BR112019018759A2

BR112019018759A2 - composições compreendendo uma combinação de um anticorpo anti-lag-3, um inibidor da via pd-1, e um agente imunoterápico

Info

Publication number: BR112019018759A2
Application number: BR112019018759A
Authority: BR
Inventors: J. Korman Alan; Lonberg Nils; J. Selby Mark; Jackson Jeffrey
Original assignee: Bristol-Myers Squibb Company
Priority date: 2017-05-30
Filing date: 2018-05-30
Publication date: 2020-05-05
Also published as: US20250163152A1; MX2019012038A; KR20200010500A; US20230111786A1; AU2018277559A1; JP2020522495A; EP4245375A2; US20210340250A1; EP4245375A3; JP2023126946A; IL269090A; CN110691795A; AU2025202283A1; WO2018222711A2; EP3630842A2; CA3060989A1

Abstract

a presente invenção se refere a métodos para tratamento clínico de tumores malignos (por exemplo, tumores sólidos avançados) usando uma combinação de um anticorpo anti-lag-3, um anticorpo anti-pd-1, e um agente imunoterápico.

Description

Relatório Descritivo da Patente de Invenção para COMPOSIÇÕES COMPREENDENDO UMA COMBINAÇÃO DE UM ANTICORPO ANTI-LAG-3, UM INIBIDOR DA VIA PD-1, E UM AGENTE IMUNOTERÁPICO.

REFERÊNCIA CRUZADA COM REQUERIMENTOS RELACIONADOS [001] Este requerimento reivindica prioridade para os Requerimentos de Patente Provisória dos Estados Unidos Nos. 62/512.618, depositado em 30 de maio de 2017 e 62/513.812, depositado em 1° de junho de 2017, os quais são incorporados aqui, a este requerimento de patente, por meio de referência, em suas totalidades.

CAMPO DA INVENÇÃO [002] A presente invenção proporciona métodos para tratamento de um tumor maligno (por exemplo, tumores sólidos avançados) com uma composição farmacêutica compreendendo uma combinação de um anticorpo anti-LAG-3, um inibidor da via PD-1, e um agente imunoterápico.

ANTECEDENTES DA INVENÇÃO [003] Os cânceres humanos abrigam numerosas alterações genéticas e epigenéticas, gerando neoantígenos potencialmente reconnhecíveis pelo sistema imune (Sjoblom et a!., Science 314(5797):268-274 (2006)). O sistema imune adaptativo, composto dos linfócitos T e B, tem poderoso potencial anti-cancerígeno, com uma ampla capacidade e extraordiária especificidade para responder a diversos antígenos tumorais. Além disso, o sistema imune demonstra considerável plasticidade e um componente de memória. O aproveitamento bem-sucedido de todos estes atributos do sistema imune adaptativo tornaria a imunoterapia única entre todas as modalidades de tratamento do câncer.

[004] Até recentemente, a imunoterapia do câncer tem focalizado

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2/84 substancial esforço sobre abordagens que reforçam respostas imunes antitumorais por transferência adotiva de células efetoras ativadas, imunização contra antígenos relevantes, ou proporcionando agentes imunoestimulatórios inespecíficos tais como as citocinas. No entanto, na última década, intensivos esforços para desenvolver inibidores específicos da via do ponto de controle imunológico começaram a proporcionar novas abordagens imunoterápicas para o tratamento do câncer, incluindo o desenvolvimento de um anticorpo (anticorpo), ipilimumab (YERVOY®), que se liga a e inibe CTLA-4 para o tratamento de pacientes com melanoma avançado (Hodi et al., N Engl J Med 363:711-723 (2010)) e o desenvolvimento de anticorpos tais como nivolumab e pembrolizumab (anteriormente lambrolizumab; USAN Council Statement, (2013)) que se ligam especificamente ao receptor de morte celular programada -1 (PD-1) e bloqueiam a via do ligante de PD-1/PD-1 inibidor (Topalian et al., N Engl J Med 366:244354 (2012a); Topalian et al., Curr Opin Immunol 24:207-12 (2012b); Topalian et al., J Clin Oncol 32(10):1020-30 (2014); Hamid et al., N Engl J Med 369:134-144 (2013); Hamid and Carvajal, Expert Opin Biol Ther 13(6):847-61 (2013); e McDermott and Atkins, Cancer Med 2(5):662-73 (2013)).

[005] No entanto, a tolerância imune observada na situação de desenvolvimento tumoral e de recidiva tumoral, parece ser mediada pela coexpressão de vários receptores regulatórios negativos de células T, não somente de LAG-3. Dados de modelos de infecção viral crônica (Blackburn et al., Nat. Immunol 10:29-37 (2009), Grosso et al.,

J. Clin. Invest. 117:3383-3392 (2007), e Lyford-Pike etal., Cancer Fies. 73(6):1733-41 (2013)), camundongos de knock-out (Woo et al., Cancer Fies. 72:917-927 (2012); Okazaki et al., J. Exp Med. 208:395-407 (2011), e Bettini et al., J. Immunol. 187:3493-3498 (2011)), modelos de recidiva tumoral (Goding et al., J. Immunol. 190(9):4899-4909 (2013))

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3/84 e, em uma extensão mais limitada, pacientes com câncer humanos (Matsuzaki et al., Proc. Natl. Acad. Sei., USA. 107:7875-7880 (2010), e Gandhi Μ K, et a!., Blood. 108:2280-2289 (2006)) corroboram um modelo em que células T que são continuamente expostas a antígeno se tornam progressivamente inativadas através de um processo denominado exaustão. Células T exauridas são caracterizadas pela expressão de receptores regulatórios negativos de células T, predominantemente CTLA-4, PD-1, e LAG-3, cuja ação é limitar a capacidade das células para se proliferarem, produzir citocinas, e destruir célula-alvo e/ou aumentar a atividade de Treg. Por conseguinte, uma terapia de combinação compreendendo um anticorpo anti-PD-1 e um anticorpo anti-LAG-3 tem tido resultados promissores em alguns tipos de cânceres. (Publicação do Requerimento de Patente U.S. No. 2016/0222116 A1).

[006] O gene de ativação de linfócitos-3 (LAG-3; CD223) é uma proteína transmembrana tipo I que é expressa sobre a superfície celular de células T CD4+ e CD8+ ativadas e subgrupos de células NK e dendríticas (Triebel et al., J. Exp. Med. 171:1393-1405 (1990); Workman et al., J. Immunol. 182(4):1885-91 (2009)). O LAG-3 é intimamente relacionado com CD4, o qual é um co-receptor para ativação de células T helper. Ambas as moléculas têm 4 domínios extracelulares semelhantes a Ig e requerem ligação a seu ligante, complexo de histocompatibilidade maior (MHC) classe II, para sua atividade funcional. Em contraste com CD4, LAG-3 somente é expresso sobre a superfície celular de células T ativadas e sua divagem da superfície celular termina a sinalização de LAG-3. LAG-3 também pode ser encontrado como uma proteína solúvel, mas não se liga a MHC classe II e sua função é desconhecida.

[007] Foi reportado que LAG-3 tem um papel importante na estimulação da atividade de células T regulatórias (Treg) e na

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4/84 regulação negativamente da ativação e da proliferação de células T (Workman et aí., J. Immunol. 174:688-695 (2005)). Tanto Treg naturais quanto induzidas expressam LAG-3 aumentada, a qual é requerida para a máxima função supressiva (Camisaschi et al., J. Immunol. 184:6545-6551 (2010) e Huang et al., Immunity. 21:503-513 (2004)). Além do mais, a expressão ectópica de LAG-3 sobre células T efetoras CD4+ reduziu sua capacidade proliferativa e conferiu às mesmas um potencial regulador contra células T de terceiros (Huang et al., Immunity. 21:503-513 (2004)). Recentes estudos também mostraram que alta expressão de LAG-3 sobre células T CD8+ específicas para o vírus da coriomeningite linfocítica (LCMV) exauridas contribui para seu estado não responsive e limita as respostas antitumorais de células T CD8+ (Blackburn et al., Nat. Immunol. 10:29-37 (2009) e Grosso et al., J. Clin. Invest. 117:3383-3392 (2007)). De fato, LAG-3 manteve tolerância para auto antígenos e para antígenos tumorais através de efeitos diretos sobre as células T CD8+ em 2 modelos murinos (Grosso etal., J. Clin. Invest. 117:3383-3392 (2007)).

[008] Morte Celular Programada 1 (PD-1, Programmed Cell Death-1) é um receptor de sinalização da superfície celular que desempenha um papel crucial na regulação da ativação e tolerância de células T (Keir et al., Annu Rev Immunol 26:677-704 (2008)). É uma proteína transmembrana tipo I e junto com BTLA, CTLA-4, ICOS e CD28, compreendem a família CD28 de receptores coestimulatórios de células T. O PD-1 é essencialmente expresso sobre células T, células B, e células mieloides ativadas (Dong et al., Nat Med. 5:13651369 (1999)). Também é expresso sobre células natural killer (NK) (Terme et al., Cancer Res 71:5393-5399 (2011)). A ligação de PD-1 por seus ligantes, PD-L1 e PD-L2, resulta em fosforilação do resíduo de tirosina no domínio inibitório de tirosina do receptor imune intracelular proximal, seguida por recrutamento da fosfatase SHP-2,

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5/84 eventualmente resultando em regulação negativa da ativação de células T. Um papel importante do PD-1 é limitar a atividade de células T nos tecidos periféricos por ocasião de uma resposta inflamatória para infecção, deste modo limitando o desenvolvimento de autoimunidade (Pardoll Nat Rev Cancer 12:252-264 (2012)). A evidência deste papel regulador negativo vem da descoberta de que camundongos deficientes em PD-1 desenvolvem doenças autoimunes semelhantes ao lúpus, incluindo artrite e nefrite, junto com cardiomiopatia (Nishimura H, et al., Immunity, 1999; 11:141-151; e Nishimura H, et al., Science, 2001; 291:319-322). Na situação de tumor, a consequência é o desenvolvimento de resistência imune dentro do microambiente tumoral. PD-1 é altamente expresso sobre linfócitos de infiltração tumoral, e seus ligantes são regulados positivamente sobre a superfície celular de muitos tumores diferentes (Dong H, et al., Nat Mee/2002; 8:793-800). Múltiplos modelos murinos de câncer demonstraram que a ligação de ligante a PD-1 resulta em evasão imune. Além disso, o bloqueio desta interação resulta em atividade anti-tumoral (Topalian S L, et al. NEJM 2012; 366(26):24432454; Hamid O, et al., NEJM 2013; 369:134-144). Além disso, foi demonstrado que a inibição da interação PD-1/PD-L1 medeia potente atividade antitumoral em modelos pré-clínicos (Pat. U.S. Nos.

8.008.449 e 7.943.743).

[009] Pacientes com determinados tumores malignos (por exemplo, tumores sólidos metastáticos ou refratários) têm um prognóstico muito pobre (Rosenberg S A, et al., Cancer immunotherapy in Cancer: Principles & Practice of Oncology (Eds DeVita V T, Lawrence T S and Rosenberg S A) 2011; 332-344 (Lippincott Williams & Wilkins, Philadelphia Pa.)). Apesar dos avanços na terapia multimodal, os aumentos na sobrevida geral desta população de pacientes têm sido limitados. Por conseguinte, é um

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6/84 objeto da presente invenção proporcionar métodos aprimorados (por exemplo, uma composição compreendendo uma combinação de um anticorpo anti-PD-1, um anticorpo anti-LAG-3, e um agente imunoterápico) para o tratamento de sujeitos com os referidos tumores (por exemplo, tumores sólidos refratários avançados).

SUMÁRIO DA INVENÇÃO [0010] A presente invenção proporciona um método para o tratamento de um sujeito afetado com um tumor maligno compreendendo a administração, ao sujeito, de uma quantidade terapeuticamente eficaz de (a) inibidor de LAG-3, (b) um inibidor da via PD-1; e (c) um agente imunoterápico, em combinação.

[0011] Em determinadas modalidades, o inibidor de LAG-3 é um anticorpo anti-LAG-3 ou um fragmento de ligação ao antígeno do mesmo. Em uma modalidade, o anticorpo anti-LAG-3 é um anticorpo biespecífico. Em outra modalidade, em que o anticorpo anti-LAG-3 ou fragmento de ligação ao antígeno do mesmo compreende (a) uma região variável de cadeia pesada CDR1 compreendendo a sequência estipulada na SEQ ID NO: 7; (b) uma região variável de cadeia pesada CDR2 compreendendo a sequência estipulada na SEQ ID NO: 8; (c) uma região variável de cadeia pesada CDR3 compreendendo a sequência estipulada na SEQ ID NO: 9; (d) uma região variável de cadeia leve CDR1 compreendendo a sequência estipulada na SEQ ID NO: 10; (e) uma região variável de cadeia leve CDR2 compreendendo a sequência estipulada na SEQ ID NO: 11; e (f) uma região variável de cadeia leve CDR3 compreendendo a sequência estipulada na SEQ ID NO: 12. Em algumas modalidades, o anticorpo anti-LAG-3 ou fragmento de ligação ao antígeno do mesmo compreende regiões variáveis de cadeias pesadas e leves compreendendo as sequências estipuladas nas SEQ ID NOs: 3 e 5, respectivamente. Em uma modalidade, o anticorpo anti-LAG-3 é BMS 986016, MK-4280 (28G

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10), REGN3767, GSK2831781, IMP731 (H5L7BW), BAP050, IMP-701 (LAG-5250), IMP321, TSR-033, LAG525, Bl 754111, ou FS-118.

[0012] Em determinadas modalidades, o inibidor de LAG-3 é um polipeptídeo LAG-3 solúvel. Em uma modalidade, o polipeptídeo LAG3 solúvel é um polipeptídeo de fusão. Em outra modalidade, polipeptídeo LAG-3 solúvel compreende um fragmento de ligação ao ligante do domínio extracelular LAG-3. Em algumas modalidades, o fragmento de ligação ao ligante do domínio extracelular LAG-3 compreende uma sequência de aminoácidos com no mínimo 90%, no mínimo 95%, no mínimo 98%, ou no mínimo 99% de identidade de sequência com a SEQ ID NO: 44. Em determinadas modalidades, o polipeptídeo LAG-3 solúvel adicionalmente compreende um domínio Fc.

[0013] Em uma modalidade, o inibidor da via PD-1 é um anticorpo anti-PD-1 ou fragmento de ligação ao antigeno do mesmo. Em determinadas modalidades, o anticorpo anti-PD-1 é pembrolizumab (KEYTRUDA; MK-3475), pidilizumab (CT-011), nivolumab (OPDIVO; BMS-936558), PDR001, MEDI0680 (AMP-514), TSR-042, REGN2810, JS001, AMP-224 (GSK-2661380), PF-06801591, BGB-A317, BI 754091, ou SHR-1210.

[0014] Em uma modalidade, o inibidor da via PD-1 é um anticorpo anti-PD-L1 ou fragmento de ligação ao antigeno do mesmo. Em determinadas modalidades, o anticorpo anti-PD-L1 é atezolizumab (TECENTRIQ; RG7446; MPDL3280A; RO5541267), durvalumab (MEDI4736), BMS-936559, avelumab (bavencio), LY3300054, CX-072 (Proclaim-CX-072), FAZ053, KN035, ou MDX-1105.

[0015] Em uma modalidade, o inibidor da via PD-1 é um fármaco de molécula pequena. Em determinadas modalidades, o inibidor da via PD-1 é CA-170. Em outra modalidade, o inibidor da via PD-1 é uma terapia à base de células. Em uma modalidade, a terapia à base de

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8/84 células é uma vacina de células dendríticas silenciadas por PD-L1/L2 carregada com MiHA. Em outras modalidades, a terapia à base de células é um anticorpo anti-proteína da morte delular programada 1 expressando linfócito T killer pluripotente, um linfócito T autólogo modificado por receptor de switch quimérico direcionado para PD-1, ou um linfócito T autólogo de nocaute de PD-1.

[0016] Em uma modalidade, o inibidor da via PD-1 é um anticorpo anti-PD-L2 ou fragmento de ligação ao antígeno do mesmo. Em outra modalidade, o anticorpo anti-PD-L2 é rHlgM12B7.

[0017] Em uma modalidade, o inibidor da via PD-1 é um polipeptídeo PD-1 solúvel. Em determinadas modalidades, o polipeptídeo PD-1 solúvel é um polipeptídeo de fusão. Em algumas modalidades, o polipeptídeo PD-1 solúvel compreende um fragmento de ligação ao ligante do domínio extracelular PD-1. Em outras modalidades, o polipeptídeo PD-1 solúvel compreende um fragmento de ligação ao ligante do domínio extracelular PD-1. Em uma modalidade, o fragmento de ligação ao ligante do domínio extracelular PD-1 compreende uma sequência de aminoácidos com no mínimo 90%, no mínimo 95%, no mínimo 98%, ou no mínimo 99% de identidade de sequência com a SEQ ID NO: 29. Em outra modalidade, o polipeptídeo PD-1 solúvel adicionalmente compreende um domínio Fc.

[0018] Em uma modalidade, o agente imunoterápico é um modulador da atividade de CTLA-4, um modulador da atividade de CD28, um modulador da atividade de CD80, um modulador da atividade de CD86, um modulador da atividade de 4-1 BB, um modulador da atividade de 0X40, um modulador da atividade de KIR, um modulador da atividade de Tim-3, um modulador da atividade de CD27, um modulador da atividade de CD40, um modulador da atividade de GITR, um modulador da atividade de TIGIT, um

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9/84 modulador da atividade de CD20, um modulador da atividade de CD96, um modulador da atividade de IDO1, um modulador da atividade de STING, um modulador da atividade de GARP, um modulador da atividade de A2aR, um modulador da atividade de CEACAM1, um modulador da atividade de CEA, um modulador da atividade de CD47, um modulador da atividade de PVRIG, um modulador da atividade de TDO, um modulador da atividade de VISTA, uma citocina, uma quimiocina, um interferon, uma interleucina, uma linfocina, um membro da família de fatores de necrose tumoral (TNF), ou um oligonucleotideo imunoestimulador.

[0019] Em uma modalidade, o agente imunoterápico é um inibidor do ponto de controle imunológico. Em determinadas modalidades, o inibidor do ponto de controle imunológico é um antagonista de CTLA-4, um antagonista de CD80, um antagonista de CD86, um antagonista de Tim-3, um antagonista de TIGIT, um antagonista de CD20, um antagonista de CD96, um antagonista de IDO1, um antagonista de STING, um antagonista de GARP, um antagonista de CD40, um antagonista de A2aR, um antagonista de CEACAM1 (CD66a), um antagonista de CEA, um antagonista de CD47, um antagonista de PVRIG, um antagonista de TDO, um antagonista de VISTA, ou um antagonista de KIR.

[0020] Em uma modalidade, o inibidor do ponto de controle imunológico é um antagonista de CTLA-4. Em determinadas modalidades, o antagonista de CTLA-4 é um anticorpo anti-CTLA-4 ou fragmento de ligação ao antígeno do mesmo. Em algumas modalidades, o anticorpo anti-CTLA-4 é ipilimumab (YERVOY), tremelimumab (ticilimumab; CP-675,206), AGEN-1884, ou ATOR1015.

[0021] Em uma modalidade, o antagonista de CTLA-4 é um polipeptídeo CTLA-4 solúvel. Em uma modalidade, o polipeptídeo

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CTLA-4 solúvel é abatacept (Orencia), belatacept (Nulojix), RG2077, ou RG-1046. Em outra modalidade, o antagonista de CTLA-4 é uma terapia à base de células. Em algumas modalidades, o antagonista de CTLA-4 é uma vacina de células dendríticas autólogas transfectadas com RNA de mAb anti-CTLA4 / RNA de GITRL ou uma vacina de células dendríticas autólogas transfectadas com RNA de mAb antiCTLA4.

[0022] Em uma modalidade, o inibidor do ponto de controle imunológico é um antagonista de KIR. Em determinadas modalidades, o antagonista de KIR é um anticorpo anti-KIR ou fragmento de ligação ao antígeno do mesmo. Em algumas modalidades, o anticorpo antiKIR é lirilumab (1-7F9, BMS-986015, IPH 2101) ou IPH4102.

[0023] Em uma modalidade, o inibidor do ponto de controle imunológico é um antagonista de TIGIT. Em uma modalidade, o antagonista de TIGIT é um anticorpo anti-TIGIT ou fragmento de ligação ao antígeno do mesmo. Em determinadas modalidades, o anticorpo anti-TIGIT é BMS-986207, AB 154, COM902 (CGEN-15137), ou OMP-313M32.

[0024] Em uma modalidade, o inibidor do ponto de controle imunológico é um antagonista de Tim-3. Em determinadas modalidades, o antagonista de Tim-3 é um anticorpo anti-Tim-3 ou fragmento de ligação ao antígeno do mesmo. Em algumas modalidades, o anticorpo anti-Tim-3 é TSR-022 ou LY3321367.

[0025] Em uma modalidade, o inibidor do ponto de controle imunológico é um antagonista de IDO1. Em outra modalidade, o antagonista de IDO1 é indoximod (NLG8189; 1-metil-D-TRP), epacadostat (INCB-024360, INCB-24360), KHK2455, PF-06840003, navoximod (RG6078, GDC-0919, NLG919), BMS-986205 (F001287), ou derivados de pirrolidina-2,5-diona.

[0026] Em uma modalidade, o inibidor do ponto de controle

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11/84 imunológico é um antagonista de STING. Em determinadas modalidades, o antagonista de STING é di-nucleotídeos cíclicos 2’ ou 3’-mono-fluoro substituídos; di-nucleotídeos 2’,5’ - 3’,5’ cíclicos de ligação mista 2’3’-di-fluoro substituídos; di-nucleotídeos bis-3’,5’ cíclicos, 2’-fluoro substituídos; di-nucleotídeos 2’,2”-diF-Rp,Rp,bis-3’,5’ cíclicos; ou di-nucleotídeos cíclicos fluorados.

[0027] Em uma modalidade, o inibidor do ponto de controle imunológico é um antagonista de CD20. Em algumas modalidades, o antagonista de CD20 é um anticorpo anti-CD20 ou fragmento de ligação ao antígeno do mesmo. Em uma modalidade, o anticorpo antiCD20 é rituximab (RITUXAN; IDEC-102; IDEC-C2B8), ABP 798, ofatumumab, ou obinutuzumab.

[0028] Em uma modalidade, o inibidor do ponto de controle imunológico é um antagonista de CD80. Em determinadas modalidades, o antagonista de CD80 é um anticorpo anti-CD80 ou fragmento de ligação ao antígeno do mesmo. Em uma modalidade, o anticorpo anti-CD80 é galiximab ou AV 1142742.

[0029] Em uma modalidade, o inibidor do ponto de controle imunológico é um antagonista de GARP. Em algumas modalidades, o antagonista de GARP é um anticorpo anti-GARP ou fragmento de ligação ao antígeno do mesmo. Em determinadas modalidades, o anticorpo anti-GARP é ARGX-115.

[0030] Em uma modalidade, o inibidor do ponto de controle imunológico é um antagonista de CD40. Em determinadas modalidades, o antagonista de CD40 é um anticorpo anti-CD40 for fragmento de ligação ao antígeno do mesmo. Em algumas modalidades, o anticorpo anti-CD40 é BMS3h-56, lucatumumab (HCD122 e CHIR-12.12), CHIR-5.9, ou dacetuzumab (huS2C6, PRO 64553, RG 3636, SGN 14, SGN-40). Em outra modalidade, o antagonista de CD40 é um ligante de CD40 solúvel (CD40-L). Em uma

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12/84 modalidade, o ligante de CD40 solúvel é um polipeptídeo de fusão. Em uma modalidade, o ligante de CD40 solúvel é um CD40-L/FC2 ou um CD40-L monomérico.

[0031] Em uma modalidade, o inibidor do ponto de controle imunológico é um antagonista de A2aR. Em algumas modalidades, o antagonista de A2aR é uma molécula pequena. Em determinadas modalidades, o antagonista de A2aR é CPI-444, PBF-509, istradefilina (KW-6002), preladenant (SCH420814), tozadenant (SYN115), vipadenant (BIIB014), HTL-1071, ST1535, SCH412348, SCH442416, SCH58261, ZM241385, ou AZD4635.

[0032] Em uma modalidade, o inibidor do ponto de controle imunológico é um antagonista de CEACAM1. Em algumas modalidades, o antagonista de CEACAM1 é um anticorpo antiCEACAM1 ou fragmento de ligação ao antígeno do mesmo. Em uma modalidade, o anticorpo anti-CEACAM1 é CM-24 (MK-6018).

[0033] Em uma modalidade, o inibidor do ponto de controle imunológico é um antagonista de CEA. Em uma modalidade, o antagonista de CEA é um anticorpo anti-CEA ou fragmento de ligação ao antígeno do mesmo. Em determinadas modalidades, o anticorpo anti-CEA é cergutuzumab amunaleucina (RG7813, RO-6895882) ou RG7802 (RO6958688).

[0034] Em uma modalidade, o inibidor do ponto de controle imunológico é um antagonista de CD47. Em algumas modalidades, o antagonista de CD47 é um anticorpo anti-CD47 ou fragmento de ligação ao antígeno do mesmo. Em determinadas modalidades, o anticorpo anti-CD47 é HuF9-G4, CC-90002, TTI-621, ALX148, Nl1701, NI-1801, SRF231, ou Effi-DEM.

[0035] Em uma modalidade, o inibidor do ponto de controle imunológico é um antagonista de PVRIG. Em determinadas modalidades, o antagonista de PVRIG é um anticorpo anti-PVRIG ou

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13/84 fragmento de ligação ao antígeno do mesmo. Em uma modalidade, o anticorpo anti-PVRIG é COM701 (CGEN-15029).

[0036] Em uma modalidade, o inibidor do ponto de controle imunológico é um antagonista de TDO. Em uma modalidade, o antagonista de TDO é um derivado de 4-(indol-3-il)-pirazol, um derivado substituído de 3-indol, ou um derivado de a 3-(indol-3-il)piridina. Em outra modalidade, o inibidor do ponto de controle imunológico é um duplo antagonista de IDO e TDO. Em uma modalidade, o duplo antagonista de IDO e TDO é uma molécula pequena.

[0037] Em uma modalidade, o inibidor do ponto de controle imunológico é um antagonista de VISTA. Em algumas modalidades, o antagonista de VISTA é CA-170 ou JNJ-61610588.

[0038] Em uma modalidade, o agente imunoterápico é um reforçador ou estimulador do ponto de controle imunológico. Em uma modalidade, reforçador ou estimulador do ponto de controle imunológico é um agonista de CD28, um agonista de 4-1 BB, um agonista de 0X40, um agonista de CD27, um agonista de CD80, um agonista de CD86, um agonista de CD40, um agonista de ICOS, um agonista de CD70, ou um agonista de GITR.

[0039] Em uma modalidade, reforçador ou estimulador do ponto de controle imunológico é um agonista de 0X40. Em determinadas modalidades, o agonista de 0X40 é um anticorpo anti-OX40 ou fragmento de ligação ao antígeno do mesmo. Em algumas modalidades, o anticorpo anti-OX40 é tavolixizumab (MEDI-0562), pogalizumab (MOXR0916, RG7888), GSK3174998, ATOR-1015, MEDI-6383, MEDI-6469, BMS 986178, PF-04518600, ou RG7888 (MOXR0916). Em outra modalidade, o agonista de 0X40 é uma terapia à base de células. Em determinadas modalidades, o agonista de 0X40 é uma célula GINAKIT (linfócitos T expressando ÍC9-GD2Petição 870190089572, de 10/09/2019, pág. 30/165

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CD28-OX40).

[0040] Em uma modalidade, reforçador ou estimulador do ponto de controle imunológico é um agonista de CD40. Em algumas modalidades, o agonista de CD40 é um anticorpo anti-CD40 ou fragmento de ligação ao antígeno do mesmo. Em uma modalidade, o anticorpo anti-CD40 é ADC-1013 (JNJ-64457107), RG7876 (RO7009789), HuCD40-M2, APX005M (EPI-0050), ou Chi Lob 7/4. Em outra modalidade, o agonista de CD40 é um ligante de CD40 solúvel (CD40-L). Em uma modalidade, o ligante de CD40 solúvel é um polipeptídeo de fusão. Em determinadas modalidades, o ligante de CD40 solúvel é um CD40-L trimérico (AVREND®).

[0041] Em uma modalidade, reforçador ou estimulador do ponto de controle imunológico é um agonista de GITR. Em determinadas modalidades, o agonista de GITR é um anticorpo anti-GITR ou fragmento de ligação ao antígeno do mesmo. Em uma modalidade, o anticorpo anti-GITR é BMS-986156, TRX518, GWN323,

INCAGN01876, ou MEDI1873. Em uma modalidade, o agonista de GITR é um ligante de GITR solúvel (GITRL). Em algumas modalidades, o ligante de GITR solúvel é um polipeptídeo de fusão. Em outra modalidade, o agonista de GITR é uma terapia à base de células. Em uma modalidade, a terapia à base de células é uma vacina de células dendríticas autólogas transfectadas com RNA de mAb antiCTLA4 / RNA de GITRL ou uma vacina de células dendríticas autólogas transfectadas com RNA de GITRL.

[0042] Em uma modalidade, reforçador ou estimulador do ponto de controle imunológico é um agonista de 4-1 BB. Em algumas modalidades, o agonista de 4-1 BB é um anticorpo anti-4-1BB ou fragmento de ligação ao antígeno do mesmo. Em uma modalidade, o anticorpo anti-4-1BB é urelumab ou PF-05082566.

[0043] Em uma modalidade, reforçador ou estimulador do ponto de

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15/84 controle imunológico é um agonista de CD80 ou um agonista de CD86. Em algumas modalidades, o agonista de CD80 ou o agonista de CD86 é um ligante de CD80 ou CD86 solúvel (CTLA-4). Em determinadas modalidades, o ligante de CD80 ou CD86 solúvel é um polipeptídeo de fusão. Em uma modalidade, o ligante de CD80 ou CD86 é CTLA4-lg (CTLA4-lgG4m, RG2077, ou RG1046) ou abatacept (ORENCIA, BMS188667). Em outras modalidades, o agonista de CD80 ou o agonista de CD86 é uma terapia à base de células. Em uma modalidade, a terapia à base de células é MGN1601 (uma vacina de carcinoma de células renais alogênicas).

[0044] Em uma modalidade, reforçador ou estimulador do ponto de controle imunológico é um agonista de CD28. Em algumas modalidades, o agonista de CD28 é um anticorpo anti-CD28 ou fragmento de ligação ao antígeno do mesmo. Em determinadas modalidades, o anticorpo anti-CD28 é TGN1412.

[0045] Em uma modalidade, o agonista de CD28 é uma terapia à base de células. Em determinadas modalidades, a terapia à base de células é JCAR015 (linfócito T CD3+ CAR modificado anti-CD19CD28-zeta); linfócito T expressando CD28CAR/CD137CAR; células T alogênicas Th1 semelhantes de memória CD4+ / anti-CD3/anti-CD28 ligados a micropartículas; linfócitos T autólogos KTE-C19 transduzidos por vetor gama-retroviral CAR anti-CD19/CD28/CD3zeta; linfócitos T autólogos transduzidos por lgCD28TCR anti-CEA; linfócitos T alogênicos transduzidos por CAR anti-EGFRvlll; linfócitos T autólogos expressando CD123CAR-CD28-CD3zeta-EGFRt; linfócitos T autólogos expressando CAR-CD28 zeta-4-1-BB-EGFRt específicos para CD171; células T autólogas enriquecidas com expressando CD19CAR-CD28-CD3zeta-EGFRt; linfócitos T autólogos modificados com receptor de comutador quimérico direcionado para PD-1 (quimera com CD28); linfócitos T enriquecidos com Tem expressando

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CD19CAR-CD28-CD3zeta-EGFRt; linfócitos T enriquecidos com Τη/mem expressando CD19CAR-CD28-CD3zeta-EGFRt; linfócitos T alogênicos expressando CD19CAR-CD28zeta-4-1BB; linfócitos T autólogos expressando CD19CAR-CD3zeta-4-1BB-CD28; linfócitos T expressando CD28CAR/CD137CAR; linfócitos T autólogos sensibilizados com vacina coestimulada com CD3/CD28; ou linfócitos T expressando ÍC9-GD2-CD28-OX40.

[0046] Em uma modalidade, reforçador ou estimulador do ponto de controle imunológico é um agonista de CD27. Em determinadas modalidades, o agonista de CD27 é um anticorpo anti-CD27 ou fragmento de ligação ao antígeno do mesmo. Em uma modalidade, o anticorpo anti-CD27 é varlilumab (CDX-1127).

[0047] Em uma modalidade, reforçador ou estimulador do ponto de controle imunológico é um agonista de CD70. Em algumas modalidades, o agonista de CD70 é um anticorpo anti-CD70 ou fragmento de ligação ao antígeno do mesmo. Em uma modalidade, o anticorpo anti-CD70 é ARGX-110.

[0048] Em uma modalidade, reforçador ou estimulador do ponto de controle imunológico é um agonista de ICOS. Em determinadas modalidades, o agonista de ICOS é um anticorpo anti-ICOS ou fragmento de ligação ao antígeno do mesmo. Em algumas modalidades, o anticorpo anti-ICOS é BMS986226, MEDI-570, GSK3359609, ou JTX-2011. Em outras modalidades, o agonista de ICOS é um ligante de ICOS solúvel. Em algumas modalidades, o ligante de ICOS solúvel é um polipeptídeo de fusão. Em uma modalidade, o ligante de ICOS solúvel é AMG 750.

[0049] Em uma modalidade, o agente imunoterápico é um anticorpo anti-CD73 ou fragmento de ligação ao antígeno do mesmo. Em determinadas modalidades, o anticorpo anti-CD73 é MEDI9447.

[0050] Em uma modalidade, o agente imunoterápico é um

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17/84 agonista de TLR9. Em uma modalidade, o agonista de TLR9 é agatolimod de sódio.

[0051] Em uma modalidade, o agente imunoterápico é um citocina. Em determinadas modalidades, a citocina é uma quimiocina, um interferon, uma interleucina, uma linfocina, ou um membro da família de fatores de necrose tumoral. Em algumas modalidades, a citocina é IL-2, IL-15, ou interferon gama.

[0052] Em uma modalidade, o agente imunoterápico é um antagonista do TGF-β. Em algumas modalidades, o antagonista do TGF-β é fresolimumab (GC-1008); NIS793; IMC-TR1 (LY3022859); ISTH0036; trabedersen (AP 12009); fator de crescimento transformante-beta-2 recombinante; linfócitos T resistentes ao TGF beta autólogos específicos para HPV-16/18 E6/E7; ou linfócitos T citotóxicos LMP-específicos resistentes ao TGF beta.

[0053] Em uma modalidade, o agente imunoterápico é um antagonista da iNOS (N.T.: iNOS, sintase do óxido nítrico indutível). Em algumas modalidades, o antagonista da iNOS é N-Acetil cisteína (NAC), aminoguanidina, éster metílico de L-nitroarginina, ou S,S-1,4fenileno-bis(1,2-etanodiil)bis-isotiouréia).

[0054] Em uma modalidade, o agente imunoterápico é um antagonista da SHP-1.

[0055] Em uma modalidade, o agente imunoterápico é um antagonista do CSF1R (receptor do fator estimulante de colônia de macrófagos 1). Em determinadas modalidades, o antagonista do CSF1R é um anticorpo anti-CSF1R ou fragmento de ligação ao antígeno do mesmo. Em algumas modalidades, o anticorpo antiCSF1R é emactuzumab.

[0056] Em uma modalidade, o agente imunoterápico é um agonista de um membro da família de TNF. Em algumas modalidades, o agonista do membro da família de TNF é ATOR 1016, ABBV-621, ou

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Adalimumab.

[0057] Em uma modalidade, o agente imunoterápico é aldesleucina, tocilizumab, ou MEDI5083.

[0058] Em uma modalidade, o agente imunoterápico é um agonista do CD160 (NK1). Em determinadas modalidades, o agonista do CD160 (NK1) é um anticorpo anti-CD160 ou fragmento de ligação ao antígeno do mesmo. Em uma modalidade, o anticorpo anti-CD160 é BY55.

[0059] Em uma modalidade, o inibidor de LAG-3, o inibidor da via PD-1, e o agente imunoterápico são formulados para administração intravenosa. Em algumas modalidades, o inibidor de LAG-3, o inibidor da via PD-1, e o agente imunoterápico são formulados juntos. Em outra modalidade, o inibidor de LAG-3, o inibidor da via PD-1, e o agente imunoterápico são formulados separadamente.

[0060] Em uma modalidade, o tumor maligno é selecionado entre o grupo consistindo em um câncer de fígado, câncer ósseo, câncer pancreático, câncer de pele, câncer oral, câncer de cabeça ou pescoço, câncer de mama, câncer de pulmão - incluindo câncer de pulmão de células pequenas e de células não pequenas, melanoma maligno cutâneo ou intraocular, câncer renal, câncer uterino, câncer de ovário, câncer colorretal, câncer de cólon, câncer retal, câncer da região anal, câncer de estômago, câncer testicular, câncer uterino, carcinoma das trompas de Falópio, carcinoma do endométrio, carcinoma do colo uterino, carcinoma da vagina, carcinoma da vulva, linfoma não Hodgkin, câncer do esôfago, câncer do intestino delgado, câncer do sistema endócrino, câncer da glândula tiroide, câncer da glândula paratiroide, câncer da glândula adrenal, sarcoma de tecidos moles, câncer da uretra, câncer do pênis, cânceres da infância, linfoma linfocítico, câncer da bexiga, câncer do rim ou ureter, carcinoma da pelve renal, neoplasma do sistema nervoso central

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19/84 (SNC), linfoma primário do sistema nervoso central, angiogênese tumoral, tumor do eixo espinhal, glioma do tronco cerebral, adenoma de pituitária, sarcoma de Kaposi, câncer epidermoide, câncer de células escamosas, cânceres induzidos ambientalmente incluindo os induzidos por amianto, malignidades hematológicas incluindo, por exemplo, mieloma múltiplo, linfoma de células B, linfoma de Hodgkin / linfoma de células B mediastinal primário, linfomas não-Hodgkin, linfoma mieloide agudo, leucemia mieloide crônica, leucemia linfoide crônica, linfoma folicular, linfoma difuso de grandes células B, linfoma de Burkitt, linfoma imunoblástico de células grandes, linfoma linfoblástico de células precursoras B, linfoma de células do moanto, leucemia linfoblástica aguda, micose fungoide, linfoma anaplásico de células grandes, linfoma de células T, e linfoma linfoblástico de células T precursoras, e qualquer combinação dos mesmos.

[0061] Em uma modalidade, o tumor maligno é câncer de pulmão de células não pequenas (NSCLC), um tumor relacionado com câncer relacionado com vírus, ou adenocarcinoma gástrico. Em algumas modalidades, o tumor maligno é melanoma, câncer gástrico, câncer da junção gastroesofágica, câncer de pulmão de células não pequenas, câncer de bexiga, carcinoma de células escamosas de cabeça e pescoço, ou câncer de células renais. Em uma modalidade, em que o tumor é câncer de pulmão, melanoma, carcinoma de células escamosas de cabeça e pescoço, câncer renal, câncer gástrico, ou carcinoma hepatocelular.

[0062] Em uma modalidade, o anticorpo anti-LAG-3 ou fragmento de ligação ao antígeno do mesmo e o agente imunoterápico são administrados como uma primeira linha de tratamento. Em outra modalidade, o inibidor de LAG-3, o inibidor da via PD-1, e o agente imunoterápico são administrados como uma segunda linha de tratamento. Em determinadas modalidades, o tumor maligno é

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20/84 refratário à primeira linha de tratamento.

[0063] Em uma modalidade, o método para tratamento de um sujeito efetado com um tumor maligno conforme descrito acima adicionalmente compreende a administração de no mínimo um agente terapêutico adicional. Em determinadas modalidades, o no mínimo um agente terapêutico adicional é um agente quimioterápico.

[0064] Outras características e vantagens da presente invenção serão evidentes a partir da descrição detalhada e dos exemplos que se seguem, os quais devem ser considerados como limitantes. DESCRIÇÃO DETALHADA DA INVENÇÃO

I. Termos [0065] Um paciente conforme usado aqui, neste requerimento de patente, inclui qualquer paciente que seja afetado com um câncer (por exemplo, melanoma). Os termos sujeito e paciente são usados de modo intercambiável aqui, neste requerimento de patente.

[0066] Conforme usado aqui, neste requerimento de patente, o termo administração se refere à introdução físical de uma composição compreendendo um agente terapêutico (por exemplo, combinação de um anticorpo anti-PD-1, um anticorpo anti-LAG-3, e um agente imunoterápico adicional) a um sujeito, usando quaisquer dos vários métodos e sistemas de liberação conhecidos pelos peritos na técnica. As vias de administração incluem intravenosa, intramuscular, subcutânea, intraperitoneal, espinhal ou outras vias de administração parenterais, por exemplo, por injeção ou infusão. A expressão administração parenteral conforme usado aqui, neste requerimento de patente, significa modos de administração direfentes de administração enteral e tópica, geralmente por injeção, e inclui, sem limitação, injeção e infusão intravenosas, intramusculares, intraarteriais, intratecais, intralinfáticas, intralesionais, intracapsulares, intraorbitais, intracardíacas, intradérmicas, intraperitoneais,

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21/84 transtraqueais, subcutâneas, subcuticulares, intra-articulares, subcapsulares, subaracnoides, intraespinhais, epidurais e intraesternais, bem como eletroporação in vivo. Outras vias não parenterais incluemn uma via de administração tópica, epidérmica ou mucosa, por exemplo, por via intranasal, por via vaginal, por via retal, por via sublingual ou por via tópica. A administração também pode ser realizada, por exemplo, uma vez, uma pluralidade de vezes, e/ou durante um ou mais períodos prolongados.

[0067] Conforme usado aqui, neste requerimento de patente, tratamento eficaz se refere a um tratamento que produz um efeito benéfico, por exemplo, a melhora de no mínimo um sintoma de uma doença ou de um distúrbio. Um efeito benéfico pode tomar a forma de uma melhora em relação à linha basal, isto é, uma melhora em relação a uma medição ou observação feita antes do início da terapia de acordo com o método. Um efeito benéfico também pode tomar a forma de para, tornar mais lenta, retardar, ou estabilizar a progressão deletéria de um marcador de tumor sólido. Tratamento eficaz pode se referir a alívio de no mínimo um sintoma de um tumor sólido. O tratamento eficaz referido pode, por exemplo, reduzir a dor do paciente, reduzir o tamanho e/ou o número de lesões, pode reduzir ou prevenir metástase de um tumor, e/ou pode tornar mais lento o crescimetno do tumor.

[0068] O termo quantidade eficaz se refere a uma quantidade de um agente que proporciona o resultado biológico, terapêutico, e/ou profilático desejado. Este resultado pode ser a redução, a melhora, a atenuação, a diminuição, o atraso, e/ou o alívio de um ou mais dos sinais, sintomas, ou causas de uma doença, ou qualquer outra alteração desejada de um sistema biológico. Em referência aos tumores sólidos, uma quantidade eficaz compreende uma quantidade suficiente para provocar um encolhimento do tumor e/ou para diminuir

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22/84 a taxa de crescimento do tumor (tal como para suprimir o crescimento do tumor) ou para prevenir ou retardar outra proliferação celular indesejada. Em algumas modalidades, uma quantidade eficaz é uma quantidade suficiente para retardar o desenvolvimento do tumor. Em algumas modalidades, uma quantidade eficaz é uma quantidade suficiente para prevenir ou retardar a recidiva do tumor. Uma quantidade eficaz pode ser administrada em uma ou mais administrações. A quantidade eficaz do fármaco ou da composição pode: (i) reduzir o número de células cancerígenas; (ii) reduzir o tamanho do tumor; (iii) inibir, retardar, tornar mais lenta em alguma extensão e pode interromper a infiltração de células cancerígenas dentro dos órgãos periféricos; (iv) inibir (isto é, tornar mais lenta em alguma extensão e pode interromper a metástase tumoral; (v) inibir o crescimento do tumor; (vi) prevenir ou retardar a ocorrência e/ou recidiva do tumor; e/ou (vii) aliviar em alguma extensão um ou mais dos sintomas associados com o câncer. Em um exemplo, uma quantidade eficaz é a quantidade de anticorpo anti-LAG-3 e a quantidade de anticorpo anti-PD-1, em combinação, clinicamente comprovada para realizar uma redução significativa no câncer ou para tornar mais lenta a progressão do câncer, tal como um tumor sólido avançado. Conforme usado aqui, neste requerimento de patente, os termos dose fixa, dose fixa e dose fixa são usados de modo intercambiável e se referem a uma dose que é administrada a um paciente sem relação com o peso ou com a área da superfície corporal (BSA) do paciente. Portanto, a dose fixa ou fixa não é proporcoinada como uma dose em mg/kg, mas ao invés é uma quantidade absoluta do agente (por exemplo, o anticorpo anti-LAG-3 e/ou anticorpo antiPD-1).

[0069] Conforme usado aqui, neste requerimento de patente, o termo imunoterapia se refere ao tratamento de um sujeito afetado

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23/84 com, ou em risco de contrair ou sofrer uma recidiva de, uma doença por um método compreendendo indução, reforço, supressão ou modificação de modo diverso de uma resposta imune. Tratamento ou terapia de um sujeito se refere a qualquer tipo de intervenção ou processo realizado em, ou a administração de um agente ativo (por exemplo, composição compreendendo uma combinação de um anticorpo anti-PD-1, um anticorpo anti-LAG-3, e um agente imunoterápico adicional) ao sujeito com o objetivo de reverter, aliviar, melhorar, inibir, retardar ou prevenir o início, a progressão, o desenvolvimento, a gravidade ou a recidiva de um sintoma, uma complicação ou uma condição, ou indícios bioquímicos associados com uma doença.

[0070] Conforme usado aqui, neste requerimento de patente, os termos terapia à base de células, terapia com células, terapia celular, ou citoterapia se referem à transplantação de liberação de material celular para dentro de um paciente para os fins de tratamento de uma doença ou de um distúrbio (por exemplo, um tumor maligno). O material celular pode ser um fragmento celular ou uma célula viva e intacta (por exemplo, linfócitos T, células dendríticas, ou célulastronco).

[0071] O uso do termo dose fixa com respeito a uma composição da invenção significa que dois ou mais anticorpos diferentes em uma única composição estão presentes na composição em proporções particulares (fixas) uns com os outros. Em algumas modalidades, a dose fixa se baseia no peso (por exemplo, mg) dos anticorpos. Em determinadas modalidades, a dose fixa se baseia na concentração (por exemplo, mg/ml) dos anticorpos. Em algumas modalidades, a proporção é de no mínimo cerca de 1:1, cerca de 1:2, cerca de 1:3, cerca de 1:4, cerca de 1:5, cerca de 1:6, cerca de 1:7, cerca de 1:8, cerca de 1:9, cerca de 1:10, cerca de 1:15, cerca de 1:20, cerca de

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1:30, cerca de 1:40, cerca de 1:50, cerca de 1:60, cerca de 1:70, cerca de 1:80, cerca de 1:90, cerca de 1:100, cerca de 1:120, cerca de 1:140, cerca de 1:160, cerca de 1:180, cerca de 1:200, cerca de 200:1, cerca de 180:1, cerca de 160:1, cerca de 140:1, cerca de 120:1, cerca de 100:1, cerca de 90:1, cerca de 80:1, cerca de 70:1, cerca de 60:1, cerca de 50:1, cerca de 40:1, cerca de 30:1, cerca de 20:1, cerca de 15:1, cerca de 10:1, cerca de 9:1, cerca de 8:1, cerca de 7:1, cerca de 6:1, cerca de 5:1, cerca de 4:1, cerca de 3:1, ou cerca de 2:1 mg do primeiro anticorpo para mg do segundo anticorpo. Por exemplo, a proporção de 3:1 de um primeiro anticorpo e um segundo anticorpo pode significar que um frasco pode conter cerca de 240 mg do primeiro anticorpo e 80 mg do segundo anticorpo ou cerca de 3 mg/ml do primeiro anticorpo e 1 mg/ml do segundo anticorpo.

[0072] O uso do termo dose fixa com respeito à composição da invenção significa uma dose que é administrada a um paciente sem relação com o peso ou a área da superfície corporal (BSA) do paciente. Portanto, a dose fixa não é proporcionada como uma dose em mg/kg, mas ao invés como uma quantidade absoluta do agente (por exemplo, do anticorpo anti-LAG-3 e/ou do anticorpo anti-PD-1). Por exemplo, uma pessoa de 60 kg e uma pessoa de 100 kg iriam receber a mesma dose da composição (por exemplo, 240 mg de um anticorpo anti-PD-1 e 80 mg de um anticorpo anti- LAG-3 em um único frasco de formulação de dosagem fixa contendo tanto 240 mg de um anticorpo anti-PD-1 quanto 80 mg de um anticorpo anti- LAG-3 (ou dois frascos de formulações de dosagens fixas contendo 120 mg de um anticorpo anti-PD-1 e 40 mg de um anticorpo anti- LAG-3, etc.)).

[0073] O termo dose com base no peso conforme referido aqui, neste requerimento de patente, significa que uma dose que é administrada a um paciente é calculada com base no peso do paciente. Por exemplo, quando um paciente com 60 kg de peso

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25/84 corporal necessita de 3 mg/kg de um anticorpo anti-LAG-3 em combinação com 3 mg/kg de um anticorpo anti-PD-1, pode-se extrair as quantidades apropriadas do anticorpo anti-LAG-3 (isto é, 180 mg) e do anticorpo anti-PD-1 (isto é, 180 mg) de uma vez a partir de uma formulação de dosagem fixa de um anticorpo anti-LAG3 e urn anticorpo anti-PD-1 em uma proporção de 1:1.

[0074] Um anticorpo (Ab) vai incluir, sem limitação, uma glicoproteina imunoglobulina a qual se liga especificamente a um antígeno e compreende no mínimo duas cadeias pesadas (H) e duas cadeias leves (L) interconectadas por ligações de dissulfeto, ou uma porção de ligação ao antígeno da mesma. Cada cadeia pesada é composta de uma região variável de cadeia pesada (abreviada aqui, neste requerimento de patente, como Vh) e uma região constante de cadeia pesada (abreviada aqui, neste requerimento de patente, como CH). Em alguns anticorpos, por exemplo, anticorpos IgG que ocorrem naturalmente, a região constante de cadeia pesada é composta de uma articulação e três domínios, CH1, CH2 e CH3. Em alguns anticorpos, por exemplo, anticorpos IgG que ocorrem naturalmente, cada cadeia leve é composta de uma região variável de cadeia leve (abreviada aqui, neste requerimento de patente, como Vl) e uma região constante de cadeia leve. A região constante de cadeia leve é composta de um domínio (abreviada aqui, neste requerimento de patente, como CL). As regiões Vh e Vl podem ser adicionalmente subdivididas em regiões de hipervariabilidade, denominadas regiões determiantes de complementaridade (CDR), intercaladas com regiões que são mais conservadas, denominadas regiões de estrutura principal (FR). Cada Vh e Vl é composta de três CDRs e quatro FRs, arranjadas do término amino para o término carbóxi na seguinte ordem: FR1, CDR1, FR2, CDR2, FR3, CDR3, FR4. As regiões variáveis das cadeias pesadas e leves contêm um domínio de ligação

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26/84 que interage com um antigeno. As regiões constantes dos anticorpos podem mediar a ligação da imunoglobulina a fatores ou tecidos hospedeiros, incluindo várias células do sistema imune (por exemplo, células efetoras) e o primeiro componente (C1q) do sistema de complemento clássico. Uma cadeia pesada pode ter a lisina do Cterminal ou não. A menos que especificado de modo diverso aqui, neste requerimento de patente, os aminoácidos nas regiões variáveis são numerados usando o sistema de numeração Kabat e os aminoácidos nas constantes são numerados usando o sistema de numeração EU.

[0075] Uma imunoglobulina pode ser de qualquer um dos isótipos conhecidos, incluindo IgA, IgA secretora, IgD, IgE, IgG, e IgM. O isótipo de IgG é dividido em subclasses em determinadas espécies: lgG1, lgG2, lgG3 e lgG4 em seres humanos, e lgG1, lgG2a, lgG2b e lgG3 em camundongos. Isótipo se refere à classe ou subclasse de anticorpos (por exemplo, IgM ou lgG1) que é codificada pelos genes de região constante de cadeia pesada. O termo anticorpo inclui, a título de exemplo, anticorpos monoclonais e policlonais; anticorpos quiméricos e humanizados; anticorpos humanos ou não humanos; anticorpos totalmente sintéticos; e anticorpos de cadeia única. Um anticorpo não humano pode ser humanizado por meio de métodos recombinantes de modo a reduzir sua imunogenicidade no homem. Onde não declarado expressamente, e a menos que o contexto indique de modo diverso, o termo anticorpo inclui anticorpos monoespecíficos, biespecíficos, ou multiespecíficos, bem como um anticorpo de cadeia única. Em modalidades, o anticorpo é um anticorpo biespecífico. Em outras modalidades, o anticorpo é um anticorpo monoespecífico.

[0076] Conforme usado aqui, neste requerimento de patente, um anticorpo IgG tem a estrutura de um anticorpo IgG que ocorre

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27/84 naturalmente, isto é, tem o mesmo número de cadeias pesadas e leves e de ligações de dissulfeto que um anticorpo IgG que ocorre naturalmente da mesma subclasse. Por exemplo, um anticorpo lgG1, lgG2, lgG3 ou lgG4 anti-ICOS consiste em duas cadeias pesadas (HCs) e duas cadeias leves (LCs), em que as duas cadeias pesadas e cadeia leves são ligadas pelo mesmo número e localização de pontes de dissulfeto que ocorrem em anticorpos lgG1, lgG2, lgG3 e lgG4 que ocorrem naturalmente, respectivamente (a menos que o anticorpo tenha sido mutado para modificar as ligações de dissulfeto).

[0077] Um anticorpo isolado se refere a um anticorpo que é substancialmente livre de outros anticorpos tendo diferentes especificidades antigênicas (por exemplo, um anticorpo isolado que se liga especificamente a PD-1 é substancialmente livre de anticorpos que se ligam especificamente a antígenos diferentes de PD-1). No entanto, um anticorpo isolado que se liga especificamente a PD-1 pode ter reatividade cruzada com outros antígenos, tais como moléculas de PD-1 de diferentes espécies. Além disso, um anticorpo isolado pode ser substancialmente livre de outro material celular e/ou substâncias químicas.

[0078] O anticorpo pode ser um anticorpo que tenha sido alterado (por exemplo, por mutação, deleção, substituição, conjugação a uma porção não anticorpo). Por exemplo, um anticorpo pode incluir um ou mais aminoácidos variantes (comparado com um anticorpo que ocorre naturalmente) os quais modificam uma propriedade (por exemplo, uma propriedade funcional) do anticorpo. Por exemplo, são conhecidas na técnica numerosas alterações semelhantes as quais afetam, por exemplo, a meia-vida, a função efetora, e/ou respostas imunes para o anticorpo em um paciente. O termo anticorpo também inclui constructos polipeptídicos artificiais os quais compreendem no mínimo um sítio de ligação ao antígeno derivado de anticorpo.

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28/84 [0079] O termo anticorpo monoclonal (mAb) se refere a uma preparação de moléculas de anticorpo que não ocorre naturalmente de composição molecular única, isto é, moléculas de anticorpo cujas sequências primárias são essencialmente idênticas, e a qual apresenta uma especificidade e afinidade de ligação únicas para um epitopo em particular. Um anticorpo monoclonal é um exemplo de um anticorpo isolado. MAbs podem ser produzidos por técnicas de hibridoma, recombinantes, transgênícas ou diversas de conhecimento dos peritos na técnica.

[0080] Um anticorpo humano (HuMAb) se refere a um anticorpo tendo regiões variáveis nas quais tanto as regiões de estrutura principal quanto de CDR são derivadas de sequências de imunoglobulinas da linhagem germinativa humana. Além do mais, se o anticorpo contiver uma região constante, a região constante também é derivada de sequências de imunoglobulinas da linhagem germinativa humana. Os anticorpos humanos da invenção podem incluir resíduos de aminoácidos não codificados por sequências de imunoglobulinas da linhagem germinativa humana (por exemplo, mutações introduzidas por mutagênese aleatória ou sítio-específica in vitro ou por mutação somática in vivo). No entanto, o termo anticorpo humano, conforme usado aqui, neste requerimento de patente, não se destina a incluir anticorpos nos quais sequências de CDR derivadas da linhagem germinativa de outra espécie de mamífero, tal como um camundongo, tenham sido enxertadas sobre sequências de estrutura principal humanas. Os termos anticorpos humanos e anticorpos totalmente humanos são usados de maneira sinônima.

[0081] Um anticorpo humanizado se refere a um anticorpo no qual alguns, a maioria ou todos os aminoácidos fora dos domínios de CDR de um anticorpo não humano são substituídos com aminoácidos correspondentes derivados de imunoglobulinas humanas. Em uma

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29/84 modalidade de uma forma humanizada de um anticorpo, alguns, a maioria ou todos os aminoácidos fora dos domínios de CDR foram substíituídos com aminoácidos de imunoglobulinas humanas, ao passo que alguns, a maioria ou todos os aminoácidos dentro de uma ou mais regiões de CDR são inalterados. São permissíveis pequenas adições, deleções, inserções, substituições ou modificações de aminoácidos, na medida que não anulem a capacidade do anticorpo para se ligar a um antígeno em particular. Um anticorpo humanizado mantém uma especificidade antigênica similar à do anticorpo original.

[0082] Um anticorpo quimérico se refere a um anticorpo no qual as regiões variáveis são derivadas de uma espécie e as regiões constantes são derivadas de outra espécie, tal como um anticorpo no qual as regiões variáveis são derivadas de um anticorpo de camundongo e as regiões constantes são derivadas de um anticorpo humano.

[0083] Um antiantígeno anticorpo se refere a um anticorpo que se liga especificamente ao antígeno. Por exemplo, um anticorpo antiPD-1 se liga especificamente a PD-1 e um anticorpo anti-CTLA-4 se liga especificamente a CTLA-4.

[0084] Uma porção de ligação ao antígeno de um anticorpo (também denominada um fragmento de ligação ao antígeno) se refere a um ou mais fragmentos de um anticorpo que conservam a capacidade de se ligarem especificamente ao antígeno ligado pelo anticorpo inteiro. Foi demonstrado que a função de ligação ao antígeno de um anticorpo pode ser realizada por fragmentos ou porções de um anticorpo de comprimento total. Exemplos de fragmentos de ligação englobados dentro do termo porção de ligação ao antígeno ou fragmento de ligação ao antígeno de um anticorpo, por exemplo, um anticorpo anti-ICOS descrito aqui, neste requerimento de patente, incluem:

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30/84 [0085] (1) um fragmento Fab (fragmento de divagem de papaína) ou um fragmento monovalente similar consistindo nos domínios VL, VH, LCeCHI;

[0086] (2) um fragmento F(ab')2 (fragmento de divagem de pepsina) ou um fragmento bivalente similar compreendendo dois fragmentos Fab ligados por uma ponte de dissulfeto na região de articulação;

[0087] (3) um fragmento Fd consistindo nos domínios VH e CH1;

[0088] (4) um fragmento Fv consistindo nos domínios VL e VH de um único braço de um anticorpo, [0089] (5) um fragmento de anticorpo de domínio único (dAb) (Ward et al., (1989) Nature 341:544-46), o qual consiste em um domínio VH;

[0090] (6) um anticorpo de duplo domínio único o qual consiste em dois domínios VH ligados por uma articulação (anticorpos de redirecionamento de dupla afinidade (DARTs));

[0091] (7) uma imunoglobulina de duplo domínio variável;

[0092] (8) uma região determiante de complementaridade isolada (CDR); e [0093] (9) uma combinação de duas ou mais CDRs isoladas, as quais opcionalmente podem ser unidas por um ligante sintético. Além do mais, embora os dois domínios do fragmento Fv, VL e VH, sejam codificados por genes separados, eles podem ser unidos, usando métodos recombinantes, por um ligante sintético que permita que sejam produzidos como uma única cadeia de proteína na qual o par de regiões VL e VH forme moléculas monovalentes (conhecidas como Fv de cadeia única (scFv); vide, por exemplo, Bird et al. (1988) Science 242:423-426; e Huston et al. (1988) Proc. Natl. Acad. Sei. USA 85:5879-5883). Os anticorpos de cadeia única referidos também se destinam a ser englobados dentro do termo porção de ligação ao

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31/84 antígeno ou fragmento de ligação ao antígeno de um anticorpo. Estes fragmentos de anticorpos são obtidos usando técnicas convencionais de conhecimento dos peritos na técnica, e os fragmentos são triados para utilidade nas mesma maneira que anticorpos intactos são triados. Porções de ligação ao antígeno podem ser produzidas por técnicas de DNA recombinante, ou por divagem enzimática ou química de imunoglobulinas intactas.

[0094] O termo LAG-3, LAG3, ou Gene-3 de Ativação de Linfócitos se refere ao Gene-3 de Ativação de Linfócitos. O termo LAG-3 conforme usado aqui, neste requerimento de patente, inclui o LAG-3 humano (hLAG-3), variantes, isoformas, e homólogos de espécies de hLAG-3, e análogos tendo no mínimo um epítopo em comum com hLAG-3. O termo LAG-3 conforme usado aqui, neste requerimento de patente, inclui variantes, isoformas, homólogos, ortólogos e parálogos. Por exemplo, anticorpos específicos para uma proteína LAG-3 humana, em certos casos, podem realizar reação cruzada com uma proteína LAG-3 de uma espécie diferente da humana. Em outras modalidades, os anticorpos específicos para uma proteína LAG-3 humana podem ser completamente específicos para a proteína LAG-3 humana e podem não apresentar reatividade cruzada entre espécies ou outros tipos de reatividade cruzada, ou podem apresentar reatividade cruzada com LAG-3 de algumas outras espécies, mas não todas as outras espécies (por exemplo, apresentar reação cruzada com LAG-3 de macaco, mas não com LAG-3 de camundongo). O termo LAG-3 humana se refere à sequência de LAG-3 humana, tal como a sequência de aminoácidos completa de LAG-3 humano tendo Acesso no GenBank de No. NP_002277 (SEQ ID NO: 13). O termo LAG-3 de camundongo se refere à sequência LAG-3 de camundongo, tal como a sequência de aminoácidos completa de LAG-3 de camundongo tendo Acesso no GenBank de No.

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NP_032505. LAG-3 também é conhecida na técnica como, por exemplo, CD223. A sequência de LAG-3 humana pode diferir da LAG3 humana do Acesso no GenBank de No. NP_002277 por ter, por exemplo, mutações conservadas ou mutações em regiões não conservadas e a LAG-3 tem substancialmente a mesma função biológica que a LAG-3 humana do Acesso no GenBank de No. NP_002277 (SEQ ID NO: 44). Por exemplo, uma função biológica de LAG-3 humana é ter um epitopo no domínio extracelular de LAG-3 que é especificamente ligado por um anticorpo da presente invenção ou uma função biológica de LAG-3 humana é ligação a moléculas de MHC Classe II.

[0095] Uma sequência LAG-3 humana em particular geralmente vai ser no mínimo 90% idêntica em sequência de aminoácidos à LAG3 humana de Acesso no GenBank de No. NP_002277 e contém resíduos de aminoácidos que identificam a sequência de aminoácidos como sendo humana quando comparada com sequências de aminoácidos LAG-3 de outras espécies (por exemplo, murinas). Em alguns casos, uma LAG-3 humana pode ser no mínimo 95%, ou mesmo no mínimo 96%, 97%, 98%, ou 99% idêntica em sequência de aminoácidos à LAG-3 de Acesso no GenBank de No. NP_002277. Em determinadas modalidades, uma sequência LAG-3 humana vai apresentar não mais de 10 diferenças de aminoácidos da sequência LAG-3 de Acesso no GenBank de No. NP_002277. Em determinadas modalidades, a LAG-3 humana pode apresentar não mais de 5, ou mesmo não mais de 4, 3, 2, ou 1 aminoácidos de diferença da sequência LAG-3 de Acesso no GenBank de No. NP_002277. A percentagem de identidade pode ser determinada conforme descrito aqui, neste requerimento de patente.

[0096] Conforme usado aqui, neste requerimento de patente, os termos Morte Programada 1, Morte Celular Programada 1,

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Proteína PD-1, PD-1, PD1, PDCD1, hPD-1 e hPD-l são usados de modo intercambiável, e incluem variantes, isoformas, homólogos de espécies de PD-1 humano, e análogos tendo no mínimo um epítopo em comum com PD-1. A sequência completa de PD-1 pode ser encontrada sob o GenBank Acesso Nos. U64863 (SEQ ID NO: 29) e AAC51773.1 (SEQ ID NO: 45).

[0097] A proteína de Morte Celular Programada 1 (PD-1) é um membro inibidor da família de receptores CD28, que também inclui CD28, CTLA-4, ICOS e BTLA. PD-1 é expresso sobre células B, células T, e células mieloides ativadas (Agata et al., supra; Okazaki et al. (2002) Curr. Opin. Immunol. 14: 391779-82; Bennett et al. (2003) J Immunol 170:711-8). Os membros iniciais da família, CD28 e ICOS, foram descobertos por efeitos funcionais sobre o aumento da proliferação de células T depois da adição de anticorpos monoclonais (Hutloff et al. Nature (1999); 397:263-266; Hansen et al. Immunogenics (1980); 10:247-260). PD-1 foi descoberto através de triagem para expressão diferencial em células apotóticas (Ishida et al. EMBO J (1992); 11:3887-95). Os outros membros da família, CTLA-4 e BTLA, foram descobertos através de triagem para expressão diferencial em linfócitos T citotóxicos e células TH1, respectivamente. CD28, ICOS e CTLA-4 todos têm um resíduo de cisteína não pareado o qual possibilita homodimerização. Em contraste, foi sugerido que PD-1 existe como um monômero, carecendo do resíduo de cisteína não pareado característico em outros membros da família CD28.

[0098] O gene PD-1 é uma proteína transmembrana de 55 kDa tipo I que é parte da superfamília de genes de Ig (Agata et al. (1996) Int Immunol 8:765-72). PD-1 contém um motivo inibidor de tirosina imunorreceptor proximal à membrana (ITIM) e um motivo de switch à base de tirosina distai à membrana (ITSM) (Thomas, M. L. (1995) J Exp Med 181:1953-6; Vivier, E and Daeron, M (1997) Immunol Today

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18:286-91). Embora estruturalmente similar a CTLA-4, PD-1 carece do motivo MYPPPY que é crucial para a ligação de B7-1 e de B7-2. Foram identificados dois ligantes para PD-1, PD-L1 e PD-L2, os quais foi demonstrado que regulam negativamente a ativação de células T depois de ligação a PD-1 (Freeman et al. (2000) J Exp Med 192:102734; Latchman et al. (2001) Nat Immunol 2:261-8; Carter et al. (2002) Eur J Immunol 32:634-43). Tanto PD-L1 quanto PD-L2 são homólogos de B7 que se ligam a PD-1, mas não se ligam a outros membros da família CD28. PD-L1 é abundante em uma variedade de cânceres humanos (Dong et al. (2002) Nat. Med. 8:787-9). A interação entre PD1 e PD-L1 resulta em uma diminuição na infiltração tumoral por linfócitos, em uma diminuição na proliferação mediada por receptores de células T, e em uma evasão imune pelas células cancerosas (Dong et al. (2003) J. Mol. Med. 81:281-7; Blank et al. (2005) Cancer Immunol. Immunother. 54:307-314; Konishi et al. (2004) Clin. Cancer Res. 10:5094-100). A supressão imune pode ser revertida por inibição da interação local de PD-1 com PD-L1, e o efeito é aditivo quando a interação de PD-1 com PD-L2 também é bloqueada (Iwai et al. (2002) Proc. Nat'l. Acad. Sci. USA 99:12293-7; Brown et al. (2003) J. Immunol. 170:1257-66).

[0099] Consistente com PD-1 ser um membro inibidor da família CD28, animais deficientes de PD-1 desenvolvem vários fenótipos autoimunes, incluindo cardiomiopatia autoimunes e uma síndrome semelhante ao lúpus com artrite e nefrite (Nishimura et al. (1999) Immunity 11:141-51; Nishimura et al. (2001) Science 291:319-22). Adicionalmente, foi visto que o PD-1 tem um papel na encefalomielite autoimune, no lúpus eritematoso sistêmico, na doença do enxertoversus-hospedeiro (GVHD), no diabetes tipo I, e na artrite reumatoide (Salama et al. (2003) J Exp Med 198:71-78; Prokunina and AlarconRiquelme (2004) Hum Mol Genet 13:R143; Nielsen et al. (2004) Lupus

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13:510). Em uma linhagem tumoral de células B murinas, foi demonstrado que o ITSM de PD-1 é essencial para bloquear o fluxo de Ca2+ mediado por BCR e a fosforilação por tirosina de moléculas efetoras a jusante (Okazaki et al. (2001) PNAS 98:13866-71).

[00100] Ligante de Morte Celular Programada -1 (PD-L1) é um de dois ligantes de glicoproteínas da superfície celular para PD-1 (o outro sendo PD-L2) que regula negativamente a ativação de células Tea secreção de citocina depois de ligação a PD-1. O termo PD-L1 conforme usado aqui, neste requerimento de patente, inclui PD-L1 humano (hPD-L1), variantes, isoformas, e homólogos de espécies de hPD-L1, e 5 análogos tendo no mínimo um epítopo em comum com hPD-L1. A sequência completa de hPD-L1 pode ser encontrada sob o Acesso no GenBank de No. Q9NZQ7.

[00101] Os termos Ligante de Morte Celular Programada-2 e PDL2 conforme usado aqui, neste requerimento de patente, incluem PDL2 humano (hPD-L2), variantes, isoformas, e homólogos de espécies de hPD-L2, e análogos tendo no mínimo um epítopo em comum com hPD-L2. A sequência completa de hPD-L2 pode ser encontrada sob o Acesso no GenBank de No. Q9BQ51.

[00102] Um câncer se refere a um amplo grupo de várias doenças caracterizadas pelo crescimento descontrolado de células anormais no corpo. Divisão e crescimento celulares desregulados resultam na formação de tumores malignos que invadem os tecidos vizinhos e também podem metastatizar para partes distantes do corpo através do sistema linfático ou da corrente sanguínea. Um câncer ou tecido câncerígeno pode incluir um tumor.

[00103] O termo tumor conforme usado aqui, neste requerimento de patente, se refere a qualquer massa de tecido que resulte de crescimento celular excessivo ou proliferação celular excessiva, quer benigna (não cancerosa) ou maligna (cancerosa), incluindo lesões préPetição 870190089572, de 10/09/2019, pág. 52/165

36/84 cancerosas.

[00104] O termo e/ou onde usado aqui, neste requerimento de patente, deve ser tomado como divulgação específica de cada uma das duas características ou cada um dos dois componentes especificados com ou sem a/o outra/outro. Deste modo, o termo e/ou conforme usado em uma expressão tal como A e/ou B aqui, neste requerimento de patente, se destina a incluir A e B, A ou B, A (isolado), e B (isolado). Do mesmo modo, o termo e/ou conforme usado em uma expressão tal como A, B, e/ou C se destina a englobar cada um dos seguintes aspectos: A, B, e C; A, B, ou C; A ou C; A ou B; B ou C; A e C; A e B; B e C; A (isolado); B (isolado); e C (isolado).

[00105] Deve ser entendido que sempre que aspectos são descritos aqui, neste requerimento de patente, com a expressão compreendendo, também são proporcionados aspectos análogos de modo diverso descritos em termos de consistindo em e/ou consistindo essencialmente em.

[00106] Os termos cerca de ou compreendendo essencialmente de se referem a um valor ou composição que está dentro de uma faixa de erro aceitável para o valor ou composição em particular conforme determinado por um perito na técnica, a qual vai depender em parte de como o valor ou composição é medido ou determinado, isto é, das limitações do sistema de medição. Por exemplo, cerca de ou compreendendo essencialmente de pode significar dentro de 1 ou mais de 1 desvio-padrão de acordo com a prática na técnica. Alternativamente, cerca de ou compreendendo essencialmente de pode significar uma faixa de até 10% ou 20% (isto é, ±10% ou ±20%). Por exemplo, cerca de 3 mg pode incluir qualquer número entre 2,7 mg e 3,3 mg (para 10%) ou entre 2,4 mg e 3,6 mg (para 20%). Além do mais, particularmente com respeito a sistemas ou processos

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37/84 biológicos, os termos podem siignificar até uma ordem de magnitude ou até 5 vezes de um valor. Quando valores ou composições particulares são proporcionados no requerimento e nas reivindicações, a menos que determinado de modo diverso, o significado de cerca de ou compreendendo essencialmente de deve ser presumido como estando dentro de uma faixa de erro aceitável para aquele valor ou composição em particular.

[00107] Conforme descrito aqui, neste requerimento de patente, qualquer faixa de concentração, faixa de percentagem, faixa de proporção ou faixa de inteiros deve ser entendida como incluindo o valor de qualquer inteiro dentro da faixa mencionada e, quando apropriado, frações das mesmas (tais como um décimo e um centésimo de um número inteiro), a menos que indicado de modo diverso.

[00108] A menos que definido de modo diverso, todos os terms técnicos e científicos usados aqui, neste requerimento de patente, têm o mesmo significado conforme é comumente entendido por um perido na técnica à qual esta invenção está relacionada. Por exemplo, o Concise Dictionary of Biomedicine and Molecular Biology, Juo, PeiShow, 2nd ed., 2002, CRC Press; The Dictionary of Cell and Molecular Biology, 5th ed., 2013, Academic Press; e o Oxford Dictionary Of Biochemistry And Molecular Biology, 2006, Oxford University Press, proporcionam a um perito um dicionário geral de muitos dos termos usados nesta invenção.

[00109] Unidades, prefixos, e símbolos são denotados em sua forma aceita pelo Système International de Unites (SI). Intervalos numéricos são inclusivos dos números definindo o intervalo. Os títulos proporcionados aqui, neste requerimento de patente, não são limitações dos vários aspectos da invenção, as quais podem ser tidas por meio de referência à especificação como um todo. Por

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38/84 conseguinte, os termos definidos imediatamente abaixo são mais completamente definidos por meio de referência à especificação em sua totalidade.

[00110] Vários aspectos da invenção são descritos em detalhes adicionais nas sub-seções que se seguem.

Ila. Anticorpos anti-LAG-3 [00111] Anticorpos anti-LAG-3 humano (ou domínios VH/VL derivados dos mesmos) adequados para uso na invenção podem ser gerados usando métodos de conhecimento geral na técnica. Alternativamente, podem ser usados anticorpos anti-LAG-3 reconhecidos na técnica. Por exemplo, pode ser usado o anticorpo anti-LAG-3 humano descrito no requerimento de Patente No. US2011/0150892 A1, cujos ensinamentos são por este incorporados por meio de referência, e referido como anticorpo monoclonal 25F7 (também conhecido como 25F7 e LAG3.1). Outros anticorpos antiLAG-3 reconhecidos na técnica que podem ser usados incluem IMP731 (H5L7BW) descrito Patente US 2011/007023, MK-4280 (28G10) descrito em WO2016028672, REGN3767 descrito no Journal for ImmunoTherapy of Cancer, (2016) Vol. 4, Supp. Supplement 1 Abstract Number: P195, BAP050 descrito em WO2017/019894, IMP701 (LAG-525), IMP321 (eftilagimod alfa)), Sym022, TSR-033, MGD013, BI754111, FS118, AVA-017 e GSK2831781. Estes e outros anticorpos anti-LAG-3 uteis na invenção reivindicada podem ser encontrados, por exemplo, em: WO2016/028672, W02017/106129,

WO2017/062888,

WO2016/126858,

WO2015/200119,

WO2017/220555,

WO2017/015560,

WO2017/087901,

W02009/044273,

WO2014/179664,

WO2017/019846,

WO2017/220569,

WO2017/025498,

WO2018/083087,

WO2018/069500,

WO2016/200782,

WO2017/198741,

WO2018/071500,

WO2017/087589,

WO2017/149143,

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WO2017/219995, US2017/0260271, WO2017/086367,

WO/2017/086419, WO2018/034227, e W02014/140180. Os conteúdos de cada uma destas referências são aqui, a este requerimento de patente, incorporados por meio de referência.

[00112] Podem ser usados anticorpos que competem com quaisquer dos anticorpos para ligação a LAG-3 reconhecidos na técnica acima referidos.

[00113] Um exemplo de anticorpo anti-LAG-3 é BMS-986016 compreendendo cadeias pesadas e leves compreendendo as sequências mostradas nas SEQ ID NOs: 1 e 2, respectivamente, ou fragmentos de ligação ao antígeno e variantes dos mesmos, conforme descrito na Patente US No. 9.505.839, a qual é aqui, a este requerimento de patente, incorporada por meio de referência.

[00114] Em outras modalidades, o anticorpo tem as CDRs de cadeias pesadas e leves ou regiões variáveis de BMS-986016. Por conseguinte, em uma modalidade, o anticorpo compreende os domínios CDR1, CDR2, e CDR3 da região VH de BMS-986016 tendo a sequência estipulada na SEQ ID NO: 3, e os domínios CDR1, CDR2 e CDR3 da região VL de BMS-986016 tendo a sequência estipulada na SEQ ID NO: 5. Em outra modalidade, o anticorpo compreende os domínios CDR1, CDR2 e CDR3 compreendendo as sequências estipuladas nas SEQ ID NOs: 7, 8, e 9, respectivamente, e os domínios CDR1, CDR2 e CDR3 compreendendo as sequências estipuladas nas SEQ ID NOs: 10, 11, e 12, respectivamente. Em outra modalidade, o anticorpo compreende as regiões VH e/ou VL compreendendo as sequências de aminoácidos estipuladas na SEQ ID NO: 3 e/ou SEQ ID NO: 5, respectivamente. Em outra modalidade, o anticorpo compreende as regiões variável de cadeia pesada (VH) e/ou variável de cadeia leve (VL) codificadas pelas sequências de ácidos nucleicos estipuladas na SEQ ID NO: 4 e/ou SEQ ID NO: 6,

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40/84 respectivamente. Em outra modalidade, o anticorpo compete para ligação com e/ou se liga ao mesmo epítopo sobre LAG-3 que os anticorpos acima mencionados. Em outra modalidade, o anticorpo se liga a um epítopo de LAG-3 humano compreendendo a sequência de aminoácidos PGHPLAPG (SEQ ID NO: 14). Em outra modalidade, o anticorpo se liga a um epítopo de LAG-3 humano compreendendo a sequência de aminoácidos HPAAPSSW (SEQ ID NO: 15) ou PAAPSSWG (SEQ ID NO: 16).

[00115] Em outra modalidade, o anticorpo tem no mínimo cerca de 90% de identidade de sequência de aminoácidos de região variável com os anticorpos acima mencionados (por exemplo, no mínimo cerca de 90%, 95% ou 99% de identidade de região variável com SEQ ID NO: 3 ou SEQ ID NO: 5).

[00116] Em modalidades, o anticorpo anti-LAG-3 é um anticorpo biespecífico. Em modalidades, o anticorpo anti-LAG-3 é um anticorpo biespecífico que se liga tanto a PD-1 quanto a LAG-3.

Ib. Anticorpos Anti-PD-1 [00117] Anticorpos monoclonais humanos (HuMAbs) que se ligam especificamente a PD-1 com alta afinidade foram revelados nas Patentes U.S. Nos. 8.008.449 e 8.779.105. Outros mAbs anti-PD-1 foram descritos, por exemplo, nas Patentes U.S. Nos. 6.808.710, 7.488.802, 8.168.757 e 8.354.509, e na Publicação de Patente Internacional PCT No. WO 2012/145493. Foi demonstrado que cada um dos HuMAbs anti-PD-1 revelados na Patente U.S. No. 8.008.449 apresenta uma ou mais das seguintes características: (a) liga-se ao PD-1 humano com uma Kd de 1 x 10’⁷ M ou menos, conforme determinado por ressonância de plasmon superficial usando um sistema biosensor Biacore; (b) não se liga substancialmente a CD28, CTLA-4 ou ICOS humano; (c) aumenta uma proliferação de células T em um ensaio de Reação de Linfócitos Mistos (MLR); (d) aumenta a

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41/84 produção de interferon-γ em um ensaio de MLR; (e) aumenta a secreção de IL-2 em um ensaio de MLR; (f) liga-se ao PD-1 humano e ao PD-1 de macaco cynomolgus; (g) inibe a ligação de PD-L1 e/ou PD-L2 a PD-1; (h) estimula respostas de memória específicas para antígeno; (i) estimula respostas de anticorpos; e (j) inibe o crescimento de células tumorais in vivo. Anticorpos anti-PD-1 úteis para a presente invenção incluem mAbs que se ligam especificamente ao PD-1 humano e apresentam no mínimo uma, de modo preferencial no mínimo cinco, das características precedentes.

[00118] Em uma modalidade, o anticorpo anti-PD-1 é nivolumab. Nivolumab (também conhecido como OPDIVO®; BMS-936558; anteriormente designado 5C4, BMS-936558, MDX-1106, ou ONO4538) é um anticorpo do inibidor do ponto de controle imunológico PD1 de lgG4 totalmente humana (S228P) que evita seletivamente a interação com ligantes de PD-1 (PD-L1 e PD-L2), deste modo bloqueando a regulação negativa de funções das células T antitumorais (Patente U.S. No. 8.008.449; Wang et al., 2014 Cancer Immunol Res. 2(9):846-56). Em outra modalidade, o anticorpo anti-PD1 ou fragmento do mesmo realiza competição cruzado com o nivolumab. Em outras modalidades, o anticorpo anti-PD-1 ou fragmento do mesmo se liga ao mesmo epitopo que o nivolumab. Em determinadas modalidades, o anticorpo anti-PD-1 tem as mesmas CDRs que o nivolumab. 3 [00119] Em outra modalidade, o anticorpo anti-PD-1 é pembrolizumab. Pembrolizumab é um anticorpo lgG4 monoclonal humanizado (S228P) direcionado contra o receptor da superfície celular humana PD-1 (morte programada -1 ou morte celular programada -1). O pembrolizumab é descrito, por exemplo, nas Patentes U.S. Nos. 8.354.509 e 8.900.587.

[00120] Anticorpos anti-PD-1 humano (ou domínios VH e/ou VL

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42/84 derivados dos mesmos) adequados para uso na invenção podem ser gerados usando métodos de conhecimento geral na técnica. Alternativamente, podem ser usados anticorpos anti-PD-1 reconhecidos na técnica. Por exemplo, podem ser usados anticorpos monoclonais 5C4 (referidos aqui, neste requerimento de patente, como Nivolumab ou BMS-936558), 17D8, 2D3, 4H1, 4A11, 7D3, e 5F4, descritos em WO 2006/121168, cujos ensinamentos são por este incorporados por meio de referência. Outros anticorpos contra PD-1 conhecidos incluem lambrolizumab (MK-3475) descrito em WO 2008/156712, e AMP-514 descrito em WO 2012/145493, cujos ensinamentos são por este incorporados por meio de referência. Anticorpos anti-PD-1 conhecidos adicionais e outros inibidores do PD1 incluem os descritos em WO 2009/014708, WO 03/099196, WO 2009/114335 e WO 2011/161699, cujos ensinamentos são por este incorporados por meio de referência. Em uma modalidade, o anticorpo anti-PD-1 é REGN2810. Em uma modalidade, o anticorpo anti-PD-1 é PDR001. Outro anticorpo anti-PD-1 conhecido é o pidilizumab (CT011). Também podem ser usados anticorpos ou fragmentos de ligação ao antígeno dos mesmos que competem com qualquer um destes anticorpos ou inibidores para ligação ao PD-1.

[00121] Outros anticorpos monoclonais anti-PD-1 foram descritos, por exemplo, nas Patentes U.S. Nos. 6.808.710, 7.488.802, 8.168.757 e 8.354.509, na Publicação de Patente US No. 2016/0272708, e na Publicação de Patente Internacional PCT Nos. WO 2012/145493, WO 2008/156712, WO 2015/112900, WO 2012/145493, WO 2015/112800, WO 2014/206107, WO 2015/35606, WO 2015/085847, WO 2014/179664, WO 2017/020291, WO 2017/020858, WO 2016/197367, WO 2017/024515, WO 2017/025051, WO 2017/123557, WO

2016/106159, WO 2014/194302, WO 2017/040790, WO 2017/133540, WO 2017/132827, WO 2017/024465, WO 2017/025016, WO

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43/84

2017/106061, WO 2017/19846, WO 2017/024465, WO 2017/025016, WO 2017/132825, e WO 2017/133540, cada uma das quais é aqui, a este requerimento de patente, incorporada por meio de referência. [00122] Em algumas modalidades, o anticorpo anti-PD-1 é selecionado entre o grupo consistindo em nivolumab (também conhecido como OPDIVO®, 5C4, BMS-936558, MDX-1106, e ONO4538), pembrolizumab (Merck; também conhecido como KEYTRUDA®, lambrolizumab, e MK-3475; vide WO2008/156712), PDR001 (Novartis; vide WO 2015/112900), MEDI-0680 (AstraZeneca; também conhecido como AMP-514; vide WO 2012/145493), cemiplimab (Regeneron; também conhecido como REGN-2810; vide WO 2015/112800), JS001 (TAIZHOU JUNSHI PHARMA; vide Si-Yang Liu et al., J. Hematol. Oncol. /0:136 (2017)), BGB-A317 (Beigene; vide WO 2015/35606 e US 2015/0079109), INCSHR1210 (Jiangsu Hengrui Medicine; também conhecido como SHR-1210; vide WO 2015/085847; Si-Yang Liu et al., J. Hematol. Oncol. /0:136 (2017)), TSR-042 (Tesaro Biopharmaceutical; também conhecido como ANB011; vide WO2014/179664), GLS-010 (Wuxi/Harbin Gloria Pharmaceuticals; também conhecido como WBP3055; vide Si-Yang Liu et al., J. Hematol. Oncol. /0:136 (2017)), AM-0001 (Armo), STI-1110 (Sorrento Therapeutics; vide WO 2014/194302), AGEN2034 (Agenus; vide WO 2017/040790), MGA012 (Macrogenics, vide WO 2017/19846), e IBI308 (Innovent; vide WO 2017/024465, WO 2017/025016, WO 2017/132825, e WO 2017/133540), cujas referências são aqui, a este requerimento de patente, incorporadas por meio de referência.

[00123] Em outra modalidade, o anticorpo anti-PD-1 ou fragmento de ligação ao antígeno do mesmo realiza competição cruzada com o pembrolizumab. Em algumas modalidades, o anticorpo anti-PD-1 ou fragmento de ligação ao antígeno do mesmo se liga ao mesmo epítopo que o pembrolizumab. Em determinadas modalidades, o anticorpo

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44/84 anti-PD-1 ou fragmento de ligação ao antígeno do mesmo tem as mesmas CDRs que o pembrolizumab. Em outra modalidade, o anticorpo anti-PD-1 é pembrolizumab. Pembrolizumab (também conhecido como KEYTRUDA®, lambrolizumab, e MK-3475) é um anticorpo lgG4 monoclonal humanizado direcionado contra o receptor da superfície celular humano PD-1 (morte programada -1 ou morte celular programada -1). Pembrolizumab é descrito, por exemplo, nas Patentes U.S. Nos. 8.354.509 e 8.900.587; vide também http://www. cancer. gov/drugdictionary?cdrid=695789 (acessado pela última vez em: 25 de maio de 2017). O pembrolizumab foi aprovado pela agência americana FDA para o tratamento de recidiva de melanoma ou melanoma refratário.

[00124] Em outras modalidades, o anticorpo anti-PD-1 ou fragmento de ligação ao antígeno do mesmo realiza competição cruzada com o MEDI0608. Em ainda outras modalidades, o anticorpo anti-PD-1 ou fragmento de ligação ao antígeno do mesmo se liga ao mesmo epítopo que o MEDI0608. Em determinadas modalidades, o anticorpo anti-PD1 tem as mesmas CDRs que o MEDI0608. Em outras modalidades, o anticorpo anti-PD-1 é MEDI0608 (anteriormente AMP-514), o qual é um anticorpo monoclonal. MEDI0608 é descrito, por exemplo, na Patente U.S. No. 8.609.089 ou em http://www.cancer.gov/drugdictionary?cdrid=756047 (acessado pela última vez em 25 de maio de 2017).

[00125] Em outras modalidades, o anticorpo anti-PD-1 ou fragmento de ligação ao antígeno do mesmo realiza competição cruzada com o BGB-A317. Em algumas modalidades, o anticorpo anti-PD-1 ou fragmento de ligação ao antígeno do mesmo se liga ao mesmo epítopo que BGB-A317. Em determinadas modalidades, o anticorpo anti-PD-1 ou fragmento de ligação ao antígeno do mesmo tem as mesmas CDRs que o BGB-A317. Em determinadas modalidades, o anticorpo anti-PD

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45/84 ou fragmento de ligação ao antígeno do mesmo é BGB-A317, o qual é um anticorpo monoclonal humanizado. BGB-A317 é descrito na Publicação de Patente U.S. No. 2015/0079109.

[00126] Anticorpos anti-PD-1 úteis para as composições reveladas também incluem anticorpos isolados que se ligam especificamente ao PD-1 humano e realizam competição cruzada para ligação ao PD-1 humano com o nivolumab (vide, por exemplo, as Patentes U.S. Nos. 8.008.449 e 8.779.105; e a Publicação de Patente Internacional No. WO 2013/173223). A capacidade dos anticorpos para realizar competição cruzada para ligação a um antígeno indica que estes anticorpos se ligam à mesma região epitópica do antígeno e impedem estericamente a ligação de outros anticorpos de competição cruzada a aquela região epitópica em particular. Espera-se que estes anticorpos de competição cruzada tenham propriedades funcionais muito similares às do nivolumab em virtude de sua ligação à mesma região epitópica do PD-1. Anticorpos de competição cruzada podem ser prontamente identificados com base em sua capacidade para realizar competição cruzada com o nivolumab em ensaios de ligação ao PD-1 de rotina tais como análise Biacore, ensaios ELISA ou citometria de fluxo (vide, por exemplo, Publicação de Patente Internacional No. WO 2013/173223).

[00127] Anticorpos anti-PD-1 úteis nos métodos revelados também incluem anticorpos isolados que se ligam especificamente ao PD-1 humano e realizam competição cruzada para ligação ao PD-1 humano com qualquer anticorpo anti-PD-1 revelado aqui, neste requerimento de patente, por exemplo, o nivolumab (vide, por exemplo, as Patentes U.S. No. 8.008.449 e 8.779.105; e WO 2013/173223, as quais são aqui, a este requerimento de patente, incorporadas por meio de referência). Em algumas modalidades, o anticorpo anti-PD-1 se liga o mesmo epitopo que qualquer um dos anticorpos anti-PD-1 descritos

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46/84 aqui, neste requerimento de patente, por exemplo, nivolumab. A capacidade dos anticorpos para realizar competição cruzada para ligação a um antígeno indica que estes anticorpos monoclonais se ligam à mesma região epitópica do antígeno e impedem estericamente a ligação de outros anticorpos de competição cruzada a aquela região epitópica em particular. Espera-se que estes anticorpos de competição cruzada tenham propriedades funcionais muito similares às do anticorpo de referência, por exemplo, nivolumab, em virtude de sua ligação à mesma região epitópica do PD-1. Anticorpos de competição cruzada podem ser prontamente identificados com base em sua capacidade para realizar competição cruzada com o nivolumab em ensaios de ligação ao PD-1 de rotina tais como análise Biacore, ensaios ELISA ou citometria de fluxo (vide, por exemplo, WO 2013/173223).

[00128] Em determinadas modalidades, anticorpos ou fragmentos de ligação ao antígeno dos mesmos que realizam competição cruzada para ligação ao PD-1 humano com, ou que se ligam à mesma região epitópica do PD-1 humano que, o nivolumab são mAbs. Para administração a pacientes humanos, estes anticorpos de competição cruzada podem ser anticorpos quiméricos, ou anticorpos humanizados ou humanos. Os mAbs quiméricos, humanizados ou humanos referidos podem ser preparados e isolados por métodos de conhecimento geral na técnica.

[00129] Anticorpos anti-PD-1 úteis para as composições da invenção revelada também incluem porções de ligação ao antígeno dos anticorpos acima. Foi amplamente demonstrado que a função de ligação ao antígeno de um anticorpo pode ser realizada por fragmentos de um anticorpo de comprimento total. Exemplos de fragmentos de ligação englobados dentro do termo porção de ligação ao antígeno de um anticorpo incluem (i) um fragmento Fab, um

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47/84 fragmento monovalente consistindo nos domínios VL, VH, CL e CH1; (ii) um fragmento F(ab')2, um fragmento bivalente compreendendo dois fragmentos Fab ligados por uma ponte de dissulfeto na região de articulação; (iii) um fragmento Fd consistindo nos domínios VH e CH1; e (iv) um fragmento Fv consistindo nos domínios VL e VH de um único braço de um anticorpo.

[00130] Anticorpos anti-PD-1 adequados para uso nas composições reveladas são anticorpos que se ligam a PD-1 com altas especificidade e afinidade, bloqueiam a ligação de PD-L1 e ou PD-L2, e inibem o efeito imunossupressor da via de sinalização de PD-1. Em determinadas modalidades, o anticorpo anti-PD-1 ou porção de ligação ao antígeno do mesmo realiza competição cruzada com o nivolumab para ligação ao PD-1 humano. Em outras modalidades, o anticorpo anti-PD-1 ou porção de ligação ao antígeno do mesmo é um anticorpo monoclonal quimérico, humanizado ou humano ou uma porção do mesmo. Em determinadas modalidades, o anticorpo é um anticorpo humanizado. Em outras modalidades, o anticorpo é um anticorpo humano. Pode sedr usados anticorpos de um isótipo de lgG1, lgG2, lgG3 ou lgG4.

[00131] Em determinadas modalidades, o anticorpo anti-PD-1 ou fragmento de ligação ao antígeno do mesmo compreende uma região constante de cadeia pesada a qual é de um isótipo de lgG1 ou lgG4 humana. Em algumas outras modalidades, a sequência da região constante de cadeia pesada de lgG4 do anticorpo anti-PD-1 ou fragmento de ligação ao antígeno do mesmo contém uma mutação S228P, a qual substitui um resíduo de serina na região de articulação com o resíduo de prolina normalmente encontrado na posição correspondente em anticorpos do isótipo lgG1. Esta mutação, a qual está presente no nivolumab, previne a troca de ramo de Fab com anticorpos lgG4 endógenos, ao mesmo tempo que retendo a baixa

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48/84 afinidade para ativação de receptores de Fc associados com anticorpos lgG4 selvagens (Wang et al., 2014). Em ainda outras modalidades, o anticorpo compreende uma região constante de cadeia leve a qual é uma região constante capa ou lâmbda humana. Em outras modalidades, o anticorpo anti-PD-1 ou fragmento de ligação ao antígeno do mesmo é um mAb ou uma porção de ligação ao antígeno do mesmo. Em determinadas modalidades de qualquer um dos métodos terapêuticos descritos aqui, neste requerimento de patente, compreendendo a administração de um anticorpo anti-PD-1, o anticorpo anti-PD-1 é nivolumab. Em outras modalidades, o anticorpo anti-PD-1 é pembrolizumab. Em outras modalidades, o anticorpo antiPD-1 é escolhido entre os anticorpos humanos 17D8, 2D3, 4H1,4A11, 7D3 e 5F4 descritos na Patente U.S. No. 8.008.449. Em ainda outras modalidades, o anticorpo anti-PD-1 é MEDI0608 (anteriormente AMP514), AMP-224, ou Pidilizumab (CT-011).

[00132] Em modalidades, o anticorpo anti-PD-1 é um anticorpo biespecífico. Em modalidades, o anticorpo anti-PD-1 é um anticorpo biespecífico que se liga tanto a PD-1 quanto a LAG-3.

Ilc. Anticorpos Anti-PD-L1 [00133] Anticorpos anti-PD-L1 humano (ou domínios VH e/ou VL derivados dos mesmos) adequados para uso na invenção podem ser gerados usando métodos de conhecimento geral na técnica. Exemplos de anticorpos anti-PD-L1 úteis nos métodos da presente invenção incluem os anticorpos revelados na Patente US No. 9.580.507, incorporada aqui, a este requerimento de patente, por meio de referência. Foi demonstrado que os anticorpos monoclonais anti-PDL1 humano revelados na Patente U.S. No. 9.580.507 apresentam uma ou mais das seguintes características: (a) se ligam ao PD-L1 humano com uma KD de 1 x 10’⁷ M ou menos, conforme determinado por ressonância de plasmon superficial usando um sistema biosensor

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Biacore; (b) aumentam a proliferação de células T em um ensioa de reação de linfócitos mistos (MLR, Mixed Lymphocyte Reaction); (c) aumentam a produção de interferon-γ em um ensaio de MLR; (d) aumentam a secreção de IL-2 em um ensaio de MLR; (e) estimulam reações de anticorpo; e (f) revertem o efeito de células T regulatórias sobre células efetoras de células T e/ou células dendríticas. Anticorpos anti-PD-L1 úteis na presente invenção incluem anticorpos monoclonais que se ligam especificamente ao PD-L1 humano e apresentam no mínimo uma, em algumas modalidades, no mínimo cinco, das características precedentes.

[00134] Podem ser usados alguns anticorpos anti-PD-L1 reconhecidos. Por exemplo, podem ser usados anticorpos anti-PD-L1 humano revelados na Patente U.S. No. 7.943.743, cujo conteúdo é por este incorporado por meio de referência. Os anticorpos anti-PD-L1 referidos incluem 3G10, 12A4 (também referido como BMS-936559), 10A5, 5F8, 10H10, 1B12, 7H1, 11E6, 12B7, e 13G4. Outros anticorpos anti-PD-L1 reconhecidos na técnica os quais podem ser usados incluem os descritos, por exemplo, nas Patentes U.S. Nos. 7.635.757 e 8.217.149, na Publicação de Patente U.S. No. 2009/0317368, e na Publicação de Patente Internacional PCT Nos. WO 2011/066389 e WO 2012/145493, cujos ensinamentos também são por este incorporados por meio de referência. Outros exemplos de um anticorpo anti-PD-L1 incluem atezolizumab (TECENTRIQ; RG7446), ou durvalumab (IMFINZI; MEDI4736) ou avelumab (Bavencio). Também podem ser usados anticorpos ou fragmentos de ligação ao antígeno dos mesmos que compitam com qualquer um destes anticorpos ou inibidores para ligação a PD-L1 reconhecidos na técnica.

[00135] Em determinadas modalidades, o anticorpo anti-PD-L1 é BMS-936559 (anteriormente 12A4 ou MDX-1105) (vide, por exemplo, a Patente U.S. No. 7.943.743; WO 2013/173223). Em outras

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50/84 modalidades, o anticorpo anti-PD-L1 é MPDL3280A (também conhecido como RG7446 e atezolizumab) (vide, por exemplo, Herbst et al. 2013 J Clin Oncol 31 (suppl):3000; U.S. Patent No. 8,217,149), MEDI4736 (Khleif, 2013, In: Proceedings from the European Cancer Congress 2013; September 27-October 1, 2013; Amsterdam, Paises Baixos. Abstract 802), ou MSB0010718C (também denominado Avelumab; vide US 2014/0341917). Em determinadas modalidades, anticorpos que realizam competição cruzada para ligação ao PD-L1 humano com, ou se ligam à mesma região epitópica do PD-L1 humano que os anticorpos contra PD-L1 das referências acima são mAbs. Para administração a pacientes humanos, estes anticorpos de competição cruzada podem ser anticorpos quiméricos, ou podem ser anticorpos humanizados ou humanos. Os mAbs quiméricos, humanizados ou humanos referidos podem ser preparados e isolados por métodos de conhecimento geral na técnica. Em determinadas modalidades, o anticorpo anti-PD-L1 é selecionado entre o grupo consistindo em BMS936559 (também conhecido como 12A4, MDX-1105; vide, por exemplo, a Patente U.S. No. 7.943.743 e WO 2013/173223), atezolizumab (Roche; também conhecido como TECENTRIQ®; MPDL3280A, RG7446; vide a Patente US No. 8.217.149; vide, também, Herbst et al. (2013) J Clin Oncol 31 (suppl):3000), durvalumab (AstraZeneca; também conhecido como IMFINZI™, MEDI-4736; vide WO 2011/066389), avelumab (Pfizer; também conhecido como BAVENCIO®, MSB-0010718C; vide WO 2013/079174), STI-1014 (Sorrento; vide WO2013/181634), CX-072 (Cytomx; vide

WO2016/149201), KN035 (3D Med/Alphamab; vide Zhang et al., Cell Discov. 7:3 (March 2017), LY3300054 (Eli Lilly Co.; vide, por exemplo, WO 2017/034916), e CK-301 (Checkpoint Therapeutics; vide Gorelik et al., AACR:Abstract 4606 (Apr 2016)).

[00136] Em determinadas modalidades, o anticorpo contra PD-L1 é

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51/84 atezolizumab (TECENTRIQ®). Atezolizumab é um anticorpo monoclonal anti-PD-L1 de lgG1 totalmente humanizado.

[00137] Em determinadas modalidades, o anticorpo contra PD-L1 é durvalumab (IMFINZI™). Durvalumab é um anticorpo monoclonal antiPD-Ll de lgG1 kappa humana.

[00138] Em determinadas modalidades, o anticorpo contra PD-L1 é avelumab (BAVENCIO®). Avelumab é um anticorpo monoclonal antiPD-Ll de lgG1 lâmbda humana.

[00139] Em outras modalidades, o anticorpo monoclonal anti-PD-L1 é selecionado entre o grupo consistindo em 28-8, 28-1, 28-12, 29-8, 5H1, e qualquer combinação dos mesmos.

[00140] Anticorpos anti-PD-L1 úteis nos métodos revelados também incluem anticorpos isolados que se ligam especificamente ao PD-L1 humano e realizam competição cruzada para ligação ao PD-L1 humano com qualquer anticorpo anti-PD-L1 revelado aqui, neste requerimento de patente, por exemplo, atezolizumab, durvalumab, e/ou avelumab. Em algumas modalidades, o anticorpo anti-PD-L1 se liga o mesmo epitopo que qualquer um dos anticorpos anti-PD-L1 descritos aqui, neste requerimento de patente, por exemplo, atezolizumab, durvalumab, e/ou avelumab. A capacidade dos anticorpos para realizar competição cruzada para ligação a um antígeno indica que estes anticorpos se ligam à mesma região epitópica do antígeno e impedem estericamente a ligação de outros anticorpos de competição cruzada a aquela região epitópica em particular. Espera-se que estes anticorpos de competição cruzada tenham propriedades funcionais muito similares às do anticorpo de referência, por exemplo, atezolizumab e/ou avelumab, em virtude de sua ligação à mesma região epitópica do PD-L1. Anticorpos de competição cruzada podem ser prontamente identificados com base em sua capacidade para realizar competição cruzada com o

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52/84 atezolizumab e/ou o avelumab em ensaios de ligação ao PD-L1 de rotina tais como análise Biacore, ensaios ELISA ou citometria de fluxo (vide, por exemplo, WO 2013/173223).

[00141] Em determinadas modalidades, os anticorpos que realizam competição cruzada para ligação ao PD-L1 humano com, ou se ligam à mesma região epitópica do anticorpo para PD-L1 humano que, o atezolizumab, o durvalumab, e/ou o avelumab, são anticorpos monoclonais. Para administração a pacientes humanos, estes anticorpos de competição cruzada são anticorpos quiméricos, anticorpos produzidos por engenharia genética, ou anticorpos humanizados ou humanos. Os referidos anticorpos quiméridos, produzidos por engenharia genética, humanizados ou humanos monoclonais podem ser preparados e isolados por métodos de conhecimento geral na técnica.

[00142] Anticorpos anti-PD-L1 úteis nos métodos da invenção revelada também incluem porções de ligação ao antígeno dos anticorpos acima. Foi amplamente demonstrado que a função de ligação ao antígeno de um anticorpo pode ser realizada por fragmentos de um anticorpo de comprimento total.

[00143] Anticorpos anti-PD-L1 adequados para uso nos métodos ou composições revelados são anticorpos que se ligam a PD-L1 com altas especificidade e afinidade, bloqueiam a ligação de PD-1, e inibem o efeito imunossupressor da via de sinalização PD-1 signaling pathway. Em quaisquer das composições ou dos métodos revelados aqui, neste requerimento de patente, um anticorpo anti-PD-L1 inclui uma porção de ligação ao antígeno ou fragmento que se liga ao PD-L1 e apresenta as propriedades funcionais similares às dos anticorpos inteiros na inibição da ligação de receptor e na regulação positiva do sistema imune. Em determinadas modalidades, o anticorpo anti-PD-L1 ou porção de ligação ao antígeno do mesmo realiza competição

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53/84 cruzada com o atezolizumab, ο durvalumab, e/ou o avelumab para ligação ao PD-L1 humano.

Ild. Agentes Imunoterápicos [00144] Agente imunoterápico e fármacos imuno-oncológicos conforme usado na presente invenção incluem qualquer agente, composto, ou biológico que é capaz de modular o sistema imune do hospedeiro. O agente imunoterápico pode ser um inibidor do ponto de controle imunológico, um reforçador ou estimulador do ponto de controle imunológico. Os agentes imunoterápicos descritos aqui, neste requerimento de patente, podem ser usados em combinação com um ou mais agentes imunoterápicos adicionais (por exemplo, anticorpo anti-PD-1 e anticorpo anti-LAG-3).

[00145] Em uma modalidade, o agente imunoterápico é um inibidor do ponto de controle imunológico. Exemplos não limitantes de semelhantes agentes imunoterápicos incluem:

[00146] (i) um antagonista de CTLA-4 (CD152) (por exemplo,

YERVOY® (ipilimumab) (Patente U.S. No. 6.984.720); tremelimumab (anteriormente ticilimumab e CP-675,206); AGEN-1884; e ATOR-1015 (um anticorpo bi-específico anti-OX40 e anti-CTLA-4)) Anticorpos monoclonais humanos que se ligam especificamente a CTLA-4 com alta afinidade foram revelados na Patente U.S. No. 6.984.720. Outros anticorpos monoclonais anti-CTLA-4 foram descritos, por exemplo, nas Patentes U.S. Nos. 5.977.318, 6.051.227, 6.682.736, e 7.034.121 e na Publicação de Patente Internacional Nos. WO 2012/122444, WO 2007/113648, WO 2016/196237, e WO 2000/037504.

[00147] (ii) antagonista de TIM-3 (HAVCR2) (por exemplo, TSR-022 e LY3321367);

[00148] (iii) antagonista de TIGIT (imunorreceptor de células T com domínios de Ig e ITIM) (por exemplo, BMS-986207, OMP-313M32, COM902 (CGEN-15137), e AB154);

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54/84 [00149] (iv) um antagonista de IDO1 (indoleamina-2,3-dioxigenase 1) (por exemplo, indoximod (NLG8189, 1-metil-D-TRP), epacadostat (INCB-024360), KHK2455, PF-06840003 (Publicação do

Requerimento de Patente Internacional PCT No. WO 2016/181348 A1), derivados de pirrolididina-2,5-diona (Publicação do Requerimento de Patente Internacional PCT No. WO 2015/173764 A1), navoximod (RG6078, GDC-0919, NLG919), e BMS-986205 (F001287));

[00150] (v) antagonista de KIR (receptor semelhante à imunoglobulina de células assassinas) (por exemplo, lirilumab (I-7F9, BMS-980615, ou IPH2101) e IPH4102 (um anticorpo monoclonal antiKIR3DL2);

[00151] (vi) antagonista de TDO (triptofano 2,3-dioxigenase) (por exemplo, derivados de 4-(indol-3-il)-pirazol (Patente U.S. No. 9.126.984 B2 e Publicação do Reqeuerimento de Patente U.S. No. 2016/0263087 A1); derivados substituídos de 3-indol (Publicação do Requerimento de Patente Internacional PCT Nos. WO 2015140717 A1, WO 2017025868 A1, WO 2016147144 A1), derivados de 3-(indol3-il)-piridina (Publicação do Requerimento de Patente U.S. No. 20150225367 A1 e Publicação do Requerimento de Patente Internacional PCT No. WO 2015121812 A1);

[00152] (vii) duplo antagonista de IDO/TDO (por exemplo, duplo inibidores de IDO/TDO de molécula pequena conforme revelado na Publicação do Requerimento de Patente Internacional PCT Nos. WO 2015150097 A1, WO 2015082499 A2, WO 2016026772 A1, WO 2016071283 A1, WO 2016071293 A2, e WO 2017007700 A1);

[00153] (viii) antagonista de CD40 (por exemplo, Lineage BMS3h56 (Patente U.S. No. 9.475.879), lucatumumab (HCD122 e CHIR12.12), CHIR-5.9, e dacetuzumab (huS2C6, PRO 64553, RG 3636, SGN 14, SGN-40));

[00154] (ix) antagonista do receptor de adenosina A2a (A2aR) (por

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55/84 exemplo, CPI-444, PBF-509, istradefilina (KW-6002), preladenant (SCH420814), tozadenant (SYN115), vipadenant (BIIB014), HTL-1071, ST1535, SCH412348, SCH442416, SCH58261, ZM241385, e AZD4635 (um inibidor do A2aR de molécula pequena));

[00155] (x) antagonista de VISTA (suppressor de ativação de células T contendo imunoglobulina (Ig) de domínio V) (por exemplo, CA-170 (anti-PD-L1/L2 e molécula pequena anti-VISTA) e JNJ61610588);

[00156] (xi) antagonista de CEACAM1 (CD66a) (por exemplo, CM24 (MK-6018));

[00157] (xii) antagonista de CEA (antígeno carcinoembrionário) (por exemplo, cergutuzumab amunaleucina (RG7813, RO-6895882), RG7802 (RO6958688));

[00158] (xiii) antagonista de CD47 (por exemplo, HuF9-G4, CC90002, TTI-621, ALX148, NI-1701, NI-1801, SRF231, e Effi-DEM);

[00159] (xiv) antagonista de PVRIG (domínio contendo imunoglobulina relacionada com receptor do poliovirus, CD122R) (por exemplo, COM701);

[00160] (xv) antagonista de GARP (repetições de glicoproteína A predominantes) (por exemplo, ARGX-115);

[00161] (xvi) um agonista de STING (estimulador de genes de IFN) (por exemplo, di-nucleotídeos 2’,5’ - 3’,5’ cíclicos de ligação mista 2’3’di-fluoro substituídos ou 2’ ou 3’-mono-fluoro substituídos (Publicação do Requerimento de Patente Internacional PCT No. WO 2017/075477 A1); di-nucleotídeos bis-3’,5’ cíclicos, 2’-fluoro substituídos e dinucleotídeos 2’,2”-diF-Rp,Rp,bis-3’,5’ cíclicos (Publicação do Requerimento de Patente Internacional PCT No. WO 2016/145102 A1); e di-nucleotídeos cíclicos fluorados (Publicação do Requerimento de Patente Internacional PCT No. WO 2016/096174 A1);

[00162] (xvii) agonista de CD20 (por exemplo, RITUXAN® e ABP

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798);

[00163] (xviii) antagonista de CD80 (por exemplo, galiximab (IDEC114) e AV 1142742 (RhuDex);

[00164] (xix) antagonista de CD86; e [00165] (xx) antagonista de CD96.

[00166] Em outra modalidade, o agente imunoterápico é um estimulador ou reforçador do ponto de controle imunológico. Exemplos não limitantes de semelhantes agentes imunoterápicos incluem: [00167] (i) um agonista de CD28 (por exemplo, TGN1412 (um anticorpo anti-CD28) e JCAR015 (um receptor de antígeno quimérico modificado anti-CD19-CD28-zeta));

[00168] (ii) um agonista de CD80 ou de CD86 (por exemplo, constructo de fusão CTLA4-lg (CTLA-4-lgG4m, RG2077, ou RG1046); ORENCIA® (abatacept ou BMS-188667); e MGN1601;

[00169] (iii) ICOS ou agonista de ligante de ICOS (por exemplo, BMS986226, MEDI-570, GSK3359609, JTX-2011, e AMG 570);

[00170] (iv) agonista de 4-1 BB (CD137) (por exemplo, urelumab e PF-05082566);

[00171] (v) agonista de 0X40 (CD134 ou TNFRS4) (por exemplo, tavolixizumab (MEDI-0562); pogalizumab (MOXR0916, RG7888); GSK3174998; ATOR-1015 (um anticorpo biespecífico anti-OX40 e anti-CTLA-4); MEDI-6383; MEDI-6469; BMS 986178; PF-04518600; e células GINAKIT (linfócitos T expressando ÍC9-GD2-CD28-OX40));

[00172] (vi) agonista de CD27 (por exemplo, varilumab (CDX1127));

[00173] (vii) agonista de CD40 (por exemplo, ADC-1013 (JNJ64457107), RG7876 (RO-7009789), HuCD40-M2; APX005M (EPI0050) (Patente U.S. No. 9.556.278); Chi Lob 7/4 (anticorpo monoclonal de CD40 agonista quimérico IgG 1));

[00174] (viii) agonista de CD70 (por exemplo, ARGX-110); e

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57/84 [00175] (ix) agonista de GITR (por exemplo, BMS-986156, TRX518, GWN323, INCAGN01876, e MEDI1873).

[00176] Em uma modalidade, o agente imunoterápico é um citocina, tal como uma quimiocina, um interferon (por exemplo, interferon gama), uma interleucina (por exemplo, aldesleucina (análogo recombinante de IL-2 com atividades imunorregulatórias e antineoplásicas), tocilizumab (anticorpo antirreceptor de IL-6)); uma linfocina, ou um membro da família de fatores de necrose tumoral (TNF) (por exemplo, ATOR-1016, ABBV-621, e adalimumab). Exemplos de outros agentes imunoterápicos incluem: antagonista de CSF1R (receptor do fator de estimulador de colônias 1, CD115) (por exemplo, emactuzumab); agonista do receptor Toll-like 9 (TLR9) (por exemplo, agatolimod de sódio); agonista do CD160 (NK1) (por exemplo, BY55); antagonista de CD73 (5'-nucleotidase ou ecto-5'nucleotidase ) (por exemplo, MEDI9447); antagonista de iNOS (NO sintase indutível, NOS2) (por exemplo, N-Acetil cisteína (NAC), aminoguanidina, éster metílico de L-nitroarginina, S,S-1,4-fenilenob/s(1,2-etanodiil)b/s-isotiouréia); e antagonista de SHP-1 (proteína tirosina fosfatase 1 contendo o domínio de homologia 2 Src) (vide Watson etal., Biochem Soc Trans 44(2): 356-362 (2016)).

III. Composições Farmacêuticas [00177] Composições farmacêuticas adequadas para administração a pacientes humanes são tipicamente formuladas para administração parenteral, por exemplo, em um veículo líquido, ou adequado para reconstituição em solução líquida ou suspensão para administração intravenosa.

[00178] Em geral, as referidas composições tipicamente compreendem um veículo farmaceuticamente aceitável. Conforme usado aqui, neste requerimento de patente, o termo farmaceuticamente aceitável significa aprovado por uma agência

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58/84 regulatória governamental ou listado na Farmacopéia dos Estados Unidos ou em outra farmacopéia reconhecida de modo geral para uso em animais, particularmente em seres humanos. O termo veículo se refere a um diluente, adjuvante, excipiente, ou veículo com o qual o composto é administrado. Os veículos farmacêuticos podem ser líquidos estéreis, tais como água e óleos, incluindo os de origem de petróle, animal, vegetal ou sintética, tais como óleo de amendoim, óleo de soja, óleo mineral, óleo de gergelim, ricinoleato de polietileno glicol de glicerol, e semelhantes. Água ou solução aquosa salina e soluções aquosas de dextrose e glicerol podem ser empregadas como veículos, particularmente para soluções injetáveis (por exemplo, compreendendo um anticorpo anti-PD-1, um anticorpo anti-LAG-3, e/ou outro agente imunoterápico). Composições líquidas para administração parenteral podem ser formuladas para administração por injeção ou infusão contínua. Vias de administração por injeção ou infusão incluem intravenosa, intraperitoneal, intramuscular, intratecal e subcutânea. Em uma modalidade, a composição compreendendo um anticorpo anti-PD-1, um anticorpo anti-LAG-3, e um agente imunoterápico são administrados por via intravenosa (por exemplo, em formulações separadas ou juntos (na mesma formulação ou em formulações separadas)).

IV. Populações de Pacientes [00179] São proporcionados aqui, neste requerimento de patente, métodos clínicos para o tratamento de câncer de tumor sólido (por exemplo, tumores sólidos refratários avançados) em pacientes humanos usando uma combinação de um anticorpo anti-LAG-3, um inibidor da via PD-1, e um agente imunoterápico adcional.

[00180] Exemplos de cânceres que podem ser tratados usando os métodos da invenção, incluem câncer de fígado, câncer ósseo, câncer pancreático, câncer de pele, câncer de cabeça ou pescoço, câncer

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59/84 oral, câncer de mama, câncer de pulmão - incluindo câncer de pulmão de células pequenas e de células não pequenas, melanoma maligno cutâneo ou intraocular, câncer renal, câncer uterino, câncer de ovário, câncer colorretal, câncer de cólon, câncer retal, câncer da região anal, câncer de estômago, câncer testicular, câncer uterino, carcinoma das trompas de Falópio, carcinoma do endométrio, carcinoma do colo uterino, carcinoma da vagina, carcinoma da vulva, linfoma nãoHodgkin, câncer do esôfago, câncer do intestino delgado, câncer do sistema endócrino, câncer da glândula tiroide, câncer da glândula paratiroide, câncer da glândula adrenal, sarcoma de tecidos moles, câncer da uretra, câncer do pênis, tumores sólidos da infância, linfoma linfocítico, câncer da bexiga, câncer do rim ou ureter, carcinoma da pelve renal, neoplasma do sistema nervoso central (SNC), linfoma primário do sistema nervoso central, angiogênese tumoral, tumor do eixo espinhal, glioma do tronco cerebral, adenoma de pituitária, sarcoma de Kaposi, câncer epidermoide, câncer de células escamosas, cânceres induzidos ambientalmente incluindo os induzidos por amianto, malignidades hematológicas incluindo, por exemplo, mieloma múltiplo, linfoma de células B, linfoma de Hodgkin / linfoma de células B mediastinal primário, linfomas não Hodgkin, linfoma mieloide agudo, leucemia mieloide crônica, leucemia linfoide crônica, linfoma folicular, linfoma difuso de grandes células B, linfoma de Burkitt, linfoma imunoblástico de células grandes, linfoma linfoblástico de células precursoras B, linfoma de células do moanto, leucemia linfoblástica aguda, micose fungoide, linfoma anaplásico de células grandes, linfoma de células T, e linfoma linfoblástico de células T precursoras, e quaisquer combinações dos referidos cânceres. A presente invenção também é aplicável ao tratamento de cânceres metastáticos.

[00181] Em uma modalidade, o paciente humano sofre de câncer

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60/84 de pulmão de células não pequenas (NSCLC) ou de um câncer relacionado com vírus (por exemplo, um tumor relacionado com papiloma vírus humano (HPV)) ou adenocarcinoma gástrico. Em uma modalidade particular, o tumor relacionado com o HPV é câncer de cabeça e pescoço (HNC) HPV+. Em outra modalidade particular, o adenocarcinoma gástrico é associado com infecção pelo vírus EpsteinBarr (EBV).

[00182] Os pacientes podem ser testados ou selecionados para um ou mais dos atributos clínicos acima descritos antes, durante ou depois do tratamento.

V. Terapia de Combinação [00183] As terapias de combinação proporcionadas aqui, neste requerimento de patente, envolvem a administração de um anticorpo anti-LAG-3, um inibidor da via PD-1, e outro agente imunoterápico que bloqueia um receptor imune inibidor (por exemplo, um receptor, o qual depois de ligação a seu ligante natural, inibe / neutraliza atividade, tal como atividade citotóxica), para tratar sujeitos tendo tumores malignos (por exemplo, tumores sólidos refratários avançados).

[00184] Em uma modalidade, a invenção proporciona um anticorpo anti-LAG-3, um anticorpo anti-PD-1, e outro agente imunoterápico, em combinação, de acordo com um regime de dosagem clínica definido, para tratar sujeitos tendo um tumor maligno (por exemplo, um tumor sólido refratário avançado). Em uma modalidade particular, o anticorpo anti-LAG-3 é BMS-986016. Em outra modalidade, o anticorpo anti-PD1 é BMS-936558. Em outra modalidade, os regimes de dosagem são ajustados para proporcionar a resposta desejada ótima (por exemplo, uma resposta eficaz).

[00185] Conforme usado aqui, neste requerimento de patente, administração adjuvante ou combinada (coadministração) inclui administração simultânea dos compostos na mesma forma de

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61/84 dosagem ou em forma de dosagem diferente, ou separate administração dos compostos (por exemplo, administração sequencial). Deste modo, o anticorpo anti-LAG-3, o inibidor da via PD1, e o agente imunoterápico podem ser administrados simultaneamente em uma única formulação. Alternativamente, o anticorpo anti-LAG-3, o inibidor da via PD-1, e o agente imunoterápico podem ser formulados para administração separada e são administrados concomitantemente ou seqüencialmente (por exemplo, um anticorpo é administrado dentro de cerca de 30 minutos antes da administração do segundo anticorpo), e em qualquer ordem.

[00186] Por exemplo, o anticorpo anti-PD-1 pode ser administrado primeiro, seguido (por exemplo, seguido imediatamente) pela administração do anticorpo anti-LAG-3 e/ou do agente imunoterápico. Em uma modalidade, o inibidor da via PD-1 é administrado antes da administração do anticorpo anti-LAG-3 e/ou do agente imunoterápico. Em outra modalidade, o inibidor da via PD-1 é administrado depois da administração do anticorpo anti-LAG-3 e/ou do agente imunoterápico. Em outra modalidade, o anticorpo anti-LAG-3, o inibidor da via PD-1, e o agente imunoterápico são administrados concomitantemente. A referida administração concomitante ou sequencial de modo preferencial resulta em todos os três componentes edstando presentes simultaneamente nos pacientes tratados.

VI. Protocolos de Tratamento [00187] Os protocolos de tratamento adequados para tratamento de um tumor maligno em um paciente humano incluem, por exemplo, a administração ao paciente de uma quantidade eficaz de cada um de: [00188] (a) um anticorpo anti-LAG-3, tal como um compreendendo os domínios CDR1, CDR2 e CDR3 da região variável de cadeia pesada tendo a sequência estipulada na SEQ ID NO: 3, e os domínios CDR1, CDR2 e CDR3 da região variável de cadeia leve tendo a

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62/84 sequência estipulada na SEQ ID NO: 5, [00189] (b) um anticorpo anti-PD-1, tal como um compreendendo os domínios CDR1, CDR2 e CDR3 da região variável de cadeia pesada tendo a sequência estipulada na SEQ ID NO: 19, e os domínios CDR1, CDR2 e CDR3 da região variável de cadeia leve tendo a sequência estipulada na SEQ ID NO: 21, [00190] (c) um agente imunoterápico, [00191] em que o método compreende no mínimo um ciclo de administração, em que o ciclo é um período de oito semanas, em que para cada um do no mínimo um ciclo, no mínimo quatro doses do anticorpo anti-LAG-3 são administradas em uma dose fixa de cerca de 1, 3, 10, 20, 50, 80, 100, 130, 150, 180, 200, 240 ou 280 mg, no mínimo quatro doses do anticorpo anti-PD-1 são administradas em uma dose fixa de cerca de 50, 80, 100, 130, 150, 180, 200, 240 ou 280 mg, e no mínimo quatro doses do agente imunoterápico são administradas em uma dose fixa de cerca de. Em outra modalidade, quatro doses do anticorpo anti-LAG-3 são administradas em uma dose de 0,01,0,03, 0,25, 0,1,0,3, 1 ou 3, 5, 8 ou 10 mg/kg de peso corporal, quatro doses do anticorpo anti-PD-1 são administradas em uma dose de 0,1,0,3, 1,3, 5, 8 ou 10 mg/kg de peso corporal, e quatro doses do agente imunoterápico são administradas em uma dose fixa de cerca de.

[00192] Em uma modalidade, a dose do anticorpo anti-LAG-3, do inibidor da via PD-1, e/ou do agente imunoterápico é calculada por peso corporal, por exemplo, mg/kg de peso corporal. Em outra modalidade, a dose do anticorpo anti-LAG-3, do inibidor da via PD-1, e/ou do agente imunoterápico é uma dose fixa. Em outra modalidade, a dose do anticorpo anti-LAG-3, do inibidor da via PD-1, e/ou do agente imunoterápico é variada ao longo do tempo. Por exemplo, o anticorpo anti-LAG-3, o anticorpo anti PD-1, e/ou o agente

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63/84 imunoterápico pode ser inicialmente administrado em uma dose elevada e pode ser reduzido ao longo do tempo. Em outra modalidade, o anticorpo anti-LAG-3, o inibidor da via PD-1, e/ou o agente imunoterápico é inicialmente administrado em uma baixa dose e aumentado ao longo do tempo.

[00193] Em outra modalidade, a quantidade do anticorpo anti-LAG3, do inibidor da via PD-1, e/ou do agente imunoterápico administrados é constante para cada dose. Em outra modalidade, a quantidade de anticorpo e/ou agente imunoterápico administrado varia com cada dose. Por exemplo, a dose de manutenção (ou subsequente) do anticorpo e/ou agente imunoterápico pode ser maior ou a mesma que a dose de carga a qual é administrada primeiro. Em outra modalidade, a a dose de manutenção do anticorpo e/ou agente imunoterápico pode ser menor ou a mesma que a dose de carga.

[00194] Em outra modalidade, o anticorpo anti-LAG-3, o inibidor da via PD-1, e/ou o agente imunoterápico são formulados para administração intravenosa. Em uma modalidade, o anticorpo anti-PD-1 é administrado nos Dias 1, 15, 29, e 43 de cada ciclo. Em outra modalidade, o anticorpo anti-LAG-3 é administrado nos Dias 1,15, 29, e 43 de cada ciclo. Em alguma modalidade, o agente terapêutico é administrado nos Dias 1, 15, 29, e 43 de cada ciclo.

[00195] Em outras modalidades, o anticorpo anti-LAG-3, o inibidor da via PD-1, e/ou o agente imunoterápico são administrados uma vez por semana, uma vez a cada duas ou três semanas, uma vez por mês ou enquanto for observado um benefício clínico ou até haver uma resposta completa, doença progressiva confirmada ou toxicidade não controlável.

[00196] Em outra modalidade, um ciclo de administração é oito semanas, o qual pode ser repetido, caso necessário. Em outra modalidade, o tratamento consiste em até 12 ciclos.

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64/84 [00197] Em outra modalidade, 4 doses do inibidor da via PD-1 são administradas por ciclo de oito semanas. Em outra modalidade, 4 doses do inibidor da via PD-1 são administradas por ciclo de oito semanas. Em alguma modalidade, 4 doses do agente terapêutico são administradas por ciclo de oito semanas.

[00198] Em outra modalidade, o inibidor da via PD-1, o anticorpo anti-LAG-3, e/ou o agente imunoterápico são administrados como uma primeira linha de tratamento (por exemplo, o tratamento inicial ou primeiro tratamento). Em outra modalidade, o inibidor da via PD-1, o anticorpo anti-LAG-3, e/ou o agente imunoterápico são administrados como uma segunda linha de tratamento (por exemplo, depois do tratamento inicial ou do primeiro tratamento, incluindo depois de recidiva e/ou onde o primeiro tratamento tenha falhado).

[00199] Em outro aspecto, a invenção caracteriza qualquer uma das modalidades acima mencionadas, em que o anticorpo anti-PD-1 é substituído por, ou combinado com, um anticorpo anti-PD-L1 ou antiPD-L2.

VII. Resultados [00200] Pacientes tratados de acordo com os métodos revelados aqui, neste requerimento de patente, de modo preferencial experimental melhora em no mínimo um sinal de câncer. Em uma modalidade, a melhora é medida por uma redução na quantidade e/ou no tamanho de lesões tumorais mensuráveis. Em outra modalidade, as lesões podem ser medidas em radiografias torácicas ou filmes de tomografia computadorizada ou de ressonância magnética. Em outra modalidade, pode ser usada citologia ou histologia para avaliar a responsividade a uma terapia.

[00201] Em uma modalidade, o paciente tratado apresenta uma resposta completa (CR), uma resposta parcial (PR), doença estável (SD), doença completa imuno-relacionada (irCR), resposta parcial

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65/84 imuno-relacionada (irPR), ou doença estável imuno-relacionada (irSD). Em outra modalidade, o paciente tratado experimenta encolhimento do tumor e/ou diminuição na taxa de crescimento, isto é, supressão do crescimento do tumor. Em outra modalidade, proliferação celular indesejada é reduzida ou inibida. Em ainda outra modalidade, pode ocorrer um ou mais dos seguintes: o número de células cancerígenas pode ser reduzido; o tamanho do tumor pode ser reduzido; a infiltração de células cancerígenas dentro dos órgãos periféricos pode ser inibida, retardada, desacelerada, ou interrompida; a metástase tumoral pode ser desacelerada ou inibida; o crescimento do tumor pode ser inibido; a recidiva do tumor pode ser prevenida ou retardada; um ou mais dos sintomas associados com câncer podem ser aliviados em alguma extensão.

[00202] Em outras modalidades, a administração de quantidades eficazes do anticorpo anti-LAG-3, do inibidor da via PD-1, e do agente imunoterápico de acordo com qualquer um dos métodos proporcionados aqui, neste requerimento de patente, produz no mínimo um efeito terapêutico selecionado entre o grupo consistindo em redução do tamanho de um tumor, redução do número de lesões metastáticas que aparecem ao longo do tempo, remissão completa, remissão parcial, ou doença estável. Em ainda outras modalidades, os métodos de tratamento produzem uma taxa de benefício clínico comparável (CBR = CR + PR + SD > 6 meses) melhor do que a obtida por um anticorpo anti-LAG-3, um inibidor da via PD-1, ou um agente imunoterápico isolado. Em outras modalidades, a melhora da taxa de benefício clínico é de cerca de 20% 20%, 30%, 40%, 50%, 60%, 70%, 80% ou mais comparada com um anticorpo anti-LAG-3, um inibidor da via PD-1, ou um agente imunoterápico isolado.

VIII. Kits e Formas de Unidade de Dosagem [00203] Também são proporcionados aqui, neste requerimento de

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66/84 patente, kits os quais incluem uma composição farmacêutica compreendendo um anticorpo anti-LAG-3 (por exemplo, BMS-986016), um inibidor da via PD-1 (por exemplo, BMS-936558), um agente imunoterápico, e um veículo farmaceuticamente aceitável, em uma quantidade terapeuticamente eficaz adaptada para uso nos métodos precedentes. Os kits opcionalmente também podem incluir instruções, por exemplo, compreendendo esquemas de administração, para permitir a um praticante (por exemplo, um médico, enfermeiro, ou paciente) administrar a composição contida no mesmo para administrar a composição a um paciente tendo câncer (por exemplo, um tumor sólido). O kit também pode incluir uma seringa.

[00204] Opcionalmente, os kits incluem múltiplos pacotes das composições farmacêuticas de dose única, cada um contendo uma quantidade eficaz do anticorpo anti-LAG-3, do inibidor da via PD-1, e/ou do agente imunoterápico para uma única administração de acordo com os métodos proporcionados acima. Instrumentos ou dispositivos necessários para a administração da uma ou mais composições farmacêuticas também podem ser incluídos nos kits. Por exemplo, um kit pode proporcionar uma ou mais seringas précarregadas contendo uma quantidade eficaz do anticorpo anti-LAG-3, o anticorpo anti-PD-1, e/ou o agente imunoterápico.

[00205] Em uma modalidade, a presente invenção proporciona um kit para tratamento de um tumor maligno em um paciente humano, o kit compreendendo, por exemplo:

[00206] (a) uma dose de um anticorpo anti-LAG-3, tal como um compreendendo os domínios CDR1, CDR2 e CDR3 da região variável de cadeia pesada tendo a sequência estipulada na SEQ ID NO: 3, e os domínios CDR1, CDR2 e CDR3 da região variável de cadeia leve tendo a sequência estipulada na SEQ ID NO: 5;

[00207] (b) uma dose de inibidor da via PD-1, tal como um anticorpo

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67/84 anticorpo compreendendo os domínios CDR1, CDR2 e CDR3 da região variável de cadeia pesada tendo a sequência estipulada na SEQ ID NO: 19, e os domínios CDR1, CDR2 e CDR3 da região variável de cadeia leve tendo a sequência estipulada na SEQ ID NO: 21;

[00208] (c) uma dose de um agente imunoterápico; e [00209] (d) instrução para uso do anticorpo anti-LAG-3, do inibidor anti-via PD-1, e do agente imunoterápico nos métodos descritos aqui, neste requerimento de patente.

[00210] Os exemplos que se seguem são meramente ilustrativos e não devem ser considerados como limitando o âmbito desta invenção de qualquer modo, uma vez que muitas variações e equivalentes se tornarão evidentes para os peritos na técnica depois da leitura da presente invenção.

EXEMPLOS

EXEMPLO 1

Tratamento de Tumor Maligno com Monoterapia com Nivolumab v. Nivolumab + BMS 986016 (anticorpo anti-LAG-3) + Agente Imunoterápico [00211] De modo a determinar se existe uma melhora na sobrevida geral (OS) em comparação com monoterapia com nivolumab, uma composição farmacêutica compreendendo uma combinação de nivolumab, BMS 986016, e um agente imunoterápico é testada em pacientes com tumores metastáticos recorrentes. É conduzida uma comparação pareada formal da sobrevida geral entre os braços experimentais (isto é, monoterapia com nivolumab v. terapia de combinação de nivolumab + BMS 986016 + agente imunoterápico).

[00212] O estudo também compara a sobrevida livre de progressão (PFS) e a taxa de resposta objetiva (ORR), com base na avaliação pela Blinded Independent Central Review (BICR, N.T.: Revisão Central

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Independente Cega) da combinação de nivolumab, BMS 986016, e um agente imunoterápico (terapia combinada) com a monoterapia com nivolumab em sujeitos com tumor metastático recorrente. São avaliadas as diferenças na PFS e na ORR entre os diferentes braços. [00213] Outros objetivos do estudo incluem: 1) avaliação da segurança geral e da tolerabilidade da terapia combinada comparada com a monoterapia com nivolumab; 2) caracterização da farmacocinética da terapia combinada e explorar as relações entre exposição-segurança e exposição-eficácia; 3) caracterização da imunogenicidade da terapia combinada; 4) caracterização de correlatos imunes da terapia combinada; 5) avaliação de biomarcadors preditivos tumorais e periféricos da resposta clínica à terapia combinada; e 6) avaliação do estado de saúde geral usando o índice EQ-5D e escala análoga visual em sujeitos tratados com a terapia combinada.

Métodos

Esquema do Estudo [00214] O estudo é um estudo randomizado, aberto, de 2 braços, em sujeitos adultos (com idade igual ou superior a 18 anos de idade) do sexo masculino e do sexo feminino, com câncer de pulmão de células não pequenas (NSCLC) do estágio IV ou recorrente, PD-L1 positivo ou negativo, não tratado previamente para doença avançada. [00215] Os critérios de inclusão chave incluem: 1) ECOG Performance Status de mais de ou igual a 1; 2) Pacientes com câncer de pulmão de células não pequenas em Estágio IV histologicamente confirmado ou recorrente (de acordo com a classificação de histologia escamosa ou não- escamosa do 7th International Association for the Study of Lung Cancer), sem terapia anticancerígena sistêmica anterior (incluindo inibidores de EGFR e ALK) administrada como terapia primária para doença avançada ou metastática; e 3) Doença

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69/84 mensurável por CT ou MRI segundo os critérios do RECIST 1.1. [00216] Os critérios de exclusão chave incluem: 1) Sujeitos com mutações do EGFR conhecidas as quais são sensíveis a terapia com os inibidores direcionados disponíveis; 2) Sujeitos com translocações de ALK conhecidas as quais são sensíveis a terapia com os inibidores direcionados disponíveis; 3) Sujeitos com metástases não tratadas do sistema nervoso central; 4) Sujeitos com uma doença autoimune ativa, conhecida ou suspeita (sujeitos com diabetes mellitus tipo I, hipotiroidismo somente necessitando de reposição hormonal, distúrbios de pele (tais como vitiligo, psoríase, ou alopecia) não necessitando de tratamento sistêmico, ou condições que não se espera que recidivem na ausência de um gatilho externo são permitidos para registro); e 5) Sujeitos com uma condição necessitando de tratamento sistêmica com ou corticosteroides (> 10 mg diariamente de equivalente de prednisona) ou outras medicações imunossupressoras dentro de 14 dias da randomização (esteroides inalados ou tópicos, e esteroide de reposição adrenal > 10 mg diariamente de equivalente de prednisona, são permitidos na ausência de doença autoimune ativa).

[00217] Os sujeitos são randomizados a 1:1:1:1, e estratificados por histologia (Escamosas versus Não-escamosas) e status de PD-L1. O status de PD-L1 é determinado por coloração imunohistoquímica (IHC) da proteína PD-L1 em uma amostra tumoral submetida antes da randomização. Os sujeitos são identificados como positivos para PDL1 se for observado mais de ou igual a 5% de coloração de membrana das células tumorais em um mínimo de uma centena de células tumorais avaliáveis, ou PD-L1 negativo se for observado menos de 5% de coloração de membrana das células tumorais em um mínimo de uma centena de células tumorais avaliáveis.

[00218] Os sujeitos recebem tratamento aberto de um dos dois

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70/84 braços do estudo. O esquema de dosagem é mostrado na Tabela 1. Tabela 1. Esquema de Dosagem*

	Semana 1	Semana 2	Semana 3	Semana 4	Semana 5	Semana 6
Braco A: Nivolumab 240 mg^a q 2 semanas	Dia 1 Nivoluma b		Dia 1 Nivoluma b		Dia 1 Nivoluma b
Braco B: Nivolumab 1 mg/kg + BMS 986016 1 mg/kg q 3 semanas x4^a + Agente imunoterápico 1 mg/kg	Dia 1 Nivoluma b + BMS 986016 + Agente imunoterápico			Dia 1 Nivoluma b + BMS 986016 + Agente imunoterápico

* Tanto nivolumab quanto BMS 986016 podem ser administrados como infusões de 30 minutos ^a continua até a progressão da doença, descontinuação devido a toxicidade inaceitável, retirada do consentimento, ou o encerramento do estudo [00219] A avaliação de tumor no estudo se inicia na Semana 6 após a randomização (± 7 dias) e é realizada a cada 6 semanas (± 7 dias) até a Semana 48. Depois da Semana 48, a avaliação de tumor é realizada a cada 12 semanas (± 7 dias) até a progressão ou até a descontinuação do tratamento, o que ocorrer mais tarde. Os sujeitos que estejam recebendo nivolumab ou a terapia combinada além da progressão definida pelo RECIST 1.1 avaliados pelo investigador também devem continuar as avaliações de tumor até o referido tratamento ser descontinuado. O registro vai terminar depois de aproximadamente 1200 sujeitos serem randomizado. O desfecho

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71/84 primário do estudo é a Sobrevida Geral (OS, Overall Survival). Esperase que a duração do estudo a partir do início do registro até a análise do desfecho de OS primário seja de aproximadamente 48 meses. Braços do Estudo

Monoterapia com Nivolumab (Braço A) [00220] Nivolumab 240 mg é administrado por via intravenosa (IV) no dia 1 de cada ciclo durante 30 minutos a cada 2 semanas até a progressão da doença, descontinuação devido a toxicidade inaceitável, retirada de consentimento ou encerramento do estudo. É permitido tratamento além da progressão definida pelo RECIST 1.1 avaliada pelo investigador inicial se o sujeito tiver benefício clínico avaliado pelo investigador e for tolerante ao tratamento. Após a conclusão do esquema de dosagem, os sujeitos ingressam na Fase de Acompanhamento.

Terapia Combinada com Nivolumab + BMS 986016 + Agente imunoterápico (Braço B) [00221] Nivolumab a 1 mg/kg é administrado IV durante 30 minutos combinado com BMS 986016 a 1 mg/kg e agente imunoterápico administrado IV durante 30 minutos a cada 3 semanas por quatro ciclos até a progressão da doença, toxicidade inaceitável, retirada de consentimento, ou o encerramento do estudo. É permitido tratamento além da progressão definida pelo RECIST 1.1 avaliada pelo investigador inicial se o sujeito tiver benefício clínico avaliado pelo investigador e for tolerante ao tratamento. Após a conclusão do esquema de dosagem, os sujeitos ingressam na Fase de Acompanhamento.

Acompanhamento Pós-Tratamento [00222] O acompanhamento pós-tratamento se inicia quando é tomada a decisão para descontinuar um sujeito de todo o tratamento; isto inclui terapia de manutenção de continuação opcional. Os sujeitos

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72/84 que descontinuam o tratamento por razões diferentes de progressão da doença vão continuar a ter avaliações do tumor (caso clinicamente viável) até progressão ou até o início de qualquer terapia subsequente, o que ocorrer primeiro. Os sujeitos são seguidos para toxicidades relacionadas com o fármaco até a resolução destas toxicidades, até o retorno à linha basal ou até serem consideradas irreversíveis. Todos os eventos adversos são documentados por um mínimo de 100 dias depois da última dose da medicação do estudo. Depois da conclusão das primeiras duas visitas de acompanhamento, os sujeitos são seguidos a cada 3 meses para sobrevida.

Tamanho da Amostra [00223] Aproximadamente 1200 sujeitos são randomizados para os 4 grupos de tratamento em uma proporção a 1:1:1:1. A análise final é conduzida depois de ocorrerem 257 eventos no grupo de controle, e estes eventos vão ser monitorados pelo estatístico independente não cego (un-blinded) corroborando o DMC. Presumindo uma taxa de falha da triagem de 20%, estima-se que aproximadamente 1500 sujeitos vão ser registrados de modo a ter 1200 sujeitos randomizados, presumindo uma taxa de acumulação constante por partes (8 sujeitos/ mês durante os Meses 1 a 2, 40 sujeitos/ mês durante os Meses 3 a 4, 85 sujeitos/ mês durante os Meses 5 a 6, 138 sujeitos/ mês durante os Meses 7 a 8, 170 sujeitos/ mês depois do Mês 8), vão ser necessários aproximadamente 48 meses para obter o número requerido de óbitos para a análise da sobrevida geral final (14 meses para competência e 34 meses para acompanhamento da sobrevida).

Desfecho [00224] A sobrevida geral (OS) é um desfecho primário para este estudo. Se a superioridade da sobrevida geral for demonstrada para no mínimo uma comparação, uma abordagem de teste de gatekeeping para os desfechos secundários chave vai ser aplicada para

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73/84 comparações adicionais experimentais vs. controle conforme descrito no plano de análise estatística. Desfechos secundários chave incluem PFS e ORR com base em avaliações de BICR.

[00225] Cada uma das três análises de OS primárias vão ser conduzidas usando um teste de log-rank de dois lados por histologia e status de PD-L1 em todos os sujeitos randomizados usando o procedimento de Hochberg para tratar multiplicidade. As taxas de risco (HR) e a % de intervalos de confiança (Cl) de dois lados (a ajustado para 1) correspondentes vão ser estimadas usando um modelo de risco proporcional Cox, com grupos de tratamento como uma única covariável, estratificados pelos fatores acima. As curvas da sobrevida geral (OS), medianas da sobrevida geral com intervalos de confiança de 95%, e as taxas de sobrevida geral em 12 e 24 meses com intervalos de confiança de 95% vão ser estimadas usando a metodologia de Kaplan-Meier. Se for demonstrada superioridade da sobrevida geral para no mínimo uma comparação, uma abordagem de teste de gatekeeping para os desfechos secundários chave vai ser aplicada a comparações adicionais experimentais vs. controle conforme descrito no plano de análise estatística. Os desfechos secundários chave vão ser testados na seguinte ordem hierárquica:

[00226] 1) Vão ser conduzidas análises da sobrevida livre de progressão (PFS) (com base em avaliações de BICR) usando um teste de log-rank de dois lados estratificado por histologia e status de PD-L1 em todos os sujeitos randomizados para comparar cada um dos três tratamentos experimentais com o grupo de controle. As taxas de risco e % de intervalos de confiança (a ajustado para 1) de dois lados correspondentes vão ser estimadas usando um modelo de risco proporcional Cox, com grupo de tratamento como uma única covariável, estratificado pelos fatores acima. Curvas da sobrevida livre de progressão, medianas da sobrevida livre de progressão com

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74/84 intervalos de confiança de 95%, e taxas da sobrevida livre de progressão em 6 e 12 meses com intervalos de confiança de 95% vão ser estimadas usando a metodologia de Kaplan-Meier.

[00227] 2) Vão ser conduzidas análises da taxa de resposta objetiva (ORR) (com base em avaliações de BICR) usando um teste de Cochran-Mantel-Haenszel (CMH) de dois lados estratificado por status de PD-L1 e histologia para comparar cada um dos três tratamentos do experimento com o grupo de controle. Também vão ser calculadas as proporções de probabilidades associadas e a % de intervalos de confiança (a ajustado para 1). Adicionalmente, as taxas de resposta objetiva (ORRs) e seus intervalos de confiança de 95% correspondenets exatos vão ser calculados usando o método de Clopper-Pearson para cada um dos quatro grupos de tratamento.

[00228] 3) Vai ser conduzida uma comparação pareada da sobrevida geral entre braços experimentais usando um teste de logrank de dois lados estratificado por histologia e status de PD-L1. As taxas de risco e a % de intervalos de confiança (Cl) de dois lados correspondentes (a ajustado para 1) vão ser estimadas usando um modelo de risco proporcional Cox, com grupo de tratamento como uma única covariável, estratificado pelos fatores acima.

Análises [00229] As análises da expressão de PD-L1 serão descritivas. A distribuição da expressão de PD-L1 vai ser examinada com base na população global. Serão avaliadas potenciais associações entre a expressão de PD-L1 e medidas de eficácia (ORR, OS e PFS). Se houver uma indicação de uma associação significativa, será conduzida uma avaliação adicional para explorar a expressão de PD-L1 como um biomarcador preditivo estimando o efeito de interação entre a expressão de PD-L1 e o tratamento.

[00230] Os resultados mostram se a terapia combinada (nivolumab

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75/84 + BMS 986016 + agente imunoterápico) vão melhorar a sobrevida geral (OS) comparada com monoterapia com nivolumab.

SEQUÊNCIAS

SEQ ID NO: 1 Sequência de Aminoácidos de Cadeia Pesada; mAb Anti-LAG-3 (BMS-986016)

QVQLQQWGAGLLKPSETLSLTCAVYGGSFSDYYWNWIRQPPGKGL EWIGEINHRGSTNSNPSLKSRVTLSLDTSKNQFSLKLRSVTAADTAVY YCAFGYSDYEYNWFDPWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPCSRSTS ESTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLS SVVTVPSSSLGTKTYTCNVDHKPSNTKVDKRVESKYGPPCPPCPAP EFLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSQEDPEVQFNWYV DGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSN KGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTCLVKGFY PSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKSRWQE GNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLGK

SEQ ID NO: 2 Sequência de Aminoácidos de Cadeia Leve; mAb AntiLAG-3 (BMS-986016)

EIVLTQSPATLSLSPGERATLSCRASQSISSYLAWYQQKPGQAPRLLI YDASNRATGIPARFSGSGSGTDFTLTISSLEPEDFAVYYCQQRSNWP LTFGQGTNLEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPRE AKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKH KVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC

SEQ ID NO: 3 Sequência de Aminoácidos de Região Variável de Cadeia Pesada (VH); mAb Anti-LAG-3 (BMS-986016)

QVQLQQWGAGLLKPSETLSLTCAVYGGSFSDYYWNWIRQPPGKGL EWIGEINHRGSTNSNPSLKSRVTLSLDTSKNQFSLKLRSVTAADTAVY YCAFGYSDYEYNWFDPWGQGTLVTVSS

SEQ ID NO: 4 Sequência de Nucleotídeos de Região Variável de Cadeia Pesada (VH); mAb Anti-LAG-3 (BMS-986016) caggtgcagctacagcagtggggcgcaggactgttgaagccttcggagaccctgtccctcacct

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76/84 gcgctgtctatggtgggtccttcagtgattactactggaactggatccgccagcccccagggaagg g g ctg g ag tg g attg g g g aaatcaatcatcg tg g aag caccaactccaacccg tccctcaag ag tcgagtcaccctatcactagacacgtccaagaaccagttctccctgaagctgaggtctgtgaccgc cgcggacacggctgtgtattactgtgcgtttggatatagtgactacgagtacaactggttcgacccc tggggccagggaaccctggtcaccgtctcctca

SEQ ID NO: 5 Sequência de Aminoácidos de Região Variável de Cadeia Leve (VL); mAb Anti-LAG-3 (BMS-986016)

EIVLTQSPATLSLSPGERATLSCRASQSISSYLAWYQQKPGQAPRLLI YDASNRATGIPARFSGSGSGTDFTLTISSLEPEDFAVYYCQQRSNWP LTFGQGTNLEIK

SEQ ID NO: 6 Sequência de Nucleotídeos de Região Variável de Cadeia Leve (VL); mAb Anti-LAG-3 (BMS-986016) gaaattgtgttgacacagtctccagccaccctgtctttgtctccaggggaaagagccaccctctcct gcagggccagtcagagtattagcagctacttagcctggtaccaacagaaacctggccaggctcc caggctcctcatctatgatgcatccaacagggccactggcatcccagccaggttcagtggcagtg ggtctgggacagacttcactctcaccatcagcagcctagagcctgaag attttg cag tttattactg t cag cag eg tag caactg g cctctcacttttg g ccag g g g accaacctg g ag atcaaa

SEQ ID NO: 7 Sequência de Aminoácidos de CDR1 de Cadeia Pesada; mAb Anti-LAG-3 (BMS-986016)

DYYWN

SEQ ID NO: 8 Sequência de Aminoácidos de CDR2 de Cadeia Pesada; mAb Anti-LAG-3 (BMS-986016)

EINHRGSTNSNPSLKS

SEQ ID NO: 9 Sequência de Aminoácidos de CDR3 de Cadeia Pesada; mAb Anti-LAG-3 (BMS-986016)

GYSDYEYNWFDP

SEQ ID NO: 10 Sequência de Aminoácidos de CDR1 de Cadeia Leve; mAb Anti-LAG-3 (BMS-986016)

RASQSISSYLA

SEQ ID NO: 11 Sequência de Aminoácidos de CDR2 de Cadeia Leve;

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77/84 mAb Anti-LAG-3 (BMS-986016)

DASNRAT

SEQ ID NO: 12 Sequência de Aminoácidos de CDR3 de Cadeia Leve; mAb Anti-LAG-3 (BMS-986016)

QQRSNWPLT

SEQ ID NO: 13 Sequência de Aminoácidos LAG-3 Humana

MWEAQFLGLLFLQPLWVAPVKPLQPGAEVPVVWAQEGAPAQLPCS PTIPLQDLSLLRRAGVTWQHQPDSGPPAAAPGHPLAPGPHPAAPSS WGPRPRRYTVLSVGPGGLRSGRLPLQPRVQLDERGRQRGDFSLWL RPARRADAGEYRAAVHLRDRALSCRLRLRLGQASMTASPPGSLRAS DWVILNCSFSRPDRPASVHWFRNRGQGRVPVRESPHHHLAESFLFL PQVSPMDSGPWGCILTYRDGFNVSIMYNLTVLGLEPPTPLTVYAGAG SRVGLPCRLPAGVGTRSFLTAKWTPPGGGPDLLVTGDNGDFTLRLE DVSQAQAGTYTCHIHLQEQQLNATVTLAIITVTPKSFGSPGSLGKLLC EVTPVSGQERFVWSSLDTPSQRSFSGPWLEAQEAQLLSQPWQCQL YQGERLLGAAVYFTELSSPGAQRSGRAPGALPAGHLLLFLTLGVLSL LLLVTGAFGFHLWRRQWRPRRFSALEQGIHPPQAQSKIEELEQEPEP EPEPEPEPEPEPEPEQL

SEQ ID NO: 14 Epítopo de LAG-3

PGHPLAPG

SEQ ID NO: 15 Epítopo de LAG-3

HPAAPSSW

SEQ ID NO: 16 Epítopo de LAG-3

PAAPSSWG

SEQ ID NO: 17 Sequência de Aminoácidos de Cadeia Pesada; mAb Anti-PD-1 (BMS936558)

QVQLVESGGGVVQPGRSLRLDCKASGITFSNSGMHWVRQAPGKGL EWVAVIWYDGSKRYYADSVKGRFTISRDNSKNTLFLQMNSLRAEDTA VYYCATNDDYWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPCSRSTSESTAAL GCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVP

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78/84

SSSLGTKTYTCNVDHKPSNTKVDKRVESKYGPPCPPCPAPEFLGGP SVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVH NAKTKPREEQFNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSI EKTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAV EWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKSRWQEGNVFS CSVMHEALHNHYTQKSLSLSLGK

SEQ ID NO: 18 Sequência de Aminoácidos de Cadeia Leve; mAb AntiPD-1 (BMS936558)

EIVLTQSPATLSLSPGERATLSCRASQSVSSYLAWYQQKPGQAPRLLI YDASNRATGIPARFSGSGSGTDFTLTISSLEPEDFAVYYCQQSSNWP RTFGQGTKVEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPRE AKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLLSKADYEKHK VYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC

SEQ ID NO: 19 Sequência de Aminoácidos de Região Variável de Cadeia Pesada (VH); mAb Anti-PD-1 (BMS936558)

QVQLVESGGGVVQPGRSLRLDCKASGITFSNSGMHWVRQAPGKGL EWVAVIWYDGSKRYYADSVKGRFTISRDNSKNTLFLQMNSLRAEDTA VYYCATNDDYWGQGTLVTVSS

SEQ ID NO: 20 Sequência de Nucleotídeos de Região Variável de Cadeia Pesada (VH); mAb Anti-PD-1 (BMS936558) caggtgcagctggtggagtctgggggaggcgtggtccagcctgggaggtccctgagactcgact gtaaagcgtctggaatcaccttcagtaactctggcatgcactgggtccgccaggctccaggcaag gggctggagtgggtggcagttatttggtatgatggaagtaaaagatactatgcagactccgtgaag g g ccg attcaccatctccag ag acaattccaag aacacg ctg tttctg caaatg aacag cctg ag agccgaggacacggctgtgtattactgtgcgacaaacgacgactactggggccagggaaccct ggtcaccgtctcctca

SEQ ID NO: 21 Sequência de Aminoácidos de Região Variável de Cadeia Leve (VL); mAb Anti-PD-1 (BMS936558)

EIVLTQSPATLSLSPGERATLSCRASQSVSSYLAWYQQKPGQAPRLLI YDASNRATGIPARFSGSGSGTDFTLTISSLEPEDFAVYYCQQSSNWP

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RTFGQGTKVEIK

SEQ ID NO: 22 Sequência de Nucleotídeos de Região Variável de Cadeia Leve (VL); mAb Anti-PD-1 (BMS936558) gaaattgtgttgacacagtctccagccaccctgtctttgtctccaggggaaagagccaccctctcct gcagggccagtcagagtgttagtagttacttagcctggtaccaacagaaacctggccaggctccc aggctcctcatctatgatgcatccaacagggccactggcatcccagccaggttcagtggcagtgg g tctg g g acag acttcactctcaccatcag cag cctag ag cctg aag attttg cag tttattactg tc agcagagtagcaactggcctcggacgttcggccaagggaccaaggtggaaatcaaa

SEQ ID NO: 23 Sequência de Aminoácidos de CDR1 de Cadeia Pesada; mAb Anti-PD-1 (BMS936558)

NSGMH

SEQ ID NO: 24 Sequência de Aminoácidos de CDR2 de Cadeia

Pesada; mAb Anti-PD-1 (BMS936558)

VIWYDGSKRYYADSVKG

SEQ ID NO: 25 Sequência de Aminoácidos de CDR3 de Cadeia

Pesada; mAb Anti-PD-1 (BMS936558)

NDDY

SEQ ID NO: 26 Sequência de Aminoácidos de CDR1 de Cadeia Leve; mAb Anti-PD-1 (BMS936558)

RASQSVSSYLA

SEQ ID NO: 27 Sequência de Aminoácidos de CDR2 de Cadeia Leve; mAb Anti-PD-1 (BMS936558)

DASNRAT

SEQ ID NO: 28 Sequência de Aminoácidos de CDR3 de Cadeia Leve; mAb Anti-PD-1 (BMS936558)

QQSSNWPRT

SEQ ID NO: 29 Sequência de PD-1 de Homo sapiens Completa agtttcccttccgctcacctccgcctgagcagtggagaaggcggcactctggtggggctgctccag gcatgcagatcccacaggcgccctggccagtcgtctgggcggtgctacaactgggctggcggcc ag g atg g ttcttag actccccag acag g ccctg g aacccccccaccttcttcccag ccctg ctcg t

Petição 870190089572, de 10/09/2019, pág. 96/165

80/84 ggtgaccgaaggggacaacgccaccttcacctgcagcttctccaacacatcggagagcttcgtg ctaaactggtaccgcatgagccccagcaaccagacggacaagctggccgccttccccgagga ccgcagccagcccggccaggactgccgcttccgtgtcacacaactgcccaacgggcgtgacttc cacatgagcgtggtcagggcccggcgcaatgacagcggcacctacctctgtggggccatctccc tg g cccccaag g eg cag atcaaag ag ag cctg eg g g cag ag ctcag g g tg acag ag ag aa gggcagaagtgcccacagcccaccccagcccctcacccaggccagccggccagttccaaac cctggtggttggtgtcgtgggcggcctgctgggcagcctggtgctgctagtctgggtcctggccgtc atetg ctcccg g g ccg cacg ag g g acaatag g ag ccag g eg caccg g ccag cccctg aag g aggacccctcagccgtgcctgtgttctctgtggactatggggagctggatttccagtggcgagaga agaccccggagccccccgtgccctgtgtccctgagcagacggagtatgccaccattg tctttccta g eg g aatg g g cacctcatcccccg cccg cag g g g ctcag ccg acg g ccctcg g ag tg cccag ccactg ag g cctg ag g atg g acactg ctcttg g cccctctg accg g cttccttg g ccaccag tg ttc tg cag accctccaccatg ag cccg g g tcag eg catttcctcag g ag aag cag g cag g g tg cag gccattgcaggccgtccaggggctgagctgcctgggggcgaccggggctccagcctgcacctg caccag g cacag ccccaccacag g actcatg tctcaatg cccacag tg ag cccag g cag cag gtgtcaccgtcccctacagggagggccagatgcagtcactgcttcaggtcctgccagcacagag etg cctg eg tccag ctccctg aatctctg etg etg etg etg etg etg etg etg etg cctg eg g cccg g ggctgaaggcgccgtggccctgcctgacgccccggagcctcctgcctgaacttgggggctggttg g ag atg g ccttg g ag cag ccaag g tg cccctg g cag tg g catcccg aaacg ccctg g acg ca gggcccaagactgggcacaggagtgggaggtacatggggctggggactccccaggagttatct gctccctgcaggcctagagaagtttcagggaaggtcagaagagctcctggctgtggtgggcagg g cag g aaacccctcccacctttacacatg cccag g cag cacctcag g ccctttg tg g g g cag g g aag etg ag g cag taag eg g g cag g cag ag etg g ag g cctttcag g ccag ccag cactctg g c ctcctg ccg ccg cattccaccccag cccctcacaccactcg g g ag ag g g acatcctacg g tccc aaggtcaggagggcagggctggggttgactcaggcccctcccagctgtggccacctgggtgttg g g ag g g cag aag tg cag g cacctag g g ccccccatg tg cccaccctg g g ag ctctccttg g aa cccattcctg aaattatttaaag g g g ttg g ccg g g ctcccaccag g g cctg g g tg g g aag g taca g g eg ttcccccg g g g cctag tacccccg eg tg g cctatccactcctcacatccacacactg cacc cccactcctg g g g cag g g ccaccag catccag g eg g ccag cag g cacctg ag tg g etg g g ac aag g g atcccccttccctg tg g ttctattatattataattataattaaatatg ag ag catg ct

Petição 870190089572, de 10/09/2019, pág. 97/165

81/84

SEQ ID NO: 30 Sequência de Nucleotídeos de Cadeia Pesada; mAb Anti-LAG-3 (BMS-986016) caggtgcagctacagcagtggggcgcaggactgttgaagccttcggagaccctgtccctcacct gcgctgtctatggtgggtccttcagtgattactactggaactggatccgccagcccccagggaagg g g ctg g ag tg g attg g g g aaatcaatcatcg tg g aag caccaactccaacccg tccctcaag ag tcgagtcaccctatcactagacacgtccaagaaccagttctccctgaagctgaggtctgtgaccgc cgcggacacggctgtgtattactgtgcgtttggatatagtgactacgagtacaactggttcgacccc tg g g g ccag g g aaccctg g tcaccg tctcctcag ctag caccaag g g cccatccg tcttccccct g g eg ccctg ctccag g ag cacctccg ag ag cacag ccg ccctg g g ctg cctg g tcaag g acta cttccccgaaccggtgacggtgtcgtggaactcaggcgccctgaccagcggcgtgcacaccttc ccggctgtcctacagtcctcaggactctactccctcagcagcgtggtgaccgtgccctccagcagc ttgggcacgaagacctacacctgcaacgtagatcacaagcccagcaacaccaaggtggacaa gagagttgagtccaaatatggtcccccatgcccaccatgcccagcacctgagttcctgggggga ccatcag tcttcctg ttccccccaaaacccaag g acactctcatg atctcccg g acccctg ag g tc acgtgcgtggtggtggacgtgagccaggaagaccccgaggtccagttcaactggtacgtggatg gcgtggaggtgcataatgccaagacaaagccgcgggaggagcagttcaacagcacgtaccgt gtggtcagcgtcctcaccgtcctgcaccaggactggctgaacggcaaggagtacaagtgcaag g tctccaacaaag g cctcccg tcctccatcg ag aaaaccatctccaaag ccaaag g g cag ccc cgagagccacaggtgtacaccctgcccccatcccaggaggagatgaccaagaaccaggtca g cctg acctg cctg g tcaaag g cttctaccccag eg acatcg ccg tg g ag tg g g ag ag caatg g g cag ccg g ag aacaactacaag accacg cctcccg tg ctg g actccg acg g ctccttcttcctct acagcaggctaaccgtggacaagagcaggtggcaggaggggaatgtcttctcatgctccgtgat g catg ag g ctctg cacaaccactacacacag aag ag cctctccctg tetetg g g taaatg a

SEQ ID NO: 31 Sequência de Nucleotídeos de Cadeia Leve; mAb AntiLAG-3 (BMS-986016) gaaattgtgttgacacagtctccagccaccctgtctttgtctccaggggaaagagccaccctctcct gcagggccagtcagagtattagcagctacttagcctggtaccaacagaaacctggccaggctcc caggctcctcatctatgatgcatccaacagggccactggcatcccagccaggttcagtggcagtg ggtctgggacagacttcactctcaccatcagcagcctagagcctgaag attttg cag tttattactg t cagcagcgtagcaactggcctctcacttttggccaggggaccaacctggagatcaaacgtacgg

Petição 870190089572, de 10/09/2019, pág. 98/165

82/84 tg g ctg caccatctg tcttcatcttcccg ccatctg atg ag cag ttg aaatctg g aactg cctctg ttg t gtgcctgctgaataacttctatcccagagaggccaaagtacagtggaaggtggataacgccctcc aatcgggtaactcccaggagagtgtcacagagcaggacagcaaggacagcacctacagcctc ag cag caccctg acg ctg ag caaag cag actacg ag aaacacaaag tctacg cctg eg aag t cacccatcagggcctgagctcgcccgtcacaaagagcttcaacaggggagagtgttag SEQ ID NO: 32 Motivo

MYPPPY

SEQ ID NO: 33 Sequência de Aminoácidos de Cadeia Pesada; mAb Anti-ICOS (BMS986226)

EVQLVESGGGLVKPGGSLRLSCAASGFTFSDYFMHWVRQAPGKGL EWVGVIDTKSFNYATYYSDLVKGRFTISRDDSKNTLYLQMNSLKTED TAVYYCTATIAVPYYFDYWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKST SGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSL SSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKRVEPKSCDKTHTCPPC PAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVEHEDPEVKFN WYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKC KVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLV KGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSR WQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPG

SEQ ID NO: 34 Sequência de Aminoácidos de Cadeia Leve; mAb AntiICOS (BMS986226)

DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCQASQDISNYLSWYQQKPGKAPKLLI YYTNLLAEGVPSRFSGSGSGTDFTFTISSLQPEDIATYYCQQYYNYRT FGPGTKVDIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAK VQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKV YACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC

SEQ ID NO: 35 Sequência de Aminoácidos de Região Variável de Cadeia Pesada (VH); mAb Anti-ICOS (BMS986226)

EVQLVESGGGLVKPGGSLRLSCAASGFTFSDYFMHWVRQAPGKGL EWVGVIDTKSFNYATYYSDLVKGRFTISRDDSKNTLYLQMNSLKTED

Petição 870190089572, de 10/09/2019, pág. 99/165

83/84

TAVYYCTATIAVPYYFDYWGQGTLVTVSS

SEQ ID NO: 36 Sequência de Aminoácidos de Região Variável de Cadeia Leve (VL); mAb Anti-ICOS (BMS986226)

DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCQASQDISNYLSWYQQKPGKAPKLLI YYTNLLAEGVPSRFSGSGSGTDFTFTISSLQPEDIATYYCQQYYNYRT FGPGTKVDIK

SEQ ID NO: 37 Sequência de Aminoácidos de CDR1 de Cadeia

Pesada; mAb Anti-ICOS (BMS986226)

GFTFSDYFMH

SEQ ID NO: 38 Sequência de Aminoácidos de CDR2 de Cadeia

Pesada; mAb Anti-ICOS (BMS986226)

VIDTKSFNYATYYSDLVKG

SEQ ID NO: 39 Sequência de Aminoácidos de CDR3 de Cadeia

Pesada; mAb Anti-ICOS (BMS986226)

TIAVPYYFDY

SEQ ID NO: 40 Sequência de Aminoácidos de CDR1 de Cadeia Leve; mAb Anti-ICOS (BMS986226)

QASQDISNYLS

SEQ ID NO: 41 Sequência de Aminoácidos de CDR2 de Cadeia Leve; mAb Anti-ICOS (BMS986226)

YTNLLAE

SEQ ID NO: 42 Sequência de Aminoácidos de CDR3 de Cadeia Leve; mAb Anti-ICOS (BMS986226)

QQYYNYRT

SEQ ID NO: 43 Sequência de Aminoácidos de CDR3 de Cadeia Leve; mAb Anti-ICOS (BMS986226)

QQYYNYRT

SEQ ID NO: 44 Sequência de Aminoácidos da Proteína do Gene 3 de Ativação de Linfócitos (Homo Sapiens, NP_002277)

MWEAQFLGLLFLQPLWVAPVKPLQPGAEVPVVWAQEGAPAQLPCS

Petição 870190089572, de 10/09/2019, pág. 100/165

84/84

PTIPLQDLSLLRRAGVTWQHQPDSG

PPAAAPGHPLAPGPHPAAPSSWGPRPRRYTVLSVGPGGLRSGRLPL QPRVQLDERGRQRGDFSLWLRPAR

RADAGEYRAAVHLRDRALSCRLRLRLGQASMTASPPGSLRASDWVI LNCSFSRPDRPASVHWFRNRGQGR

VPVRESPHHHLAESFLFLPQVSPMDSGPWGCILTYRDGFNVSIMYNL TVLGLEPPTPLTVYAGAGSRVGL

PCRLPAGVGTRSFLTAKWTPPGGGPDLLVTGDNGDFTLRLEDVSQA QAGTYTCHIHLQEQQLNATVTLAI

ITVTPKSFGSPGSLGKLLCEVTPVSGQERFVWSSLDTPSQRSFSGP WLEAQEAQLLSQPWQCQLYQGERL

LGAAVYFTELSSPGAQRSGRAPGALPAGHLLLFLILGVLSLLLLVTGAF GFHLWRRQWRPRRFSALEQGI

HPPQAQSKIEELEQEPEPEPEPEPEPEPEPEPEQL

SEQ ID NO: 45 Sequência de Aminoácidos de PD-1 (Homo Sapiens,

AAC51773.1)

MQIPQAPWPVVWAVLQLGWRPGWFLDSPDRPWNPPTFFPALLVVT EGDNATFTCSFSNTSESFVLNWYRM

SPSNQTDKLAAFPEDRSQPGQDCRFRVTQLPNGRDFHMSVVRARR NDSGTYLCGAISLAPKAQIKESLRA

ELRVTERRAEVPTAHPSPSPRPAGQFQTLVVGVVGGLLGSLVLLVW VLAVICSRAARGTIGARRTGQPLK

EDPSAVPVFSVDYGELDFQWREKTPEPPVPCVPEQTEYATIVFPSG MGTSSPARRGSADGPRSAQPLRPE

Claims

REIVINDICAÇÕES

1. Método de tratamento de um tumor maligno em um paciente humano caracterizado pelo fato de que compreende a administração de uma quantidade terapeuticamente eficaz de:

um inibidor de LAG-3;

um inibidor da via PD-1; e um agente imunoterápico.
2. Método de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que o inibidor de LAG-3 é um anticorpo antiLAG-3 ou um fragmento de ligação ao antígeno do mesmo.
3. Método de acordo com a reivindicação 1 ou 2, caracterizado pelo fato de que o anticorpo anti-LAG-3 é um anticorpo biespecífico.
4. Método de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 3, caracterizado pelo fato de que o anticorpo antiLAG-3 ou fragmento de ligação ao antígeno do mesmo compreende (a) uma região variável de cadeia pesada CDR1 compreendendo a sequência estipulada na SEQ ID NO: 7; (b) uma região variável de cadeia pesada CDR2 compreendendo a sequência estipulada na SEQ ID NO: 8; (c) uma região variável de cadeia pesada CDR3 compreendendo a sequência estipulada na SEQ ID NO: 9; (d) uma região variável de cadeia leve CDR1 compreendendo a sequência estipulada na SEQ ID NO: 10; (e) uma região variável de cadeia leve CDR2 compreendendo a sequência estipulada na SEQ ID NO: 11; e (f) uma região variável de cadeia leve CDR3 compreendendo a sequência estipulada na SEQ ID NO: 12.
5. Método de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 4, caracterizado pelo fato de que o anticorpo antiLAG-3 ou fragmento de ligação ao antígeno do mesmo compreende regiões variáveis de cadeias pesadas e leves compreendendo as

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2/22 sequências estipuladas nas SEQ ID NOs: 3 e 5, respectivamente.
6. Método de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 5, caracterizado pelo fato de que o anticorpo antiLAG-3 é BMS 986016, MK-4280 (28G-10), REGN3767, GSK2831781, IMP731 (H5L7BW), BAP050, IMP-701 (LAG-5250), IMP321, TSR-033, LAG525, BI 754111, ou FS-118.
7. Método de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que o inibidor de LAG-3 é um polipeptídeo LAG-3 solúvel.
8. Método de acordo com a reivindicação 7, caracterizado pelo fato de que o polipeptídeo LAG-3 solúvel é um polipeptídeo de fusão.
9. Método de acordo com a reivindicação 7 ou 8, caracterizado pelo fato de que o polipeptídeo LAG-3 solúvel compreende um fragmento de ligação ao ligante do domínio extracelular LAG-3.
10. Método de acordo com a reivindicação 9, caracterizado pelo fato de que o fragmento de ligação ao ligante do domínio extracelular LAG-3 compreende uma sequência de aminoácidos com no mínimo 90%, no mínimo 95%, no mínimo 98%, ou no mínimo 99% de identidade de sequência com a SEQ ID NO: 44.
11. Método de acordo com qualquer uma das reivindicações 7 a 10, caracterizado pelo fato de que o polipeptídeo LAG-3 solúvel adicionalmente compreende um domínio Fc.
12. Método de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 11, caracterizado pelo fato de que o inibidor da via PD-1 é um anticorpo anti-PD-1 ou fragmento de ligação ao antígeno do mesmo.
13. Método de acordo com a reivindicação 12, caracterizado pelo fato de que o anticorpo anti-PD-1 é pembrolizumab

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3/22 (KEYTRUDA; MK-3475), pidilizumab (CT-011), nivolumab (OPDIVO; BMS-936558), PDR001, MEDI0680 (AMP-514), TSR-042, REGN2810, JS001, AMP-224 (GSK-2661380), PF-06801591, BGB-A317, Bl 754091, ou SHR-1210.
14. Método de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 11, caracterizado pelo fato de que o inibidor da via PD-1 é um anticorpo anti-PD-L1 ou fragmento de ligação ao antígeno do mesmo.
15. Método de acordo com a reivindicação 14, caracterizado pelo fato de que o anticorpo anti-PD-L1 é atezolizumab (TECENTRIQ; RG7446; MPDL3280A; RO5541267), durvalumab (MEDI4736), BMS-936559, avelumab (bavencio), LY3300054, CX-072 (Proclaim-CX-072), FAZ053, KN035, ou MDX-1105.
16. Método de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 11, caracterizado pelo fato de que o inibidor da via PD-1 é um fármaco de molécula pequena.
17. Método de acordo com a reivindicação 16, caracterizado pelo fato de que o inibidor da via PD-1 é CA-170.
18. Método de acordo com a reivindicação 16, caracterizado pelo fato de que o inibidor da via PD-1 é uma terapia à base de células.
19. Método de acordo com a reivindicação 18, caracterizado pelo fato de que a terapia à base de células é uma vacina de células dendríticas silenciadas por PD-L1/L2 carregada com MiHA.
20. Método de acordo com a reivindicação 19, caracterizado pelo fato de que a terapia à base de células é um anticorpo antiproteína da morte celular programada 1 expressando linfócito T assassino pluripotente, um linfócito T autólogo modificado por receptor de comutador quimérico direcionado para PD-1 , ou um

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4/22 linfócito T autólogo de nocaute de PD-1.
21. Método de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 11, caracterizado pelo fato de que o inibidor da via PD-1 é um anticorpo anti-PD-L2 ou fragmento de ligação ao antígeno do mesmo.
22. Método de acordo com a reivindicação 21, caracterizado pelo fato de que o anticorpo anti-PD-L2 é rHlgM12B7.
23. Método de acordo com a reivindicação 1 a 11, caracterizado pelo fato de que o inibidor da via PD-1 é um polipeptídeo PD-1 solúvel.
24. Método de acordo com a reivindicação 23, caracterizado pelo fato de que o polipeptídeo PD-1 solúvel é um polipeptídeo de fusão.
25. Método de acordo com a reivindicação 23 ou 24, caracterizado pelo fato de que o polipeptídeo PD-1 solúvel compreende um fragmento de ligação ao ligante do domínio extracelular PD-1.
26. Método de acordo com qualquer uma das reivindicações 23 a 25, caracterizado pelo fato de que o polipeptídeo PD-1 solúvel compreende um fragmento de ligação ao ligante do domínio extracelular PD-1.
27. Método de acordo com a reivindicação 26, caracterizado pelo fato de que o fragmento de ligação ao ligante do domínio extracelular PD-1 compreende uma sequência de aminoácidos com no mínimo 90%, no mínimo 95%, no mínimo 98%, ou no mínimo 99% de identidade de sequência com a SEQ ID NO: 45.
28. Método de acordo com qualquer uma das reivindicações 23 a 27, caracterizado pelo fato de que o polipeptídeo PD-1 solúvel adicionalmente compreende um domínio Fc.
29. Método de acordo com qualquer uma das

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5/22 reivindicações 1 a 28, caracterizado pelo fato de que o agente imunoterápico é um modulador da atividade de CTLA-4, um modulador da atividade de CD28, um modulador da atividade de CD80, um modulador da atividade de CD86, um modulador da atividade de 41BB, um modulador da atividade de 0X40, um modulador da atividade de KIR, um modulador da atividade de Tim-3, um modulador da atividade de CD27, um modulador da atividade de CD40, um modulador da atividade de GITR, um modulador da atividade de TIGIT, um modulador da atividade de CD20, um modulador da atividade de CD96, um modulador da atividade de IDO1, um modulador da atividade de STING, um modulador da atividade de GARP, um modulador da atividade de A2aR, um modulador da atividade de CEACAM1, um modulador da atividade de CEA, um modulador da atividade de CD47, um modulador da atividade de PVRIG, um modulador da atividade de TDO, um modulador da atividade de VISTA, uma citocina, uma quimiocina, um interferon, uma interleucina, uma linfocina, um membro da família de fatores de necrose tumoral (TNF), ou um oligonucleotídeo imunoestimulador.
30. Método de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 28, caracterizado pelo fato de que o agente imunoterápico é um inibidor do ponto de controle imunológico.
31. Método de acordo com a reivindicação 30, caracterizado pelo fato de que o inibidor do ponto de controle imunológico é um antagonista de CTLA-4, um antagonista de CD80, um antagonista de CD86, um antagonista de Tim-3, um antagonista de TIGIT, um antagonista de CD20, um antagonista de CD96, um antagonista de IDO1, um antagonista de STING, um antagonista de GARP, um antagonista de CD40, um antagonista de A2aR, um antagonista de CEACAM1 (CD66a), um antagonista de CEA, um antagonista de CD47, um antagonista de PVRIG, um antagonista de

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6/22

TDO, um antagonista de VISTA, ou um antagonista de KIR.
32. Método de acordo com a reivindicação 31, caracterizado pelo fato de que o inibidor do ponto de controle imunológico é um antagonista de CTLA-4.
33. Método de acordo com a reivindicação 32, caracterizado pelo fato de que o antagonista de CTLA-4 é um anticorpo anti-CTLA-4 ou fragmento de ligação ao antígeno do mesmo.
34. Método de acordo com a reivindicação 33, caracterizado pelo fato de que o anticorpo anti-CTLA-4 é ipilimumab (YERVOY), tremelimumab (ticilimumab; CP-675,206), AGEN-1884, ou ATOR-1015.
35. Método de acordo com a reivindicação 32, caracterizado pelo fato de que o antagonista de CTLA-4 é um polipeptídeo CTLA-4 solúvel.
36. Método de acordo com a reivindicação 35, caracterizado pelo fato de que o polipeptídeo CTLA-4 solúvel é abatacept (Orencia), belatacept (Nulojix), RG2077, ou RG-1046.
37. Método de acordo com a reivindicação 32, caracterizado pelo fato de que o antagonista de CTLA-4 é uma terapia à base de células.
38. Método de acordo com a reivindicação 37, caracterizado pelo fato de que o antagonista de CTLA-4 é uma vacina de células dendríticas autólogas transfectadas com RNA de mAb antiCTLA4 / RNA de GITRL ou uma vacina de células dendríticas autólogas transfectadas com RNA de mAb anti-CTLA4.
39. Método de acordo com a reivindicação 31, caracterizado pelo fato de que o inibidor do ponto de controle imunológico é um antagonista de KIR
40. Método de acordo com a reivindicação 39, caracterizado pelo fato de que o antagonista de KIR é um anticorpo

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7/22 anti-KIR ou fragmento de ligação ao antígeno do mesmo.
41. Método de acordo com a reivindicação 40, caracterizado pelo fato de que o anticorpo anti-KIR é lirilumab (1-7F9, BMS-986015, IPH 2101) ou IPH4102.
42. Método de acordo com a reivindicação 31, caracterizado pelo fato de que o inibidor do ponto de controle imunológico é um antagonista de TIGIT.
43. Método de acordo com a reivindicação 42, caracterizado pelo fato de que o antagonista de TIGIT é um anticorpo anti-TIGIT ou fragmento de ligação ao antígeno do mesmo.
44. Método de acordo com a reivindicação 43, caracterizado pelo fato de que o anticorpo anti-TIGIT é BMS-986207, AB 154, COM902 (CGEN-15137), ou OMP-313M32.
45. Método de acordo com a reivindicação 31, caracterizado pelo fato de que o inibidor do ponto de controle imunológico é um antagonista de Tim-3.
46. Método de acordo com a reivindicação 45, caracterizado pelo fato de que o antagonista de Tim-3 é um anticorpo anti-Tim-3 ou fragmento de ligação ao antígeno do mesmo.
47. Método de acordo com a reivindicação 46, caracterizado pelo fato de que o anticorpo anti-Tim-3 é TSR-022 ou LY3321367.
48. Método de acordo com a reivindicação 31, caracterizado pelo fato de que o inibidor do ponto de controle imunológico é um antagonista de IDO1.
49. Método de acordo com a reivindicação 48, caracterizado pelo fato de que o antagonista de IDO1 é indoximod (NLG8189; 1-metil-_D-TRP), epacadostat (INCB-024360, INCB-24360), KHK2455, PF-06840003, navoximod (RG6078, GDC-0919, NLG919), BMS-986205 (F001287), ou derivados de pirrolidina-2,5-diona.

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8/22
50. Método de acordo com a reivindicação 31, caracterizado pelo fato de que o inibidor do ponto de controle imunológico é um antagonista de STING.
51. Método de acordo com a reivindicação 50, caracterizado pelo fato de que o antagonista de STING é dinucleotídeos cíclicos 2’ ou 3’-mono-fluoro substituídos; di-nucleotídeos 2’,5’ - 3’,5’ cíclicos de ligação mista 2’3’-di-fluoro substituídos; dinucleotídeos bis-3’,5’ cíclicos, 2’-fluoro substituídos; di-nucleotídeos 2’,2”-diF-Rp,Rp,bis-3’,5’ cíclicos; ou di-nucleotídeos cíclicos fluorados.
52. Método de acordo com a reivindicação 31, caracterizado pelo fato de que o inibidor do ponto de controle imunológico é um antagonista de CD20.
53. Método de acordo com a reivindicação 52, caracterizado pelo fato de que o antagonista de CD20 é um anticorpo anti-CD20 ou fragmento de ligação ao antigeno do mesmo.
54. Método de acordo com a reivindicação 53, caracterizado pelo fato de que o anticorpo anti-CD20 é rituximab (RITUXAN; IDEC-102; IDEC-C2B8), ABP 798, ofatumumab, ou obinutuzumab.
55. Método de acordo com a reivindicação 31, caracterizado pelo fato de que o inibidor do ponto de controle imunológico é um antagonista de CD80.
56. Método de acordo com a reivindicação 55, caracterizado pelo fato de que o antagonista de CD80 é um anticorpo anti-CD80 ou fragmento de ligação ao antigeno do mesmo.
57. Método de acordo com a reivindicação 56, caracterizado pelo fato de que o anticorpo anti-CD80 é galiximab ou AV 1142742.
58. Método de acordo com a reivindicação 31, caracterizado pelo fato de que o inibidor do ponto de controle

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9/22 imunológico é um antagonista de GARP.
59. Método de acordo com a reivindicação 58, caracterizado pelo fato de que o antagonista de GARP é um anticorpo anti-GARP ou fragmento de ligação ao antígeno do mesmo.
60. Método de acordo com a reivindicação 59, caracterizado pelo fato de que o anticorpo anti-GARP é ARGX-115.
61. Método de acordo com a reivindicação 31, caracterizado pelo fato de que o inibidor do ponto de controle imunológico é um antagonista de CD40.
62. Método de acordo com a reivindicação 61, caracterizado pelo fato de que o antagonista de CD40 é um anticorpo anti-CD40 for fragmento de ligação ao antígeno do mesmo.
63. Método de acordo com a reivindicação 62, caracterizado pelo fato de que o anticorpo anti-CD40 é BMS3h-56, lucatumumab (HCD122 e CHIR-12.12), CHIR-5.9, ou dacetuzumab (huS2C6, PRO 64553, RG 3636, SGN 14, SGN-40).
64. Método de acordo com a reivindicação 61, caracterizado pelo fato de que o antagonista de CD40 é um ligante de CD40 solúvel (CD40-L).
65. Método de acordo com a reivindicação 64, caracterizado pelo fato de que o ligante de CD40 solúvel é um polipeptídeo de fusão.
66. Método de acordo com a reivindicação 64 ou 65, caracterizado pelo fato de que o ligante de CD40 solúvel é um CD40L/FC2 ou um CD40-L monomérico.
67. Método de acordo com a reivindicação 31, caracterizado pelo fato de que o inibidor do ponto de controle imunológico é um antagonista de A2aR.
68. Método de acordo com a reivindicação 67, caracterizado pelo fato de que o antagonista de A2aR é uma molécula

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10/22 pequena.
69. Método de acordo com a reivindicação 67 ou 68, caracterizado pelo fato de que o antagonista de A2aR é CPI-444, PBF509, istradefilina (KW-6002), preladenant (SCH420814), tozadenant (SYN115), vipadenant (BIIB014), HTL-1071, ST1535, SCH412348, SCH442416, SCH58261, ZM241385, ou AZD4635.
70. Método de acordo com a reivindicação 31, caracterizado pelo fato de que o inibidor do ponto de controle imunológico é um antagonista de CEACAM1.
71. Método de acordo com a reivindicação 70, caracterizado pelo fato de que o antagonista de CEACAM1 é um anticorpo anti-CEACAM1 ou fragmento de ligação ao antígeno do mesmo.
72. Método de acordo com a reivindicação 71, caracterizado pelo fato de que o anticorpo anti-CEACAM1 é CM-24 (MK-6018).
73. Método de acordo com a reivindicação 31, caracterizado pelo fato de que o inibidor do ponto de controle imunológico é um antagonista de CEA.
74. Método de acordo com a reivindicação 73, caracterizado pelo fato de que o antagonista de CEA é um anticorpo anti-CEA ou fragmento de ligação ao antígeno do mesmo.
75. Método de acordo com a reivindicação 74, caracterizado pelo fato de que o anticorpo anti-CEA é cergutuzumab amunaleucina (RG7813, RO-6895882) ou RG7802 (RO6958688).
76. Método de acordo com a reivindicação 31, caracterizado pelo fato de que o inibidor do ponto de controle imunológico é um antagonista de CD47.
77. Método de acordo com a reivindicação 76, caracterizado pelo fato de que o antagonista de CD47 é um anticorpo

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11/22 anti-CD47 ou fragmento de ligação ao antígeno do mesmo.
78. Método de acordo com a reivindicação 77, caracterizado pelo fato de que o anticorpo anti-CD47 é HuF9-G4, 0090002, TTI-621, ALX148, NI-1701, NI-1801, SRF231, ou Effi-DEM.
79. Método de acordo com a reivindicação 31, caracterizado pelo fato de que o inibidor do ponto de controle imunológico é um antagonista de PVRIG.
80. Método de acordo com a reivindicação 79, caracterizado pelo fato de que o antagonista de PVRIG é um anticorpo anti-PVRIG ou fragmento de ligação ao antígeno do mesmo.
81. Método de acordo com a reivindicação 80, caracterizado pelo fato de que o anticorpo anti-PVRIG é COM701 (CGEN-15029).
82. Método de acordo com a reivindicação 31, caracterizado pelo fato de que o inibidor do ponto de controle imunológico é um antagonista de TDO.
83. Método de acordo com a reivindicação 82, caracterizado pelo fato de que o antagonista de TDO é um derivado de 4-(indol-3-il)-pirazol, um derivado substituído de 3-indol, ou um derivado de a 3-(indol-3-il)-piridina.
84. Método de acordo com a reivindicação 31, caracterizado pelo fato de que o inibidor do ponto de controle imunológico é um duplo antagonista de IDO e TDO.
85. Método de acordo com a reivindicação 84, caracterizado pelo fato de que o duplo antagonista de IDO e TDO é uma molécula pequena.
86. Método de acordo com a reivindicação 31, caracterizado pelo fato de que o inibidor do ponto de controle imunológico é um antagonista de VISTA.
87. Método de acordo com a reivindicação 86,

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12/22 caracterizado pelo fato de que o antagonista de VISTA é CA-170 ou JNJ-61610588.
88. Método de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 29, caracterizado pelo fato de que o agente imunoterápico é um reforçador ou estimulador do ponto de controle imunológico.
89. Método de acordo com a reivindicação 88, caracterizado pelo fato de que reforçador ou estimulador do ponto de controle imunológico é um agonista de CD28, um agonista de 4-1 BB, um agonista de 0X40, um agonista de CD27, um agonista de CD80, um agonista de CD86, um agonista de CD40, um agonista de ICOS, um agonista de CD70, ou um agonista de GITR.
90. Método de acordo com a reivindicação 89, caracterizado pelo fato de que reforçador ou estimulador do ponto de controle imunológico é um agonista de 0X40.
91. Método de acordo com a reivindicação 90, caracterizado pelo fato de que o agonista de 0X40 é um anticorpo anti-OX40 ou fragmento de ligação ao antígeno do mesmo.
92. Método de acordo com a reivindicação 91, caracterizado pelo fato de que o anticorpo anti-OX40 é tavolixizumab (MEDI-0562), pogalizumab (MOXR0916, RG7888), GSK3174998, ATOR-1015, MEDI-6383, MEDI-6469, BMS 986178, PF-04518600, ou RG7888 (MOXR0916).
93. Método de acordo com a reivindicação 90, caracterizado pelo fato de que o agonista de 0X40 é uma terapia à base de células.
94. Método de acordo com a reivindicação 93, caracterizado pelo fato de que o agonista de 0X40 é uma célula GINAKIT.
95. Método de acordo com a reivindicação 89,

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13/22 caracterizado pelo fato de que reforçador ou estimulador do ponto de controle imunológico é um agonista de CD40.
96. Método de acordo com a reivindicação 95 caracterizado pelo fato de que o agonista de CD40 é um anticorpo anti-CD40 ou fragmento de ligação ao antígeno do mesmo.
97. Método de acordo com a reivindicação 96, caracterizado pelo fato de que o anticorpo anti-CD40 é ADC-1013 (JNJ-64457107), RG7876 (RO-7009789), HuCD40-M2, APX005M (EPI-0050), ou Chi Lob 7/4.
98. Método de acordo com a reivindicação 95, caracterizado pelo fato de que o agonista de CD40 é um ligante de CD40 solúvel (CD40-L).
99. Método de acordo com a reivindicação 98, caracterizado pelo fato de que o ligante de CD40 solúvel é um polipeptídeo de fusão.
100. Método de acordo com a reivindicação 98 ou 99, caracterizado pelo fato de que o ligante de CD40 solúvel é um CD40-L trimérico (AVREND).
101. Método de acordo com a reivindicação 89, caracterizado pelo fato de que reforçador ou estimulador do ponto de controle imunológico é um agonista de GITR.
102. Método de acordo com a reivindicação 101, caracterizado pelo fato de que o agonista de GITR é um anticorpo antiGITR ou fragmento de ligação ao antígeno do mesmo.
103. Método de acordo com a reivindicação 102, caracterizado pelo fato de que o anticorpo anti-GITR é BMS-986156, TRX518, GWN323, INCAGN01876, ou MEDI1873.
104. Método de acordo com a reivindicação 101, caracterizado pelo fato de que o agonista de GITR é um ligante de GITR solúvel (GITRL).

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14/22
105. Método de acordo com a reivindicação 104, caracterizado pelo fato de que o ligante de GITR solúvel é um polipeptídeo de fusão.
106. Método de acordo com a reivindicação 101, caracterizado pelo fato de que o agonista de GITR é uma terapia à base de células.
107. Método de acordo com a reivindicação 106, caracterizado pelo fato de que a terapia à base de células é uma vacina de células dendríticas autólogas transfectadas com RNA de mAb anti-CTLA4 / RNA de GITRL ou uma vacina de células dendríticas autólogas transfectadas com RNA de GITRL.
108. Método de acordo com a reivindicação 89, caracterizado pelo fato de que reforçador ou estimulador do ponto de controle imunológico é um agonista de 4-1 BB.
109. Método de acordo com a reivindicação 108, caracterizado pelo fato de que o agonista de 4-1 BB é um anticorpo anti-4-1 BB ou fragmento de ligação ao antígeno do mesmo.
110. Método de acordo com a reivindicação 109, caracterizado pelo fato de que o anticorpo anti-4-1 BB é urelumab ou PF-05082566.
111. Método de acordo com a reivindicação 89, caracterizado pelo fato de que reforçador ou estimulador do ponto de controle imunológico é um agonista de CD80 ou um agonista de CD86.
112. Método de acordo com a reivindicação 111, caracterizado pelo fato de que o agonista de CD80 ou o agonista de CD86 é um ligante de CD80 ou CD86 solúvel (CTLA-4).
113. Método de acordo com a reivindicação 112, caracterizado pelo fato de que o ligante de CD80 ou CD86 solúvel é um polipeptídeo de fusão.
114. Método de acordo com a reivindicação 112 ou 113,

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15/22 caracterizado pelo fato de que o ligante de CD80 ou CD86 é CTLA4-lg (CTLA4-lgG4m, RG2077, ou RG1046) ou abatacept (ORENCIA, BMS188667).
115. Método de acordo com a reivindicação 111, caracterizado pelo fato de que o agonista de CD80 ou o agonista de CD86 é uma terapia à base de células.
116. Método de acordo com a reivindicação 115, caracterizado pelo fato de que a terapia à base de células é MGN1601.
117. Método de acordo com a reivindicação 89, caracterizado pelo fato de que reforçador ou estimulador do ponto de controle imunológico é um agonista de CD28.
118. Método de acordo com a reivindicação 117, caracterizado pelo fato de que o agonista de CD28 é um anticorpo anti-CD28 ou fragmento de ligação ao antígeno do mesmo.
119. Método de acordo com a reivindicação 118, caracterizado pelo fato de que o anticorpo anti-CD28 é TGN1412.
120. Método de acordo com a reivindicação 117, caracterizado pelo fato de que o agonista de CD28 é uma terapia à base de células.
121. Método de acordo com a reivindicação 120, caracterizado pelo fato de que a terapia à base de células é JCAR015 (linfócito T CD3+ CAR modificado anti-CD19-CD28-zeta); linfócito T expressando CD28CAR/CD137CAR; células T alogênicas Th1 similares de memória CD4+ / anti-CD3/anti-CD28 ligados a micropartículas; linfócitos T autólogos KTE-C19 transduzidos por vetor gama-retroviral CAR anti-CD19/CD28/CD3zeta; linfócitos T autólogos transduzidos por lgCD28TCR anti-CEA; linfócitos T alogênicos transduzidos por CAR anti-EGFRvlll; linfócitos T autólogos expressando CD123CAR-CD28-CD3zeta-EGFRt; linfócitos T

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16/22 autólogos expressando CAR-CD28 zeta-4-1-BB-EGFRt específicos para CD171; células T autólogas enriquecidas com expressando CD19CAR-CD28-CD3zeta-EGFRt; linfócitos T autólogos modificados com receptor de comutador quimérico direcionado para PD-1 (quimera com CD28); linfócitos T enriquecidos com Tem expressando CD19CAR-CD28-CD3zeta-EGFRt; linfócitos T enriquecidos com Τη/mem expressando CD19CAR-CD28-CD3zeta-EGFRt; linfócitos T alogênicos expressando CD19CAR-CD28zeta-4-1BB; linfócitos T autólogos expressando CD19CAR-CD3zeta-4-1BB-CD28; linfócitos T expressando CD28CAR/CD137CAR; linfócitos T autólogos sensibilizados com vacina coestimulada com CD3/CD28; ou linfócitos T expressando ÍC9-GD2-CD28-OX40.
122. Método de acordo com a reivindicação 89, caracterizado pelo fato de que reforçador ou estimulador do ponto de controle imunológico é um agonista de CD27.
123. Método de acordo com a reivindicação 122, caracterizado pelo fato de que o agonista de CD27 é um anticorpo anti-CD27 ou fragmento de ligação ao antígeno do mesmo.
124. Método de acordo com a reivindicação 123, caracterizado pelo fato de que o anticorpo anti-CD27 é varlilumab (CDX-1127).
125. Método de acordo com a reivindicação 89, caracterizado pelo fato de que reforçador ou estimulador do ponto de controle imunológico é um agonista de CD70.
126. Método de acordo com a reivindicação 125, caracterizado pelo fato de que o agonista de CD70 é um anticorpo anti-CD70 ou fragmento de ligação ao antígeno do mesmo.
127. Método de acordo com a reivindicação 126, caracterizado pelo fato de que o anticorpo anti-CD70 é ARGX-110.
128. Método de acordo com a reivindicação 89,

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17/22 caracterizado pelo fato de que reforçador ou estimulador do ponto de controle imunológico é um agonista de ICOS.
129. Método de acordo com a reivindicação 128, caracterizado pelo fato de que o agonista de ICOS é um anticorpo antiICOS ou fragmento de ligação ao antigeno do mesmo.
130. Método de acordo com a reivindicação 129, caracterizado pelo fato de que o anticorpo anti-ICOS é BMS986226, MEDI-570, GSK3359609, ou JTX-2011.
131. Método de acordo com a reivindicação 128, caracterizado pelo fato de que o agonista de ICOS é um ligante de ICOS solúvel.
132. Método de acordo com a reivindicação 131, caracterizado pelo fato de que o ligante de ICOS solúvel é um polipeptídeo de fusão.
133. Método de acordo com a reivindicação 131 ou 132, caracterizado pelo fato de que o ligante de ICOS solúvel é AMG 750.
134. Método de acordo com a reivindicação 89, caracterizado pelo fato de que o agente imunoterápico é um anticorpo anti-CD73 ou fragmento de ligação ao antigeno do mesmo.
135. Método de acordo com a reivindicação 134, caracterizado pelo fato de que o anticorpo anti-CD73 é MEDI9447.
136. Método de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 28, caracterizado pelo fato de que o agente imunoterápico é um agonista de TLR9.
137. Método de acordo com a reivindicação 136, caracterizado pelo fato de que o agonista de TLR9 é agatolimod de sódio.
138. Método de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 28, caracterizado pelo fato de que o agente imunoterápico é um citocina.

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18/22
139. Método de acordo com a reivindicação 138, caracterizado pelo fato de que a citocina é uma quimiocina, um interferon, uma interleucina, uma linfocina, ou um membro da família de fatores de necrose tumoral.
140. Método de acordo com a reivindicação 138 ou 139, caracterizado pelo fato de que a citocina é IL-2, IL-15, ou interferon gama.
141. Método de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 28, caracterizado pelo fato de que o agente imunoterápico é um antagonista do TGF-β.
142. Método de acordo com a reivindicação 141, caracterizado pelo fato de que o antagonista do TGF-β é fresolimumab (GC-1008), NIS793, IMC-TR1 (LY3022859), ISTH0036, trabedersen (AP 12009), fator de crescimento transformante-beta-2 recombinante, linfócitos T resistentes ao TGF beta autólogos específicos para HPV16/18 E6/E7, ou linfócitos T citotóxicos LMP-específicos resistentes ao TGF beta.
143. Método de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 28, caracterizado pelo fato de que o agente imunoterápico é um antagonista da iNOS.
144. Método de acordo com a reivindicação 143, caracterizado pelo fato de que o antagonista da iNOS é N-Acetil cisteína (NAC), aminoguanidina, éster metílico de L-nitroarginina, ou S,S-1,4-fenileno-bis(1,2-etanodiil)bis-isotiouréia).
145. Método de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 28, caracterizado pelo fato de que o agente imunoterápico é um antagonista da SHP-1.
146. Método de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 28, caracterizado pelo fato de que o agente imunoterápico é um antagonista do CSF1R (receptor do fator

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19/22 estimulante de colônia de macrófagos 1).
147. Método de acordo com a reivindicação 146, caracterizado pelo fato de que o antagonista do CSF1R é um anticorpo anti-CSF1 R ou fragmento de ligação ao antígeno do mesmo.

148. Método de acordo com a reivindicação 147, caracterizado pelo fato de que o anticorpo anti-CSF1R é emactuzumab. 149. Método de acordo com qualquer uma das

reivindicações 1 a 28, caracterizado pelo fato de que o agente imunoterápico é um agonista de um membro da família de TNF.
150. Método de acordo com a reivindicação 149, caracterizado pelo fato de que o agonista do membro da família de TNF é ATOR 1016, ABBV-621, ou Adalimumab.
151. Método de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 28, caracterizado pelo fato de que o agente imunoterápico é aldesleucina, tocilizumab, ou MEDI5083.
152. Método de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 28, caracterizado pelo fato de que o agente imunoterápico é um agonista do CD160 (NK1).
153. Método de acordo com a reivindicação 152, caracterizado pelo fato de que o agonista do CD 160 (NK1) é um anticorpo anti-CD160 ou fragmento de ligação ao antígeno do mesmo.
154. Método de acordo com a reivindicação 152 ou 153, caracterizado pelo fato de que o anticorpo anti-CD160 é BY55.
155. Método de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 154, caracterizado pelo fato de que o inibidor de LAG-3, o inibidor da via PD-1, e o agente imunoterápico são formulados para administração intravenosa.
156. Método de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 155, caracterizado pelo fato de que o inibidor de

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LAG-3, o inibidor da via PD-1, e o agente imunoterápico são formulados juntos.
157. Método de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 155, caracterizado pelo fato de que o inibidor de LAG-3, o inibidor da via PD-1, e o agente imunoterápico são formulados separadamente.
158. Método de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 157, caracterizado pelo fato de que o tumor maligno é selecionado entre o grupo consistindo em um câncer de fígado, câncer ósseo, câncer pancreático, câncer de pele, câncer de cabeça ou pescoço, câncer de mama, câncer de pulmão, melanoma maligno cutâneo ou intraocular, câncer renal, câncer uterino, câncer de ovário, câncer colorretal, câncer de cólon, câncer retal, câncer da região anal, câncer de estômago, câncer testicular, câncer uterino, carcinoma das trompas de Falópio, carcinoma do endométrio, carcinoma do colo uterino, carcinoma da vagina, carcinoma da vulva, linfoma não Hodgkin, câncer do esôfago, câncer do intestino delgado, câncer do sistema endócrino, câncer da glândula tiroide, câncer da glândula paratiroide, câncer da glândula adrenal, sarcoma de tecidos moles, câncer da uretra, câncer do pênis, cânceres da infância, linfoma linfocítico, câncer da bexiga, câncer do rim ou ureter, carcinoma da pelve renal, neoplasma do sistema nervoso central (SNC), linfoma primário do sistema nervoso central, angiogênese tumoral, tumor do eixo espinhal, glioma do tronco cerebral, adenoma de pituitária, sarcoma de Kaposi, câncer epidermoide, câncer de células escamosas, cânceres induzidos ambientalmente incluindo os induzidos por amianto, malignidades hematológicas incluindo, por exemplo, mieloma múltiplo, linfoma de células B, linfoma de Hodgkin / linfoma de células B mediastinal primário, linfomas não Hodgkin, linfoma mieloide agudo, leucemia mieloide crônica, leucemia linfoide

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21/22 crônica, linfoma folicular, linfoma difuso de grandes células B, linfoma de Burkitt, linfoma imunoblástico de células grandes, linfoma linfoblástico de células precursoras B, linfoma de células do moanto, leucemia linfoblástica aguda, micose fungoide, linfoma anaplásico de células grandes, linfoma de células T, e linfoma linfoblástico de células T precursoras, e qualquer combinação dos mesmos.
159. Método de acordo com a reivindicação 158, caracterizado pelo fato de que o tumor maligno é câncer de pulmão de células não pequenas (NSCLC), um tumor relacionado com câncer relacionado com vírus, ou adenocarcinoma gástrico.
160. Método de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 157, caracterizado pelo fato de que o tumor maligno é melanoma, câncer gástrico, câncer da junção gastroesofágica, câncer de pulmão de células não pequenas, câncer de bexiga, carcinoma de células escamosas de cabeça e pescoço, ou câncer de células renais.
161. Método de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 157, caracterizado pelo fato de que o tumor é câncer de pulmão, melanoma, carcinoma de células escamosas de cabeça e pescoço, câncer renal, câncer gástrico, ou carcinoma hepatocelular.
162. Método de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 161, caracterizado pelo fato de que o anticorpo antiLAG-3 ou fragmento de ligação ao antígeno do mesmo e o agente imunoterápico são administrados como uma primeira linha de tratamento.
163. Método de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 161, caracterizado pelo fato de que o inibidor de LAG-3, o inibidor da via PD-1, e o agente imunoterápico são administrados como uma segunda linha de tratamento.

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164. Método de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 163, caracterizado pelo fato de que o tumor maligno é refratário à primeira linha de tratamento.
165. Método de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 164, caracterizado pelo fato de que adicionalmente compreende a administração de no mínimo um agente terapêutico adicional.
166. Método de acordo com a reivindicação 165, caracterizado pelo fato de que no mínimo um agente terapêutico adicional é um agente quimioterápico.