다졸 유도체 및 포스포디에스터라제 (pde) 유형 iv 및 종양괴사인자 (tnf) 생산의 억제제로서 그의 용도
ATE315553T1 (de) * 1997-10-27 2006-02-15 Agouron Pharma 4-aminothiazol derivate, deren herstellung und deren verwendung als inhibitoren cyclin- abhängiger kinasen
PE20010306A1 (es) * 1999-07-02 2001-03-29 Agouron Pharma Compuestos de indazol y composiciones farmaceuticas que los contienen utiles para la inhibicion de proteina kinasa

Patent Citations (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO1996014843A2 (en) * 1994-11-10 1996-05-23 Cor Therapeutics, Inc. Pharmaceutical pyrazole compositions useful as inhibitors of protein kinases
US5760028A (en) * 1995-12-22 1998-06-02 The Dupont Merck Pharmaceutical Company Integrin receptor antagonists
WO1997034876A1 (en) * 1996-03-15 1997-09-25 Zeneca Limited Cinnoline derivatives and use as medicine
WO1997048697A1 (en) * 1996-06-19 1997-12-24 Rhone-Poulenc Rorer Limited Substituted azabicylic compounds and their use as inhibitors of the production of tnf and cyclic amp phosphodiesterase
WO1999023077A1 (en) * 1997-11-04 1999-05-14 Pfizer Products Inc. Indazole bioisostere replacement of catechol in therapeutically active compounds
WO1999023076A1 (en) * 1997-11-04 1999-05-14 Pfizer Products Inc. Therapeutically active compounds based on indazole bioisostere replacement of catechol in pde4 inhibitors

Also Published As

Publication number Publication date
CY2013009I2 (el) 2016-04-13
CY2013009I1 (el) 2016-04-13
PT1614683E (pt) 2008-01-24
ES2296014T3 (es) 2008-04-16
CN1137884C (zh) 2004-02-11
CY1107148T1 (el) 2012-01-25
FR13C0010I1 (cs) 2013-03-22
IS6207A (is) 2001-12-19
JO2319B1 (en) 2005-09-12
HUP0202490A2 (hu) 2002-11-28
EP1614683A1 (en) 2006-01-11
FR13C0010I2 (fr) 2013-08-16
HK1065037A1 (en) 2005-02-08
CY1107147T1 (el) 2012-10-24
CO5190686A1 (es) 2002-08-29
ES2293906T3 (es) 2008-04-01
JP3878849B2 (ja) 2007-02-07
SI1218348T1 (sl) 2008-02-29
AP2002002392A0 (en) 2002-03-31
DK1218348T3 (da) 2008-02-25
UY26231A1 (es) 2001-01-31
JP2003503481A (ja) 2003-01-28
TNSN00146A1 (fr) 2005-11-10
CR10194A (es) 2008-09-30
MY137622A (en) 2009-02-27
NO20015797L (no) 2002-03-01
LU92154I2 (fr) 2013-04-22
PA8498001A1 (es) 2002-08-26
HUP0202490A3 (en) 2003-01-28
HRP20020109A2 (en) 2003-12-31
CN1374950A (zh) 2002-10-16
OA11980A (en) 2006-04-18
BRPI0012352B1 (pt) 2016-08-16
KR20020027379A (ko) 2002-04-13
NO2013004I1 (no) 2013-03-18
HK1085470A1 (en) 2006-08-25
SI1614683T1 (sl) 2008-02-29
EE200100717A (et) 2003-02-17
WO2001002369A3 (en) 2002-04-25
CA2383630A1 (en) 2001-01-11
BG66070B1 (bg) 2011-01-31
AU5785200A (en) 2001-01-22
DE60037211D1 (de) 2008-01-03
MY139999A (en) 2009-11-30
NO2013004I2 (no) 2014-06-02
NO20060596L (no) 2002-03-01
NO20015797D0 (no) 2001-11-28
CN1495171A (zh) 2004-05-12
GT200000107A (es) 2001-12-21
EE05585B1 (et) 2012-10-15
DE60037211T2 (de) 2008-12-11
CR6517A (es) 2006-09-21
EA004460B1 (ru) 2004-04-29
BG106380A (bg) 2002-09-30
PE20010306A1 (es) 2001-03-29
CA2383630C (en) 2008-11-18
YU92901A (sh) 2004-09-03
ZA200110061B (en) 2003-02-06
ME00385B (me) 2011-05-10
RS50339B (sr) 2009-11-10
BRPI0012352B8 (pt) 2021-05-25
MEP45108A (en) 2011-05-10
PL355757A1 (en) 2004-05-17
NO322507B1 (no) 2006-10-16
SK19252001A3 (sk) 2002-11-06
SV2002000121A (es) 2002-12-02
SK286936B6 (sk) 2009-07-06
MA26803A1 (fr) 2004-12-20
NZ516676A (en) 2003-09-26
PL212108B1 (pl) 2012-08-31
BE2013C015I2 (cs) 2019-05-21
HU228502B1 (en) 2013-03-28
CZ20014634A3 (cs) 2002-09-11
IS2791B (is) 2012-06-15
BR0012352A (pt) 2002-05-14
EP1218348B1 (en) 2007-10-24
GEP20063885B (en) 2006-08-10
JP2006348043A (ja) 2006-12-28
AR065937A2 (es) 2009-07-15
DK1614683T3 (da) 2008-03-25
HRP20020109B1 (en) 2008-07-31
EP1614683B1 (en) 2007-11-21
AU777701B2 (en) 2004-10-28
KR100529639B1 (ko) 2006-01-16
AR035554A1 (es) 2004-06-16
CN1234693C (zh) 2006-01-04
IL146710A0 (en) 2002-07-25
ATE376543T1 (de) 2007-11-15
WO2001002369A2 (en) 2001-01-11
MXPA01012795A (es) 2002-09-02
HK1048813A1 (en) 2003-04-17
PT1218348E (pt) 2007-12-14
AP1486A (en) 2005-11-01
JP3969669B2 (ja) 2007-09-05
UA66933C2 (uk) 2004-06-15
DE60036879T2 (de) 2008-02-14
DE60036879D1 (de) 2007-12-06
EP1218348A2 (en) 2002-07-03
EA200200120A1 (ru) 2002-08-29
DZ3191A1 (fr) 2001-01-11

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CZ301667B6 (cs) Derivát indazolu a farmaceutický prípravek s jeho obsahem pro inhibici proteinkináz
US6884890B2 (en) Indazole compounds and pharmaceutical compositions for inhibiting protein kinases, and methods for their use
HRP20020675A2 (en) Indazole compounds, pharmaceutical compositions and methods for mediating or inhibiting cell poliferation
MXPA06004438A (es) Derivados de indolinona y su uso en el tratamiento de enfermedades como el cancer.
EP1585743A1 (en) 2-(1h-indazol-6-ylamino)- benzamide compounds as protein kinases inhibitors useful for the treatment of ophthalmic diseases
WO2005023782A1 (ja) 置換された縮環ピリミジン－４（３ｈ）－オン化合物
点击 这是indexloc提供的php浏览器服务，不要输入任何密码和下载